Orientador: Fabíola Freitas de Paula Lopes / Banca: José Antônio Visintin / Banca: Marcelo Fábio Gouvia Nogueira / Resumo: As alterações no microambiente do trato reprodutivo comprometem a competência oocitária e o desenvolvimento embrionário pré-implantacional em bovinos. Vacas Bos indicus apresentam adaptações fenotípicas e genotípicas conferindo maior resistência e tolerância à temperatura elevada quando comparadas as vacas Bos taurus, que sofrem redução nos índices de prenhez durante os meses quentes do ano. Esta infertilidade causada pelo estresse térmico é um problema de ordem multifatorial, entretanto já foi demonstrado que o oócito e embrião são extremamente susceptíveis aos efeitos deletérios da temperatura elevada. Os danos celulares desencadeados pela temperatura elevada podem ser manipulados pelo fator de crescimento semelhante à insulina-I (IGF-I), que além de minimizar a morte celular espontânea, resgata células que já iniciaram apoptose induzida por diferentes agentes ou estresses. A primeira etapa deste projeto visou avaliar o efeito dose resposta do IGF-I durante a maturação in vitro (MIV) em meio quimicamente não definido (pré-experimento 1: meio MIV - 10% de soro fetal bovino) e semidefinido (pré-experimento 2: meio MIV - 6 mg/mL de albumina sérica bovina) na competência de desenvolvimento de oócitos bovinos. Para tanto, complexos cumulus-oócito (CCOs) de vacas (mestiças Bos indicus) oriundas de abatedouro foram maturados in vitro em meio MIV não definido ou semidefinido suplementado com 0 (controle veículo), 6,25; 12,5; 25; 50; 100 ou 200 ng/mL de IGF-I por 22-24 h. Em seguida os oócitos foram fecundados (FIV) e cultivados in vitro (CIV). A adição de 25 ng/mL de IGF-I no meio MIV semidefinido ou não definido aumentou a porcentagem de oócitos clivados no dia 3 e a taxa de blastocisto no dia 8 após a fecundação. Dessa forma, a dose de 25 ng/mL de IGF-I foi utilizada na segunda etapa deste projeto, cujo objetivo foi avaliar o papel do IGF-I na competência de desenvolvimento de ... / Abstract: Microenvironmental alterations on reproductive tract compromise oocyte competence and pre-implicational embryo development in bovine. This fact is well characterized in animals exposed to heat stress. Bos indicus have fenotypic and genotypic adaptations which confers a higher tolerance to high temperatures compared with Bos taurus, suffering a reduction in the pregnancy rates during the hot months. This infertility caused by heat stress is a multifactorial problem, however it has been shown that oocyte and embryo are very susceptible to deleterious effects of high temperature. The cellular damage induced by high temperature could be manipulated by insulin-like growth factor I (IGF-I), which besides minimizing the spontaneous cell death, IGF-I rescue cells which have already initiated the apoptosis induced by different agents or stresses. The first step of this project aimed to evaluate dose-response effect of IGF-I during the maturation in vitro (MIV) in a non-defined medium (pre-experiment 1: MIV - 10% of bovine fetal serum) and semi-defined (preexperiment 2: MIV - 6 mg/mL of bovine albumin serum) in competence of bovine oocytes. Therefore, cumulus-oocyte complexes (CCOs) obtained of cows (Bos indicus crossbreed) from a slaughterhouse were matured in vitro in non-defined and semidefined MIV medium supplemented with 0 (vehicle control), 6,25; 12,5; 25; 50; 100 or 200 ng/mL of IGF-I for 22-24 h. After, oocytes were fertilized (FIV) and cultured in vitro (CIV). The adition of 25 ng/ml of IGF-I on non-defined and semi-defined MIV medium increased porcentage of cleavage on day 3 and blastocysts rate in day 8 after fertilization. In this way, 25 ng/ml IGF-I was used on second step of this experiment, which objective was to evaluate the role of IGF-I on oocyte competence of oocytes collected from Bos indicus - Nelore (NEL; n= 6) and Bos taurus-Holstein (HPB; n= 6) exposed to heat stress. Therefore, cows adapted ... / Mestre

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Coorientador: Naiara Zoccal Saraiva / Banca: César Roberto Esper / Banca: Simone Cristina Méo Niciura / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a influência do fluido folicular (FF) e da proteína recombinante humana GDF9 adicionados ao meio de maturação sobre a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro. Foram realizados três experimentos utilizando o meio TCM199 como meio básico de maturação. No primeiro experimento, os oócitos foram maturados em cinco diferentes meios (0%, 25%, 50%, 75% ou 100% de FF) em quatro tempos de maturação (22, 24, 26 ou 28 h). No segundo experimento, os oócitos foram maturados nos mesmos meios utilizados no primeiro experimento e fecundados em três diferentes tempos (24, 26 ou 28 h). No terceiro experimento, foram utilizados dois meios: controle (sem FF) ou com 25% de FF e quatro níveis de suplementação (0, 25, 100 ou 200 ng/mL) com GDF9. O FF promoveu retardo da progressão meiótica, afetando a maturação nuclear e a migração de grânulos corticais para a periferia dos oócitos. O FF em altas concentrações influenciou negativamente as taxas de clivagem e de blastocisto. O GDF9, com (25%) ou sem FF, não influenciou as taxas de clivagem e de blastocisto, no entanto, interferiu positivamente sobre o percentual de embriões considerados superiores. O percentual mais elevado (82,22%) de embriões classificados como superiores foi obtido com o uso de 200 ng de GDF9 em meio de maturação acrescido de 25% de FF. Em conclusão, a adição do fluido folicular (75% e 100%) ao meio de maturação in vitro retarda a progressão meiótica, sincronizando a maturação nuclear com a citoplasmática e a suplementação do meio de maturação com proteína recombinante humana GDF9 melhora a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro, baseando-se na avaliação da proporção do número de células da massa celular interna (MCI) em relação ao número total de células / Abstract: This study aimed to evaluate the effects of follicular fluid (FF) and recombinant human GDF9 added to the maturation media on the quality of in vitro produced bovine embryos. Three experiments using TCM199 medium as basic maturation media were performed. In the first experiment oocytes were matured in five different media (0%, 25%, 50%, 75% or 100% of FF) during four maturation times (22, 24, 26 or 28 h). In the second experiment, the oocytes were matured in the same five media used in the first experiment and fertilized at three different times (24, 26 or 28 h). In the third experiment were used two media: control (without FF) or with 25% FF combined with four levels of supplementation (0, 25, 100 or 200ng/mL) with GDF9. The FF promoted delay of the meiotic progression, affecting nuclear maturation and cortical granules migration to the oocyte periphery. In addition FF influenced the cleavage and blastocyst rates. GDF9, without or added to FF did not affect the cleavage and blastocyst rates, however, a positive influence on the percentage of embryos considered superior was observed. The highest percentage (82.22%) of embryos considered superior was obtained with maturation media added with 25% of FF and supplemented with 200 ng of GDF9. In conclusion, addition follicular fluid (75% and 100%) to the in vitro maturation media delays meiotic progression, synchronizing nuclear to cytoplasmic maturation, and supplementation of maturation media with recombinant human GDF9 improves the quality of bovine embryos in vitro produced, based on inner cell mass cells (ICM) proportion, relative to the total cell number / Mestre

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:38:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 olga.pdf: 1375254 bytes, checksum: 3324d73a6b00929f314affe8fbb627b4 (MD5) Previous issue date: 2012-08-20 / A água residuária da suinocultura fornece nutrientes para as culturas agrícolas, diminuindo os custos de produção. Assim, o objetivo foi encontrar qual a dose de água residuária da suinocultura mais apropriada, ambientalmente e agronomicamente para fertilizar culturas de importância econômica mundial: soja, milho e aveia. O experimento foi conduzido em esquema fatorial (4x2) com três repetições totalizando vinte e quatro lisímetros de drenagem, nos quais foram aplicados água residuária nas doses de 0, 100, 200 e 300 m³ ha-1 na ausência ou presença de adubação mineral. Foram usadas técnicas estatísticas multivariadas (PCA, PERMANOVA e CLUSTER), avaliando a longo prazo e simultaneamente o sistema, solo-água-planta. As doses mais recomendadas são: para a cultura da soja a de 100 m3 ha-1 isolada da adubação mineral. Para as culturas de milho e aveia a dose de 100 m3 ha-1 associada com a adubação mineral.

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o benefício da substituição do soro fetal bovino (SFB) pelo fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-1) durante a maturação in vitro (MIV) ou cultivo in vitro (CIV), sobre qualidade embrionária e expressão de genes em embriões pré- e pós-compactação. Delineamento experimental foi fatorial 3 x 3 (três suplementos de MIV e três de CIV), com 9 grupos experimentais. Foram realizadas 20 réplicas (oócitos ≈ 400/grupo). Complexos cúmulus-oócito (COCs) graus I e II foram maturados in vitro com a adição de 10% de SFB (SFB), ou 3 mg/mL polivinil-álcool (PVA), ou PVA + 100 ng/mL de IGF-1 (IGF) a 38,5 ºC em 5% de CO2 em ar por 22 a 24 horas. Foram fertilizados e incubados durante 18 horas. Os zigotos foram cultivados com a adição de: 2,5% de SFB (SFB), ou 3 mg/mL de PVA (PVA), ou PVA + 100 ng/mL de IGF-1 (IGF) por sete dias a 38,5ºC em 5% de CO2 em ar. As taxas de clivagem e blastocisto foram avaliadas após 48 e 168 horas de cultivo, respectivamente. A técnica simplificada de coloração diferencial de células da massa celular interna (MCI) e trofoectoderma (TE) foi utilizada para avaliar a distribuição celular de blastocistos (n = 155) e a técnica de TUNEL para avaliação do índice de apoptose (n = 207). Concentrações de glicose e lactato obtidas do meio MIV utilizaram-se para analisar o metabolismo de glicose. mRNA foi extraído de embriões de 6 – 8 células colhidos após 66 horas post-inseminação (4 pools de 15 embriões por grupo) e d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-29Bitstream added on 2014-08-13T18:00:52Z : No. of bitstreams: 1 000753005.pdf: 2398846 bytes, checksum: 88a9bdc09aaab4eb0166b0e572c83bb7 (MD5) / As alterações no microambiente do trato reprodutivo comprometem a competência oocitária e o desenvolvimento embrionário pré-implantacional em bovinos. Vacas Bos indicus apresentam adaptações fenotípicas e genotípicas conferindo maior resistência e tolerância à temperatura elevada quando comparadas as vacas Bos taurus, que sofrem redução nos índices de prenhez durante os meses quentes do ano. Esta infertilidade causada pelo estresse térmico é um problema de ordem multifatorial, entretanto já foi demonstrado que o oócito e embrião são extremamente susceptíveis aos efeitos deletérios da temperatura elevada. Os danos celulares desencadeados pela temperatura elevada podem ser manipulados pelo fator de crescimento semelhante à insulina-I (IGF-I), que além de minimizar a morte celular espontânea, resgata células que já iniciaram apoptose induzida por diferentes agentes ou estresses. A primeira etapa deste projeto visou avaliar o efeito dose resposta do IGF-I durante a maturação in vitro (MIV) em meio quimicamente não definido (pré-experimento 1: meio MIV - 10% de soro fetal bovino) e semidefinido (pré-experimento 2: meio MIV - 6 mg/mL de albumina sérica bovina) na competência de desenvolvimento de oócitos bovinos. Para tanto, complexos cumulus-oócito (CCOs) de vacas (mestiças Bos indicus) oriundas de abatedouro foram maturados in vitro em meio MIV não definido ou semidefinido suplementado com 0 (controle veículo), 6,25; 12,5; 25; 50; 100 ou 200 ng/mL de IGF-I por 22-24 h. Em seguida os oócitos foram fecundados (FIV) e cultivados in vitro (CIV). A adição de 25 ng/mL de IGF-I no meio MIV semidefinido ou não definido aumentou a porcentagem de oócitos clivados no dia 3 e a taxa de blastocisto no dia 8 após a fecundação. Dessa forma, a dose de 25 ng/mL de IGF-I foi utilizada na segunda etapa deste projeto, cujo objetivo foi avaliar o papel do IGF-I na competência de desenvolvimento de ... / Microenvironmental alterations on reproductive tract compromise oocyte competence and pre-implicational embryo development in bovine. This fact is well characterized in animals exposed to heat stress. Bos indicus have fenotypic and genotypic adaptations which confers a higher tolerance to high temperatures compared with Bos taurus, suffering a reduction in the pregnancy rates during the hot months. This infertility caused by heat stress is a multifactorial problem, however it has been shown that oocyte and embryo are very susceptible to deleterious effects of high temperature. The cellular damage induced by high temperature could be manipulated by insulin-like growth factor I (IGF-I), which besides minimizing the spontaneous cell death, IGF-I rescue cells which have already initiated the apoptosis induced by different agents or stresses. The first step of this project aimed to evaluate dose-response effect of IGF-I during the maturation in vitro (MIV) in a non-defined medium (pre-experiment 1: MIV - 10% of bovine fetal serum) and semi-defined (preexperiment 2: MIV - 6 mg/mL of bovine albumin serum) in competence of bovine oocytes. Therefore, cumulus-oocyte complexes (CCOs) obtained of cows (Bos indicus crossbreed) from a slaughterhouse were matured in vitro in non-defined and semidefined MIV medium supplemented with 0 (vehicle control), 6,25; 12,5; 25; 50; 100 or 200 ng/mL of IGF-I for 22-24 h. After, oocytes were fertilized (FIV) and cultured in vitro (CIV). The adition of 25 ng/ml of IGF-I on non-defined and semi-defined MIV medium increased porcentage of cleavage on day 3 and blastocysts rate in day 8 after fertilization. In this way, 25 ng/ml IGF-I was used on second step of this experiment, which objective was to evaluate the role of IGF-I on oocyte competence of oocytes collected from Bos indicus – Nelore (NEL; n= 6) and Bos taurus-Holstein (HPB; n= 6) exposed to heat stress. Therefore, cows adapted ...

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000444693-Texto+Completo-0.pdf: 339452 bytes, checksum: ef9dfaf2d55534b68964afd3bb92e166 (MD5) Previous issue date: 2012 / The aim of this study was to check if there is a predictive relationship of measured serum levels of anti-Mullerian hormone (AMH), antral follicle count (AFC) and ovarian volume with the results of IVF. We conducted a prospective study between January 2010 and March 2012 with women aged 35 or more who underwent IVF. The levels of AMH, AFC and ovarian volume were correlated with response to ovarian hyperstimulation, with rates of fertilization, with embryo quality and pregnancy rates. We evaluated 40 patients with a median age of 39 years old. There was a significant direct correlation between the levels of AMH and the number of follicles larger than 14 mm (rS = 0. 81 and P < 0. 001). The same happened to the AFC (rS = 0. 69 and P < 0. 001). This correlation was not significant when evaluated the ovarian volume. AMH, AFC and ovarian volume did not show a statistically significant correlation with rates of fertilization, with embryo quality or with pregnancy rates. In predicting good or poor response, AMH and AFC showed a high positive predictive value (100% for the AMH and 87% for AFC, using a cutoff of 0. 9 ng/ml and 7 follicles respectively, values established by ROC curve). We conclude from this study that AMH and AFC can be used as predictors of response to ovarian hyperstimulation in IVF, but they are not related to embryo quality, fertilization rates or pregnancy. / O objetivo deste estudo foi verificar se existe relação preditiva da medida do nível sérico do hormônio antimülleriano (HAM), da contagem de folículos antrais (CFA) e do volume ovariano com os resultados de FIV. Realizou-se um estudo prospectivo no período de janeiro de 2010 a março de 2012 com mulheres de 35 anos ou mais que realizaram FIV. Os níveis do HAM, CFA e volume ovariano foram correlacionados com resposta à hiperestimulação ovariana, com as taxas de fertilização, com a qualidade dos embriões e com os índices de gestação. Foram avaliadas 40 pacientes com uma mediana de idade de 39 anos. Observou-se uma correlação direta significativa entre os níveis do HAM e o número de folículos maiores de 14 mm (rS = 0,81 e P < 0,001), ocorrendo o mesmo com a CFA (rS = 0,69 e P < 0,001). Tal correlação não foi significativa quando avaliado o volume ovariano. HAM, CFA e volume ovariano não apresentaram uma correlação estatisticamente significativa com as taxas de fertilização, com a qualidade embrionária, nem com os índices gestação. Na predição de boa ou má resposta, HAM e CFA apresentaram um alto valor preditivo positivo (100% para o HAM e 87% para a CFA, usando um ponto de corte de 0,9 ng/ml e 7 folículos respectivamente, valores estabelecidos pela curva ROC). Concluímos, com o estudo, que HAM e CFA podem ser utilizados como preditores da resposta à hiperestimulação ovariana em FIV; porém, não estão relacionados à qualidade embrionária, taxas de fertilização ou gestação.

A fertilização tem proporcionado aumento de 30 a 50% da produtividade dos povoamentos de eucalipto, e tem no fósforo (P) um dos principais nutrientes responsáveis por estas respostas. Ambientes tropicais altamente intemperizados diminuem a disponibilidade do P no solo em função das reações de adsorção com os minerais de argila e precipitação com os cátions Fe, Al e Ca. O manejo adequado da fertilização fosfatada contribui para a otimização dos custos inerentes à atividade de fertilização e para manutenção da competitividade técnicofinanceira das plantações florestais. Diversas são as opções de fornecimento de P às plantas. Em geral, as fontes fosfatadas distinguem-se pela concentração, forma e solubilidade do P, mas apresentam a menor taxa de recuperação pelas plantas entre os macronutrientes. Novas tecnologias de fertilizantes fosfatados estão sendo desenvolvidas visando aumentar esta eficiência de utilização, as quais necessitam de validação e comprovação dos seus efeitos em condições reais de crescimento do povoamento. Uma alternativa para aumentar a eficiência do P é a complexação deste com substâncias húmicas (complexo P-metal-SH), pois podem diminuir os processos de adsorção e possibilitar o maior aproveitamento do nutriente. Constatou-se que é possível obter crescimento satisfatório do povoamento de Eucalyptus grandis apenas com a utilização de fontes fosfatadas totalmente solúveis, durante os dois primeiros anos de crescimento. Estas fontes tiveram efeito benéfico na sanidade e na uniformidade do povoamento. A utilização do fosfato natural reativo proporcionou comportamentos distintos no acúmulo de P nas plantas. Em condições de maior disponibilidade hídrica no solo, houve maior absorção de P pelas plantas relativamente ao período de maior limitação hídrica, fato que não foi observado com a utilização de fontes solúveis. O complexo P-metal-SH se mostrou uma alternativa tecnicamente viável, proporcionando oportunidades de ganho na eficiência de utilização do P e na produção de madeira. As respostas às diferentes fontes fosfatadas foram mais evidentes nos meses iniciais de crescimento do povoamento e diminuíram com o passar do tempo. Sob elevada deficiência hídrica do solo, esses efeitos foram menos pronunciados, em função da limitação do crescimento das plantas. Não houve grande diferença de crescimento das plantas em relação às fontes fosfatadas usadas, refletindo em oportunidades econômicas e logísticas que estão atreladas à escolha do fertilizante. Fontes de maior concentração possibilitam redução nos custos de formação do povoamento, em função da diminuição dos gastos com transporte e armazenamento, e permitem a obtenção de maiores rendimentos operacionais no momento da aplicação do fertilizante no campo. Contudo é preciso maior clareza quanto aos efeitos residuais da fertilização fosfatada, com suas diferentes fontes, nas rotações de cultivo subsequentes (em especial quanto ao manejo da talhadia). Estudos para entender a participação de formas de P presentes no solo não detectáveis nas análises de rotina (principalmente o P orgânico), no fornecimento de P às plantas, podem auxiliar os programas de fertilização a aperfeiçoar o uso do P em plantações florestais. / Fertilization has provided a 30-50% increase on Eucalyptus plantations productivity, and phosphorus (P) is one of the main nutrients responsible for this response. Highly weathered tropical soils reduce the availability of P applied during fertilization due to adsorption reactions with soil clay minerals and complexation with Fe, Al and Ca cations. Proper management of phosphate fertilization contributes to optimize the costs of fertilization and to maintain the economic competitiveness of forest plantations. There are several options for supplying P to plants. In general, phosphate sources differ in concentration, form and P solubility, however exhibit the lowest recovery rate by plants among the macronutrients. New technologies of phosphate fertilizers are being developed to increase this efficiency, which need validation and evidences of its effects on real growth conditions. An alternative to increase P efficiency is complexation with humic substances (P-metal-HS complex), once this method decreases the adsorption processes and provides a better utilization of this nutrient. This study showed a satisfactory growth of Eucalyptus grandis plantation only with the use of fully soluble phosphorus sources during the first two years of the stand. These sources positively affected healthiness and uniformity of the stand. The use of natural reactive phosphate caused different behaviors on P accumulation in plants. With high soil water availability there was a higher P uptake by plants compared with water limitation periods, this fact that was not observed when soluble sources were used. The P-metal-HS complex proved to be a technically feasible alternative to increase P utilization and wood production. The responses to the different phosphorus sources were more evident during the early months of forest growth and decreased over time. Under high soil water stress, these effects were lower due to plant growth limitation. There were no great differences on plant growth in relation to the phosphate sources used, what raises economic and logistic opportunities concerning to the fertilizer choice. Fertilizers with higher concentration sources decrease the initial costs of forest plantations as a result of reduction in expenses with transportation, storage and also due to better efficiency during fertilizer application on the field. However it is necessary to understand the residual effects of P fertilization, with different sources, on subsequent rotations (mainly regarding the coppice management). Studies to understand the participation of P forms in the soil, not detectable in routine analysis (especially organic P), on P supply to plants, can help fertilization programs to optimize the use of P in forest plantations.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-11Bitstream added on 2014-06-13T21:01:14Z : No. of bitstreams: 1 sanches_ea_dr_jabo.pdf: 2259186 bytes, checksum: 4918c5b558ff28f27002661990f850b9 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do trabalho foi de adaptar metodologias de análises espermáticas e aprimorar o processo de fertilização artificial e condições de estocagem de gametas de surubim-do-paraiba, Steindachneridion parahybae: espécie de peixe criticamente ameaçada de extinção. Para tanto, foram realizados quatro ensaios experimentais: (1) validação de método e avaliação dos parâmetros espermáticos por meio de software livre. (2) determinação da dose inseminante e volume de água empregados na fertilização artificial; (3) estocagem de ovócitos in natura em quatro temperaturas ao longo de 355 minutos; (4) estocagem do sêmen in natura em quatro temperaturas ao longo 112h. Observou-se que o método de análise espermática utilizando o software de código aberto ImageJ/plugin CASA é uma ferramenta eficiente, exata, objetiva e barata, além de possibilitar uma nova perspectiva de análises em peixes nativos. As configurações estabelecidas no presente trabalho poderão servir de base para novos trabalhos relacionados às análises espermáticas do surubim-do-paraíba, bem como de outras espécies. Verificou-se que a quantidade de espermatozóides e o volume de água interferem diretamente no procedimento de fertilização artificial, com melhores resultados na utilização de 5,5×106 espermatozóides ovócito-1 e 1,0mL de água g-1 de ovócitos. Foi observado que a estocagem de ovócitos e sêmen de forma in natura não é recomendada em ambientes com temperaturas superiores a 25ºC e inferiores a 15ºC. Temperaturas intermediárias (15-25ºC) possibilitam melhores condições e prolongam a qualidade dos gametas, entretanto, recomenda-se em procedimentos de fertilização artificial da espécie, a coleta do sêmen antes que os ovócitos. Os resultados obtidos no presente trabalho além de proporcionarem aumento das... / The aim was to adapt methodologies of sperm analysis and to improve the artificial fertilization process and gamete storage conditions of surubim-of-paraiba, Steindachneridion parahybae: critically endangered fish species. So that, four experimental tests were performed: (1) validation of method and evaluation of sperm parameters using free software. (2) determination of the inseminating dose and water volume used in artificial fertilization, (3) storage of fresh oocytes into four temperatures over 355 minutes, (4) storage of fresh semen into four temperatures over 112h. It was observed that the sperm analysis method using open source software ImageJ/plugin CASA is an effective tool, accurate, objective and inexpensive, besides enables a new perspective of the analysis on the native fish. The settings established in this study could serve as a basis for further work related at sperm analysis of surubim-do-paraiba and other species. It was found that sperm quantity and water volume interfere directly in the procedure of artificial fertilization, with improved results on usage of 5.5×106 spermatozoa oocyte-1 and 1.0 ml of water g-1 of oocyte. It was observed that the fresh oocytes and sperm storage is not recommended in environments with temperatures above 25ºC and below 15ºC. Intermediate temperatures (15-25ºC) enable better results and prolong the gametes quality, however, it is recommended in the artificial fertilization procedures the semen collection before the oocytes. The results obtained in this study providing increased rates of fertilization and hatching, besides to allow gametes optimization through of the utilization of controlled manner, and with satisfactory quality for more time after collection. Besides, these results provide a basis for future research, contributing to the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-17Bitstream added on 2014-06-13T19:40:11Z : No. of bitstreams: 1 favaro_egp_dr_jabo.pdf: 983800 bytes, checksum: 05601fed4d94756e0a8cf4f21dc4f9c0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo apresenta o papel do sedimento na qualidade da água durante as estações de chuva (fluxo contínuo) e seca (fluxo não contínuo) e balanço parcial de massa do nitrogênio e fósforo nos viveiros de criação extensiva de (Oreochromis niloticus) fertilizados com resíduos de alface. No fluxo contínuo, os valores de NH4, NO2 e NO3 aumentaram (p<0,05). Similarmente, os valores da matéria orgânica, nitrogênio e fósforo no sedimento aumentaram (p<0,05). No fluxo não contínuo, os valores do PO4, clorofila-a, pH, alcalinidade e oxigênio dissolvido aumentaram (p<0,05). O fluxo contínuo da água nos meses chuvosos aumentou a carga de partículas suspensas nos viveiros, reduziu a penetração de luz e promoveu a resuspensão do sedimento e a nitrificação na coluna da água. A re-suspensão prejudicou os processos de mineralização no sedimento, contudo a nitrificação causou o aumento do NO3 e redução do NO2. A menor sedimentação das partículas limitou o desenvolvimento fitoplanctônico. O fluxo não contínuo da água nos meses secos promoveu a sedimentação das partículas suspensas e mineralização da matéria orgânica no sedimento com correspondente liberação de nutrientes para a água. Adicionalmente, a aplicação dos resíduos de alface na taxa de 0,8 kg peso seco semana-1 favoreceu os processos de mineralização no sedimento e enriquecendo a atividade microbiana. Em média, as concentrações do nitrogênio inorgânico e fósforo total foram reduzidas 48,5% e 43,7% através dos viveiros (entrada-saída)... / The role of the sediment in water quality during the rainy (continuous flow) and dry (non-continuous flow) periods and partial equilibrium of nitrogen and phosphorus mass in extensive breeding pools for tilapia (Oreochromis niloticus), manured by lettuce wastes, is provided. NH4, NO2 and NO3 rates increased (p<0.05) during the continuous flow from 119.6 μg L-1, 12.8 μg L-1 1, from 132 μg L-1 to 120.5 μg L-1 , 15.7 μg L-1 ,174 μg L-1 Organic matter, nitrogen and phosphorus rates in the sediment increased similarly (p<0.05) from 105 μg L-1, 5%, 107 μg L-1 to 108 μg L-1, 7%, 108 μg L-1. In the case of non-continuous flow, PO4, chlorophyll-a, pH, alkalinity and dissolved oxygen rates increased (p<0.05) from 166 μg L-1; 359 mg L-1; 7; 82 mg L-1 and 5 mg L-1 to 178 μg L-1; 391 mg L-1; 7; 84 mg L-1 and 5 mg L-1, respectively. Water continuous flow during the rainy months increased the number of suspended particles in the breeding pools, decreased light penetration and triggered the re-suspension of sediment and nitrification in the water column. Although re-suspension jeopardized the mineralization processes in the sediment, nitrification caused an increase in NO3 and a decrease in NO2. Less sedimentation of particles restricted phytoplankton development. Intermittent water flow during the dry months caused sedimentation of suspended particles and the mineralization of organic matter in the sediment, coupled to a corresponding release of nutrients in the water. Further, the application of lettuce wastes at the rate employed were an asset to the mineralization processes in the sediment and enriched microbial activity. Concentrations of inorganic nitrogen and total phosphorus were at an average reduced by 48.5% and by 43.7% through the breeding pools (entrance-exit), respectively. Further, 82% of Nitrogen and 48% of Phosphorus provided to the fertilizer... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-04Bitstream added on 2015-04-09T12:48:24Z : No. of bitstreams: 1 000815814.pdf: 419662 bytes, checksum: b03fc09d9d326c880d6e914d837b278f (MD5) / Animais da raça Holandesa, criados nas regiões de clima temperado a quente apresentam baixa eficiência quanto ao número, qualidade e competência oocitária para a produção in vitro de embriões, em comparação às raças Zebuínas. Por outro lado o controle da onda folicular e a estimulação com FSH exógeno pode incrementar o número e melhorar a qualidade e competência oocitária para a produção embrionária. Com o objetivo comparativo sete novilhas, sete vacas não lactantes e sete vacas em lactação foram utilizadas em um delineamento em “crossover” foram submetidas a quatro tratamentos: T1 – Aspiração folicular ao acaso em dia aleatório do ciclo estral; T2 – Aspiração folicular dois dias após a remoção do folículo dominante; T3 - Aspiração folicular 24 horas após remoção do folículo dominante e estimulação com dose única de FSH (100 UI para novilhas e 200 UI para vacas não lactantes ou em lactação) vinte quatro horas antes da aspiração folicular; T4 – Aspiração folicular após estimulação e indução do pico de LH (inserção de implante de progestágeno, aspiração do folículo dominante e estimulação com FSH na dose de 250 UI para novilhas, 500 UI para vacas não lactantes e lactantes, subdividas em 8 doses decrescentes, indução de luteólise e retirada do implante 36 horas antes do GnRH e aspiração folicular 24 horas após a administração de GnRH). Não foi observada diferença estatística entre os tratamentos (P>0,05) quando foi avaliada a recuperação de oócitos, no entanto a categoria de novilhas obteve melhores resultados e apresentou diferença estatística (P<0,05) quando comparada com vacas lactantes e não lactantes, porém não foi observada diferença estatística entre as categorias vacas não lactantes ou vacas lactantes. Quando os oócitos viáveis foram avaliados, a categoria de novilhas apresentou melhor resultado e diferença significativa ... / Holstein cows, bred in temperate to hot climate have low efficiency on the number, quality and oocyte competence for in vitro production of embryos, compared to Zebu breeds. On the other hand the control of follicular wave and stimulation with exogenous FSH can increase the number and improve the quality and oocyte competence for embryo production. With the comparative goal seven heifers, seven non-lactating cows and seven lactating cows were used in a complete crossover were subjected to four treatments: T1 - Follicular Aspiration randomly at any time of the estrous cycle; T2 - Follicular Aspiration two days after removal of the dominant follicle; T3 - Follicular Aspiration 24 hours after removal of the dominant follicle and stimulation with single dose of FSH (100 IU to 200 IU for heifers and non-lactating cows or lactating) twenty four hours before follicular aspiration; T4 - Follicular Aspiration after stimulation and induction of the LH surge (progestagen implant insertion, aspiration of the dominant follicle and FSH stimulation at a dose of 250 IU to 500 IU for heifers and non-lactating and lactating cows, subdivided in 8 decreasing doses, induce luteolysis and removal of the implant 36 hours before of the GnRH and follicular aspiration 24 hours after GnRH administration). No statistical difference between treatments (P>0.05) was evaluated oocyte retrieval was observed, however category heifers achieved better results and statistical differences (P<0.05) compared with lactating cows and non-lactating, although no statistical difference between the categories of non-lactating cows and lactating cows was observed. When the viable oocytes were evaluated, the grade of heifers showed better results and significant difference (P <0.05) compared with lactating and non-lactating cows, and no significant difference was observed between non-lactating cows and lactating cows (P>0.05). In relation to treatments, treatment 1 (T1) differed ...