Na imunodeficiência comum variável (ICV) têm sido descritas alterações de linfócitos T, incluindo a produção diminuída da interleucina-2 (IL-2). Desde que a IL-2 pode promover a produção de imunoglobulinas in vitro, nosso principal objetivo foi investigar os efeitos in vivo do tratamento com IL-2 recombinante (IL-2r) em pacientes com ICV. Foram selecionados 4 pacientes que apesar de tratamento adequado com imunoglobulina EV apresentavam infecções recorrentes. Após um período de observação de 12 meses, os pacientes receberam doses crescentes de IL-2r durante 16 semanas com reposição de imunoglobulina apenas se a IgG sérica atingisse níveis menores do que 400mg/dL. A seguir, permaneceram em observação por mais 12 meses recebendo imunoglobulina . A gravidade das infecções foi avaliada segundo um \"score\" numa escala de 3 a 10. A avaliação in vitro incluiu: quantificação dos níveis de IgG, IgA e IgM séricas; resposta linfoproliferativa à PHA; populações linfocitárias CD4+, CD8+, CD19+ e CD25+ no sangue periférico. As reações adversas à IL-2r foram leves e localizadas. Houve redução aparente do número e gravidade das infecções durante os 12 meses subseqüentes ao término da IL-2r. Os níveis da IgG sérica e das células CD4+, CD8+ e CD19+ mantiveram-se estáveis durante todo o estudo. Em 3 pacientes houve relação entre melhora clínica e aumento da proporção de linfócitos T CD25+. Isto permite supor que a remissão de infecções em alguns pacientes com ICV , sob terapêutica com IL-2r associada ou não à imunoglobulina EV, esteja parcialmente relacionada à melhora da imunidade celular. Adicionalmente, nossos dados indicam que a IL-2r pode ser utilizada de modo seguro nas dosagens e período utilizados como terapêutica adjuvante em alguns pacientes com ICV que apresentam infecções recorrentes e má resposta terapêutica à imunoglobulina endovenosa / In Common Variable Immunodeficiency (CVID) T cell function may be impaired and interleukin-2 (IL-2) production diminished. Since IL-2 stimulates immunoglobulin production in vitro, the aim of this study was to determine the in vivo effects of recombinant interleukin-2 (rIL-2) in patients with CVID. We selected four CVID patients, who despite intravenous immunoglobulin infusion (IVIG) had recurrent infections. After a twelve-month run-in period, escalating dosages of rIL-2 were administered during 16 weeks, during which rescue IVIG treatment was performed whenever serum IgG levels dropped below 400 mg/dL. During follow-up (12 months), patients were observed and treated with IVIG. Infection severity was assessed using a 3 to 10 infection score. In vitro analysis included: measurement of serum levels of IgG, IgA and IgM; lymphocyte proliferative responses to phytohaemaglutinin (PHA); CD4+, CD8+,CD19+ and CD25+ lymphocyte populations in peripheral blood. Few local side-effects were observed in 2 patients. In the follow-up period after rIL-2 treatment, patients experienced reduction of the number and severity of infections. Levels of serum IgG, CD4+, CD8+ and CD19+ were stable throughout the study. In 3 patients we observed a relation between improvement of clinical parameters and number of T CD25+ cells. These findings suggest that remission of infections in some CVID patients treated with rIL-2, in combination or not with IVIG is, in part, associated with the improvement of cell immunity. Additionally, our results indicate that rIL-2 administration is safe and may serve as adjuvant therapy in some CVID patients with recurrent infections and poor response to IVIG treatment

O presente projeto teve como proposta estudar a utilização do colostro bovino liofilizado como manejo alternativo para caprinos recém-nascidos. Estudos relacionados com a aquisição de proteção passiva e o desenvolvimento do epitélio intestinal, como aspectos citológicos e histológicos, atividade celular e expressão do receptor específico para o IGF-I (IGF-IR), foram realizados. Às 0, 7 e 14 horas de vida, 15 machos recém-nascidos receberam 5% do peso inicial de colostro bovino liofilizado (CBL) e 14 colostro caprino (CC), ambas as refeições com 55 mg/mL de IgG. Amostras de sangue foram coletadas às 0, 7, 14, 18, 24, 36, 48, 72 e 96 horas de vida para a quantificação da imunoglobulina G (IgG), proteína total (PT) e do fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-I). Amostras do duodeno, jejuno e íleo foram coletadas às 18, 36 e 96 horas de vida para análises utilizando microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura e transmissão. A atividade de enzimas extracelulares, quantificação da proteína, DNA e RNA total e expressão do IGF-IR também foram determinadas. Amostras de um grupo adicional (0 h), que não ingeriu colostro, foram coletadas. No grupo CBL, as concentrações séricas de IgG às 14, 18, 24 e 48 horas foram maiores que às 0 e 7 horas, enquanto no grupo CC, apenas às 18 horas a concentração sérica foi maior que às 0 e 7 horas (P<0,05). A capacidade de absorção de IgG diminuiu entre 7 e 14 horas em CC (P<0,05), enquanto em CBL, manteve-se sem alteração nestes horários (P>0,05). As variáveis PT e IGF-I não foram influenciadas pela ingestão de colostro bovino liofilizado (P>0.05). Os indicativos de atividade celular, concentração de proteína, DNA e RNA total, proteína/DNA, proteína/RNA e RNA/DNA, e a atividade das enzimas aminopeptidase N, dipeptidil peptidase IV, aminopeptidase A, lactase, maltase e sacarase diferiram nos horários experimentais e em relação ao grupo adicional (P<0,05). Apenas as razões proteína/DNA, proteína/RNA no jejuno e a atividade da aminopeptidase A no íleo foram maiores no grupo CBL (P<0,05). A atividade da fosfatase ácida foi observada nas primeiras horas de vida, especialmente no duodeno. Com relação à morfologia do epitélio intestinal e densidade das vilosidades, o fornecimento de colostro bovino liofilizado não determinou alterações. As variações na ultraestrutura dos enterócitos revelaram a presença, no segmento jejuno, de material absorvido e do complexo endocítico apical às 0, 18 e 36 horas. No duodeno, a expressão gênica do IGF-IR ao nascimento foi maior que às 18 e 36 horas nos grupos CC e CBL (P<0,05). Enquanto, a expressão do receptor deste peptídeo bioativo no jejuno do grupo CBL foi maior às 18 e 36 horas em relação a 0 h (P<0,05). Os resultados obtidos do presente trabalho contribuem para que a fonte alternativa de imunoglobulinas, colostro bovino liofilizado, seja utilizada como um substituto para o colostro caprino sem alterações significativas na aquisição de proteção passiva e nas características histofisiológicas do tecido epitelial do intestino delgado de cabritos. / This project was proposed to study the use of lyophilized colostrum as an alternative management for newborn goat kids. Studies related to the acquisition of passive protection and development of the intestinal epithelium, as cytological and histological aspects, cellular activity and expression of the receptor specific for IGF-I (IGF-IR), were performed. At 0, 7 and 14 hours of life, 15 newborn males received 5% of initial weight of lyophilized bovine colostrum (LBC) and 14 goat colostrum (GC), both meals with 55 mg/mL of IgG. Blood samples were collected at 0, 7, 14, 18, 24, 36, 48, 72 and 96 hours of life to quantification of immunoglobulin G (IgG), total protein (TP) and insulin like growth factor type I (IGF-I). Samples of the duodenum, jejunum and ileum were collected at 18, 36 and 96 hours of life for analysis using optical microscopy and scanning and transmission electron microscopy. The activity of extracellular enzymes, quantification of total protein, DNA and RNA and expression of the IGF-IR were also determined. Samples from an additional group (0 h), not suckling, were collected. In LBC group, serum IgG concentrations at 14, 18, 24 and 48 hours were higher than at 0 and 7 hours, while in the GC group, only at 18 hours serum concentration was higher than at 0 and 7 hours (P<0.05). The capacity of IgG absorption decreased between 7 and 14 hours in GC (P<0.05), while in LBC, remained unchanged at these times (P>0.05). The variables TP and IGF-I were not influenced by ingestion of lyophilized bovine colostrum (P>0.05). The indicators of cellular activity, total protein, DNA and RNA concentration, protein/DNA, protein/RNA and RNA/DNA, and the enzyme activity of aminopeptidase N, dipeptidyl peptidase IV, aminopeptidase A, lactase, maltase and sucrase differed in sampling times and in relation to the additional group (P<0.05). Only the rations protein/DNA, protein/RNA in the jejunum and aminopeptidase A activity in the ileum were higher in the LBC group (P<0.05). The acid phosphatase activity was observed in the first hours of life, especially in the duodenum. Regarding the intestinal epithelium morphology and villi density, the supply of lyophilized bovine colostrum did not determine alterations. Changes in enterocytes ultrastructure revealed the presence in the jejunum segment of absorbed material and apical endocytic complex at 0, 18 and 36 hours. In the duodenum, IGF-IR gene expression at birth was higher than at 18 and 36 hours in the GC and LBC (P<0.05). While the expression of this bioactive peptide receptor in the jejunum of the LBC group was higher at 18 and 36 hours relative to 0 h (P<0.05). The results of this work indicate that the alternative source of immunoglobulins, lyophilized bovine colostrum, can be used as a substitute for goat colostrum without significant changes in the acquisition of passive protection and histophysiology characteristics of the small intestine epithelium of goat kids.

Orientador: Henrique Nunes de Oliveira / Coorientador: Márcia Cristina de Sena Oliveira / Banca: Jesus Aparecido Ferro / Banca: Teresa Cristina Goulart de Oliveira Sequeira / Banca: Anderson Ferreira da Cunha / Banca: Marcos Rogério André / Resumo: A babesiose bovina é uma hemoparasitose transmitida pelo carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que causa grandes prejuízos à bovinocultura do Brasil. Entre as espécies que causam as babesioses bovinas, B. bovis se destaca como a mais patogênica. É amplamente conhecida a resistência natural dos bovinos do grupo genético Bos taurus indicus frente a B. bovis. Entretanto, a relação quantitativa do nível de infecção em animais Bos taurus taurus e seus cruzamentos é desconhecida. O método clássico de detecção e quantificação da parasitemia por B. bovis apresenta baixa sensibilidade e falha no diagnostico em animais portadores. Recentemente, a técnica de qPCR tem sido utilizada com grande sucesso para este propósito. Assim, o presente estudo teve como objetivo verificar a associação entre o nível de infestação por R. (B.) microplus, a soroprevalência e a parasitemia por B. bovis, estimada através dos métodos do ELISA-teste e qPCR em bovinos de corte naturalmente infestados, de diferentes locais e grupos genéticos (grupos-locais).Verificou-se que a infestação por carrapatos foi maior nos grupos locais de taurinos, com diferenças significativas entre os grupos. Nos ensaios do ELISA-teste, 74,39% dos animais avaliados foram positivos, encontrando-se os maiores níveis de anticorpos em animais taurinos quando comparados aos cruzados. Nas quantificações do DNA através da qPCR, a técnica demonstrou alta sensibilidade analítica e todos os animais foram positivos. Foram verificadas diferenças significativas (P<0,05) para o numero de copias (NC) de DNA de B. bovis entre os grupos locais, onde o grupo Angus de José Bonifácio, SP (AJB) apresentou o maior nível de infecção. As repetibilidades encontradas para as contagens de R. (B.) microplus e os NC de DNA de B. bovis foram baixas, enquanto que para os níveis de anticorpos obtidos pelo ELISA-teste foram ... / Abstract: Bovine babesiosis is a tick-borne disease, transmitted by Rhiphicephalus (Boophilus) microplus tick, that imposes substantial economic losses in to Brazilian livestock, among the species that cause bovine babesiosis B. bovis is the most virulent. Is widely known the natural resistance of the Bos taurus indicus genetic group to B. bovis, however, the quantitative relationship of the infection levels when compared to Bos taurus taurus and their crosses is unknown. The classical detection and quantitation method is of low sensitivity and usually fails to diagnose carrier animals. Recently, the real-time PCR (qPCR) techniques have been used successfully for these purposes. The present study aimed to determine the association among infestations by R. (B.) microplus, infection levels by B. bovis, estimated by qPCR, and the antibody levels in beef cattle naturally infested, proceeding of different locations and genetic groups (local groups). It was found greater tick infestations in taurine local groups, with significant differences between groups. In the ELISA test, 74.39% of animals were positive, meeting the highest antibodies levels in taurine animals when compared to the crossbred. In the DNA quantification, the analytical sensitivity of qPCR technique was high and all animals were positive. There were significant differences (P <0.05) for the DNA copy number (NC) among local groups, where Angus-Jose Bonifácio group (AJB) showed the highest infection levels. R. (B.) microplus scores and DNA copy number of B. bovis show low repeatability, whereas the antibodies levels were higher. No correlation among the examined measures were found. It is concluded that there is variation in the seroprevalence and DNA copy number of B. bovis among different local groups and the antibodies levels in the animals is not directly associated with the DNA NC of B. bovis, and both are independent of tick infestation / Doutor

Objetivo: Comparar as relações de custo-efetividade de duas terapias, Imunoglubulina Intravenosa (IgIV) e Plasmaferese (PE), no tratamento da Síndrome de Guillain-Barré sob a perspectiva do sistema público (SUS). O objetivo secundário foi avaliar a adesão às recomendações da Comissão de Medicamentos do HCPA Métodos: estudo transversal com análise econômica de pacientes tratados por Síndrome de Guillain-Barré no período de junho de 2003 a junho de 2008 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Foi realizada análise de custo-efetividade do emprego de IgIV e de PE nestes pacientes, pelo método de minimização de custos, considerando-se somente os custos diretos sanitários, fornecidos pelo sistema gerencial da instituição . Foram excluídos os pacientes que usaram outro tipo de tratamento associado ou isolado. Coletaram-se os dados através da revisão dos prontuários. A gravidade da doença na internação foi classificada como: doença leve, quando caminhar foi possível; doença moderada, quando caminhar foi impossível; doença grave, quando os pacientes necessitaram de ventilação assistida. A incapacidade na alta foi estabelecida pela escala de sete pontos de Hughes. A adesão às recomendações da Comissão de Medicamentos do HCPA, objetivo secundário, foi avaliada através da dose e o esquema de prescrição da IgIV. Resultados: Vinte e cinco participantes (2 a 70 anos) foram incluídos no estudo, cinco tratados com PE, empregando-se Albumina Humana como substituto do plasma, e 20 tratados com IgIV. O custo total do tratamento de um paciente com PE foi R$10.603,88 (± 2.978,12) e o de um que recebeu IgIV foi R$ 32.103,00 (± 21.454,24). O custo total da internação foi de R$45.027,14 (± 32.750,45) para os tratados com PE e de R$ 60.844,28 (±48.590,52) para os que receberam IgIV. Em relação ao desfecho clínico principal, melhora na escala de incapacidade de sete pontos, após o tratamento com uma das alternativas escolhida, a mediana dos pacientes que internaram com grau de gravidade 3 e que foram tratados com PE foi igual a dos que receberam IgIV. Em relação à permanência hospitalar, permanência em UTI e dias de Ventilação Mecânica, não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois tratamentos. Conclusões: Quando comparados os custos médios das duas opções terapêuticas, uma delas aparece claramente com menor custo. Quando comparados os desfechos, após o emprego de cada opção terapêutica, estes não revelam diferença. Concluímos que, no HCPA, a opção pelo procedimento Plasmaferese é mais custo efetiva do que o emprego da IgIV. / Objectives: To compare the cost-effectiveness of two distinct therapies, Intravenous Immunoglobulin (IVIg) and Plasma Exchange (PE) in the treatment of Guillain-Barré Syndrome, concerning the public health care system. Compliance to the guidelines of the Pharmacy and Therapeutics Committee of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre was a secondary objective. Methods: A cross-sectional, economical analysis was conducted, including patients treated for GBS in the period from June, 2003 through June, 2008 in Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). The cost-effectiveness of the use of IVIg and PE in such patients was studied through the cost minimization method, considering direct medical costs only (2008 currency), yield by the management of the institution. Patients receiving treatments other than PE or IVIg were excluded. Data were collected by chart reviews. Severity of disease on admittance was classified as follows: mild disease, when the patient was able to walk; moderate disease, when the patient was unable to walk, and severe disease, when assisted ventilation was required. Disability on discharge was established by the 7-point scale of Hughes. Compliance to the guidelines of the Pharmacy and Therapeutics Committee was evaluated through the dose and prescription scheme of IVIg. Results: Twenty-five participants (2 to 70 years of age) were included in the study, 5 were submitted to treatment with PE, using human albumin as replacement for plasma, and 20 were treated with IVIg. The total treatment cost for PE in a single patient was US$6,058.85 (±1,701.78 SD), and the same expense for IVIg was US$18,344.57 (± 12,259.56 SD) (p = 0.035). Total inpatient cost was US$25,729.79 (± 18,714.54 SD) in the PE group, and US$34,768.16 (±27,766.01 SD) (p=0.530) in the IVIg group. The main clinical outcome was improvement in the 7-point disability grade scale. The median of that measure in patients admitted with a severity grade 3 treated either with PE and IVIg was the same. Secondary outcomes, such as in-hospital stay, ICU stay, and number of days on mechanical ventilation revealed no statistically significant difference between treatments. Conclusions: As the mean expenses of both therapeutic options are compared, one clearly stands-out as less onerous. Clinical outcomes, when compared, reveal no statistical difference after each treatment. We concluded that, in HCPA, plasma exchange is more cost-effective than intravenous immunoglobulin.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-25Bitstream added on 2014-06-13T19:42:44Z : No. of bitstreams: 1 000749443.pdf: 1003234 bytes, checksum: 782cda03d91059640e363de67ccc1519 (MD5) / A babesiose bovina é uma hemoparasitose transmitida pelo carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que causa grandes prejuízos à bovinocultura do Brasil. Entre as espécies que causam as babesioses bovinas, B. bovis se destaca como a mais patogênica. É amplamente conhecida a resistência natural dos bovinos do grupo genético Bos taurus indicus frente a B. bovis. Entretanto, a relação quantitativa do nível de infecção em animais Bos taurus taurus e seus cruzamentos é desconhecida. O método clássico de detecção e quantificação da parasitemia por B. bovis apresenta baixa sensibilidade e falha no diagnostico em animais portadores. Recentemente, a técnica de qPCR tem sido utilizada com grande sucesso para este propósito. Assim, o presente estudo teve como objetivo verificar a associação entre o nível de infestação por R. (B.) microplus, a soroprevalência e a parasitemia por B. bovis, estimada através dos métodos do ELISA-teste e qPCR em bovinos de corte naturalmente infestados, de diferentes locais e grupos genéticos (grupos-locais).Verificou-se que a infestação por carrapatos foi maior nos grupos locais de taurinos, com diferenças significativas entre os grupos. Nos ensaios do ELISA-teste, 74,39% dos animais avaliados foram positivos, encontrando-se os maiores níveis de anticorpos em animais taurinos quando comparados aos cruzados. Nas quantificações do DNA através da qPCR, a técnica demonstrou alta sensibilidade analítica e todos os animais foram positivos. Foram verificadas diferenças significativas (P<0,05) para o numero de copias (NC) de DNA de B. bovis entre os grupos locais, onde o grupo Angus de José Bonifácio, SP (AJB) apresentou o maior nível de infecção. As repetibilidades encontradas para as contagens de R. (B.) microplus e os NC de DNA de B. bovis foram baixas, enquanto que para os níveis de anticorpos obtidos pelo ELISA-teste foram... / Bovine babesiosis is a tick-borne disease, transmitted by Rhiphicephalus (Boophilus) microplus tick, that imposes substantial economic losses in to Brazilian livestock, among the species that cause bovine babesiosis B. bovis is the most virulent. Is widely known the natural resistance of the Bos taurus indicus genetic group to B. bovis, however, the quantitative relationship of the infection levels when compared to Bos taurus taurus and their crosses is unknown. The classical detection and quantitation method is of low sensitivity and usually fails to diagnose carrier animals. Recently, the real-time PCR (qPCR) techniques have been used successfully for these purposes. The present study aimed to determine the association among infestations by R. (B.) microplus, infection levels by B. bovis, estimated by qPCR, and the antibody levels in beef cattle naturally infested, proceeding of different locations and genetic groups (local groups). It was found greater tick infestations in taurine local groups, with significant differences between groups. In the ELISA test, 74.39% of animals were positive, meeting the highest antibodies levels in taurine animals when compared to the crossbred. In the DNA quantification, the analytical sensitivity of qPCR technique was high and all animals were positive. There were significant differences (P <0.05) for the DNA copy number (NC) among local groups, where Angus-Jose Bonifácio group (AJB) showed the highest infection levels. R. (B.) microplus scores and DNA copy number of B. bovis show low repeatability, whereas the antibodies levels were higher. No correlation among the examined measures were found. It is concluded that there is variation in the seroprevalence and DNA copy number of B. bovis among different local groups and the antibodies levels in the animals is not directly associated with the DNA NC of B. bovis, and both are independent of tick infestation

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-14Bitstream added on 2014-06-13T20:36:40Z : No. of bitstreams: 1 santos_il_me_jabo.pdf: 445425 bytes, checksum: 8eabdcdd56ae9af7bcf160cad345bd86 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O vírus da bronquite infecciosa aviária (VBIG) permanece como um dos principais problemas para a avicultura industrial. Para a imunoprofilaxia dessa virose existem vacinas “vivas” atenuadas ou inativadas, mas elas não são efetivas para o controle dessa doença infecciosa a longo prazo, especialmente contra estirpes variantes desse vírus. A função primordial das vacinas usuais contra o VBIG são estimular as respostas imunes sistêmicas e locais, mediadas por anticorpos ou por células T efetoras. Com a finalidade de investigar os mecanismos envolvidos na imunidade protetora, os níveis de anticorpos locais e sistêmicos e a expressão de genes associados a respostas de linfócitos T citotóxicos, tais como o CD8 e a granzima A foi avaliada na mucosa traqueal, após a imunização primária de pintinhos de 1 dia de idade com vacinas atenuadas contra o VBIG seguida do desafio 42 dias depois. Proteção ao desafio foi avaliada por meio da ciliostase traqueal, histopatologia e detecção de vírus pela técnica de RT-PCR em tempo real na traquéia. Os níveis de anticorpos no soro e na secreção lacrimal foram mensurados pelo Sandwich- Concanavalina A – ELISA. A expressão dos genes de CD8 e de granzima A foram avaliadas pela técnica de RT-PCR em tempo real. Os resultados demonstraram que a proteção contra a infecção pelo VBIG em aves vacinadas se correlacionou com os níveis de anticorpos anti-virais específicos dos isótipos IgG, IgM e IgA na secreção lacrimal e com os níveis de expressão de CD8 e de granzima A. Concluindo, os resultados possibilataram definir o perfil cinético do desenvolvimento das respostas imunes de memória contra o VBIG na mucosa que é o sítio primário de replicação viral e indicaram que os mecanismos de imunidade humoral e celular podem ser muito importantes para a proteção de hospedeiros naturais contra a infecção pelo VBIG. / Avian infectious bronchitis (IBV) remains a major problem in the poultry industry. Live and inactivated vaccines are available, but they are not effective long term in controlling IBV infection, specially against variant strains. The essential function of existing IBV vaccines is to elicit, ideally, local and systemic specific antibodies, as well as cell-mediated immunity to this virus. To investigate the mechanisms of protective immunity, the levels of systemic and local specific antibodies and the expression of genes responsible for cytotoxic T cell killing such as CD8-marker and granzyme-A at tracheal mucosa was evaluated after the primary immunization of 1- day-old chicks with an attenuated avian infectious bronchitis virus (IBV) and challenge 42 days later. Challenge protection was evaluated by tracheal ciliostasis, histopathology and virus detection by real time RT-PCR. The serum and lachrymal anti-IBV antibody levels of IgG, IgM and IgM isotypes were measured with a Sandwich-ELISA Concanavalina-A method. The expression of CD8 and granzyme A genes were evaluated by real time RT-PCR. The results showed protection against challenge with the M-41. Lachrymal IgG, IgM and IgA anti-IBV specific antibodies and the levels of expression of CD8 and granzyme A genes correlated significantly with the protection to challenge. Overall, the results provided the kinetics on the development of memory mucosal immune responses against IBV at the primary replication site and indicate that tracheal humoral and cellular immune mechanisms may be very important in protecting natural hosts against IBV infection.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-05Bitstream added on 2014-06-13T19:50:59Z : No. of bitstreams: 1 baroza_pfj_me_jabo.pdf: 472300 bytes, checksum: 8c0c255232fc2e33839f99f65b3e5d49 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os objetivos do estudo foram: 1. avaliar as concentrações de proteína total, imunoglobulina G, enzimas e minerais na secreção láctea de cabras e vacas, nos primeiros 30 dias pós-parto, estabelecendo o limite máximo possível para se obter secreção láctea que permita adequada transferência de imunidade passiva aos neonatos; 2. avaliar a influência do congelamento nestes constituintes; e, disponibilizar informações que possam auxiliar na montagem de bancos de colostro. Foram examinadas amostras de secreções lácteas de 10 cabras da raça Saanen e 10 vacas da raça Holandesa recém-paridas e sadias, de terceira ou quarta lactação, coletadas nos momentos: dia do parto e 1, 3, 5, 9, 14 e 29 dias após o parto. As amostras foram obtidas após a ordenha completa das cabras e vacas. As amostras de colostro caprino foram submetidas aleatoriamente a seis tratamentos, de acordo com o período de congelamento; enquanto as amostras de colostro bovino foram submetidas a cinco tratamentos. As amostras do grupo G1 são colostros caprinos “in natura”; as amostras do grupo G2 são as mesmas amostras do G1, porém submetidas ao aquecimento de 56ºC durante 60 minutos; as amostras do grupo G3 foram submetidas a 30 dias de congelamento, as amostras do grupo G4, a 60 dias de congelamento, as amostras do grupo G5, a 90 dias de congelamento e as do grupo G6, a 180 dias de congelamento. As amostras de colostro bovino foram submetidas aos mesmos períodos de congelamento... / The goals of the study were: 1. to evaluate total protein, G immunoglobulin, enzymes and minerals concentrations in goat and cow milky secretion, during the first 30 days postparturition, establishing the possible maximum limit to obtain milky secretion that allows appropriate transfer of passive immunity to the newborns kids; 2. to evaluate the influence of freezing in these constituents; and, 3. to create information that can aid in the assembly of colostrum banks. It were used samples of milky secretions of 10 Saanen goats and 10 Holstein cows recently-given birth and healthy, of third or fourth nursing, collected in the moments: in the day of the parturition and 1, 3, 5, 9, 14 and 29 days after the parturition. The samples were obtained after goats and cows complete milks. The samples of goat colostrum were submitted to six treatments, in agreement with the freezing period; the samples of cow colostrum were submitted to five treatments. The samples of the group G1 are goat colostrums “in natura; the samples of the group G2 are the same samples of G1, however submitted to the heating of 56ºC for 60 minutes; the samples of the group G3 were submitted to 30 days of freezing, the samples of the group G4, to 60 days of freezing, the samples of the group G5, to 90 days of freezing and the one of the group G6, to 180 days of freezing. The samples of cow colostrum were submitted to the same freezing periods... (Complete abstract, click electronic access below)

Orientador: José Jurandir Fagliari / Banca: Mario Roberto Hatayde / Banca: Eduardo Harry Birgel Junior / Resumo: Os objetivos do estudo foram: 1. avaliar as concentrações de proteína total, imunoglobulina G, enzimas e minerais na secreção láctea de cabras e vacas, nos primeiros 30 dias pós-parto, estabelecendo o limite máximo possível para se obter secreção láctea que permita adequada transferência de imunidade passiva aos neonatos; 2. avaliar a influência do congelamento nestes constituintes; e, disponibilizar informações que possam auxiliar na montagem de bancos de colostro. Foram examinadas amostras de secreções lácteas de 10 cabras da raça Saanen e 10 vacas da raça Holandesa recém-paridas e sadias, de terceira ou quarta lactação, coletadas nos momentos: dia do parto e 1, 3, 5, 9, 14 e 29 dias após o parto. As amostras foram obtidas após a ordenha completa das cabras e vacas. As amostras de colostro caprino foram submetidas aleatoriamente a seis tratamentos, de acordo com o período de congelamento; enquanto as amostras de colostro bovino foram submetidas a cinco tratamentos. As amostras do grupo G1 são colostros caprinos "in natura"; as amostras do grupo G2 são as mesmas amostras do G1, porém submetidas ao aquecimento de 56ºC durante 60 minutos; as amostras do grupo G3 foram submetidas a 30 dias de congelamento, as amostras do grupo G4, a 60 dias de congelamento, as amostras do grupo G5, a 90 dias de congelamento e as do grupo G6, a 180 dias de congelamento. As amostras de colostro bovino foram submetidas aos mesmos períodos de congelamento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The goals of the study were: 1. to evaluate total protein, G immunoglobulin, enzymes and minerals concentrations in goat and cow milky secretion, during the first 30 days postparturition, establishing the possible maximum limit to obtain milky secretion that allows appropriate transfer of passive immunity to the newborns kids; 2. to evaluate the influence of freezing in these constituents; and, 3. to create information that can aid in the assembly of colostrum banks. It were used samples of milky secretions of 10 Saanen goats and 10 Holstein cows recently-given birth and healthy, of third or fourth nursing, collected in the moments: in the day of the parturition and 1, 3, 5, 9, 14 and 29 days after the parturition. The samples were obtained after goats and cows complete milks. The samples of goat colostrum were submitted to six treatments, in agreement with the freezing period; the samples of cow colostrum were submitted to five treatments. The samples of the group G1 are goat colostrums "in natura"; the samples of the group G2 are the same samples of G1, however submitted to the heating of 56ºC for 60 minutes; the samples of the group G3 were submitted to 30 days of freezing, the samples of the group G4, to 60 days of freezing, the samples of the group G5, to 90 days of freezing and the one of the group G6, to 180 days of freezing. The samples of cow colostrum were submitted to the same freezing periods... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

One of the purposes of allergen-specific immunotherapy (SIT) is to modulate the humoral immune response against allergens with significant increases in allergen-specific IgG1 and IgG4 levels. These antibodies are associated with blocking activity by preventing IgE binding to allergen and leading to reduced inflammatory responses. This study aimed to investigate in vitro blocking activity of allergen-specific IgG antibodies on IgE reactivity to D. pteronyssinus (Dpt) in sera from atopic patients. Dpt-specific IgG antibodies were obtained from atopic sera and irrelevant IgG from non-atopic sera. IgG antibodies were purified by ammonium sulfate precipitation followed by Protein-G affinity chromatography and evaluated with regards to purity by SDS-PAGE and immunoreactivity by slot-blot and immunoblot assays. The blocking activity was evaluated by inhibition ELISA. The electrophoretical profile after salting-out precipitation showed an enrichment of high molecular weight proteins in the precipitated fraction and strongly stained bands in the ligand fraction after chromatography, compatible with molecular weight of human IgG. It was detected strong immunoreactivity to IgG, negligible to IgA, and no reactivity to IgE and IgM. Dpt-specific IgG fraction was capable to significantly reduce levels of IgE anti-Dpt, resulting in 35-51% inhibition of IgE reactivity to Dpt in atopic patient sera. Allergen-specific IgG antibodies purified using available and standardized methodology are able to inhibit IgE reactivity to Dpt allergen extract. In addition to the clinical symptoms improvement (subjective parameter), this approach reinforces that the intermittent measurement of serum allergen-specific IgG antibodies will be an important objective laboratorial parameter that will help specialists to follow their patients under SIT. / Uma das propostas da imunoterapia alérgeno específica é a de modular a resposta imune humoral contra alérgenos, com aumento significativo nos níveis de IgG1 e IgG4 específicos. Esses anticorpos estão associados com uma atividade bloqueadora, impedindo a ligação de anticorpos IgE ao alérgeno e levando a uma redução nas respostas inflamatórias. Esse estudo objetivou investigar a atividade bloqueadora, in vitro, de anticorpos IgG específicos sobre a reatividade de IgE a D. pteronyssinus (Dpt) em soros de pacientes atópicos. Anticorpos IgG específicos foram obtidos de soros de pacientes atópicos, e IgG irrelevante a partir de soros de não atópicos, e depois purificados por precipitação com sulfato de amônio, seguido de cromatografia de afinidade em Proteina G-agarose. A pureza desses anticorpos foi avaliada por SDS-PAGE, a imunoreatividade por ensaios de slot-blot e immunoblot, e a atividade bloqueadora por ELISA inibição. O perfil eletroforético, após precipitação com sulfato de amônio, mostrou um enriquecimento de proteínas de alto peso molecular na fração precipitada,e bandas fortemente coradas na fração ligante após a cromatografia, compatíveis com o peso molecular de IgG humana. Foi detectada uma forte imunoreatividade para IgG, leve para IgA, e nenhuma reatividade para IgE e IgM. A Fração IgG específica foi capaz de reduzir significantemente os níveis de IgE anti-Dpt, resultando em 35-51% de inibição da reatividade de IgE a Dpt em pools de soros de pacientes atópicos. Anticorpos IgG específicos purificados, através de uma metodologia disponível e padronizada, são capazes de inibir a reatividade de IgE ao extrato alergênico Dpt. Além da melhoria da sintomatologia clínica, considerada um parâmetro subjetivo, essa abordagem reforça que a avaliação intermitente de anticorpos IgG alérgeno-específicos pode ser uma ferramenta importante, auxiliando especialistas a acompanharem seus pacientes em processo de imunoterapia específica. / Mestre em Ciências da Saúde

Objetivo: Comparar as relações de custo-efetividade de duas terapias, Imunoglubulina Intravenosa (IgIV) e Plasmaferese (PE), no tratamento da Síndrome de Guillain-Barré sob a perspectiva do sistema público (SUS). O objetivo secundário foi avaliar a adesão às recomendações da Comissão de Medicamentos do HCPA Métodos: estudo transversal com análise econômica de pacientes tratados por Síndrome de Guillain-Barré no período de junho de 2003 a junho de 2008 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Foi realizada análise de custo-efetividade do emprego de IgIV e de PE nestes pacientes, pelo método de minimização de custos, considerando-se somente os custos diretos sanitários, fornecidos pelo sistema gerencial da instituição . Foram excluídos os pacientes que usaram outro tipo de tratamento associado ou isolado. Coletaram-se os dados através da revisão dos prontuários. A gravidade da doença na internação foi classificada como: doença leve, quando caminhar foi possível; doença moderada, quando caminhar foi impossível; doença grave, quando os pacientes necessitaram de ventilação assistida. A incapacidade na alta foi estabelecida pela escala de sete pontos de Hughes. A adesão às recomendações da Comissão de Medicamentos do HCPA, objetivo secundário, foi avaliada através da dose e o esquema de prescrição da IgIV. Resultados: Vinte e cinco participantes (2 a 70 anos) foram incluídos no estudo, cinco tratados com PE, empregando-se Albumina Humana como substituto do plasma, e 20 tratados com IgIV. O custo total do tratamento de um paciente com PE foi R$10.603,88 (± 2.978,12) e o de um que recebeu IgIV foi R$ 32.103,00 (± 21.454,24). O custo total da internação foi de R$45.027,14 (± 32.750,45) para os tratados com PE e de R$ 60.844,28 (±48.590,52) para os que receberam IgIV. Em relação ao desfecho clínico principal, melhora na escala de incapacidade de sete pontos, após o tratamento com uma das alternativas escolhida, a mediana dos pacientes que internaram com grau de gravidade 3 e que foram tratados com PE foi igual a dos que receberam IgIV. Em relação à permanência hospitalar, permanência em UTI e dias de Ventilação Mecânica, não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois tratamentos. Conclusões: Quando comparados os custos médios das duas opções terapêuticas, uma delas aparece claramente com menor custo. Quando comparados os desfechos, após o emprego de cada opção terapêutica, estes não revelam diferença. Concluímos que, no HCPA, a opção pelo procedimento Plasmaferese é mais custo efetiva do que o emprego da IgIV. / Objectives: To compare the cost-effectiveness of two distinct therapies, Intravenous Immunoglobulin (IVIg) and Plasma Exchange (PE) in the treatment of Guillain-Barré Syndrome, concerning the public health care system. Compliance to the guidelines of the Pharmacy and Therapeutics Committee of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre was a secondary objective. Methods: A cross-sectional, economical analysis was conducted, including patients treated for GBS in the period from June, 2003 through June, 2008 in Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). The cost-effectiveness of the use of IVIg and PE in such patients was studied through the cost minimization method, considering direct medical costs only (2008 currency), yield by the management of the institution. Patients receiving treatments other than PE or IVIg were excluded. Data were collected by chart reviews. Severity of disease on admittance was classified as follows: mild disease, when the patient was able to walk; moderate disease, when the patient was unable to walk, and severe disease, when assisted ventilation was required. Disability on discharge was established by the 7-point scale of Hughes. Compliance to the guidelines of the Pharmacy and Therapeutics Committee was evaluated through the dose and prescription scheme of IVIg. Results: Twenty-five participants (2 to 70 years of age) were included in the study, 5 were submitted to treatment with PE, using human albumin as replacement for plasma, and 20 were treated with IVIg. The total treatment cost for PE in a single patient was US$6,058.85 (±1,701.78 SD), and the same expense for IVIg was US$18,344.57 (± 12,259.56 SD) (p = 0.035). Total inpatient cost was US$25,729.79 (± 18,714.54 SD) in the PE group, and US$34,768.16 (±27,766.01 SD) (p=0.530) in the IVIg group. The main clinical outcome was improvement in the 7-point disability grade scale. The median of that measure in patients admitted with a severity grade 3 treated either with PE and IVIg was the same. Secondary outcomes, such as in-hospital stay, ICU stay, and number of days on mechanical ventilation revealed no statistically significant difference between treatments. Conclusions: As the mean expenses of both therapeutic options are compared, one clearly stands-out as less onerous. Clinical outcomes, when compared, reveal no statistical difference after each treatment. We concluded that, in HCPA, plasma exchange is more cost-effective than intravenous immunoglobulin.