Orientador: Flavio Henrique Caetano / Coorientador: Bruno Fiorelin Pereira / Banca: Wagner dos Santos Mariano / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Resumo: A Baccharis dracunculifolia, popularmente conhecida como alecrim do campo, merece destaque por apresentar promissor potencial terapêutico. Os extratos de folhas desta planta são utilizados para tratar distúrbios do fígado e digestivo, dentre outros. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos tóxicos do extrato alcoólico de B. dracunculifolia em órgãos de peixes. Dos 60 indivíduos (Prochilodus lineatus), 32 foram utilizados em dois grupos experimentais em duplicatas Controle (ração sem aditivo-alecrim) e Grupo alecrim (ração com aditivo-alecrim). Após o tratamento (21 dias) realizou-se 2 coletas com 14 e 21 dias. As alterações histológicas e histoquímicas foram avaliadas pelo Valor Médio de Alteração (VMA), Índice de Alteração Histológica (IAH) e software ImageJ®. IAH e o VMA mostraram que o extrato causa danos leves no fígado e brânquias, entretanto significativos somente no fígado. A análise histoquímica nas brânquias e rastros branquiais demonstraram o aumento de diferentes tipos de muco substâncias produzidas pelas células mucosas. As análises de muco e histomorfométrica do estômago e da porção mediana do intestino posterior demonstraram um aumento na altura, altura total e largura das vilosidades da porção mediana do intestino posterior e altura total e espessura da camada muscular do estômago. Os resultados evidenciam que a ingestão do extrato da B. dracunculifolia pode promover alterações significativas nas brânquias, fígado, intestino e estômago da espécie estud... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Baccharis dracunculifolia, popularly known as field rosemary, deserves to be highlighted because it presents promising therapeutic potential. The leaf extracts of this plant are used to treat liver and digestive disorders, among others. This study aimed to evaluate the toxic effects of alcoholic extract of B. dracunculifolia on fish organs. Of the 60 individuals (Prochilodus lineatus), 32 were used in two experimental groups in duplicates Control (ration without additive-rosemary) and Group rosemary (ration with additive-rosemary). After the treatment (21 days) 2 collections were performed with 14 and 21 days. Histological and histochemical changes were evaluated by the Mean Value of Alteration (MVA), Histological Alteration Index (HAI) and ImageJ® software. HAI and MVA have shown that the extract causes mild damage to the liver and gills, however significant only in the liver. Histochemical analysis in the gills and gill tracts demonstrated the increase of different types of mucus substances by mucosal cells. The analysis of mucus and histomorphometric of the stomach and the medial portion of the posterior intestine demonstrated an increase in height, total height and width of the villi of the mid portion of the posterior intestine and total height and thickness of the muscular layer of the stomach. The results evidenced that the ingestion of the extract of B. dracunculifolia can promote significant alterations in the gills, liver, intestine and stomach of the studied specie... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A Cannabis sativa é a droga ilícita usada com maior frequência por gestantes. O Delta9-tetrahidrocanabinol é o canabinóide principal responsável pelos efeitos psicoativos agindo principalmente nos receptores canabinóides 1 no cérebro. O consumo de Cannabis durante a gestação pode afetar o sistema endocanabinóide causando impactos na fase implantacional e no desenvolvimento fetal. Além disso, o Delta9- tetrahidrocanabinol é uma substância que pode atravessar a barreira feto-placentária e estar presente no leite materno. Sabe-se, no entanto, que qualquer estímulo ou insulto em um período crítico de desenvolvimento embrionário-fetal pode representar consequências mais tarde na vida. A fumaça de Cannabis contém elementos tóxicos prejudiciais semelhantes aos da fumaça de cigarro, logo o uso crônico de Cannabis tem sido associado a efeitos deletérios sobre o sistema respiratório. Embora vários estudos abordarem os efeitos da exposição à Cannabis sativa, escassos são aqueles que estudam a exposição gestacional e seus efeitos na prole. Além disso, os efeitos da Cannabis sativa sobre o desenvolvimento pulmonar são pouco conhecidos. O objetivo deste estudo é analisar os efeitos do uso da Cannabis sativa no desenvolvimento pulmonar da prole de camundongos, cujas mães foram expostas no período de gestação e analisar os efeitos no próprio tecido pulmonar dessas mães. Camundongos fêmeas grávidas (BALB/c) com aproximadamente 3 meses foram expostas à fumaça de Cannabis sativa ou ar filtrado por um período de 13 dias. Após as exposições os pulmões e os fetos das fêmeas grávidas foram coletados e o perfil inflamatório pulmonar avaliado no lavado broncoalveolar. As análises morfologia tecidual foram conduzidas e avaliadas utilizando os parâmetros estereológicos do volume pulmonar total, volume total e densidade de volume dos compartimentos pulmonares (parênquima pulmonar, vias aéreas, vasos sanguíneos, espaços aéreos alveolares, septos alveolares, áreas de superfície total e densidade de superfície dos alvéolos). Adicionalmente foram incluídas as análises de dissector físico para a estimativa de volume médio alveolar, densidade numérica e o número total de alvéolos para as proles com 20 e 60 dias de idade. As análises estereológicas das fêmeas grávidas mostraram um aumento significativo no volume total pulmonar, no volume total dos septos e no volume total dos espaços aéreos alveolares, quando comparados com as fêmeas grávidas expostas ao ar filtrado (grupo controle). Nos fetos com 18 dias de idade gestacional, houve uma diminuição significativa no volume total pulmonar, no volume total e na densidade de volume de sacos alveolares, no volume total e na densidade de volume de mesênquima, quando comparados com o grupo controle. Na prole com 20 dias de idade, houve um aumento no volume total, na densidade de volume e de superfície das vias aéreas, quando comparados com o grupo controle. Na prole com 60 dias de idade, houve um aumento no volume total do espaço aéreo alveolar, na densidade de volume do espaço aéreo alveolar, na densidade de superfície dos septos alveolares e na estimativa do número total de alvéolos, quando comparados com o grupo controle. Já os parâmetros de densidade de volume dos septos alveolares, área de superfície total dos septos alveolares e espessura dos septos alveolares, mostraram-se diminuídas quando comparados com o grupo controle. Os resultados mostraram que a exposição à fumaça de Cannabis é capaz de induzir alterações morfológicas no tecido pulmonar de camundongos (BALB/c) fêmeas grávidas e nas suas respectivas proles / Cannabis sativa is the illicit drug most frequently used by pregnant women. Delta9-tetrahydrocannabinol is the main cannabinoid responsible for psychoactive effects and acts mainly on the cannabinoid 1 receptors in the brain. Cannabis use during pregnancy can affect the endocannabinoid system causing impacts on the implantation phase and fetal development. In addition, Delta9-tetrahydrocannabinol is a substance that can cross the fetal-placental barrier and be present in breast milk. It is known, however, that any stimulus or insult in a critical period of embryonic-fetal development can have consequences later in life. Cannabis smoke contains harmful toxic elements similar to those of cigarette smoke, so chronic use of Cannabis has been associated with deleterious effects on the respiratory system. Although several studies address the effects of exposure to Cannabis sativa, few are those who study gestational exposure and its effects on offspring. In addition, the Cannabis sativa effects on lung development are poorly understood. The aim of this study is to analyze the effects of Cannabis sativa on the mice offspring lung development whose mothers were exposed during the gestation period and to analyze the effects on the lung tissue of these mothers. Pregnant female mice (BALB / c) with approximately 3 months were exposed to Cannabis sativa smoke or filtered air for 13 days. After the exposures the lungs and fetuses of the pregnant females were collected and the lung inflammatory profile evaluated in the bronchoalveolar lavage. The tissue morphology analyzes were conducted and evaluated using the stereological parameters of total lung volume, total volume and volume density of lung compartments (lung parenchyma, airways, blood vessels, alveolar air spaces, alveolar septa, total surface areas and alveoli surface density). In addition, physical dissector analyzes were used to estimate the mean alveolar volume, numerical density and the total number of alveoli for offspring at 20 and 60 days of age. Stereological analyzes of pregnant females showed a significant increase in total lung volume, total septal volume and alveolar air spaces total volume when compared to pregnant females exposed to filtered air (control group). In fetuses with 18 days gestational age, there was a significant decrease in total lung volume, total volume and volume density of saccules, total volume and volume density of mesenchymal stroma when compared to the control group. In the 20-day-old offspring, there was an increase in total volume, volume density and surface density of airway when compared to the control group. In the 60-day-old offspring, there was an increase in total alveolar airspace volume, alveolar airspace volume density, alveolar septal surface density, and total alveolar number estimation, as compared to the control group. The alveolar septa volume density, alveolar septa total surface area and alveolar septa thickness were decreased when compared to the control group. The results showed that exposure to Cannabis smoke is able to induce morphological changes in the lung tissue of pregnant (BALB / c) mice and their respective offspring

Enyalius perditus e Enyalius iheirngii são duas espécies de lagartos semi- arborícolas pertencentes à nova família Leiosauridae. Apresentam hábitos diurnos, são forrageadores ativos, e estão distribuídos ao longo da Mata Atlântica. E. perditus ocorre na porção sudeste enquanto E. iheringii nas porções sudeste e sul com registros de co-ocorrência em áreas do Estado de São Paulo. Apesar de sua ampla distribuição pouco se conhece sobre a ecologia e menos ainda sobre a biologia reprodutiva do gênero Enyalius. Além disto, informações sobre o comportamento reprodutivo de corte, época de cópula, desova e nascimento dos filhotes são praticamente inexistentes. Para tanto, este estudo investigou a estratégia reprodutiva de ambas as espécies através da dissecção de animais provenientes de coleções científicas, de cativeiro e de coletas em campo. Machos e fêmeas de E.iheringii atingiram maturidade sexual em tamanhos similares. Ambas as espécies são mais abundantes durante a estação chuvosa do que na estação seca. Ciclo de fêmeas de E. iheringii são mais estendidos e há possibilidade dos machos estocarem o espermatozoides nos ductos deferentes durante todo o ano. Foram encontradas fêmeas de E. iheringii estocando espermatozoides durante a primavera no infundíbulo e no outono dentro das criptas de estocagem da junção uterino-vaginal. Nas fêmeas de E. perditus a reprodução é altamente sazonal e ocorre nos períodos mais quentes e úmidos do ano. / Enyalius perditus and Enyalius iheirngii are two semi-arboreal lizard species that belong to the new family Leiosauridae. These specimens present daytime behavior and are active forragers distributed across the Atlantic Rainforest. E. perditus are found in the Southeast and E. iheringii in the Southeast and South. They also present co- occurrence in some areas at São Paulo state. Despite their wide distribution, little is known about their ecology and even less about the reproductive biology of their genera. The information about the reproductive biology of these animals is scarce on the other hand data regarding courtship behavior, mating season, spawning and offspring birth is virtually absent. For this, this study investigated the reproductive strategy of both species through the dissection of animals from scientific collections, captivity and field collections. In E.iheringii males and females reached sexual maturity in similar sizes. Both species are more abundant during the rainy season than in the dry season. Cycle of females of E. iheringii appear more extended and there is possibility of males stocking the spermatozoa in the vas deferens throughout the year. Females of E. iheringii were found stocking sperm during the spring in the infundibulum and in the fall within the storage crypts of the uterine-vaginal junction. In E. perditus females reproduction is highly seasonal and occurs during the hottest and wettest periods of the year.

Neste estudo foram investigados os efeitos da inalação crônica de cocaína crack na espermatogênese de camundongos púberes e maduros. Camundongos Balb/c machos de duas diferentes idades, jovem e adulta (n=20), foram expostos à fumaça de 5g de cocaína crack em uma câmara de inalação, 5 dias por semana, durante 2 meses. Animais controle (n=10) foram mantidos em biotério durante o período de experimentação. Análises morfométricas quantitativas de cortes histológicos de testículos foram feitas em microscopia óptica. A qualidade da espermatogênese foi avaliada durante a fase VII de maturação do epitélio seminífero, através da quantificação dos tipos celulares normais e degenerados presentes nos espaços intra e intertubular (células germinativas, células de Sertoli e células de Leydig). As diferenças foram consideradas significativas quando p<0,05. O número de túbulos seminíferos em fase VII por testículo mostrou significante redução (p=0,023) em animais jovens expostos. Houve redução significativa observada no número de células de Sertoli (p=0,000) e espermátides alongadas (p=0,005) de animais jovens expostos. A degeneração celular é aumentada em todos os grupos expostos, com maior severidade no grupo jovem (p=0,000). A inalação de fumaça de cocaína crack induz a alterações na espermatogênese, sendo sua toxicidade maior em animais jovens expostos durante a fase de maturação gonadal . Estes achados são de interesse na saúde pública e mais investigações devem ser feitas focando efeitos similares em homens. / In the present study, the effects of chronic inhalation of crack cocaine on the spermatogenesis of pubertal and mature mice were investigated. Balb/c mice of two different ages, young and adult (n=20), were exposed to the smoke of 5g of crack in an inhalation chamber for 5 days a week during 2 months. Correspondents control animals (n=10) were kept in animal house during experimentation. Morphological quantitative analyses of testis were made in optical microscope. The spermatogenesis was evaluated during phase VII of maturation of the seminiferous epithelium. The number of spermatogenesis cell types (germ cells and Sertoli cells), the germ cell degenerations and the intertubular Leydig cells population was scored. Differences were considered significant when p<0.05. The number of tubular phase VII per testis showed significant (p= 0,023) reduction in young exposed animals. Significant reductions (p=0,000) were observed in Sertoli cells and spermatids elongated (p=0,005) in young intoxicated animals. Apoptosis is also increased in all intoxicated groups being more severe in young groups (p=0,000). Inhalation of crack cocaine smoke induced spermatogenesis disruption of chronic exposed mice. Crack toxicity was more severe in pubertal mice when sexual gonad undergoes maturation. We think that our findings should be of public health concern and that further investigations focusing similar effects on human males are warranted.

O círculo arterial do cérebro (CAC) é objeto de estudo desde os princípios da anatomia moderna e ao longo dos séculos documentado e classificado de várias maneiras. Recentemente o desenvolvimento dos métodos diagnósticos por imagem e de ultraestrutura abriram um novo leque nas possibilidades de investigação. Neste trabalho o CAC foi avaliado por meio de exames por angiotomografia computadorizada, por angiorressonância magnética, fotografias de peças anatômicas, histologia, microscopia eletrônica por varredura e por transmissão. Verificou-se na amostra que o CAC possui tendência a simetria. Os achados foram similares na comparação entre os métodos de diagnóstico por imagem, porém não demonstraram todos os achados dos espécimes anatômicos. A metodologia utilizada permitiu verificar que as camadas das paredes das diferentes artérias podem explicar parcialmente as diferenças nos achados entre os métodos de imagem e as peças anatômicas. Os dados aqui apresentados revestem-se de grande importância clínica e cirúrgica uma vez que o CAC é um elemento chave na circulação cerebral. / The Willis Polygon (WP) has been studied since the beginning of modern anatomy and documented and classified over the centuries in various ways. Recently the development of diagnostic imaging methods and ultra structure opened a new range of possibilities in the investigation. In this work the WP was assessed by computer tomography angiography examinations by magnetic resonance angiography, photographs of anatomical specimens, histology, scanning and transmission electron microscopy. It was found that the sample has a tendency to the WP symmetry. The findings were similar when comparing the methods of diagnostic imaging, but did not show all findings of anatomical specimens. The methodology has shown that the different layers of the walls of arteries may partly explain the differences in findings between imaging and anatomical parts. The data presented here are of great clinical and surgical importance, once the WP is a key element in the cerebral circulation.

Objetivos: Recentemente, a Espectroscopia de Fluorescência (EF) tem sido estudada como método de análise de propriedades da pele de forma nãoinvasiva e em tempo real, utilizada em uma variedade de aplicações, incluindo avaliação e diagnóstico do tecido in vivo. Contudo, na cicatrização da pele, essa técnica não tem sido completamente explorada. Visto que a determinação da idade de uma lesão é um aspecto importante na medicina forense, esse trabalho tem por objetivo testar a aplicabilidade da medida da Intensidade de Fluorescência (IF) após o uso de metil-aminolevulinato (MAL) na estimativa da idade de lesão incisa, através da EF ao longo do tempo e fazer a correlação desta com os achados histológicos. Materiais e Métodos: Foram utilizados camundongos hairless como modelo experimental. Os animais foram divididos em dois grupos: com (+) e sem (-) o uso de MAL antes da EF. Incisões cirúrgicas lineares foram realizadas no dorso de cada animal. Espectros na faixa de 480 e 800 nm foram coletados da lesão e da pele normal adjacente, usando o sistema Ocean Optics, correspondendo a quatro condições: a) IF da lesão após MAL (+/+); b) IF da pele normal após MAL (-/+); c) IF da lesão sem MAL (+/-) e d) IF da pele normal sem MAL (-/-). Após a cirurgia, os animais foram monitorados periodicamente até 3 meses de pós-operatório e eutanaziados em grupos. Fragmentos de pele, contendo todo o ferimento, foram removidos e processados para análise histológica por métodos estereológicos. Vários cortes histológicos foram analisados para avaliar a organização da derme e da epiderme, deposição de colágeno e proliferação celular (imunoistoquímica por PCNA). Resultados: Nas fases iniciais da cicatrização, a EF in vivo mostrou acúmulo preferencial de protoporfirinas na lesão com uso de MAL (+/+), quando comparado à pele normal adjacente (-/+). Contudo, nas fases avançadas, ocorreu o inverso. Houve uma diferença estatisticamente significante neste grupo (+/+) ao longo do tempo (p < 0,0001), o que não aconteceu com os demais ((-/+); (+/-) e (-/-)). O modelo apresentado permitiu a estimativa da idade de lesão incisa no intervalo de dois meses, sendo possível estimar a fase de cicatrização em que esta se encontra. Achados histológicos confirmaram as fases da cicatrização, mostrando correlação com os achados de fluorescência. Conclusão: Os resultados mostraram que a técnica de EF usando MAL é um método promissor na análise dos estágios da cicatrização da pele / Background and Objective: In recent years, Fluorescence Spectroscopy (FS) has been explored as a novel noninvasive and real-time technique for analysis of skin properties, useful in a wide variety of applications, including tissue evaluation and diagnosis. However, the use of FS in skin wound healing has not been fully explored. Since aging of injuries on a victims body is an important aspect of forensic medicine, this paper intended to test the usefulness of collecting Fluorescence Intensity (FI) after topical MAL on age estimate of the incised lesion, through the study by FS over time and correlation with histological findings. Materials and Methods: As experimental model, was used hairless mice. The mice were divided into two groups: with (+) and without (-) use MAL before FS. Standardized linear wounds were made on the dorsum of each mice. Spectra in the 480-800 nm wavelength range were collected from normal and wound skin using Ocean Optics system, corresponding to four conditions: a) FI of skin wound after MAL (+/+); b) FI of normal skin after MAL (- /+); c) FI of skin wound without MAL (+/-) and d) FI of normal skin without MAL (- /-). After wounding, the animals were monitored periodically until 3 months and killed in groups. Tissue specimens, containing the whole wound, were removed and processed for histological analysis using stereological techniques. Several cross-sections were analyzed to evaluate the organization of the dermis and epidermis, collagen deposition and cellular proliferation (PCNA - imunohistochemistry antigen). Results: In vivo FS of skin wound healing with MAL (+/+) showed that there was a protoporphyrin preferential accumulation in healing site as compared to adjacent normal skin (+/-) in the early stage of healing. However, in the later stages, the reverse happened. There was statistically significant into this group (+/+) along the time (p < 0,0001); what not happened with another groups ((-/+); (+/-) and (-/-)). The model allows to estimate the age of an incised injury into interval of two months. Its possible to estimating his healing phase. Histological findings confirm the stages of healing and agree well with the fluorescence findings. Conclusion: The results showed that FS using MAL appears to be a promising approach for the analysis of stages of skin wound healing

Apesar dos avanços recentes na tecnologia dos aparelhos de ressonância magnética (RM) permitirem a aquisição de imagens de alta resolução, ainda não é possível delinear de forma confiável os limites entre regiões de diferentes citoarquiteturas baseando-se somente nesta modalidade. As imagens de histologia são mandatórias quando se necessita saber o limite exato entre diferentes regiões neuroanatômicas. Contudo, o processamento histológico inevitavelmente causa grandes deforma¸coes no tecido, o que torna a compara- ção direta entre as duas modalidades inviável. Os estudos de neuroimagem/neuroanatomia que necessitam de comparação com a histologia devem necessariamente incluir uma etapa de alinhamento entre as duas modalidades; tarefa que muitas vezes acaba sendo realizada manualmente. Entretanto, o registro manual ´e demorado e pouco acurado, se tornando inviável quando os exames de histologia geram centenas de imagens. Este trabalho propõe um método para registro de imagens de histologia e RM, composto por um conjunto de recomenda¸coes para o preparo das imagens cujo objetivo ´e otimizá-las para o registro; e por uma pipeline computacional capaz de registrar as imagens consideradas. O trabalho aqui descrito foi desenvolvido primeiramente com o intuito de registrar imagens de espécimens de hipocampo provenientes do projeto CINAPCE e, posteriormente, para registro de imagens de encéfalo inteiro provenientes do Banco de Cérebros da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. A pipeline computacional foi testada com sucesso em imagens reais de dois encéfalos inteiros. A avaliação quantitativa dos registros realizados foi feita comparando segmenta¸coes manuais do hipocampo direito, núcleo caudado esquerdo e ventrículos laterais superiores, realizadas no volume de RM e da histologia registrada. A quantificação do resultado foi feita através do cálculo das métricas coeficiente de Dice (CSD) e distancia espectral ponderada (DEP) sobre as segmentações. A pipeline obteve um CSD médio de aproximadamente 0,77 e um DEP médio de aproximadamente 0,003. Os resultados mostraram que o método foi capaz de registrar as imagens de histologia nas respectivas imagens de RM exigindo interação mínima com o usuário. / Although latest advances in MRI technology have allowed the acquisition of higher resolution images, reliable delineation of cytoarchitectural boundaries is not yet possible based solely on that modality. Histological images are regularly required to locate the exact limits between neuroanatomical structures. Histological processing is nevertheless prone to cause a high amount of tissue distortion, which prevents direct comparison between the two modalities. Neuroimage/neuroanatomy studies that require direct comparison between histology am MRI must include a registration step. Such task is usually manually performed, but that becames infeasible for large histology volumes. Moreover, manual registration is time consuming and inaccurate. This thesis proposes a set of tissue processing recommendations aiming at optimizing the registration proccess, together with a computational pipeline for registering histology to MRI. The herein described work was initially designed to proccess hippocampi specimens from the CINAPCE project and posteriorly improved to process full brain images from the Brain Bank of the Brazilian Aging Brain Study Group. The pipeline was tested on two full brain histology volumes from the Brain Bank of the Brazilian Aging Brain Study Group. Results were assessed by comparison of manual segmentations of the left caudate nucleus, right hippocampus and superior lateral ventricles, performend on both MRIs and registered histology volumes. Quatitative evaluation was performed by computing the Dice coeficient (DC) and normalized weighted spectral distance (WESD) on the segmentations. The pipeline precessing yielded mean DC of 0.77 and mean WESD of 0.0033. The described method was able to sucessfuly register histology to their corresponding MRI volumes with minimal user interaction.

Macrodon ancylodon é um cienídeo demersal distribuído desde a Venezuela até a costa Nordeste do Brasil, sendo um dos principais recursos pesqueiros da costa Norte brasileira. Este trabalho estimou os parâmetros de crescimento, através de métodos diretos e indiretos, assim como descreveu os aspectos reprodutivos utilizando análises macro- e microscópicas dos ovários. As amostras foram obtidas no período de 1998 a 2001, provenientes de atividades pesqueiras industriais e artesanais na costa Norte. Para o estudo do crescimento, pelo método direto, foram realizados cortes transversais dos otólitos sagittae, e, para o método indireto, distribuições modais da freqüência de comprimento. Os parâmetros de crescimento para duas coortes encontradas foram: coorte 1) L¥= 47,4 cm, k= 0,42 e to= -0,3442; coorte 2) L¥= 46,8 cm, k= 0,44 e to= - 0,3302, nascidas em junho e dezembro, respectivamente. As avaliações qualitativas e quantitativas das gônadas indicaram que o período de desova é prolongado, com picos em julho-agosto e dezembro-fevereiro, coincidindo com o final do período de transição do regime de pluviosidade. As fêmeas atingem o comprimento médio de início de primeira maturação gonadal (L50) aos 25,08 cm, com 1,5 anos de idade, e todas estão participando do processo reprodutivo ao atingir 34,00 cm (L100). O estudo histológico indicou existência de estádios maturacionais intermediários aos da classificação macroscópica bem como erros na identificação macroscópica do estádio \"B\", da ordem de 40%. / Macrodon ancylodon is a demersal marine Sciaenidae largely distributed along the Brazilian coast. It is one of the major fisheries resources, mainly in the Northern and Southern regions of the Brazil. This work aims to estimate the growth parameters trough direct and indirect methods as well as estimate the reproductive aspects trough macroscopic and microscopic analyses of the gonads. The samples were obtained in the 1998-2001 period, derived from industrial and artisanal fishing activities that work along the Northern Brazilian coast. In order to conduct the growth study by the direct method, transversal sections were employed over the otolith sagitta. By the indirect method the length frequency modal distribution were observed during the period. The histological study was conducted on macroscopically classified females \"semi-mature\". It was verified the variation of the gonadosomatic relationship, the variation of the condition factor and the frequencies of the maturation stages. The growth parameters couldn\'t be estimated due to the absence of modal distribution in the length frequency and because the otolith sections were unreadable. The macroscopic valuation indicate a prolonged spawning season and has peaks in June-July and November-December, which coincide with the transition of the pluviometric period. The histological study indicate that the female enter this stages \"semi-mature\" more than once per cycle. The female reach the first maturation mean length (L50) of 25,08 cm and all of them participate in the reproductable process when reach 34,00 cm (L100).

A pupunha (Bactris gasipaes Kunth-Arecaceae) é uma palmeira de extrema importância ecológica e na agroindústria palmiteira, sendo essencialmente propagada por sementes, uma vez que, devido às sérias dificuldades na aclimatização, a micropropagação dessa espécie é prejudicada. Neste contexto, foram comparadas por meio de análises anatômicas e fisiológicas, folhas de pupunheiras cultivadas in vitro, ex vitro e in vivo, com o intuito de verificar as prováveis alterações, que possam influenciar na adaptação das microplantas às condições ex vitro, uma vez que a lâmina foliar é o órgão que mais se modifica em resposta as alterações ambientais. As plantas cultivadas in vitro e posteriormente transferidas para ambiente ex vitro, passaram por um processo de aclimatização constituído de três etapas de rustificação, onde na 1ª etapa as microplantas foram mantidas por três dias na sala de crescimento com os tubos de ensaio abertos, apresentando 100% de sobrevivência. Na 2ª etapa (50 dias de aclimatização) as microplantas permaneceram por quarenta e sete dias em sala de crescimento com temperatura e luminosidade controladas, apresentando 95% de sobrevivência. Na 3ª etapa (180 dias de aclimatização), onde as microplantas permaneceram por 130 dias no ripado sob condições de sombra (sombrite com malha 50%), com percentual de 70% de sobrevivência. Durante o processo de aclimatização foram coletadas amostras de folhas sob condição in vitro, ex vitro (aos 50, 90 e 180 dias de aclimatização) e in vivo, onde foram realizadas análises anatômicas por meio de microscopia eletrônica de varredura e de luz, e fisiológicas, pela taxa de condutância estomática, transpiração e fotossíntese, obtidas pelo IRGA (analisador de gás infravermelho), e o teor de clorofila, obtida pelo SPAD-502 (Soil and Plant Analysis Development). Os dados analisados foram comparados entre si, e suas médias submetidas à análise de variância e comparadas pelo teste de Tukey. As folhas das pupunheiras apresentaram as mesmas estruturas anatômicas básicas em todas as condições de cultivo, e como resposta a aclimatização observou-se o aumento na espessura do mesofilo e na quantidade fibras vasculares (área ocupada pelas fibras na lâmina foliar). Também foram observadas alterações fisiológicas, como a diminuição da condutância estomática, com conseqüente queda na taxa de transpiração e fotossíntese logo após o transplante das microplantas para as condições ex vitro; sendo que no decorrer do processo de aclimatização observou-se a recuperação destes fatores com a taxa de fotossíntese se igualando as das plantas in vivo. O mesmo verificou-se em relação ao teor de clorofila que apresentou um aumentou gradativo em relação ao tempo de aclimatização. As alterações anatômicas e fisiológicas não afetaram de forma significativa o processo de aclimatização, ao contrário evidenciaram um mecanismo de adaptação da espécie às condições de cultivo, permitindo considerar como fatores determinantes para o estabelecimento do protocolo de aclimatização, o ambiente com elevada umidade relativa do ar (ex vitro), o substrato composto de solo tipo latossolo vermelho-amarelo e o tratamento profilático com fungicidas. / The peach palm (Bactris gasipaes Kunth-Arecaceae) is a palm of extreme importance in ecological and palm tree agribusiness and is being mainly propagated by seed, once; due to serious difficulties in acclimatization, the micropropagation of this species is a hard process. In this context, pejibaye leaves from in vitro, ex vitro and in vivo cultivated plants were compared using anatomical and physiological analysis in order to detect probable alterations that would influence the microplants adaptation to ex vitro conditions, since the leaf blade is the plant organ that more is modifying in response to environmental changes. The in vitro cultivated plants that were subsequently transferred to ex vitro environment went through an acclimatization process that consisted of three rustification phases. In the first stage the microplants were maintained in the growth room for three days in opened test tubes, featuring 100 % of survival. In the second stage (50 days of acclimatization) the microplants remained for forty-seven days in the growth room with controlled lighting and temperature, resulting in 95% of survival. In the third stage (180 days of acclimatization) the microplants remained for 130 days covered with black shadow screen (\"sombrite\" mesh with 50%) on the sides, resulting in 70% of survival. During the acclimatization process leaves samples of in vitro, ex vitro (to 50, 90 and 180 days of acclimatization) and in vivo cultivated plants were collected and used for anatomical analyses using light and scanning electron microscopy and for physiological analyses using stomatal conductance, transpiration and photosynthesis rates, obtained by IRGA (infrared gas analyzer), and the content of chlorophyll, obtained by the SPAD-502 (Soil and Plant Analysis Development). The analyzed data were compared with each other, and their average subjected to analysis of variance and compared by Tukey test. The peach palm had the same basic anatomical structures in all conditions of cultivation, and in response to the acclimatization process there was an increase in the thickness of the mesophyll and in quantity of vascular fibers (area occupied by the fibers in leaf blade). Physiological changes were also observed, as the decrease in stomatal conductance, with a consequent fall in the photosynthesis and transpiration rates soon after the microplants transplant to ex vitro conditions. During the acclimatization process was the recovery of these factors with the photosynthesis rate equaling the rate of in vivo plants. The same occurred in relation to the level of chlorophyll which showed a gradual increase in relation to the period of acclimatization. These anatomical and physiological changes did not affect significantly the acclimatization process, on the contrary, showed a adaptation mechanism of the species to the cultivation conditions, allowing consider as determining factors for the establishment of a acclimatization protocol, the environment with high relative humidity (ex vitro), the substrate consisting of Red Yellow latosol and the fungicide prophylactic treatment.

Na medicina legal a identificação de produtos de origem animal vem atingindo grande importância. A grande maioria das amostras encontradas na cena do crime são fragmentos de tecido não facilmente degradável, entre estes o tecido ósseo. Por ter sua estrutura composta por uma matriz mineral o osso preserva sua característica morfológica e material genético viável. Os objetivos do presente trabalho foram: caracterizar morfologicamente o tecido íntegro, agregando assim mais informações a respeito da espécie animal, e verificar se os dados da literatura quanto à identificação genética são confiáveis e passíveis de reprodução. Para isso foram utilizados 10 fêmures de espécies diferentes. Este material foi descarnado e teve suas características morfológicas avaliadas. Após realizar a diferenciação macroscópica, o material foi serrado em sua porção diafisária, de onde retiramos um fragmento para avaliação histológica e outro para estudo do material genético. Os métodos de avaliação histológica foram baseados na morfologia do sistema harvesiano, na disposição destes na superfície de corte, conformação do canal de Havers e nas características dos osteócitos. As características morfométricas foram baseadas apenas na área do canal haversiano e no diâmetro do Sistema Harvesiano (osteon). A avaliação genética teve como objeto de estudo o citocromo B, localizado no DNA mitocondrial, que é encontrado em maior quantidade que o DNA nuclear, além de possuir herança materna que lhe confere grande especificidade quanto à espécie animal. Utilizando um par de primers que seleciona uma porção de 358 pares de bases e três enzimas de restrição, HinfI, AluI e Hae III, foi possível identificar geneticamente as 10 espécies estudadas. Este estudo revelou que a metodologia de identificação animal por morfologia macroscópica, microscópica e genética podem ser reproduzidas e são de grande importância dentro da medicina legal. Entretanto, o método genético mostrou-se mais eficiente e confiável quando dispomos de fragmentos ósseos muito reduzidos. / In Legal Medicine, the identification of products from animals has been reaching a great importance. The great majority of samples that have been founded in a crime scene are pieces of tissues that are not easily destroyed, between them, the bone tissue. Because of their structure, composed by a mineral matrix, bone preserves morphologic characteristics and viable genetic materials. The objective of the present work had been: to characterize morphologically the complete tissue, thus adding more information regarding the animal species and the verification concerning the information in literature about the genetic identification, if they are trustworthy and available to reproduction. For this 10 femur of different species had been used. This material was picked the flesh off and its morphologic characteristics had been evaluated. After to carry through the macrocospic differentiation, the material was sawed in its diafisary portion, where we remove a piece for histologic evaluation and another one for genetic material study. The methods of histologic evaluation had been based on the morphology of the harvesian system, in the disposal of these in the cut surface, conformation of the Havers canal and in the characteristics of the osteocitos. The morphometric characteristics had been based only on the area of the haversiano canal and on the diameter of the Harvesiano System (osteon). The genetic evaluation had as study object the citocromo B, located in the mitochondrial DNA, which is better founded than the nuclear DNA, besides possessing mother inheritance that confers a great especify about animal specie. Using a pair of primers that selects a portion of 358 pairs of bases and three enzymes of restriction, HinfI, AluI and Hae III, it was possible to identify genetically the 10 studied species. This study disclosed that the methodology of animal identification for macrocospic, microscopical and genetic morphology can be reproduced and it has a great importance inside of the medical jurisprudence. However, the genetic method revealed more efficient and trustworthy when the work involves the use of very reduced bone pieces