Este estudo teve por objetivo avaliar, in vitro, a viabilidade do uso de soluções de extratos naturais no tratamento restaurador da dentina, por meio do ensaio de resistência à microtração e análise qualitativa da superfície dentinária e interface adesiva em microscopia eletrônica de varredura (MEV). A amostra foi composta de 90 fragmentos de dentina bovina. Os fragmentos foram planificados, polidos e condicionados com ácido fosfórico 37% e, em seguida, divididos de acordo com o tratamento da dentina em 5 níveis: GI Sem tratamento (controle), GII Solução de extrato de Camellia sinensis (chá verde), GIII Solução de extrato de Punica granatum (romã), GIV Solução de extrato de Vitis vinifera (semente de uva), GV Solução de extrato de Lycium barbarum (goji berry). Os espécimes que foram utilizados na análise da resistência de união e interface adesiva tiveram as superfícies restauradas com adesivo (Adper Single Bond 2 - 3M) e resina composta (Filtek Z250 - 3M). Os 60 fragmentos utilizados para o teste de microtração (6 mm x 6 mm x 6 mm) foram seccionados em palitos de aproximadamente 1 mm&sup2, obtendo-se 4 palitos por dente (n=12). Após o teste, o padrão de falhas foi analisado em microscopia de varredura confocal a laser (MVCL). Para análise da interface adesiva, 15 fragmentos (6 mm x 3 mm x 3 mm) foram tratados com as soluções (n=3), restaurados e preparados para MEV. Os 15 fragmentos (3 mm x 3 mm x 3 mm) destinados à análise da superfície foram tratados com as soluções (n=3) e preparados para MEV. Os dados do teste de microtração (MPa) foram submetidos à ANOVA e teste de Tukey (p=0,05). Os maiores valores médios de resistência adesiva (p < 0,05) foram obtidos nos grupos controle (sem tratamento, GI - 25,69 ± 6,32), extrato de Camellia sinenis (chá verde, GII - 28,14 ± 7,66) e extrato de Vitis vinifera (semente de uva, GIV - 25,55 ± 4,00), sendo estes iguais entre si (p > 0,05). Os fragmentos tratados com o extrato de Punica granatum apresentaram os menores valores médios (p < 0,05) de resistência adesiva (Romã, GIII - 17,42 ± 4,82). Os fragmentos que receberam o extrato de Lycium barbarum apresentaram valores intermediários (Goji Berry, GV - 23,44 ± 6,78), ora similares aos dos grupos com maiores médias, ora iguais ao grupo de menor média de resistência adesiva (p > 0,05). Falhas adesivas foram predominantes nos grupos experimentais. Na análise em MEV da superfície dentinária, verificou-se superfície regular, sem camada de smear e com abertura dos túbulos dentinários em todos os grupos analisados. Na análise da interface adesiva, houve boa hibridização da embocadura dos canais, e presença de tags resinosos na maioria dos túbulos dentinários, sugerindo formação de camada hibrida. As soluções de Camellia sinensis, Vitis vinifera e Lycium barbarum não interferiram negativamente na resistência de união quando comparados ao grupo controle, sem tratamento. / This study aimed to evaluate, in vitro, the viability of using natural extracts solutions in dentin restorative treatment, by microtensile bond strength test and qualitative analysis of dentin morphology surface and adhesive interface under scanning electron microscopy (SEM). Sample was composed of 90 fragments of intracoronary bovine dentin. The fragments were flattened, etched with 37% phosphoric acid and then were divided according to the dentin treatments: GI - Untreated (control), GII - Camellia sinensis extract solution (green tea), GIII - Punica granatum extract solution (pomegranate), GIV - Vitis vinifera extract solution (grape seed), GV - Lycium barbarum extract solution (goji berry). Specimens that were used on the bond strength test and adhesive interface analysis were restored with adhesive (Single Bond 2 - 3M) and composite resin (Filtek Z250 - 3M). The 60 fragments used to microtensile test (MPa) (6mm x 6mm x 6mm) were sectioned at approximately 1mm2 sticks, 4 destined to the bonding interface analysis (n=12). After the test, the failure pattern was analyzed in confocal laser scanning microscopy (CLSM). For adhesive interface analysis, 15 pieces (6mm x 3mm x 3mm) were treated with solutions, restored and prepared for SEM (n=3). The 15 fragments (3mm x 3mm x 3mm) destined for surface analysis were treated with solutions and prepared for SEM (n=3). The microtensile test (MPa) data were submitted to ANOVA and Tukey test (p=0.05). The highest values of bond strength (p<0.05) were obtained in the control groups (untreated, GI - 25.69 ± 6.32), Camellia sinenis extract (green tea, GII - 28.14 ± 7. 66) and Vitis vinifera extract (grape seed, GIV - 25.55 ± 4.00), which are equal to each other (p>0.05). The fragments treated with Punica granatum extract (Pomegranate, GIII - 17.42 ± 4.82) showed lowest values of bond strength (p <0.05). Fragments treated with Lycium barbarum extract showed intermediate values (Goji Berry, GV - 23.44 ± 6.78), similar to those of groups with higher values and to the lower values group of bond strength (p>0.05). Adhesive failures were predominant in all groups. The SEM analysis of the dentin surface demonstrated that there was a regular surface, without smear layer and open dentinal tubules in all groups analyzed. The adhesive interface analysis, showed that there was good hybridization of the entrance of dentinal tubules, and presence of resin tags in most dentinal tubules, suggesting formation of hybrid layer. The extracts solutions of Camellia sinensis, Vitis vinifera and Lycium barbarum did not interfere negatively on the bond strength when compared to the control group without treatment.

Os patógenos de origem alimentar constituem um dos maiores problemas de saúde pública no mundo, responsáveis por prejuízos com custos médicos, morbidade e mortalidade. O surgimento de cepas microbianas resistentes a uma grande variedade de antibióticos tem agravado o problema, o que evidencia a necessidade de descoberta de novos compostos com atividade antimicrobiana. Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar o perfil fitoquímico e potencial antimicrobiano in vitro de extratos vegetais de três plantas medicinais coletadas no Estado do Tocantins sobre micro-organismos frequentemente relacionados com toxinfecções alimentares. Foram coletadas amostras de folha e entrecasca de Parkia plathycephala Benth, Pouteria ramiflora (Mart.) Radlk e Lophantera lactescens Ducke e elaborados extratos brutos aquosos e hidroalcoólicos dos vegetais. Os extratos obtidos foram submetidos a avaliações fitoquímicas para identificação de seus compostos bioativos e solubilizados em solução de Dimetilsulfóxido (DMSO) a 1% na concentração de 25 mg/mL, solução estoque, para o teste de atividade antimicrobiana, na qual foram determinadas a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) pelas técnicas de microdiluição em caldo e de observação de crescimento da bactéria em placas de ágar Mueller Hinton, respectivamente, utilizando concentrações de extratos de 12,5; 6,25; 3,12; 1,56; 0,78; 0,39; 0,19 e 0,09 mg/mL frente as cepas de Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Salmonella Typhimurium ATCC 14028. Os resultados da análise fitoquímica dos extratos revelaram que as folhas da espécie L. lactescens foram as que obtiveram menor presença de compostos bioativos em sua composição, ácidos orgânicos, saponinas e taninos, ao passo que a entrecasca dessa espécie e as demais plantas apresentaram também os compostos catequinas, sesquiterpenlactonas e antraquinonas, este último exceto na espécie P. plathycephala. Quanto à atividade antimicrobiana as três espécies de plantas apresentaram-se ativas, sendo o S. aureus o micro-organismo mais sensível aos extratos. E. coli e Salmonella foram inibidas somente com a aplicação de extratos da entrecasca da P. plathycephala. Dessa forma, foi possível concluir que as três espécies de plantas avaliadas demostraram ser promissoras para o desenvolvimento de novos produtos com atividade antimicrobiana, sendo que a espécie P. plathycephala apresentou um maior espectro de ação. / Pathogens foodborne are one of the most important problems in public health in the world, responsible for losses with medical costs, morbidity and mortality. The emergence of microbial strains resistant to a wide variety of antibiotics have exacerbated the problem, highlighting the need for discovery of new compounds with antimicrobial activity. Thus, the aim of this study was to evaluate the phytochemical profile and antimicrobial potential in vitro of plant extracts of three medicinal plants collected in Tocantins State on often microorganisms related to food poisoning. Leaf samples were collected and inner bark of Parkia platycephala Benth, Pouteria ramiflora (Mart.) Radlk and Lophantera lactescens Ducke and elaborate hydroalcoholic and aqueous extracts of vegetables. The extracts were subjected to phytochemical evaluation for the identification of their bioactive compounds, solubilized in dimethyl sulfoxide solution (DMSO) at 1% concentration 25 mg/mL, stock solution, for the antimicrobial activity test, which were determined minimum inhibitory concentration (MIC) and bactericidal concentration Minimum (CBM) by microdilution techniques in broth and bacterial growth observation on agar plates Mueller Hinton, respectively, using extracts concentrations of 12.5; 6.25; 3.12; 1.56; 0.78; 0.39; 0.19 and 0.09 mg / mL front strains of Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Salmonella Typhimurium ATCC 14028. The results of the phytochemical analysis revealed that extracts of the leaves of the species L. lactescens obtained were smaller the presence of bioactive compounds in its composition, organic acids, tannins and saponins, while the inner bark of the species and other plants also showed the compounds catechins, sesquiterpenlactonas and anthraquinones, the latter except in the species P. plathycephala. The antimicrobial activity of the three species of plants had become active, with S. aureus more susceptible microorganism to the extracts. E. coli and Salmonella were inhibited only with extracts application of the inner bark of P. plathycephala. Thus, it was concluded that the three species of plants evaluated have shown to be promising for the development of new products with antimicrobial activity, and the specie P. plathycephala presented a greater spectrum of action.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-06-29T13:18:42Z No. of bitstreams: 1 MARIA JOSÉ BATISTA DE SOUSA.pdf: 2843064 bytes, checksum: f400a0df10a20e086f4f74a5b6cf9480 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T13:18:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIA JOSÉ BATISTA DE SOUSA.pdf: 2843064 bytes, checksum: f400a0df10a20e086f4f74a5b6cf9480 (MD5) Previous issue date: 2017-03-28 / The species Brosimum gaudichaudii (family Moraceae) and Caesalpinia ferrea (family Fabaceae) are widely distributed throughout Brazil and are considered medicinal plants. The extract of Brosimum gaudichaudii bark has been indicated for the treatment of skin blemishes and vitiligo. On the other hand, the extract of Caesalpinia ferrea fruit has been used due to its therapeutic properties as antibacterial, anti-inflammatory and analgesic action. Much of the medicinal plant extracts constituents are unknown and may be toxic to human and animal health, so it is necessary to study the qualitative phytochemical of secondary metabolites and to evaluate the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potential of the extracts of these species. In this study, in order to evaluate the mutagenic and / or genotoxic effects, different concentrations of the extractive solutions of B. gaudichaudii and C. ferrea were evaluated in vivo in Astyanax sp and Allium cepa, and ex vivo, by the micronucleus test in T lymphocytes humans. Data were submitted to Kruskall-Wallis a non-parametric test and then to simple linear regression with a significance level of 5%. The Allium cepa test, micronucleus test for human T lymphocytes and erythrocytes of Astyanax sp did not indicate mutagenic and / or genotoxic potential of phytochemicals (p> 0.05) when compared to the non-exposed controls, except the concentration of 5 mg/L of B. gaudichaudii that showed cytotoxicity. On the other hand, the comet assay revealed genotoxic action for all concentrations evaluated for the tail length parameter of the comet. For the moment parameter of Olive's tail only the 20mg /L concentration of Caesalpinia ferrea extract was genotoxic. Therefore, apical meristematic cells from the roots of Allium cepa and human T lymphocytes did not present genotoxic and / or mutagenic changes induced by exposure to both plant extracts detectable by micronuclei tests or mitotic index reduction. Genotoxic effect was evidenced by the tail length and tail moment parameter of Olive in the Comet Assay only for C. ferrea extract in the erythrocytes of Astyanax sp. In order to understand the genotoxic and mutagenic activities of B. gaudichaudii and C. ferrea it is important to increase the number of studies to establish safer doses for human consumption. / As espécies Brosimum gaudichaudii (família Moraceae) e Caesalpinia ferrea da família Fabaceae são amplamente distribuídas pelo território brasileiro e são consideradas plantas medicinais. O extrato das cascas de Brosimum gaudichaudii tem sido indicado para tratamento de mancha de pele e vitiligo. Por outro lado, o extrato dos frutos de Caesalpinia ferrea tem sido usado devido suas propriedades terapêuticas como ação antibacteriana, antiinflamatória e analgésica. A maioria dos fitoquímicos presentes nos extratos de plantas medicinais ainda não foram completamente estudados e podem ser tóxicos para a saúde humana e animal. Nesse sentido, é necessário estudos fitoquímicos qualitativos de metabólitos secundários e avaliação do potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico dos extratos destas espécies. Nesse estudo, visando avaliar os efeitos mutagênico e/ou genotóxico, diferentes concentrações das soluções extrativas de B. gaudichaudii e C. ferrea foram avaliadas in vivo em Astyanax sp e em Allium cepa, e em ex vivo, pelo teste de micronúcleos em linfócitos T humanos. Os resultados observados das análises foram submetidos ao teste não paramétrico Kruskall-Wallis e posteriormente a regressão linear simples com nível de significância 5%. O teste em Allium cepa, teste de micronúcleo em linfócitos T humanos e em eritrócitos de Astyanax sp não indicaram potencial mutagênico e/ou genotóxico dos fitoconstituintes (p>0,05) quando comparado aos controles não expostos, exceto a concentração de 5g/L de B. gaudichaudii que apresentou citotoxicidade (p=0,038). Por outro lado, o ensaio cometa, revelou ação genotóxica para todas as concentrações avaliadas no parâmetro comprimento da cauda do cometa, para o parâmetro momento da cauda de Olive, apenas a concentração de 20mg/L do extrato de Caesalpinia ferrea mostrou-se genotóxica. Nenhum dos parâmetros avaliados evidenciou danos genéticos resultantes da exposição aos extratos das cascas do caule de B. gaudichaudii. Portanto, as células meristemáticas apicais das raízes de Allium cepa e os linfócitos T humanos não apresentaram alterações genotóxicas e/ou mutagênicas induzidas pela exposição a ambos extratos vegetais que pudesse ser detectadas pelos testes do micronúcleos ou redução do índice mitóticos. Enquanto, nos eritrócitos de Astyanax sp foi evidenciado ação genotóxica pelo parâmetro comprimento da cauda do cometa e momento de da cauda de Olive somente para o extrato de C. ferrea. Diante do exposto, há necessidade de ampliar os estudos para melhor compreensão das atividades genotóxicas e/ou mutagênicas dos extratos de B. gaudichaudii e C. ferrea visando o estabelecimento de doses mais seguras para o consumo humano.

O presente trabalho teve como objetivo investigar o tipo de morte induzida nas linhagens de carcinoma mamário humano MCF-7 (ER+) e MDA-MB-435 (ER-), pela fração isolada do extrato de folhas de barbatimão. As folhas de Stryphnodendron adstringens (Martius) Coville (Fabaceae) foram coletadas, secas e utilizadas para o preparo do extrato acetônico, que foi particionado com acetato de etila. A fração aquosa remanescente foi liofilizada e fracionada por cromatografia em Sephadex LH 20. As frações coletadas foram submetidas à cromatografia em camada delgada e a fração eluída com metanol a 100% foi utilizada nos experimentos, por apresentar o maior conteúdo de proantocianidinas. A análise por HPLC permitiu verificar que a fração isolada contem procianidina dimérica B1, epigalocatequina-3-O-galato e ácido gálico. As células de adenocarcinoma mamário MCF-7 (ER+) e MDA-MB-435 (ER-) foram tratadas por 24 h com diferentes concentrações da fração (5 – 160 μg/mL) e com ciclofosfamida a 550 μg/mL. O tratamento das células com a fração isolada induziu redução da viabilidade celular e alterações morfológicas nas duas linhagens, incluindo perda da morfologia celular típica, condensação da cromatina e diminuição da área das colônias e das células. A DE50 para células MCF-7 foi de 12,35 μg/mL e para as células MDA-MB-435 foi de 34,43 μg/mL, sendo as células MCF-7 mais sensíveis ao tratamento. A análise por Western blotting mostrou que tratamento o com a fração induziu aumento da expressão de Bax e diminuição de Bcl-2 nas células, indicando apoptose. Houve ainda aumento da expressão de caspase-9, caspase-3-ativa e caspase-8, além da diminuição da expressão da caspase-3 e pró-caspase-8. Estas proteínas estão envolvidas na via intrínseca de indução da apoptose. Foi observado também aumento de proteínas marcadoras da autofagia, LC-3 nas duas linhagens e beclin-1 nas células MDA-MB-435. Assim, os resultados do presente trabalho permitem concluir que a fração isolada do extrato de folhas de barbatimão induziu a morte por apoptose com autofagia nas células MCF-7 e MDA-MB-435. Estes resultados são importantes, pois foram demonstradas a citotoxicidade e indução de morte das células MDA-MB-435, que são ER-, além das células MCF-7 (ER+). Tendo em vista que não há tratamento curativo para tumor mamário ER-, bem como para ER+ em estágio avançado, a fração isolada parece ser candidata promissora para o desenvolvimento de fármaco para o tratamento e prevenção do câncer de mama. / The aim of the present work was to investigate the type of cell death induced in the MCF-7 (ER+) and MDA-MB-435 (ER-) human mammary carcinoma cell lineages by the fraction isolated from the barbatimão leaf extract. Stryphnodendron adstringens (Martius) Coville (Fabaceae) leaves were collected, dried and the acetone extract was prepared. It was partitioned with ethyl acetate and the remaining aqueous solution was lyophilized and fractioned by Sephadex LH 20 chromatography. The collected fractions were analyzed by thin layer chromatography and the fraction eluted with 100 % methanol was used in the experiments, because it showed the highest proanthocyanidin content. The HPLC analysis showed that the isolated fraction is composed by procyanidin dimmer B1, epigallocatechin-3-O-gallate and gallic acid. The MCF-7 (ER+) and MDA-MB-435 (ER-) cells were treated for 24 h with different concentrations of the fraction (5 – 160 μg/mL) and with 550 μg/mL cyclophosphamide. The cell treatment with the isolated fraction induced cell viability reduction and morphologic alterations in both cell lines, including cell typical shape loss, chromatin condensation and a decrease in the colony and cell area. The ED50 dose for MCF-7 cells was 12.35 μg/mL and the ED50 dose for MDA-MB-435 cells was 34.43 μg/mL, being the MCF-7 cells more sensitive to the fraction treatment. The Western blotting analysis showed that the fraction treatment induced an increase in the Bax and a decrease in the Bcl-2 cell expression that is indicative of apoptosis. There were also an increase in the caspase-9, caspase-3-active and caspase-8 expression and a decrease in the caspase-3 and pro-caspase-8 expression. These proteins are involved in induction of the intrinsic apoptosis pathway. It was also observed an increase in the expression of autophagy protein markers: LC-3 expression increased in both cell lines and beclin-1 expression increased only in the treated MDA-MB-435. The results of the present work allowed the conclusion that the isolated fraction from barbatimão leaf extract induced apoptotic death with autophagy in both cell lines, MCF-7 and MDA-MB-435. These results are important because it was demonstrated the cytotoxic effect and the ER- MDA-MB-435 cell death induction, besides the cytotoxicity to ER+ MCF-7 cells. As there is no a curative treatment for ER- mammary tumors as well as ER+ tumors in an advanced stage, the isolated fraction seems to be a promising candidate to a drug development for breast cancer treatment and prevention. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O uso indiscriminado de antimicrobianos pode estar associado ao fenômeno da resistência microbiana, levando ao insucesso no tratamento das infecções e impulsionando a busca por novas alternativas terapêuticas, dentre elas, os bioativos obtidos a partir de fontes vegetais. Foi avaliada a atividade antimicrobiana de extratos hidroetanólicos de plantas sobre bactérias Gram positiva, Gram negativa, leveduras, Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis pela técnica de difusão em agar e microdiluição em caldo. Dentre os extratos avaliados pelo método de difusão em agar, o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a mais expressiva média de halos de inibição de crescimento frente aos microrganismos utilizados, seguido por Bidens pilosa flor, E. pyriformis folha, M. cauliflora folha e E. pyriformis semente que apresentaram estatisticamente a mesma média de formação de halos inibitórios sobre bactérias Gram positivas, Gram negativas e leveduras. Os extratos de Heliconia rostrata não apresentaram atividade. Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis mostraram-se resistentes a todos os extratos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). As bactérias Gram negativas E. coli, E. cloacae, S. marcescens e P. aeruginosa também apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade frente aos extratos (p>0.05). O perfil de senbilidade dos fungos C. albicans e S. cerevisiae foram comparáveis entre si e entre as bactérias Gram positivas B. subtilis, E. faecalis e Gram negativa S. typhimurium (p>0.05). Os extratos que apresentaram ação inibitória através do ensaio de microdiluição em caldo foram os mesmos extratos ativos no teste de difusão em agar. A avaliação da citotoxicidade foi realizada sobre células C6-36 de larvas de mosquito Aedes albopictus. Os extratos de caule e flor de Heliconia rostrata, folha e caule de Plinia cauliflora, semente de Anonna crassiflora e caule, flor e raiz de Bidens pilosa não apresentaram toxicidade nas concentrações avaliadas. Os maiores índices de seletividade foram apresentados pelos extratos de A. crassiflora caule e B. pilosa flor para S. aureus, apresentando potencial para estudos como futuros candidatos a fármacos. Dos microrganismos avaliados, as bactérias Gram positivas M. luteus e S. aureus apresentaram o mesmo perfil de sensibilidade (p>0.05). Dos microrganismos que apresentaram alguma sensibilidade a qualquer um dos extratos, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. cloacae e E. coli foram estatisticamente, igualmente os menos sensíveis. Apenas os extratos de B. pilosa folha apresentou igualdade, estatisticamente significativa, da média de efetividade inibitória quando comparado ao controle positivo, a clorexidina / The indiscriminate use of antibiotics may be associated with the phenomenon of microbial resistance, leading to infections treatment failure and boosting the search for new therapeutic alternatives, among them, the bioactive obtained from plant sources. We evaluated the antimicrobial activity of hydroethanolic extracts of plants on Gram positive, Gram negative bacteria, yeasts, Mycobacterium tuberculosis and Mycobacterium bovis H37 through agar diffusion and broth microdilution techniques. Among the extracts evaluated through agar diffusion method, the leaf extract of Bidens pilosa showed the most significant average halos of growth inhibition against microorganisms used, followed by flower of Bidens pilosa leaf E. pyriformis, sheet M. cauliflora seed and E. pyriformis showed that statistically the same average formation of inhibitory halos on Gram positive bacteria, Gram negative bacteria and yeast. Extracts of Heliconia rostrata showed no activity. Mycobacterium bovis and Mycobacterium tuberculosis H37 were resistant to all extracts. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). Gram negative bacteria E. coli, E. cloacae, S. marcescens and P. aeruginosa also showed the same sensitivity profile compared to extracts (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were comparable between the Gram-positive B. subtilis, E. faecalis and Gram negative bacteria S. typhimurium (p> 0.05). The extracts which showed inhibitory action by microdilution sample test were the same active extracts as in agar diffusion test. The Cytotoxicity assessment was performed on cell C6-36 larvae of Aedes albopictus. The extracts of Heliconia rostrata’s stem and flower, Plinia cauliflora’s leaf and stem, crassiflora Annona’s seed and stem, Bidens pilosa's root and flower showed no toxicity at the evaluated concentrations. The highest selectivity were presented by stem extracts of A. crassiflora and Bloom B. pilosa as for S. aureus there is potential for studies on future drug candidates. Of the tested microorganisms, Gram positive bacteria M. luteus and S. aureus showed the same sensitivity profile (p> 0.05). The sensitivity profile of the fungi C. albicans and S. cerevisiae and were compared one another and to B. subtilis, E. faecalis Gram positive and S. typhimurium Gram negative bacteria (p> 0.05). Among the microorganisms which showed some sensitivity to any of the extracts, M. bovis, P. aeruginosa, S. marcescens, E. and E. cloacae coli were statistically also less sensitive. Only the leaf extracts of B. pilosa showed statistically significant equality of the average inhibitory effectiveness when compared to the positive control and chlorhexidine

Atualmente, S. aureus meticilina resistente (MRSA) é o mais importante patógeno nosocomial, devido à sua multirresistência aos antimicrobianos disponíveis, o que direciona esforços na busca de novas alternativas terapêuticas. Neste estudo foi avaliada a ação antimicrobiana de extratos vegetais contra isolados MRSA do ambiente aéreo, identificados previamente. Os extratos de Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata e Plinia cauliflora foram obtidos por maceração em álcool etílico a 70%, submetidos à rota evaporador e liofilizados. Estes foram testados quanto à ação antimicrobiana pela técnica de difusão em ágar. Posteriormente, realizou-se a concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de microdiluição em caldo. Testes de toxicidade em cultura celular e análise fitoquímica dos extratos complementaram a análise, onde a maioria dos extratos apresentou baixa toxicidade, presença de alcalóides, flavonóides, taninos e saponinas. Os extratos da folha, casca do fruto e caule de Plinia cauliflora, caule e folha de Eugenia pyriformis, caule, polpa, casca do fruto e folha de Annona crassiflora e flor, caule e folha de Bidens pilosa foram efetivos contra as amostras multirresistentes analisadas, sendo que o extrato de Bidens pilosa folha apresentou a melhor atividade antibacteriana in vitro por ambos os métodos avaliados. / Currently S. aureus methicillin resistant (MRSA) is the most important nosocomial pathogen due to multidrug resistance to available antimicrobials, which directs efforts in the search for new therapies. In this study we evaluated the in vitro antimicrobial activity of plant extracts against ambient aerial isolates of MRSA previously identified. The hydroethanolic extracts of Annona crassiflora, Bidens pilosa, Eugenia pyriformis, Heliconia rostrata and Plinia cauliflora were obtained by steeping in ethyl alcohol, 70%, evaporated and lyophilized. The antimicrobial activity was evaluated by agar diffusion and determination of minimum inhibitory concentration (MIC) by microdilution broth. Toxicity testing in cell culture and phytochemical analysis complemented the analysis where most of the extracts showed low toxicity, presence of alkaloids, flavonoids, tannins and saponins. The extracts of leaf, stem and fruit rind of Plinia cauliflora, stem and leaf of Eugenia pyriformis, stem, pulp, fruit rind and leaf of Annona crassiflora and flower, stem and leaf of Bidens pilosa were effective against multidrug-resistant samples analyzed being that the leaf extract of Bidens pilosa showed the best in vitro anti-MRSA activity by both methods evaluated. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

As plantas têm sido utilizadas para fins terapêuticos desde a antiguidade, sendo que atualmente, através de estudos de segurança, de eficácia e de qualidade, são alternativas como possíveis fitoterápicos, ou através de triagens prospectivas, promissoras fontes de moléculas-protótipo candidatas a fármacos. Nos últimos anos, o surgimento de micro-organismos multi-resistentes aos agentes antimicrobianos disponíveis na prática médica tem sido razão de constante preocupação por parte da comunidade cientifica, direcionando a busca por novos antimicrobianos. Talinum patens (L.) Willd (Talinaceae) uma planta encontrada na flora brasileira é amplamente utilizada na culinária e com finalidades terapêuticas na medicina popular. Neste contexto, o objetivo desta pesquisa foi realizar o estudo farmacognóstico de T. patens, incluindo a avaliação das atividades antibacteriana, antifúngica, anti-micobacteriana, leishmanicida e sequestrante de radicais do extrato hidroetanólico seco das folhas, e suas frações: hexânica, acetato-etílica, butanólica e aquosa, além da citotoxicidade. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada através dos métodos de difusão em agar e microdiluição em caldo, com obtenção através deste último da concentração inibitória mínima (CIM). O extrato seco apresentou CIM de 250 e 500 µg/ml contra Serratia marcescens e Staphylococcus aureus respectivamente; a fração hexânica, por sua vez, mostrou-se mais eficaz contra bactérias Gram-positivas e leveduras com CIM de 31,2 µg/ml para Micrococcus luteus e Candida albicans e a fração acetato-etílica, contra bactérias Gram-negativas, CIM de 31,2 µg/ml para Escherichia coli. Adicionalmente, na triagem fitoquímica, o extrato seco mostrou reação positiva para saponinas, esteroides e taninos, a fração hexânica mostrou reação positiva para esteroides e a acetato-etílica para saponinas e esteroides. Portanto, as frações hexânica e acetato-etílica das folhas de T. patens apresentaram promissora atividade antimicrobiana, sendo candidatas a estudos futuros na busca de substâncias com ação antimicrobiana, na busca por novos fármacos com atividade frente a bactérias Gram negativas, positivas e fungos patogênicos. Adicionalmente, o extrato seco demonstrou boa atividade sequestrante de radicais DPPH e quantidade significativa de polifenóis (17,4 mg GAE/g de extrato). O extrato seco e as frações com melhor ação antimicrobiana mostraram baixa citotoxicidade. Foram propostos, por espectrometria de massas, os esteroides estigmasterol, b-sitosterol e campesterol como metabólitos presentes nas folhas de T. patens. / Plants have been used for therapeutic purposes since ancient times, and currently, through studies of safety, efficacy and quality they become possible alternatives as herbal medicines, or through prospective trials, promising sources of molecules prototype drug candidates. In recent years, the emergence of multi-resistant micro-organisms to antimicrobial agents available in medical practice has been the reason for continued concern by the scientific community, directing search for new antimicrobials. Talinum patens (L.) Willd (Talinaceae) is a plant widely used in cooking and for therapeutic purposes in folk medicine. In this context, the objective of this research was to carry out a pharmacognostic study of T. patens, including the evaluation of antibacterial, antifungal, anti-mycobacteria, leishmanicidal and radical scavenger from dry leaves hydroethanolic extract and its fractions: hexane, ethyl acetate, butanol and water. Evaluation of the antimicrobial activity was performed by the methods of agar diffusion and broth microdilution, getting through the minimum inhibitory concentration (MIC). Dried extract showed MIC of 250 and 500 mg/​​ml against Serratia marcescens and Staphylococcus aureus respectively, and the hexane fraction was more effective against Gram-positive bacteria and yeasts with MIC of 31.2 mg /ml for Micrococcus luteus and Candida albicans. Ethyl acetate fraction was active against Gram-negative bacteria with MIC of 31.2 mg/ml for Escherichia coli. In addition, at phytochemical screening, dried extract showed a positive reaction for saponins, steroids and tannins. The hexane fraction showed a positive reaction for steroids and ethyl acetate to saponins and steroids. Therefore, hexane and ethyl acetate fractions from T. patens leaves showed promising antimicrobial activity, being candidates for future studies in research for substances with antimicrobial activity and new drug candidates against Gram-negative and positive bacteria and pathogenic fungi. Additionally, dried extract showed good scavenging activity of DPPH radicals and significant concentration of polyphenols (17.4 mg GAE/g extract). It was proposed by mass spectrometry, as secondary metabolites, the steroids stigmasterol, kaempsterol and b-sitosterol. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Estudos voltados para identificação de plantas com propriedades curativas presentes no Cerrado ainda são poucos, principalmente quando comparadas a sua grande diversidade e a área que elas ocupam. Byrsonima intermedia A. Juss., é um arbusto presente no Cerrado brasileiro, pertencente a família Malpighiaceae, muito utilizada pela população local como antisséptica, antimicrobiana, anti-hemorrágica, cicatrizante, anti-inflamatório, febrífugo e adstringente nas diarréias e disenterias. No entanto são plantas que não apresentam estudos suficientes para que possam ser empregadas de maneira racional. Seu uso popular se dá através das cascas do caule, o que leva ao extrativismo. Um dos problemas que têm limitado a ampla utilização desta espécie é a produção de mudas, pois suas sementes apresentam dormência tegumentar. O objetivo do estudo foi caracterizar biológica e quimicamente o extrato liofilizado das folhas (ELF), bem como avaliar quimicamente os calos produzidos dos explantes foliares. A atividade antioxidante in vitro, foi verificada pela capacidade de seqüestrar o radical DPPH, sendo realizado também o teste do poder redutor do ELF e frações. A atividade anti-inflamatória foi avaliada no modelo de edema de pata e tecido granulomatoso comparando os resultados com os grupos controle. A atividade antimicrobiana in vitro foi testada contra Staphylococcus aureus (ATCC 6538); Escherichia coli (ATCC 25922); Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853); Salmonella tiphy (ATCC 14028); Proteus mirabilis (ATCC 25933); Micrococcus luteus (ATCC 9341), Bacillus cereus (ATCC 11778); Bacillus subtilis (ATCC 6633); Candida albicans (ATCC 10231), Saccharomyces cerevisae (ATCC 2601), utilizando a técnica de difusão em Agar. A caracterização dos constituintes químicos foi obtida através de HPLC-DAD e a determinação quantitativa dos principais metabólitos através de reações colorimétricas de folin-ciocalteau para fenóis totais, reação com AlCl3 para flavonóides e precipitação de proteínas para taninos. O ELF de Byrsonima intermedia, frações e calos apresentaram o mesmo perfil cromatográfico, constituído por catequinas e flavonóides. As amostras apresentaram atividade antioxidante, que pode ter relação direta com a presença destes compostos, tanto para os extratos, como para as frações acetato de etíla, butanólica, e aquosa que promoveram uma redução do edema das patas dos ratos nos grupos tratados, em relação aos grupos controles. Observou-se também uma redução considerável na formação na formação do tecido granulomatoso, e atividade antimicrobiana. Os microrganismos Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Micrococus luteus, Candida albicans e Sacharomyces cerevisae mostraram-se sensíveis. O extrato de folhas de Byrsonima intermedia possui propriedades antioxidante, anti-inflamatória e antimicrobiana. / Studies gone back to identification of plants with present healing properties in the Savannah they are still few, mainly when compared your great diversity and the area that they occupy Byrsonima intermedia A. Juss., it is a present bush in the Savannah Brazilian, belonging the family Malpighiaceae, very used by the place population as an antiseptic, antimicrobial, anti-hemorrhagic, healing and anti-inflammatory, febrifuge and astringent in diarrhea and dysentery. However they are plants that don't present enough studies so that they can be used in a rational way. Your populary use feels through the peels of the stem, what takes to the extraction. One of the problems that have been limiting the wide use of this species is the production of seedlings, because your seeds present tegument dormancy. The objective of the study was to characterize biological and chemically the extract lyophilized of the leaves (ELF), as well as to evaluate the produced calluses of the explants chemically foliate. The activity antioxidant in vitro, it was verified by the capacity to kidnap the radical DPPH, being also accomplished the test of the power reducer of ELF and fractions. The activity anti-inflammatory was evaluated in the model of paw edema and woven granulomatous tissue comparing the results with the group’s control. The activity antimicrobial in vitro was tested against Staphylococcus aureus (ATCC 6538); Escherichia coli (ATCC 25922); Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853); Salmonella tiphy (ATCC 14028); Proteus mirabilis (ATCC 25933); Micrococcus luteus (ATCC 9341), Bacillus cereus (ATCC 11778); Bacillus subtilis (ATCC 6633); Candida albicans (ATCC 10231), Saccharomyces cerevisae (ATCC 2601), using the diffusion technique in Agar. The chemical representatives' characterization was obtained through HPLC-DAD and the quantitative determination of the principal metabolites through s folin-ciocalteau colorimetric reactions for total phenols, reaction with FeCl3 for flavonoids and precipitation of proteins for tannins. ELF of Byrsonima intermedia, fractions and calluses presented the same profile chromatographic, constituted by catechins and flavonoids. The samples presented antioxidant activity, that can have direct relationship with the presence of these composed, so much for the extracts, as for the fractions etily acetate, butanolic, and aqueous that they promoted a reduction of the edema of the paws of the mice in the treated groups, in relation to the group’s controls. It was also observed a considerable reduction in the formation in the formation of the granulomatous tissue, and activity antimicrobial. The microorganisms Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Micrococus luteus, Candida albicans and Sacharomyces cerevisae were shown sensitive. The extract of leaves of Byrsonima intermedia possesses properties antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial.

Nas últimas décadas, a produção de carne de frango vem se intensificando por expressivos avanços tecnológicos. Nutricionalmente, os promotores de crescimento antimicrobianos (antibióticos e quimioterápicos) foram essenciais, beneficiando o desempenho e a eficiência alimentar, quando utilizados como aditivos nas dietas, em doses subterapêuticas. Apesar da comprovada contribuição no desempenho das aves, os antibióticos promotores de crescimento passaram a ser vistos como fatores de risco para a saúde humana, devido ao potencial desenvolvimento da resistência bacteriana cruzada em humanos. Recentemente, têm sido desenvolvidas diversas alternativas aos antibióticos promotores de crescimento, incluindo probióticos, prebióticos, ácidos orgânicos, enzimas e extratos vegetais. Seguindo essa tendência, este estudo teve o objetivo de avaliar a eficácia do uso de extratos vegetais como alternativas aos antimicrobianos promotores de crescimento em dietas de frangos de corte. Foram realizados dois experimentos com frangos de corte para avaliar os efeitos de diferentes extratos vegetais no desempenho, na energia metabolizável da dieta e na morfometria dos órgãos. O experimento de desempenho envolveu 1200 frangos de corte machos criados em galpão experimental no período de 1 a 42 dias de idade, separados em grupos de 40 aves por boxe. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, sendo seis tratamentos e cinco repetições. O ensaio de metabolismo contou com 96 frangos machos em crescimento alojados em gaiolas metabólicas para coleta total de excretas, foram seis tratamentos e quatro repetições em delineamento interiramente casualizado. Ambos os experimentos receberam os mesmos tratamentos: dieta controle (DC); DC + 10 ppm de Avilamicina; DC + 1000 ppm de extrato de orégano; DC + 1000 ppm de extrato de cravo; DC + 1000 ppm de extrato de canela e DC + 1000 ppm de extrato de pimenta vermelha. Os produtos à base de extratos vegetais consistiram de microencapsulados contendo 20% do óleo essencial. As variáveis determinadas foram: peso vivo, ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, mortalidade, energia metabolizável aparente (EMAn) das dietas e peso relativo dos órgãos. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey. Não foi possível observar diferenças significativas (P>0.05) entre os tratamentos propostos para as variáveis de desempenho analisadas em todo o período de criação das aves. Da mesma maneira, a suplementação dos extratos nas dietas não interferiu (P>0.05) nos valores de EMAn das mesmas. A morfometria dos órgãos, em geral, também não foi alterada pela utilização dos extratos vegetais. Pôde ser observado que, os animais que receberam ração controle apresentaram maior peso relativo do fígado em relação aos demais tratamentos, diferindo significativamente (P<0.05) das aves alimentadas com a dieta suplementada com extrato de pimenta, que foi o menor valor observado. / Broiler meat production has experienced expressive technological improvements in the last decades. Nutritionally, the antimicrobial growth promoters (antibiotics and chemotherapeutics) contributed to that, when utilized as feed additives. These antimicrobials are very effective in performance improvement, but there are human health risks associated to their use because of the possibility of development of bacterial cross resistance. In recent years, several alternatives to the antibiotic growth promoters have been proposed including probiotics, prebiotics, organic acids, enzymes and plant extracts. In this context, the objective of the present study was to evaluate the efficacy of plant extracts as alternative growth promoters to the antibiotics as feed additives in chicken diets. Two experiments were conducted to determine the effects of different plant on the metabolizable energy of the diet and performance and organ morphometry of broiler chickens. The performance trial involved 1,200 male chicks raised from 1 to 42 days of age, in groups of 40 birds per pen, in a experimental poultry house. A randomized complete block design, with 6 treatments and 5 blocks, was used. In the metabolism trial, 96 chickens in the grower period were allotted to battery cages and total excreta collection was conducted with 6 treatments and 4 replicates in a completely randomized design. The treatments for both experiments were: Corn-soybean meal control diet (C); C + 10 ppm Avilamycin; C + 1,000 ppm oregano extract; C + 1,000 ppm clove extract; C + 1,000 ppm cinnamon extract; C + 1,000 ppm red pepper extract. The plant extract products added consisted of microencapsulated preparations containing 20% essential oil. The variables evaluated were liveweight, weight gain, feed intake, feed conversion, mortality, apparent metabolizable energy (AMEn) of the diets and organ weights. The results were statistically analyzed by ANOVA and means compared using Tukey&#39;s test. It was not detected any significant (P>0.05) difference among the treatments for the performance variables of the chickens along the growth period. Likewise, the plant extracts supplementation did not affect the AMEn of the diets (P>0.05). Organ morphometry was also, in general, not influenced by the additives. The only significant effect was a higher liver relative weight of the control birds (P<0.05) compared to the red pepper fed birds.

Foram realizados estudos do processo de extração de bromelina de caules de abacaxizeiro Ananás comosus (L.) Merr. cultivar Cayenne, com a finalidade de avaliar o efeito da temperatura de filtração do extrato, da adição de ativadores e de agentes precipitantes sobre a estabilidade da atividade proteolítica e no balanço material. A filtração de extratos a 20, 30, 40, 50 e 60°C, promoveu gradual elevação da atividade proteolítica para as temperaturas ate 50°C e redução a 60°C. A atividade proteolítica foi determinada em Unidades Kunitz. A adição de agentes reconhecidamente ativadores de enzimas proteolíticas como benzoato de sódio, cloridrato de cisteina e edetato dissódico aos extratos filtrados em diferentes temperaturas, promoveu elevação da atividade enzimática, demonstrando um efeito somatório com a temperatura. 0 extrato filtrado a 50°C, contendo ativadores, manteve-se estável durante 60 dias, quando armazenado a 5 e 20°C. 0 balanço material mostrou-se superavitário quando se precipitou bromelina por sulfato de amônio, de extrato filtrado a 40°C, contendo benzoato de sódio, cloridrato de cisteina e edetato dissódico. A acetona demonstrou menor eficiência que o sulfato de amônio, em relação ao balanço material. 0 estudo de estabilidade nas temperaturas de 5, 20, 30 e 40°C, durante 90 dias, das amostras de bromelina obtidas através do inter-relacionamento dos fatores temperatura, ativadores e precipitantes, revelou resultados mais favoráveis na amostra preparada a partir de extrato filtrado a 40°C, contendo benzoato de sódio, cloridrato de cisteina e edetato dissódico, e precipitado por sulfato de amônio. A performance conseguida na ativação e estabilização do extrato e no balanço material não foi ratificada em relação a estabilidade da bromelina em pó. A bromelina em pó, sequramente, necessita de estabilizadores para consolidar as vantagens comprovadas no balanço material, na ativação e estabilização do extrato. / Studies were made on the extraction process of bromelain obtained from the stem of pineapple plant Ananas comosus (L.) Merr. variety Cayenne, with the purpose to evaluate the effect of temperature of the filtration extract, addition of activators and of precipitants agents upon the stability of the proteolytic activity and upon the material balance. The filtration of the extracts at 20, 30, 40, 50 and 60°C results in a gradual increase in the proteolytic activity of the extract till 50°C and a reduction at 60°C. The proteolytic activity was determined in Kunitz units.The addition of commons agents, proteolytic activators like sodium benzoate, cysteine hydrochloride and sodium edetate to the filtrated extracts of stem pineapple at different temperatures promote one elevation of the activity showing an addictive effect with the temperature. The filtrated extract at 50°C and with activators was stable for 60 days when stored at 5 and 20°C.The material balance showed a superavit when the precipitation of bromelain was made by ammonium sulphate in relation to others filtrated at 40°C, obtained with sodium benzoate, cysteine hydrochloride and sodium edetate.The acetone showed less efficiency than the ammonium sulphate in relation to the material balance. The stability study of the bromelain at the temperature of 5, 20, 30 and 40°C during a period of 90 days and obtained through the interrelationship of factors like temperature, activators and precipitants showed best results to bromelain sample prepared from the filtrated extract at 40°C with sodium benzoate, cysteine hydrochloride and sodium edetate and precipitated with ammonium sulphate. The performance related to the activation, stabilization and in the material balance was not confirmed in relation to the stability of the bromelain powder. The bromelain powder, certainly needs stabilizers to consolidate the advantages showed in the material balance in the activation and stabilization of pineapple extract.