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Participação da via Notch em lesões labiais fotoinduzidas / Participation of the Notch pathway in photoinduced lip lesionsPigatti, Fernanda Mombrini 18 March 2016 (has links)
A intensa exposição ao Sol sujeita o lábio, principalmente o inferior, aos danos provocados pela absorção de radiação ultravioleta (UV). O carcinoma epidermoide é a neoplasia maligna que se desenvolve nos lábios após exposição crônica prolongada aos raios UV e acredita-se que todos os casos sejam precedidos pela desordem potencialmente maligna denominada queilite actínica. Ambas as lesões são causados pelos efeitos nocivos da radiação UV agindo diretamente sobre o DNA, por meio do fenômeno da fotocarcinogênese. Nesse processo, a radiação provoca mutações que são capazes de causar a iniciação, progressão e a promoção de neoplasias. No entanto, é também importante considerar que outros eventos moleculares, além das mutações, estão envolvidos na iniciação e progressão do câncer. Alterações moleculares com ganho ou perda de função de componentes da via de sinalização Notch estão envolvidas em diferentes tipos de cânceres hematológicos e sólidos. Entretanto, a participação da sinalização Notch em câncer de lábio ainda é desconhecida. Assim, o objetivo desse trabalho foi investigar se a via Notch está relacionada às lesões de queilite actínica e de carcinoma epidermoide de lábio e sua participação na fotocarcinogênese bucal. Para isso, foram utilizados 45 casos de queilite actínica, 15 casos de carcinoma epidermoide de lábio e 05 casos de lábio com aspecto de normalidade, nos quais foi analisada a expressão de Notch1 e Jagged1 por meio da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados demonstraram que houve perda da expressão de Notch1 em 40% dos carcinomas epidermoides de lábio, sugerindo que a expressão reduzida de Notch1 pode converter os queratinócitos a um estado ativado e imaturo. Observou-se ainda, diferença nos padrões de marcação de Nocth1 e Jagged1 nas células epiteliais sugerindo que o sinal da via Notch seja transmitido a partir de uma célula apical para uma célula basal devido a localização das células que expressam o receptor e das que expressam o ligante. Concluiu-se, assim, que os resultados imuno-histoquímicos não apontam a uma regulação diferencial da expressão da proteína Notch1 e Jagged1 em lesões UV induzidas. / The intense exposure to the sun subject the lips, particularly the lower, the damage caused by the absorption of ultraviolet (UV) radiation. The squamous cell carcinoma is a malignant tumor that develops on the lips after prolonged chronic exposure to UV rays and it is believed that all cases are preceded by potentially malignant disorder called actinic cheilitis. Both lesions are caused by the harmful effects of UV radiation acting directly on the DNA, through the phenomenon of photocarcinogenesis. In this process, the radiation causes mutations that are capable of causing the initiation, progression and promotion of cancer. However, it is also important to consider that other molecular events, apart from the mutations are involved in the initiation and progression of cancer. Molecular abnormalities with gain or loss of Notch pathway components function are involved in several types of hematological and solid cancer. However, the participation of Notch signaling in lip cancer is still unknown. The objective of this study was to investigate whether the Notch pathway is related to injuries actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lip and participation in oral photocarcinogenesis. For this, were used 45 cases of actinic cheilitis, 15 cases of squamous cell carcinoma of the lip and lip 05 cases with normal aspect in which we analyzed the expression of Notch1 and Jagged1 by immunohistochemistry. The results showed loss of Notch1 expression in 40% of squamous cell carcinomas of the lip, suggesting that reduced expression of Notch1 can convert to an activated keratinocytes and immature state. There was also a difference in labeling patterns of Notch 1 and Jagged1 epithelial cells suggesting that the Notch pathway signal is transmitted from an apical cell to a basal cell due to localization of cells expressing the receptor and expressing the ligand. In summary, the immunohistochemical results do not show a differential regulation of Notch 1 and Jagged1 expression in UV induced lesions.
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Localização dos receptores opioides no sistema nervoso central e avaliação dos efeitos analgésico e sedativo da morfina e do butorfanol em iguanas verdes (Iguana iguana) / Localization of opioid receptors in the central nervous system and assessment of morphine and butorphanol analgesic and sedative effects in green iguanas (Iguana iguana)Bressan, Thais Feres 15 December 2017 (has links)
A popularização dos répteis no mercado pet e no meio científico amplia a necessidade por conhecimentos clínicos e fisiológicos mais adequados a classe o que, consequentemente, irá melhorar a qualidade dos atendimentos e do manejo desses animais. Destaca-se que, como cada espécie de réptil apresenta um comportamento metabólico e fisiológico distinto é necessário a realização de estudos com cada espécie em particular. Assim, buscou-se caracterizar os receptores opioides no sistema nervoso central (SNC) e os efeito sedativo e analgésico da morfina e do butorfanol em Iguana iguana. Na 1ª etapa três iguanas jovens (101 ± 6g) e saudáveis foram submetidas à eutanásia para colheita do SNC. Os tecidos de dois animais foram submetidos à técnica do RNAseq para formação de um transcriptoma de novo, para então obter-se as sequências de nucleotídeos dos receptores opioides. Já o tecido de um animal foi submetido à técnica de imuno-histoquímica (IH). Na 2ª etapa, 10 iguanas jovens (160 ± 46g) receberam cinco tratamentos, por via intramuscular e com intervalo de duas semanas entre eles: solução salina (0,3mL, CON), morfina 5 mg/kg (MOR5) e 10 mg/kg (MOR10), butorfanol 5 mg/kg (BUT5) e 10 mg/kg (BUT10). A sedação foi avaliada por meio da escala comportamental específica para iguanas e pelo teste de natação forçada, sendo este por 120 segundos. A latência do reflexo de retirada do membro (LRRM) frente ao estímulo térmico foi utilizada para avaliação antinociceptiva promovida pelos opioides. Todos os testes foram avaliados antes do tratamento (0) e com 30 minutos, 1, 2, 3, 4, 6, 12 e 24 horas pós-tratamento. Utilizou-se ANOVA e Dunnett para a comparação com o momento basal (0 minuto) e ANOVA de dois fatores e Tukey entre os grupos. As sequências gênicas compatíveis com os receptores μ (mu), κ (kappa) e δ (delta) foram identificadas, porém o teste de IH não revelou resultados confiáveis para as marcações dos receptores no SNC. Na escala comportamental apesar dos escores de sedação terem sido baixos, foi observado aumento significativo na pontuação entre 30 minutos e 2 horas em MOR5 e entre 30 minutos e 3 horas em MOR10, BUT5 e BUT10. O tempo de natação foi reduzido em MOR10 e BUT5 entre 30 minutos e 2 horas e em BUT10 a redução ocorreu entre 30 minutos e 12 horas. Todos os tratamentos proporcionaram sedação pelos dois testes com 12 horas de avaliação. Por outro lado no teste de termoalgimetria só foi observado aumento no tempo de LRRM em MOR10, entre 2 horas e 4 horas de avaliação. Conclui-se que os receptores opioides estão presentes no SNC, porém apenas κ e δ foram evidenciados na IH. Ademais, as duas doses de butorfanol e a maior dose de morfina promovem sedação, sendo que apenas 10 mg/kg de morfina promoveu antinocicepção em iguanas no presente estudo. / The increasing popularity of reptiles in the pet market and in the scientific studies requires appropriate clinical and physiological knowledge, which will consequently improve the quality of care and management of this classe. It is necessary to have studies with each species in particular because of every specie of reptile has different metabolic and physiological behavior. Therefore, it was aimed localization of opioid receptor in the central nervous system (CNS) and evaluated the sedative and analgesic effect of morphine and butorphanol in Iguana iguana. At the first stage three young (101 ± 6g) and healthy green iguanas were submitted to euthanasia for harvesting the CNS, then the tissues of two animals were submitted to the RNAseq technique for the formation of de Novo transcriptome, so we could get the nucleotide sequences of the opioid receptors obtained. The immunohistochemistry (IH) technique was use to locate the distribution of these receptors in the CNS. In the second stage, 10 young green iguanas (160 ± 46 g) received five treatments, intramuscularly and with an interval of two weeks between them: saline solution (0.3 mL, CON), morphine 5 mg/kg (MOR5) and 10 mg/kg (MOR10), butorphanol 5 mg/kg (BUT5) and 10 mg/kg (BUT10). The sedation was estimate by behavioral scale for iguanas and forced swing test, during 120 seconds. The latency of hind limb withdrawal reflex (LWR) in front of the thermal stimulus was use for antinociceptive evaluation promoted by opioids. All the tests were evaluate before treatment (0) and at 30 minutes, 1, 2, 3, 4, 6, 12 and 24 hours post-treatment. ANOVA and Dunnett were used for comparison with the baseline (0 minute) and two-way ANOVA and Tukey between the groups. We identified sequences compatible with μ (mu), κ (kappa) and δ (delta), but only κ and δ were marked in the IH of the CNS. In the behavior scale despite of low scores of sedation, it was observe a significant increase in the score between 30 minutes and 2 hour MOR5 and between 30 minutes and 3 hours in MOR10, BUT5 and BUT10. The time of swimming test was reduced in MOR10 and BUT5 between 30 minutes and 2 hours and in BUT10 the reduction occurred between 30 minutes and 12 hours. All treatment provided sedation for both tests in 12 hours of evaluation. Otherwise, the thermoalgymetry test showed increased time in LWR in MOR10 between 2 hours and 4 hours of evaluation. It concluded that the opioid receptors are present in the CNS. In addition, the two doses of butorphanol and the highest dose of morphine further sedation and only 10 mg/kg of morphine promoted antinociception in iguanas in this study.
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Análise imuno-histoquímica do CXCR4 em carcinoma epidermoide de cavidade oral / Immunohistochemical analysis of CXCR4 in squamous cell carcinoma of the oral cavityTonin, Letícia Oliveira 26 April 2018 (has links)
O câncer de cavidade oral é uma das neoplasias mais comuns no Brasil e no mundo, porém seu prognóstico ainda é incerto principalmente devido ao diagnóstico tardio e presença de metástases. A análise de fatores relacionados ao prognóstico dessa doença é de suma importância e, o receptor de quimiocina denominado CXCR4, está sendo relacionado a um pior prognóstico devido a maior capacidade de invasão das células que o expressam, em diversas neoplasias. Apesar dessa relação estar demonstrada em vários tipos de cânceres, com relação ao de cavidade oral pouco se sabe até o momento. Assim, objetivo desse trabalho foi analisar a expressão imuno-histoquímica do receptor de quimiocina CXCR4 em carcinomas epidermóides de cavidade oral, e relacioná-la com variáveis clínicas e histológicas. Foram obtidos 94 blocos de carcinomas epidermóides oriundos de instituições parceiras para obtenção de cortes histológicos convencionais, corados com hematoxilina e eosina (HE), e cortes de TMA (tissue microarray). Foi realizado imuno-histoquímica para anticorpo anti-CXCR4 (ab124824, ABCAM, EUA) e análise da marcação em lâminas de TMA utilizando o software Image J (versão 1.49u). A intensidade de marcação imuno-histoquímica foi correlacionada com dados clínicos (TNM, tabagismo, etilismo e sobrevida) e histopatológicos (diferenciação histológica, infiltrado inflamatório e infiltração vascular, linfática e perineural) dos pacientes. Dos casos analisados 74,4% exibiram uma marcação fortemente positiva para o CXCR4, enquanto que o epitélio não tumoral mostrou uma marcação negativa ou fracamente positiva (71,1%; p=0,011). Tumores classificados como \"bem diferenciados\" apresentaram marcação fortemente positiva para a proteína estudada (53,3%; p=0,049). Não houve associação entre a marcação imuno-histoquímica do CXCR4 com sobrevida global em 5 anos (?2= 0.3, p=0.565). Os resultados sugerem que a alta expressão dessa proteína não influencia no prognóstico e na sobrevida desses pacientes. / Oral cancer is one of the most common neoplasia in Brazil and the world. Mainly due to a late diagnosis and presence of metastases its prognosis is still uncertain. Finding biological markers related to the prognosis of this disease is of paramount importance. The chemokine receptor CXCR4 is being related to a worse prognosis in several neoplasms because cells expressing it acquire a greater capacity of invasion. Although this relationship is demonstrated in several types of cancers, in the oral cavity it is uncertain. The aim of this study was to analyze by immunohistochemistry the CXCR4 chemokine receptor expression in oral squamous cell carcinomas, and related to clinical and histological variables. Conventional histological sections stained with hematoxylin and eosin (HE) were acquired from 94 blocks of oral squamous cell carcinoma for histological analysis. TMA (tissue microarray) was assembled from these blocks for anti-CXCR4 immunohistochemistry (ab124824, ABCAM, USA). Staining analysis was performed using Image J software (version 1.49u). The immunohistochemical signal intensity was correlated with clinical (TNM, smoking, alcoholism and survival) and histopathological parameters (histological differentiation, inflammatory infiltration, vascular, lymphatic and perineural infiltration). From the cases studied 74.4% showed a strong positivity for CXCR4, and the non-tumoral epithelium was negative or weakly positive (71.1%; p = 0.011). Tumors histologically well differentiated were strongly positive for the protein studied (53.3%; p = 0.049). There was no association between CXCR4 signal and global survival in 5 years (?2= 0.3, p=0.565). These results suggest that a high expression of CXCR4 it is not related to prognosis and survival of patients of patients with oral squamous cell carcinoma.
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Ação do estrógeno na expressão de proteínas relacionadas ao metabolismo ósseo durante regeneração alveolar em ratas /Dias, Sheila Mônica Damásio. January 2007 (has links)
Resumo: Objetivo:Avaliar a atuação do E2 durante a regeneração alveolar, utilizando a expressão das proteínas OPG, RANK e RANKL como indicadores celulares de predisposição à reabsorção ou formação de tecido ósseo. Material e métodos: Após 8 dias da cirurgia SHAM ou ovariectomia (OVX), as ratas (200g) OVX receberam implantes subcutâneos contendo óleo de milho (grupo OVX/óleo) ou E2 (400μg) (grupo OVX/E2). As exodontias dos incisivos superiores direitos foram realizadas no decorrer do tratamento e agendadas para que ao término de 60 dias fosse possível obter as peças referentes a 14, 28 e 42 dias de regeneração óssea alveolar. As peças foram submetidas a processamento imunoistoquímico. Resultados: Nos animais com ciclo estral regular (grupo SHAM), foi observada expressão baixa aos 14, média/alta aos 28 e a não expressão de OPG e RANKL aos 42 dias. A expressão de RANK iniciou alta e foi diminuindo até o último período analisado. No grupo OVX/Óleo a expressão de RANKL foi crescente até o término da análise aos 42 dias, enquanto que a expressão de RANK diminuiu ao longo do período estudado. Foi observada expressão de OPG no início e ao final do período analisado. Os animais OVX/E2 apresentaram marcação semelhante para OPG, RANK e RANKL aos 14 dias. A expressão de RANKL foi observada até o final do experimento, entretanto não foi detectada expressão de OPG e RANK aos 28 e 42 dias. Conclusão: Estes resultados evidenciam a participação do E2 modulando o ciclo de remodelação óssea alveolar. / Abstract: Objective: To evaluate the role of E2 during alveolar bone regeneration, using OPG, RANK and RANKL protein expression as cellular indicators of predisposition to resorption or bone tissue formation. Methods: Eight days after either SHAM surgery or ovariectomy (OVX), the OVX rats (200g) received subcutaneous implants with corn oil (OVX/oil group) or E2 (400μg) (OVX/E2 group). Extraction of the maxillary right incisors were performed during the course of the treatment and was scheduled in such a way that at the end of a 60-day period it would possible to retrieve anatomic pieces referring to 14, 28 and 42 days of alveolar bone healing. The pieces were submitted to immunohistochemical processing. Results: In the animals with regular estrous cycle (SHAM group), it was observed low expression at 14 days, medium/high expression at 28 days and no OPG and RANKL expression at 42 days. RANK expression started high and decreased continuously up to the last analyzed period. In the OVX/oil group, RANKL expression increased up to the completion of the analysis at 42 days, whereas RANK expression decreased within the studied period. OPG expression was observed in the beginning and the end of the analyzed period. The animals OVX/E2 showed similar labeling for OPG, RANK and RANKL at 14 days. RANKL expression was observed up to the end of the experiment. However, no OPG and RANK expression was detected at 28 and 42 days. Conclusion: These results demonstrate the role of E2 modulating the alveolar bone remodeling cycle. / Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Coorientador: Rita Cássia Menegati Dornelles / Banca: Ana Maria Pires Soubhia / Banca: Teresa Lucia Lamano Carvalho / Mestre
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Estudo clínico, morfológico e imunoistoquímico de carcinomas espinocelulares em boca : análise comparativa entre pacientes jovens e idosos /Ribeiro, Ana Carolina Prado. January 2008 (has links)
Orientador: Ana Maria Pires Soubhia / Banca: Suzana Cantanhede Orsini Machado de Souza / Banca: Décio dos Santos Pinto Júnior / Resumo: A incidência mundial de câncer em jovens tem aumentado e estudos recentes mostram que o câncer de boca também segue esta tendência. O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar as características clínicas, histopatológicas e imunoistoquímicas entre pacientes jovens, com idade igual ou inferior a 40 anos, e pacientes idosos, com idade igual ou superior a 65 anos, diagnosticados com carcinoma espinocelular em língua. Foram selecionados 19 casos de pacientes jovens e 19 casos de pacientes idosos e coletados dados clínicos dos prontuários. A gradação histológica foi realizada utilizando os critérios de classificação de Bryne et al (1992), na região do fronte tumoral. Também foi analisada a expressão imunoistoquímica das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67. Neste estudo foi observado maior número de carcinomas espinocelulares moderadamente e pobremente diferenciados no grupo de pacientes jovens enquanto que no grupo de idosos houve maior prevalência de carcinomas bem diferenciados. Houve também no grupo de pacientes jovens um aumento do infiltrado linfoplasmocitário. A expressão imunoistoquímica das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67 não mostrou diferenças significantes no fronte tumoral entre pacientes jovens e idosos. Na amostra estudada, foram detectadas diferenças morfológicas entre o grupo de pacientes jovens e idosos, no entanto, estas diferenças não foram expressas de forma significativa na análise imunoistoquímica. / Abstract: The worldwide incidence of cancer in young is increasing and recent studies show that the oral cancer also follows this trend. The objective of this study was to evaluate and to compare the clinical, histopathological and immunohistochemical features between young patients, with 40 years old or less, and elderly patients, with 65 years old or a superior age, diagnosed with tongue squamous cell carcinoma. Nineteen cases of young patients and 19 cases of elderly patients were selected and clinical data were collected from medical records. The histological grading was carried out using the criteria of classification of Bryne et al (1992) in the tumoral front region. The immunohistochemical expression of the proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 was also analyzed. In the present study, the group of young patients presented a higher number of moderately and poor differentiated squamous cell carcinomas whereas the elderly group had a greater prevalence of well differentiated carcinomas. The group of young patients also showed an increase in the lympho-plasmacytic infiltration. The immunohistochemical expression of the proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 did not show significant differences in the tumoral front region between young and elderly patients. In the studied sample, morphological differences between the group of young and elderly patients were detected, however, these differences were not expressed in in the immunohistochemical analysis. / Mestre
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Expressão da proteína nuclear de proliferação celular (PCNA), da B-Catenina e do Agnor, na etapa inicial do processo de carcinogênese quimicamente induzido pelo DMBA, em borda lateral de língua de hamsters sírio dourado(Mesocricetus auratus) /Rosa, Luiz Eduardo Blumer. January 2006 (has links)
Banca: Horacio Faig Leite / Banca: Yasmin Rodarte Carvalho / Banca: Suzana Catanhede Orsini Machado de Sousa / Banca: Fabio Daumas Nunes / Banca: Décio dos Santos Pinto Junior / Resumo: O modelo de câncer bucal em hamsters exibe muitas semelhanças com o desenvolvimento do câncer oral em humanos. A capacidade proliferativa é uma das principais características das células neoplásicas e a detecção de células proliferativas permite, através de sua contagem, obter uma estimativa das taxas de crescimento neoplásico, com consequente repercussão no prognóstico e no tratamento das lesões. Foram utilizados 40 hamsters Sírios dourados, machos e fêmeas, com peso aproximado de 150 gramas, com dois a seis meses de idade. A seguir, foi aplicada solução de DMBA na borda lateral esquerda da língua dos animais por oito semanas. Os animais foram sacrificados, e as línguas removidas foram fixadas em formei tamponado a 10%. O cortes histológicos foram corados pela prata para marcação das NOR e pelos anticorpos PCNA e β-catenina. Os dados obtidos receberam tratamento estatístico pelo teste ANOVA e teste de Tukey. Após análise dos resultados pudemos concluir que as associações da técnica pelo AgNOR e a imunoistoquímica pelo PCNA refletiram a maior atividade proliferativa das células analisadas. O modelo de carcinogênese experimental em borda lateral de língua de hamster é uma metodologia que se presta para estudo por imunoistoqufmica. E finalmente, que os anticorpos PCNA e β-catenina podem ser utilizados, nos casos leucoplasia, para analisar possíveis áreas de transformação maligna / Abstract: The oral cancer model in hamsters shows many simílarities with developmental oral cancer in humans. The proliferating capacity is one the most characteristics of neoplásica ce/Is and detection of these ce/Is allow us, throughout of its counting, to achieve an estimated tumour growing index, with a consequent repercussion about prognostic and in the treatment of those lesions. 40 golden Syrian hamsters, both genders, aged between two to six mouth and weight 150g in average were used. The left síde of tangue of each animal was painted for eight consecutive weeks, with a solution of DMBA. Tongues were removed, fixed in 10% buffered fonnal solution. The histological slides were stained by AgNOR technique and by PCNA and β-catenin immunohistochemical antibodies. Statistical analyzes were performed by ANOVA one-way test and Tukey test. We may conclude that an association between AgNOR and PCNA might indicate the higher proliferating activity of the analyzed celIs. The experimental carcinogenesis model in hamster tongue is an available methodology for immunohistochemistry study. And finally, PCNA and β-catenin immunohistochemical antibodies may be used to analyze possible premalignant areas in oral leukoplakia
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Avaliação histológica e imuno-histoquímica do subcutâneo e do alvéolo dentário de ratos com implantes de cimento Portland, MTA e MTA experimental /Viola, Naiana Viana. January 2010 (has links)
Resumo: Atualmente, dentre os materiais retrobturadores, destaca-se o Mineral Trióxido Agregado (MTA) e seus derivados. Devidos as suas boas propriedades biológicas e a necessidade de um cimento endodôntico mais próximo do ideal, modificações têm sido propostas ao MTA na tentativa de se obter um material obturador de canal radicular. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a resposta biológica dos materias Portland, MTA e um material experimental à base de MTA (CE-MTA), no tecido subcutâneo e alvéolo dentário de ratos. Foram utilizados 80 ratos, divididos em 4 grupos: 1-Cimento Portland (CP); 2-MTA (Angelus); 3- CE-MTA e 4-Controle (tubo de polietileno vazio). Em cada animal, foram implantados dois tubos de polietileno, preenchidos ou não com material, no alvéolo dentário e no subcutâneo da região dorsal. Decorrido os períodos de 7, 14, 30 e 60 dias, os implantes juntamente com os tecidos adjacentes foram removidos, fixados e processados para inclusão em parafina. Os cortes do subcutâneo e do alvélo dentário contendo os implantes corados com H&E, foram utilizados para análise morfológica e quantificação de células inflamatórias; alguns cortes foram submetidos a imuno-histoquímica para detecção de osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN) presentes durante a formação dos tecidos mineralizados. Cortes do subcutâneo contendo os implantes foram submetidos ao método de Von Kossa, usado para identificar estruturas calcificadas. Os resultados mostraram que aos 7 dias todos os materiais promoveram uma moderada reação inflamatória no subcutâneo; aos 14 dias, verificou-se um aumento, embora não estatisticamente significante, no número de células inflamatórias no grupo CE-MTA em comparação aos demais grupos. No entanto, o número de células inflamatórias reduziu significantemente nos períodos de 30 e 60 dias, em todos os grupos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, among the filling materials, the Mineral trioxide aggregate (MTA) and its derivatives stands. Due to its good biological properties and the need for a sealer closest to the ideal, changes have been proposed to the MTA in an attempt to get a filling material for root canal. The purpose of this study was to evaluate the biological response of the materials Portland, MTA and MTA-based experimental cement in subcutaneous tissue and tooth socket of rats. Were used 80 rats divided into 4 groups: 1-Portland cement (PC), 2-MTA (Angelus), 3 - CEMTA and 4-Control (polyethylene tubes empty). In each animal, polyethylene tubes were implanted into dorsal subcutaneous and in the tooth socket. After 7, 14, 30 and 60 days, fragments of the subcutaneous and of the maxilla containing the implants with surrounding tissues were removed, fixed, processed and embedded in paraffin. H&E-stained sections of the subcutaneous and tooth socket with the polyethylene tubes were used for morphological analysis and quantification of inflammatory cells, some sections were submitted to immunohistochemistry for detection of osteopontin (OPN) and osteocalcin (OCN), typical non-collagen proteins of the mineralized tissues. von Kossa method, used to identify calcified structures, was performed in the subcutaneous sections. Our results showed that, in the period of 7 days, a moderate inflammatory reaction was observed in the all groups; at 14 days, although not statistically significant, the number of inflammatory cells in the CE-MTA group was higher than other groups. However, the number of inflammatory cells decreased significantly in the periods of 30 and 60 days in all groups in comparasion to initial periods. Moreover, significant differences were not found between the groups containing materials (PC, MTA and CE-MTA) and the control group indicating, therefore, that these materials are biocompatible... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Paulo Sérgio Cerri / Coorientador: Mário Tanomaru Filho / Banca: Marco Antonio Húngaro Duarte / Banca: Eleny Zanella Balducci / Mestre
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Imunomarcação de proteínas de estresse (HSP 27, HSP 72, HSP 90) e proteína P53 em neoplasias mamárias de cadelas /Paula, Ana Carolina Barbosa de. January 2010 (has links)
Orientador: Antônio Carlos Alessi / Banca: Karin Werther / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Resumo: Os tumores de mama são a principal causa de morte em cães e isso vem despertando maior interesse no desenvolvimento de estudos relacionados a este distúrbio. A proximidade com os seres humanos, tanto na convivência quanto aos hábitos, podem influenciar o aparecimento das neoplasias. A semelhança dos tumores mamários caninos com os tumores de mama da mulher leva a um interesse no estudo da patologia comparada, estimulando o uso de modelos animais. Apesar dos muitos estudos, pouco se conhece sobre o prognóstico e as causas dos tumores mamários caninos, observando-se um esforço crescente na tentativa de acrescentar aos fatores prognósticos clássicos novos parâmetros, de natureza molecular, que auxiliem a decisão clínica, à semelhança do verificado em Medicina Humana, estando entre eles os marcadores moleculares, como a proteína P53 e as proteínas de estresse. A expressão de proteína P53 e das proteínas de estresse tem sido observada em muitas neoplasias, incluindo o câncer de mama. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi investigar a imunomarcação de HSP 27, HSP 72, HSP 90 e proteína P53 em tecido mamário normal e neoplásico de cadelas e estabelecer uma relação entre a expressão destas proteínas e o grau histológico das neoplasias. Foi realizada análise estatística e o nível de significância (α) adotado foi de 5%. Dentre os tumores malignos, os carcinomas simples foram o tipo histológico predominante. Para a proteína P53, não houve diferença significativa em sua expressão entre os grupos de tumores malignos avaliados, ocorrendo o mesmo para as HSPs 27, 72 e 90. A sensibilidade do teste de imuno-histoquímica para a proteína P53, nesta amostra, foi de 67,5%, a especificidade foi de 100%, o valor preditivo positivo foi de 100%, o valor preditivo negativo foi de 25% e acurácia do teste foi de 92%. Ainda para a proteína P53, comparando-se o grupo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast tumors are the leading cause of death in dogs and this has aroused great interest in developing studies related to this disease. The proximity with humans, much as in living habits, may influence the onset of tumors. The similarity of canine mammary tumors with breast tumors of women take an interest in the study of comparative pathology, stimulating the use of animal models. Despite many studies, little is known about the prognosis and causes of canine mammary tumors, observing a growing effort in trying to add to the classic prognostic factors new parameters of molecular nature, that help the clinical decision, like that seen in Human Medicine, and among them the molecular markers such as P53 and stress proteins. The expression of P53 protein and the stress proteins has been observed in many cancers, including breast cancer. Accordingly, the purpose of this study was to investigate the immunostaining of HSP 27, HSP 72, HSP 90 and P53 protein in normal and neoplastic breast tissue of female dogs and establish a relationship between the expression of these proteins and the histological grade of tumors. Statistical analysis was performed and significance level (α) was 5%. Among the malignant tumors, simple carcinomas were the predominant histologic type. Protein P53, presented no significant difference in expression between the evaluated groups of malignant tumors, the same occurring for HSPs 27, 72 and 90. The test sensitivity of immunohistochemistry for protein P53 in this sample was 67,5%, specificity was 100%, positive predictive value was 100%, negative predictive value was 25% and accuracy of test was 92%. Although protein P53, compared to the control group with other groups in relation to staining intensity and proportion score, there was a significant difference only between the group of simple carcinomas. With regard to staining intensity, we tested the correlation between... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação do efeito do atenolol no processo de reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) /Cursino, Natalia Manrique. January 2010 (has links)
Resumo: A hipertensao arterial representa um fator de risco sistemico e condicao desfavoravel para tratamentos dentarios, especialmente aqueles que necessitam de reparacao ossea. O objetivo deste estudo foi avaliar o reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e o efeito do atenolol sobre este processo. Wistar e SHR tratados ou nao com 100mg/kg/dia (atenolol), foram submetidos a extracao do dente incisivo superior direito e sacrificados aos 7, 14, 21, 28 e 42 dias apos a cirurgia. As hemi-maxilas foram removidas e as imagens radiograficas foram realizadas. A analise radiografica foi obtida por meio do sistema digital Digora. Analises histologicas, histomorfometricas e reacoes imunoistoquimicas foram feitas em cortes histologicos de 5ƒÊm de espessura, os quais foram corados com hematoxilina-eosina ou submetidos a imunomarcacao para RANK, RANKL, OPG e proteinas MMP-9. A analise histologica foi realizada por microscopia optica e a analise histomorfometrica pelo software RGB / Leica Qwin Color. Os resultados densitometricos e histomorfometricos foram analisados pela Anova two-way. Na analise imunoistoquimica, utilizando um microscopio optico, foram atribuidos scores as imagens. Os resultados foram analisados pelos testes estatisticos Kruskal-Wallis e Mann Whitney. As diferencas entre os resultados foram consideradas significativas quando p<0,05. Reducao da densidade mineral ossea (DMO), menor porcentagem de osso e menor espessura do trabeculado osseo foram observadas nos periodos finais do reparo alveolar em SHR. Aumento da imunomarcacao para RANKL, RANK e MMP-9 foi observado em 28 dias apos a cirurgia no alveolo em SHR. Consistente efeito do atenolol foi observado no reparo alveolar de ratos hipertensos. O atenolol aumentou a DMO observada na maioria dos periodos analisados e aumentou a espessura do trabeculado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hypertension represents a systemic risk factor and unfavorable condition for dental treatments, especially treatments that require bone healing. The purpose of this study was to evaluate the alveolar wound healing in spontaneously hypertensive rats (SHR) and the atenolol effect on this process. Normotensive Wistar rats and SHR, untreated or treated with atenolol (100mg/kg/day), were submitted to the extraction of the upper right incisive tooth and sacrificed at 7, 14, 21, 28 and 42 days after surgery. The hemi-jaws were extracted and the radiographic images were obtained. Radiographic analysis was performed by using the digital system Digora. Histological, histomorphometric and immunohistochemical reactions were done in histological sections, 5 μm thick, stained with hematoxylin and eosin or subjected to immunolabeling to RANK, RANKL, OPG and MMP-9 proteins. Histological analysis was performed by light microscopy and histomorphometric analysis by Leica Qwin Color/RGB software. The densitometric and histomorphometric results were also analyzed by two-way ANOVA. In immunohistochemical analysis, using an optical microscopy, scores were assigned to the images. Results were analyzed by Kruskal-Wallis and Mann Whitney statistical tests. Differences between results were considered significant when p <0.05. Reduced bone mineral density (BMD), lower bone percentage and less thickness of trabecular bone was observed in the final periods of alveolar bone healing in SHR. Increased RANKL, RANK and MMP-9 immunolabeling were observed at 28 days after surgery in SHR alveolus. Consistent atenolol effect was observed on alveolar bone healing of hypertensive rats. Atenolol increased the BMD observed in most of the periods analyzed and increased trabecular bone thickness at 28 and 42 days in SHR alveolus. Increased OPG immunolabeling... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Cristina Antoniali Silva / Coorientador: Roberta Okamoto / Banca: Raquel Fernanda Gerlach / Banca: Sandra Helena Penha de Oliveira / Mestre
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Lesões do músculo gastrocnêmio e da junção músculo tendínea em cães afetados pela distrofia muscular progressiva /Beretta, Daniel Côrtes. January 2011 (has links)
Orientador: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Carlos Eduardo Ambrósio / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Maria de Jesus Veloso Soares / Resumo: A Distrofia Muscular no Golden Retriever (DMGR) é doença muscular degenerativa hereditária que representa excelente modelo para o estudo da Distrofia Muscular de Duchene de humanos. Esta pesquisa objetivou estudar as lesões do músculo gastrocnêmio (MG) e da junção músculo tendínea (JMT), na ausência de distrofina em cães afetados por distrofia muscular. Foram utilizados seis cães distróficos para distrofia muscular e três cães controle que vieram a óbito por causas variadas que não afetavam o sistema músculo esquelético. Após necrópsia completa, setenta e cinco fragmentos musculares do MG e da JMT foram colhidos em duplicata. Metade destes foi fixada em solução de formol e o restante foi congelado em nitrogênio líquido. Seguiram-se as técnicas usuais para inclusão em parafina e coloração pelo método Picrosirius, HE e TGM para análise histopatológica. Reações imuno-histoquímicas para MHCII e vimentina foram realizadas nos cortes em parafina. Os fragmentos congelados foram processados para colorações especiais para cálcio, alizarina Red S; reações enzimo-histoquímicas de fibras do tipo I (FTI) e II (FTII), mATPase (pH 9,4); e imuno-histoquímicas para CD4, CD8, MHCI e utrofina. Resultados da análise histopatológica mostraram que as lesões no MG de distróficos foram mais pronunciadas que na JMT. A análise histomorfométrica no MG de distróficos revelou maior porcentagem de FTII e menores valores de diâmetro mínimo e área para FTI e FTII. Para os parâmetros supracitados, as FTII na JMT mantiveram-se morfologicamente iguais ao controle. Não houve diferença quanto ao tipo de colágeno na JMT de distróficos e controle. Nas reações imuno-histoquímica para os anticorpos CD4, CD8, MHCI, MHCII, vimentina e utrofina, somente o antígeno MHCI apresentou diferença significativa (p< 0.07), quando comparado ao controle, sendo a imunoexpressão mais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Muscular Dystrophy in Golden Retrievers (DMGR) is a hereditary degenerative muscle disease that represents an excellent model for the study of Duchenne Muscular Dystrophy. The aim of this study was to characterize the lesions in gastrocnemius muscle (GM) and myotendinous junction (MTJ) in absence of dystrophin in dogs affected by progressive muscular dystrophy. Six affected dogs and three control dogs, without musculoskeletal system diseases, were used. After necropsy, seventy-five myotendinous and muscle samples were cut and collected in duplicate. Half of them were fixed in formalin solution, and the other half were frozen in liquid nitrogen. After that, the samples were processed by usual techniques of paraffin embedding and stained by Picrosirius method, HE and TGM, for histopathological analysis. Immunohistochemical reactions for MHCII and vimentin were performed in paraffin samples. The frozen fragments were processed for special stains for calcium, Alizarin Red S, enzymohistochemical reactions of type I fibers (FTI) and II (FTII), mATPase (pH 9.4), and immunohistochemical for CD4, CD8, MHCI and utrophin. The results of histopathological analysis of the dystrophic dogs showed that the lesions in GM were more pronounced than MTJ. Histomorphometric analysis of the dystrophic GM showed the highest percentage of FTII, and lower values of minimum diameter and area for FTI and FTII. For the same parameters, the FTII in dystrophic MTJ remained morphologically similar to control. There was no difference in the type of collagen in MTJ of dystrophic and control. In immunohistochemical reactions to antibodies CD4, CD8, MHCI, MHCII, vimentin and utrophin, only the antigen MHCI showed a significant statistic difference (p <0.07) compared to control, being the most intense immunostaining in GM dystrophic. From these results we can conclude that the preservation of morphological MTJ can be ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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