Introducción: El perfil del anciano institucionalizado en una residencia geriátrica se caracteriza por ser mayoritariamente mujer, con una edad superior a 80 años, con pluripatología crónica y deterioro cognitivo, asociado muchas veces a demencia, lo que implica dependencia física y mental. El envejecimiento es el principal factor de riesgo para el declive cognitivo y la demencia; el estrés oxidativo desempeña un importante papel en el envejecimiento y, en consecuencia, en la pérdida de la función cerebral debido a la elevada susceptibilidad de este órgano a las especies reactivas de oxígeno. La desnutrición es un problema muy frecuente en este tipo de personas, y también se ha asociado con el deterioro cognitivo, pues los nutrientes participan en la fisiología cerebral así como en la defensa antioxidante. Los cuidados que se proporcionan a los ancianos son de vital importancia para mantener un buen estado nutricional y, en consecuencia, su estado cognitivo, por lo que se consideró de interés valorar el perfil nutricional y funcional de un colectivo de ancianos institucionalizados en una residencia geriátrica y su relación con el estado cognitivo, con el objetivo de conocer los factores más importantes a tener en cuenta en el momento de establecer un programa de cuidados e intervenciones, para intentar atenuar el deterioro cognitivo existente en este tipo de instituciones a través de la mejora del estado nutricional de los residentes. Material y métodos: Se ha llevado a cabo un estudio transversal sobre una muestra de 36 ancianos (14 hombres y 22 mujeres), y un estudio longitudinal sobre los 22 residentes supervivientes al cabo de un año. Se ha valorado el estado nutricional global con el Mini Nutritional Assessment, la función cognitiva con el Mini Examen Cognoscitivo de Lobo, el estado emocional con la escala de Depresión Geriátrica de Yesavage, la capacidad funcional física con el Nursing Home Physical Performance Test. Se ha determinado el IMC, y se han medido diversos pliegues cutáneos y perímetros corporales, y se ha valorado la composición corporal por medio de bioimpedancia. Se han cuantificado diversos parámetros hematológicos y bioquímicos, así como el perfil de ácidos grasos y de estrés oxidativo. Se ha evaluado la oferta y la ingesta energética y nutricional a través del registro alimentario por doble pesada y el recordatorio de 24 horas. Resultados: Los residentes presentaron riesgo de desnutrición, deterioro cognitivo, depresión leve, reducción de la fuerza muscular y, en un 67%, de la capacidad funcional física máxima y, a la vez, bajo peso; mostraron concentraciones de hematíes, hemoglobina, hematocrito, vitaminas B6 y B12, folato, y de diversos compuestos con actividad antioxidante (albúmina, coenzima Q10, β-caroteno, retinol, γ- tocoferol, vitamina C y selenio) próximas al límite inferior y deficitarias en tioles totales. Su ingesta alimentaria fue significativamente inferior a la oferta, hipocalórica, excesiva en ácidos grasos saturados y deficitaria en monoinsaturados y poliinsaturados totales, incluidos los ácidos grasos omega-3, fibra, riboflavina, niacina, piridoxina, ácido fólico, vitaminas D y E, calcio, hierro, magnesio, cobre, cinc, selenio, yodo y potasio. Los ancianos cognitivamente normales mostraron mejor estado nutricional global, mayor fuerza muscular y capacidad funcional física, menor riesgo cardiovascular, mayor concentración sérica de vitamina B12 y mayor defensa antioxidante (ácido úrico, albúmina, γ-tocoferol y luteína-zeaxantina), y realizaron una ingesta superior en ácidos grasos monoinsaturados, fibra, ácido fólico, vitaminas C y E, cobre y yodo. Al cabo de un año, los ancianos mostraron un declive de la función cognitiva, del estado nutricional global, de la capacidad funcional física, de la fuerza muscular, del peso corporal a expensas de grasa corporal y masa muscular, y de la ingesta de selenio. Conclusiones: Los valores del perfil sociosanitario, antropométrico y de composición corporal, hematológico y bioquímico, y dietético que presentaron inicialmente los residentes, y la evolución de los mismos al cabo de un año, han podido contribuir al declive de la función cognitiva así como del estado nutricional y de la capacidad funcional física, y se ha podido establecer una retroalimentación negativa entre los tres ámbitos. El control de los efectos secundarios de los fármacos y del IMC, el adecuado tratamiento y seguimiento de la patología respiratoria, de la hipertensión arterial, la diabetes mellitus y/o la anemia, el establecimiento de un programa de actividad física, la monitorización de indicadores hematológicos (hematíes, hemoglobina, hematocrito) y bioquímicos (glucosa, albúmina, ácido úrico, ferritina, perfil lipídico, PCR), la óptima gestión de los menús, el control de la ingesta alimentaria, y el seguimiento del estado nutricional, podrían ayudar a disminuir el riesgo de deterioro cognitivo, siendo necesario para ello un equipo asistencial interdisciplinar. / Introduction: The profile of institutionalized elderly in a nursing home is characterized by mostly women, older than 80 years, with chronic comorbidity and cognitive impairment, often associated with dementia, which involves physical and mental dependence. Aging is the major risk factor for cognitive decline and dementia; oxidative stress plays an important role in aging and, therefore, the loss of brain function due to the high susceptibility of this organ to the reactive species oxygen. Malnutrition is a common problem in these kinds of people, and has also been associated with cognitive impairment, as the nutrients are involved in brain physiology as well as antioxidant defense. The care provided to seniors are of vital importance to maintaining good nutritional status and, consequently, their cognitive status, so it was considered interesting to assess the nutritional and functional profile of a group of institutionalized elderly in a nursing home and its relationship to cognitive state, in order to know the most important factors to consider when establishing a plan of care and interventions, to try to reduce cognitive impairment exists in these institutions through improved nutritional status of residents. Material and methods: We conducted a cross-sectional study on a sample of 36 elderly (14 men and 22 women), and a longitudinal study of the 22 surviving residents after one year. We valued the overall nutritional status with the Mini Nutritional Assessment, cognitive function with the Mini Mental State Examination of Lobo, emotional state with the Geriatric Depression Scale of Yesavage, physical functional capacity with the Nursing Home Physical Performance Test. BMI was determined, and measured various skin folds and body circumferences, and body composition was assessed by bioimpedance. We quantified various hematological and biochemical parameters and fatty acid profile and oxidative stress profile. Supply and intake of energy and nutrients was measured by using the double weighed food method and the 24 hours dietary record. Results: Residents displayed risk of malnutrition, cognitive impairment, mild depression, reduction of the muscle strength and, in a 67%, of the maximum physical functional capacity, and also under weight; showed concentrations of red blood cells, hemoglobin, hematocrit, vitamins B6 and B12, folate, and several compounds with antioxidant activity (albumin, coenzyme Q10, β-carotene, retinol, γ-tocopherol, vitamin C and selenium) near the lower limit and deficit of total thiols. Their food intake was significantly less than the supply, low-calorie, excessive in saturated fatty acids and deficit in monounsaturated and total polyunsaturated, including omega-3 fatty acids, fiber, riboflavin, niacin, pyridoxine, folic acid, vitamins D and E, calcium, iron, magnesium, copper, zinc, selenium, iodine and potassium. Cognitively normal elderly showed better overall nutritional status, greater muscle strength and physical functional capacity, lower cardiovascular risk, greater serum vitamin B12 and antioxidant defense (uric acid, albumin, γ-tocopherol and lutein-zeaxanthin), and performed a higher intake in monounsaturated fatty acids, fiber, folic acid, vitamins C and E, copper and iodine. After a year, the elderly showed a decline in cognitive function, overall nutritional status, physical functional capacity, muscular strength, body weight, at the expense of body fat and muscle mass, and selenium intake. Conclusions: The values of social-health, anthropometric and body composition, hematological and biochemical, and dietary profile that residents initially presented, and their evolution after one year, may have contributed to the decline of cognitive function as well as nutritional status and physical functional capacity, and has been able to establish a negative feedback between the three areas. Control of drug indirect effects and BMI, proper treatment and monitoring of respiratory disease, high blood pressure, diabetes mellitus and / or anemia, the establishment of a physical activity program, the monitoring indicators hematological (erythrocytes, hemoglobin, hematocrit) and biochemical (glucose, albumin, uric acid, ferritin, lipid profile, CRP), the optimal management of menus, the control of food intake, and monitoring of nutritional status, could help reduce the risk of cognitive impairment, but it’s necessary to establish an interdisciplinary care team.

INTRODUCCIÓN La urolitiasis es una enfermedad multifactorial crónica. Dentro de los factores de riesgo extrínsecos al individuo, existen pocos trabajos que evalúen el estrés crónico (EC), mediante los acontecimientos vitales estresantes (AV), como factor de riesgo de la litiasis oxalocálcica (OxCa). El EC implica una activación del cortisol y éste puede aumentar la excreción urinaria del calcio al competir con la aldosterona a nivel intracelular renal. Además, se ha demostrado que animales sometidos a EC presentan alteraciones metabólicas urinarias favorecedoras de la formación de litiasis OxCa. El EC es también un estado secundario a la interacción de múltiples factores en el que además de los AV deberían considerarse otros aspectos del proceso de EC y su influencia a nivel bioquímico. HIPÓTESIS Y OBJETIVOS El EC altera los parámetros promotores y/o protectores de la litiasis renal OxCa favoreciendo su aparición. Como consecuencia, las alteraciones bioquímicas detectadas en los pacientes sometidos a EC deben reflejar la mayor incidencia de litiasis renal OxCa. Objetivos: 1. Analizar la relación entre EC y litiasis OxCa sintomática; 2. Analizar los cuestionarios que evalúan el EC, en los pacientes con litiasis OxCa y sus controles; 3.Analizar si los cuestionarios utilizados para evaluar el EC se asocian a modificaciones del cortisol plasmático, y en qué dirección, en los litiásicos y sus controles; 4. Analizar si los cuestionarios utilizados para evaluar el EC se asocian a modificaciones de los parámetros urinarios litógenos, tanto en los litiásicos como en sus controles; 5. Analizar la relación entre: antecedentes epidemiológicos, dieta, o presencia de síndrome metabólico, y la litiasis OxCa; 6. Analizar la relación entre el nivel socioeconómico y la litiasis OxCa. MATERIAL Y MÉTODOS Entre Mayo de 2008 y Febrero de 2010 se incluyeron 128 individuos, 64 litiásicos OxCa, reclutados entre los 2 y 3 meses después del último episodio litiásico y 64 controles, apareados 1:1 por edad y sexo. En función de si se trataba de un primer episodio litiásico o no, se crearon dos grupos de casos: el de incidentes (CaI) y el de recurrentes (CaR). Todos los individuos fueron evaluados mediante: la Escala General de apreciación del estrés (EAE-G), el Perceived Stress Scale (PSS), el Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS), el Burnout Measure (BM) y el Satisfaction With Life Scales (SWLS); en los casos se evaluó también el estrés secundario al episodio litiásico. Además, se realizó una historia clínica exhaustiva, se administró un cuestionario de datos demográficos y nivel socioeconómico, un cuestionario dietético, y se practicó un estudio metabólico en sangre y orina nocturna a todos los individuos a los que se añadió la determinación del cortisol plasmático. Por último, se aplicaron los criterios del síndrome metabólico (SM). RESULTADOS y CONCLUSIONES Globalmente, no encontramos una relación significativa entre el EC y la litiasis OxCa sintomática. Sin embargo, el número e intensidad percibida de los AV estresantes fueron mayores en los CaI que en los CaR (p<0,001) y se relacionaron positivamente con los niveles de cortisol plasmático en los litiásicos, siendo la relación inversa en los controles (p<0,05). Existieron más parámetros urinarios litógenos relacionados significativamente con las distintas áreas del estrés en los litiásicos. El magnesio fue el parámetro urinario más relacionado con el EC, observando que en los litiásicos la relación fue negativa mientras que en los controles positiva (p<0,1). Los antecedentes familiares de litiasis fueron más frecuentes en los litiásicos (p<0,05). Se observó una prevalencia mayor de SM en los CaR que en los CaI (p<0,1). El nivel de ingresos mensuales bajo se relacionó con la litiasis OxCa sintomática y con su recurrencia (p<0,05), siendo el único factor de riesgo independiente de la litiasis OxCa sintomática. / INTRODUCTION Urolithiasis is a chronic, multifactorial disease. Little research has been done examining chronic stress (CS), as measured by stressful life events (LE), as an external risk factor for calcium oxalate (CaOx) lithiasis. CS activates cortisol, which can increase urinary excretion of calcium, competing with aldosterone at the intracellular level. Moreover, animals undergoing CS show urinary metabolic alterations that can lead to CaOx lithiasis. In fact, CS is due to the interaction of multiple factors in addition to LEs, and the biochemical influence of these other aspects of CS must also be taken into account. HYPOTHESIS AND OBJECTIVES CS alters the promoter and protective parameters of CaOx lithiasis, leading to its onset. Therefore, we hypothesized that biochemical alterations detected in patients undergoing CS will be reflected in a higher incidence of CaOx renal lithiasis. Objectives: 1) Analyze the relation between CS and symptomatic CaOx lithiasis. 2) Analyze the questionnaires evaluating CS completed by CaOx lithiasis patients and controls. 3) Analyze whether and how the information reported in the questionnaires is associated with modifications of the level of cortisol in the plasma of patients and controls. 4) Analyze if the information in the questionnaires is associated with modifications of lithogenic urinary parameters in patients and controls. 5) Analyze the relation between epidemiological antecedents, diet, presence of metabolic syndrome, and CaOx lithiasis. 6) Analyze the relation between socioeconomic level and CaOx lithiasis. MATERIAL AND METHODS From May 2008 to February 2010, 128 individuals were included in the study: 64 CaOx lithiasis patients, included two to three months after their latest lithiasis episode, and 64 controls matched by age and gender. Patients were divided into two groups: the ICa group was composed of patients who had suffered only an initial CaOx lithiasis episode, and the RCa group was composed of those who had recurrent CaOx lithiasis. All patients and controls were evaluated with the Escala General de Apreciación del Estrés (EAE-G), the Perceived Stress Scale (PSS), the Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS), the Burnout Measure (BM), and the Satisfaction With Life Scales (SWLS); in the patients, the secondary stress of a lithiasis episode was also evaluated. A complete clinical history was taken, and all patients and controls completed a questionnaire on demographic data and socioeconomic level and a questionnaire on dietary habits. In addition, a metabolic study of blood and nocturnal urine was performed, as well as an analysis of cortisol levels in plasma. Finally, patients and controls were evaluated according to the defining criteria for metabolic syndrome (MS). RESULTS AND CONCLUSIONS Overall, no significant relation between CS and CaOx lithiasis was observed. However, the number and perceived intensity of stressful LEs were greater in the ICa group than in the RCa group (P<0.001) and correlated with plasma cortisol levels – directly in the lithiasis patients and inversely in the controls (P<0.05). More lithogenic urinary parameters were significantly related to areas of stress in the lithiasis patients. Magnesium was the urinary parameter most closely associated with CS; this association was positive in the patients but negative in the controls (P<0.1). A family history of lithiasis was observed more frequently in the patients (P<0.05). A higher prevalence of MS was observed in the RCa than in the ICa patients (P<0.1). A lower level of monthly income was associated with CaOx lithiasis and its recurrence (P<0.05); in fact, this was the only independent risk factor for symptomatic CaOx lithiasis.

Nuestros resultados previos han mostrado que una sola exposición a un estímulo estresante de elevada intensidad como la inmovilización (IMO) causa una reducción de la respuesta del eje hipotalámico-pituitario-adrenal (HPA) al mismo, pero no a un nuevo, estímulo estresante y este efecto se incrementa con el tiempo transcurrido (días o semanas) entre las dos exposiciones. La menor respuesta al mismo estímulo sugiere que una exposición previa a la IMO es capaz de inducir un cierto nivel de adaptación frente al mismo estímulo. Por lo tanto, la adaptación observada en respuesta al estrés crónico podría ser consecuencia del tiempo transcurrido entre la primera y la última exposición al estrés y no de la repetición del estímulo. Los objetivos del presente trabajo han sido: (a) comparar los efectos a largo plazo de una sola exposición al nado o a la IMO con los efectos de la exposición repetida; (b) estudiar el papel de los glucocorticoides o el miedo generados durante la primera exposición a la IMO en la inducción de los efectos a largo plazo de una sola exposición al estrés. Se utilizaron ratas macho adultas como animales de experimentación y se analizaron los niveles plasmáticos de ACTH, corticosterona y glucosa.No observamos adaptación del eje HPA, pero sí de la glucosa y otras variables, al nado crónico. Una sola exposición al nado no causó efectos a largo plazo en la respuesta del eje HPA al mismo estímulo, en contraposición con lo observado con la IMO. Por ello, decidimos comparar los efectos de una exposición única o repetida a la IMO en animales intactos y en animales adrenalectomizados suplementados con corticosterona en el agua de bebida (ADX+B). En los intactos, los efectos de la exposición repetida a la IMO sobre el eje HPA fueron muy similares a los de una sola exposición, pero en los ADX+B, una sola exposición a la IMO no modificó la respuesta de la ACTH al mismo estímulo, lo que sugiere que los glucocorticoides no serían necesarios para la adaptación a la IMO crónica, pero estarían implicados en la inducción o en la expresión de los efectos a largo plazo. Para profundizar en el papel de los glucocorticoides en la inducción de los efectos a largo plazo se manipuló su efecto biológico durante la primera exposición a la IMO inhibiendo su síntesis con metirapona, bloqueando sus receptores con el RU38486 o potenciando su liberación con la administración de ACTH. Los resultados sugieren que los glucocorticoides podrían estar implicados, aunque sólo parcialmente, en la inducción de los efectos a largo plazo sobre el eje HPA. La manipulación de los niveles de miedo/ansiedad con el fármaco ansiogénico FG7142 antes de la exposición al nado o el ansiolítico diazepam antes de la exposición a la IMO no modificó los efectos a largo plazo del estrés per se, lo que sugiere que el miedo/ansiedad no es un factor importante en la inducción de los efectos a largo plazo. Aunque una sola exposición previa a la IMO protegió parcialmente de la anorexia asociada a una nueva exposición al mismo estímulo, ninguna manipulación experimental fue capaz de modificar el efecto del estrés previo, indicando que los mecanismos neuroquímicos implicados en la inducción de los efectos a largo plazo de la IMO sobre la ingesta y el eje HPA son distintos. La futura caracterización de la respuesta conductual a la IMO podría ser de gran valor para determinar si la exposición a la IMO es un modelo experimental del síndrome de estrés postraumático en humanos. / We have previously observed that a single exposure of rats to severe stressors such as immobilization in wooden boards (IMO) results in a desensitization of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) response to the same, but not a novel, stressor and this process enhances with time (days/weeks) elapsed between the two exposures to the stressor. The lower HPA response to the same stressor suggests that some degree of adaptation developed after a single exposure to IMO and therefore is unclear whether adaptation to chronic repeated IMO may be explained by the time elapsed between the first and the final exposure rather than by repetition of the stressful situation. Thus the purposes of the present work were: (a) to compare the long-term effects of single exposure to forced swimming (FS) or IMO with repeated exposure; (b) to study the role of glucocorticoids or fear generated during the first exposure to IMO on the induction of long-term effects of an acute exposure to the same stressor. Two-month-old male Sprague-Dawley rats maintained under controlled conditions were used. Plasma levels of ACTH, corticosterone and glucose levels were measured. We found no significant adaptation of the HPA axis to chronic FS, but did of glucose and other variables. A single exposure to FS did not cause long-term effects on the responsiveness of the HPA axis to the same stressor in contrast to that observed after IMO. We then studied the effects of single versus repeated exposure to IMO on the HPA response to the same stressor in both sham-operated and adrenalectomized rats maintained with corticosterone in their drinking saline (ADX+B). In sham rats, daily exposure to IMO had similar effects on the HPA axis that a previous single session. In contrast, in ADX+B rats, a reduction of the ACTH response to the stressor was observed in repeated but not single IMO rats. The present result suggest that the glucocorticoids are not mandatory for the development or adaptation of the HPA axis to chronic IMO, but they may be involved in the induction or expression of long-term effects of IMO on the HPA responsiveness to the same stressor. In order to better study the role of glucocorticoids in the induction of long-term effects to IMO, three different experimental approaches were used during the first exposure to IMO: (i) inhibition of corticosterone synthesis with metyrapone; (ii) blockade of glucocorticoid receptors with RU38486; and (iii) potentiation of glucocorticoids release with the concomitant administration of exogenous ACTH. Taken together, the data suggest that glucocorticoids play only a partial role in the induction of long-term effects of IMO on the HPA. To study the contribution of fear/anxiety generated during the first exposure to stress we study the effect of the administration of the anxiogenic drug FG7142 in rats exposed to a moderate stressor (FS) or that of the anxiolytic diazepam in rats exposed to IMO. No effect of drugs was observed, suggesting that fear/anxiety is not one of the factors involved in the induction of the long-term effects of stress on the responsiveness of the HPA axis. Although a previous exposure to IMO was able to induce a partial protection on the effects on subsequent IMO-induced anorexia, neither the manipulation of glucocorticoid levels or function nor the administration of anxiety-related drugs were able to modify this protective effect. These results indicate that neurochemical mechanisms inducing long-term effects of food intake are different from those inducing changes in the HPA axis. The characterization of the behavioural response to IMO may be of value to determine whether or not exposure to IMO is an animal model for post-traumatic stress disorder.

El presente trabajo se centra en el estudio de las diferencias individuales en la respuesta endocrina al estrés. Mientras que la mayoría de estudios abordan este tema utilizando cepas de roedores seleccionados genéticamente, nosotros estamos interesados en el estudio de la susceptibilidad al estrés utilizando poblaciones de ratas adultas genéticamente diversas (outbred) de la cepa Sprague-Dawley, con el objetivo de prevenir posibles sesgos genéticos.Datos previos de nuestro laboratorio han demostrado que la velocidad de recuperación de los niveles basales de ACTH y corticosterona tras una exposición al estrés es un buen marcador de la intensidad del estrés (García et al., 2000). Hasta el momento se había asumido que la respuesta inicial de la ACTH a un estímulo estresante era un buen marcador de la intensidad de estrés. Sin embargo, como hemos comprobado en el presente trabajo, puede darse el caso de que los niveles plasmáticos de ACTH no discriminen entre estímulos estresantes severos (Márquez et al., 2002), confirmando la importancia del estudio de la dinámica de liberación de las hormonas del eje HPA después de finalizar la exposición a la situación estresante. Los datos de este trabajo apoyan que estudiado en las condiciones adecuadas, el eje HPA puede ser un muy buen marcador de la intensidad del estrés. Basándonos en este enfoque, hemos descrito la dinámica de adaptación a un paradigma de estrés crónico, estudiando detalladamente tanto la dinámica de liberación hormonal a lo largo de los días, como diferentes variables que pueden proporcionarnos información sobre el impacto final del estrés crónico. Hemos podido observar que aunque las diferencias individuales en la respuesta al estrés van haciéndose menos pronunciadas a lo largo del protocolo de estrés crónico, la respuesta a la primera exposición al estímulo estresante predice en parte el impacto final sobre el eje HPA a nivel central (Márquez et al., 2004). El hecho de que el perfil de la respuesta a una primera situación estresante pueda ser un índice de susceptibilidad a padecer patologías asociadas al estrés nos ha llevado a intentar caracterizar más detalladamente los factores que pueden estar determinando esta respuesta a una primera exposición a una situación estresante. Como paso previo a la caracterización de factores pronóstico de la respuesta de estrés hemos estudiado la consistencia y estabilidad de la respuesta al estrés de las hormonas del eje HPA. Hemos observado que la liberación de ACTH y corticosterona es bastante consistente frente a diferentes estímulos estresantes de intensidad baja-moderada (ambientes nuevos), independientemente de las características particulares de cada ambiente, lo que sugiriere que la liberación de las hormonas del eje HPA puede ser considerada una característica individual (rasgo) de cada animal. Sin embargo, cuando se han comparado situaciones estresantes que difieren ampliamente en cuanto a características cualitativas e intensidad, esta consistencia es mucho menor. Puesto que la mayor parte de los datos en la literatura en cuanto a susceptibilidad al estrés y diferencias individuales han utilizado situaciones estresantes de intensidad moderada, decidimos iniciar el estudio acerca de qué rasgos conductuales podrían estar relacionados con la respuesta al estrés utilizando ambientes nuevos. Gracias a la estrategia de caracterización conductual que nos ha permitido estudiar independientemente la influencia del rasgo de ansiedad del de actividad/exploración en ambientes nuevos, hemos descrito que ni la ansiedad ni la perseverancia en la exploración de ambientes nuevos parecen afectar el nivel de activación del eje en estas situaciones. Sin embargo, el nivel de actividad/exploración que muestran los individuos en el periodo inicial de exposición a un ambiente nuevo está positivamente relacionado con la reactividad del eje HPA ante situaciones de estrés. / The present work is focused in the study of individual differences of endocrine response to stress. Whereas most studies in this field use genetically selected rodents, we are interested in the study of stress susceptibility using outbred adult rats (Sprague-Dawley), in order to prevent possible genetic biases.Previous results from our laboratory have shown that the speed of recovery of ACTH and corticosterone basal levels after stress is a good marker of stress intensity (García et al., 2000). To date, it have been assumed that initial ACTH response to stress is a good intensity marker. However, as we have demonstrated in the present work, ACTH levels may not discriminate between highly stressful situations (Márquez et al., 2002). These data suggest that the follow up of the physiological response to severe stressors for a period of time after the termination of exposure to the situation allow us to better discriminate between the stressors in terms of intensity and could be a good marker of the possible pathological impact of such stressors. The present work corroborates that HPA axis response to stress is a very good intensity marker, if studied in the optimal conditions.We have also described the adaptation pattern to a chronic stress protocol, studying the hormonal response dynamics over the days, and studying different measures that may give us information about the final impact of chronic stress. Whereas individual differences in hormonal response to stress eventually disappeared after chronic stress, the hormonal response to the first encounter to the stressor may predict the final impact of chronic stress on the activity of HPA axis (Márquez et al., 2004). As the pattern of response to the first encounter to the stressor may be an index of susceptibility to stress-related pathologies, we have been interested in characterise variables that could be determining the response to this first encounter to stressor. As a first step to characterisation of prognostic factors of stress response, we have assessed the reliability of HPA response to stress. Our data suggest a good reliability of individual differences in the responsiveness of the HPA axis to stressors, when low to middle stressors are studied (novel environments), suggesting that HPA axis activation may be considered as a consistent individual trait of animals. Nevertheless, when highly differing stressors are compared, a lower reliability is observed. As most of the literature concerning stress susceptibility and individual differences have used low intensity stressors, we decide to use novel environments to start our last objective: to assess which personality traits could be related to a different stress responsiveness. Using a behavioural characterization strategy that allow us to study independently the influence of anxiety and novelty seeking traits, we have described that neither anxiety nor perseverance to explore novel environments seems to affect HPA response to stress. Nevertheless, initial exploration level of novel environments is positively related to HPA reactivity to stress.

Flavonoids have received much attention in biology and medicine because of their high in vitro antioxidant activities. However, little is known about the physiological significance of this capacities in plants under stress conditions, but for anthocyanins, which act as photoprotective screens. The final objective of the present work was to determine the role of the accumulation and oxidation of flavonoids in plants under abiotic stress conditions, and to compare it with that of a well known antioxidant: ascorbate. To accomplish this objective, a multi-disciplinary approach was applied, including plant physiology, biochemistry and molecular biology techniques. First, the total phenolic content of three Mediterranean species -Salvia officinalis (L), Melissa officinalis (L) and Cistus clusii (Dunal)- was analyzed as well as the changes they showed during a drought treatment. C. clusii plants showed the highest phenolic levels among the studied species, and these phenolics increased during the drought treatment. It is suggested that the biosynthesis of phenolics may serve as an alternative carbon, reduction equivalents and ATP sink. Second, the main antioxidant flavonoids in C. clusii leaf extreacts were identified to be (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), (-)-epicatechin (EC) and (-)-epicatechin gallate (ECG). Levels of these flavan-3-ols increased during the drought treatment in a simmilar manner as ascorbate did, which moreover reduced the levels of its oxidized form, dehydroascorbate (DHA). It is suggested that aside ot the mentioned role as phenolics, flavan-3-ols may act as antioxidants in C. clusii plants under stress. Next, the role of these flavan-3-ols in different aged C. clusii plants in field conditions was studied. In this experiment it is shown that the accumulation of monomeric reduced flavan-3-ols is triggered by incident light (maximum radiation or photoperiod). Moreover, the accumulation of monomeric reduced, monomeric oxidized (quinones) and polymeric (proanthocyanidins) flavan-3-ols may serve also an alternative carbon, reduction equivalents and ATP sink as well as an antioxidant mechanism as plants age. Next, the oxidation of monomeric reduced flavan-3-ols to their respective quinones was studied in tea plants under severe drught stress. EC and EGCG oxidize to their respective quinones in such conditions, suggesting that EC and EGCG may act as membrane antioxidants. Finally, the role of ascorbate oxidation state in the apoplast as a cell signal was studied. Tobacco transgenic plants with shifted ascorbate oxidase activity modulated showed shifted transcript profile. Many cell preocesses were altered at gene expression levels upon shifting the ascorbate oxidation state in the apoplast, including H2O2 homeostasis, electron transport and stress responses. Moreover, Ca2+ is shown to be a key component of the ascorbate oxidation state signal transduction pathway to the nucleus.In conclusion, in this study it is demonstrated the presence of EC, EGCG y ECG in C. clusii and that the levels of these flavan-3-ols increase with drought. These flavan-3-ols may serve as an alternative C, reduction equivalents and ATP sink. Flavan-3-ols accumulate in plants as they age, especially during streass periods. Flavan-3-ols are oxidized to their respective quinones under severe drought stress, particularly in tea plants, and they may act as membrane antioxidants. The oxidation state of the ascorbate in the apoplast acts as a cell signal regulating different processes within the symplast at gene expression levels, including H2O2 homeostasis.

El objetivo de esta tesis ha sido abordar un estudio global, tanto a nivel transcripcional como funcional, de los genes y proteínas de O. oeni involucrados en su adaptación a las condiciones del vino y al desarrollo de la FML. A partir del estudio transcripcional hemos observado una relación entre el nivel de expresión de ciertos genes y las condiciones particulares del cultivo. También hemos estudiado por primera vez en vino tinto, la expresión de un gen que codifica para la enzima &#946;-glucosidasa. Adicionalmente, hemos encontrado que diversas proteínas se ven afectadas luego del choque con 12% etanol. Éstas están relacionadas con la biosíntesis y estabilidad proteica y a la biosíntesis de la pared celular. Estos resultados contribuyen a una mejor compresión de los mecanismos relacionados con la respuesta fisiológica de O. oeni durante la adaptación a las condiciones del vino y proveen información para la caracterización de cepas. / The objective of this thesis was to perform a comprehensive study, both transcriptional and functional, of O. oeni genes and proteins involved in its adaptation to wine conditions and in the development of the MLF. A transcriptional relationship between the level of expression of certain genes and particular conditions of the culture was observed. We have also studied the first time in red wine, the expression of one gene that encodes the enzyme &#946;-glucosidase. We have also found that several proteins are affected after 12% ethanol shock. These are proteins related to protein biosynthesis and stability and cell envelope biosynthesis. These results contribute to a better understanding of the mechanisms related to the physiological response of O. oeni during adaptation to wine conditions. Also, the link between the behavior of genes and proteins for cell growth under these conditions provides information for the characterization of strains with oenological interest.

Introducció. Una important àrea de recerca en LLC és la identificació de marcadors útils predictius de probabilitat de progressió de la malaltia. La mesura de l'estrès oxidatiu (OS), fa referència al desequilibri en favor de l'estat prooxidant enfront davant l'antioxidant.Objectiu. Determinar el grau d'OS en pacients amb estadis inicials d'LLC, relacionar amb altres factors pronòstics reconeguts, i comparar-los amb un grup control.Materials i mètodes. En 37 pacients diagnosticats d'LLC en estadis inicials, es va determinar l'OS mitjançant la mesura i puntuació de diferents paràmetres. Els resultats van ser processats estadísticament.Resultats. S'observa major OS en grup de pacients, major en els malalts amb major nombre de factors pronòstics adversos.Conclusió. La determinació del nivell d'OS podria usar-se com a marcador pronòstic en estadís inicials d'LLC al costat dels factors ja coneguts. / Introduction. An important area of research of CLL is the identification of markers useful for predicting likelihood of disease progression. Measurement of oxidative stress (OS), makes reference to the imbalance in favour of prooxidating state in front of antioxidative state.Objective. To determine the degree of OS in a group of patients with initial stages of CLL, to relate it with another recognized prognosis factors and to compare with a matched group control. Material and methods. In a group of 37 patients diagnosed of initial stages of CLL, OS were determinated by the measurement and scoring of different parameters. The results were statistical processed.Results. Significantly greater OS is observed in patients group, greater in patients with higher number of adverse prognostic factors.Conclusion. The determination of the level of OS could be considered for its use as prognosis factor of CLL early stage, next to the knowed factors.

La incidencia del síndrome metabólico es cada vez más alta en los países desarrollados. El estrés oxidativo tiene un papel potencial en la patología del síndrome metabólico. Puede mediar en diversos factores de riesgo como: aterosclerosis, hipertensión, diabetes tipo 2, obesidad y resistencia a la insulina. Los ácidos grasos poliinsaturados n-3 (AGPI n3) reducen el riesgo de enfermedad cardiovascular en parte por la mejora del perfil lipídico, de la hipertensión, del estrés oxidativo y de la inflamación. Se realizó un estudio nutricional en animales Wistar (controles) y SHROB (modelo de síndrome metabólico). Durante tres meses se administraron cinco tratamientos distintos: tres con diferentes proporciones de AGPI n3, EPA:DHA (1:1, 2:1 y 1:2), y dos controles a base de soja y lino. Se controlaron diferentes parámetros como: peso corporal, glucosa, presión arterial, insulina e índice HOMA. Se analizaron el perfil lipídico, biomarcadores de riesgo cardiovascular, estrés oxidativo y se realizó un análisis de daño histológico. Se pretende demostrar cuales son los efectos beneficiosos de los AGPI n3 de origen marino, esclareciendo a su vez cual de las tres proporciones EPA:DHA es la más adecuada en la mejora de los parámetros estudiados. / The incidence of metabolic syndrome increases in developed countries. Oxidative stress has a potential role in the pathology of metabolic syndrome. It mediates various risk factors such as atherosclerosis, hypertension, type 2 diabetes, obesity and insulin resistance. Polyunsaturated fatty acids n-3 (PUFA n3) reduces the risk of cardiovascular disease in part by improving the lipid profile, hypertension, oxidative stress and inflammation. We conducted a nutritional study in Wistar rats (controls) and SHROB rats (model of metabolic syndrome). For three months were administered five different treatments: three with different proportions of PUFA n3, EPA: DHA (1:1, 2:1 and 1:2), and two controls soy and flax. Different parameters were studied as body weight, glucose, blood pressure, insulin and HOMA index. We analyzed the lipid profile, cardiovascular risk biomarkers, oxidative stress and an analysis of histological damage. We want demonstrate beneficial effects of PUFA n3, clarifying turn which of the three ratios EPA: DHA is the most suitable in improving the studied parameters.

El presente estudio tuvo como objetivo determinar la relación existente entre el estrés y el tabaquismo con la estomatitis aftosa recurrente. Se tomó una muestra total de sesenta (60) pacientes de ambos sexos con una edad promedio de 36,5 años y que presentaban lesiones aftosas recurrentes, fueron divididos en dos grupos iguales de treinta (30) personas, el primero presentaba el hábito de tabaquismo y el segundo no. Nuestra metodología consideró un examen clínico en donde se evaluó la ubicación y el tamaño de las aftas en la mucosa bucal, asimismo, mediante una encuesta se determinó el nivel de estrés (somático y cognoscitivo), la condición de tabaquismo y la periodicidad de las lesiones aftosas. Nuestros resultados nos permitieron concluir que el tabaquismo (tiempo de fumador y número de cigarrillos por día) no guarda una relación con la mayor o menor frecuencia de lesiones aftosas en la mucosa bucal (cada mes, cada tres meses, cada seis meses y cada año) ni con el tipo de lesiones presentes en boca (mayor, menor y herpetiforme). Con relación al estrés: El de tipo cognoscitivo guarda una relación con el tipo de lesiones aftosas. El de tipo somático presentó una relación directa con la frecuencia de lesiones aftosas en la mucosa bucal.

El sulfonato de perfluorooctano (PFOS) es un compuesto orgánico ampliamente utilizado en la industria como agente surfactante. Varios estudios ambientales han mostrado que el PFOS es un contaminante global, persistente y bioacumulativo, cuyos niveles en la población y en el medio ambiente son en la actualidad un riesgo potencial. Sin embargo, los efectos tóxicos del PFOS no han sido aún bien caracterizados. Se considera que este compuesto es un posible disruptor endocrino con efectos sobre los niveles de hormonas tiroideas y glucocorticoides. Por otra parte, se ha demostrado que el estrés materno produce efectos adversos sobre la madre y el desarrollo pre y postnatal de la descendencia, estos incluyen alteraciones en el aprendizaje en machos y alteraciones en el comportamiento en respuesta a situaciones estresantes. No obstante, el patrón de efectos derivados de la exposición a estrés durante la gestación depende del periodo de exposición y el tipo/intensidad del estresor. Son varias las investigaciones que demuestran que algunas sustancias químicas pueden modular los efectos del estrés materno, y a la inversa, el estrés materno puede modificar los efectos de ciertas sustancias químicas, en especial cuando estas se administran a dosis relativamente elevadas. Por lo tanto, el estrés y el PFOS podrían compartir mecanismos de acción comunes, lo que podría incrementar el riesgo de interacciones toxicológicas entre estos dos factores. El objetivo de la presente tesis es evaluar los efectos del PFOS, del estrés prenatal y de una posible interacción entre ambos factores sobre la toxicidad materna, el desarrollo pre y postnatal y la conducta de la descendencia, además de valorar la conducta en sujetos adultos tras la exposición a PFOS. Se utilizaron ratones albinos, cepa CD1. Con el objetivo de determinar la toxicidad materna y embriofetal, se administró 0, 1.5, 3 ó 6 mg/kg/día de PFOS vía oral (Días de Gestación 6-18) a hembras que mostraron presencia de tapón vaginal. La mitad de animales de cada grupo fue expuesta a estrés por inmovilización 30 minutos, 3 veces al día. Con el objetivo de determinar la toxicidad sobre el desarrollo postnatal y el comportamiento a largo plazo, se administró vía oral 0 ó 6 mg/kg/día a hembras con tapón vaginal durante los DG 12-18. La mitad de animales de cada grupo fue sujeta, a la vez, a estrés por inmovilización durante 30 minutos, 3 veces al día, durante el mismo periodo.Con el objetivo de determinar los efectos del PFOS sobre el comportamiento en la edad adulta, se administró 0, 3 ó 6 mg/kg/día de PFOS vía oral a ratones machos adultos durante 4 semanas consecutivas. Los resultados de la presente tesis muestran que la exposición a PFOS y a estrés por inmovilización produce efectos maternotóxicos. No existen efectos de potenciación entre estos dos factores sobre la toxicidad materna. Se observó que el PFOS aumenta la mortalidad prenatal. El estrés materno, a su vez, incrementó la mortalidad prenatal en el grupo expuesto a la dosis de PFOS más baja. La exposición simultánea a PFOS y estrés por inmovilización durante la gestación produce efectos opuestos sobre el desarrollo postnatal de la descendencia. Estos efectos consisiten en una tendencia hacia un retraso general en la maduración, por parte del PFOS, y un patrón de maduración general acelerada, por parte del estrés prenatal. A pesar de que la interacción entre la administración de PFOS y estrés prenatal no causó efectos adversos sobre la maduración física o el desarrollo neuromotor, esta causó alteraciones en el comportamiento en la edad adulta. El efecto más remarcable, producido tras la administración de PFOS a ratones adultos, fue el deterioro en la retención de una tarea espacial. / Perfluorooctane sulfonate (PFOS) is a persistent and bioaccumulative pollutant that can be released from several fluorochemicals by. The surfactant properties of this chemical have made it desirable for extensive use in industrial and commercial applications including surface protection, paper and food- package treatment, and lubricants. A number of recent studies have shown the presence of PFOS in blood samples from occupationally and non-occupationally exposed humans. Studies focused on the developmental effects of oral PFOS during pregnancy have shown dose-dependent adverse effects in rodents. Maternal and developmental toxicity were observed as reductions in maternal weight gain, reductions in fetal body weight, and delays in developmental landmarks and neuromotor maturation. Prenatal and postnatal mortality have been also reported. The toxicological profile of PFOS in adult rodents shows a significant weight loss accompanied by hepatotoxicity and reduced levels of serum cholesterol and triglycerides. However, the potential toxicity of PFOS has not been completely characterized yet. On the other hand, it has been established that gestational stress during a critical period of the embryonic development may modify gestational parameters and produce longlasting alterations in the behavior of the offspring. The presence and persistence of such adverse effects depend on factors such as the exact timing of exposure to stress of the dam and the type and intensity of stressor.It has been reported that some chemicals can alter the effects of maternal stress and, conversely, maternal stress can modify the potential adverse effects of some contaminants, in particular when they have been administered at high doses. The purpose of the present study was to evaluate whether maternal stress can modify the potential adverse effects of prenatal oral exposure to PFOS in mice.In order to assess the maternal and developmental toxicity of combined exposure to restraint stress and perfluorooctane sulfonate in mice, four groups of plug-positive female mice were orally exposed to PFOS at 0, 1.5, 3 and 6 mg/kg/day during gestation days 6-18. Four additional groups of plug-positive animals received the same PFOS doses being restrained during 30 min three times per day. Cesarean sections were performed on Day 18 of gestation and fetuses were weighed and examined for external, internal and skeletal malformations and variations. Before sacrifice of the dams, blood was collected and serum samples were prepared for thyroid hormones (total and free T3 and T4) and corticosterone analyses. In order to assess the combined effects of maternal restraint stress and (PFOS) on postnatal development and behavior of the offspring, thirty-four plug positive females were randomly divided into two groups. Animals were given by gavage 0 and 6 mg PFOS/kg/day on gestation days 12-18. One-half of the animals in each group was subjected to restraint stress (30 min per session, three sessions per day) during the same period. At 3 months of age, the offspring was evaluated for general activity in an open-field, and for learning and memory in a water maze task. After behavioral testing, serum was collected for corticosterone analyses. In order to assess the behavioral effects of PFOS on adult mice, thirty adult mice were divided into three groups. Animals were given by gavage 0, 3, and 6 mg PFOS/kg/day for four consecutive weeks. After the treatment period, mice were evaluated for several skills by testing motor and sensory function by means of a functional observation battery (FOB), general activity and exploratory behavior in an open-field, and learning and memory in a water maze task. One week after behavioral testing, serum was collected for corticosterone analyses. The results of the present study show that both PFOS and restraint stress induced maternal toxicity. PFOS-induced adverse effects on maternal and fetal toxicity in mice were observed at lower doses than those previously reported. Pups of dams exposed to 6 mg/kg of PFOS showed a reduced body weight. Moreover, PFOS exposure induced some delay in developmental landmarks and neuromotor maturation. The current results indicate that concurrent exposure to PFOS and restraint stress during pregnancy induces opposite effects on developmental parameters in the pups. These effects consist in a general delayed maturation trend induced by PFOS exposure, and a general accelerated maturation pattern induced by prenatal stress. Our results suggest interactive deleterious effects between PFOS and maternal stress on the behaviour of the offspring. Our results indicate that PFOS exposure induced only slight behavioral effects in adult male mice. In the retention test, a deleterious effect of PFOS was noted.