Orientador: Gisele Fabrino Machado / Banca: Mary Marcondes / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Para investigar a patogênese das alterações encefálicas durante a leishmaniose visceral, a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, IL-12p40, IFN-e TNF-e das citocinas anti-inflamatórias IL-10 e TGF- foi avaliada por meio de RT-qPCR no encéfalo de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum (= chagasi). No encéfalo dos cães infectados houve aumento da expressão gênica de IL-1, IL-6, IFN- e TNF-, associada ao decréscimo da expressão de IL-10 e TGF-. Por outro lado, a expressão gênica da citocina pró-inflamatória IL-12p40 mostrou-se reduzida no encéfalo de cães com LV. Esses dados indicam a presença de um ambiente pró-inflamatório no encéfalo de cães com leishmaniose visceral, já que IL-1, IL-6 e TNF-, principalmente, é tida como um fator chave para a iniciação, manutenção e persistência da inflamação. Ainda, não foi detectada correlação entre o perfil de citocinas expresso com a manifestação clínica ou com a carga parasitária periférica de Leishmania, sugerindo que as alterações encefálicas são decorrentes da própria resposta imune do hospedeiro, independentemente da fase em que a doença se encontra / Abstract:To investigate the pathogenesis of the brain alterations during visceral leishmaniasis, the gene expression of the pro-inflammatory cytokines IL-1, IL- 6, IL-12p40, IFN-and TNF-, and the anti-inflammatory cytokines IL-10 and TGF-was evaluated in the brain of dogs naturally infected with Leishmania infantum (syn. chagasi) by means of RT-qPCR. In the brain of the infected dogs, there was noticed up-regulation of IL-1, IL-6, IFN- and TNF-gene expression, in association with down-regulation of IL-10 and TGF-. On the other hand, the gene expression of IL-12p40 was down-regulated in the brain of the dogs with visceral leishmaniasis. These data indicate the presence of a pro- inflammatory milieu in the brain of dogs with visceral leishmaniasis, since IL-1, IL-6 and TNF-are considered key factors for the initiation, maintenance and persistence of inflammation. Furthermore, it was not detected correlation between the cytokine profile with the clinical manifestation or with the peripherical parasite density of Leishmania, which suggests that the brain alterations are due to the host immune response, regardless of the stage of the disease / Mestre

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Resumo: Manejos inerentes da piscicultura intensiva afetam a condição fisiológica e o sistema imune, desencadeando respostas de estresse nos animais, podendo aumentar a susceptibilidade a infecções, causando queda da produtividade. Para contornar este problema, o uso de nutrientes moduladores do sistema imunológico na dieta vem sendo utilizado como medida profilática para assegurarem uma maior sobrevivência e consequentemente a produtividade. A vitamina E é um importante antioxidante e tem sido muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Porém, é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus), o uso oral de vitamina E na dieta com 0,150 e 500 mg kg-1 administrados por 30 dias, onde em cada condição alimentar metade dos peixes foram manipulados (submetidos a estresse por perseguição (estresse crônico). Após o período experimental, foram amostrados para respostas de estresse, do sistema imune e sistema antioxidante de peixes submetidos a estressores crônico e agudo. Avaliamos como indicadores da resposta de estresse, a concentração de cortisol e glicose plasmáticos; como indicadores do sistema imune inato, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento e a atividade de lisozima; como indicadores do sistema antioxidante/estresse oxidativo, as atividades das enzimas hepáticas da glutationa-S-transferase (GST), da... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inherent management of intensive fish farming affects the physiological condition and immune system, triggering stress responses in animals, which may increase susceptibility to infections, causing a drop of the productivity. To solve/reduce this problem, the use of nutritional modulators of the immune system in the diet has been considered as a prophylactic measure to ensure better survival and consequently productivity. Vitamin E is an important antioxidant that has been widely used in aquaculture also as an immunostimulant. However, its direct effect on the classic stress response is little investigated. In this context, the present study evaluated the oral use of vitamin E in the diet with 0.150 and 500 mg kg-1 administered for 30 days, in which half of the fish were handled during the whole period (Chronic Stress) and the other half was not disturbed and only handled acutely after the 30-day period (Acute stress). After the experimental period, both fish groups were sampled for the assessment of indicators of stress, innate immune system and the antioxidant system. We evaluated the concentration of cortisol and glucose, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system and the activity of lysozyme, and the activity of hepatic enzymes glutathione-S-transferase (GST) and catalase (CAT), and the reduced glutathione (GSH). Vitamin E influenced glucose throughout the samplings, and non-fish manipulated the elevation was higher in those fe... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Samira Prince (prince@ufpa.br) on 2012-10-16T14:14:53Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-10-16T18:28:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-16T18:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) Previous issue date: 2008 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As células de Langerhans (CLs) estão localizadas na epiderme e desempenham um papel chave na indução da resposta imune e da tolerância imunológica. Os macrófagos são células fagocíticas que atuam como primeira linha de defesa do organismo, e que estão envolvidos na formação de granulomas em pacientes com hanseníase. A imunopatogenia da resposta celular nos estados reacionais ainda é pouco estudada, porém, diversas evidências sugerem que as drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina, utilizadas no controle das reações hansênicas, exercem seus efeitos pela modulação das funções de diferentes células imunocompetentes. O objetivo do presente estudo foi analisar a ação in vitro das drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina sobre a produção de citocinas por CLs e macrófagos de camundongos BALB/c. As CLs foram isoladas, purificadas e cultivadas a partir da epiderme pela técnica de “panning” e os macrófagos foram isolados da cavidade peritoneal de camundongos BALB/c. Após 36 h de tratamento com as drogas, os níveis de TNF-, IL-12 e IL-10 foram medidos por ELISA. Prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina inibiram os níveis de TNF- produzidos pelas CLs, em ambas as concentrações, no entanto, não foi detectada alteração significativa na produção de IL-12. A produção de TNF- e de IL-12 por macrófagos peritoneais também foi diminuída após o tratamento, porém os níveis de IL-10 não foram modificados por nenhuma das drogas testadas. Nossos resultados mostram que estas drogas podem modular a resposta imune através da regulação das citocinas pró-inflamatórias TNF- e IL-12 por CLs purificadas da epiderme e por macrófagos peritoneais, indicando que as citocinas constituem importante alvo de drogas usadas no tratamento dos estados reacionais. / Langerhans cells (LCs) are localized in the epidermis and performs a key role in the induction of immune response and immunologic tolerance. Macrophages are phagocytic cells that act as first line of defense of the organism, and they are involved in the granuloma formation in patients with leprosy. The immunopathogeny of the cellular response in the reactional states is yet little studied, however, several evidences suggest that the drugs prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline, used in the control of leprosy reactions, perform their effects by the modulation of different immunocompetent cells functions. The objective of the present study was to analyze in vitro action of prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline on the cytokine production by LCs and macrophages of BALB/c mice. LCs were isolated, purified and cultivated from the epidermis by the panning technique and macrophages were isolated by the peritoneal cavity of BALB/c mice. After 36 h of treatment with the drugs, the levels of TNF-, IL-12 and IL-10 were measured by ELISA. Prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline inhibited TNF- produced by LCs, in both concentrations, however no important alterations in IL-12 production were detected. TNF- and IL-12 production by macrophages was also decreased after treatment, but IL-10 levels were not modified for none of the drugs tested. Our results show that these drugs can modulate the immune response by the regulation of pro-inflammatory cytokines TNF- and IL-12 by purified epidermal LCs and peritoneal macrophages, indicating that they constitute an important target for the drugs used in treatment of leprosy reactional states.

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-09-14T14:39:59Z No. of bitstreams: 1 claudiareginassilva_dissert.pdf: 1494248 bytes, checksum: a28172aa7743b4b9810d1de076e19740 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-14T14:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 claudiareginassilva_dissert.pdf: 1494248 bytes, checksum: a28172aa7743b4b9810d1de076e19740 (MD5) Previous issue date: 2015-05-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / ABSTRACT Introduction: Down syndrome (DS) is a genetic disorder caused by the presence of an extra copy of human chromosome 21 (HSA21) with an incidence of one in 660 live births. Individuals with DS show alterations of the immune system resulting in increased frequency of infections and autoimmune diseases. Studies show that some genes involved in the immune system present altered expression in individuals with DS, however, the molecular mechanisms by which trisomy 21 leads to the immune system disorders in DS remain poorly investigated. Objective: This study aimed to investigate the expression pattern of a specific set of genes involved in the immune system and inflammation process in children with DS and children without the syndrome (control group), to identify differences that may be related to clinical manifestations of the syndrome. Casuistic and Methods: In this study were included six children with DS and six children without the syndrome. The quantification of the gene expression was performed using TaqMan ® Array Plate Human Inflammation Kit, which enables the investigation of 92 inflammation-related genes and four reference genes by real-time polymerase chain reaction (qPCR). Results: Of the 92 genes analyzed, 20 genes showed differential expression in children DS; 12 overexpressed (PLA2G2D, CACNA1D, ALOX12, VCAM1, ICAM1, PLCD1, ADRB1, HTR3A, PDE4C, CASP1, PLA2G5 e PLCB4) and 8 underexpressed (LTA4H, BDKRB1, ADRB2, CD40LG, ITGAM, TNFRSF1B, ITGB1 e TBXAS1). After statistical correction for false discovery rate, only the genes BDKRB1 and LTA4H showed differential expression, both underexpressed. Conclusion: DS children show differential expression of genes, not located on chromosome 21, compared to children without DS. The altered expression of these genes, considering their functions in the inflammatory response, suggests an important role in DS pathogenesis. / RESUMO Introdução: A síndrome de Down (SD) é um distúrbio genético causado pela presença de uma cópia extra do cromossomo humano 21 (HSA 21) com uma incidência de um a cada 660 nascidos vivos. Indivíduos com SD apresentam alterações no sistema imunológico que resultam no aumento da frequência de infecções e doenças autoimunes. Estudos mostram que alguns genes envolvidos no sistema imunológico apresentam expressão alterada em indivíduos com SD, entretanto, os mecanismos moleculares pelos quais a trissomia do 21 leva aos distúrbios do sistema imunológico em SD permanecem pouco investigados. Objetivo: O presente trabalho teve como objetivo investigar o padrão de expressão de um conjunto específico de genes envolvidos no sistema imunológico e no processo inflamatório em crianças com SD e crianças sem a síndrome (grupo controle), visando identificar diferenças que possam estar relacionadas com manifestações clínicas da síndrome. Casuística e Métodos: Foram incluídas no estudo seis crianças com SD e seis crianças sem a síndrome. A quantificação da expressão gênica foi realizada com o kit TaqMan® Human Plate Inflammation Array, que permite a investigação de 92 genes relacionados com a inflamação e quatro genes de referência pelo método de reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (PCRq). Resultados: Dos 92 genes analisados, 20 genes apresentaram expressão diferencial em crianças com SD; 12 com expressão aumentada (PLA2G2D, CACNA1D, ALOX12, VCAM1, ICAM1, PLCD1, ADRB1, HTR3A, PDE4C, CASP1, PLA2G5 e PLCB4) e oito com expressão reduzida (LTA4H, BDKRB1, ADRB2, CD40LG, ITGAM, TNFRSF1B, ITGB1 e TBXAS1). Após correção estatística para múltiplos testes apenas os genes BDKRB1 e LTA4H apresentaram expressão diferencial, ambos com expressão reduzida. Conclusão: Crianças com SD apresentam expressão diferencial de genes, não localizados no cromossomo 21, em relação a crianças sem a síndrome. A expressão alterada desses genes, considerando suas funções na resposta inflamatória, sugere um papel relevante na patogênese da SD.

Orientador: Vânia Nieto Brito de Souza / Coorientador: Alessandra Pontillo / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Fátima Regina Vilani Moreno / Resumo: Os macrófagos desempenham um papel importante na eliminação do M. Leprae (ML). Estas células participam do reconhecimento de patógenos e ativação do sistema imune, no entanto na hanseníase virchowiana elas se tornam alvos, servindo de habitat para o bacilo, que ali se protege da ação do sistema imune. Assim, este estudo teve por objetivo avaliar a função macrofágica de pacientes com hanseníase virchowiana (LLP) em termos de expressão de marcadores de superfície e produção de mediadores inflamatórios. Além disso, considerando o possível envolvimento dos inflamassomas na resposta dos macrófagos ao ML, foi avaliada a expressão de genes do complexo do inflamassoma. Para tanto, macrófagos diferenciados a partir de monócitos sanguíneos de LLP e indivíduos saudáveis (HC) foram cultivados com ML. A expressão dos marcadores de ativação CD40 e ICAM, e dos receptores do tipo Toll envolvidos no reconhecimento do ML, TLR1 e TLR2, foi avaliada por citometria de fluxo. A produção de citocinas pró (TNF e IL-1β) e anti-inflamatórias (IL-10 e IL-1RA) foi determinada por ELISA e a produção de H2O2 foi avaliada por ensaio colorimétrico. A expressão relativa dos genes NLRP1, NLRP3, NLRC4, CASP1, IL1B e IL18 foi avaliada por PCR em tempo real. ML induziu expressão semelhante de CD40 e ICAM em HC e LLP, assim como dos TLR1 e TLR2. TNF e IL-1β mostraram comportamento diferente, sendo que o ML estimulou uma produção significativa de TNF em HC e LLP, mas não induziu a secreção de IL-1β. H2O2 não foi significativamente induzida pelo ML em LLP. Nenhuma diferença foi encontrada para as citocinas anti-inflamatórias entre HC e LLP. A análise da expressão de genes relacionados aos inflamassomas mostrou que ML é capaz de induzir o gene da IL-1β, mas não dos receptores analisados. Os dados aqui reportados mostrando deficiência na secreção de IL-1β em macrófagos estimulados com ML e a baixa quantidade de H2O2 produzida ... / Abstract: Macrophages play a major role in the elimination of M. leprae (ML). These cells participate in pathogen recognition and activation of the immune system. However in the lepromatous leprosy macrophages become targets, serving as habitat for the bacillus that protects itself from the action of the immune system. This study aimed to evaluate the macrophage function in lepromatous leprosy patients (LLP) in term of surface molecules expression and cytokine and H2O2 production. Moreover, considering the possible involvement of inflammasome complex in macrophage response against ML, inflammasome genes expression was evaluated. ML induced surface expression of activation markers CD40 and ICAM in healthy controls (HC) and LLP macrophages in a similar way, as well as TLRs involved in ML recognition (TLR1 and TLR2). Pro-inflammatory cytokines TNF and IL-1β showed a different behavior. ML was able to induce TNF in HC and LLP, but not IL-1β. Similarly, ML induced significant production of H2O2 in HC but not in LLP macrophages. No difference was found in the production of anti-inflammatory molecules IL-10 and IL1RA in HC and LLP macrophages stimulated with ML. When inflammasome genes expression was analyzed an up-regulation of IL1B gene was observed in both HC and LLP macrophages stimulated with ML. Together, our data indicate that the deficiency in the production of IL-1β and H2O2 in lepromatous leprosy patients combined with IL1B gene expression induction by M. leprae suggested that even if surface recognition of ML and general activation of macrophages are apparently normal, the bacteria is able to inhibits the pathways leading to I IL-1β and H2O2 production, possibly affecting inflammasome activation / Mestre

Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-06-09T15:53:14Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eleonora Dantas Dias.pdf: 1606006 bytes, checksum: 39bc4387f7de748f5319e9835177b21c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-09T19:53:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eleonora Dantas Dias.pdf: 1606006 bytes, checksum: 39bc4387f7de748f5319e9835177b21c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-09T19:55:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eleonora Dantas Dias.pdf: 1606006 bytes, checksum: 39bc4387f7de748f5319e9835177b21c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-09T19:55:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Eleonora Dantas Dias.pdf: 1606006 bytes, checksum: 39bc4387f7de748f5319e9835177b21c (MD5) Previous issue date: 2008-12-02 / Não Informada / The Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) constitutes a sub-epidemic in Brazil. Due to the increasing number of women infected by the virus, vertical transmission increasing substantially, and the lack of adequate prophylactic treatment, many children are infected and show manifestations of the disease in early ages. Multiples are the systems affected by the HIV virus, being frequently the skin the first organ to be affected. Skin disorders are the most common manifestation in children with HIV, being sometimes persistent and recurrent. The study objective is to analyze clinic, dermatologic and epidemiological profiles of children carriers of the virus in the City of Manaus aiming to identify the most frequent dermatosis that affect children carriers of HIV virus in the Amazon Region as to try to related these dermatosis with immunologic deterioration in this population. A study took place, where children carriers of HIV virus from the Fundação de Medicina Tropical were studied from March 2007 to July 2008. These children were submitted to dermatological examination viewing to identify dermatosis and also submitted to laboratorial exams such as viral load dosage, CD4+, and CD8+. Specific exams were also realized whenever necessary to give support to dermatosis diagnosis such as direct and culture mycological exam, bacteriologic and histopathological exams. The data collect were stored in data base elaborated using Excel and analyzed using Epi-Info, Windows versions. During the study period, 70 children HIV + were examined, all of them had AIDS and had being contaminated by vertical transmission. The media of children attended was 1.67 and the media of dermatosis by children was 1.73 dermatosis/children and among the 70 youngest, 95.5% had at least one dermatosis during the study period. The most frequent manifestation was atopic dermatitis (22.9%), prurigo estrofulo (20.0%) and wartz (18.6%). There was no statistical difference between the children in the group using HAART and the group that wasn’t using it. / A Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) tem se configurado como uma sub-epidemia no Brasil, devido ao crescente número de mulheres infectadas pelo vírus, a transmissão vertical aumentou significativamente, e devido a falta de tratamento profilático adequado, muitas crianças são infectadas e convivem com as manifestações da doença precocemente. Múltiplos são os sistemas acometidos pelo vírus HIV, sendo a pele muitas vezes o primeiro órgão acometido. As desordens cutâneas são as manifestações mais comuns em crianças com HIV, sendo por vezes persistentes e recorrentes. O estudo teve por objetivo analisar o perfil clínico-dermatológico e imunológico das crianças portadoras do vírus HIV na cidade de Manaus com a finalidade de identificar as dermatoses mais freqüentes que acometem as crianças portadoras do vírus HIV na população estudada, bem como tentar relacionar essas dermatoses com a deterioração do sistema imunológico dessa população. Realizou-se um estudo onde foram acompanhadas no período de março de 2007 a julho de 2008, crianças portadoras do vírus HIV atendidas na Fundação de Medicina Tropical do Amazonas. Estas crianças foram submetidas a exame dermatológico para identificação de dermatoses e a exames laboratoriais como dosagem de carga viral, CD4+, CD8+. Também foram realizados exames específicos quando se fez necessário para suporte ao diagnóstico de dermatoses como exame micológico direto e cultura, bacteriológicos e histopatológicos. Os dados coletados foram armazenados em base de dados elaborada no programa Excel e analisados no programa Epi-Info versão Windows. Durante o período estudado, foram atendidas 70 crianças HIV+, todas já apresentavam AIDS e tinham sido contaminadas por transmissão vertical. A média de consultas por criança foi de 1,67 e a média de dermatose por criança foi de 1,73 dentre os 70 menores, 95,5% apresentou pelo menos uma dermatose no período do estudo. A manifestação mais freqüente encontrada foi à dermatite atópica (22,9%), prurigo estrófulo (20%) e verruga (18,6%). Não houve diferença estatística em relação às dermatoses entre o grupo de crianças que estava em uso de Terapia antiretroviral (TARV) e o que não estava.

Imunossenescência, termo que designa o envelhecimento do sistema imune, contribui com o aumento das infecções, doença autoimune, câncer e baixa eficiência das vacinações, favorecendo o aumento da morbi-mortalidade entre os indivíduos idosos. Dentre as mudanças, destacam-se as alterações no tamanho da subpopulação de célula T, com aumento de células de memória e diminuição de células naive; no padrão de secreção de citocinas, na capacidade de replicação das células e na produção de anticorpos, as quais culminam em um estado pró-inflamatório chamado \'inflamm-aging\' e uma capacidade diminuída para responder a novos antígenos. Além disto, o acúmulo de linfócitos T CD8+CD28- nos idosos também se correlaciona com uma diminuição do controle sobre a infecção. No entanto, há poucos relatos sobre o papel do exercício regular na prevenção ou tratamento de imunossenescência. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da atividade física intensa e regular na imunossenescência de idosos. Foram selecionados 15 indivíduos idosos em treinamento intenso de corrida (meia maratona e/ou maratona há pelo menos 5 anos, TI), e 16 indivíduos idosos não praticantes de atividade física, NT. Todos os indivíduos eram do sexo masculino, com idade entre 65 a 85 anos, apresentavam auto percepção de saúde positiva e ausência de co-morbidades e/ou em tratamento com impacto significativo para o sistema imune. Foram avaliadas as subpopulações de células T (CD8+CD28+ e CD8+CD28-; CD4+ naive e de memória) em relação ao comprimento de seus telômeros, resposta proliferativa e marcadores de apoptose, síntese de citocinas (Th1/Th2); níveis séricos de citocinas inflamatórias; frequência das subpopulações (naive, memória central, memória efetora e terminalmente diferenciada) dos linfócitos T CD4+ e CD8+ no sangue periférico e a quantificação da produção de anticorpos anti-Influenza. Verificamos no grupo TI, em relação ao NT, aumento de células TME e diminuição de TEMRA; maior proliferação de linfócitos T CD4+ naive estimulados com mitógeno; maior comprimento do telômero em linfócitos T CD3+, T CD3+CD8+ e T CD3+CD8+CD28-, esta última considerada subpopulação associada à imunossenescência; preservação dos mecanismos anti-apoptóricos, verificado pelo aumento da expressão in vitro de Bcl-2 e redução de caspase-3 em células TCD4+ (memória e naive) e T CD8+ (senescentes e não senescentes) não estimuladas; parâmetros estes denotando uma provável melhor capacidade funcional de células T. Além disso, verificamos aumento da produção sérica de títulos de anticorpos anti-influenza pré e pós-vacinação, evidenciando possível papel adjuvante do exercício intenso na resposta vacinal. E finalmente, observamos equivalência entre os dois grupos com relação ao padrão de secreção de citocinas séricas e secretadas in vitro associadas com o Inflammaging. Os resultados evidenciaram que a prática da atividade física intensa e regular teria um efeito protetor contra alguns parâmetros associados à imunossenescência / Immunosenescence, the term used to designate the process of aging of the immune system, is associated with to the increased rate of infections, autoimmune diseases, cancer and low efficiency of vaccinations in elderly, favoring their increased morbidity and mortality. Immunosenescence is associated with changes in the size of the T cell subpopulation with increased proportion of memory T cells and decrease proportion of naive T cells, in the pattern of cytokine secretion, in cell replication capability and in antibody production, all of which culminate in a pro-inflammatory state called \"inflamm-aging\" and diminished capacity to responding to new antigens. In addition, the accumulation of CD8+CD28- lymphocytes in elderly also correlates with a decreased control of infections. However, there are few reports on the role of chronic regular exercise in the prevention or treatment of immunosenescence. The objective of this study was to investigate the effects of intense regular physical activity on immunosenescence of elderly men. We selected 15 elderly men with intensive training for at least the last 5 years (IT, participating in half marathon and/or marathon), and 16 elderly men not training, NT. They were 65-85 years and had self perception of positive health and lack of co-morbidities and/or treatment with significant impact on the immune system. T-cell subpopulations were assessed (CD8+CD28+ and CD8+CD28-; CD4+ naive and memory) with respect to telomere length, proliferative responses, apoptosis markers, cytokine synthesis (Th1/Th2); serum levels of inflammatory cytokines; distribution of the naive, central memory, effector memory, and terminally differentiated CD4+ and CD8+ lymphocyte subpopulations in peripheral blood, and anti-influenza antibodies production. We found in the IT group, compared with the NT, in the T-cell subsets, increased percentages of effector memory T-cells and decreased percentages of terminally differentiated T-cells; higher proliferation of naive CD4+T cells stimulated with mitogen; larger telomere length in TCD3+, TCD3+CD8+ and TCD3+CD8+CD28- cells (the latter subset being a marker of immunosenescence), preservation of the anti-apoptotic mechanisms, indicated by increased Bcl-2 expression and decreased caspase-3 expression in in vitro resting memory and naive CD4+ T-cell and in senescent and non-senescent CD8+ T-cells; all of which denote a potentially better T-cell functioning. There was also increased anti-influenza antibody titers pre and post-vaccination, indicating a possible adjuvant role of intense exercise in vaccine responses. Finally there was a similar pattern between the two groups in in vitro secreted and in serum cytokines associated with Inflamm-aging. The results showed that the practice of regular intense physical activity has a protective effect against some parameters associated with immunosenescence

Orientador: João Martins Pizauro Junior / Resumo: O desenvolvimento dos anfíbios é caracterizado por uma série de eventos que possibilitam a esses animais a ocupação dos ambientes aquático e terrestre. Nesse sentido, a supressão do sistema imunológico é necessária para que esses eventos ocorram de forma ordenada, evitando então, respostas autoimunes. Por outro lado essa imunossupressão durante a metamorfose pode tornar os animas mais susceptíveis a algumas doenças, dentre elas, a causada pelo fungo Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), que é considerado o principal patógeno de anfíbios da atualidade. Nesse contexto, a produção de anticorpos da classe IgY anti-Bd, extraídos de gemas de ovos de galinhas poedeiras infectadas com o referido fungo, pode agregar valor ao ovo, auxiliar no combate a quitridiomicose, diminuição da perda da produção e dispersão do patógeno por criadouros, diminuindo também o uso de antibióticos no tratamento e profilaxia da quitridiomicose, aumentando o nível de segurança da carne e valorizando o produto final. No presente estudo a imunização das aves com o antígeno desativado fez com que o sistema humoral das mesmas respondesse a indução contra Bd viabilizando a produção e purificação de imunoglobulinas da classe IgY específicas e de alta avidez contra o fungo. A transferência passiva das imunoglobulinas purificadas das gemas apresentou resultados promissores, onde os girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) tratados não apresentaram danos deletérios quanto à sanidade animal dos mesmos, mantendo ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The development of amphibians is characterized by a series of events that enable these animals to occupy aquatic and terrestrial environments. In this sense, suppression of the immune system is necessary for these events to occur in an orderly manner, avoiding autoimmune responses. On the other hand, this immunosuppression during metamorphosis may make the animals more susceptible to some diseases, among them, the one caused by the fungus Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), which is considered the main amphibian pathogen today. In this context, the production of anti-Bd IgY class antibodies, extracted from egg yolks of laying hens infected with this fungus, may add value to the egg, assist in the fight against chytridiomycosis, decrease production loss and pathogen dispersion by breeding facilities, reduce the use of antibiotics in the treatment and prophylaxis of chytridiomycosis, increasing the safety level of the meat and valuing the final product. In the present study, the immunization of hens with the deactivated antigen caused their humoral system to respond to induction against Bd, enabling the production and purification of specific and highly avid fungal IgY class immunoglobulins. Passive transfer of purified immunoglobulins from yolk showed promising results, where treated bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus) showed no deleterious damage to animal health, keeping the morphology and counting of blood cells within normal range. These results enable the develop... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Antonio José Maria Cataneo / Coorientador: Daniele Cristina Cataneo / Coorientador: Paulo Eduardo de Oliveira Carvalho / Banca: Vânia dos Santos Nunes / Banca: Olavo Ribeiro Rodrigues / Resumo: Introdução: A miastenia gravis é uma doença que afeta a junção neuromuscular e leva a fraqueza da musculatura esquelética. O tratamento atual pode ser clínico ou cirúrgico através da ressecção completa do timo. Objetivo: Comparar, através de uma revisão sistemática da literatura, os resultados do tratamento cirúrgico e clínico da miastenia gravis. Métodos: Foi realizada uma busca nos principais bancos de dados a fim de encontrar ensaios clínicos randomizados que comparassem as duas modalidades terapêuticas. Como não existem estudos dessa categoria, foram selecionados aqueles com menor nível de evidência e que continham as duas intervenções, com pelo menos 10 pacientes em cada braço do estudo. A análise estatística foi feita com software StatsDirect, versão 3.0.121. Resultados: A busca encontrou 592 artigos na base Medline, 1925 artigos na base Embase e 204 artigos na base Lilacs. Após a exclusão dos estudos duplicados, 51 artigos foram analisados integralmente e nove foram selecionados para esta revisão. O número total de pacientes avaliados foi de 3.211. A mortalidade nos grupos cirúrgico e clínico foram respectivamente de 7 e 19%, com diferença estatística significante. A taxa de remissão nos grupos foi de 17% para o grupo cirúrgico e de 13% para o clínico, sem significância estatística. Para o desfecho melhora, o grupo cirúrgico apresentou uma taxa de 23% e o clínico de 29%, também sem diferença estatística. Conclusões: Apesar da baixa evidência disponível, a timectomia pode ser considerada uma opção terapêutica na miastenia gravis, com menores índices de mortalidade e taxas de remissão e controle semelhantes ao tratamento clínico / Abstract: Introduction: Myasthenia gravis is a disease that affects the neuromuscular junction and leads to weakness of the skeletal muscles. Current treatment is guided by the clinical and surgical conduction through the complete resection of the thymus. Objective: Compare, through a systematic review, the results of surgical and medical treatment of myasthenia gravis. Methods: A search was conducted in major databases to find randomized controlled trials that compared the two treatment modalities. As there are no studies that category, were selected studies with a lower level of evidence and that contained both interventions and at least 10 patients in each arm of the study. Statistical analysis was performed with StatsDirect version 3.0.121 software. Results: The search found 592 articles in Medline, 1925 articles in the Embase and 204 articles in the Lilacs. After exclusion of duplicate studies, 51 articles were fully analyzed and nine were selected for this review. The total number of patients was 3,211. The mortality in the surgical and medical groups were respectively 7 and 19%, with significant differences. The remission rate in both groups was 17% for the surgical group and 13% for clinical, without statistical significance. To improve the outcome, the surgical group had a rate of 23% and 29% of the clinical, also no statistical difference. Conclusion: Despite the low available evidence, thymectomy may be considered a therapeutic option in myasthenia gravis, with lower rates of mortality and rates of remission and control similar to clinical treatment Keywords: myasthenia gravis, thymectomy, clinical treatment / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000425543-Texto+Completo-0.pdf: 747447 bytes, checksum: 25a6005ed4d57ac7cb87a5a7d22ed8de (MD5) Previous issue date: 2010 / Aging is associated with the gradual decline in the immune system function (immunosenescence), both in humoral immunity as well in cellmediated responses, resulting in an increased susceptibility to infections and cancer, as well as reduced response to vaccination. Dendritic cells (DCs) are the most powerful and efficient antigen-presenting cells (APC), playing a pivotal role in the presentation and consequent T-cell mediated immune response. However, most of the studies focusing on immunosenescence focus on T cells. Also, most of the data on aged dendritic cells come from in vitro studies. The interaction between dendritic and T cells affects the processing and consequent presentation of antigens, influencing the effectiveness of T cell-mediated immune responses. The goal of this study was to evaluate the stimulatory capacity of dendritic cells from old mice in a specific T CD4+ response compared to young mice in vivo. Transgenic T cells from TEa mice, specific for the Ea:IAb complex were transferred to normal C57Bl/6 mice. T cells from young mice being transferred into young and old animals, and T cells from old mice transferred into young and old animals. The results demonstrate that, after immunization with EaRFP antigen, young dendritic cells stimulated equally young and old T cells. However, dendritic cells from old animals were less capable of stimulating old as well as young T cells. While both T cells, young and old, acquired CD44+ phenotype when transferred to young animals, young T cells when transferred to old animals did not acquired the same phenotype. This fact suggested that dendritic cells from old animals possess lower capacity to stimulate T cells, even if these cells come from a young animal. We hypothesized that this could be due to an extremely diminished dendritic cells number in old animals, or rather to some deficiency in one of the signals supplied by dendritic cells in T lymphocyte priming (antigen presentation or costimulatory signals). The dendritic cells total number was lower in old mice compared to young mice. Also, the number of antigen presenting cells was lower in draining lymph nodes of old animals and the expression of CD86 by dendritic cells did not differ between old and young animals. Altogether, the results suggest that the impairment of antigen presentation capacity presented by aged dendritic cells is critical for their loss of stimulatory potential of CD4+ T cells. / O envelhecimento está associado com o declínio progressivo nas funções do sistema imunológico (imunosenescência), tanto na imunidade humoral quanto na imunidade mediada por células, resultando em maior suscetibilidade a infecções e câncer, além da diminuição na capacidade de responder a vacinas. As células dendríticas (DCs) são as mais poderosas e eficientes apresentadoras de antígenos (APC), desempenhando um papel primordial na apresentação e conseqüente resposta imune mediada por células T. Poucos estudos enfocam a atividade das células dendríticas no envelhecimento, sendo que a maioria dos dados são relativos às funções das células T. As interações entre as células dendríticas e as células T afetam o processamento e consequente apresentação de antígenos, influenciando a efetividade das respostas imunes mediadas por células T. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade estimulatória de células dendríticas de camundongos velhos em uma resposta específica T CD4+ comparada à resposta imune de camundongos jovens. Para isso, células T de camundongos transgênicos TEa, específicas para o complexo Ea:IAb foram transferidas para camundongos normais C57Bl/6, células T de camundongos jovens para animais velhos e jovens, e células T de camundongos velhos para animais velhos e jovens. Os resultados demonstram que, após imunização com o antígeno EaRFP, tanto as células T jovens quanto as células T velhas foram estimuladas de modo semelhante por células dendríticas jovens. Contudo, células dendríticas de animais velhos não foram capazes de estimular suficientemente as células T de animais velhos nem mesmo as células T de animais jovens. Enquanto ambas as células T, jovens e velhas, adquiriram o fenótipo CD44+ quando transferidas para os animais jovens, células T jovens transferidas para animais velhos não adquiriram o mesmo fenótipo. Esse fato sugeriu que células dendríticas de animais velhos possuem baixa capacidade de estimular células T, mesmo que essas células venham de um animal jovem. Nós hipotetizamos que esse resultado poderia estar ligado a um número extremamente diminuído de células dendríticas nos animais velhos, ou ainda em uma deficiência em um dos sinais fornecidos pelas células dendríticas no priming de linfócitos T (apresentação de antígeno ou sinais coestimulatórios). O número total de células dendríticas foi significativamente menor em camundongos velhos comparado a camundongos jovens. Além disso, o número de células apresentando antígeno foi menor no linfonodo drenante de animais velhos, e a expressão de CD86 por células dendríticas de animais velhos não foi diferente da dos animais jovens. Os resultados sugerem que a diminuição da capacidade de apresentação de antígeno apresentada no envelhecimento é crítica para a perda do potencial estimulatório de células T CD4+ por células dendríticas.