Orientador: Sergio Marangoni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T17:42:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Huaco_FrankDenisTorres_D.pdf: 4738657 bytes, checksum: 14194646f90e694d6d1598ef9b7fc870 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Neste trabalho descrevemos a purificação, caracterização estrutural e os efeitos locais e sistêmicos de uma nova metaloprotease de baixa massa molecular, denominada BtaHF (Bothriopsis taeniata Hemorrhagic Factor). A proteína foi purificada a partir do veneno total da serpente Bothriopsis taeniata usando cromatografía exclusão molecular convencional (Sephadex G-75), seguida de uma cromatografia de alta eficiência de troca iônica (coluna DEAE 8HR APMinicolumn). A nova metaloprotease BtaHF apresenta um alto grau de pureza e homogeneidade molecular e possui uma massa molecular de 25968,16 Da. A BtaHF apresentou atividade caseinolítica com uma temperatura e pH ótimos de 37-40 oC e 8, respectivamente. A atividade caseinolítica da BtaHF foi inibida por EGTA, EDTA e DTT, mas os inibidores PMSF e SBTI não apresentaram efeito. O íon Ca+2 é importante para a estabilidade da metaloprotease BaHF, aumentando atividade caseinolítica da enzima, entretanto, os íons Zn+2 e Mn+2 inibem a atividade enzimática desta enzima. A BtaHF é uma enzima ?-fibrinogênolítica por degradar rapidamente à cadeia A do fibrinogênio após 15 minutos de incubação, enquanto a cadeia B? é completamente degradada após 6 horas. Por outro lado, a BtaHF não possui atividade fibrinolítica ou arginine amidase. A análise de composição de aminoácidos mostrou que a BtaHF possui caráter ácido e apresenta 6 resíduos de cisteína. No estudo de homologia a BtaHF apresentou maior identidade sequencial com metaloproteases com atividade hemorrágica da classe P-I como a BaP1 (Bothrops asper). A metaloprotease BtaHF possui atividade hemorrágica fraca com uma dose hemorrágica mínima de 20,14 ?g/animal. Esta metaloprotease mostrou atividade edematogênica que mostrou ser dose-dependente e teve um efeito permaneceu após 6 horas de injeção. Ambos os efeitos estão relacionados à atividade proteolítica e ao correto enovelamento da BtaHF, una vez que foram inibidas por agentes quelantes (EDTA e EGTA) e redutor (DTT). A metaloprotease BtaHF não possui atividade miotóxica, embora tenha atividade citotóxica em fibroblastos C2C12. A análise histológica do músculo gastrocnêmio de camundongo confirmou a atividade hemorrágica e edematogênica da metaloprotease, assim como, a ausência de atividade miotoxica. A metaloprotease BtaHF produz efeitos sistêmicos específicos quando injetado via endovenosa em camundongos. A nível do tecido pulmonar, a toxina produz alteração da estrutura alveolar com hemorragia significativa, engrossamento dos septos alveolares e inflamação. A BtaHF não produz hemorragia no tecido renal, mas alterou a estrutura glomerular, além de alterações no citoplasma das células dos túbulos proximal e distal. Contrariamente, esta toxina não produz efeito nenhum a nível hepático. A BtaHF consome o fibrinogênio plasmático de modo dose e tempo-dependente, produzindo incoagulabilidade sanguínea após uma hora. Estudos in vitro revelaram atividade pro-coagulante dose-dependente, ao reduzir os índices PT e APPT. A utilização de metodologias de purificação de alta eficiência permitram a purificação da metaloprotease BtaHF. Assim, esta abordagem pode ser aplicada nos estudos bioquímicos, estrutura-função, fisiológicos e farmacológicos, podendo deduzir o papel desenvolvido pela metaloprotease purificada nos efeitos biológicos produzidos pelo veneno total de Botriopsis taeniata. As informações produzidas no presente trabalho permitiram sugerir que as principais funções das metaloproteases de veneno de serpente da classe P-I são manter a hemorragia característica dos envenenamentos botrópicos e participar da imobilização da presa promovendo rápidos efeitos próinflamatórios / Abstract: In this work we described the purification, structural characterization and the local and systemic effects of a new low molecular weight snake venom metalloproteinase, named BtaHF. This protein was purified from the Bothriopsis taeniata crude venom combining conventional molecular exclusion (Sephadex G-75 column) followed by an ion exchange (DEAE 8HR APMinicolumn) chromatography on a HPLC system. The new metalloproteinase BtaHF showed a high degree of purity and molecular homogeneity with a molecular mass of 25968.16 Da. BtaHF showed caseinolytic activity with an optimum temperature and pH of 37-40 °C and 8, respectively. The caseinolytic activity was inhibited by EGTA, EDTA and DTT, but PMSF and SBT-I did not show inhibitory effect. The Ca+2 ion shown to be important for protein stability enhancing its caseinolytic activity, on the contrary, Z+2 and Mn+2 showed inhibitory effects upon the enzymatic activity of this protein. The metalloproteinase BtaHF is an ?-fibrigenolytic enzyme, rapidly degraded fibrinogen A? chain within 15 minutes, while fibrinogen B? chain is degraded after 6 hours. This enzyme did not show fibrinolytic or arginine amidase activities BtaHF is an acidic protein due the mayor proportion of acidic amino acid in its amino acid composition with 6 cysteinyl residues. By the homology study BtaHF share a high sequence identity other weakly hemorrhagic P-I class SVMP such BaP1 isolated from Bothrops asper snake venom This new metalloproteinase, BtaHF, have a weak hemorrhagic with a minimum hemorrhagic dose of 20.14 ?g. Also, this metalloproteinase showed dose-dependent paw edemaforming activity, this effect remain six hours after inoculation. Both hemorrhage and edemaforming activities were related to the enzymatic activity and correct fold of BtaHF, since chelating (EDTA and EGTA) and reducing (DTT) agents inhibited these activities. On the other hand, this enzyme did not show miotoxic activity, although, showed citotoxic activity on C2C12 fibroblast. Histological analysis of mice gastrocnemius muscle confirmed that the metalloproteinase produce local hemorrhage and pro-inflammatory effects, as well as, the absence of miotoxic activity. This metalloproteinase, BtaHF, produce specific systemic effects when injected endovenously in mice. On lung tissue level these toxin produce alteration of alveolus structure with significant hemorrhage, thickness of alveolus septum and inflammation. On renal tissue BtaHF did not produce hemorrhage, but, was observe alteration of glomerulus structure, along with cytoplasmatic alterations of distal and proximal tubulus cells. On the other hand, were not observed any alterations on hepatic tissue. BtaHF deplete completely plasma fibrinogen levels in a time and dose-depended manner, reaching blood incoagulability after one hour. BtaHF shown dose-dependent pro-coagulant activity "ex vivo" reducing PT and APPT index. The metalloproteinase BtaHF was purified using a high efficient system. Thus, this approach can be applied to biochemical, structure-function, physiologic and pharmacologyc studies which allow infer the role of this enzyme in the biological effects produce by Bothriopsis taeniata crude venom. The information here presented suggest that the mainly functions of P-I class snake venom metalloproteinases are the maintenance of the characteristic hemorrhagic effect of the botropic venoms and participate of prey immobilization by promoting rapid inflammatory effects / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Laurecir Gomes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T16:34:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Feo_HalineBallestero_M.pdf: 2334519 bytes, checksum: be5f8302e40b51d83cebbead8c42e396 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O tendão calcanear e o tendão flexor digital superficial de frangos são estruturas adaptadas para resistir às forças de tensão geradas pelos músculos e transmitidas para os ossos. Em algumas regiões, estes tendões também suportam forças de compressão adicionais às de tensão. Durante o envelhecimento os tendões apresentam modificações nas regiões sujeitas à compressão e a tensão, com variações na composição da matriz extracelular, disposição de fibras de colágeno e celularidade, assim como em suas interações com outros componentes da matriz. O objetivo desse trabalho foi analisar a organização estrutural e a composição da matriz extracelular das regiões submetidas à tensão e a tensão-compressão em diferentes idades (1 mês, 5 meses e 8 meses). O tendão calcanear e o tendão flexor digital superficial foram divididos em região proximal (tensão-compressão) e distal (tensão). Os resultados morfológicos, em ambos os tendões, mostraram presença de uma estrutura fibrocartilaginosa na região sujeita as forças de tensão-compressão. No tendão calcanear foi possível observar ainda, presença de um coxim gorduroso, que se acentuou com o passar da idade. Esse coxim funciona como um amortecedor, uma vez que essa região é muito requisitada durante a locomoção do animal. Já a região que recebe apenas forças de tensão apresentou alterações marcantes nos diferentes tendões em relação aos animais mais jovens. No tendão calcanear dos animais mais velhos, as fibras de colágeno estão mais compactadas exibindo poucas ondulações e células com núcleos alongados, enquanto que no tendão flexor digital superficial essa região apresentou-se com pontos de calcificação, de forma que essa morfologia pode indicar o início do estabelecimento de uma matriz óssea. Análises bioquímicas apresentaram, tanto no tendão calcanear como no tendão flexor digital superficial, aumento da atividade da MMP-2 e MMP-9 comparados aos animais mais jovens, em ambas as regiões, indicando um processo de remodelamento no tecido. No SDS-PAGE do tendão calcanear, componentes com migração eletroforética semelhante ao decorim e fibromodulim aumentaram com o avanço da idade, principalmente na região sujeita às forças de tensão, enquanto que no SDFT o decorim aparentemente diminuiu com o envelhecimento / Abstract: The calcaneal and the superficial digital flexor tendons of chickens are structures adapted to resist to tensile forces generated by the muscles and transmitted to the bones. In some regions, these tendons also support compressive forces additional to the tension forces. During aging tendons exhibit modifications in regions subjected to compression and tension forces, with variations in the composition of the extracellular matrix, arrangement of collagen fibers and cellularity, as well as in its interactions with other matrix components. The aim of this study was to analyze the structural organization and composition of the extracellular matrix regions subjected to tension and tension-compression forces at different ages (1 month, 5 months, 8 months old). The calcaneal and the superficial digital flexor tendons were divided into proximal (tension-compression) and distal (tension) regions. The morphological results, in both tendons, showed presence of a fibrocartilage structure in the region subject to the compression-tension forces. In the calcaneal tendon was also observed the presence of a fat pad, that increased with age. This structure act absorbing the mechanical impacts, once this region is required during the locomotion of the animal. The region that receives only tension forces had marked alterations in different tendons compared to younger animals. In the calcaneal tendon of older animals, the collagen fibers are more compact exhibiting few ondulations and cells with elongated nuclei, whereas in the superficial digital flexor tendon this region exhibit calcification points. This morphology may indicate the beginning of the establishment of a bone matrix. Biochemical analyzes showed in both tendons, increased activity of MMP-2 and MMP-9 compared to younger animals, in both regions, indicating a remodeling process in the tissue. In SDS-PAGE of the calcaneal tendon, components with electrophoretic migration similar to decorin and fibromodulin increased with advanced age, especially in the area subject to tensile forces, whereas in the SDFT decorin apparently decreased with aging / Mestrado / Biologia Tecidual / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Elemir Macedo de Souza / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T22:06:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franca_AndreaFernandesEloydaCosta_D.pdf: 3442848 bytes, checksum: 1ed0dba42432e3b03b1b7c6c386bdf41 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O lúpus eritematoso (LE) é uma doença auto-imune com espectro clínico variado. O lúpus eritematoso cutâneo (LEC) inclui o lúpus eritematoso agudo (LECA), o subagudo (LECSA) e o crônico (LECC). Lesões acrômicas podem ocorrer durante a evolução do LE, embora nunca tenham sido estudadas histologicamente. O objetivo deste trabalho é descrever os achados clínicos, laboratoriais e histológicos das lesões acrômicas no LE. Foram selecionados 12 pacientes com LE de um grupo de 220 atendidos no período de 2005 a 2008, sendo sete com LECC e cinco com LECSA. Doze pacientes com vitiligo e 10 controles de pele sã foram usados para comparação. As alterações histológicas encontradas foram: infiltrado inflamatório (75%); hiperceratose e espessamento da zona da membrana basal (ZMB) (66,7%); retificação da epiderme (58,3%); ceratinócitos apoptóticos epidérmicos, elastose e telangectasias (50%); fibrose (41,7%); degeneração vacuolar da ZMB (33,3%); rolhas córneas (16,7%). O diagnóstico histológico de LE foi possível em quatro casos. Melanina pela coloração de Fontana Masson (FM) foi vista em cinco casos e incontinência pigmentar em quatro. Melanócitos foram evidenciados em amostras de cinco doentes através da reação imunohistoquímica pelo HMB45 e Melan-A, com diferença estatística em relação aos controles. Quando comparado ao vitiligo, a diferença foi estatisticamente significante para os achados histológicos: ceratinócitos apoptóticos epidérmicos (p=0,014), espessamento da ZMB (p=0,009) e fibrose (p=0,037). Em relação à quantificação dos melanócitos, não houve diferença estatística entre o grupo LE e vitiligo usando os anticorpos Melan-A e HMB45. Concluímos que as lesões acrômicas no LE correspondem a lesões residuais, decorrentes de processo inflamatório liquenóide prévio que destrói os melanócitos. Não é possível diferenciar as lesões vitiligóides das duas dermatoses pela presença ou ausência de melanócitos, embora a repigmentação seja possível em ambas as doenças devido a presença de melanogênese ativa comprovada pela positividade pelo HMB45 / Abstract: Lupus Erythematosus (LE) is an autoimmune disorder with multiple clinical manifestations. Skin damage is a hallmark of the disease. Cutaneous LE (CLE) includes acute LE (ACLE), subacute LE (SCLE) and chronic LE (CCLE). Although achromic lesions are often found in patients with LEC, there are no detailed data about the histological features of such lesions. Therefore, we designed this study to determine clinical, laboratorial and histological profile of patients with LEC presenting achromic lesions. Between 2005 and 2008, we identified 12 individuals with LEC and acromic lesions from a larger group of 220 patients with LEC that were followed at the Dermatology outpatient clinic. There were seven patients with LECC and five with LECSA. Twelve patients with chronic stable vitiligo and 10 controls of unaffected skin were used for comparison. The most frequent histological abnormalities found in LEC-related achromic lesions were inflammatory infiltrates (75%); hyperkeratosis and thickening of the basement membrane (BM) (66.7%); epidermal flattening (58.3%); apoptotic epidermal keratinocytes, elastosis and vasodilation (50%); fibrosis (41.7%); hydropic degeneration of the basal cells (33.3%); follicular plugging (16.7%). These achromic lesions retained histological features that enabled the diagnosis of CLE to be established in four patients. Fontana Masson (FM) staining was positive for melanin in five cases and revealed pigmentary incontinence in four. Immunohistochemistry for HMB45 and Melan-A identified melanocytes in five CLE-related achromic lesions. Melanocyte counts were significantly smaller in achromic lesions when compared to unaffected skin samples. When compared to vitiligo, CLE-related achromic lesions showed more frequently apoptotic epidermal keratinocytes (p=0,014), thickening of the BM (p=0,009) and fibrosis (p=0,037). Melanocyte counts according to immunohistochemistry were similar in CLE and vitiligo groups. Our results indicate that CLE-related achromic lesions represent residual scars due to chronic lichenoid inflammation that leads to melanocyte destruction. Melanocyte count does not help to distinguish CLE-related achromic lesions and true vitiligo lesions. Despite this, HMB45 staining was sometimes positive in both conditions, which indicates active melanogenesis and suggests that repigmentation may be possible at least for some individuals / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Sergio Roberto Peres Line, Marcelo Rocha Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T05:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_SimoneCaixetade_D.pdf: 127365203 bytes, checksum: 4736aaa809aadf03b1ad27e52dbb8b30 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A dentição não é somente o maior componente do complexo crânio facial dos mamíferos, mas um modelo útil de desenvolvimento, combinado em um sistema de um único órgão, onde ocorrem fenômenos de organização espacial, simetria, aquisição de formas complexas e citodiferenciação órgão-específica. Durante os primeiros estágios do desenvolvimento do dente ocorre uma série de interações entre o epitélio oral e mesênquima, por meio de diferentes moléculas sinalizadoras ao longo do futuro processo alveolar. Bmp4 atua ativando Msx1 na região de incisivos e molares e restringe a ação de Barx1 apenas na região dos molares. A interação entre o sinal mesenquimal Bmp4 e o sinal epitelial Shh faz parte dos primeiros eventos da formação do germe dentário no estágio botão. As fases seguintes são os estágios capuz e sino. Mutações nos genes Msx1 e Barx1 impedem o desenvolvimento do germe dentário além do estágio botão. Para o gene Msx1 essa condição é permanente, enquanto para Barx1 é temporal e o crescimento do germe dentário é retomado após o estágio E14.5 em camundongos. O objetivo desse trabalho é investigar a interação genética entre Msx1 e Barx1 no desenvolvimento do primeiro molar inferior na fase sino (E16.5) e qual a influência da ausência do gene Msx1 na dimensão das estruturas vestigiais MS, R2 e do primeiro molar inferior nas fases botão (E13.5) e sino (E16.5). Esse estudo também se propôs a avaliar se genes Barx2, Barhl1 e Barhl2 estariam expressos em botões de molares inferiores (E13.5). Os resultados indicaram que na ausência completa de Barx1, um único alelo de Msx1 não é suficiente para promover a evolução do botão dentário a capuz em camundongos E16.5 Barx1;Msx1 e não houve expressão de Bmp4 nesses camundongos. A expressão nula dos genes Barx2, Barhl1 e Barhl2 em botões de molares inferiores em camundongos wild-type E13.5 indica que genes da família Bar não possuem nenhum papel no desenvolvimento de molares inferiores. Ainda, dados alométricos de Msx1-/- (E13.5 e E16.5) indicam que a mutação no gene Msx1 e consequente ausência de expressão de Smad1-5-8 e Shh não impede o crescimento no sentido proximal-distal. Conclui-se que existe interação entre Barx1 e Msx1. Barx1 é necessário para controlar os níveis de expressão de Bmp4. Barx2 possivelmente desempenha um papel importante na morfogênese de pré-molares e incisivos inferiores. O atraso no desenvolvimento dos molares inferiores de camundongos Msx1-/- é permanente ao estágio botão, contudo, os botões dentários destes camundongos continuam a exibir um crescimento no sentido proximal-distal no estágio E16.5 / Abstract: The dentition is not only the largest component of the craniofacial complex of mammals, but a useful model of development, combined in a single organ system, where phenomena of spatial organization, symmetry, complex shape acquisition and organ-specific cytodifferentiation occur. During the early stages of tooth development, series interactions take place between oral epithelial and mesenchyme by different signalling molecules along the future alveolar process. Bmp4 acts by activating Msx1 in the region of incisors and molars and it restricts the action of Barx1 only to the molars' region. The interaction between mesenchymal Bmp4 signal and Shh epithelial signal is part of the first events of tooth germ formation at the bud stage. The next stages are cap and bell. Mutations in Msx1 and Barx1 genes inhibit the development of the tooth germ beyond the bud stage. For the Msx1 gene, this condition is permanent, while for Barx1 is temporal and the growth of tooth germ is retaken after stage E14.5 in mice. This study investigates the genetic interaction between Msx1 and Barx1 in the first lower molar development at the bell stage (E16.5), the effect of the absence of Msx1 gene in the size of the vestigial structures MS, R2 and first lower molar bud (E13.5) and bell (E16.5). This study also aimed to assess whether Barx2, Barhl1 and Barhl2 genes were expressed in lower molars buds (E13.5). The results indicated that in the complete absence of Barx1, a single allele of Msx1 is not sufficient to promote the development of tooth bud to cap in E16.5 Barx1;Msx1 mice, and there was no expression of Bmp4 in these mice. The null expression of Barx2, Barhl1 and Barhl2 genes in lower molar buds in E13.5 wild-type mice indicates that genes of the Bar family do not exert any role in the development of lower molars. Still, allometric data on Msx1-/- (E13.5 and E16.5) indicates that Msx1 gene mutation and consequently the absence of Shh and SMAD1-5-8 expression do not prevent growth towards proximal-distal. It is concluded that there is interaction between Barx1 and Msx1. Barx1 is necessary to control the expression levels of Bmp4. Barx2 might play a role in the lower premolars and incisors morphogenesis. The delayed development of Msx1-/- lower molars is permanent at the bud stage, however, the tooth buds of these mice continue to exhibit growth towards proximal-distal at E16.5 stage / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Enyalius perditus e Enyalius iheirngii são duas espécies de lagartos semi- arborícolas pertencentes à nova família Leiosauridae. Apresentam hábitos diurnos, são forrageadores ativos, e estão distribuídos ao longo da Mata Atlântica. E. perditus ocorre na porção sudeste enquanto E. iheringii nas porções sudeste e sul com registros de co-ocorrência em áreas do Estado de São Paulo. Apesar de sua ampla distribuição pouco se conhece sobre a ecologia e menos ainda sobre a biologia reprodutiva do gênero Enyalius. Além disto, informações sobre o comportamento reprodutivo de corte, época de cópula, desova e nascimento dos filhotes são praticamente inexistentes. Para tanto, este estudo investigou a estratégia reprodutiva de ambas as espécies através da dissecção de animais provenientes de coleções científicas, de cativeiro e de coletas em campo. Machos e fêmeas de E.iheringii atingiram maturidade sexual em tamanhos similares. Ambas as espécies são mais abundantes durante a estação chuvosa do que na estação seca. Ciclo de fêmeas de E. iheringii são mais estendidos e há possibilidade dos machos estocarem o espermatozoides nos ductos deferentes durante todo o ano. Foram encontradas fêmeas de E. iheringii estocando espermatozoides durante a primavera no infundíbulo e no outono dentro das criptas de estocagem da junção uterino-vaginal. Nas fêmeas de E. perditus a reprodução é altamente sazonal e ocorre nos períodos mais quentes e úmidos do ano. / Enyalius perditus and Enyalius iheirngii are two semi-arboreal lizard species that belong to the new family Leiosauridae. These specimens present daytime behavior and are active forragers distributed across the Atlantic Rainforest. E. perditus are found in the Southeast and E. iheringii in the Southeast and South. They also present co- occurrence in some areas at São Paulo state. Despite their wide distribution, little is known about their ecology and even less about the reproductive biology of their genera. The information about the reproductive biology of these animals is scarce on the other hand data regarding courtship behavior, mating season, spawning and offspring birth is virtually absent. For this, this study investigated the reproductive strategy of both species through the dissection of animals from scientific collections, captivity and field collections. In E.iheringii males and females reached sexual maturity in similar sizes. Both species are more abundant during the rainy season than in the dry season. Cycle of females of E. iheringii appear more extended and there is possibility of males stocking the spermatozoa in the vas deferens throughout the year. Females of E. iheringii were found stocking sperm during the spring in the infundibulum and in the fall within the storage crypts of the uterine-vaginal junction. In E. perditus females reproduction is highly seasonal and occurs during the hottest and wettest periods of the year.

O Callithrix penicillata (sagui-de-tufo-preto) mesmo sendo utilizado em algumas pesquisas e também mantido tanto em zoológicos como animal de estimação, possui ainda diversas lacunas acerca de sua anatomia. Assim, utilizamos 10 animais somente para o estudo da topografia, do padrão de irrigação vascular e de alguns índices biométricos do estômago, e outros cinco animais para estudos microscópicos. Ambos tendo com o objetivo caracterizar a anatomia do estômago e comparar as variações entre os sexos e eventualmente com outras espécies. Para o padrão vascular realizamos injeção de neoprene látex corado na aorta torácica com posterior dissecação dos ramos abdominais e no caso do estudo biométrico o mesmo foi realizado com o uso de um paquímetro digital, fita métrica e transferidor. E procedimentos tanto para a microscopia de luz com colorações de Hematoxilina-Eosina e Tricrômio de Masson quanto para a microscopia eletrônica de varredura foram efetuados. Com base no estudo ora realizado verificamos que o estômago localizava-se medialmente da 9° a 12° costelas e os aspectos biométricos revelam os padrões primários para este órgão, não se registrando diferenças entre machos e fêmeas. A artéria celíaca surge como o primeiro ramo da aorta abdominal, ocorrendo maior prevalência (70%) de trifurcação a partir desta artéria, com a emissão da artéria lienal, artéria gástrica esquerda e artéria hepática. A artéria lienal acompanhou a curvatura maior do estômago dando origem à artéria gastroepiplóica esquerda. A artéria gástrica esquerda no seu trajeto acompanhava a região da cárdia e do esôfago abdominal, cedendo-lhes contribuições. Já a artéria hepática originava a artéria gástrica direita e a artéria gastroduodenal. E esta por sua vez fornecia a artéria gastroepiplóica direita e a artéria pancreático-duodenal. Quanto aos aspectos microscópicos observamos a presença de quatro camadas: mucosa, submucosa, muscular e serosa e a presença de pregas da mucosa. Desta forma nesta oportunidade visamos contribuir para o estudo da anatomia comparativa, o que procuramos por vezes realizar neste trabalho, a fim também de oferecer subsídios indispensáveis em procedimentos clínico-cirúrgicos nesta espécie. / The Callithrix penicillata (black-tufted-ear-marmoset), have being used in some research and also kept both in zoos and pet. There are still many questions to be answered about their anatomy. Then to study the topography, the vascular pattern of irrigation and some biometric indices of the stomach, we used 10 animals and five other animals to microscopic studies. Both group of animals were studied in order to characterize the anatomy of the stomach and compare the variations between the sexes and possibly other species. To perform the vascular standard thoracic aorta was stained with injection of neoprene latex. Subsequently, we performed the dissection of the abdominal branches and in the case of the same biometric study was conducted using a digital caliper, tape measure and protractor. Procedures for both light microscopy with hematoxylin-eosin staining and Massons Trichrome as for scanning electron microscopy were perfomed. Based on our study we verified that the stomach was located medially from 9° to 12° ribs and biometric aspects reveal the primary standards body for this, not registering differences between males and females. The celiac artery arises as the first branch of the abdominal aorta, causing a higher prevalence (70%) from the trifurcation of the artery, originating the lienal artery, left gastric artery and the hepatic artery. Lienal artery accompanied the greater curvature of the stomach giving rise to the left gastroepiploic artery. The left gastric artery in its course follow and irrigate the region of the abdominal esophagus and cardia, originating new branches for that region. In its turn the hepatic artery originated the right gastric artery and gastroduodenal artery which gives rise to the right gastroepiploic artery and pancreatic-duodenal artery. In regards to the microscopic aspects we observed the presence of four layers: mucosa, submucosa, muscle and serosa and the presence of mucosal folds. Thus we aim to contribute to the study of comparative anatomy, in order to offer indispensable subsidies in clinical and surgical procedures in this specie.

O avestruz (Struthio camelus), embora compartilhe de muitas adaptações evolucionárias de outros pássaros, possui algumas características anatômicas relacionadas com o seu tubo digestivo que são únicas, entre as quais podemos citar o cólon que se apresenta maior que o ceco (aparece duplicado) . Há algum tempo esta ave têm sido explorada economicamente, principalmente na alimentação como uma carne alternativa para o consumo humano. O presente trabalho tem como objetivo estudar as estruturas anatômicas e histológicas do intestino ligadas a distribuição do tecido linfóide . No estudo foram utilizados vinte e quatro avestruzes, com idade entre 2 meses e 2,5 anos, sendo animais destinados ao abate. Para a descrição morfológica utilizou-se a metodologia preconizada Bezuindenhout (1986) e o método de rotina para coloração hematoxilina e eosina. Esperamos contribuir na multiplicação de conhecimentos na área da estrutiocultura. / Although the ostrich shares a lot of evolutionary adaptation with other birds, it presents some anatomical characteristics concerning its digestive tube that are unique, like the colon for instance. The ostrich?s colon is bigger than its caecum. The caecum is doubled. The caecum is folded. This bird has been economically exploited, mainly because of its meat as an alternative food for humans. The purpose of the present research is to study the anatomical and histological structures connecting them to the lymphoid tissue distribution. In this study, 24 ostriches between the ages of 2 months and 2 years and a half ? when they?re ready to be slaughtered ? were used. In order to describe the study, the Bezuindenhout methodology and the routine method for printing H. E. and eosine were used.

Analisou-se rins de 51 Callithrix jacchus, 38 animais provenientes do DPZ (Centro de Primatas da Alemanha) e 13 animais provenientes do CENP (Centro Nacional de Primatas - Brasil), para a caracterização morfológica e biométrica dos rins desta espécie, utilizando-se de exames ultra-sonográficos e radiográficos, comparando-se os dados de cada colônia para verificação de possíveis diferenças decorrentes de manejos distintos. Foram realizados exames de urina e sangue para verificar a condição de sanidade dos animais. Foi realizada também a histologia do rim em 19 animais do DPZ. Com os resultados pudemos concluir que nos animais do DPZ, os parâmetros mensurados não são influenciados pelo sexo. Os Callithrix jacchus da colônia do DPZ apresentaram a biometria corpórea maior do que os Callithrix jacchus da colônia do CENP e os animais com alterações renais apresentaram peso maior do que os animais sadios. No exame ultra-sonográfico, o rim desta espécie apresenta aspecto ovalado, é unipiramidal, e a relação de ecogenicidade é igual à descrita para outras espécies de primatas. Houve a isoecogenicidade do fígado e do baço em relação ao rim. Nos animais do CENP, a região cortical e medular e a junção cortico-medular foram mais definidas do que nos animais do DPZ. Os aspectos radiográficos para os rins de Callithrix jacchus foram semelhantes ao descrito para outras espécies. Os rins de animais com alterações apresentaram um volume maior do que os rins de animais sadios. Foram observadas alterações histológicas nos rins dos animais necropsiados, mesmo no grupo dos animais sem alterações laboratoriais. / The kidneys of fifty one Callithrix jacchus, being thirty eight animals from the DPZ (Germany Primate Center) and thirteen animals from the CENP (National Primate Center - Brazil), were used in the present experiment. Kidneys morphological and biometrical characterizations were evaluated using ultrasonographic and radiographic exams. Comparisons were performed between each colony in order to evaluate the effect of different management. Soundness evaluation was performed in all animals using blood and urine analysis. The kidneys of nineteen animals from the DPZ were used for histological evaluations. Results indicate that variables were not influenced by gender on DPZ animals. Animals from the DPZ colony showed higher values of body biometry than those from the CENP colony. Furthermore, animals showing renal alterations presented higher weight when compared to healthy animals. At the ultra-sonographic exam, the kidney of this specie showed an elliptical and unipyramidal aspect, with an echogenicity similar to other primates species previously described. Kidney echogenicity was also similar to the liver and spleen. At the CENP, animals showed better definition at the cortical and the medullar region, as well as the cortico-medular junction, when compared to the DPZ. The radiographic aspects of the Callithrix jacchus kidneys were similar to species previously described. Kidneys from animals with alterations showed a higher volume when compared to the healthy animals. Histological kidney abnormalities were found at necropsy also on animals with no laboratorial alterations.

Orientador : Angelo Pires do Prado / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:12:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Avancini_RitaMariaPereira_M.pdf: 3969485 bytes, checksum: a69e9c937e04cea1b5e8f1041b1f12eb (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Neste estudo foram investigados alguns aspectos básicos da biologia reprodutiva de C. putoria mosca varejeira, da família Calliphoridae, de introdução recente no Brasil. As moscas foram mantidas em gaiolas de criação sob dieta padrão composta por fígado bovino cru (3 horas/dia) e água à vontade. Constatou-se que são necessários, no mínimo 6 dias para que as fêmeas tenham seus folículos ovarianos totalmente desenvolvidos o que ocorre de maneira sincrôni-ca. Este desenvolvimento é possível quando a fêmea recebe dieta protéica adequada, pois do contrário não se inicia a deposição de vitelo nos folículos. Portanto, sob dieta constituída por açúcar e água, C. putoria manifestou-se como a nautógena. Porém, mesmo após um período prolongado sob dieta aproteica, C. putoria manteve seu potencial reprodutivo, pois desenvolveu normalmente os folículos quando passou ter acesso ao fígado.Esta espécie foi capaz de desenvolver os folículos da segunda camada mesmo quando os primeiros não tinham ainda sido ovipostos, multiplicando dessa forma o mero de ovos a ser deixados numa postura. Os fatos acima mencionados podem ter uma ampla repercussão nas populações naturais, pois se aí também ocorrerem, sabemos que: em ausência de matéria orgânica protéica, as fêmeas não desenvolvem ovos, mas que quando o alimento volta a existir, o processo é retomado e, conseqüentemente, novos indivíduos surgirão; além disto, em ausência de condições ideais para oviposição, o estoque dos folícu-los maduros irá sendo multiplicado. Os ovários são do tipo meroístico politrófico contando em média com 76 folículos por ovário. Existem 15 células tróficas por folículo e o núcleo destas pode apresentar uma ploidia final de até 13 vezes a inicial. estimativa feita a partir das áreas das projeções dos núcleos obtidas de montagem total com coloração de Feulgen. No início do processo de multiplicação desse material nuclear são visíveis cromossomos politênicos típicos. Esses núcleos a-presentam um corpúsculo de DNA bastante evidente o qual não encontramos descrito para outras espécies da família. C putoria apresenta desenvolvimento ovariano bastante semelhante ao que ocorre para a espécie na Tan-zânia (África oriental) e com ela produz descendentes férteis.Este fato nos fez pensar na hipótese de sua origem a partir da África oriental e não da ocidental como anteri-ormente suposto. Julgamos que com o presente estudo serão oferecidos subsídios para bem fundamentar futuros programas de controle dessa espécie-praga / Abstract: This study was carried out to investigate some basic aspects concerning the reproductive biology of a blowfly, Chrydomya putoria (Ca11iphoridae) which has recently been introduced in Brazil.Adu1t flies were kept in cages and were fed on fresh cattle liver during 3 hours a day and water "adlibitum".Results showed that females presented a synchronic development of ovarian follicles, a process which took 6 days at least to be completed.No yolk deposition in the follicles was started out unless a proper protein diet has been supplied. Therefore, C. putoria was an anautogenous species when fed only with sugar and water. However C.putoria maintained its reproductive potential presenting normal follicle growth when liver was available even after along time under an aproteic diet. The concerned species was able to develop the second batch of eggs when the first one had not been laid yet. Thus, the arnount of eggs of a certain oviposition could be multiplied. Great changes in populations structure can be expected if the facts above also occur in the field since females do not complete oogenesis without proteic matter, but when it is present again in the field, eggs can be produced and, consequently, new flies will be risen. In addition, when ideal conditions for egg laying do not occur, there will be mature follicle batches multiplication. In this species, ovaries are classified as meroistic polytrophic, each one presenting 76 follicles in average. There are 15 nurse cells in a follicle and their nucleous may present a final ploidy 13 times greater than the initial one, which was estimated in view of the nucleous areas projections obtained in Feulgen-stained whole mounts. Typical polytenic chromosomes can be seen at the begining of this nuclear material multiplication. Those nuclei present a very remarkable DNA body which we did not find described for other alliphoridae species. C. putoria ovarian developrnent pattern is very similar to that of Tanzania (Eastern Africa) species. When these two species are crossed, fertile progeny is produced. This leads to the hypothesis of its origin from the Eastern Africa instead of the Western one as previously described. / Mestrado / Mestre em Biologia

Humic acid is an organic substance identified in black waters, used as growth promoter and confers protection against environmental contamination by metals. The objective of this study was to evaluate survival and growth of juvenile silver catfish Rhamdia quelen exposed to different concentrations of humic acid at acidic pH, observing the morphological effects in the gills and erythrocytes. In the first experiment, juveniles were exposed to two pH (5.5 and 6.5) with concentrations (0, 10, 25 and 50 mg.L-1) of humic acid (CAT: H1 0.675-2 Aldrich® - humic acid sodium salt) for 40 days. In the second study the histological and morphometric parameters of gills of juveniles exposed to these treatments were analyzed. The third study evaluated the effect of different pH (3.8, 4.0, 4.2 and 7.0) and the concentrations of humic acid previously described on survival and erythroid morphology of juvenile silver catfish. Silver catfish showed greater weight, length, biomass, feed intake, and specific growth rate when exposed to pH 6.5 without the presence of humic acid. The gills of silver catfish exposed to pH 5.5 at 50 mg.L-1 of humic acid presented higher filament length, width of the lamellae, thickness of the epithelium of gill filament, lower distance between the lamellae, cell proliferation and increase in chloride gill respiratory surface area GRSA. There was also proliferation of chloride cells and increase in chloride cells fractional area (CCFA) of juveniles exposed to pH 5.5 at 50 mg L-1 humic acid. Survival of juveniles was impaired at pH 3.8 and pH 4.0, and the higher the concentration of humic acid, the lower the survival. Silver catfish exposed to pH 7.0 showed higher erythrocyte are than those exposed to pH 3.8, 4.0 or 4.2. The presence of humic acid caused an opposite effect, increasing red cells diameter in fish exposed to higher concentrations (50 mg.L-1). No changes in plasma Na+, K+, but at pH 3.8 the plasma levels of Cl- were lower than at neutral pH and this effect was potentiated by the increase of humic acid levels. Thus, it is concluded that the presence of synthetic humic acid in water is harmful to the developing juvenile catfish, the higher the concentration of humic acid in water, the higher is the water barrier and blood-cell proliferation chloride, changing the gill morphology of juvenile catfish, hematological parameters of juvenile silver catfish are also altered by the presence of synthetic humic acid, which could compromise adaptation and survival of this species in acidic pH, the humic acid protects against the juvenile catfish ionorregulatórios negative effects of exposure the acidic pH. / O ácido húmico é uma substância orgânica identificada nas águas pretas, já utilizada como promotor de crescimento e que confere proteção contra a contaminação ambiental por metais. O objetivo deste estudo foi verificar a sobrevivência e o crescimento de juvenis de jundiá Rhamdia quelen em concentrações distintas de ácido húmico em pH ácido, observando os efeitos morfológicos nas brânquias e nos eritrócitos. No primeiro manuscrito, os juvenis foram expostos a dois pH (5,5 e 6,5) em concentrações (0, 10, 25 e 50 mg L-1) de ácido húmico, por 40 dias. No segundo manuscrito, foram analisados os aspectos histológicos e morfométricos das brânquias dos juvenis expostos a esses tratamentos ao final de 40 dias de experimento. O terceiro manuscrito avaliou a sobrevivência e o efeito na morfometria eritróide de juvenis de jundiá expostos a pH distintos (3,8; 4,0; 4,2 e 7,0) e nas concentrações de ácido húmico já citadas. Após ao experimento, os juvenis de jundiás apresentaram maior peso, comprimento, bioamassa, consumo de ração e taxa de crescimento específico quando expostos ao pH 6,5 sem a presença de ácido húmico. As brânquias dos jundiás expostos ao pH 5,5 em 50 mg L-1 de ácido húmico apresentaram maior comprimento dos filamentos, largura das lamelas e da espessura do epitélio do filamento branquial, menor distanciamento entre as lamelas, proliferação de células de cloreto e aumento na área de superfície respiratória GRSA. Também se verificou proliferação das células de cloreto e aumento na área fracional das células de cloreto (CCFA) dos juvenis expostos ao pH 5,5 em 50 mg L-1 de ácido húmico. A sobrevivência dos juvenis foi comprometida em pH 3,8 e pH 4,0, diminuindo esta sobrevivência em quanto maior foi a concentração de ácido húmico adicionado ao meio ambiente. Jundiás expostos ao pH 7,0 apresentavam área eritrocitária maior que os peixes expostos aos pH 3,8; 4,0 ou 4,2. Já a presença do ácido húmico causou um efeito contrário, fazendo com que os eritrócitos de peixes expostos às maiores concentrações (50 mg L-1) tivessem maiores diâmetros. Não há alteração nos níveis plasmáticos de Na+, K+, porém em pH 3.8 os níveis plasmáticos de Cl- foram menores que em pH neutro e esse efeito foi potencializado pelo aumento da concentração de ácido húmico. Assim, conclui-se que a presença do ácido húmico sintético na água é prejudicial para o desenvolvimento de juvenis de jundiá; quanto maior a concentração de ácido húmico na água, maior é a barreira águasangue e a proliferação de células de cloreto, alterando a morfologia branquial de juvenis de jundiá; os parâmetros hematimétricos de juvenis de jundiás também são alterados pela presença do ácido húmico sintético, podendo comprometer a adaptação e sobrevivência desta espécie em pH ácido; o ácido húmico protege juvenis de jundiá contra os efeitos ionorregulatórios negativos da exposição ao pH ácido.