Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-25T23:51:26Z No. of bitstreams: 1 MarianyPatriciaWanderleyDeMacedo_DISSERT.pdf: 1476311 bytes, checksum: d40929188702a06876c5f930bd5a5f9e (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-28T20:01:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarianyPatriciaWanderleyDeMacedo_DISSERT.pdf: 1476311 bytes, checksum: d40929188702a06876c5f930bd5a5f9e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T20:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianyPatriciaWanderleyDeMacedo_DISSERT.pdf: 1476311 bytes, checksum: d40929188702a06876c5f930bd5a5f9e (MD5) Previous issue date: 2015-03-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A caprinocultura e a ovinocultura mostram-se como atividades agropecu?rias de grande import?ncia para o semi?rido nordestino. No entanto, a produ??o de caprinos e ovinos se faz com v?rias dificuldades. Dentre elas as infec??es parasit?rias, em especial as helmintoses do trato gastrintestinal, a eimeriose e a toxoplasmose; esta relacionada com problemas na reprodu??o. Em virtude disso, este trabalho teve como objetivo fazer o levantamento da ocorr?ncia e de alguns determinantes das parasitoses que acometem os rebanhos de pequenos ruminantes das microrregi?es Natal, Maca?ba, Litoral Sul, Angicos, Vale do A?u e Borborema Potiguar. Para isso foram aplicados instrumentos epidemiol?gicos com produtores, tratadores ou respons?veis pelos rebanhos e tamb?m realizadas colheitas de amostras de sangue e fezes dos animais em oito propriedades, localizadas em sete munic?pios dessas microrregi?es. A carga parasit?ria dos animais foi determinada atrav?s da contagem de ovos e oocistos por grama de fezes OPG e OoPG, respectivamente. Al?m disso, foi feita a recupera??o de larvas infectantes. Com as amostras de sangue foram feitas a mensura??o do volume globular e a pesquisa de IgG anti-Toxoplasma gondiino soro sangu?neo dos ovinos, por meio do teste imunoenzim?tico (ELISA). Para as vari?veis discretas, a an?lise estat?sticafoi feita por regress?o de Poisson, com n?vel de signific?ncia menor que 0,05.A an?lise dos instrumentos epidemiol?gicos permitiu observar que a ivermectina ? o antihelm?ntico utilizado em 85,71% das propriedades. Do total de amostras de fezes dos ovinos (n=179) 53,07% apresentaram positividade para ovos de helminto e 48,04% mostraram-se positivas para oocistos de Eimeria. Das amostras de fezes dos caprinos (n=133), 72,18% foram positivas para ovos de helmintos e 96,99% para oocistos de Eimeria. A menor contagem de OPG e de OoPG foi observada na microrregi?o Angicos. A maior contagem de OPG foi encontrada na microrregi?o Litoral Sul e a de OoPG na microrregi?o Borborema Potiguar.Para ambos os casos, a diferen?a foi estatisticamente significante (p?0,000). O g?nero de helminto mais prevalente foi Haemonchus, presente em 49,87% dos ovinos e em 80,42% dos caprinos. A m?dia do hemat?crito variou de 22,91 a 33,25 nos ovinos e de 22,62 a 28,25 nos caprinos. A preval?ncia de IgG anti-Toxoplasma gondii variou de 63,33% a 100,00%. Os caprinos mostraram-se mais suscept?veis ?s infec??es por parasitos do trato gastrintestinal do que os ovinos. Em todas as propriedades foi observada elevada preval?ncia de infec??o por T. gondii, sendo as menores porcentagens registradas nas microrregi?es Angicos e Borborema Potiguar. / The goat and sheep industry shows up as an agricultural activity of great importance for the semiarid Northeast. However, the sheep and goats production is made with various difficulties. Among them, parasitic infections, particularly helminth infections of the gastrointestinal tract, the eimeriosis and toxoplasmosis; this one related to problems in reproduction. For this reason, the aim of this study is to to make a survey of the occurrence and some determinants of parasitic diseases that affect small ruminant flocks of the microregions Natal, Maca?ba, Litoral Sul, Angicos, Vale do A?u and Borborema Potiguar. Thereunto, epidemiological tools were applied with producers, keepers or guardians of herds and also held collections of blood and feces of animals in eight properties located in seven municipalities of these microregions. The parasite load of the animals was determined through eggs and oocysts counting per gram of feces EPG and OPG, respectively. In addition, the recovery of infective larvae was made. Blood samples were used to measure the globular cell volume and the search for anti-Toxoplasma gondii IgG in sheep serum, by Enzyme Linked Immune Sorbent Assay (ELISA). For categorical variables, the statistical analysis was performed using Poisson regression, with significance level of 0.05. The analysis of the instruments showed that ivermectin is the anthelmintic used in 85,71% of properties. From the total of feces samples of the sheep (n = 179), 53,07% were positive for helminth eggs and 48,04% were positive for oocysts of Eimeria. From the samples of faeces of goats (n = 133), 72,18% were positive for helminth eggs and 96,99% for oocysts of Eimeria. The lowest EPG and OPG count was observed in the micro region of Angicos. Most of the EPG count was found in the micro region Litoral Sul and the OPG count in the micro-region Borborema Potiguar. Both cases the difference was statistically significant(p- value?0,000)The most prevalent helminth genus found was Haemonchus, present in 49,87% of the sheep and 80,42% of goats. The average of hematocrit ranged from 22,91 to 33,25 in sheep and from 22,62 to 28,25 in goats. The prevalence of anti-Toxoplasma gondii IgG ranged from 63,33% to 100,00%. The goats showed to be more susceptible to infections by parasites of the gastrointestinal tract than the sheep. In all the properties was observed high prevalence of infection by T. gondii, with the lowest percentages recorded in the micro regions Angicos and Borborema Potiguar.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-20T23:49:39Z No. of bitstreams: 1 AlanaKarinaMirandaDaSilva_DISSERT.pdf: 2248771 bytes, checksum: fa3f2de8391ad8509c18c1e3b35755b8 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-03-02T23:24:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AlanaKarinaMirandaDaSilva_DISSERT.pdf: 2248771 bytes, checksum: fa3f2de8391ad8509c18c1e3b35755b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-02T23:24:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AlanaKarinaMirandaDaSilva_DISSERT.pdf: 2248771 bytes, checksum: fa3f2de8391ad8509c18c1e3b35755b8 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A caprinocultura ? uma atividade amplamente explorada nos pa?ses tropicais e apresenta grande import?ncia social e econ?mica. A despeito disso, muitas doen?as afetam os caprinos dentre as quais, as parasitoses. Nesse contexto, alguns parasitos do filo Apicomplexa s?o de grande import?ncia, devido ?s altas preval?ncias, impacto sobre a produtividade e a reprodu??o dos animais, al?m do car?ter zoon?tico de algumas esp?cies. O objetivo desse trabalho foi monitorar as infec??es por Eimeria spp.,Criptosporidium spp.e Toxoplasma gondii em matrizes caprinas da ra?a Canind?, criadas em regime semi-intensivo, na Esta??o Experimental Terras Secas, Pedro Avelino, Rio Grande do Norte. As colheitas das amostras de fezes e de sangue foram realizadas no per?odo de agosto de 2010 a julho de 2011. Para monitorar a infec??o por Eimeria spp. foi realizada a contagem de oocistos por grama de fezes (OoPG) e a identifica??o das esp?cies com base em par?metros morfol?gicos e morfom?tricos dos oocistos esporulados. A infec??o por Cryptosporidium spp. foi verificada pela pesquisa de oocistos em esfrega?os fecais corados pela t?cnica de Zielh-Neelsen modificado. Para monitorar as infec??es por T. gondii foi realizado o teste ELISA convencional e de avidez. A an?lise estatistica para a correla??o entre a m?dia de elimina??o de oocistos e a intensidade de chuvas foi verificada atrav?s do teste t para os coeficientes de regress?o. E para a correla??o entre a elimina??o de oocistos e o estado reprodutivo das matrizes, foi feito uma analise de vari?ncia. As an?lises estat?sticas foram feitas utilizando o programa R Core Team, vers?o 2015, admitindo-se n?vel de signific?ncia de 0,05%. Os oocistos de Eimeria foram detectados em 85,24% das amostras de fezes. Foram identificadas nove esp?cies de Eimeria: E. alijevi, E. arloingi, E. apsheronica, E. caprovina, E. christenseni, E. hirci, E. joechijevi, E. ninakohlyakimovae e E. caprina. A intensidade da precipita??o mostrou rela??o com a elimina??o de oocistos. Nos meses em que a intensidade pluviom?trica foi superior a 100 mm houve maior elimina??o de oocistos nas fezes (p=0,00). As matrizes gestantes e paridas eliminaram mais oocistos de Eimeria do que as secas, sendo essa diferen?a estatisticamente significante (p=0,00). Dos 405 esfrega?os fecais examinados, nove apresentaram oocistos de Cryptosporidium spp., representando 2,20% das amostras; sendo os oocistos presentes em uma amostra colhida em agosto, uma em janeiro, tr?s em fevereiro, tr?s em mar?o e uma em junho. Das 215 amostras de soro testadas pelo teste ELISA, 93 (43,26%) foram consideradas reativas para T.gondii. A maior taxa de reatividade foi verificada no m?s de julho de 2011 (94,10%). Nas amostras consideradas reativas, foi realizado o teste ELISA de avidez de anticorpos das quais 65 (69,90%) apresentaram anticorpos de alta avidez, indicativo de infec??o cr?nica e 28 (30,10%) apresentaram anticorpos de baixa avidez, indicativo de infec??o aguda. A infec??o por Eimeria spp. se constitui um problema para o rebanho j? que as cinco esp?cies consideradas patog?nicas para caprinos foram observadas com alta preval?ncia, ao longo de todo o per?odo do estudo. A infec??o por Cryptosporidium spp. apresenta baixo risco, mas este ? cont?nuo, j? que a elimina??o de oocistos de Cryptosporidium spp. ocorreu em diversos momentos ao longo de tempo do estudo. O risco de transmiss?o vertical de T. gondii pode ser considerado alto, j? que aproximadamente um ter?o dessas matrizes estava na fase aguda da infec??o. / The goat production is a widely exploited activity in tropical countries and has great social and economic importance. Despite this, many diseases affect goats among which, parasitosis. In this context, some parasites of the phylum Apicomplexa are of great importance, due to high prevalence, impact on productivity and reproduction of animals, in addition to zoonotic's characteristics of some species. The aim of this study was to monitor the infections by Eimeria spp., Cryptosporidium spp.e Toxoplasma gondii in goats matrices of Canind? breed, raised in semi-intensive regime at the Experimental Station Terras Secas, Pedro Avelino, Rio Grande do Norte. Crops of stool samples and blood were carried out from August 2010 to July 2011. To monitor Eimeria spp. Infection it was realized the oocyst count per gram of feces (OoPG) and the identification of species based on morphological and morphometric parameters of sporulated oocysts. The infection by Cryptosporidium spp. was verified by oocyst's search in fecal smears stained with modified Zielh- Neelsen technique. To monitor infection by T. gondii was performed the conventional ELISA and avidity. The statistical analysis of the correlation between the average oocysts disposal and intensity of rainfall was verified by the t test for the regression coefficients. And the correlation between the oocysts shedding and reproductive status of matrices, it was made an analysis of variance. Statistical analyzes were performed using the R Core Team program, version 2015, assuming a significance level of 0.05%. Eimeria oocysts were detected in 85.24% of feces samples. Nine species of Eimeria have been identified: E. alijevi, E. arloingi, E. apsheronica, and. caprovina, E. christenseni, E. hirci, E. joechijevi, E. Ninakohlyakimovae e, E. caprina. The intensity of rainfall is related to the elimination of oocysts in the months in which the rainfall intensity was greater than 100 mm there was a greater elimination of oocysts in the feces (p = 0.00). Pregnant and calved matrices tend to eliminate more oocysts of Eimeria than dry, and this difference was statistically significant (p = 0.00). Of 405 fecal smears examined, nine were Cryptosporidium spp, representing 2.20% of the samples.; being the oocysts present in a sample taken in August, one in January, three in February, three in March and one in June. Of the 215 serum samples tested by ELISA, 93 (43.26%) were considered reactive to T. gondii. The greater reactivity rate was observed in July 2011 (94.10%). In the samples considered reactive, it was performed the ELISA test of antibody avidity of which 65 (69.90%) had high avidity antibodies, indicative of chronic infection and 28 (30.10%) had low avidity, indicative of acute infection. The infection by Eimeria spp. constitutes a problem for the flock since the five considered pathogenic species for goats were observed with high prevalence throughout the study period. The infection by Cryptosporidium spp. a low risk, but this is continuous, since the elimination of Cryptosporidium spp. It occurred at several points over the study time. The risk of vertical transmission of T. gondii can be considered high, since approximately one third of matrices were in the acute phase of infection.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-04-03T22:31:55Z No. of bitstreams: 1 MarianneGarciaDeOliveira_DISSERT.pdf: 1689030 bytes, checksum: 7a391e7ba53ea61b94026888e1a5be01 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-04-11T18:26:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarianneGarciaDeOliveira_DISSERT.pdf: 1689030 bytes, checksum: 7a391e7ba53ea61b94026888e1a5be01 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-11T18:26:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianneGarciaDeOliveira_DISSERT.pdf: 1689030 bytes, checksum: 7a391e7ba53ea61b94026888e1a5be01 (MD5) Previous issue date: 2016-10-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O Toxoplasma gondii ? o principal agente etiol?gico respons?vel pelo acometimento do SNC em pacientes HIV/Aids. A triagem de pacientes portadores de HIV/Aids em rela??o ? positividade para T. gondii, associada ? determina??o do n?mero de linf?citos TCD4, pode auxiliar na redu??o da morbi-mortalidade relacionada a esta co-infec??o. O presente estudo teve como objetivo geral avaliar a frequ?ncia da infec??o pelo T. gondii em pacientes HIV positivos e correlacionar aos aspectos cl?nicos, sorol?gicos e epidemiol?gicos. Para isto, foram avaliados 179 pacientes HIV positivos acompanhados no Hospital Giselda Trigueiro. As an?lises sorol?gicas foram realizadas atrav?s da t?cnica de ELISA, enquanto que as an?lises cl?nicas e epidemiol?gicas ocorreram por meio da pesquisa em prontu?rios e aplica??o de question?rio, respectivamente. Al?m disso, foi realizada an?lise molecular a partir de PCR em amostras de sangue perif?rico de 11 pacientes HIV internados com neurotoxoplasmose (suspeita ou confirma??o). Nossos resultados indicam alta taxa de infec??o por T. gondii entre pacientes portadores de HIV/Aids (83,8%), sendo detectadas a neurotoxoplasmose (11,7%) e a toxoplasmose ocular (3,35%). A presen?a de gatos e a ingest?o de salada crua foram fatores de risco identificados, aumentando a chance de adquirir a infec??o em 2,6 e 3,4 vezes, respectivamente. As manifesta??es cl?nicas mais frequentes entre todos os pacientes acometidos pela toxoplasmose cerebral consistiram em: paresia/hemiparesia (65,62%), cefaleia (37,50%) e altera??es da consci?ncia (28,12%). Al?m disso, entre os pacientes HIV/Aids internados, a neurotoxoplasmose foi decorrente de reativa??o da infec??o latente. A avalia??o molecular apresentou limita??es quanto ao diagn?stico da neurotoxoplasmose. Conclui-se que a realiza??o deste trabalho permitiu uma caracteriza??o epidemiol?gica e cl?nica da toxoplasmose em pacientes HIV/Aids do Rio Grande do Norte, sendo um estudo pioneiro na regi?o. / Toxoplasma gondii is the main etiological agent responsible for central nervous system involvement in HIV / AIDS patients. The screening of patients with HIV / AIDS related to the positivity for T. gondii, associated to the determination of the number of CD4+ T lymphocytes, may help to reduce the morbidity and mortality related to this co-infection. The present study had as general objective to evaluate the frequency of T. gondii infection in HIV positive patients and to correlate clinical, serological and epidemiological aspects. For this, 179 HIV positive patients were evaluated at the Hospital Giselda Trigueiro. Serological tests were performed using the ELISA technique, while the clinical and epidemiological analyzes occured through research in medical records and questionnaire application, respectively. In addition, molecular analysis was performed by PCR in peripheral blood samples from 11 HIV patients hospitalized with neurotoxoplasmosis (suspected or confirmed). Our results indicate a high rate of T. gondii infection among patients with HIV / AIDS (83.8%), being detected neurotoxoplasmosis (11.7%) and ocular toxoplasmosis (3.35%). The presence of cats and raw salad ingestion were identified as risk factors, increasing the chance of acquiring the infection in 2.6 and 3.4 times, respectively. The most frequent clinical manifestations among all patients affected by cerebral toxoplasmosis consisted of: paresis / hemiparesis (65.62%), headache (37.50%) and changes in consciousness (28.12%). Besides that, among hospitalized HIV / AIDS patients, neurotoxoplasmosis was due to latent infection reactivation. The molecular evaluation presented limitations on the diagnosis of neurotoxoplasmosis. It is concluded that the accomplishment of this work allowed an epidemiological and clinical characterization of the toxoplasmosis in HIV / AIDS patients of Rio Grande do Norte, being a pioneer study in the region.

A toxoplasmose é uma das enfermidades parasitárias mais difundidas entre as transmissíveis. Novos aspectos parecem justificar o reaparecimento da questão da toxoplasmose, uma vez que ela vem sendo diagnosticada em um número crescente de pacientes com imunossupressão devida a várias causas tais como doenças malignas, transplantes de órgãos e principalmente, a Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS). Mais de 50% da população humana mundial acha-se infectada pelo Toxoplasma gondii com variações determinadas por fatores climáticos, sócio-econômicos, tipo de contato com animais, em especial o gato e costumes alimentares relacionados ao consumo de carnes. O T. gondii é um protozoário que infecta praticamente todas as espécies animais. A caprinocultura é uma atividade bastante exercida no Estado, sendo que representa 0,4% de sua atividade pecuária total. O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel desempenhado pela espécie caprina na transmissão do T.gondii. A amostragem foi estratificada por idade e gênero. Foram analisadas 360 amostras de soros de caprinos, através da técnica de Hemaglutinaçao Indireta (HAI) e Imunofluorescência Indireta (IFI). Os resultados obtidos pela HAI estimam uma freqüência de 19 % de soro-positividade e pela IFI de 30%, o que representa índices elevados. Em relação a Hemaglutinação Indireta, na variável gênero, foi observada uma freqüência de 20,1% de soropositividade para os machos e 19,3% para as fêmeas, enquanto que na variável idade, os resultados demonstraram freqüências de 16,5% para os indivíduos jovens e 21,1% para os adultos. No que tange à Imunofluorescência Indireta, a variável gênero demonstrou uma freqüência de 14,44% de soropositivos para os machos e 15,56% para as fêmeas. Na variável idade, através desta mesma técnica, observou-se uma freqüência de soropositividade de 13,06% para indivíduos jovens e de 16,94% para indivíduos adultos. Ao compararem-se as duas técnicas os dados obtidos revelam uma associação significativa entre elas, com uma índice de co-positividade para a HAI de 78,6% e de co-negatividade de 81,7%. O índice Kappa utilizado para medir o grau de concordância entre as duas técnicas foi igual a 0,5% que evidencia um grau de concordância moderado entre as técnicas, recomendando, desta forma o uso cauteloso da HAI na espécie caprina. Os dados obtidos nos permitem concluir que os caprinos criados na região estudada podem ser fonte de transmissão de T. gondii.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:28:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6392_1.pdf: 4313443 bytes, checksum: c9863c6d46edb79cdb34b7f265eec379 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Doenças parasitárias, incluindo a toxoplasmose, afetam milhões de pessoas, sendo assim algumas das mais prevalentes doenças em humanos. A toxoplasmose é causada por um parasito intracelular, Toxoplasma gondii, e está associada com severas patologias, como pneumonia e miocardite. Em recentes trabalhos, nosso grupo de pesquisa reportou a síntese e atividade anti-T. gondii de tiossemicarbazonas e 4-tiazolidinonas substituídas na porção arilhidrazona com o grupo nitro nas posição orto, meta e para. Estes resultados foram pioneiros, devido a inexistência na literatura da ação destas duas classes de compostos no parasito intracelular. Na busca de novas drogas ativas contra o T. gondii, bem como apresentando potencial atividade antimicrobiana, desenvolvemos a síntese de uma série de benzaldeído 4-fenil-3-tiossemicarbazonas e de três séries de seus derivados 2[(fenilmetileno)hidrazono]-3-fenil-4-tiazolidinona-5-substituídos, ambas apresentando substituintes eletroretiradores e eletroatratores na função arilhidrazona. Já as 4-tiazolidinonas ainda se diferenciaram quanto a presença ou ausência de substituintes na posição 5 do anel, sendo eles hidrogênio, acetil e pnitrobenzilideno. Todos os compostos foram submetidos a avaliação in vitro de suas atividades anti-T. gondii. Apenas os derivados tiazolidinônicos foram submetidos à atividade antimicrobiana. As tiossemicarbazonas foram sintetizadas a partir de reações de condensação entre 4-feniltiossemicarbazida e benzaldeídos substituídos. Já as 4-tiazolidinonas foram obtidas a partir das tiossemicarbazonas, através de reações com o anidrido maléico (aceptor de Michael), cloroacetato de etila e 2-Ciano-3[(4-nitro)-fenil]-acetato de etila. Após purificação, os compostos finais apresentaram rendimentos entre 36-100%. Todos foram caracterizados por métodos espectroscópicos convencionais (RMN 1H, RMN 13C e IV), os mesmos mostrando-se consistentes com as respectivas estruturas. Alguns derivados tiazolidinônicos contendo o grupo acetil na posição 5 do anel 4-tiazolidinona demonstraram consideráveis atividades antibióticas frente aos microrganismos M. luteus, M. tuberculosis e Candida sp. (IMUR 4249). Em geral, todas as tiossemicarbazonas e 4-tiazolidinonas sintetizadas apresentaram excelentes atividades in vitro frente ao T. gondii intracelular, reduzindo significantemente a percentagem de células infectadas e o número médio de parasitos intracelulares a partir das concentrações de 1 e 2 mM. Vários compostos apresentaram melhores resultados quando comparados com hidroxiuréia e sulfadiazina. A toxicidade para a maioria dos compostos foi mais efetiva contra os parasitos, com valores de CI50 entre 0,05 e 1mM

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:31:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6183_1.pdf: 1683765 bytes, checksum: b5847d9d54b73793b7e809056f871fd5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Doenças parasitárias, como a toxoplasmose, afetam milhões de pessoas no mundo inteiro e são amplamente pesquisadas. Este fato deve-se, em parte, à elevada disseminação dessas doenças em pacientes imunocomprometidos, principalmente naqueles que apresentam a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS). A toxoplasmose é uma infecção causada por Toxoplasma gondii, parasita com biologia bastante complexa e de caráter cosmopolita, estando largamente distribuído nas diversas áreas geográficas do globo terrestre. Em trabalho publicado recentemente por nosso grupo de pesquisa, foi observado que tiossemicarbazonas e aril-hidrazono-4-tiazolidinonas, substituídas na porção aril com grupo nitro, possuem notória atividade anti-T. gondii. Nos últimos anos, várias publicações têm abordado compostos contendo o núcleo imidazol como potenciais agentes antiprotozoários. Principalmente para análogos do megazol (2-amino-5-(1-metil-5-nitro-2- imidazolil)-1,3,4-tiadiazol) atuando como agentes antichagásicos. Com o objetivo de produzir novas moléculas ativas contra T. gondii desenvolvemos a síntese e avaliação in vitro para aciltiossemicarbazidas (e seus derivados: 4- tiazolidinonas e 1,3,4-tiadiazóis) obtidas a partir do éster etil(5-metil-1-Himidazol- 4-carboxilato). Aciltiossemicarbazidas foram sintetizadas através da reação de adição entre 5-metil-1H-imidazol-4-carboidrazida e isotiocianatos substituídos. A partir destas, foram obtidas duas novas séries: 4-tiazolidinonas, através de uma reação tia-Michael envolvendo anidrido maléico como aceptor de Michael; e 1,3,4-tiadiazóis por uma ciclodesidratação com ácido sulfúrico. Os produtos finais foram purificados por recristalizações (tiossemicarbazidas) e cromatografia em coluna (4-tiazolidinonas) em solventes apropriados, obtendose rendimentos entre 10% e 94%, e caracterizados estruturalmente por métodos espectroscópicos convencionais (RMN 1H, RMN 13C, IV) e espectrometria de massas de alta resolução (MS-HR). A formação de aciltiossemicarbazidas foi confirmada principalmente em RMN 13C, onde sinais em 181,1-181,0 ppm e 163,1-162,5 ppm evidenciaram os grupos C=S e C=O, respectivamente. Para 4-tiazolidinonas, bandas de absorção encontradas entre 1397-1378 cm-1, referentes à deformação angular do grupo NCS, confirmaram o fechamento do anel. Os derivados 1,3,4-tiadiazóis foram caracterizados observando-se a ausência de sinais entre 181,1-181,0 ppm e 163,1-162,5 ppm em espectros de RMN 13C referentes aos grupos C=S e C=O. A existência de troca química em aciltiossemicarbazidas, envolvendo átomos de H lábeis, foi confirmada através da análise espectroscópica de troca química (EXSY). Os resultados de atividade anti-T. gondii indicaram as aciltiossemicarbazidas e os derivados contendo o núcleo 1,3,4-tiadiazol como os compostos de maior ação inibitória frente à células vero infectadas e ao parasita intracelular, evidenciado uma futura aplicação desses derivados como agentes anti-T. gondii. Por fim, foram realizados testes antimicrobianos, os quais revelaram fracas atividades dos compostos sintetizados frente a fungos e bactérias. A descrição de atividades antimicrobianas na literatura, para compostos contendo os heterociclos imidazol, 1,3,4-tiadiazol e 4-tiazolidinona, justificou a realização dos testes para as moléculas obtidas

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-06-20T13:29:58Z No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Goncalves de Azevedo Filho.pdf: 1942735 bytes, checksum: 02c3cdaa871437e7dc1b37053ee3a98c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-20T13:29:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Cesar Goncalves de Azevedo Filho.pdf: 1942735 bytes, checksum: 02c3cdaa871437e7dc1b37053ee3a98c (MD5) Previous issue date: 2016-10-26 / Toxoplasma gondii and Neospora caninum are obligate intracellular parasites responsible for reproductive disorders in sheep. The aim of this study was to evaluate the kinetics of antibodies in ewes naturally infected by Toxoplasma gondii and Neospora caninum. Ewes in reproductive age composed the experimental groups. All animals were submitted to pregnancy diagnosis and serological monitoring to determine prevalence and incidence rates. Blood samples of the ewes (postpartum) and their lambs (pre-colostral) were collected to evaluate the vertical transmission rate. Serological monitoring of the ewes was performed using the ELISA, and research of IgG antibodies anti- T. gondii and N. caninum in lambs was performed by IFAT. Aborted fetuses tissue samples were collected for PCR. The initial prevalence of toxoplasmosis was 25.0 % (15/60) and the final 46.7% (28/60), with an incidence of 28.9% (13/45); N. caninum initial prevalence was 26.0% (13/50) and the final 72.0% (36/50), and the incidence rate of 62.2 % (23/37). The abortion rate was 37.5% (3/8) for T. gondii and no abortions cases by N. caninum. The vertical transmission rate for T. gondii was 38.9% and 15.4% for N. caninum. The results of this study indicate immune response alterations in ewes naturally infected by T. gondii, mainly in those that aborted. Moreover, it was observed the importance of the horizontal transmission on the infection incidence by coccidia, as weel as the importance of the congenital infection to the maintenance of the parasites in the flock analyzed. / Toxoplasma gondii e Neospora caninum são parasitos intracelulares obrigatórios responsáveis por distúrbios reprodutivos em ovinos. Objetivou-se neste estudo avaliar a cinética de anticorpos em ovelhas naturalmente infectadas por Toxoplasma gondii e Neospora caninum. Ovelhas em idade reprodutiva compuseram os grupos experimentais. Todos os animais passaram por diagnóstico de gestação e monitoramento sorológico para determinar a taxa de prevalência e incidência. Amostras de sangue das ovelhas e seus conceptos foram coletadas para avaliar a taxa de transmissão vertical. Para o monitoramento sorológico das ovelhas foi utilizada a técnica de ELISA e para a pesquisa de anticorpos IgG anti- T. gondii e N. caninum nos neonatos foi utilizada a RIFI. Dos fetos abortados foram coletadas amostras de tecidos para PCR. A prevalência inicial da toxoplasmose no rebanho foi de 25,0% (15/60) e a final de 46,7% (28/60) com incidência de 28,9% (13/45); para N. caninum a prevalência inicial foi de 26,0% (13/50) e a final de 72,0% (36/50) e taxa de incidência de 62,2% (23/37). A taxa de aborto foi de 37,5% (3/8) nas ovelhas infectadas por T. gondii e ausência de abortos por N. caninum. A taxa de transmissão vertical para T. gondii foi de 38,9% e de 15,4% para N. caninum. Os resultados deste estudo indicam alterações na resposta imune de ovelhas naturalmente infectadas por T. gondii, principalmente nas ovelhas que abortaram. Além disto, constatou-se a importância da transmissão horizontal na incidência da infecção pelos coccídios e a importância da infecção congênita para a manutenção dos parasitos no rebanho analisado.

Orientador: Ana Maria Aparecida Guaraldo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:42:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_RosangelaJunqueira_D.pdf: 4641170 bytes, checksum: aedf4a1570b3ee1a0bf27ff37fbccd29 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Para a detecção de antígenos de T. gondii na urina e plasma de camundongos infectados com o parasito foi utilizada técnica de ELISA de captura. Na técnica, IgG humana anti,T. gondii, obtida por cromatografia de afinidade, foi utilizada para o revestimento da placa de ELISA com o intuito de capturar antígenos específicos. Nas reações positivas, os antígenos de T. gondii foram reconhecidos por IgG de coelho anti, T. gondii obtida por cromatografia de afinidade. Utilizou,se o conjugado IgG de cabra anti,lgG de coelho marcado com peroxidase e como substrato a ortofenilenodiamina. Em cada placa de reação foram incluídos padrões contendo concentrações conhecidas de proteínas de taquizoitos (AgS T. gondii). A concentração de proteínas presentes nas amostras testadas foram expressas em J.1g1 mI. A técnica eviqenciou alta reprodutibilidade, com limite inferior de sensibilidade de 0,05 Ilg/mI. Foi observada antigenúria em camundongos inoculados com 1000, 25000, 50000 e 100000 taquizoitos da linhagem N de alta virulência de Toxoplasma gondii ,durante a fase aguda da infecção. Camundongos inoculados com 1, 6 ou 12 cistos da linhagem P de moderada virulência de T. gondii apresentaram antigenúria e antigenemia na fase aguda e crônica da infecção. Os primeiros cistos foram detectados no cérebro dos camundongos infectados com a linhagem P, 11 dias após a infecção. O número de cistos e o volume médio aumenta com o tempo de infecção, independentemente do número de cistos inoculados. Na fase crônica da infecção dos animais observou,se o ocorrência simultânea de cistos grandes e pequenos, indicando neoformação de cistos. A neoformação de cistos e antigenúria na fase crônica da infecção, indicam a possibilidade de reagudização periódica da infecção pelo T. gondii / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Ciências Biológicas

Five target genes were selected in Toxoplasma gondii tachyzoites for localization studies. These five genes, detected through proteomics studies, included TgME49_227450, TgME49_223080, TgME49_262390, TgME49_230940, and TgME49_269620. Localization of these five target proteins is a first step to confirm their interaction with TgCrk2 and understand their function and role in TgCrk2 regulation of the tachyzoite cell cycle. Gene models for the targets were analyzed using ToxoDB and ApE analysis tools. Endogenous tagging constructs were created for each target. Transgenic parasites were created. Finally, localization analysis of the target proteins in tachyzoites was completed using immunofluorescent microscopy following. One protein was found to be nuclear, two were located in the cytoplasm, and two were unable to be analyzed. Future research should be completed in order to prove these putative interactors are really correlated with TgCrk2 through Co-immunoprecipitation.

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Toxoplasma gondii is a ubiquitous, protozoan parasite contributing significantly to global human and animal health. In the host, this obligate intracellular parasite converts into a latent tissue cyst form known as the bradyzoite, which is impervious to the immune response. The tissue cysts facilitate wide-spread transmission through the food chain and give rise to chronic toxoplasmosis in immune compromised patients. In addition, they may reactivate into replicating tachyzoites which cause tissue damage and disseminated disease. Current available drugs do not appear to have appreciable activity against latent bradyzoites. Therefore, a better understanding of the molecular mechanisms that drive interconversion between tachyzoite and bradyzoite forms is required to manage transmission and pathogenesis of Toxoplasma. Conversion to the bradyzoite is accompanied by an altered transcriptome, but the molecular players directing this process are largely uncharacterized. Studies of stage-specific promoters revealed that conventional cis-acting mechanisms operate to regulate developmental gene expression during tissue cyst formation. The major class of transcription factor likely to work through these cis-regulatory elements appears to be related to the Apetala-2 (AP2) family in plants. The Toxoplasma genome contains nearly 70 proteins harboring at least one predicted AP2 domain, but to date only three of these T. gondii AP2 proteins have been linked to bradyzoite development. We show that the putative T. gondii transcription factor, AP2IX-4, is localized to the parasite nucleus and exclusively expressed in tachyzoites and bradyzoites undergoing division. Knockout of AP2IX-4 had negligible effect on tachyzoite replication, but resulted in a reduced frequency of bradyzoite cysts in response to alkaline stress induction – a defect that is reversible by complementation. Microarray analyses revealed an enhanced activation of bradyzoite-associated genes in the AP2IX-4 knockout during alkaline conditions. In mice, the loss of AP2IX-4 resulted in a modest virulence defect and reduced brain cyst burden. Complementation of the AP2IX-4 knockout restored cyst counts to wild-type levels. These findings illustrate the complex role of AP2IX-4 in bradyzoite development and that certain transcriptional mechanisms responsible for tissue cyst development operate across parasite division.