Além das características tecnológicas das bactérias lácticas para o processamento de alimentos fermentados, novas propriedades são requeridas, como a produção de bacteriocinas. Vários desses compostos protéicos possuem atividade antimicrobiana direcionada à patógenos e apresentam potencial de uso como bioconservadores naturais de alimentos. O objetivo desse trabalho foi avaliar a viabilidade de aplicação de cinco culturas lácticas produtoras de bacteriocinas como bioconservantes em alimentos. Avaliaram-se as propriedades de segurança e probióticas dessas culturas e determinaram-se os parâmetros de produção e purificação parcial das bacteriocinas, bem como os efeitos de fatores limitantes de crescimento (cloreto de sódio e nitrito). Os resultados demonstraram que essas linhagens não possuem atividade de enzimas indicadoras de patogenicidade (termonuclease, -hemolisinas e gelatinases). A tolerância às condições ácidas variou dependendo da linhagem. Lactobacillus plantarum CTC 368 e Enterococcus avium CTC 469 apresentaram maior tolerância a valores de pH 2,0 e 3,0. Lactococcus lactis subsp. cremoris CTC 204 e Enterococcus avium CTC 483 também apresentaram 100% de sobrevivência a pH 3,0 e, mesmo com uma diminuição da tolerância a pH 2,0, a sobrevivência foi cerca de 80%. Com relação à susceptibilidade aos sais de bile, observou-se que a viabilidade variou entre as linhagens em função da concentração e tempo de incubação. Enterococcus avium CTC 469 e Lactococcus lactis subsp. hordinae CTC 484 foram as mais tolerantes e apresentaram sobrevivência de 57% e 58%, respectivamente. As linhagens mostraram excelente sobrevivência tanto a baixos valores de pH, quanto às concentrações de sais biliares indicando potencial probiótico. As características de crescimento e de produção de bacteriocinas foram semelhantes para todas as linhagens e meios avaliados. A viabilidade aumentou durante o período de incubação e a produção de bacteriocinas mostrou uma cinética de metabólito primário. A suplementação do meio MRS com 1,0% de NaCl e 0,1% de NaNO2, não afetou o crescimento de Lc. lactis subsp. cremoris CTC 204, mas promoveu a redução da atividade da bacteriocina de 42,5% e 17,5%, respectivamente. O crescimento de Lactococcus lactis subsp. hordinae CTC 484 foi afetado com a adição de NaCl e NaNO2 ao meio APT, mas ainda reteve 50% da atividade bacteriocigênica. O espectro de atividade das bacteriocinas variou de acordo com a susceptibilidade da linhagem indicadora, a concentração ou atividade da bacteriocina, a viabilidade e/ou presença das células produtoras e os procedimentos de extração das bacteriocinas. Os resultados revelaram que as bacteriocinas de Lactococcus lactis subsp. cremoris CTC 204 e Lactococcus. lactis subsp. hordinae CTC 484 promoveram um efeito bactericida contra Staphylococcus aureus. Concluiu-se que essas duas culturas produtoras de bacteriocinas apresentam propriedades para utilização como bioconservantes em alimentos e que estudos mais aprofundados, relacionados com a purificação da bacteriocina e avaliação de seu uso em alimentos, devem ser realizados. / In addition to the technological characteristics of lactic bacteria for the processing of fermented foods, other properties need to be developed and explored, such as bacteriocin production. Several of these protein-based compounds have antimicrobial activities targeted towards pathogens and have a significant potential for use as natural biopreservatives in processed foods. The objective of this study was to evaluate the viability of using five bacteriocin-producing lactic cultures as biopreservatives in foods. The safety and probiotic properties of these cultures were evaluated, followed by the determination of bacteriocin production and purification parameters and the effect of growth-limiting factors (sodium chloride and nitrite). The results demonstrated that these strains do not show activity of marker enzymes of pathogenicity (thermonuclease, - hemolysins and gelatinases). Tolerance to acidic conditions varied depending on the specific strain. Lactobacillus plantarum CTC 368 and Enterococcus avium CTC 469 exhibited greater tolerance to pH values 2,0 and 3,0. Lactococcus lactis subsp. cremoris CTC 204 and En. avium CTC 483 also presented 100% survival at pH 3,0, and even with reduced tolerance at pH 2,0, the survival rate was 80%. Variation in susceptibility to bile salts was observed between the strains as a function of concentration and incubation time. En. avium CTC 469 and Lactococcus lactis subsp. hordinae CTC 484 were found to be the most tolerant, exhibiting survival rates of 57% and 58%, respectively. The strains demonstrated excellent survival not only at low pH values, but also at high bile salt concentrations, thereby indicating probiotic potential. The growth and bacteriocin-producing characteristics were similar for all the strains and culture media evaluated. Bacterial multiplication increased during the incubation period, while bacteriocin production displayed primary metabolite kinetics. The activity spectrum of the bacteriocins varied with the susceptibility of the indicator strain, the concentration or activity of the bacteriocin, the viability and/or presence of bacteriocinproducing cells and the bacteriocin extraction procedures. The results reveal that the bacteriocins produced by Lc. lactis subsp. cremoris CTC 204 and Lc. lactis subsp. hordinae CTC 484 exerted a bactericidal effect against Staphylococcus aureus. Supplementation of the MRS medium with 1,0% NaCl and 0,1% NaNO2, did not affect the growth of Lc. lactis subsp. cremoris CTC 204, but did reduce by 42,5% and 17,5% the activity of the bacteriocin, respectively. Growth of Lc. lactis subsp. hordinae CTC 484 was affected by the addition of NaCl and NaNO2 to the APT medium, but even so still exerted 50% of its bacteriocinogenic activity. It was concluded that Lc. lactis subsp. cremoris CTC 204 and Lc. lactis subsp. hordinae CTC 484 exhibited adequate properties for use as biopreservatives in foods and that more extensive studies related to the purification of bacteriocins and assessment of their use in foods should be conducted.

A demanda crescente por alimentos frescos tem incentivado o comércio de vegetais minimamente processados, que são disponibilizados já prontos para o consumo. No entanto, apesar de sanitizados, eles retêm a maioria de sua microbiota natural, inclusive patógenos: O armazenamento sob refrigeração favorece o crescimento de microrganismos psicrotrófilos, inclusive patogênicos como a Listeria monocytogenes. A ingestão de alimentos contaminados por L. monocytogenes pode representar um risco a gestantes e seus fetos, indivíduos com imunodeficiência adquirida e outras doenças que comprometam o sistema imunológico. Métodos alternativos de descontaminação que não empregam alta temperatura, como a irradiação, podem reduzir a população de microrganismos patogênicos e deteriorantes, sem causar alterações substanciais nas características sensoriais e fisico-químicas do alimento. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar o efeito da radiação gama sobre L. monocytogenes inoculada artificialmente em uma mistura de 4 variedades de alface minimamente processada (Americana, Crespa, Lisa e Crespa Roxa); avaliar seu efeito nas variedades das folhas de alface, em separado, através do teste sensorial de aceitação e determinar a vida de prateleira do vegetal através do teste sensorial de aceitação e de acompanhamento microbiológico. População de L. monocytogenes (7 log UFC/g de alface) foi inoculada em mistura das 4 variedades de alface, já citadas, e expostas a 0,3; 0,6; 0,9 e 1,2 kGy sob refrigeração. Os valores D10 para a L. monocytogenes em salada de alface minimamente processada e irradiada variaram de 0,18 a 0,21 kGy. A análise sensorial e acompanhamento microbiológico indicam que a vida de prateleira das diferentes variedades, quando armazenadas a 10 ºC, foi de 5 e 7 dias para a Americana irradiada e não irradiada, respectivamente; de 10 dias para as amostras não irradiada e irradiada da variedade Crespa; de 3 e 7 dias para a Lisa não irradiada e irradiada, respectivamente e de 4 dias e 5 dias para alface Crespa roxa não irradiada e irradiada, respectivamente. As amostras irradiadas foram mais estáveis microbiologicamente. O processo de irradiação mostrou ser factível para a melhora da inocuidade e qualidade desse alimento. / The increasing demand for fresh foods have stimulated the marketing of minimally processed vegetables. However, these products maintain most of their natural microbiota even after being sanitized, including pathogenic microorganisms. Refrigerated storage allows the growth of psycrotrophic microorganisms and among them the pathogen Listeria monocytogenes. The ingestion of food contaminated with L. monocytogenes may represent a risk to pregnant women and their fetuses and to immunocompromised people. Non-thermal alternative processes for food preservation, such as irradiation, can reduce pathogenic and spoilage microorganism populations without imparing substantial changes in sensory, physical or chemical attributes. The aims of this research were to evaluate the effect of gamma radiation on L. monocytogenes artificially inoculated on minimally processed lettuce, to evaluate its effect on lettuce leaves through acceptance sensory test and to determine the irradiated vegetable shelf life through sensory and microbiological tests. A mixture of 4 types of lettuce (Iceberg, Boston, Loose-leaf and Red loose-leaf) were artificially inoculated with L. monocytogenes (7 log UFC/g lettuce) and then exposed to 0.3; 0.6; 0.9 and 1.2 kGy, under refrigeration. The D10 values for L. monocytogenes varied from 0.18 to 0.21 kGy. Sensory and microbiological tests indicated that the shelf life of Iceberg lettuce stored at 7ºC was 5 and 7 days for the irradiated and non-irradiated samples, respectively, and for the irradiated and non-irradiated Loose-leaf lettuce samples were 10 days. For the non-irradiated Boston sample, the shelf life was 3 days and for the irradiated 7 days. Red loose-leaf showed 5 and 4 days of shelf lives for the irradiated and non-irradiated, respectively. Irradiated samples presented better microbiological quality than non-irradiated ones. The irradiation is feasible process to improve quality and safety of lettuce leaves.

The objective of this study was to evaluate the survival of non-O157:H7 STEC, Salmonella spp., and S. aureus in dry fermented sausages. Chorizo and Landjager sausages were inoculated with individual bacterial cocktails and stuffed into natural casings. Temperature, relative humidity, pH, and water activity were monitored through fermentation, drying, and storage. Bacterial counts were determined by serial dilution and plated in triplicates on selective media. Plates were incubated at 37°C for 24 hours and colony forming units per gram (CFU/g) were observed. Results of the first study validate that contaminated raw materials contribute to pathogen survival and background bacteria outcompeted the starter culture. The pH critical limit of < 5.3 was met but there was no pathogen inhibition. Results from the second study confirm that pH and water activity are not enough to eliminate pathogens when post processing interventions are not used. Critical pH (< 5.3) and water activity (< 0.85) limits were met, but pathogens still survived. In chorizo, non-O157:H7 was recovered through enrichments until the end of the study. In landjager, non-O157:H7 STEC and Salmonella were recovered through enrichments until the end of the study.The studies suggest that sausages produced without post processing interventions are a health risk to consumers.

The initial aim of this work was to evaluate processing conditions for extended shelf life (ESL) milk to have a shelf life at refrigeration temperature of 60 d. Milk was processed on a pilot-scale ultra-high-temperature processing plant and evaluated for microbial and sensory quality over 60 d at 7°C storage. Results of this study showed that lower process temperatures were preferable to minimize cooked flavors and that the minimum safe processing temperature was 134°C for 4 s as determined by the destruction of bacterial spores in the processed milk. Consumer preference panel results indicated that consumers preferred milk processed at 134°C for 4 s (those recommended in this study for ESL processing) to commercial UHT milk although there was a slight preference for pasteurized milk. The critical sensory characteristic of the processed milk was a cooked flavor, which decreased with lower processing temperature and shorter storage time; however, a significant increase in flavors that could be associated with lipolytic activity was also noted. This study highlighted deficiencies in existing methods for determining heat-stable bacterial products in thermal-processed foods. No rapid, sensitive assay for detection of heat-stable spores or lipases in milk exists. If such assays were available, it would allow processors to determine Lipase activity and bacterial spore counts before processing and direct raw milk with low spore counts and low lipolytic activity into long-shelf-life products. To this end, assays to rapidly quantitate spores and lipolytic activity in milk were developed. The lipase assay relies on the hydrolysis of p-nitrophenyl caprylate liberating a yellow color that is detected using reflectance colorimetry. The assay is sensitive to 5 mUnits/ml and is linearly correlated to spectrophotometry (r2 = 0.93) and release of titratable free fatty acids (r2 = 0.92 to 0.97). An immunocapture, enzyme-linked immunoassay coupled with a fluorescent detection system was developed for and resulted in a prototype spore assay using Bacillus stearothermophilus spores. This organism was selected because it is extremely heat resistant, is commonly found in milk, and is associated with spoilage of milk and milk products. The assay was able to quantitate spores down to 103 cfu/ml in milk and other products in about 1.5 h. Other detection limits could be set if needed.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-10Bitstream added on 2014-06-13T20:04:46Z : No. of bitstreams: 1 sigarini_co_dr_botfmvz.pdf: 424397 bytes, checksum: dc378b5bab7232e9336dc1e3596d48c9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O Brasil é um dos principais países produtores/exportadores e consumidores de carne de frango no mundo. A maioria das aves é criada tradicionalmente, porém uma parte já é produzida pelo método alternativo que preconiza o bem- estar das aves sem o uso de antibióticos, coccidiostásticos, promotores de crescimento e ração de origem animal. No entanto, devido à ausência de inibidores exógenos, bactérias patogênicas podem se disseminar sem restrição na granja, sendo levadas ao abatedouro, contaminando não só o ambiente de abate, mas também o produto destinado ao consumidor final. Uma destas bactérias, Listeria monocytogenes é um microrganismo ubíquo que provoca a listeriose, doença zoonótica grave que leva a aborto/natimortos, neuropatias, gastroenterites, principalmente em crianças e idosos. É portanto, de fundamental importância que conheçamos a prevalência desta bactéria da recepção das aves no abatedouro até o acondicionamento do produto final, para que possamos orientar com precisão os principais focos de contaminação. Assim, foram colhidas 230 amostras sendo estas, obtidas em ambientes, equipamentos, utensílios e em carcaças de frango em diferentes etapas de abate e processamento de frangos alternativos. As amostras foram analisadas pela técnica convencional de isolamento de L. monocytogenes e posterior confirmação por técnica molecular. De um total de 230 amostras analisadas, 12 foram confirmadas como L. monocytogenes, representando 5,21% do total de amostras colhidas em diferentes pontos do fluxograma de abate. Assim, do total de amostras positivas (12), apenas duas (3,33%) destas foram identificadas no produto final (cortes embalados). / Brazil is one of the major producers/exporters and consumers of chicken meat in the world. Chicken production has been mainly based on confinement systems, although many animals have been raised in alternative systems, which focuses animal welfare, antibiotic-free animal production, with no coccidiostatic drugs or growth promoters or food of animal origin. However the absence of exogenous inhibitors could potentially spread pathogenic bacteria to the farm and then to the slaughterhouse, contaminating not only the environment of slaughter, but also the final product. One of these bacteria, Listeria monocytogenes, is an ubiquitous pathogen which causes listeriosis, a severe zoonotic disease that leads to abortion/ stillbirth, neuropathy, gastroenteritis, mainly in children and elderly people.Therefore, the identification of sources of this bacterium in poultry slaughterhouses and in the final product is very important. A total of 230 samples were collected from the slaughterhouse environment, equipment, utensils and carcasses in different stages of slaughtering and chicken processing. Samples were analyzed using the conventional technique for isolation of L. monocytogenes. Confirmation was achieved using molecular technique. Only 12 out of 230 samples were positive for L. monocytogenes which represent 5.21% of the samples from this slaughterhouse. Only two samples (3.33%) from the final product were positive for this pathogen.

The fishes are foods very propitious to deterioration, for have the pH next to the neutrality, the water high activity and the elevated content of nutritious. For they reflect the contamination of the springs and to are excessively manipulated, without suffering no thermal treatment when used to prepare sushis and sashimis, represent potential risk of transmit alimentary origin diseases. Thus this search objective to evaluate the microbiological quality of sushis and sashimis commercialized in Maceió-Al, to alert the sanitary authorities and the consumers on the sanity conditions of these victuals. They were going collected 60 samples, being 30 (thirty) of sushis and 30 (thirty) of sashimis, commercialized in 05 (five) specialized restaurants and 05 (five) not specialized restaurants in japanese food, in which searched coliforms to 35ºC, coliforms to 45ºC, E. coli, Salmonella spp, S. aureus and B. cereus, according with analysis methods by APHA (2001) and FDA (2005). The results demonstrated isolation of all of microrganisms analyzed, indicating that the raw material is bad quality, it suffer imperfect manipulation or prepare and it is inadequate distribution in time or meals temperature. A total of 90% of the sushis and 93,33% of sashimis contained enumerations of coliformes to 45ºC, presence of Salmonella spp or countings of Sthapylococcus coagulase positive above of the certain standards by RDC n.º 12 of ANVISA (2001). Being thus, considering microrganisms pathogenic potential identified in the samples, it suggests that urgent measures, as the Production Good Practices implantation, be implemented in the sushis and sashimis productive process in the city of Maceio, so that the alimentary safety be guaranteed. / Os pescados são os alimentos muito propícios à deterioração, devido ao pH próximo à neutralidade, à alta atividade de água e ao elevado teor de nutrientes. Por refletirem a microbiota dos mananciais e serem excessivamente manipulados, sem sofrerem nenhum tratamento térmico quando usados para preparar sushis e sashimis, representam risco potencial de transmitir doenças de origem alimentar. Desta forma objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica de sushis e sashimis comercializados na cidade de Maceió-AL, para alertar as autoridades sanitárias e os consumidores sobre as condições de sanidade destes alimentos. Foram coletadas 60 amostras, sendo 30 (trinta) de sushis e 30 (trinta) de sashimis, comercializadas em 05 (cinco) restaurantes especializados e 05 (cinco) não-especializados em comida japonesa, nas quais se pesquisou coliformes a 35ºC, coliformes a 45ºC, E. coli, Salmonella spp, S. aureus e B. cereus, de acordo com métodos de análise determinados pela APHA (2001) e FDA (2005). Os resultados demonstraram isolamento de todos os microrganismos analisados, indicando má qualidade da matéria-prima, falhas durante manipulação ou preparo dos pratos e distribuição inadequada em tempo ou temperatura das refeições. Um total de 90% dos sushis e 93,33% dos sashimis continham altas enumerações de coliformes a 45ºC, presença de Salmonella spp ou contagens de Sthapylococcus coagulase positiva acima dos padrões determinados pela RDC n.º 12 da ANVISA (2001). Sendo assim, considerando o potencial patogênico dos microrganismos identificados nas amostras, sugere-se que medidas urgentes, como a implantação de Boas Práticas de Fabricação, sejam implementadas no processo produtivo de sushis e sashimis na cidade de Maceió, para que a segurança alimentar seja garantida.

Orientador: Germano Francisco Biondi / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Simone Carvalho Balian / Propôs-se colher e analisar amostras da merenda escolar, provenientes da Cozinha Piloto e de quatro pontos de distribuição, na cidade de Botucatu, SP. Objetivou-se avaliar o padrão higiênico-sanitário destas refeições, pesquisando os patógenos Salmonella spp, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. O padrão higiênico-sanitário dos utensílios envolvidos na distribuição da merenda e o padrão microbiológico presente nas mãos dos manipuladores envolvidos também foram avaliados mediante análises microbiológicas para bactérias aeróbicas mesófilas, S. aureus, coliformes totais e fecais. A metodologia utilizada para a detecção de Salmonella spp obedeceu às normas estabelecidas pela FDA, enquanto que para Staphylococcus aureus a metodologia seguiu os fundamentos da Instrução Normativa SDA Nº62, de 26 de agosto de 2003. A análise de Escherichia coli, bactérias mesofílicas e coliformes totais foi realizada através de método rápido (Petrifilm®). Visou avaliar também o grau de conhecimento e capacitação dos manipuladores de alimentos através de aplicação de inquérito de múltipla escolha, o qual abrangeu tópicos relativos à higiene pessoal, alimentar e ambiental adotadas por estes...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The effectiveness of the food's hygienic-sanitary control from the raw material until their handling, processment, and consumption may be responsible to avoid several reports of diseases transmitted for foods. In order to gather and analyze school meal samples prepared in the Kitchen Headquarter and from four distribution places of Botucatu city, SP, the aim of the present study was to estimate the hygienic-sanitary standard of these meals, looking for Salmonella spp, Staphylococcus aureus and Escherichia coli pathogens. The hygienic-sanitary standard of utensils used at the school meal distribution and the microbiological standard present in the food handlers were also estimated by microbiological analyses of mesophyllic aerobic bacteria, S. aureus and coliforms. The methodology used to detect Salmonella spp was the FDA one, while Staphylococcus aureus methodology obeyed the Normative Instruction SDA Nº62, from August 26th, 2003. Escherichia coli, mesophyllic bacteria's, and coliforms analyses were done by rapid test (Petrifilm®). The research also estimated the food handlersþ knowledge and capacity through a checklist. The results showed no development of Salmonella spp/25g, presence < 1,0 x 102 UFC/g of Staphylococcus aureus and < 1,0 x 101 UFC/g of Escherichia coli in all food samples analyzed; the presence of coliforms in swab's samples was not observed, while Staphylococcus spp was identified in some food handler's hands; a high number of mesophyllic aerobic bacteria in handþs swabs were also observed, but into utensilsþsamplers this number was considered normal. The absence of outbreak pathogens in the food samples shows the right preparation of them, but doesnþt exclude the possibility of fortuitous farther contaminations due to absence of food handler's information and correct trainmen...(Complete abstract, click electronic address below) / Mestre

Campylobacteriosis, in the current days, is recognized as the major cause of foodborne illness in many developed and developing countries. Among the Campylobacter species responsable for the infections, C. jejuni is responsable for 75% of the cases of human campilobacteriosis, as for it, it s considered as the major species involved on the registered cases. In this work, two experiments were conduced. In the first, the presence of C. jejuni and Campylobacter spp. in poultry farms of Rio Grande do Sul State in Brazil was investigated. Epidemiological data was obtained with the person encharged by the farms, and the data obtained was corelated with the levels of contamination of each property. In the second experiment, we investigated the contamination of cicken meat and giblets adquired in supermarkets in Santa Maria city of C. jejuni as well as the freezing effect on the contamination levels in this samples. For the first trial, 280 cloacal swabs were collected from four poultry farms. In the second experiment, 9 samples of heart, liver, gizzard and drumette, tottalizing 36 samples collected. A portion of each sample was processed freshly, while the rest was freezed (-18ºC) for 7 days before it s processing. In the first trial, 147 samples (52,5%) were positive for C. jejuni and another 31 (11,07%) were identified as Campylobacter spp. The data analysis revealed correlaction beetwen the number of birds kept in de farms (p=0,05), the age of the poultry (p=0,05) and the gender (p=0,03), as female was more infected than males. In the second experiment, isolation of C. jejuni was achieved in 7 heart (77,7%), 8 liver (88,8%), 4 gizzard (44,4%) and 3 drumette (33,3%) fresh samples, corresponding to 61,1% of total samples. After freezing storage, in only 3 samples (two liver and one heart) C. jejuni was isolated (8,3%). The data obtained allowed us to conclude that C. jejuni is widely spread in poultry farms os Rio Grande do Sul state, so, improve the control procedures for Compylobacter species on the poultry fars is needed. The chicken cuts obtained from supermarkets in Santa Maria city are also higly contaminated by C. jejuni, however, freezing storage for seven days can drastically reduce the contamination levels of chicken cuts, improoving food safety, althoght, this procedure do not eliminate completely C. jejuni from de cuts analized, and the correct manipullation is needed to eliminate the risk of infeccion from poultry meat sources . / A campilobacteriose, atualmente, é reconhecida como sendo a causa mais freqüente de infecção de origem alimentar em seres humanos. Dentre as espécies responsáveis pela infecção, Campylobacter jejuni responde por cerca de 75% dos casos de campilobacteriose humana, sendo considerada a principal espécie envolvida nos casos registrados. Este trabalho é composto de dois experimentos. No primeiro avaliou-se a ocorrência de C. jejuni em granjas avícolas no estado do Rio Grande do Sul, correlacionando os índices de contaminação detectados com dados epidemiológicos obtidos através de entrevista com o responsável pela granja. Foram coletados 280 swabs cloacais oriundos de quatro granjas avícolas do Rio Grande do Sul. No segundo experimento, foram adquiridos em supermercados de Santa Maria, 9 amostras frescas de fígado, coração, moela e drumete, totalizando 36 amostras. Foi realizado o processamento de um fragmento de 25g de cada amostra fresca, sendo o restante congelado à -18ºC durante sete dias, sendo as amostras, após este período novamente analisadas. No primeiro experimento, foram obtidas 147 amostras (52,5%) positivas para C. jejuni e 31 amostras (11,07%) identificadas como Campylobacter spp. A análise dos dados revelou existir influência dos índices de contaminação mais elevados com o número de aves alojadas (p=0,05), tempo de alojamento (p=0,05) e sexo (p=0,05), sendo as fêmeas mais acometidas que os machos. No segundo experimento, realizou-se o isolamento em 7 (77,7%) amostras frescas de coração, 8 (88,8%) de fígado, 4 (44,4%) de moela e 3 (33,3%) de drumete, correspondendo a 61,1% das amostras frescas analisadas. Após o congelamento, em apenas três amostras (8,3%) foi obtido o isolamento de C. jejuni, sendo duas amostras de fígado e uma de coração. Os dados obtidos permitem concluir que C. jejuni está amplamente difundido na avicultura industrial do Rio Grande do Sul, sendo necessário ampliar os esforços para redução deste patógeno nos plantéis avícolas. Os cortes de frango adquiridos em supermercados na cidade de Santa Maria apresentam índices de contaminação elevados por C. jejuni, contudo o congelamento por 7 dias é capaz de reduzir consideravelmente os índices de contaminação, porém, não eliminando completamente C. jejuni dos cortes congelados, assim, a manipulação adequada da carne de frango continua sendo essencial para assegurar a eliminação de C. jejuni dos alimentos contendo carne de frango em suas preparações.

Submitted by Rafael Akira Sato null (rafaelsato.vet@gmail.com) on 2018-03-01T18:43:25Z No. of bitstreams: 1 Tese_Rafael_Akira_Sato.pdf: 1575822 bytes, checksum: 8c5d8477c59f39d10f58c0386df5dd7e (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-03-02T12:07:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sato_ra_dr_jabo.pdf: 1575822 bytes, checksum: 8c5d8477c59f39d10f58c0386df5dd7e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-02T12:07:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sato_ra_dr_jabo.pdf: 1575822 bytes, checksum: 8c5d8477c59f39d10f58c0386df5dd7e (MD5) Previous issue date: 2017-12-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A segurança de alimentos de origem animal é uma das preocupações da medicina veterinária preventiva e um interesse de saúde pública, como os sushis preparados com peixe cru e consumidos sem tratamento térmico. Diante dessa preocupação aliada a expansão da culinária japonesa no Brasil, esse estudo objetivou avaliar a qualidade microbiológica e pesquisa de genes codificadores de fatores de virulência do Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus e Salmonella, em sushis. Para tanto, 60 amostras foram coletadas em restaurantes e avaliados pela quantificação Staphylococcus spp., S. coagulase positivo e número mais provável de coliformes totais e termotolerantes. Também foram realizadas pesquisas da presença do B. cereus, da E. coli, do S. aureus e da Salmonella spp., e estudo da ocorrência de genes codificadores fatores de virulência para B. cereus, E. coli, S. aureus. Das amostras analisadas 80,0% (48/60) apresentaram Staphylococcus spp., com populações variando de 1,0 x 102 a 5,3 x 105 UFC.g-1, sendo que 31,7 % (19/60) foram caracterizados como S. coagulase positivo e 8,3% (5/60) apresentaram valores de populações acima do limite estabelecido. As populações de coliformes totais e termotolerantes variaram de ausência (< 3,0) a exponenciais de 105 e 104 NMP.g-1, respectivamente, sendo que 60,0% (36/60) das amostras apresentaram valores acima de 102 NMP.g-1, limite máximo previsto pela legislação brasileira para coliformes termotolerantes. Das amostras analisadas 75,0% (45/60) apresentaram B. cereus e o gene bceT foi mais o frequente sendo amplificado em 35,6% (16/45), seguido pelos genes nheB 26,7% (12/45), nheC 22,2% (10/45), hblA 17,8% (8/45) e cytK 15,6% (7/45). Os genes hblC, hblD e entFM apresentaram a menor ocorrência, 11,1% (5/45) em cada. Quanto a presença da E. coli, foi confirmada em 21,7% (13/60), e dessas amostras 23,0% (3/13) apresentaram amplificação dos genes de toxinas aea e estB. A presença S. aureus foi identificada em 11,7% (7/60) amostras, sendo que todas apresentaram gene codificador coa e foram positivas na prova da coagulase. Dentre as 7 amostras de S. aureus os genes eta e hlg foram os mais frequentes (4/7), seguidos pelos genes sea, sei e tst (2/7),e o gene seg (1/7). O gene mecA foi identificado em 6 amostras das 48, totalizando 12,5%. O gene para detecção da Salmonella sp. não foi amplificado neste trabalho. O B. cereus, E. coli, S. aureus e seus genes codificadores de toxinas estão presentes no sushi, oferecendo risco a saúde pública e podendo ocasionar surtos de intoxicações alimentar quando os padrões boas praticas de fabricação de alimentos não forem corretamente aplicadas. / The safety of animal origin food is one of the concerns of preventive veterinary medicine and a public health interest, such as the sushis prepared with raw fish and consumed without heat treatment. Given this concern, added to the expansion of Japanese cuisine in Brazil, this study evaluated the microbiological quality and research of genes encoding virulence factors of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus and Salmonella, in sushis. For that, 60 samples were collected from restaurants and evaluated by the quantification of Staphylococcus spp., coagulase positive S. and the most probable number of total and thermotolerant coliforms. Research of B. cereus, E. coli, S. aureus and Salmonella spp. presence, and the study of the occurrence of encoding virulence factors genes for B. cereus, E. coli, S. aureus. From the analyzed samples, 80.0% (48/60) presented Staphylococcus spp., with populations varying from 1.0 x 102 to 5.3 x 105 CFU.g-1, 31.7% (19/60) were characterized as coagulase positive S. and 8.3% (5/60) presented values of populations above the established limit. Total and thermotolerant coliform populations ranged from absent (<3.0) to exponentials of 105 and 104 MPN.g-1, respectively, and 60.0% (36/60) of the samples presented values above 102 MPN.g-1, the maximum limit established by Brazilian legislation for thermotolerant coliforms. The samples analyzed, 75.0% (45) presented B. cereus and the bceT gene was more frequent, being amplified in 35.6% (16/45), followed by genes nheB 26.7% (12/45), nheC 22.2% (10/45), hblA 17.8% (8/45) and cytK 15.6% (7/45). The hblC, hblD and entFM genes had the lowest occurrence, 11.1% (5/45) in each. E. coli presence was confirmed in 21.7% (13/60), and of these samples 23.0% (3/13) presented amplification of the aea and estB toxin genes. S. aureus presence was identified in 11.7% (7/60) samples, all of which presented coa coding gene and were positive in the coagulase test. Among the 7 S. aureus samples, the eta and hlg genes were the most frequent (4/7), followed by the sea, sei and tst (2/7) genes, and the seg gene (1/7). The mecA gene was identified in 6 samples from 48, totaling 12.5%. The Salmonella spp. gene was not amplified in this work. B. cereus, E. coli, S. aureus and their toxin encoding genes are present in sushi, posing a risk to public health and may lead to outbreaks of food poisoning when good food manufacturing standards are not correctly applied.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-02Bitstream added on 2014-06-13T20:38:48Z : No. of bitstreams: 1 munhoz_pm_me_botfmvz.pdf: 382756 bytes, checksum: 723b8e75cf4e4fc65c17e78cd49f15e3 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Propôs-se colher e analisar amostras da merenda escolar, provenientes da Cozinha Piloto e de quatro pontos de distribuição, na cidade de Botucatu, SP. Objetivou-se avaliar o padrão higiênico-sanitário destas refeições, pesquisando os patógenos Salmonella spp, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. O padrão higiênico-sanitário dos utensílios envolvidos na distribuição da merenda e o padrão microbiológico presente nas mãos dos manipuladores envolvidos também foram avaliados mediante análises microbiológicas para bactérias aeróbicas mesófilas, S. aureus, coliformes totais e fecais. A metodologia utilizada para a detecção de Salmonella spp obedeceu às normas estabelecidas pela FDA, enquanto que para Staphylococcus aureus a metodologia seguiu os fundamentos da Instrução Normativa SDA Nº62, de 26 de agosto de 2003. A análise de Escherichia coli, bactérias mesofílicas e coliformes totais foi realizada através de método rápido (Petrifilm®). Visou avaliar também o grau de conhecimento e capacitação dos manipuladores de alimentos através de aplicação de inquérito de múltipla escolha, o qual abrangeu tópicos relativos à higiene pessoal, alimentar e ambiental adotadas por estes...