Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:06Z : No. of bitstreams: 1 000868417_20170731.pdf: 124958 bytes, checksum: bf72a7f09986678cc29855b1fbd1c2c9 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-07T14:09:04Z: 000868417_20170731.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-07T14:10:13Z : No. of bitstreams: 1 000868417.pdf: 1153725 bytes, checksum: d7676d38e8c4fa2daf08e559555e8ebf (MD5) / Os peixes são encontrados em ambientes passíveis de contaminação, dentre as quais se destaca a radiação decorrente de descartes inadequados de material radiativo ou mesmo de acidentes como de Chernobyl na Ucrânia e, mais recentemente, Fukushima no Japão. Poucos trabalhos são encontrados na literatura com o emprego de radiações ionizantes como agente estressor em peixes. Neste trabalho pretende-se quantificar o impacto de diferentes doses de radiação gama em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) no comportamento alimentar, em parâmetros bioquímicos, tais como, hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, assim como no comprometimento na sobrevida. Neste trabalho foram utilizados 105 exemplares machos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), com o comprimento padrão médio de 11,11 ± 0,44 cm e peso médio de 40,56 ±3,64 gramas; divididos em seis grupos experimentais de 15 peixes cada e expostos à radiação gama de corpo inteiro de dose única através de um aparelho de telecobaltoterapia nas doses de 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy e 32 Gy, e um grupo Controle sem irradiação. Foram coletados, em média, 0,3 mL de sangue com o auxílio de agulhas e seringas heparinizadas através de punção cardíaca. Posteriormente, foram determinadosos parâmetros de hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, por técnicas usuais, para se avaliarem os efeitos da radiação. Observou-se a diminuição da ingestão de alimento, devido à ocorrência de irritação na mucosa oral em doses mais elevadas de radiação. A porcentagem de hematócrito foi a variável mais sensível aos efeitos da radiação gama. Os níveis glicêmicos variaram dependendo das doses de radiação gama em função do tempo. Elevadas doses de radiação gama provocaram alterações metabólicas que modificaram os padrões das diferentes classes protéicas. A tilápia do Nilo demonstrou-se resistente às doses de 1 a 8 Gy, possivelmente devido... / Fish are found in susceptible to contamination environments, among which stands out the radiation arising from inadequate disposal of radioactive material or even accidents like Chernobyl in Ukraine and, more recently, Fukushima in Japan. Few studies are found in the literature with the use of ionizing radiation as a stressor in fish. This work aims to quantify the impact of different doses of gamma radiation in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) in eating behavior, biochemical parameters, such as, hematocrit, glucose and plasma protein electrophoretic pattern, as well as the commitment on survival. In this work we used 105 males of Nile tilapia (Oreochromis niloticus), with the average standard length of 11.11 ± 0.44 cm and average weight of 40.56 ± 3.64 grams; divided into six experimental groups of 15 fish each and exposed to gamma radiation full-length single dose, by the use of a telecobaltoterapia apparatus in doses of 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy and 32 Gy, and a group Control without irradiation. They were collected, on average, 0.3 ml of blood with the aid of needles and heparinized syringes by cardiac puncture. Subsequently, they determined the parameters hematocrit, blood glucose and plasma protein electropherogram by standard techniques, to assess the effects of radiation. There was a decrease in food intake due to the occurrence of irritation on oral mucosa in higher doses of radiation. The percentage of hematocrit was the most sensitive variable to the effects of gamma radiation. Glucose levels varied depending on the doses of gamma radiation as a function of time. High doses of gamma radiation caused metabolic alterations that changed the standards of different protein classes. The Nile tilapia shown to be resistant to doses of 1 to 8 Gy, possibly due to repair system efficiency. It is believed that in the group of 16 and 32 Gy, mortality was occurring due to infection by opportunistic agents and susceptibilityof the...

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-27. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:20Z : No. of bitstreams: 1 000866553_20171126.pdf: 380333 bytes, checksum: 84405dc42df088ce6a479f7158e7fd49 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-11-29T13:07:45Z: 000866553_20171126.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-11-29T13:08:38Z : No. of bitstreams: 1 000866553.pdf: 2314592 bytes, checksum: 7fc46c19fdec3f21779317a59ff8e385 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O desenvolvimento dos órgãos linfoides de pacu (Piaractus mesopotamicus) desde a eclosão até 34 dias de vida, e os efeitos de diferentes manejos alimentares sobre a ontogenia do sistema imunológico e a resistência das larvas à exposição ao ar foram avaliados neste estudo. Os manejos alimentares estudados foram: (TP) transição prematura de náuplios de artêmia para a dieta comercial iniciada aos oito dias após a primeira alimentação (12 dias pós- eclosão); (TT) transição tardia de náuplios de artêmia para dieta comercial iniciada aos 15 dias após a primeira alimentação (19 dpe) e (A) alimentação exclusivamente com náuplios de artêmia. As amostras para análises histológicas para descrição da ontogenia do rim, timo e baço foram tomadas duas vezes por dia, diariamente até os 13 dias pós-eclosão (dpe) (nove dias pós a primeira alimentação), uma vez ao dia até o 16 dpe (12 dias após a primeira alimentação) e, posteriormente, a cada três dias até o final do experimento. Biometrias foram realizadas na primeira alimentação, aos sete, 11, 16, 22 e 30 dias após o início da alimentação exógena. Um teste de resistência ao estresse (exposição ao ar por 1, 3, 5, 7 e 20 min) foi aplicado às larvas após 12 dias do término da transição alimentar prematura e tardia, respectivamente aos 22 e 29 dias de alimentação. A histogênese dos órgãos do sistema imune do pacu mostrou que o primeiro órgão a se tornar linfoide foi o timo aos 2 dpe, embora nos rins tenham sido observadas células indiferenciadas desde a eclosão. No início da alimentação exógena, aos 5 dpe, o rim da larva de pacu apresenta pequenos linfócitos e células eritropoiéticas dispersas entre os túbulos renais. O baço foi último órgão a se tornar linfoide, sendo observado a partir do 6º dpe como um órgão eritrocítico e, a partir do 16º dpe, o órgão torna-se linfoide. Ao final do experimento, com 34 dpe, o rim... / The development of the lymphoid organs in pacu larvae (Piaractus mesopotamicus) since hatching until 34 days of age and the effects of different feeding protocols on the morphogenesis of the immune system and the resistance of ar exposure were investigated. The feeding treatments studied were: (TP) early weaning, replacement of artêmia nauplii by commercial microdiet initiated at eight days after the first feeding; (TT) late weaning, replacement initiated at 15 after the first feeding; (ART) larvae fed exclusively artemia nauplii. The histological samples to describe the ontogeny of the kidney, thymus and spleen were taken twice a day until 13 days pos-hatch (dph), once a day until 16 dph and then each three days until the end of the experiment. On the first feeding day, 7, 11, 16, 22 and 30 days after the beginning of the active feeding, biometrics were made. A stress resistance test (air exposure for 1, 3, 5, 7 e 20 min) was applied to the larvae 12 days after the end of the early and late weaning, respectively, after 22 and 29 days of feeding. The histogenesis of the lymphoid organs demonstrated that the fisrt organ to became lymphoid was the thymus with 2 dph, although the kidney had been observed since the moment the larvae hatched. At 6 dph, the kidney show signs of differentiation. The spleen was the last organs to appear at 6 dph. At 35 dph the kidney had already differentiated into head kidney (with monocytes, lymphocytes and hematopoietic tissue) and posterior kidney (renal tubules). The thymic parenchyma didn't present differences, however the cells differentiated in the inner and outer zones and the spleen did not present differentiation between red and white pulp until this period. Comparing to the treatment that received only artemia nauplii, early and late weaning reduced de survival of the larvae. However, only the early weaning decreased the specific growth rate and weight gain and caused difference on larvae size ... / CNPq: 830847/1999-5

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Fábio Sabbadin Zanuzzo / Banca: Marco Antonio de Andrade belo / Banca: Janessa Sampaio de Abreu / Resumo: Manejos inerentes da piscicultura intensiva, como o transporte, desencadeiam resposta de estresse nos animais, podendo causar perdas na produtividade. Como alternativa, o β-glucano, um polissacarídeo derivado da parede celular de cereais, bactérias e fungos, vem sendo muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Há evidências de que o β-glucano minimiza os efeitos negativos do estresse por atuar no sistema imune, porém é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu, o uso oral de 0.1% de duas gerações de β-glucano, de diferentes graus de pureza e processamentos, na resposta de estresse e no sistema imune inato, após transporte e inoculação com Aeromonas hydrophila. Avaliamos a concentração de cortisol e glicose plasmáticos como indicadores da resposta de estresse, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento, a atividade de lisozima e contagem total e diferencial de leucócitos, como indicadores do sistema imune inato, e o hematócrito, número de eritrócitos, concentração de hemoglobina e volume corpuscular médio de eritrócitos como indicadores hematológicos. As duas gerações de β-glucano utilizadas modularam os níveis de cortisol circulantes, mantendo os níveis elevados até 24 horas após o transporte, sem alteração após o desafio bacteriano. O β-glucano aumentou a atividade hemolítica do sistema complemento e de lisozima apó... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inherent handling in intensive fish farming, such as transport, trigger stress response in animals, and may cause losses in productivity. As an alternative, the β-glucan, a polysaccharide derived from the cell walls of cereals, bacteria and fungi, has been widely used in aquaculture due their immunostimulatory effect. The β-glucan minimizes the negative effects of stress by acting on the immune system, but it is little investigated its direct effect on the classical stress response. In this context, the present study evaluated in pacu, the oral administration of 0.1% of two generations of β-glucan, with different degrees of purity and processing methods, on the stress and innate immune system responses, after transport and inoculation with Aeromonas hydrophila. We evaluated the plasma concentration of cortisol and glucose, as stress response indicators, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system, lysozyme activity and total and differential counts of leukocytes as innate immune system indicators, and hematocrit, number of erythrocytes, hemoglobin concentration, and mean corpuscular volume of erythrocytes as hematological indicators. The two generations of β-glucan modulated the circulating levels of cortisol, keeping the high levels 24 hours after transportation, without changes after the bacterial challenge. The β-glucan increased the hemolytic activity of the complement system and lysozyme after handling and after bacterial inoculation, and kept the population of circulating leukocytes after recovery of leukopenia, demonstrating the immunostimulatory effect. The general results of this study suggest the strengthening of the immune response of pacu juveniles fed for 15 with feed containing 0,1% β-glucan derived from yeast cell wall (Sacaromyces cerevisiae) days before stressful ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Roberto Teixeira / Coorientador: Jane Megid / Banca: Flávia Karina Delella / Banca: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Resumo: A raiva é uma zoonose, que se caracteriza como uma encefalite aguda e letal. Atualmente, sabe-se que o vírus da raiva possui vários ciclos epidemiológicos e diversos animais podem servir como seus reservatórios, perpetuando-o no ciclo silvestre e urbano. Esse estudo teve como objetivo avaliar a prevalência de anticorpos neutralizantes (AN) contra a raiva no soro de gambás das espécies Didelphis albiventris e Didelphis aurita por meio da técnica de soroneutralização (Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test - RFFIT). A pesquisa foi conduzida nas cidades de Anhembi, Torre de Pedra e Bofete, localizadas no centro oeste de São Paulo. Soro de 67 animais, a maioria do sexo masculino e na idade adulta, foram avaliados. A positividade para anticorpos neutralizantes antirábicos foi de 17,9%. Esse resultado evidencia a circulação do vírus da raiva em gambás e serve de alerta tanto à comunidade científica quanto às autoridades governamentais envolvidas nas pesquisas e controle da raiva / Abstract: Rabies is a zoonotic disease, which is characterized as an acute and lethal encephalitis. Currently, it is known that rabies virus has several cycles and several epidemiological animals may serve as reservoirs of the virus perpetuating it in wild and urban cycle. This study aimed to evaluate the presence of antirabies neutralizing antibodies (NA) in the serum of the opossum Didelphis albiventris e Didelphis aurita by means of a virus neutralizing (Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test - RFFIT). The survey was conducted in the cities of Anhembi, Torre de Pedra and Bofete, located in the center west of São Paulo. Sera from 67 animals were examined, most males in adulthood. The percentage of animals that presented neutralizing antibodies was 17.9%. This result shows the circulation of the rabies virus in skunks and serves to alert both the scientific community and government authorities involved in the research and rabies control / Mestre

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Coorientador: Fátima Regina Vilani Moreno / Banca: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Maria Esther Salles Nogueira / Banca: Sônia Maria Usó Ruiz Silva / Banca: Silvio Luís de Oliveira / Resumo: A doença de Jorge Lobo é micose cutânea-subcutânea de evolução crônica causada pelo fungo Lacazia loboi. Esta micose é predominante na região Amazônica e afeta principalmente trabalhadores rurais que vivem em contato constante com a vegetação e o solo, como é o caso dos seringueiros dessa região. Até o momento não existem estudos sobre a participação do estado nutricional na resposta imunológica abordando a doença de Jorge Lobo; assim, este estudo tem por finalidade avaliar os efeitos da desnutrição protéico-calórica na resposta imune de camundongos isogênicos da linhagem BALB/c inoculados com L. loboi, empregando parâmetros imunológicos e histopatológicos. O presente estudo foi desenvolvido com 120 camundongos do sexo masculino, da linhagem BALB/c, com idade aproximada de 12 semanas e cerca de 25g de peso corporal. Foram constituídos quatro grupos: G1: 30 camundongos inoculados com o fungo L. loboi, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G2: 30 camundongos não inoculados, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G3: 30 camundongos inoculados, recebendo dieta normal; G4: 30 camundongos sadios. Os animais dos grupos G1 e G2 foram submetidos previamente, por 20 dias, antes do início do estudo, a restrição dietética com oferta diária de 80% da quantidade ingerida pelos grupos G3 e G4. Após instalada a desnutrição, os animais foram inoculados no coxim plantar, via intradérmica, com fungo L. loboi e depois de 4 meses (período de aparecimento das lesões macroscópicas no coxim plantar), os animais foram sacrificados e submetidos ao lavado peritoneal e à necrópsia para a retirada dos órgãos: fígado e baço. Os coxins plantares foram removidos para determinação da viabilidade e do número total de fungos, além do histopatológico. As células do lavado peritoneal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Jorge Lobo's disease is a cutaneous and subcutaneous mycosis with chronicle evolution caused by the fungus Lacazia loboi. This mycosis is predominant in the Amazon region and affects mainly rural workers who live in constant contact with the vegetation and the soil, such as the rubber tappers in this region. Up to this date there haven't been studies about the participation of the nutritional state in the immunological response approaching the Jorge Lobo; thus, this study aims to evaluate the effects of the protein-calorie malnutrition in the immune response of the isogenic mice lineage BALB/c inoculated with L. loboi, using hystopatological and immunological parameters. The present study was developed with 120 male mice lineage BALB/c, with approximately 12 weeks old and circa 25g of body weight. Four groups were made: G1: 30 mice inoculated with L. loboi fungus, receiving diet restriction of 20% of the normal diet; G2: 30 non inoculated mice, receiving diet restriction of 20% of normal diet; G3: 30 mice inoculated receiving normal diet; G4: 30 healthy mice. The animals in the groups G1 and G2 were previously submitted for 20 days before the beginning of the study to a diet restriction with a daily offer of 80% of the quantities ingested by groups G3 e G4. After malnutrition was installed the animals were inoculated in the plantar cushion, via intradermic, with L. loboi fungus and after 4 months (period of the appearance of the macroscopic lesions in the plantar cushion), the animals were sacrificed and submitted to a peritoneal washing and to a necropsy to remove the organs: liver and spleen. The plantar cushions were removed for determining the viability and the total number of fungi, besides the hystopatological. The cells in the peritoneal washing were used for: total cell culture for the dosage of cytokine IFN-γ, macrophage... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Natalia de Jesus Leitão / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Rosângela Kiyoko Jomori Bonichelli / Resumo: O desenvolvimento dos órgãos linfoides de pacu (Piaractus mesopotamicus) desde a eclosão até 34 dias de vida, e os efeitos de diferentes manejos alimentares sobre a ontogenia do sistema imunológico e a resistência das larvas à exposição ao ar foram avaliados neste estudo. Os manejos alimentares estudados foram: (TP) transição prematura de náuplios de artêmia para a dieta comercial iniciada aos oito dias após a primeira alimentação (12 dias pós- eclosão); (TT) transição tardia de náuplios de artêmia para dieta comercial iniciada aos 15 dias após a primeira alimentação (19 dpe) e (A) alimentação exclusivamente com náuplios de artêmia. As amostras para análises histológicas para descrição da ontogenia do rim, timo e baço foram tomadas duas vezes por dia, diariamente até os 13 dias pós-eclosão (dpe) (nove dias pós a primeira alimentação), uma vez ao dia até o 16 dpe (12 dias após a primeira alimentação) e, posteriormente, a cada três dias até o final do experimento. Biometrias foram realizadas na primeira alimentação, aos sete, 11, 16, 22 e 30 dias após o início da alimentação exógena. Um teste de resistência ao estresse (exposição ao ar por 1, 3, 5, 7 e 20 min) foi aplicado às larvas após 12 dias do término da transição alimentar prematura e tardia, respectivamente aos 22 e 29 dias de alimentação. A histogênese dos órgãos do sistema imune do pacu mostrou que o primeiro órgão a se tornar linfoide foi o timo aos 2 dpe, embora nos rins tenham sido observadas células indiferenciadas desde a eclosão. No início da alimentação exógena, aos 5 dpe, o rim da larva de pacu apresenta pequenos linfócitos e células eritropoiéticas dispersas entre os túbulos renais. O baço foi último órgão a se tornar linfoide, sendo observado a partir do 6º dpe como um órgão eritrocítico e, a partir do 16º dpe, o órgão torna-se linfoide. Ao final do experimento, com 34 dpe, o rim... / Abstract: The development of the lymphoid organs in pacu larvae (Piaractus mesopotamicus) since hatching until 34 days of age and the effects of different feeding protocols on the morphogenesis of the immune system and the resistance of ar exposure were investigated. The feeding treatments studied were: (TP) early weaning, replacement of artêmia nauplii by commercial microdiet initiated at eight days after the first feeding; (TT) late weaning, replacement initiated at 15 after the first feeding; (ART) larvae fed exclusively artemia nauplii. The histological samples to describe the ontogeny of the kidney, thymus and spleen were taken twice a day until 13 days pos-hatch (dph), once a day until 16 dph and then each three days until the end of the experiment. On the first feeding day, 7, 11, 16, 22 and 30 days after the beginning of the active feeding, biometrics were made. A stress resistance test (air exposure for 1, 3, 5, 7 e 20 min) was applied to the larvae 12 days after the end of the early and late weaning, respectively, after 22 and 29 days of feeding. The histogenesis of the lymphoid organs demonstrated that the fisrt organ to became lymphoid was the thymus with 2 dph, although the kidney had been observed since the moment the larvae hatched. At 6 dph, the kidney show signs of differentiation. The spleen was the last organs to appear at 6 dph. At 35 dph the kidney had already differentiated into head kidney (with monocytes, lymphocytes and hematopoietic tissue) and posterior kidney (renal tubules). The thymic parenchyma didn't present differences, however the cells differentiated in the inner and outer zones and the spleen did not present differentiation between red and white pulp until this period. Comparing to the treatment that received only artemia nauplii, early and late weaning reduced de survival of the larvae. However, only the early weaning decreased the specific growth rate and weight gain and caused difference on larvae size ... / Mestre

Orientador: Joel Mesa Hormaza / Banca: Marice Thereza Corrêa Domingues Heubel / Banca: Percilia Cardoso Giaquinto / Resumo: Os peixes são encontrados em ambientes passíveis de contaminação, dentre as quais se destaca a radiação decorrente de descartes inadequados de material radiativo ou mesmo de acidentes como de Chernobyl na Ucrânia e, mais recentemente, Fukushima no Japão. Poucos trabalhos são encontrados na literatura com o emprego de radiações ionizantes como agente estressor em peixes. Neste trabalho pretende-se quantificar o impacto de diferentes doses de radiação gama em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) no comportamento alimentar, em parâmetros bioquímicos, tais como, hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, assim como no comprometimento na sobrevida. Neste trabalho foram utilizados 105 exemplares machos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), com o comprimento padrão médio de 11,11 ± 0,44 cm e peso médio de 40,56 ±3,64 gramas; divididos em seis grupos experimentais de 15 peixes cada e expostos à radiação gama de corpo inteiro de dose única através de um aparelho de telecobaltoterapia nas doses de 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy e 32 Gy, e um grupo Controle sem irradiação. Foram coletados, em média, 0,3 mL de sangue com o auxílio de agulhas e seringas heparinizadas através de punção cardíaca. Posteriormente, foram determinadosos parâmetros de hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, por técnicas usuais, para se avaliarem os efeitos da radiação. Observou-se a diminuição da ingestão de alimento, devido à ocorrência de irritação na mucosa oral em doses mais elevadas de radiação. A porcentagem de hematócrito foi a variável mais sensível aos efeitos da radiação gama. Os níveis glicêmicos variaram dependendo das doses de radiação gama em função do tempo. Elevadas doses de radiação gama provocaram alterações metabólicas que modificaram os padrões das diferentes classes protéicas. A tilápia do Nilo demonstrou-se resistente às doses de 1 a 8 Gy, possivelmente devido... / Abstract: Fish are found in susceptible to contamination environments, among which stands out the radiation arising from inadequate disposal of radioactive material or even accidents like Chernobyl in Ukraine and, more recently, Fukushima in Japan. Few studies are found in the literature with the use of ionizing radiation as a stressor in fish. This work aims to quantify the impact of different doses of gamma radiation in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) in eating behavior, biochemical parameters, such as, hematocrit, glucose and plasma protein electrophoretic pattern, as well as the commitment on survival. In this work we used 105 males of Nile tilapia (Oreochromis niloticus), with the average standard length of 11.11 ± 0.44 cm and average weight of 40.56 ± 3.64 grams; divided into six experimental groups of 15 fish each and exposed to gamma radiation full-length single dose, by the use of a telecobaltoterapia apparatus in doses of 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy and 32 Gy, and a group Control without irradiation. They were collected, on average, 0.3 ml of blood with the aid of needles and heparinized syringes by cardiac puncture. Subsequently, they determined the parameters hematocrit, blood glucose and plasma protein electropherogram by standard techniques, to assess the effects of radiation. There was a decrease in food intake due to the occurrence of irritation on oral mucosa in higher doses of radiation. The percentage of hematocrit was the most sensitive variable to the effects of gamma radiation. Glucose levels varied depending on the doses of gamma radiation as a function of time. High doses of gamma radiation caused metabolic alterations that changed the standards of different protein classes. The Nile tilapia shown to be resistant to doses of 1 to 8 Gy, possibly due to repair system efficiency. It is believed that in the group of 16 and 32 Gy, mortality was occurring due to infection by opportunistic agents and susceptibilityof the... / Mestre

Orientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Coorientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Vera Lúcia Mores Rall / Banca: João Pessoa Araújo Junior / Banca: Aline Maria da Silva / Banca: Mario Henrique de Barros / Resumo: Salmonella Enteritidis é um patógeno pertencente à Família Enterobacteriaceae que frequentemente está relacionada a infecções alimentares em humanos, principalmente em crianças, idosos e pacientes imunossuprimidos. A importância deste micro-organismo se dá pela sua prevalência significativa, com distribuição mundial, nos lotes de frangos de corte e de postura de ovos, levando a sérias implicações na saúde pública e ao mercado avícola. O controle eficaz da salmonelose é um desafio, pois envolve um complexo manejo dos animais e tratamento com uso de antibióticos que não garantem a eliminação da infecção. O uso de bacteriófagos líticos contra infecções bacterianas (fagoterapia) vem atender uma demanda crescente por alternativas ao tratamento antimicrobiano convencional. Todavia, a literatura tem relatado o surgimento de certa resistência bacteriana a alguns bacteriófagos líticos, como por exemplo, em Salmonella sp. Diversos são os mecanismos bacterianos de resistência aos fagos, tais como a prevenção de adsorção, o bloqueio da injeção do DNA do fago, restrição-modificação, infecção abortiva e o sistema CRISPR ("clustered regularly interspaced short palindromic repeats") /Cas ("CRISPR associated proteins") de imunidade adquirida. Assim sendo, o presente trabalho objetivou a caracterização molecular da resistência bacteriana de fagos líticos isolados contra cepas de Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis (SE). Para tal, os mecanismos-alvos escolhidos foram o sistema CRISPR/Cas e o bloqueio da adsorção de fagos, via lipopolissacarídeo (LPS). Nas 22 cepas de estudo, um total de 72 CRISPRs foi identificado, com 14 diferentes domínios repetitivos (DR), apresentando um total de 551 sequências de espaçadores e os genes associados cas1, cas2 e cas3. Cas 9 e cas 10 não foram identificados. Foi observado que as cepas resistentes aos fagos líticos possuíam um maior número total... / Abstract: Salmonella Enteritidis is a pathogen that belongs to the Enterobacteriaceae family and is often related to infections transmitted by food in humans, especially in children, elderly and immunosuppressed patients. The importance of this microorganism is because it's significant prevalence with worldwide distribution in lots of poultry, leading to serious implications for public health and poultry industry. Effective control of salmonellosis is a challenging because involves a complex animal handling and treatment with antibiotics that do not guarantee the elimination of infection. The use of lytic bacteriophages against bacterial infections (phage therapy) meets a demand for alternatives to the conventional antimicrobial treatment. However, the literature has reported the emergence of bacterial resistance to some lytic bacteriophages, such as in Salmonella sp. There are several mechanisms of bacterial resistance to phages, such as prevention of adsorption, blocking the injection of phage DNA, restriction-modification, abortive infection and the CRISPR/Cas System acquired immunity. Thus, this research aims to study in a molecular level the bacterial resistance of lytic phages isolated from pathogenic strains of Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis (SE). Two mechanisms have been chosen: the CRISPR/Cas system and blocking of phage adsorption via LPS. From 22 SE strains, a total of 72 CRISPRs was identified with 14 different repetitive domains (DR), presenting a total of 551 spacers' sequences and cas1, cas2 and cas3 CRISPR associated genes. Cas 9 and cas 10 genes weren't identified. It was observed that phage lytic resistant strains have a higher total number of spacers in the CRISPR locus in relation to sensitive strains, and this difference was statistically significant. Phylogenetic analysis of cas genes from CRISPR/Cas system, of rfaC, rfaH, cpsG, manB, manc, lpxA, lpxB and lpxC genes (related to LPS) and of... / Doutor

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-05-28T23:29:22Z No. of bitstreams: 1 448387.pdf: 2406290 bytes, checksum: b9c686175b2c7a33644bea96bc032d9a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-28T23:29:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448387.pdf: 2406290 bytes, checksum: b9c686175b2c7a33644bea96bc032d9a (MD5) / O presente estudo teve por objetivo avaliar o padrão de expressão dos receptores toll-like (TLR) 5 e 9 e do fator de transcrição forkhead box p3 (Foxp3) de células T regulatórias em lesões orais de líquen plano e lúpus eritematoso. Vinte e um espécimes de biópsias de líquen plano, 21 de lúpus eritematoso e 21 de hiperplasia fibrosa inflamatória (grupo-controle) foram submetidos a processamento imunoistoquímico com os marcadores anti-TLR5, anti-TLR9 e anti-Foxp3, e a quantificação da expressão desses marcadores foi realizada por meio do software Image Pro Plus 4.5.1 (Media Cybernetics). O padrão de expressão do Foxp3 diferiu significativamente entre os três grupos, sendo os maiores níveis observados no grupo líquen plano, e os menores, no grupo-controle. A expressão do TLR5 não diferiu significativamente entre os grupos lúpus eritematoso e controle, mas foi maior nesses grupos quando comparados ao grupo líquen plano. Ao discriminarem-se os subtipos de lúpus eritematoso sistêmico e discoide, não foi verificada diferença significativa na expressão do TLR5 entre líquen plano e lúpus sistêmico, mas foram verificados maiores níveis desse marcador no lúpus discoide e no grupo-controle quando comparados ao grupo líquen plano. O padrão de expressão do TLR9 não diferiu significativamente entre os grupos. Foxp3 e TLR5 apresentaram correlação negativa fraca (r= -0.279). As demais variáveis não apresentaram correlação, mesmo quando analisadas intragrupo. Os resultados do presente estudo permitem concluir que a expressão de Foxp3 está aumentada em lesões orais de líquen plano e lúpus eritematoso, enquanto TLR5 e TLR9 não exibem maior expressão nessas lesões; Foxp3 e TLR5 estão inversamente correlacionados. Novas investigações sobre células T regulatórias, receptores toll-like e citocinas pró-inflamatórias fazem-se necessárias para o melhor entendimento de doenças como líquen plano e lúpus eritematoso. / The present study aimed at analyzing the expression of toll-like receptors (TLR) 5 and 9 and forkhead box p3 regulatory T cells transcription factor (Foxp3) in oral lesions of lichen planus and lupus erythematosus. Twenty-one biopsy specimens of lichen planus, 21 of lupus erythematosus and 21 of inflammatory fibrous hyperplasia (control group) were subjected to immunohistochemical staining with anti-TLR5, anti-TLR-9 and anti-Foxp3, whose expressions were quantified using Image Pro Plus 4.5.1 software (Media Cybernetics). Immunostaining for Foxp3 differed significantly between the three groups, where the highest levels were shown by lichen planus and the lowest ones by controls. TLR5 expression did not differ significantly between lupus erythematosus and control group, but it was significantly greater in these two groups than in lichen planus. When we considered the two types of lupus separately, there was no significant difference of TLR5 between lichen planus and systemic lupus erythematosus, but discoid lupus erythematosus as well as the control group showed significantly greater values than lichen planus. TLR9 immunostaining did not differ significantly between the groups analyzed. A weak negative correlation was observed between Foxp3 and TLR5 (r= -0.279), while there was no other correlation. When this analysis was performed within each group, no correlation was observed between the variables. In conclusion, Foxp3 expression is increased in oral lesions of lichen planus and lupus erythematosus, whereas TLR5 and TLR9 do not show increased expression in these lesions. Foxp3 and TLR5 are inversely correlated. Further investigations analyzing Treg cells and proinflammatory cytokines in these diseases are warranted.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:53:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000394809-Texto+Completo-0.pdf: 1360932 bytes, checksum: 45e91ad1f071e04247b153dcbb6a6629 (MD5) Previous issue date: 2007 / Exposure to microgravity produces changes in the immunological system at cellular level, as well as in the major physiological systems of the body. Weightlessness suppresses lymphocytic functions involved in the immunity process, such as cell locomotion and expression of antigen. The present study aimed at improving the third prototype of the Microgravity Center/PUCRS 3D-Clinostat, a device used to simulate microgravity environment on Earth, by adding to it electronic components, such as a microcontroller, a rotating speed sensor, temperature and humidity sensors and a Radio Frequency transceiver. These were intended to simplify the operation and increase the performance of the device. The present study also aimed to validate this new version of the 3D-Clinostat by investigating whether the proliferation and viability of lymphocytes are reduced by exposure to rotation, used to simulate microgravity for cells. The third objective of this study was to evaluate the growth of K562 tumor cells in simulated microgravity. The results demonstrated that the electronic components added to the Clinostat improved its performance. The validation study indicated a non-significant change in the proliferation and cellular viability to the mitogen stimulation in 24h of simulated weightlessness (p=0. 146). There was, however, a significant decrease (p= 0. 012) in proliferation and viability after 48h rotation in the 3D-Clinostat with is in accordance with the current scientific literature. A comparison between 24h and 48h of clinorotation indicated a difference between the results (p=0. 003).These findings validated the Microgravity Center 3D-Clinostat as a tool capable of simulating weightlessness on Earth. The results also suggested that the immunological depression associated with spaceflight is not just related to the psychological and physical stresses that the astronaut experiences to during a space mission, but it seems to it also be caused by microgravity per se, which affects the proliferation and cellular viability of immune cells. The results of the experiment with K562 cells showed an increase in their growth (p=0. 007) during microgravity simulation in relation to control values. Future studies have to be done to better clarify the effects of microgravity on tumor immunology. / A exposição à microgravidade acarreta alterações na atividade do sistema imunológico a nível celular, bem como na maioria dos sistemas fisiológicos do organismo. O ambiente desprovido de força gravitacional inibe funções linfocitárias envolvidas no processo de defesa imune do corpo humano, como locomoção celular e expressão de antígenos. O clinostato é uma das ferramentas utilizadas para simular microgravidade na Terra e estudar os seus efeitos em diversas funções fisiológicas do corpo humano. O presente estudo visou aperfeiçoar o terceiro protótipo do Clinostato 3D do Centro de Microgravidade/PUCRS, através da adição de componentes eletrônicos, como, por exemplo, microcontrolador, sensor de velocidade rotacional, sensor de temperatura e umidade e transceiver Rádio Freqüência, a fim de aumentar o seu desempenho e simplificar a sua operação. Este estudo também objetivou validar a nova versão do Clinostato 3D. Para tanto, realizou-se um estudo referente a processos imunológicos, o qual incluiu uma avaliação dos efeitos da microgravidade simulada sobre a proliferação e viabilidade de linfócitos T humanos em estimulação ao mitógeno fitohemaglutinina. O terceiro objetivo deste trabalho foi o de estudar o crescimento de células cancerígenas, utilizando-se o Clinostato 3D do Centro de Microgravidade como simulador de microgravidade. Os resultados do aperfeiçoamento do clinostato mostraram que os componentes eletrônicos implementados aumentaram o desempenho do Clinostato 3D e facilitaram a sua operação. No estudo de validação, não houve decréscimo na proliferação e viabilidade celular em 24h de simulação de microgravidade (p=0,146). Entretanto, ocorreu uma diminuição significativa (p=0,012) na proliferação e viabilidade celular após 48h de rotação no clinostato, o que corrobora pela literatura científica. A comparação dos resultados obtidos na clinorrotação em 24h e 48h revelou uma diferença significativa entre eles (p=0,003).Estes resultados validam o Clinostato 3D do Centro de Microgravidade como uma ferramenta capaz de simular microgravidade na Terra. O presente trabalho indica que a depressão imunológica associada aos vôos espaciais não está somente relacionada ao estresse físico e psicológico que o astronauta está sujeito, mas que esta pode ser causada pela microgravidade em si, a qual afeta a proliferação e a viabilidade celular. Os resultados do experimento com células tumorais K562 mostraram um crescimento significativo em relação ao controle estático (p=0,007), indicando que mais estudos na área de imunidade a tumores em microgravidade são necessários.