Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T02:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_CarolinaVieirade_M.pdf: 673929 bytes, checksum: de7a7d8f324324fae24215bb7eb7ed66 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O gene PAX9 pertence a uma família de fatores de transcrição denominada família Pax. Esse gene é expresso em tecidos embrionários como somitos, bolsa endodérmica da faringe, brotos distais dos membros e mesênquima derivado da crista neural. Alguns polimorfismos na região promotora desse gene em humanos vêm sendo associados a formas de agenesias não-sindrômicas autossômicas dominantes. No presente trabalho, nós verificamos a expressão gênica e a influência de duas seqüências da região promotora na transcrição do gene PAX9 em ensaios in vitro com células de tecido embrionário de ratos de 13.5 dias obtidas a partir de seus membros, face e regiões do mesencéfalo e romboencéfalo. Os fragmentos da região promotora foram clonados em plasmídios repórteres e transfectados nos três diferentes tecidos embrionários. Nossos resultados das análises de RT-PCR demonstraram que em culturas in vitro, as células dos membros e do SNC expressam o gene PAX9, porém, aquelas obtidas a partir da face não o expressaram. Além disso, os resultados dos ensaios de luciferase mostraram que a atividade dessa nos vetores construídos são mais fracas do que do vetor pGL3-Basic sozinho, sugerindo que essas regiões não são suficientes para guiar a transcrição gênica. / Abstract: PAX9 belongs to a transcriptional factor genes family named Pax. This gene is expressed in embryonic tissues like somites, pharyngeal pouch endoderm, distal limb buds and neural crest-derived mesenchyme. Some polymorphisms in the upstream promoter region of the human PAX9 have been associated with human non-syndromic forms of autossomal dominant agenesis. In the present study we verified the in vitro expression of this gene and the influence of two promoter sequences in the transcription of PAX9 gene, in embryo tissues obtained from digits, face and midbrain and hindbrain regions. These fragments were cloned on reporter plasmid and were transfected into the different cells cultures. Our RT-PCR results showed that in vitro E13.5 limb bud and CNS cells express PAX9, but not in derived facial region cells. Moreover, the luciferase activity of the Pax9 promoter vectors were weaker than pGL3-Basic alone, suggesting that the PAX9 sequences of promoter region are not sufficient to drive PAX9 gene transcription. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Orientador: Miguel Arcanjo Areas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-09T20:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_MonicaAlessandraTeixeirados_D.pdf: 1218402 bytes, checksum: c91dd447b33272e2f271723339af18ec (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Ratos Wistar recém desmamados foram expostos, por via oral, a deltametrina e permetrina para avaliação dos efeitos cardiotóxicos assim como o provável efeito protetor de fibras alimentares sobre a ação desses piretróides. O trabalho teve como objetivos específicos à avaliação eletrocardiográfica, o estudo histológico do fígado e coração e a determinação de resíduos no coração e fígado dos animais experimentais. Para tanto, o trabalho foi dividido em três partes: 1) Ensaio agudo, 2) Ensaio subcrônico, 3) Ensaio subcrônico + administração de fibras. Na primeira fase do experimento, os animais receberam doses equivalentes à 1/2 DL50, 1/5 DL50 e 1/10 DL50 de permetrina e deltametrina em dose única, com o objetivo de se determinar a menor dose onde se observa efeito agudo (LOAEL). Durante o ensaio biológico, os inseticidas foram administrados por gavagem com a utilização de óleo de milho (5 mL/kg) como veículo. Os animais do grupo controle receberam apenas óleo de milho, nas mesmas condições. Após a realização dos eletrocardiogramas (ECG) constatou-se que administração de 1/10 DL50 de permetrina e deltametrina foi a melhor dose para a realização do ensaio subcrônico de 28 dias. Durante o ensaio subcrônico, os piretróides foram administrados, diariamente, nas mesmas condições do ensaio agudo tendo sido verificado no ECG dos animais experimentais efeito cronotrópico negativo, prolongamento do intervalo PR e do complexo QRS, sugerindo retardo na condução dos estímulos dos átrios para os ventrículos. Além disso, o prolongamento dos intervalos QT e QTc indicaram retardo no processo de despolarização e repolarização ventricular, sugerindo risco de morte súbita. O complexo QRS apresentou maior prolongamento somente nos animais que receberam a deltametrina. Na terceira fase do experimento, foi avaliado o possível efeito protetor da pectina (fibra solúvel) e da celulose (fibra insolúvel), sobre a ação cardiotóxica dos piretróides, com a utilização da dose testada no ensaio subcrônico. A pectina se mostrou eficiente na redução dos efeitos tóxicos observados, já que sua presença aumentou a freqüência cardíaca e reduziu o intervalo PR, QT e QTc além do complexo QRS. A ingestão de celulose não alterou o quadro de toxicidade observado nos animais submetidos às substâncias testadas. Após o término dos ensaios subcrônicos, o coração e o fígado foram retirados dos animais experimentais para a avaliação histológica. O coração dos animais não apresentou alterações histológicas após a exposição a ambos os piretróides, no entanto, os fígados dos ratos que ingeriram deltametrina apresentaram células inflamatórias, hapatócitos irregulares, alterações citoplasmáticas, núcleo condensado e nucléolo indefinido. A exposição oral a permetrina induziu as mesmas alterações histológicas observadas nos fígados expostos a deltametrina, com exceção de infiltrações inflamatórias. A administração de pectina na dieta reduziu todas as alterações histológicas observadas anteriormente. No entanto, a celulose não se mostrou eficaz na proteção dos tecidos contra os efeitos histológicos dos piretróides estudados. Ao final do ensaio de toxicidade subcrônica, os resíduos de deltametrina e permetrina foram determinados no fígado e coração através do desenvolvimento/validação de método por cromatografia gasosa acoplada ao detector de captura de elétrons, não tendo sido detectada a presença destes resíduos nos tecidos estudados (LD < 0.9/0.2 para deltametrina e LD < 1/0.2 para permetrina em fígado e coração, respectivamente) / Abstract: The study was conducted on male wealing Wistar rats. They were exposed, by gavage, to deltamethrin and permethrin and the carditoxic effects of the pyrethroids and protective effects of dietary fibres were determinated. The purposes of this study were the eletrocardiographics evaluation, the histopathological study of the liver and heart and the residues determination in heart and liver of the rats. For that, this worky was divided in three parts: 1) Acute exposure, 2) Subchronic exposure, 3) Subchronic exposure + dietary fibres. In the first step, the animals were exposed to LD50, ½ LD50, 1/5 LD50 and 1/10 LD50 of permethrin and deltamethrin to determinate the lowest (LOAEL) dose which the acute effect could be observed. The insecticides were administrated in corn oil (5 ml/kg), intragastrically, in a single dose. Parallel studies were conduced in a control group that received only corn oil. The ECG records showed that 1/10 LD50 dose of permethrin and deltamethrin was the best dose for the conduction of subchronic assay. The experimental groups received the pyrethroids once a day for 28 days, in the same conditions of the first study. The subchronic poisoning resulted in negative chronotropism, prolongation of the PR interval and QRS complex, suggesting decrease of the stimulus from the atriums to ventricles. Besides, the prolongation of QT and QTc intervals indicated a decrease of the despolarization and repolarization processes suggesting sudden cardiac death. The QRS complex prolongation appeared only in the animals that received deltamethrin. In the third fase, the possible protective effects of pectin (soluble fiber) and cellulose (insoluble fiber) on pyrethroids cariotoxicity were evaluated. For this study, 1/10 LD50 dose was utilizated. Pectin increased the heart rate and decreased the PR, QT and QTc intervals and QRS complex, showing be efficient in reducing the cardiotoxicity. The ingestion of cellulose did not change the effects in heart observed in experimental animals. After the subchronic exposition, the heart and liver were taken in order to evaluate histologic changes. No changes were observed in the hearts of the rats exposed to both of pyrethroids. However, the liver of the animals exposed to deltamethrin showed inflamatory cells, irregular hepatocytes, cytoplasmatic changes, condensed nucleus and indefinite nucleolus. The permethrin induced the same histological changes observed in the livers exposed to the deltamethrin, exception of the inflamatory infiltrations. The pectin in the diet reduced all the histological changes previously observed and the cellulose did not efficient in the protection of the studied tissues. In the end of the subchronic essay, the tissue residues levels of permethrin and deltamethrin in heart and liver were estimated by gas chromatography with electron-capture detection. Residues of permethrin and deltamethrin were not observed in the studied tissues. (LOD < 0.9/0.2 for deltamethrin and LOD < 1.0/0.2 for permethrin in liver and heart, respectively) / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Diversos autores comprovam a influência de um episódio de desnutrição crônica no crescimento pôndero-estatural. Entretanto, não são definidas as repercussões da desnutrição protéica precocemente corrigida sobre o potencial genético de crescimento, uma vez que é difícil distinguir o papel da desnutrição do ambiente onde habitualmente ocorre. Deste modo, esta pesquisa teve como objetivo analisar os efeitos da desnutrição protéica precocemente corrigida na morfologia da epífise de crescimento. Assim, como modelos experimentais foram utilizados 13 coelhos adultos da raça Nova Zelândia Branco, sendo 12 fêmeas designadas como matrizes e 1 macho como reprodutor. Foram estabelecidos quatro grupos de acordo com o padrão alimentar: Grupo 1 (gestação e lactação normoprotéicas), grupo li (gestação normoprotéica e lactação hipoprotéica), grupo III (gestação e lactação hipoprotéicas) e grupo IV (gestação hipoprotéica e lactação normoprotéica) Após desmame todos os animais apresentaram correção protéica em suas dietas. Para coleta dos dados, os láparos foram submetidos, semanalmente, às mensurações corpóreas: comprimento crânio-caudal, peso e perímetro cefálico No 100° dia de vida, os animais foram sacrificados para mensurações ósseas e extração da epífise de crescimento proximal da tíbia para análise histológica. Dessa forma, foi possível concluir que a desnutrição protéica precocemente corrigida acarreta efeitos detetérios sobre a morfologia da epífise de crescimento de coelhos, sendo o periodo de lactação considerado como determinante do desenvolvimento pleno do potencial genético de crescimento. / Several authors prove the influence of an episode of chronic malnutrition in the growth in weight and stature. Meantime, there are not defined the repercussion of the protein malnutrition corrected at early age on the genetic potential of growth, as soon as it is difficult distinguishes the paper of the malnutrition of environment where it usually takes place. ln this way, this research had how aim to analyse the effects of the protein malnutrition corrected at early age in the morphology of the epiphyses of growth. So, experimental modeis were used 13 adult rabbits of the race White New Zealand, being 12 females designated like wombs and 1 male like reproducer. Four groups were estabiished in accordance with the food standard: Group 1 (normal protein gestation and lactation), group II (normal protein gestation and low protein lactation), group III (10w protein gestation and lactation) and group IV (10w protein gestation and normal protein lactation) After wean ali the animais presented protein correction in their diets. For collection of the datas, the young rabbits were subjected, weekly, to the corporal measure: length skull-torrent, weight and cephalic perimeter. In the 100th day of life, the animais were sacrificed for bone measure and extraction of the epiphyses of growth proximal of the tibia for histological analysis. In this form, it was possible to end that the protein malnutrition corrected at early age brings harmful effects on the morphology of the epiphyses of growth of rabbits, being the period of lactation was considered as a determinant of the fulI development of the genetic pote ntial of growth.

Introdução: A síndrome de Cowden é um distúrbio multissistêmico de predisposição a diversos tipos de câncer e padrão de herança autossômica dominante. As lesões cutâneas e viscerais são consideradas proliferações hamartomatosas ou tumores malignos. As lesões mucocutâneas estão presentes em quase 100% dos indivíduos afetados. No entanto, alguns autores consideram que as manifestações mucocutâneas da síndrome de Cowden são, na realidade, verrugas virais em diferentes estágios de evolução. Há poucos estudos sobre manifestações orais da síndrome de Cowden. Objetivos: Estudar as manifestações orais da síndrome de Cowden em 9 pacientes, clínica e histopatologicamente. Métodos: As lesões orais presentes em 9 pacientes com diagnóstico de síndrome de Cowden foram estudadas através de revisão de prontuário, fotografias e biopsias em seus distintos aspectos. Resultados: Todas as lesões biopsiadas mostraram aspectos histopatológicos característico de verrugas virais em diferentes estágios de evolução. Conclusão: Nossos achados parecem reforçar a hipótese de que as manifestações mucocutâneas da síndrome de Cowden representam, na realidade, verrugas virais. Estudos adicionais são necessários para explicar porque esta síndrome, causada por uma mutação de um gene supressor tumoral, poderia causar propensão a verrugas / Background: Cowden disease is a multisystemic cancer predisposition disorder, inherited in a autosomal dominant pattern. Cutaneous and visceral lesions are either malignant tumors or are believed to represent hamartomatous growths. Mucocutaneos lesions are present on almost 100% of affected individuals. Nonetheless, some authors consider that the mucocutaneous manifestations of Cowden disease are, in reality, viral warts at distinct steps of evolution. There are only a few studies regarding the oral manifestation of Cowden disease. Objectives: To study the oral manifestation of Cowden disease in nine patients clinically and histopathologically. Methods: The oral mucosal aspects of nine patients with clinical diagnosis of Cowden disease were studied by reviewing medical charts, photographs and biopsies in their different aspects. Results: All biopsied lesions depicted histopathological aspects suggestive of viral warts at distinct steps of development. Conclusion: Our findings seem to reinforce the poorly understood hypothesis that the mucocutaneous manifestations of Cowden disease are in reality viral warts. Additional studies are needed to explain why a syndrome caused by the mutation of a tumor suppression gene may cause propensity to warts

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-01-02T16:23:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Janaína Ribeiro Costa - 2016.pdf: 3702249 bytes, checksum: c5c72df64f423c647fbe09f7ed58d147 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-01-02T16:40:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Janaína Ribeiro Costa - 2016.pdf: 3702249 bytes, checksum: c5c72df64f423c647fbe09f7ed58d147 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-02T16:40:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Janaína Ribeiro Costa - 2016.pdf: 3702249 bytes, checksum: c5c72df64f423c647fbe09f7ed58d147 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-10-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The prostate is an accessory gland of the mammalian reproductive system with important role in reproduction. The prostatic tissue is regulated by hormones with its homeostasis dependent on a balanced hormonal interaction. The exposure to environmental chemicals with hormonal activities can cause disorders in the prostate increasing the probability of this gland to develop major lesions. Hormonally active chemicals are present in the environment in substantial amounts and forms. Amongst them are the parabens, a class of preservatives with antifungal and antimicrobial activities commonly used in the cosmetic, pharmaceutical and food industry. They are known for affecting the reproductive system and act as endocrine disruptors that mimics the physiological effects of estrogens. Up their, it is unclear whether the exposure to parabens alters the prostate morphophysiology. Therefore, it is relevant to comprehend whether the methylparaben can lead to the development of lesions in the prostate in adult gerbils. Thus, the aim of this work was to evaluate the prostate of adult gerbils exposed to methylparaben. For this, males and females aging 90 days received, through gavage, 500 mg/kg of methylparaben diluted in 1% hydroxyethyl cellulose. These animals were divided into three subgroups that were euthanized after 3 (3P), 7 (7P) and 21 days of treatment (21P). The prostates were collected for structural, cytochemical and immunohistochemical analysis. The results demonstrated that the exposure to methylparaben reduced the body weight of males of 3P and 7P groups, and testis weight of 7P and 21P groups. In the females we observed an increase in the prostatic complex weight of the 21P group. In both sexes, Gömöri’s reticulin staining showed a remodeling of the stromal compartment with reticular fibers disorganization and collagen fibers increase. Besides, males and females presented important morphological alterations as hyperplasic growth foci. In females, it was observed the presence of prostatic intraepithelial neoplasia, stromal inflammatory foci and an increase of ERα-positive cells. Immunohistochemical data showed an increase of ARpositive cells and in the proliferation rates for both genders. Altogether, these data demonstrate that methylparaben was capable to interfere in androgenic and estrogenic receptors, suggesting that this chemical might have estrogenic and anti-androgenic activity in the prostate. In males there was an intense immunostaining for MGMT in all treated groups whereas in females only in the 3P group. The immunostaining for MGMT in the prostate of males and females suggests that the exposure to methylparaben made the gland more susceptible to epigenetic modifications. The results obtained with this study are alarming, as they indicate that the increasing consumption of parabens by urban population can be related with the arising of morphophysiological alterations in prostate. / A próstata é uma glândula acessória do aparelho reprodutor dos mamíferos e tem importante função na reprodução. O tecido prostático é regulado por hormônios esteroides, sendo que sua homeostase depende de uma interação hormonal equilibrada. A exposição a químicos ambientais que apresentam atividade hormonal pode ocasionar distúrbios na próstata, aumentando a probabilidade dessa glândula desenvolver lesões. Compostos químicos hormonalmente ativos estão presentes em grande quantidade e de diversas formas no meio ambiente. Dentre estas substâncias estão os parabenos, uma classe de conservantes com ação antimicrobiana e antifúngica amplamente utilizada na indústria cosmética, farmacêutica e alimentícia. Os parabenos são conhecidos por perturbar o sistema reprodutivo e agir como desreguladores endócrinos que mimetizam os efeitos fisiológicos dos estrógenos. Até o momento, não está claro se os parabenos podem alterar a morfofisiologia da próstata. Portanto, é relevante entender se o metilparabeno pode predispor a próstata a desenvolver lesões na idade adulta. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a próstata de gerbilos adultos expostos ao metilparabeno. Para isto, machos e fêmeas com 90 dias de idade receberam, por gavagem, 500 mg/kg de metilparabeno diluídos em hidroxietil-celulose a 1%. Estes animais foram divididos em três subgrupos que foram sacrificados após 3, 7 e 21 dias de tratamento. As próstatas foram coletadas para análises estruturais, citoquímicas e imunohistoquímicas. Os resultados monstraram que a exposição ao metilparabeno diminuiu o peso dos testículos dos grupos 7 e 21 dias. Nas fêmeas houve aumento do peso do complexo prostático do grupo de 21 dias. Em ambos os sexos, a Reticulina de Gömöri mostrou um remodelamento do compartimento estromal com desorganização das fibras reticulares e aumento das fibras colágenas. Além disso, machos e fêmeas apresentaram alterações morfológicas importantes como focos de crescimento hiperplásico do epitélio secretor. Nas fêmeas observou-se a presença de neoplasia intraepitelial prostática, focos inflamatórios estromais, e aumento de células ERα- positivas. Houve um aumento do número de células AR-positivas, e aumento das taxas de proliferação celular em ambos os sexos. Em conjunto, estes dados indicam que o metilparabeno foi capaz de interferir com receptores androgênicos e estrogênicos, sugerindo que este químico pode ter atividade estrogênica e antiandrogênica na próstata. Nos machos houve uma intensa imunomarcação para MGMT (O6-Metilguanina-DNAMetiltransferase) em todos os grupos tratados e nas fêmeas apenas no grupo 3P. A imunomarcação para MGMT na próstata masculina e feminina sugere que a exposição ao metilparabeno tornou a glândula mais suscetível a modificações epigenéticas. Os resultados obtidos com este estudo são relevantes, pois demonstram que o consumo crescente de parabenos pelas populações humanas pode estar relacionado com o surgimento de alterações morfofisiológicas da próstata.

Os organismos do filo Myxozoa são endoparasitas obrigatórios que infectam principalmente peixes em diversas regiões do mundo, estando entre os mais importantes patógenos de peixes, com mais de 2180 espécies descritas porém, pouco se conhece deste parasita em peixes do Brasil. Neste estudo foram realizadas coletas entre abril de 2011 a agosto de 2012, onde foram coletados oito exemplares de piapara (Leporinus obtusidens) e dezessete exemplares de dourado (Salminus brasiliensis), oriundos do rio Mogi-Guaçu, próximo a Cachoeira de Emas, localizada no município de Pirassununga, estado de São Paulo. As análises morfológicas (microscopia de luz, histologia e a análise ultraestrutural), técnicas de biologia molecular (PCR e sequenciamento) foram utilizadas na identificação de duas novas espécies de Henneguya e análise filogenética do gene 18S rDNA foi realizada para avaliar a relação filogenética desta duas novas espécies com outras espécies de mixosporídeos. Duas novas espécies foram encontradas neste estudo. Uma delas foi encontrada infectando a nadadeira de L. obtusidens e é descrita neste estudo como Henneguya sp. 1 e uma outra espécie encontrada infectando a membrana do arco da branquial e na membrana entre os raios da nadadeira de S. brasiliensis, a qual foi aqui descrita como Henneguya sp. 2. A análise histopatológica revelou que Henneguya sp. 1 ocasionou uma leve compressão no tecido adjacente. A análise ultra-estrutural permitiu a compreensão da interface parasita-hospedeiro e o processo de esporogênese das duas espécies descritas; além disso, foi observado a presença de vesículas esbranquiçadas para Henneguya sp. 2, com função ainda desconhecida. Nos estudos filogenéticos, utilizando os métodos máxima parcimônia e máxima verossimilhança para ambas as espécies, foi avaliado no estudo 1 que Henneguya sp. 1, parasita de peixe characiforme, aparece isolado dando origem a um clado irmão de Henneguya spp., parasitas de siluriformes, characifomes e esociformes; já no estudo 2, a análise filogenética da espécie Henneguya sp. 2, também parasita de peixe characiforme, foi observado a formação de um clado com 3 espécies parasitas de characiformes, sendo duas espécies de Henneguya descritas neste estudo e o Myxobolus oliveirai. / The parasites of Myxozoa are endoparasites that infect mainly fishes in several parts of the world, being this group considered one of the most important pathogens of fishes, with more than 2180 species described. However little is known about this group of parasite in Brazil. During this study, eight piapara (Leporinus obtusidens) and seventeen dourado (Salminus brasiliensis) were caught in Mogi-Guaçu river in a period from April 2011 to August 2012, near waterfall Cachoeira de Emas located at Pirassununga city, state of São Paulo, Brazil. Morphological analyses (light microscopy, histology and ultrastructure) and molecular biology techniques (PCR and sequencing) where done to identify two new species of Henneguya and phylogenetic analyses using the 18S rDNA gene were performed to evaluate the phylogenetic relationship of this two new species among others myxosporeans available on GenBank. Henneguya sp. 1 has been described infecting the fin of L. obtusidens and Henneguya sp. 2 has been described infecting the gill arch membrane and the fin membrane of S. brasiliensis. The histopathological analyses revealed that Henneguya sp. 1 occasioned a small compression of adjacent tissue of the host. Ultraestructural analyses showed the host-parasite\'s interface and the sporogenesis of the two Henneguya spp. furthermore Henneguya sp. 2 showed several whitish vesicles with an unknown function. Phylogenetic studies using the maximum parsimony and maximum likelihood methods, showed in the first study Henneguya sp .1 appearing alone as a basal branch of a sister clade composed by Henneguya parasites of siluriforms, characiforms and esociforms fishes, and the second study showed Henneguya sp. 2 grouped with Hennegua sp. 1 and Myxobolus oliveirai, both parasites of characiforms fishes.

Avaliaram-se os efeitos da administração do extrato seco de maracujá (Passiflora incarnata), veiculado na dieta, sobre a morfologia dos hepatócitos de juvenis de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus). Peixes isolados (86,50 &plusmn; 10,17 g) receberam durante 28 dias ração comercial extrusada (32% PB - 2% biomassa) contendo o extrato diluído em alginato de sódio nas doses 0 (controle), 50, 100 e 200 mg/Kg, (n = 6 peixes/tratamento), registrando-se diariamente o consumo. No início e ao final do experimento cada indivíduo foi exposto (30 minutos) à reflexão da própria imagem em espelho (presença virtual de um coespecífico - estresse social), sendo a seguir anestesiado (2-fenoxietanol 0,5 mL/L) para realização de biometria e coleta de sangue (veia caudal) para determinação dos níveis plasmáticos de glicose e cortisol. Após 28 dias todos os animais foram sacrificados para remoção do fígado e obtenção de fragmentos utilizados na contagem de células e avaliação da morfometria do citoplasma dos hepatócitos (H/E), observando-se também as reservas de glicogênio hepático (PAS). Visando a comparação dos efeitos do estresse social natural com aquele empregado no experimento, seis peixes provenientes de um grupo de 30 indivíduos foram também sacrificados e utilizados como referência (valores basais) para avaliação dos parâmetros histológicos. Os dados foram submetidos a ANOVA, utilizando-se o proc mixed SAS 8.0 (p<0,05) para os parâmetros consumo de alimento, ganho em peso e bioquímica sangüínea (cortisol e glicose) e GLM SAS 8.0 (p<0,01) para a contagem de células e morfometria dos hepatócitos. Verificou-se que os pesos e os comprimentos iniciais não diferiram, que o consumo de alimento não foi alterado pela adição do extrato e que todos os peixes, independentemente do tratamento, cresceram significativamente. Os níveis de cortisol e de glicose também não diferiram inicialmente entre os grupos e não foram alterados pela presença do agente ou pela adição do extrato. Porém, observou-se um aumento significativo da glicose e redução dos níveis de cortisol em todos os peixes. A adição do extrato nas diferentes doses provocou aumento crescente e significativo da área citoplasmática e redução do número de células em todos os animais, com destaque para a dose 100 mg/Kg. O mesmo não ocorreu nos peixes do grupo controle, cujas áreas citoplasmáticas foram significativamente menores, em decorrência de um menor acúmulo de glicogênio hepático. Embora os efeitos do agente estressor empregado não tenham sido detectados pela análise dos parâmetros bioquímicos sangüíneos, verificou-se que este procedimento provocou alterações metabólicas que contribuíram para a depleção dos estoques de glicogênio no fígado. Este efeito parece ter sido revertido nos peixes que receberam a dieta contendo o extrato de maracujá que, por meio de mecanismos não elucidados neste trabalho, contribuiu para a manutenção ou aumento dos estoques de glicogênio hepático. Concluiu-se que o extrato de maracujá veiculado na dieta, na dose de 100 mg/Kg, protege juvenis de tilápia da depleção dos estoques de glicogênio hepático causada pelo estresse social. / Effects of Passion fruit (Passiflora incarnata) dry extract administration on hepatocyte morphometry of juveniles Nile tilapias (Oreochromis niloticus) were investigated. Male isolated fish (86,50 &plusmn; 10,17 g) were daily fed (28 days) with extruded commercial ration (32% crude protein - 2% biomass) containing the extract diluted in sodium alginate in graded doses 0 (control), 50, 100 and 200 mg/Kg (n= 6 animals/treatment), registering daily consumption. At the start and after 28 days of experiment each fish was displayed to the reflection of own mirror image (30 minutes) in order to simulate the virtual presence of a coespecific (social stress). Then the animals were anesthetized (2-fenoxietanol) for biometric measures and blood collection (caudal vein) for determination of the plasmatic levels of glucose and cortisol. After 28 days the animals were sacrificed for removal of liver fragments samples used to histological examination (cytoplasmic area and number of cells - HE stained; hepatic glycogen supplies - PAS stained). Aiming the comparison of the natural social stress with that utilized in this experiment, six fish from a group of 30 individuals were also sacrificed and used as reference (basal values) for the histological parameters evaluation. Food consumption, weight gain and sanguine biochemist parameters (cortisol and glucose) were submitted to ANOVA, SAS 8.0 proc mixed (p<0,05) and data of cells counting and hepatocyte morfometry to the same test, using SAS 8.0 GLM (p<0,01). The initial weights and lengths were similar, the food consumption was not modified by the addition of the extract and all the fish grew significantly during the experiment. Initial levels of cortisol and glucose were also similar between groups and did not modify by the stressor agent or treatments with the extract. However, a significant increase of glucose and reduction of cortisol levels were observed for all the fish. The addition of different extract doses provoked significant and noticeable increase of the cytoplasmic area and reduction of the cells number, mainly for 100 mg/Kg dose. In the control group cytoplasmatic area was significantly minor due to lesser hepatic glycogen accumulation. The stressor agent did not affect sanguine biochemists parameters but seems to lead metabolic alterations that had collaborated with the depletion of liver glycogen supplies. This effect seems to have been reverted in the fish that received the diet contend Passion fruit extract that, by means of a mechanism not elucidated in this experiment, contributed for the maintenance or increase of hepatic glycogen supplies. It was conclude that Passion fruit extract diet inclusion at 100 mg/Kg dose protects the tilapia against the hepatic glycogen depletion caused by social stress.

Diversas espécies de anuros da família Leptodactylidae se reproduzem em corpos dágua sazonais, temporários e mantidos exclusivamente por chuvas. Em períodos de estiagem prolongada a poça pode secar completamente, ocasionando elevadas taxas de mortalidade de ovos e girinos dessas espécies, podendo exercer forte pressão seletiva na evolução de mecanismos de resistência e sobrevivência nas fases iniciais do desenvolvimento. Algumas espécies de girinos conseguem sobreviver cerca de cinco dias fora dágua o que pode proporcionar uma adaptação vantajosa, porque possibilita a sobrevivência dos girinos por um período que pode ser suficiente para a reincidência de novas chuvas e restabelecimento do corpo dágua. Apesar dessa capacidade de sobrevivência, pouco se sabe sobre as possíveis modificações que a desidratação pode causar na locomoção e na morfologia durante o desenvolvimento desses animais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do estresse hídrico: (1) no nível de sobrevivência e perda de massa corpórea; (2) no desempenho locomotor; (3) na morfologia externa (morfometria linear) e interna, analisando tanto o volume total quanto o volume visceral (estereologia); e (4) no tempo até metamorfose após o estresse. Utilizamos girinos de duas espécies de anuros, Leptodactylus fuscus (Leptodactylinae) e Physalaemus nattereri (Leiuperinae), ambas as espécies se reproduzem em corpos dágua temporários, em áreas com estação seca definida estando, portanto sujeitas as mesmas pressões seletivas. Além disso, as duas espécies apresentam modos reprodutivos diferentes, podendo apresentar diferentes graus de resistência ao estresse hídrico. Os girinos das duas espécies foram divididos em dois grupos, os que ficaram em água (grupo controle) e os que foram submetidos ao estresse hídrico (grupo tratamento), por três períodos de tempo (12, 24 e 72 horas). Houve diferenças significativas para valores de perda de massa entre os grupos controle e tratamento em ambas as espécies, sendo o grupo tratamento que mais perdeu massa corpórea em todos os períodos, além disso, quase metade dos girinos de P. nattereri morreram em 36 horas de estresse. Não houve diferenças significativas para os dados de desempenho locomotor e volume total entre os grupos testado para girinos de L. fuscus, mas houve diferenças morfometricas significantes nos componentes relacionados a cauda e no volume visceral, onde, o intestino do grupo tratamento foi menor que do controle. Já em P. nattereri, houve diferenças significativas entre os grupos testados para desempenho locomotor, volume total, morfometria da cauda e volume visceral, sendo o estomago e anexo do tratamento maior que do controle. Nossos resultados sugerem que a exposição ao estresse hídrico não afeta significativamente a morfologia e o desempenho locomotor dos girinos de L. fuscus. No entanto, girinos de P. nattereri apresentaram uma sensibilidade ao estresse hídrico prolongado, principalmente sobre o seu desempenho locomotor. / Several species of frogs (Leptodactylidae) breed in temporary pools maintained exclusively by rainfall. These pools easily dry out causing high mortality of eggs or tadpoles thereby possibly exerting strong selective pressure on the evolution of resistance mechanisms and survival in the early stages of development. However, the tadpoles of some species can survive up to five days in pools that are drying out, needing only a humid substrate for development which can provide an advantageous adaptation, because it enables the survival of tadpoles for a period that may be enough for the recurrence of new rains and restoration of the water body. Despite this ability to survive out of water, it is not known which possible damages dehydration stress causes in tadpoles during their ontogeny. The aim of this study was to evaluate the effect of hydric stress on: (1) the level of survival and weight loss; (2) locomotor performance; (3) external (linear morphometry) and internal morphology, analyzing the total volume and visceral volume (stereology); and (4) the time of development after stress. We used tadpoles of two species, Leptodactylus fuscus (Leptodactylinae) and Physalaemus nattereri (Leiuperinae), both species breed in temporary ponds in areas with well-defined dry season therefore these species are subject to the same selective pressure. In addition, the two species show different reproductive modes, and may possess different degrees of resistance to water stress. To this end, the tadpoles were divided into two groups, those who stayed in 100 ml of water (control group) and those that were subjected to hydric stress (treatment group) for three time periods (12, 24 and 72 hours). Significant differences for weight loss were found between the groups (control/treatment) in both species, with the treatment group losing more weight in all stress levels. Furthermore almost half of P. nattereri tadpoles died within 36 hours of stress. There was no significant difference for locomotor performance and total volume between control group and treatment group of L. fuscus tadpoles, but morphometric analyses indicated a significant difference in the components related to tail and visceral volume, with the gut of the treatment group was lower than the control. In P. nattereri tadpoles, there were significant differences between the groups tested for locomotor performance, total volume, tail morphometry and visceral volume, with the stomach of the treatment group being greater than in the control group. Our results suggest that hydric stress has a significant effect on locomotion and morphology of P. nattereri tadpoles, but not in L. fuscus.

O mapeamento da imunorreatividade ao neuropeptídio FMRF-amida no SNC e na musculatura pediosa de Megalobulimus oblongus foi realizado com o objetivo de dar continuidade aos estudos que vem sendo realizados nesta espécie, com o interesse em estabelecê-lo como modelo experimental em estudos neurobiológicos. O neuropeptídio FMRF-amida foi o primeiro peptídio nativo de invertebrados a ser purificado e seqüenciado, a partir do extrato de gânglios cardioativos do molusco Macrocallista nimbosa. Ele atuaria sobre os receptores metabotrópicos, induzindo a abertura dos canais iônicos de K+ tipo S (sensíveis à serotonina (5HT)), hiperpolarizando a membrana celular e assim, aumentando o limiar para o desencadeamento do potencial de ação. A distribuição da imunorreatividade à FMRF-amida em M. oblongus foi investigada empregando-se a técnica imunohistoquímica com anticorpo não-marcado de Sternberger (1979). Todos os gânglios nervosos centrais apresentaram neurônios e fibras FLI (FMRF-amide-like immunoreactivity), assim como suas comissuras, conetivos e a maioria dos nervos emergentes destes gânglios. Nos cortes da musculatura pediosa observou-se também uma intensa imunorreatividade a FMRF-amida. O maior número de neurônios FLI foi encontrado nos gânglios cerebrais com seus tamanhos variando de pequeno a grande. O corpo dorsal apresentou grande quantidade de fibras viii imunomarcadas. No mesocérebro foram detectados alguns agrupamentos FLI junto ao neuropilo e à comissura cerebral e neurônios dispersos na sua porção ântero-medial. O pró-cérebro mostrou-se repleto de neurônios globulosos FLI. Vários agrupamentos foram observados nos lobos pedal, pleural e comissural do pós-cérebro. Nos gânglios pedais houve intensa imunomarcação em agrupamentos neuronais localizados principalmente nas regiões posterior e lateral dos gânglios. Na região anterior foi observado um par de neurônios gigantes FLI. Uma distribuição homogênea de neurônios FLI foi observada por toda a extensão dos gânglios pleurais, com a exceção de apenas um neurônio grande localizado no gânglio pleural esquerdo. A diferença no tamanho dos dois gânglios parietais foi constatada também em M. oblongus. No hemigânglio esquerdo, o menor, foi identificado um neurônio gigante (300 µm). O gânglio direito apresentou um número maior de neurônios FLI, de tamanhos variados. O gânglio visceral foi a estrutura que mais apresentou neurônios grandes e gigantes por toda a sua extensão, com imunorreatividades variáveis. O par de gânglios bucais possuía agrupamentos neuronais FLI médios e grandes. Os neurônios gigantes não se mostraram imunorreativos, ou foram apenas levemente imunomarcados no trofospôngio. Na musculatura pediosa foram observadas fibras nervosas de diferentes calibres nas regiões dorsal, medial e ventral e sobre as células musculares. Identificaram-se gânglios nervosos nos pontos de intersecção dos ramos nervosos e malhas nervosas que formavam plexos nervosos nas regiões ventral e dorsal da musculatura pediosa de M. oblongus.

O gênero Eucalyptus tem se mostrado um dos mais vantajosos na produção de bens e serviços florestais pela silvicultura brasileira, principalmente por sua rapidez no crescimento. A propagação vegetativa de Eucalyptus spp. permite a rápida multiplicação de genótipos selecionados alcançando aumento imediato na produtividade dos plantios clonais. Com o objetivo de avaliar o efeito do “pulse” na propagação in vitro de Eucalyptus grandis, testou-se as interações entre concentrações de BAP (Benzilaminopurina), tempo de exposição e pH, bem como as alterações morfológicas que esses fatores causam na estrutura interna dos explantes. O trabalho foi realizado na Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” – ESALQ/USP. Doses crescentes de BAP (0, 200, 400 e 600 mg.L-1) expostas durante três tempos (1, 2 e 3 horas) com dois valores de pH (3,0 e 5,8) representavam os tratamentos. Após 21 dias de cultivo avaliou-se o número de brotos por tratamento, taxa de multiplicação e biomassa produzidas para cada tratamento. As análises histológicas também foram realizadas após o fim do experimento. O fator pH não apresentou nenhuma interação com os demais fatores. A concentração 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas apresentaram os tratamentos mais significativos na multiplicação do E. grandis. Doses com 600 mg L-1 de BAP apresentaram-se tóxicas aos explantes. Houve intensificação da divisão celular no parênquima cortical e procâmbio na região basal do explante representada pelo surgimento de meristemóides evidenciando a maior capacidade de resposta organogênica desses tecidos em resposta aos tratamentos 200 mg.L-1 de BAP durante 1 e 2 horas. O uso de “pulse” como ferramenta na micropropagação de Eucalyptus grandis representa uma alternativa viável para redução de tempo e custos. / The genus Eucalyptus has proved to be one of the most profitable means of producing goods and supplying forestry services used by Brazilian silviculture, mainly because of its fast growth. The vegetative propagation of Eucalyptus spp. allows the fast reproduction of selected genotypes aiming at the immediate increase of cloned plantations. By analyzing the pulse treatment effect in vitro propagation of Eucalyptus grandis the evaluation between the concentrations of Bensylaminopurine (BAP), time exposure and pH interaction such as its morphological changes that those factors caused in the internal structure of the explants. This work has been carried out at Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz” – ESALQ/USP. The treatments consisted of increasing doses of Benzylaminopurine (0, 200, 400 and 600 mg.L-1), three exposure time (1, 2 and 3 hours) with two values of pH (3,0 e 5,8). The results were taken after 21-day of cultivation. The number of sprouts per treatment, the reproduction rate and the produced biomass for each treatment were recorded. In addition the histological analyses were aslo carried out at the end of the experiment. The pH did not present any form of interaction with the other factors but he most significant treatments of E. grandis reproduction was found in the concentration 200 of BAP during the 1st and 2nd hour. The dose 600 mg.L-1 of BAP turned out to be toxic for the explants. It was observed that there was an increase of cell division in the cortical parenchyma and procambium represented by the arising of meristems resulting to a greater capacity of organogenetic answer of these tissues due to the response of 200 mg.L-1 of BAP treatment during 1st and 2nd hours. The use of pulse treatment as a tool of micropropagation of Eucalyptus grandis represented a feasible alternative for the reduction of time and cost.