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Relação entre imunomarcação para iNOS, carga parasitária, parasitemia e lesões em diferentes órgãos de ratos wistar experimentalmente infectados com Trypanosoma evansi /Pereira, Priscila Preve. January 2017 (has links)
Orientador: Fabiano Antonio Cadioli / Banca: Adriana Coelho de Souza / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Paulo Cesar Ciarlini / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Resumo: Trypanosoma evansi acomete diversas espécies de animais em todo o mundo. A infecção se caracteriza por intensa parasitemia associada a anemia, que evolui para lesões teciduais atribuídas à resposta autoimune do hospedeiro. O objetivo desse estudo foi avaliar a evolução da infecção experimental pelo Trypanosoma evansi até as fases mais tardias da infecção, a partir das lesões patológicas, estresse oxidativo tecidual, parasitemia e parâmetros hematológicos. Para tal, os ratos infectados com T. evansi foram eutanasiados aos 7, 14, 21, 28 e 35 dias após a inoculação (DAI), os animais foram anestesiados, e posteriormente colhidos 5 ml de sangue intracardíaco com anticoagulante etileno diamino tetra acetato de sódio (EDTA). Os achados histopatológicos foram avaliados de acordo com o tipo de lesão e a incidência de T. evansi, sendo descrita a localização da lesão e determinada a intensidade por escores. O estresse oxidativo foi avaliado a partir da resposta imune celular por imunomarcações da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS) de imunohistoquímica. A carga parasitária foi detectada pela imunomarcação do parasita pela mesma técnica. Foi notada uma acentuada anemia no DAI 21. No baço, a hiperplasia linfoide em todos os momentos, evidenciando-se no DAI 35. No coração, presença de parasitas no interior de vasos e câmaras ventriculares, no DAI 21 e infiltrado inflamatório polimorfonuclear em todos os momentos, porém, extremamente acentuado no DAI 28. Nos rins notou-se a presen... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Trypanosoma evansi affects several species of animals worldwide. The infection is characterized by intense parasitemia associated with anemia, which evolves to tissue lesions attributed to the host's autoimmune response. The objective of this study was to evaluate the evolution of the experimental infection by Trypanosoma evansi until the later stages of the infection, from the pathological lesions, tissue oxidative stress, parasitemia and hematological parameters. To that end, mice infected with T. evansi were euthanized at 7, 14, 21, 28 and 35 days after inoculation (DAI), animals were anesthetized, and 5 ml of intracardiac blood was then collected with anticoagulant ethylene diamine tetraacetate sodium (EDTA). The histopathological findings were evaluated according to the type of lesion and the incidence of T. evansi. The location of the lesion was described and the intensity determined by scores. Oxidative stress was evaluated from the cellular immune response by immunostaining of the enzyme inducible nitric oxide synthase (iNOS) immunohistochemistry. The parasite load was detected by immunolabeling the parasite by the same technique. It was noted a marked anemia in DAI 21. In the spleen, lymphoid hyperplasia at all times, evidenced in DAI 35. In the heart, presence of parasites inside vessels and ventricular chambers, in DAI 21 and polymorphonuclear inflammatory infiltrate in all However, the presence of the parasite from the DAI 14 associated with a toxic nephrosis was ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Avaliação do copolímero de ácido polilático e poliglicólico ao redor de implantes osseointegráveis sem estabilidade primária : análise biomecânica, histométrica e imunoistoquímica em coelhos /Queiroz, Thallita Pereira. January 2006 (has links)
Resumo: A proposta deste estudo foi avaliar a associação do PLA/PGA ao redor de implantes osseointegráveis instalados sem estabilidade primária, por meio da análise biomecânica, histométrica e da expressão das proteínas OPG, RANKL, OC e COL-I. Vinte e cinco coelhos receberam 2 implantes de 2,6/ 6,0mm na tíbia direita em leitos receptores preparados com 3,0mm. Um defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo e o outro com o PLA/PGA previamente à instalação dos implantes. A eutanásia dos animais foi realizada nos períodos de 5, 15, 40 e 60 dias pósoperatórios e o teste biomecânico foi realizado nos períodos de 40 e 60 dias. As peças foram submetidas ao processamento imunoistoquímico e coradas por HE. As peças de 5 animais do período de 60 dias foram desgastadas e coradas com vermelho de alizarina e azul de Stevenel. Não houve diferenças nos valores de torque-reverso na comparação entre os grupos e os períodos avaliados. A análise das imunomarcações não evidenciou diferença estatística entre os grupos para cada período. Houve evidência estatística de maior expressão de RANKL no período de 15 dias no grupo tratado em relação à expressão de colágeno I. A proteína RANKL apresentou mais percentuais de marcações celulares acima de 50% quando comparada às outras proteínas. Não houve diferença estatística entre os grupos quanto à extensão linear de contato entre tecido ósseo e implante. Conclui-se que o copolímero apresentou biocompatibilidade e permitiu neoformação óssea em contato com o implante. Além disso, ocorreu o processo de osseointegração em ambos os grupos, mesmo na ausência de estabilidade primária dos implantes. / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the association of the PLA/PGA around of osseointegrated implants installed without primary stability, through the biomechanics, histometric analysis and of the OPG, RANKL, OC and COL-I proteins expression. Twenty-five rabbits received 2 implants of 2.6 / 6.0mm in the right tibia in receptor beds prepared with 3,0mm. A defect was fulfiled with blood clot and the other with the PLA/PGA, previously to the implants installation. The euthanasia of 25 animals was performed at 5, 15, 40 and 60 days and the biomechanical test was performed at 40 and 60 days. The samples followed immunoistochemistry processing and were stained with HE. The pieces of 5 animals of 60 days were trimmed and stained with alizarin red and Stevenel's blue. There were not differences in the torque-reverse between the groups and periods. The analysis of the immunolabelings did not evidence statistic difference between the groups for each period. There was statistics evidence of increase in the RANKL expression in the 15 days period, in the treated group, when compared to the COL-I. The RANKL protein presented more percentiles of immunolabelings above 50% when compared to the other proteins. There was no statistics difference between the groups regarding contact linear extension between bone tissue and implant. It can be concluded that the copolymer presented biocompatibility and it allowed bone neoformation in contact with the implant. Besides, the osseointegration process happened in both groups, even in the absence of primary stability of the implants. / Orientador: Eduardo Hochuli Vieira / Coorientador: Roberta Okamoto / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Cássio Edvard Sverzut / Mestre
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Aplicação do copolímero PLA/PGA adicionado ao fosfato de cálcio ao redor de implantes osseointegráveis instalados sem estabilidade primária em tíbia de coelhos : estudo biomecânico, histométrico e imunoistoquímico /Souza, Francisley Ávila. January 2006 (has links)
Resumo: Aplicação do copolímero PLA/PGA adicionado ao fosfato de cálcio ao redor de implantes osseointegráveis sem estabilidade primária instalados em tíbia de coelhos. Estudo biomecânico, histométrico e imunoistoquímico." Proposição: O objetivo do presente trabalho foi avaliar comportamento mecânico e biológico do tecido ósseo ao redor de implantes associados ao copolímero ácido polilático/poliglicólico adicionado ao fosfato de cálcio. Materiais e Métodos: Para tal foram usados vinte e cinco coelhos Albinus. Após procedimento cirúrgico os animais foram divididos em 4 períodos, sendo o último período, 60 dias, composto por 10 animais. Os animais tiveram perfurações realizadas com sobrefresagem na porção medial das tíbias direita e esquerda. Na tíbia direita o leito cirúrgico foi preenchido com coágulo sanguíneo e na tíbia esquerda com o copolímero. Em ambos leitos cirúrgicos a instalação dos implantes osseointegráveis ocorreu imediatamente após a fresagem. Nos períodos de 5, 15, 40 e 60 dias os animais foram anestesiados e sofreram eutanásia por meio de perfusão de Formaldeído 4% no ventrículo esquerdo. Nos períodos de 40 e 60 dias realizou-se o torque reverso para remoção dos implantes. As peças dos 5 animais restantes do período de 60 dias foram levadas ao micrótomo Exakt para realização de cortes histológicos com os implantes. Nas demais peças, realizou-se análise imunoistoquímica mediante a utilização dos anticorpos primários contra as proteínas OPG, RANK e RANKL. Resultados: As médias de torque para o grupo controle foram de 10,2 e 5,6 N/cm nos períodos de 40 e 60 dias respectivamente, enquanto para o grupo tratado foram de 7,6 e 7,0 N/cm nos mesmos períodos. Houve um balanço na expressão das proteínas com leve predomínio de RANKL. / Abstract: Application of PLA/PGA copolymer added to calcium phosphate around osseointegrated implants with no primary stability in rabbits's tibia. A biomecanical, histometric and immunohistochemistry study. Purpose: The aim of the present study was to evaluate the mechanical and biological behaviour of bone tissue formed around the implants associated to copolymer polilactic/poliglicolic acids added to calcium phosphate. Materials and Methods: In the present study, twenty five Albinus rabbits, divided in 4 periods, and the last period, referred to 60 days, was composed by 10 animals. The animals had perfurations performed with osteotomy in the medial portion of right and left tibias. In the right tibia, the surgical bed was filled with blood clot and in the left tibia, the copolymer was used. In the same way in both surgical beds, the osseointegrated implants installation occurred immediately after the osteotomy. In the periods of 5, 15, 40 and 60 days, the animals were anesthetized and were sacrificed by perfusion with 4% formaldehyde, in the left ventricule. In the periods of 40 and 60 days, the reverse torque was performed in order to remove the implants. The pieces of the 5 remaining animals of the 60 days period were processed in the Exakt microtome in order to realize undecalcified histological sections with the implants. In the other pieces, the immunohistochemical analysis was performed in order to detect the presence of the OPG, RANK and RANKL proteins in the bone tissue. Results: The mean of torque for the control group were 10.2 and 5.6 N/cm in the periods of 40 and 60 days respectly, while in the treated group were 7.6 and 7.0 N/cm in the same periods. There was a balance in the expression of the proteins with moderate predominance of RANKL protein. There were no statistically differences between the groups in relation to the linear extension of contact between bone and implant. / Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Eduardo Hochuli Vieira / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Sérgio Bruzadelli Macedo / Mestre
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Infecção experimental em carcarás (Caracara plancus, Miller, J. F., 1777) com Toxoplasma gondii (amostra ME49) /Vitaliano, Sérgio Netto. January 2007 (has links)
Orientador: Karin Werther / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Deise Aparecida de Oliveira Silva / Resumo: O presente trabalho objetivou estudar a susceptibilidade do carcará (Caracara plancus) frente à infecção experimental pela amostra ME49 de Toxoplasma gondii pela observação da sintomatologia clínica, análise dos parâmetros hematológicos, estudo da cinética de anticorpos IgG anti-T. gondii, e constatação da presença do parasito nos diversos tecidos utilizando a imunoistoquímica, imunofluorescência direta em tecidos, bioensaio em camundongos e PCR. Sete carcarás soronegativos para anticorpos anti-T. gondii foram separados em dois grupos: G1 (grupo infectado - 5 aves) e G2 (grupo controle - 2 aves). As aves do grupo G1 foram alimentadas durante três dias consecutivos com roedores Calomys callosus previamente infectados com T. gondii e as aves do grupo G2 foram alimentadas com roedores não infectados. As aves infectadas não apresentaram sintomas clínicos de toxoplasmose, tampouco alterações nos parâmetros hematológicos. Todas as aves infectadas soroconverteram. A soroconversão das aves experimentalmente infectadas ocorreu a partir do sétimo dia pós-infecção, os picos iniciais na produção de anticorpos IgG anti-T. gondii ocorreram entre 15 e 30 dias pós-infecção sendo que em seguida houve uma tendência de queda dos títulos de anticorpos. No momento da necropsia não foram encontradas lesões sugestivas da infecção por T. gondii. Não foi observado no exame histopatológico a presença do parasito nos diversos tecidos amostrados das aves infectadas, entretanto em uma das aves do grupo não infectado e sorologicamente negativa para anticorpos anti-T. gondii, foi encontrado um cisto tecidual na musculatura. Pelas técnicas de imunoistoquímica e imunofluorescência direta em tecidos o parasito foi encontrado em pequeno número em diversos tecidos, porém tanto nas aves do grupo infectado quanto nas aves do grupo controle. Utilizando o bioensaio em camundongos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study aimed to evaluate the susceptibility of crested caracara (Caracara plancus) to experimental infection with ME49 strain of Toxoplasma gondii, through clinical symptoms, hematological parameter analysis, kinetics of specific IgG antibodies to T. gondii, and parasite detection by immunohistochemistry, direct immunofluorescence, bioassay, and PCR. Seven crested caracara, seronegative to T. gondii antibodies, were separated into two groups: G1 (infected group - 5 birds), and G2 (control group - 2 birds). G1 birds were fed during three successive days with Calomys callosus previously infected with T. gondii, and G2 birds were fed with non-infected rodents. The infected birds did not present clinical symptoms, nor significant changes in hematological parameters. All infected birds had antibody titers to T. gondii. IgG antibodies to T. gondii were first detected at 7 dpi, with production peaks between 15 and 30 dpi, which were followed by a sharp decrease in detectable antibodies. No gross lesions sugestive of T. gondii infection were observed. By histopatological examination, it was not possible to observe the presence of the parasite in the infected birds' organs, however, in one bird of the control group, a T. gondii tissue cyst was visualized in muscle. By immunohistochemistry and direct immunofluorescence, the parasite was found in small number in different organs, although in animals from both groups. The presence of T. gondii was confirmed in heart samples of two bioassayed birds, both from the infected group. In this study, the experimentally infected crested caracaras did not show clinical symptoms, alteration on hematological parameters and the parasite was found in small numbers in the organs of the birds, for these reasons the crested caracara were resistant to T. gondii infection. / Mestre
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Análise dos nichos nas doenças primárias, secundárias e reacionais da medula ósseaAugusto, Bruna Pagnin January 2019 (has links)
Orientador: Maria Aparecida Custódio Domingues / Resumo: Introdução: A medula óssea é o órgão responsável pela hematopoise, fenômeno que se relaciona com a diferenciação da célula tronco hemopoética (CTH) em eritrócitos, granulócitos, monócitos, linfócitos e plaquetas. É constituída pelo tecido hematopoiético, tecido gorduroso, matriz proteica e sinusoidais e está contida no interior dos ossos esponjosos, em contato com o tecido ósseo cortical e trabecular. Em 1978, Ray Schofield conceituou nicho como local especifico, dentro da medula óssea, onde a CTH se origina, assenta e prolifera. Atualmente sabe-se que o nicho é mais do que um simples compartimento morfológico, mas um sítio funcional e dinâmico, que se remodela e influencia a função da CTH e suas progenitoras, exercendo papel definitivo na CTH normal e neoplásica. Estudos demonstram que os nichos e seus componentes celulares e proteicos, influenciam e determinam a manutenção de CTH ativas e quiescentes, sendo determinante na manutenção, progressão e recaída de doenças da medula óssea. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar na medula óssea humana, acometida por doenças primárias, secundárias e reacionais, o comportamento da CTH, descrevendo localização e quantificação destas. Material e métodos: Para realização deste estudo, foram selecionados quatro grupos de doenças hematológicas, divididas em mieloma múltiplo (n= 10), leucemia linfóide crônica (n= 10), síndrome mielodisplásica (n= 10) e reacional (n= 10). Foi realiado um estudo imuno-histoquímico para avaliação da ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Bone marrow is the organ responsible for hematopoiesis, a phenomenon that is related to the differentiation of hemopoietic stem cell (HSC) into erythrocytes, granulocytes, monocytes, lymphocytes and platelets. It consists of hematopoietic tissue, fatty tissue, protein and sinusoidal matrix and is contained within the spongy bones, in contact with the cortical and trabecular bone tissue. In 1978, Ray Schofield conceptualized a niche as a specific site within the bone marrow, where the HSC originated, settled, and proliferated. It is now known that the niche is more than a simple morphological compartment, but a functional and dynamic site, which remodels and influences the function of HSC and its progenitors, playing a definitive role in normal and neoplastic HSC. Studies demonstrate that niches and their cellular and protein components influence and determine the maintenance of active and quiescent HSC, being determinant in the maintenance, progression and relapse of diseases of the bone marrow. Objective: The aim of this study was to evaluate the behavior of HSC in the human bone marrow, affected by primary, secondary and reactional diseases, describing their location and quantification. Materials and methods: Four groups of hematological diseases were selected, divided into multiple myeloma (n = 10), chronic lymphocytic leukemia (n = 10), myelodysplastic syndrome (n = 10) and reactional (n = 10). An immunohistochemical study was performed to evaluate the marki... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Expressão da família de proteínas SIBLING nos tecidos regenerados em defeitos de furca em câes / The SIBLING family of proteins expression in regenerative tissues in furcation defects in dogsChristiane Watanabe Yorioka 13 September 2010 (has links)
O presente estudo teve como objetivo caracterizar a expressão da família SIBLING (Small Integrin-Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) após tratamento regenerativo de furca com enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. Para isto, os 2os e 3os pré-molares superiores foram extraídos em quatro cães s.r.d. Cinco dias após as extrações, defeitos padronizados de furca classe II foram criados nos 2os, 3os e 4os pré-molares inferiores, bilateralmente. Estes defeitos foram tratados imediatamente com raspagem, alisamento e polimento corono-radicular (RAPCR) e retalho deslocado coronariamente (RDC) (Grupo Controle) ou com RAPCR + RDC + enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários (Grupo Teste) em um experimento de boca-dividida. Após um período de 6 semanas de reparação, os animais foram sacrificados e foi realizada análise imuno-histoquímica para avaliar a localização dos membros da família de proteínas SIBLING, composta pelas seguintes proteínas nãocolágenas da matriz extracelular: osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BSP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1), sialofosfoproteína da dentina (DSPP) e fosfoglicoproteína da matriz extracelular (MEPE). Não foram encontradas diferenças na expressão da família SIBLING entre os grupos teste e controle. Todas as proteínas foram expressas no novo osso, novo cemento e novo ligamento periodontal, em ambos os grupos. Os osteoclastos demonstraram imunolocalização intracelular intensa somente para a OPN. Cementócitos e o novo ligamento periodontal demonstraram, particularmente, marcação intensa para a MEPE. Houve uma diferença evidente entre o padrão de marcação entre o lado tratado (vestibular) e o não-tratado (lingual) de todos os espécimes, com presença de maior marcação do lado vestibular, para todos os anticorpos testados. Podemos concluir que não houve diferenças no padrão de expressão da família SIBLING após o uso do enxerto de tecido reparativo de alvéolos dentários. A família de proteínas SIBLING é expressa durante o processo de reparação de defeitos de furca, indicando possíveis papéis e funções para as proteínas OPN, BSP, DMP1, DSP e MEPE como moléculas alvo em terapias de regeneração periodontal. / The present study aimed in characterizing the expression of the SIBLING (Small Integrin- Binding Ligand, N-linked Glycoproteins) family in a regenerative treatment of furcation defects with a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The second and third upper premolars were extracted in four mixed breed dogs. Five days later, standardized class II furcation defects were created in the second, third and fourth mandibular premolars, bilaterally. The defects were immediately treated with either debridement and root planning (DRP) combined with a coronally positioned flap (CPF) (Control Group), or with DRP+CPF + a reparative tissue graft derived from the second and third premolar extraction sockets (Experimental Group) in a split-mouth design. After 6 weeks period of healing, the animals were sacrificed and immunohistochemistry was carried out to assess the localization of members of the SIBLING family of noncollagenous extracellular matrix proteins, namely osteopontin (OPN), bone sialoprotein (BSP), dentin matrix protein 1 (DMP1), dentin sialophosphoprotein (DSPP) and matrix extracellular phosphoglycoprotein (MEPE). No differences in the SIBLING family of proteins expression were noted between the control and experimental group. All proteins were expressed in new bone, new cementum and new periodontal ligament in both groups. Osteoclasts exhibited intense intracellular localization only for OPN. Cementocytes and the newly formed periodontal ligament demonstrated particularly intense staining for MEPE. There was an evident difference between the staining pattern between the treated (buccal side) and non-treated (lingual) side of the specimens, with a more intense staining pattern in the buccal side, for all the tested antibodies. In conclusion, there were no differences in the pattern of SIBLING expression following the use of a reparative tissue graft obtained from extraction sockets. The SIBLING family of proteins is expressed during the healing process of furcation defects indicating possible roles and functions of OPN, BSP, DMP1, DSPP and MEPE as target molecules in periodontal regeneration therapies.
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Avaliação da sensibilidade de métodos diagnósticos e da carga fúngica durante o tratamento com itraconazol na esporotricose felinaSilva, Jéssica Nunes January 2016 (has links)
A esporotricose é uma micose subcutânea causada por espécies do complexo Sporothrix schenckii que acomete seres humanos e animais, principalmente os gatos. Desde 1998 o Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz no Rio de Janeiro vem acompanhando uma epidemia dessa doença envolvendo seres humanos, cães e gatos, onde as principais formas de transmissão são arranhadura, mordedura e/ou contato com o exsudato das lesões cutâneas de gatos doentes. O diagnóstico definitivo da esporotricose felina é obtido a partir do isolamento do Sporothrix sp. em meios de cultura, entretanto, o resultado desse exame pode demorar até quatro semanas, o que em algumas situações pode retardar o início do tratamento antifúngico. Os exames citopatológico, histológico e imuno-histoquímico são opções viáveis e mais rápidas para o diagnóstico dessa micose em gatos, principalmente em situações quando não é possível realizar o isolamento fúngico. O diagnóstico precoce da esporotricose felina é importante na implementação rápida do tratamento antifúngico, melhorando o prognóstico na maioria dos casos. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar as diferentes técnicas utilizadas no diagnóstico da esporotricose felina antes e durante o tratamento antifúngico. Na primeira etapa do estudo foram comparados os exames citopatológico (coloração pelo método panótico rápido), histológico (impregnação pela prata de Grocott) e imuno-histoquímico de 184 gatos no diagnóstico da esporotricose sem tratamento antifúngico prévio utilizando o cultivo fúngico como teste padrão de referência. Estruturas leveduriformes foram observadas em 160 (87,0%) casos no exame citopatológico, 168 (91,3%) na histopatologia e 163 (88,3%) na imunohistoquímica. A associação das três técnicas elevou a sensibilidade do diagnóstico para 98,3%, o que enfatiza a necessidade de sua implementação como ferramentas de rotina, sobretudo quando a cultura fúngica não está disponível. Na etapa seguinte, a carga parasitária e o isolamento de Sporothrix sp. das lesões cutâneas de 74 gatos foram avaliados mensalmente antes e durante o tratamento com itraconazol por um período de 12 semanas. A mediana da carga fúngica observada antes do início do tratamento antifúngico foi maior (pMW = 0,013) nos gatos nos quais foi observada a persistência da lesão (Med=98,6) em relação aqueles em que houve cicatrização (Med=15,0). A redução da carga fúngica ocorreu em todas as lesões estudadas, assim como a redução da positividade da cultura fúngica e do exame citopatológico. Estes resultados sugerem uma redução no potencial zoonótico dos gatos, enfatizando a importância do tratamento precoce como medida de controle. Adicionalmente, o isolamento do fungo e a presença de estruturas leveduriformes nas lesões de gatos com esporotricose podem ser fatores preditores da falência terapêutica, indicando a necessidade da implementação de alternativas terapêuticas. / Sporotrichosis is subcutaneous mycose caused by species of fungus from the Sporothrix schenckii complex and affects humans and animals, especially cats. Since 1998, the Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz in Rio de Janeiro has been describing in Rio de Janeiro an epidemic of sporotrichosis, involving humans, cats and dogs, with most of cases related to transmission through scratches, bites or contact with lesions from infected cats. The definitive diagnosis is based on the isolation of the fungus in culture; however, the results may take up to four weeks and postpone treatment outset. The cytopathology, histopathology and immunohistochemistry should be considered as rapid and accessible alternatives for the diagnosis in cats, especially when the fungal culture is not available. The early diagnosis of feline sporotrichosis is desirable for the prompt beginning of the antifungal treatment, improving the prognosis in most of the cases. The aim of this study was to evaluate and compare different techniques for the diagnosis of feline sporotrichosis before and during the treatment with itraconazol. In the first part of the study, cytopathological (Quick Panoptic), histopathological (Grocott silver stain) and immunohistochemical examinations were compared regarding the diagnosis of sporotrichosis in 184 cats without previous treatment, by using fungal culture as a reference standard. The yeast-like cells were observed in 160 (87.0%) cases by cytopathological examination, in 168 (91.3%) by histopathology and in 163 (88.3%) by immunohistochemistry. The combination of the three methods led to the diagnosis of 98.3% of cases, pointing to the need of their implementation as regular tools, notably when fungal culture is not available. In the second part of the study, the fungal burden and the isolation of Sporothrix sp. in cutaneous lesions of 74 cats were monthly evaluated before and during the treatment with itraconazole for twelve weeks. The median of the fungal load detected before the outse of the antifungal treatment was higher (pMW=0.013) in cats in which there was a persistence of the cutaneous lesion (Med=98.6) in comparison to those in which healing of the lesion was observed (Med=15.0). The decrease of the fungal burden occurred in all the lesions in this study as well as the reduction of the positivity of the fungal culture and the cytopathological examination. These results suggest a reduction in the zoonotic potential of cats and emphasize the importance of the early treatment as a control measure. In addition, the isolation of the fungus and the presence of yeast-like cells in lesions of cats with sporotrichosis during the treatment can be a predictor of treatment failure and should alert for the need of alternative therapeutic regimens.
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Caracterização histoquímica e imuno-histoquímica das alterações fibróticas nas endometroses das éguas /Costa, Leonardo Dourado da. January 2015 (has links)
Orientador: Julio Lopes Sequeira / Banca: Alessandre Hataka / Banca: Louisiane de Carvalho Nunes / Resumo: A endometrose é uma alteração degenerativa das glândulas uterinas e do estroma circundante, caracterizada pelo arranjo periglandular de miofibroblastos e a deposição de matriz extracelular (ECM). O presente trabalho objetivou avaliar a expressão de colágeno tipo I, III e IV e α-actina de músculo liso (α-SMA) nas endometroses equinas, procurando esclarecer a participação dos miofibroblastos na progressão destes processos. Foram utilizadas 24 biópsias uterinas com diagnóstico de endometrose, recebidas pelo Serviço de Patologia Veterinária e de Reprodução Animal da FMVZ, UNESP, Botucatu, SP. Cortes histológicos foram submetidos às técnicas histoquímicas de Tricrômico de Masson, Picrosirius Red sob luz polarizada e Ácido Periódico de Schiff (PAS) e imuno-histoquímicas para os três tipos de colágeno citados e α-SMA. Ainda, traçou-se um paralelo entre a técnica de Picrosirius Red e a imunomarcação dos colágenos tipos I e III. A análise histológica revelou que as fibras de colágeno denso correspondem ao colágeno tipo I, predominantes nas endometroses inativa e inativa destrutiva. As fibras de colágeno frouxo correspondem ao colágeno tipo III, predominantes nas endometroses ativas e ativas destrutivas. Nestes mesmos processos, a membrana basal revelou espessamento, aparentemente não relacionado ao colágeno tipo IV, e uma maior imunomarcação de miofibroblastos periglandulares em relação às endometroses inativa e inativa destrutiva. Desta forma, nota-se que os miofibroblastos estão relacionados ao aumento na deposição de colágeno tipo III nos ninhos fibróticos ativos / Abstract: Endometrosis is a degenerative change of the uterine glands and surrounding stroma, characterized by periglandular arrangement of myofibroblasts and deposition of extracellular matrix (ECM). The aim of this study was evaluate the expression of collagen type I, III and IV and α-smooth muscle actin (α-SMA) in equine endometroses, and investigate the role of myofibroblasts in the progression of these processes. A parallel was made with histochemical techniques of Masson's trichrome, Picrosirius Red under polarized light and Periodic Acid-Schiff (PAS). Twenty four uterine biopsies received by the Veterinary Pathology Service and Animal Reproduction of FMVZ, UNESP, Botucatu, SP, were diagnosed with endometrosis. Histological analysis revealed that the orange dense collagen fibers correspond to type I collagen, being prevalent in inactive and inactive destructive endometrosis. And the green loose collagen fibers correspond to type III collagen, and are predominant in active and active destructive endometrosis. In the same processes, a greater amount of periglandular myofibroblasts were observed in comparison to inactive and inactive destructive endometrosis. The presence of these cells in active processes are strongly related to an increased deposition of collagen type III in fibrotic nests. Regarding the basement membrane, the active destructive and active endometrosis shows thickening, apparently not related to an increase in expression of type IV collagen. The active destructive and inactive destructive endometrosis exhibited disruption areas in type IV collagen fibers. Thus, it is noted that the myofibroblasts are related to increased deposition of type III collagen in active fibrotic nests / Mestre
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Avaliação dos impactos gerados pela vinhaça bruta e após ajuste de pH, em representantes da fauna edáfica /Moreira-de-Sousa, Cristina. January 2018 (has links)
Título original: Avaliação dos possíveis impactos gerados pela vinhaça bruta e após ajuste de pH, em representantes da fauna edáfica / Orientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Rafael Neodini Remedio / Banca: Ana Maria Costa Leonardo / Banca: Cintya Aparecida Christofoletti de Figueiredo / Banca: Hellen Maria Soares Lima / Resumo: A cana-de-açúcar é uma das principais culturas mundialmente difundida e a alta produtividade resulta na geração de inúmeros resíduos. A vinhaça, resíduo da produção do etanol tem chamado a atenção devido suas características e propriedades, quando empregada na fertirrigação das culturas de cana-de-açúcar. Diversos benefícios foram descritos, ganhos na fertilização e enriquecimento do solo, bem como aumentos na produtividade. Entretanto, a vinhaça também apresenta substâncias que podem ser nocivas, afetando negativamente a fauna existente nos locais de aplicação do resíduo. Frente a essa problemática, diversos estudos foram desenvolvidos com o intuito de melhor compreender os impactos da vinhaça no meio ambiente e, mesmo diante dos benefícios que a fertirrigação com a vinhaça implica economicamente ainda há a necessidade de maiores cuidados com a utilização do resíduo no campo. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi propor um tratamento para a vinhaça, ajustando seu pH em 7,0 (neutro) utilizando cal (CaO), com a intenção de amenizar sua toxicidade para posterior uso no solo, visto que, um dos grandes problemas apresentados pela vinhaça é o pH ácido. O uso de cal foi escolhido por ser este produto utilizado em campo para correção do solo. Foi associado o uso de diversos biomarcadores à bioindicadores de solo, além de testes ecotoxicológicos para avaliar o efeito da vinhaça bruta em comparação à vinhaça tratada. Diplópodos da espécie Rhinocricus padbergi foram expostos à ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sugarcane is one of the main crops worldwide and the high productivity results in the generation of many wastes. Vinasse, the residue of ethanol production, has attracted attention because of its characteristics and properties, when used in the fertirrigation of sugarcane crops. Several benefits have been described, gains in fertilization and soil enrichment, as well as increases in productivity. However, the vinasse also presents substances that can be harmful, negatively affecting the fauna existing in the places of application of the residue. Faced with this problem, several studies were developed with the purpose of better understanding the impacts of vinasse in the environment and, even in view of the benefits that fertirrigation with vinasse implies economically, there is still a need for greater care with the use of the residue in the field. In this context, the objective of this work was to propose a treatment for vinasse, adjusting its pH to 7.0 (neutral) using lime (CaO), with the intention of mitigating its toxicity for later use in the soil, since one of the great problems presented by vinasse is acid pH. The use of lime was chosen because this product is used in field for soil correction. It was associated the use of several biomarkers to soil bioindicators, as well as ecotoxicological tests to evaluate the effect of raw vinasse in comparison to the treated vinasse. Diplopods of the species Rhinocricus padbergi were exposed to vinasse in their raw form and treate... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Expressão imuno-histoquímica de TGF Β1 em pacientes com adenomioseJacobo, Andréia January 2016 (has links)
Introdução: Proteínas da Superfamília do fator transformador de crescimento β (TGF-β) estão implicadas na regulação de diversas funções biológicas. Embora alguns estudos revelaram a sua presença no endométrio ectópico de portadoras de adenomiose, a sua função na etiopatogenia da doença permanece pouco conhecida. Objetivo: o estudo visa comparar a expressão imuno-histoquímica de TGF-β1 no endométrio ectópico de portadoras de adenomiose com o endométrio tópico de pacientes sem essa condição. Método: Estudo de caso-controle utilizando imuno-histoquímica em amostras uterinas (blocos de parafina) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre. A amostra contém 28 casos de adenomiose e 21 controles. Resultados: Não encontramos associação entre tabagismo e adenomiose (P = 0,75), abortos e adenomiose (P = 0,29), gestações e adenomiose (P = 0,85), curetagens e adenomiose (P = 0,81), dor pélvica e adenomiose (P = 0,72) e presença de mioma e adenomiose (P = 0,15). Além disso encontramos relação entre sangramento uterino anormal (SUA) e adenomiose (P = 0,02) e cesarianas prévias e adenomiose (P = 0,02) . A expressão imuno-histoquímica de TGF-β1 no endométrio ectópico de portadoras de adenomiose não teve diferença significativa quando comparado com a expressão dessa proteína no endométrio tópico de pacientes sem adenomiose (P = 0,86). Conclusão: Nosso estudo foi um dos primeiros a comparar a expressão de TGF-β1 no endométrio de pacientes com e sem adenomiose. Em nossa análise não obtivemos diferença significativa entre os grupos, resultado diferente do encontrado em outros dois estudos. Mais estudos são necessários para investigar o papel da superfamília TGF no desenvolvimento e manutenção da adenomiose. / Background: Proteins of transforming growth factor β superfamily (TGF-β) are implicated in the regulation of various biological functions. Although some studies have revealed their presence in ectopic endometrium of women with adenomyosis, their role in the pathogenesis of the disease remains largely unknown. Objective: The study aims to compare the immunohistochemical expression of TGF- β1 in ectopic endometrium of women with adenomyosis with the topic endometrium of patients without this condition. Methods: Casecontrol study using immunohistochemistry in uterine samples (paraffin blocks) obteined from Hospital de Clínicas de Porto Alegre. The sample contained 28 adenomyosis cases and 21 controls. Results: We found no significant difference between smoking and adenomyosis (P = 0.75), abortions and adenomyosis (P = 0.29), pregnancies and adenomyosis (P = 0.85), curettage and adenomyosis (P = 0.81), pelvic pain and adenomyosis (P = 0.72) and presence of myoma and adenomyosis (P = 0.15). We did find a relationship between adenomyosis and abnormal uterine bleeding (AUB) (P = 0.02) and previous cesarean section and adenomyosis (P = 0.02). Immunohistochemical expression of TGF-β1 in ectopic endometrium of women with adenomyosis did not have significant difference when compared with the expression of this protein in the topic endometrium of patients without adenomyosis (P = 0.86). Conclusion: Our study was one of the first to compare the TGF-β1 expression in the endometrium of patients with and without adenomyosis. In our analysis we have not had significant difference between the groups, unlike observed in two other studies. More studies are needed to investigate the role of TGF superfamily in the development and maintenance of adenomyosis.
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