Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Talita Silva Ramos.pdf: 3387095 bytes, checksum: 04f2c9013d8026bdbc34d13d75a0c272 (MD5) Previous issue date: 2011-04-27 / The narrowing between humans, domestic and wild animals has increased the dissemination of infectious agents for new hosts. The result of this interaction has lead to zoonosis. Among these animals are birds, which are natural reservoirs, carriers and disseminators of several infectious agents, potentially transmissible to humans. This dissemination can occur through direct and indirect contact with migratory birds originated from smuggling of wild animals. The objective was to detect viral, bacterial and fungal agents with zoonotic potential in wild birds in the county of Goiânia, Goiás. It was carried out a systematic review to assess the State of Goiás in relation to the performance of wild birds as carries of infectious agents to humans. Blood samples and cloacal swabs were collected from 88 different species of birds, as most of them were originated from smuggling and sent to CETAS-IBAMA in Goiânia in the first semester of 2010. The collects were analyzed in the Laboratory of Animal Virology at Federal University of Goiás (UFG) and the bacteriological and fungal analyses were done in the Laboratory of Microbiology at National Service of Industrial Education (SENAI) in Anápolis, Goiás. The blood was stored in tubes without anticoagulant in order to obtain serum and it was carried out a research with Enzyme-Linked Immunosorbent to search for the antibody of influenza virus and the cause of Newcastle disease. In order to isolate and identify filamentous fungus, Candida spp, bacteria, Salmonella sp and Escherichia coli, samples were collected from cloacal excretion through swabs. In the systematic review, three articles were selected using two tests of Relevance. From the interpretation of these studies, it was proved the role of migratory birds as carriers and disseminators in short and long distances of several pathogenic virus to humans. Furthermore, there are no records or even systematic studies about this process in the state of Goiás. From 88 analyzed samples, none of them presented antibodies for the two researched virus. The analysis of samples from cloacal swabs indicated a positivity of 9,1% for Candida tropicalis , 9,1% for Salmonella sp, 1,1% for Aspergillus fumigatus, 11,4% for Candida albicans, 12,5% for Candida krusei, 27,3% for Candida spp, and 43,2% for Escherichia coli. The literature review suggests that further researches should be carried out as the distribution of this zoonosis can possibly be wider, even in the State of Goiás. Regarding the negative results for the viral agents, they indicate that part of the wild birds in Goiânia-Goiás did not have contact with influenza and Newcastle viral antigens yet. Therefore they are not carriers of these photogenes. In relation to presumptive identifications of pathogenic bacteria and fungal agents in wild birds, they confirm the possibility of transmission of these agents among animals and to humans. Besides, this study also reinforces that researches about zoonosis transmitted by wild birds in the state of Goiás are still recent and incipient, highlighting the need of continuation of these studies in the region. / O estreitamento entre a população humana e os animais domésticos com animais silvestres aumentou a disseminação de agentes infecciosos para novos hospedeiros, sendo uma importante consequência, as zoonoses. Entre estes animais, estão as aves, que são reservatórios naturais, portadores e disseminadores de diversos agentes infecciosos, potencialmente patogênicos transmissíveis aos humanos. A disseminação pode ocorrer por meio de contato direto ou indireto com aves migratórias e provenientes do tráfico de animais silvestres. O objetivo foi detectar agentes virais, bacterianos e fúngicos, com potencial zoonótico em aves silvestres no município de Goiânia-Goiás. Foi conduzida uma revisão sistemática para avaliar com ênfase, o Estado de Goiás em relação a atuação das aves silvestres como portadoras de agentes infecciosos para humanos. Amostras de sangue e de swabs cloacais foram coletadas em 88 aves de distintas espécies, sendo a maioria, proveniente do tráfico e encaminhadas ao CETAS-IBAMA de Goiânia. As coletas foram realizadas em cinco incursões ao CETAS no primeiro semestre de 2010. As análises virais foram realizadas no Laboratório de Virologia Animal da UFG e as análises bacteriológicas e fúngicas no Laboratório de Microbiologia do SENAI em Anápolis. O sangue foi coletado em tubos sem anticoagulante para obtenção de soro e com o ensaio imunoenzimático indireto pesquisou-se anticorpos para os vírus influenza e causador da doença de Newcastle. As amostras de excreção cloacal foram coletadas por meio de swabs e realizouse o isolamento e identificação de fungos filamentosos, Candida spp, Salmonella sp e Escherichia coli. Na revisão sistemática, três artigos foram selecionados por meio de dois Testes de Relevância e a partir da interpretação destes estudos foi comprovado o papel das aves silvestres como portadoras e disseminadoras, a curta ou longa distância, de vários agentes infecciosos aos humanos e que não existem registros ou estudos sistemáticos sobre este processo no Estado de Goiás. Das 88 amostras analisadas, nenhuma apresentou anticorpos para os dois vírus pesquisados. As análises das amostras procedentes de swabs cloacais houve uma positividade de 9,1% para Candida tropicalis, 9,1% para Salmonella sp, 1,1% para Aspergillus fumigatus, 11,4% para Candida albicans, 12,5% para Candida krusei, 27,3% para Candida spp e 43,2% para Escherichia coli. Na revisão observou-se que novos estudos devem ser realizados, pois a distribuição destas zoonoses, possivelmente deve ser mais ainda mais ampla, inclusive em relação ao Estado de Goiás. Quanto aos resultados negativos para os agentes virais, estes sugerem que uma parcela das aves silvestres circulantes em Goiânia, ainda não entrou em contato com os agentes virais influenza e Newcastle, não sendo, portanto, portadoras destes patógenos. Em relação às identificações presuntivas de agentes bacterianos e fúngicos, em aves silvestres, estas confirmam a possibilidade da transmissão destes agentes entre os animais, incluindo os humanos. Além disso, este estudo reforça que ainda são incipientes as investigações desenvolvidas na área de zoonoses transmitidas por aves silvestres no Estado de Goiás, ressaltando a necessidade da continuidade destes estudos na região.

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Coorientador: Ana Carolina Kogawa / Banca: Felipe Rebelo Lourenço / Banca: Jacqueline Nakau Mendonça / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Tais Maria Bauab / Resumo: As infecções são a segunda maior causa de mortalidade mundial e diversos são os motivos que justificam a necessidade de novos estudos de agentes antimicrobianos. A cefadroxila é um antimicrobiano β-lactâmico pertencente ao grupo das cefalosporinas de primeira geração, sendo muito prescrita para tratamentos de infecções causadas principalmente por bactérias Gram-positivas. A realização de estudos relacionados ao controle de qualidade é imprescindível aos setores industriais, pois garantem as características dos medicamentos e a segurança e saúde dos pacientes. De acordo com esta importância, o objetivo do trabalho foi desenvolver e validar métodos analíticos físico-químicos e microbiológico para a identificação e quantificação da cefadroxila monoidratada cápsulas, além de desenvolver um modelo de triagem rápido para obtenção de polimorfos da cefadroxila, o qual permitiu caracterizar as diferentes formas obtidas e compará-las com a forma comercial monoidratada, tanto em aspectos físico-químicos como solubilidade e estabilidade, quanto em atividade antimicrobiana. Os métodos desenvolvidos e validados foram espectrofotometria na região do infravermelho médio, cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), espectrofotometria na região do visível e ensaio microbiológico turbidimétrico, baseados na química verde e estando seus resultados em concordância com guias do ICH e legislação brasileira. No estudo de polimorfos, foram obtidas quatro diferentes formas a partir da cefadroxila... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Infections are the second largest cause of worldwide mortality and several reasons for the need of new studies of antimicrobial agents. Cefadroxil is a β-lactam antimicrobial that belongs to the first-generation cephalosporin group and is highly prescribed for treatment of infections caused mainly by Gram-positive bacteria. The studies performance is related to quality control is essential for the industrial sectors, as they will guarantee the characteristics of the medicines, the safety and health of the patients. According to this importance, the objective of the work was to develop and validate physical-chemical and microbiological analytical methods for the identification and quantification of cefadroxil monohydrate capsules, in addition to develop a rapid screening model to obtain cefadroxil polymorphs, which is allowed to characterize different forms obtained and compare them with the commercial monohydrate form, both in physical-chemical aspects as solubility and stability as in antimicrobial activity. The methods developed and validated were spectrophotometry in the medium infrared region, high performance liquid chromatography (HPLC), spectrophotometry in the visible region and turbidimetric microbiological assay. All methods based on green chemistry and their results were in agreement with ICH guides and Brazilian legislation. In the study of polymorphs, were obtained four different forms obtained from the anhydrous cefadroxil, having presented all the different for... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Estudos tem salientado que a expansão urbana, fragmentação do habitat, desmatamento e sobreposição das áreas de vida das populações humanas e silvestres tem constribuido para o surgimento de doenças emergentes e reemergentes nas últimas décadas. A paisagem da floresta amazônica vem sofrendo constantemente a dominância antropica e como resultado suas populações silvestres encontram-se cada vez mais expostas ao contato com populações humanas e domesticas com um alto risco de transmissão de agentes infecciosos. A cidade de Manaus, localizada na Amazônia Brasileira, tem afrontado um crescimento desordenado e vertiginoso devido ao seu desenvolvimento industrial causando uma alteração constante em sua paisagem; representando um modelo potencialmente útil para entender os mecanismos de transmissão de doenças. Os primatas são as espécies evolutivamente mais próximas dos humanos e essa proximidade filogenética tem facilitado o compartilhamento de diversos agentes infecciosos. O presente estudo propõe utilizar subpopulações de sauim-de-coleira (Saguinus bicolor) que ocupam os fragmentos urbanos de Manaus como espécie sentinela, para avaliar a presença de agentes infecciosos na interface-humano primata. A pesquisa objetiva também determinar se a perturbação antrópica dos locais de estudo estaria favorecendo a transmissão desses agentes. Entre os anos 2011 e 2014 um total de 55 sauins de coleira foram capturados em 9 fragmentos florestais urbanos e 1 area controle. Análises moleculares foram realizados para detectar Rotavirus A, Hantavirus, Coronavirus, Flavivirus, Enterovirus, Influenza A, Adenovirus, Metapneumovirus, Virus Sincitial Respiratório Humano, Parainfluenza 1, 2, 3, 4, Virus do Oeste de Nilo e Plasmodium spp. Os resultados indicaram uma prevalência para Hantavírus de (4/48), Rotavírus (9/48). Pela primeira vez é detectada a presença de hantavírus em primatas neotropicais. Nossos dados indicaram que a presença de infeção estaria associada com a existência de algum tipo de impacto antrópico nos locais pesquisados. Nenhum indivíduo resultou infectado na area controle. / In past decades, numerous studies have highlighted how urban expansion, habitat fragmentation, deforestation, and superposition of human and wildlife population areas contribute to surges in emergent and reemergent diseases. As a result of continuing anthropogenic disturbance in the Amazon, wildlife populations find themselves increasingly exposed to human populations and their domestic animals, bringing higher risks of transmission of a variety of infectious agents. Manaus, located in the Brazilian Amazon, represents a potentially useful model to understand the mechanisms of disease transmission. The city has undergone a disorganized and precipitous growth with ongoing industrial development, causing constant landscape alteration. Because non-human primates are closely evolutionary related to humans they share a diversity of infectious agents. The present study proposes to use subpopulations of Pied tamarins (Saguinus bicolor) occupying urban forest fragments in Manaus as a flagship species to evaluate the presence of infectious agents at the human-nonhuman primate interface. It will also assess whether anthropogenic perturbation at sites favors transmission of agents within this human dominated matrix. During the period of 2011-2014 a total of 55 pied tamarins in 9 urban forest fragments and 1 control area. Molecular analyses were performed for the detection of Rotavirus, Hantavirus, Coronavirus, Flavivirus, Enterovirus, Influenza A, Adenovirus, Metapneumovirus, Sincytial Human Respiratory virus, Parainfluenza 1, 2, 3, 4, West Nile Virus and Plasmodium spp. The results indicate prevalence for Hantavirus (n =4/48) and Rotavirus (n =9/48). This is the first record of Hantavirus in neotropical primates. Data indicate that the presence of infection in the study sites could be associated with anthropogenic impact. The control area resulted uninfected.

A sepse é uma doença de alta mortalidade e o uso adequado de antimicrobianos no seu manuseio é essencial na obtenção de melhores resultados. O objetivo deste estudo foi avaliar o consumo de antimicrobianos em pacientes com sepse hospitalar com agente etiológico identificado no sangue, comparando a reação em cadeia da polimerase (PCR) - LightCycler® SeptiFast (SF) para a detecção rápida de microorganismos à hemocultura convencional nos primeiros 14 dias de tratamento. Os objetivos secundários incluíram descrever o percentual de positividade e a concordância entre o teste molecular e a hemocultura, o tempo de internação hospitalar, os custos diretos dos antimicrobianos utilizados e a letalidade em 10 e 28 dias. Entre outubro de 2012 e maio de 2016, foram incluídos 200 pacientes adultos com sepse hospitalar: 100 alocados no grupo intervenção onde a terapia antimicrobiana foi ajustada após a identificação do micro-organismo pelo SF (dentro de 6 a 12 horas) e 100 pacientes no grupo controle onde a terapia antimicrobiana foi ajustada após a identificação do microrganismo pela hemocultura (dentro de 48 a 72 horas). O consumo de antimicrobianos foi de 1429 (1071-2000) DOT por 1000 pacientes-dia no grupo intervenção versus 1889 (1357-2563) DOT por 1000 pacientes-dia no grupo controle (p = 0.017). O SF apresentou positividade de 25,9% enquanto a positividade da hemocultura foi de 22,9% (p = 0,452). O tempo de descalonamento antimicrobiano foi de 8 horas (7-14) versus 54 horas (38-75) (p < 0,001), enquanto a mortalidade em 10 e 28 dias foi de 21% e 36,8% no grupo de intervenção versus 37% e 44% no grupo controle, (p = 0,710 e p = 0,632), respectivamente. Não houve diferença no tempo de internação hospitalar e no custo direto dos antimicrobianos utilizados nos dois grupos. A duração média da terapia antimicrobiana em dias foi menor no grupo intervenção (12 ± 5 versus 15 ± 4, p = 0,039) em comparação com o grupo controle / Sepsis is a high mortality disease. Appropriate use of antimicrobials is essential to improve outcomes. The aim of the present study was to determine whether the use of the multiplex polymerase chain reaction LightCycler® SeptiFast (SF) assay reduces the antibiotic consumption through early de-escalation in patients with nosocomial sepsis compared with conventional blood cultures (BC) in the first 14 days of treatment. Secondary outcomes included the percentage of microorganisms identified through SF and BC (in both groups), timing of antimicrobial de-escalation, length of stay, direct costs of the antimicrobial drugs and mortality at 10 and 28 days. Between October 2012 and May 2016 adult patients with nosocomial sepsis were randomized in intervention group and control group: antimicrobial therapy was adjusted following the identification of microorganisms by SF (within 6 to 12 hours) or BCs (within 48 to 72 hours), respectively. A total of 200 patients were included (100 in each group). The median antimicrobial consumption was 1429 (1071-2000) DOT/1000 patients-day in the intervention group versus 1889 (1357-2563) DOT/1000 patients-day in the control (p = 0.017). Microorganism identification was 25.9% versus 22.9% (p = 0.452), timing of antimicrobial de-escalation was 8 hours (7-14) versus 54 hours (38-75) (p < 0.001) while the mortality rate at 10 and 28 days was 21% and 36.8% in the intervention group versus 37% and 44% in the control group, (p = 0.710 and p = 0.632), respectively. There was no difference in length of stay and antimicrobial costs between groups. The mean duration of antimicrobial therapy was lower in the SF group (12 ± 5 vs. 15 ± 4, p = 0.039) comparing to BC group. The use of a rapid molecular blood test resulted in a reduction in the antimicrobial consumption and a more rapid de-escalation in patients with nosocomial sepsis when compared to the standard management of blood culture

A candidose bucal acomete grande número de pessoas mundialmente, sendo associada a condições como imunossupressão, radioterapia, tabagismo, higiene bucal, idade, xerostomia e uso de próteses removíveis. Uma importante abordagem terapêutica para essas infecções consiste nos medicamentos antifúngicos, que podem apresentar efeitos colaterais e resultar na resistência dos patógenos. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica (PDT) faz-se interessante como alternativa capaz de minimizar essas limitações. Protocolos de PDT poderão ser mais facilmente assimilados à prática clínica se empregarem materiais já aprovados para uso odontológico. Sendo assim, este estudo propõe avaliar o uso de PDT com eritrosina como fotossensibilizador, irradiada por um LED azul, usando-se um modelo animal. Quarenta camundongos tiveram candidose induzida sobre o dorso da língua por meio de imunossupressão e inoculação com Candida albicans. Após estabelecimento da lesão durante cinco dias, os animais receberam um dentre quatro tratamentos possíveis: aplicação da eritrosina 5% seguida de irradiação pelo LED (E+L+); aplicação de eritrosina, somente (E+L-); salina seguida pela irradiação (EL+); e somente salina (E-L-). A fim de distinguir possíveis efeitos colaterais, os mesmos tratamentos foram aplicados em 12 camundongos sem a indução de candidose. O número de unidades formadoras de colônia de C. albicans foi contado após o tratamento, e a mucosa foi submetida à análise histológica para determinar o grau de inflamação. Os dados dos grupos foram comparados por meio de ANOVA e teste de Kruskal-Wallis, (&alpha;=0,05). Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos testados quanto à contagem de colônias de C. albicans e o grau de inflamação. O infiltrado inflamatório foi classificado como discreto na maioria dos casos. Os animais com candidose bucal induzida e os saudáveis que foram submetidos aplicação de eritrosina 5% e irradiação pelo LED apresentaram infiltrado inflamatório mais acentuado e lesões mais evidentes na camada epitelial, sugerindo que este protocolo ocasionou danos aos tecidos orais. / Oral candidosis affects many people worldwide and is associated with conditions such as immunosuppression, radiation, smoking, oral hygiene, age, xerostomia and use of removable prostheses. An important therapeutic approach for these infections consists of antifungal drugs, which have side effects and can result in the resistance of pathogens. In this context, photodynamic therapy (PDT) is an interesting alternative able to overcome those limitations. PDT protocols can be more easily assimilated in clinical practice if they employ materials already approved for use in dentistry. Thus, this study evaluate the PDT with the use of erythrosine as a photosensitizer, irradiated by a blue LED light, using an animal model. Forty mice had candidosis induced on the tongue by the immunosuppression and inoculation with Candida albicans. After five days that the lesion is established, the animals received one of four possible treatments: application of 5% erythrosine and irradiation by the LED (E+L+); erythrosine application, only (E+L- ); saline followed by irradiation (E-L+); and only saline (E-L-). In order to distinguish potential side effects, the same treatments were applied in 12 mice without induced candidosis. Colony-forming units (CFU) of C. albicans were counted after treatment, and the mucosa was subjected to histological analysis to determine the degree of inflammation. The data of the groups were compared using ANOVA and Kruskal-Wallis test (&alpha;=0.05). No significant difference was detected among the groups tested for the number of CFU of C. albicans and the degree of inflammation. The inflammatory infiltrate was classified as mild in most cases. Animals with induced oral candidosis and the healthy ones exhibited more pronounced inflammatory infiltrate and lesions in the epithelial layer following PDT by 5% erythrosine and irradiation by the LED light. Such findings suggest that this protocol resulted in damage to oral tissues.

Ecstasy é o nome popular do 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA), uma droga de abuso muito utilizada por adultos jovens. Diferentes relatos de caso têm mostrado correlações positivas entre o abuso do Ecstasy e doenças infecciosas. Muitos estudos em modelos animais mostraram que o MDMA induz alterações de imunidade inata e adquirida; entretanto pouco se sabe sobre os mecanismos pelos quais estes efeitos ocorrem. Buscamos neste trabalho por efeitos da administração i.p. de MDMA sobre parâmetros comportamentais, neuroendócrinos e de atividade de neutrófilos e o fizemos à luz de mecanismos neuroimunomodulatórios. Nossos resultados mostraram que o MDMA (5,0; 8,0; 10,0 e 20,0 mg/kg) produz, 30 minutos após a administração (1) aumento da atividade locomotora avaliada no campo aberto e no LCE e (2) diminuição do burst oxidativo de neutrófilos após indução por Staphylococcus aureus nas doses de 8,0; 10,0 e 20,0 mg/kg. Adicionalmente, 60 minutos após a administração de 10,0 mg/kg observou-se (3) um aumento de atividade locomotora avaliada no campo aberto e no LCE, (4) aumento do turnover de noradrenalina e de dopamina no hipotálamo; (5) aumento do turnover de dopamina no estriato; (6) aumento dos níveis séricos de corticosterona; (7) diminuição do burst oxidativo após indução por SAPI e PMA e, também, da porcentagem e da intensidade de fagocitose por neutrófilos sanguíneos; (8) aumento do número de eritrócitos, da quantidade de hemoglobina e da porcentagem do hematócrito e diminuição do número de linfócitos sanguíneos; (9) diminuição do número total de células na medula óssea; (10) aumento do número de leucócitos e (11) diminuição do peso relativo do baço. A exposição in vitro ao MDMA (12) não alterou o burst oxidativo e a fagocitose por neutrófilos. Esses resultados sugerem que o MDMA produz ao mesmo tempo alterações comportamentais, neuroquímicas, endócrinas e imunológicas em camundongos. A estimulação motora dos animais parece relacionada a um aumento da atividade catecolaminérgica central e, muito especialmente, do sistema dopaminérgico estriatal. É possível sugerir que a alteração na imunidade inata após MDMA esteja relacionada ao aumento de atividade do eixo HHA e, conseqüentemente, dos níveis séricos de corticosterona. Não se descarta, porém, uma possível ativação do SNAS induzida pelo MDMA. Finalmente, observamos que o MDMA não tem efeito direto sobre neutrófilos. / Ecstasy is the popular name of N-metil-3,4 methylenedioxymethamphetamine (MDMA), a drug of abuse widely used by young adults. Different case reports have been demonstrating the existence of a positive correlation between Ecstasy abuse and the presence of infectious disease. Many studies conducted in animal models showed that MDMA reduces innate and adaptative immunity. However, little is known about the mechanisms behind these reported effects. In this work we searched for effects of i.p. MDMA administration on behavioral, neuroendocrines, and neutrophil activity in mice, especially parameters looking for neuroimmune relationships. We showed that MDMA treatment (5,0; 8,0; 10,0; and 20,0 mg/kg) produces after 30 minutes (1) increased locomotor activity in the open field and plus maze apparatuses, (2) decreased neutrophil oxidative burst after Staphylococcus aureus (SAPI) after in vitro induction 8,0, 10,0, and 20,0 mg/kg doses. Additionally, 60 minutes after MDMA (10,0 mg/kg) we observed (3) increased locomotor activity in the open field and plus maze apparatuses, (4) increased noradrenaline and dopamine turnover in the hypothalamus, (5) increased dopamine turnover in the striatum, (6) increased level of serum corticosterone, (7) decreased neutrophil oxidative burst after SAPI and PMA inductions, and also decreased percentage and intensity of neutrophil phagocitosis, (8) increased erythrocyte number, hemoglobin level, and hematocrit, and decreased peripheral blood Iymphocyte number, (9) decreased bane marrow total cell number, (10) increased leucocyte number on spleen and (11) splenic weight reduction. It was also observed that (12) in vitro exposure to MDMA induced no effects on both neutrophil oxidative burst and phagocytosis. These results suggest that MDMA produces at the same time behavioral, neurochemical, endocrine, and immunological alterations in mice. The increased locomotor activity observed seems to be related to an action on central catecholaminergic activity, mainly, at the level of the dopaminergic striatal system. It is also possible to suggest that the observed innate immunity alterations are related to an increased HPA axis activity induced by MDMA, via corticosterone. However, we cannot discharge a possible SNS activation induced by MDMA, a fact that could have contributed to the present reported effects. Finally, and importantly we observed that in vitro MDMA has no effects on neutrophil activity.

A candidose bucal acomete grande número de pessoas mundialmente, sendo associada a condições como imunossupressão, radioterapia, tabagismo, higiene bucal, idade, xerostomia e uso de próteses removíveis. Uma importante abordagem terapêutica para essas infecções consiste nos medicamentos antifúngicos, que podem apresentar efeitos colaterais e resultar na resistência dos patógenos. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica (PDT) faz-se interessante como alternativa capaz de minimizar essas limitações. Protocolos de PDT poderão ser mais facilmente assimilados à prática clínica se empregarem materiais já aprovados para uso odontológico. Sendo assim, este estudo propõe avaliar o uso de PDT com eritrosina como fotossensibilizador, irradiada por um LED azul, usando-se um modelo animal. Quarenta camundongos tiveram candidose induzida sobre o dorso da língua por meio de imunossupressão e inoculação com Candida albicans. Após estabelecimento da lesão durante cinco dias, os animais receberam um dentre quatro tratamentos possíveis: aplicação da eritrosina 5% seguida de irradiação pelo LED (E+L+); aplicação de eritrosina, somente (E+L-); salina seguida pela irradiação (EL+); e somente salina (E-L-). A fim de distinguir possíveis efeitos colaterais, os mesmos tratamentos foram aplicados em 12 camundongos sem a indução de candidose. O número de unidades formadoras de colônia de C. albicans foi contado após o tratamento, e a mucosa foi submetida à análise histológica para determinar o grau de inflamação. Os dados dos grupos foram comparados por meio de ANOVA e teste de Kruskal-Wallis, (&alpha;=0,05). Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos testados quanto à contagem de colônias de C. albicans e o grau de inflamação. O infiltrado inflamatório foi classificado como discreto na maioria dos casos. Os animais com candidose bucal induzida e os saudáveis que foram submetidos aplicação de eritrosina 5% e irradiação pelo LED apresentaram infiltrado inflamatório mais acentuado e lesões mais evidentes na camada epitelial, sugerindo que este protocolo ocasionou danos aos tecidos orais. / Oral candidosis affects many people worldwide and is associated with conditions such as immunosuppression, radiation, smoking, oral hygiene, age, xerostomia and use of removable prostheses. An important therapeutic approach for these infections consists of antifungal drugs, which have side effects and can result in the resistance of pathogens. In this context, photodynamic therapy (PDT) is an interesting alternative able to overcome those limitations. PDT protocols can be more easily assimilated in clinical practice if they employ materials already approved for use in dentistry. Thus, this study evaluate the PDT with the use of erythrosine as a photosensitizer, irradiated by a blue LED light, using an animal model. Forty mice had candidosis induced on the tongue by the immunosuppression and inoculation with Candida albicans. After five days that the lesion is established, the animals received one of four possible treatments: application of 5% erythrosine and irradiation by the LED (E+L+); erythrosine application, only (E+L- ); saline followed by irradiation (E-L+); and only saline (E-L-). In order to distinguish potential side effects, the same treatments were applied in 12 mice without induced candidosis. Colony-forming units (CFU) of C. albicans were counted after treatment, and the mucosa was subjected to histological analysis to determine the degree of inflammation. The data of the groups were compared using ANOVA and Kruskal-Wallis test (&alpha;=0.05). No significant difference was detected among the groups tested for the number of CFU of C. albicans and the degree of inflammation. The inflammatory infiltrate was classified as mild in most cases. Animals with induced oral candidosis and the healthy ones exhibited more pronounced inflammatory infiltrate and lesions in the epithelial layer following PDT by 5% erythrosine and irradiation by the LED light. Such findings suggest that this protocol resulted in damage to oral tissues.

As espécies da família Annonaceae são amplamente utilizadas na medicina popular para diversos fins terapêuticos. Pesquisas têm demonstrado que o marolo (Annona crassiflora Mart.) contém muitas classes de fitoquímicos biologicamente ativos. Neste contexto, este estudo teve por objetivo realizar as análises fitoquímicas e avaliar as atividades antimicrobianas, leishmanicidas, antioxidantes e antidiabéticas do extrato hidroetanólico 70% (v/v), das frações hidroetanólicas e do extrato acetato de etila. A obtenção do extrato hidroetanólico 70% (v/v) ocorreu por percolação, às frações hidroetanólicas por cromatografia em coluna (Sephadex LH-20) e o extrato acetato de etila por maceração. As folhas de Annona crassiflora Mart foram o material de escolha para esse estudo. Inicialmente, realizou-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio da Cromatografia em Camada Delgada, tanto dos extratos como das frações, que permitiram a detecção de compostos como: alcaloides, flavonoides, taninos, terpenos, ácidos fenólicos e catequinas. Posteriormente, os extratos e as frações foram analisados em espectrômetro de massas, no modo full scan negativo e positivo, podendo sugerir alguns constituintes químicos, baseando-se na massa molecular e nos mecanismos de fragmentação propostos pela literatura, como os flavonoides, ácidos fenólicos, procianidinas e alcaloides. As análises químicas quantitativas demonstraram que os teores de fenóis no extrato seco hidroetanólico 70% (v/v) (262,02 ± 0,20 mg EAG/g) foram superiores à concentração obtida nas frações hidroetanólicas. Os teores de flavonoides também foram superiores no extrato hidroetanólico 70% (v/v) (27,56 ± 0,40 mg EQ/g). Nas avaliações da atividade antioxidante observou-se que o pontecial das frações hidroetanólicas demonstraram resultados mais significativos em relação ao extrato hidroetanólico e acetato de etila, sendo que a fração hidroetanólica FHsdx2: 12-17 apresentou os melhores resultados. A atividade antioxidante in vivo foi realizada pelo método da peroxidação lipídica, no homogeneizado renal e hepático, através da determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. A administração do extrato hidroetanólico 70% (v/v) reduziu a peroxidação lipídica no fígado e rins de animais tratados. A análise da atividade antimicrobiana revelou que o extrato hidroetanólico 70% (v/v) teve menores valores de concentração inibitória mínima (MIC) obtidos para Candida albicans (7,81 µg.mL-1), Candida tropicali (15,62 µg.mL-1), Candida glabrata (3,90 µg.mL-1) e Candida parapsilosis (7,81 µg.mL-1). A Candida krusei foi mais susceptível a fração hidroetanólica FHsdx2: 70-104, apresentando MIC de 3,90 µg.mL-1. Para avaliar o possível efeito da espécie Annona crassiflora em ratos diabéticos, determinou-se os níveis glicêmicos, as concentrações de frutosamina, uréia, creatinina, ASL e ALT em amostras de soro de animais tratados com 300 mg/kg do extrato hidroetanólico 70% (v/v). Essas análises bioquímicas foram realizadas em aparelho automatizado Humanstar 80. Com base nos resultados obtidos, pode-se avaliar que o a administração do extrato, conforme o protocolo adotado, não alterou os parâmetros bioquímicos analisados no soro de ratos normais e diabéticos. A atividade leishmanicida foi realizada utilizando placas de 96 poços. Na atividade leishmanicida, o extrato acetato de etila apresentou-se ativo contra as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis com IC50 respectivamente de 4,35 µg.mL-1 e 42,50 µg.mL-1. Utilizou-se o método colorimétrico MTT para avaliação da citotoxicidade do extrato acetato de etila frente aos macrófagos peritoniais de ratos Wistar. Os resultados mostraram redução de 86 % dos macrófagos. Por fim, os resultados obtidos podem fornecer informações relevantes, não somente para os estudos relacionados à prevenção e/ou tratamento de patologias associadas ao estresse oxidativo, leshmanioses e antimicrobianas, como também para assegurar o consumo racional de plantas medicinais. / The species of Annonaceae family are broadly used in popular medicine for several therapeutic purposes. In this context, this study aimed to perform chemical analysis and evaluate the antimicrobial, leishmanicidal, antioxidant and anti-diabetic activiteis of hydroethanolic extract 70% (v/v), of hydroethanolic fractions and extract ethyl acetate. A obtaining of extract hydroethanolic 70% (v/v) by percolation, of hydroethanolic fractions obtained by chromatography (Sephadex LH-20) and of ethyl acetate extract by maceration. The leaves of Annona crassiflora Mart. were material of choice for this study. Initially, the phytochemical’s screening preliminary was performed by Thin Layer Chromatography, thus the extracts as fractions, it allowing the detection of compounds such as: alkaloids, flavonoids, tannins, terpenes, phenolic acids and catechins. Subsequently, the extracts and fractions was analyzed in mass spectrometer, in full scan mode negative and positive, some chemical constituents can been suggest, based in molecular mass and fragmentation mechanisms proposed in the literature such as flavonoids, phenolic acids, procyanidins and alkaloids. Quantitative chemical analyses have showed that phenol contents in the dry extract hydroethanolic 70% (v/v) (262.02 ± 0.20 mg GAE/g) was higher than the concentration obtained in hydroethanolic fractions. The flavonoid levels were also higher in hydroethanolic extract 70% (v/v) (27.56 ± 0.40 mg EQ/g). it was observed in the evaluations of antioxidant activity that the pontecial the hydroethanolic fractions and ethyl acetate showed results more significant in regarding the hydroethanolic extract, where in the fractions hydroethanolic FHsdx2: 12-17 showed the best results. The antioxidant activity in vivo was realized by the method of lipid peroxidation, in kidney and liver homogenized, through determination of reactive substances to thiobarbituric acid. The administration of the hydroethanolic extract 70% (v/v) reduced the lipid peroxidation in liver and kidneys of animals treated. The analysis of antimicrobial activity revealed that the hydroethanolic extract 70% (v/v) had lower values of the minimum inhibitory concentration (MIC) obtained for Candida albicans (7.81 µg.mL-1), Candida tropicalis (15.62 µg.mL-1), Candida glabrata (3.90 µg.mL-1) and Candida parapsilosis (7.81 µg.mL-1). Candida krusei was more susceptible to hydroethanolic fraction FHsdx2: 70-104, with MIC of 3.90 µg.mL-1. To evaluate the possible effect of Annona crassiflora Mart. species, in diabetic rats, blood glucose levels, concentrations of fructosamine, urea, creatinine, ASL and ALT was determined in serum samples from animals treated with 300mg/kg of hydroethanolic extract 70 % (v/v) of the sheets. These biochemical analyzes was performed by automated apparatus Humanstar 80. Based on the results obtained in this study, the administration of the extract could be evaluated, as the protocol adopted, don’t change the biochemical parameters analyzed in the serum of normal and diabetic rats. The antileishmanial activity was performed using 96-well plates. In leishmanicidal activity, the ethyl acetate extract up showed active against Leishmania amazonensis promastigotes and amastigotes forms with IC50 respectively 4.35 µg.mL-1 and 42.50 µg.mL-1. We used the method colorimetric MTT for evaluating the cytotoxicity of the ethyl acetate extract front of peritoneal macrophages from Wistar rats. The results showed a reduction of 86% of macrophages. Finally, the results can provide relevant information, not only for studies related to the prevention and/or treatment of diseases associated with oxidative stress, leishmaniasis and diseases caused by yeast, as well to human ensure and rational use of medicinal plants. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: Mara Corrêa Lelles Nogueira / Banca: Alessandra Vidotto / Banca: Fátima Pereira de Souza / Resumo: Acinetobacter baumannii é frequentemente encontrado em infecções hospitalares, ocasionando pneumonia associada à ventilação, bacteremia, infecções de trato urinário e meningite secundária. Nos últimos anos, o uso extensivo de antimicrobianos em hospitais contribuiu para o aumento e emergência de cepas resistentes, incluindo os carbapenêmicos, os principais recomendados no tratamento. Assim, os aminoglicosídeos ganham importância como opção terapêutica. A resistência a estes antimicrobianos é decorrente, principalmente, da produção de enzimas modificadoras de aminoglicosídeos (AMEs) e de enzimas 16S rRNA Metilases. No Brasil, informações sobre o perfil de suscetibilidade e genes que codificam estas enzimas são escassas. Assim, é fundamental a identificação de mecanismos de resistência e reservatórios potenciais, bem como realizar comparação de isolados para controlar a disseminação de A. baumannii no ambiente hospitalar. O presente estudo teve como objetivos avaliar e comparar o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos, genes de enzimas modificadoras de aminoglicosídeos (AMEs), genes de enzimas 16S rRNA Metilases e similaridade genética entre isolados de A. baumannii com importância clínica no Hospital de Base (HB) de São José do Rio Preto, SP. Além disso, estes resultados foram comparados com um estudo anterior realizado no mesmo hospital. Foram avaliados 32 isolados coletados no período entre dezembro de 2013 a maio de 2014. A identificação da espécie foi realizada por metodologias automatizadas e confirmada por Duplex-PCR. Os testes de suscetibilidade aos antimicrobianos foram resultantes de teste automatizado de microdiluição e disco-difusão, para aminoglicosídeos Amicacina (AK), Gentamicina (CN), Tobramicina (TOB) e Canamicina (CAN), de acordo com o CLSI, 2014 e FDA, 2013. Primers específicos e PCRmultiplex foram usados para a detecção dos genes... / Abstract: Acinetobacter baumannii is found in nosocomial infections, causing ventilator-associated pneumonia, bacteremia, urinary tract infections and secondary meningitis. In recent years, the extensive use of antibiotics in hospitals has contributed to the rise and emergence of A. baumannii strains resistant to a wide range of antimicrobials, including carbapenems, main antibiotics recommended on treatment. In this context, aminoglycosides gain importance as therapeutic options. Resistance to aminoglycosides is mainly due to the Aminoglycoside Modifying Enzymes (AMEs) and 16S rRNA Methylases production. In Brazil, high infection rates to carbapenem-resistant A. baumannii are observated, however information about aminoglycoside susceptibility profile and occurance of this genes are scarce. Thus, it is essential to identify resistance mechanisms and potential reservoirs, as well as perform comparison of isolates to control the spread of A. baumannii in the hospital environment. This study aimed to evaluate and compare the antimicrobial susceptibility profile, genes of aminoglycoside modifying enzymes and 16S rRNA Methylases and genetic similarity among A. baumannii isolates with clinical importance at Hospital de Base (HB) in São José do Rio Preto, SP. Additionally, the results were compared to another previous study achieved in the same hospital. 32 isolates collected between December 2013 and May 2014 were evaluated. Specie identification was performed using automated methodology and confirmed by Duplex- PCR. The susceptibility tests were the result of automated and disc-diffusion tests - for aminoglycosides Amikacin (AK), Gentamicin (CN), Tobramycin (TOB) and Kanamycin (K) - according to CLSI, 2014 and FDA, 2013. Specific primers and Multiplex-PCR were used in AMEs' and 16S rRNA Methylases' genes detection and primers REP1-REP2 were used in molecular typing by REP-PCR. All the isolates of this study... / Mestre

Orientador: Ary Fernandes Júnior / Banca: Rosemeire Cristina Linhares Rodrigues Pietro / Banca: Maria de Lourdes Ribeiro da Cunha / Resumo: A propriedade antimicrobiana das plantas pode ser explicada pela produção de compostos ativos gerados durante o metabolismo secundário. Atualmente os conhecimentos, as vezes empíricos, desta propriedade têm sido confirmados cientificamente, revelando assim o enorme potencial das plantas no controle de doenças infecciosas, enquanto verifica-se um aumento nos casos de microrganismos patogênicos resistentes aos antimicrobianos conhecidos. Extratos e óleos essenciais de plantas têm mostrado efeitos sobre desenvolvimento de microrganismos em inúmeras situações, o que sugere uso prático destes produtos. O estudo teve por objetivo comparar a ação inibidora de extratos e óleos essenciais de quatro plantas (pitanga - Eugenia uniflora, Alecrim do Campo - Baccharis dracunculifo/ia, Camomila - Matricaria chamomilla e Assa Peixe - Vernonia polyanthes) sobre linhagens de Staphylococcus aureus e Escherichia coli, através da diluição dos antimicrobianos vegetais em meio Mueller Hinton Agar e verificação dos valores de Concentração Inibitória Mínima (CIM). De maneira geral verificou-se efeito antimicrobiano para todos os produtos vegetais, com uma discreta tendência de maior susceptibilidade para a bactéria Gram positiva. Os resultados apontam os extratos de pitanga e assa peixe como os mais efetivos sobre S.aureus e E.co/i. Em relação aos óleos, os óleos de alecrim do campo e pitanga foram os mais eficientes sobre s.aureus. Para E.coli, evidenciou-se os óleos de assa peixe e alecrim do campo como os mais eficientes. Em uma segunda etapa do estudo verificou-se possíveis interações entre estes derivados vegetais com drogas antimicrobianas utilizando metodologia dos discos, adaptado de Kirby&Bauer e através da determinação de curvas de sobrevivência utilizando misturas entre as drogas convencionais e antimicrobianos vegetais. Foi verificado nos testes in vitro uma taxa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The antimicrobial property of plants can be explained by the production of active compounds generated during the secondary metabolismo Currently the knowledge, often empirical, of this property has been confirmed scientifically, thus revealing the potential of plants in the control of infectious diseases, while there is an increasing incidence of pathogens resistant to known antibiotics. Extracts and essential oils of plants have shown effects on development of micro-organisms in many situations, suggesting the practical use of these produets. The study aimed to compare the inhibitory action of extracts and essential oils of four plants (Surinam Cherry - Eugenia uniflora, "Alecrim do Campo" - Baccharis dracunculifolia, Chamomile - Matricaria chamomilla and "Assa Peixe" - Vernonia polyanthes) on strains of Staphylococcus aureus and Escherichia coli, through dilution of plant antimicrobials in Mueller Hinton Agar and the minimal inhibitory concentration (MIe) values were performed. In general it was found antimicrobial effectiveness for alI plant products, with a slight tendency for increased susceptibility to Gram positive bacteria. The results show the extracts of Surinam cherry and "assa peixe" as the most effective on S. aureus and E.coli. For waste oils, "aleCrim do campo" and Surinam cherry were the most effeetive on S. aureus. For E.coli, there was the oils of "alecrim do campo" and "assa peixe" as the most efficient. In a second step ofthe present study, possible interactions between these plant derivatives from antimicrobial drugs using discs methodology adapted from Kirby & Bauer and by determining the survival curves using mixtures of conventional drugs and antimicrobial plant. It was observed in vitro tests a higher rate of synergism between drugs and essential oils, and essential oils of "alecrim do campo" and "assa peixe" showed a higher frequency of synergism with drugs... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre