Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Os efeitos locais provocados por venenos botrÃpicos sÃo caracterizados por edema, hemorragia e dor local. No entanto, os mecanismos fisiopatolÃgicos relacionados a esses venenos podem variar de acordo com a espÃcie. Esta caracterÃstica espÃcie-especÃfica pode prejudicar a eficÃcia da soroterapia. Desta forma, considerando a diversidade da resposta fisiopatolÃgica dos venenos, investigamos os mecanismos e mediadores envolvidos na resposta inflamatÃria local induzida pelo veneno da Bothrops jararacussu (VBjsu). Camundongos Swiss fÃmeas foram submetidos à injeÃÃo intraplantar de soluÃÃo salina ou VBjsu (0,125-8 Âg/pata). Para o estudo dos mecanismos e mediadores envolvidos, diferentes sub-grupos de animais foram submetidas ao prÃ-tratamento com loratadina (um antagonista do receptor H1), composto 48/80 (para induzir a depleÃÃo dos mastÃcitos), capsaicina (para promover a dessensibilizaÃÃo das fibras C), infliximabe (um anticorpo anti-TNF-&#945;), indometacina (um inibidor nÃo-especÃfico da COX), celecoxibe (um inibidor seletivo da COX-2) ou fucoidina (um modulador de P- e L-selectinas) administrados antes do VBjsu. O edema da pata foi medido por pletismografia. AlÃm disso, os tecidos da pata foram recolhidos para determinaÃÃo da atividade da mieloperoxidase (MPO), dosagem dos nÃveis de TNF-&#945;, IL-1 e da imunoexpressÃo da COX-2. O efeito quimiotÃtico direto do VBjsu tambÃm foi estudado por meio do ensaio da cÃmara de Boyden, e o estado de ativaÃÃo dos neutrÃfilos humanos foi avaliado atravÃs da dinÃmica intracelular de cÃlcio em neutrÃfilos realizado in vitro com auxilio da microscopia confocal. O VBjsu causou uma resposta edematogÃnica concentraÃÃo e tempo dependentes com aumento da produÃÃo local de TNF-&#945;, IL-1&#946; e da imunoexpressÃo da COX-2 nos tecidos quando comparado ao grupo salina (P<0,05). Ambos, edema e migraÃÃo de neutrÃfilos foram impedidos pelos inibidores da COX (indometacina ou celecoxibe), ou pelo modulador de P - e L-selectinas (fucoidina) vs. VBjsu (P<0,05). O exame histopatolÃgico revelou que o VBjsu induz uma precoce migraÃÃo de neutrÃfilos para o local da lesÃo vs. o grupo salina (P<0,05). AlÃm disso, o VBjsu induz a quimiotaxia e ativa neutrÃfilos in vitro aumentando diretamente a dinÃmica de cÃlcio intracelular quando comparado ao RPMI (P<0,05). Portanto, o VBjsu induz uma resposta edematogÃnica precoce dependente da produÃÃo de prostanoides e da migraÃÃo de neutrÃfilos. / Local tissue reactions provoked by Bothrops venoms are characterized by edema, hemorrhage, pain, and inflammation; however, the mechanisms of tissue damage vary depending upon the species of snake. This mechanistic variability reduces the efficacy of antivenom treatment. Considering the diversity of intraspecific pathophysiological responses, we investigated the mechanisms and mediators involved in the local inflammatory response induced by the Bothrops jararacussu venom (VBjsu). Female Swiss mice were injected with either saline or VBjsu (0.125-8 Âg/paw). In a subset of VBjsu-treated mice, loratadine (an H1 receptor antagonist), compound 48/80 (for mast cell depletion), capsaicin (for C-fiber desensitization), infliximab (an anti-TNF-&#945; antibody), indomethacin (a non-specific COX inhibitor), celecoxib (a selective COX-2 inhibitor) or fucoidan (a P- and L-selectins modulator) were administered before VBjsu treatment. Paw edema was measured by plethysmography. In addition, paw tissues were collected for the measurement of myeloperoxidase (MPO) activity, TNF-&#945; and IL-1 levels, and COX-2 immunoexpression. The direct chemotactic effect of VBjsu was also studied using a Boyden chamber assay, and the in vitro calcium dynamic in neutrophils was investigated using confocal microscopy. VBjsu caused concentration- and time-dependent edematogenic responses and increased the local production of TNF-&#945; and IL-1&#946; as well as COX-2 expression vs. saline group (P<0.05). Both edema and neutrophil migration were prevented by pretreatment with cyclooxygenase inhibitors (indomethacin or celecoxib) or by the P- and L-selectins modulator, fucoidan vs. VBjsu (P<0.05). Furthermore, VBjsu induced a direct in vitro neutrophil chemotaxis by increasing intracellular calcium vs. RPMI (P<0.05). Therefore, VBjsu induces an early onset edema dependent upon prostanoid production and neutrophil migration.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Calotropis procera à uma planta laticÃfera pertencente à famÃlia Apocynaceae, encontrada na Ãsia, Ãfrica e AmÃrica do Sul. Seu lÃtex à constituÃdo por um grande nÃmero de molÃculas bioativas que apresentam relevantes propriedades farmacolÃgicas que inclui anti- e prÃ-inflamatÃria, antitumoral, cicatrizante, antimicrobiana, entre outras. As proteÃnas extraÃdas deste lÃtex possuem mÃltiplos efeitos imunomodulatÃrios, dependendo da via de administraÃÃo utilizada. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a resposta prÃ-inflamatÃria da fraÃÃo proteica (PL) do lÃtex de Calotropis procera nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea; investigando a quimiotaxia de neutrÃfilos (in vivo e in vitro); o papel das cÃlulas residentes e os mediadores envolvidos. Foram utilizados camundongos Swiss (25-30 g). Verificou-se que PL induziu migraÃÃo de neutrÃfilos (MN) de forma dose-e-tempo dependente nos modelos de peritonite e bolsa de ar subcutÃnea. Foi demonstrado um aumento na permeabilidade vascular induzido pela administraÃÃo da PL (1 mg/cav) na cavidade peritoneal no modelo de Azul de Evans. O aumento na populaÃÃo de macrÃfagos residentes pelo prÃ-tratamento com tioglicolato, intensificou a MN induzida por PL, sendo observado um resultado semelhante com o grupo depletado de mastÃcitos pelo composto 48/80. Os mastÃcitos parecem exercer um papel modulador inibitÃrio sobre a quimiotaxia de neutrÃfilos, enquanto os macrÃfagos potencializam a MN, possivelmente por meio da liberaÃÃo de mediadores. Para investigaÃÃo dos mediadores envolvidos foram utilizados fÃrmacos bloqueadores especÃficos antes da administraÃÃo da PL. A modulaÃÃo farmacolÃgica com Dexametasona (0,5 mg/kg, s.c.), Pentoxifilina (100 mg/kg, s.c.), Talidomida (50 mg/kg, s.c.), Indometacina (3 mg/kg, s.c.) e Celecoxib (30 mg/kg, s.c.), mas nÃo com Meclizina (40 mg/kg, s.c.) e PCA (10 mg/kg; s.c.), inibiram a MN induzida por PL. Foi verificado por ELISA que os nÃveis dos mediadores IL-1 e IL-6 estavam aumentados no fluido peritoneal 4 h apÃs a administraÃÃo de PL (1 mg/cav, i.p.). Os nÃveis de nitrito tambÃm estavam aumentados no fluido da bolsa de ar subcutÃnea, demonstrando um envolvimento do Ãxido nÃtrico (NO) no efeito prÃ-inflamatÃrio da PL. A PL induziu rolamento e adesÃo de leucÃcitos ao endotÃlio vascular do mesentÃrio de camundongos, bem como quimiotaxia de neutrÃfilos in vitro. AlÃm disso, foi capaz de interagir diretamente com neutrÃfilos, induzindo a sÃntese dos mediadores prÃ-inflamatÃrios TNF-&#945;, IL-1&#946;, PGE2 e NO em cultura de neutrÃfilos. Em conclusÃo, PL induz uma resposta inflamatÃria aguda, caracterizada pela intensa migraÃÃo de neutrÃfilos e aumento da permeabilidade vascular. Promove quimiotaxia para neutrÃfilos de forma indireta, via macrÃfagos residentes, e de forma direta, interagindo com neutrÃfilos, induzindo rolamento e adesÃo no endotÃlio e liberaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrios. / Calotropis procera is a laticiferous plant belonging to the family Apocynaceae, found in Asia, Africa and South America. Its latex is comprised of a large number of bioactive molecules that show significant pharmacological properties including anti- and pro- inflammatory, antitumor, healing, antimicrobial, among others. The proteins extracted from this latex have multiple immunomodulatory effects, depending on the route of administration utilized. The objective of this study was to characterize the pro- inflammatory response of protein fraction PL latex Calotropis procera in models of peritonitis and subcutaneous air pouch; neutrophil chemotaxis (in vivo and in vitro); the role of resident cells and mediators involved. Swiss mice were used (25-30 g). It was found that PL induced neutrophil migration (MN) in a dose- and time - dependent in models of peritonitis and subcutaneous air pouch. An increase in vascular permeability induced by the administration of PL (1 mg / cav) in the peritoneal cavity in the Evans blue model was demonstrated. The increase in the population of resident macrophages after pre-treatment with thioglycolate intensified the MN induced by PL, with the similar result observed with the mast cell -depleted group by compound 48/80. Mast cells appear to exert an inhibitory modulatory role on neutrophil chemotaxis, whereas macrophages potentiate the MN, possibly through the release of mediators. For investigation of involved mediators, blocking drugs were used before administration of the PL. Pharmacological modulation Dexamethasone (0.5 mg/kg , s.c.), Pentoxifylline (100 mg/kg , s.c.), Thalidomide (50 mg/kg , s.c.), Indomethacin (3 mg/kg , s.c.) and Celecoxib (30 mg/kg , s.c.), but not with Meclizine (40 mg/kg , s.c.) and PCA (10 mg/kg, s.c.) inhibited the MN induced by PL. It was verified by ELISA, that levels of mediators IL-1 and IL-6 were elevated in the peritoneal fluid 4 hours after administration of PL (1 mg/cav, i.p.). The nitrite levels were also higher in the subcutaneous air pouch fluid, demonstrating the involvement of nitric oxide (NO) in the pro-inflammatory effects of LP. PL induced rolling and adhesion of leukocytes to the vascular endothelium of mesenteric mice and neutrophil chemotaxis in vitro. Furthermore, it can directly interact with neutrophils by inducing the synthesis of pro-inflammatory mediators TNF-&#945;, IL- 1&#946;, PGE2 and NO in neutrophilâs culture. In conclusion, PL induces an acute inflammatory response characterized by intense neutrophil migration and increase of vascular permeability. Promotes neutrophil chemotaxis indirectly, via resident macrophages and directly interacting with neutrophils, inducing rolling and adhesion to the endothelium and release of pro-inflammatory mediators.

Orientador: Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T04:13:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camargo_EniltonAparecido_D.pdf: 1739135 bytes, checksum: faa68531f796834af8491c48ada0ccc0 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A pancreatite aguda e uma doença inflamatória do pâncreas caracterizada por intensa necrose pancreática e efeitos sistêmicos secundários como lesão pulmonar, os quais são a principal causa da mortalidade observada nessa doença. Ha evidencia de que as fosfolipases A2 (PLA2) tem um importante papel na fisiopatologia da pancreatite aguda. O objetivo deste trabalho foi investigar a capacidade de PLA2s de induzir pancreatite em ratos e os mecanismos envolvidos nesse fenômeno. As seguintes PLA2s foram utilizadas: piratoxina-I (homologo Lys-49 de PLA2 desprovido de atividade catalitica), bothropstoxina-II (homologo Asp-49 de PLA2 com baixa atividade catalítica) e a PLA2 proveniente do veneno de Naja moçambique moçambique (que possui alta atividade catalítica). Ratos Wistar machos (200-250 g) provenientes do CEMIB/UNICAMP foram utilizados. As PLA2s foram injetadas no ducto biliopancreatico de animais anestesiados e apos diferentes tempos experimentais foram avaliados o extravasamento de proteínas plasmáticas no pâncreas, infiltrado de neutrofilos no pâncreas e pulmão e amilase serica. A analise histológica do pâncreas e pulmão também foi realizada em alguns grupos experimentais. Piratoxina-I foi capaz de causar extravasamento de proteínas plasmáticas no pâncreas, infiltrado de neutrofilos no pulmão e os níveis sericos de amilase. Alem disso, a piratoxina-I causou alterações histológicas nos tecidos pancreático (infiltrado de neutrofilos, necrose de células acinares e edema intersticial) e pulmonar (edema intersticial e diminuição do espaço alveolar), que foram mais evidentes nos tempos iniciais da pancreatite (4-12h). Bothropstoxina-II e a PLA2 do veneno de Naja moçambique moçambique, a semelhança da Piratoxina-I, também foram capazes de aumentar o extravasamento de proteínas plasmáticas e o influxo de neutrofilos no tecido pancreático por mecanismos nao relacionados a sua atividade catalítica. Entretanto, o influxo de neutrofilos para o pulmão e o aumento dos níveis sericos de amilase causados por essas PLA2s foi dependente de sua atividade catalítica. As PLA2s também causaram secreção deamilase de acinos pancreáticos isolados, que foi dependente da atividade catalítica dessas enzimas. Adicionalmente, com o objetivo de entender o mecanismo envolvido na pancreatite induzida pela PLA2 de Naja mocambique mocambique animais foram tratados com os seguintes agentes farmacológicos: pentoxifilina (inibidor da sintese de TNF-á), SR140333 (antagonista de receptor NK1), icatibant (antagonista de receptor B2), L-NAME (inibidor não seletivo das NOS), aminoguanidina (inibidor preferencial da NOS induzivel), indometacina (inibidor não seletivo de COX), celecoxib (inibidor seletivo de COX-2), PCA4248 (antagonista dos receptores de PAF) e AA861 (inibidor da 5-lipoxigenase). Em conjunto, nossos dados mostraram que os efeitos locais e secundários são multimediados, envolvendo a participação de bradicinina, substancia P, NO, TNF-á, PAF e metabolitos das COXs. Em conclusão, demonstramos que as PLA2s secretorias são capazes de induzir pancreatite aguda em ratos quando injetadas no ducto biliopancreatico, um quadro caracterizado por efeitos inflamatórios locais e secundários cuja mediação farmacológica envolve vários fatores. Alem disso, a pancreatite aguda induzida pelas PLA2s reproduz algumas alterações observadas na pancreatite aguda em humanos, representando uma nova estratégia de estudo da fisiopatologia da pancreatite aguda / Abstract: Acute pancreatitis is an inflammatory disease of the pancreas that is characterized by intense pancreatic necrosis and remote systemic effects such as the lung injury that is the main cause of death during acute pancreatitis. There are evidences that phospholipases A2 (PLA2) have an important role in the acute pancreatitis pathophysiology. The aim of this work was to investigate the ability of PLA2 to induce acute pancreatitis in rats, and the mechanisms underlying this phenomenon. The following PLA2s were used: piratoxin-I (a Lys-49 PLA2 homologue devoid of catalytic activity), bothropstoxin-II (an Asp-49 PLA2 homologue with low catalytic activity) and PLA2 from Naja mocambique mocambique venom (high catalytic activity). Male Wistar rats (200-250g) provided by CEMIBUNICAMP have been used. The PLA2s were injected into the common bile duct of anesthetized rats, after which pancreatic plasma protein extravasation, pancreatic and lung neutrophil infiltration and serum levels of amylase were measured. Histology of the pancreatic and lung tissue has also been carried out in some experimental group. Piratoxin-I was able to increase the pancreatic plasma protein extravasation, lung neutrophil infiltration and serum amylase levels. In addition, Piratoxin-I caused histological changes in the pancreatic (neutrophil infiltration, areas of acinar cell necrosis and interstitial edema) and lung (interstitial edema and diminuition of alveolar space) tissues, which were more evident in the early periods (4-12h) after the injection. Bothropstoxin-II and PLA2 from Naja mocambique mocambique venom were also able to increase the plasma protein extravasation and neutrophil influx in the pancreatic tissue by mechanisms unrelated to their catalytic activity. However, the remote lung neutrophil influx caused by these PLA2s was shown to depend on their catalytic activity. The enhancement of serum amylase levels was also dependent on the catalytic activity of these enzymes. The PLA2s also caused amylase secretion from isolated pancreatic acini, which was dependent on their catalytic activity. Next, in order to further understand the mechanisms involved in pancreatitis induced by PLA2 Naja mocambique mocambique, animals were treated with the following pharmacological agents: pentoxifylline (TNF-á synthesis inhibitior), SR140333 (NK1receptor antagonist), icatibant (B2 receptor antagonist), L-NAME (non-selective NOS inhibitor), aminoguanidine (preferential inducible NOS inhibitor), indomethacin (nonselective COX inhibitor), celecoxib (selective COX-2 inhibitor), PCA4248 (PAF receptor antagonist) and AA861 (5-lipoxygenase inhibitor). Taken together our data showed that local and remote effects are multimediated, involving the participation of bradykinin, substance P, NO, TNF-á, PAF and COXs metabolites. In conclusion, we have shown that secretory PLA2s are able to induce acute pancreatitis in rats when injected into the common bile duct. Therefore, PLA2-induce acute pancreatitis reproduces some aspects of the human disorder representing a new strategy to study the pathophysiology of acute pancreatitis / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Getulio da Rocha Nogueira Filho, Francisco Humberto Nociti Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T07:19:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peruzzo_DaianeCristina_D.pdf: 1082596 bytes, checksum: 5a19d83c292b5bded4f4f59bf5a943c6 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Estudos em animais e epidemiológicos têm sugerido que o estresse pode alterar o estabelecimento e a progressão da doença periodontal (DP). Entretanto, dados relacionados ao efeito do estresse e seus mecanismos envolvidos na DP ainda são limitados. Os objetivos deste estudos foram: i) revisar sistematicamente a literatura sobre a influência do estresse crônico (EC) na DP; ii) analisar o impacto do EC induzido em ratos na progressão da DP e na regulação de genes relacionados à progressão da doença, bem como na alteração dos biomarcadores do estresse (catecolaminas e corticoesterona); iii) avaliar a viabilidade do uso da droga metirapone (MT), como um modelo experimental em ratos, para inibir a produção de glicocorticóides (GC), determinando, assim, o efeito do EC nos tecidos periodontais. Para a revisão sistemática, foi realizada uma busca na literatura e os dados dos estudos foram extraídos e avaliados por dois revisores independentes. Para os trabalhos em animais, foram realizados experimentos em ratos machos, Wistar, divididos em grupos com 20 animais cada: controle, DP induzida por ligadura, DP + EC (restrição de movimento e isolamento, 12h/dia) e DP + EC + administração de MT (3 doses/dia de 50mg/Kg). Após 30 dias todos os animais foram sacrificados. Amostras de sangue foram coletadas para mensurar os biomarcadores do EC, o tecido marginal, ao redor dos sítios com e sem ligaduras foi coletado para avaliar a expressão de genes por meio de PCRq (Reação de Polimerase em Cadeia quantitativa) e as mandíbulas foram removidas e fixadas para mensuração histométrica da perda óssea interradicular (POI). Análise dos dados demonstrou que: i) a maioria dos estudos analisados apresentaram um desfecho positivo entre EC e DP; ii) os biomarcadores do estresse, na presença de EC, podem localmente modular a DP por meio de um aumento local nas proporções dos genes pró-inflamatórios e pró-reabsorção, favorecendo, assim a destruição óssea periodontal; e, iii) a administração de MT resultou num importante efeito na redução dos níveis sistêmicos de GC, entretanto, pode-se observar que a administração da droga alterou a expressão de fatores importantes na modulação da DP e conseqüentemente refletiu nos níveis de POI. Dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que o EC significativamente apresenta uma relação com a DP e o aumento local de fatores pró-inflamatórios e pró-reabsorção pode ser o mecanismo envolvido na progressão da doença. Além disso, a administração de MT é capaz de reduzir os níveis sistêmicos de GC, entretanto, modula a expressão de fatores relacionados à progressão da DP, resultando em POI / Abstract: Animal and epidemiological studies have suggested that stress may modify the establishment and progression of periodontal disease (PD). However, data regarding the effect of stress and the mechanisms involved in PD are limited. The aim of this study was: i) to review systematically the literature about the influence of chronic stress (CS) on PD ii) to evaluate the impact of CS, induced in rats, in the progression of PD and regulation of genes related to the disease progression, as well as the variations of stress biomarkers (cathecolamines e corticoesterone); iii) to evaluate the feasibility of the use of metyrapone (MT) as an experimental model to inhibit glucocorticoid (GC) production and, therefore, as a method to determine the effect of CS on periodontal tissues. A systematic literature search was performed and the data of the studies were independently extracted and evaluated by two reviewers. The animal studies were carried out on male Wistar rats assigned to 3 groups with 20 animals each: control, PD induced by ligature; PD associated with CS (restraint stress and isolation, 12 h/day) and PD + CS + MT administration (3 daily doses, 50mg/Kg). After 30 days, all animals were sacrificed. Blood samples were obtained and the concentrations of corticosterone and catecholamines measured as biomarkers of CS, marginal tissues around ligated and non-ligated teeth were harvested and gene expression assessed by qPCR (quantitative Polymerase Chain Reaction) and the jaws were removed and fixed to histometrically determine the interradicular bone loss (IBL). Data analysis demonstrated that: i) the majority of the studies showed a positive outcome between CS and PD; ii) the stress biomarkers may locally modulate PD by an increase of the local ratio of pro-inflammatory and pro-resorptive genes, thus favoring tissue destruction; and, iii) MT administration resulted in an important lowering effect of GC systemic levels, however, it could be observed that MT administration modified the expression of important factors which modulate PD, and consequently reflected the IBL. Within the limits of this study, it may be speculated that CS has a significant relationship with PD and the local increase in pro-inflammatory and pro-resorptive factors can be the mechanisms involved in disease progression. Moreover, MT administration is able to lower systemic levels of GC, however, it modulates the expression of factors related to periodontitis progression, resulting in IBL / Doutorado / Periodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Existem evidências mostrando que diferentes tipos de contração realizadas no exercício de força, podem causar alterações distintas na hemostasia e inflamação. O exercício estimula a coagulação através do aumento do fator VIII (FVIII) e de fator von Willebrand (FvW). A atividade fibrinolítica é regulada, principalmente, pelo ativador de plasminogênio tecidual (t-PA) e pelo inibidor do ativador de plasminogênio tipo 1 (PAI-1), o aumento da atividade fibrinolítica como consequência da atividade física é atribuída ao aumento da liberação de t-PA pelo endotélio vascular e à diminuição na atividade do PAI-1. O exercício excêntrico causa maiores danos à fibra muscular e uma maior resposta inflamatória de proteína C reativa (PCR). A PCR quando aumentada desregula o balanço entre coagulação e fibrinólise devido ao aumento de PAI-1 o que aumenta o risco para formação de trombos. Participaram do estudo 11 sujeitos jovens, sedentários, com idade média de 25,4±2,8 anos, estatura 176,2±4,4 cm, massa corporal 77,1±8,7 kg, massa de gordura 32,3±5,2 kg e VO2máx 41,4±6,5 ml/kg/min-1. Na primeira semana os sujeitos realizavam três visitas ao laboratório, na primeira visita realizavam coletas de sangue pré e pós protocolo, uma contração voluntária máxima (CVM) em um protocolo de dano isocinético, na segunda e terceira visita os sujeitos realizavam apenas a coleta de sangue e a CVM. Na segunda semana após sete dias de descanso os sujeitos repetiam todos os testes da semana anterior mudando apenas o tipo de contração. Os protocolos de dano concêntrico eram decididos por sorteio no dia do teste. O protocolo excêntrico apresentou maior déficit de torque 24h (62,4±30,6 5,3 ± 29,9 Nm) e 48h pós a realização (64,3±33,6; 2,5±31,1Nm). Também existiu um aumento de PCR no excêntrico 48h pós (0,140±0,04; 0,06±0,04 mg/L) e um aumento da inibição de fibrinólise por aumento de PAI-1 48h pós quando comparados ao concêntrico (13,5±7,5; 7,3±6,7 ug/L). Além disso, foi encontrada uma correlação positiva entre PCR e PAI-1 no protocolo excêntrico 48h pós r= 0,69; p< 0,05. Concluímos com este estudo que o exercício excêntrico causa maior perda de força, maior resposta inflamatória e essa resposta inflamatória aumenta a inibição do processo fibrinolítico. / There is evidence that different types of contraction performed in the exercise of strength, can cause different changes in hemostasis and inflammation. Exercise stimulates coagulation by increasing factor VIII (FVIII) and von Willebrand factor (vWF). The fibrinolytic activity is regulated primarily by tissue plasminogen activator (t-PA) and plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1), increased fibrinolytic activity as a consequence of physical activity is attributed to increased release of t-PA by vascular endothelium and a decrease in the activity of PAI-1. The eccentric exercise causes greater damage to muscle fibers and a greater inflammatory response of c-reactive protein (CRP). PCR deregulates increased when the balance between clotting and fibrinolysis because of increased PAI-1 increases the risk for thrombus formation. The study included 11 young subjects who were sedentary, with a mean age of 25.4±2.8 years, height 176.2±4.4 cm, body mass 77.1±8.7 kg, fat mass 32.3±5.2 kg and VO2max 41.4±6.5 ml / kg / min-1. In the first week the subjects performed three visits to the laboratory, the first visit performed blood sampling before and after protocol, a maximum voluntary contraction (MVC) in a protocol of isokinetic damage in the second and third visit, the subjects performed only the blood collection and CVM. In the second week after seven days of rest subjects repeated all the tests the week before just changing the type of contraction. The damage concentric protocols were decided by lottery on test day. The protocol had higher eccentric torque deficit 24 (62.4 ± 5.3 30.6 ± 29.9 Nm) and 48 hours after the completion (64.3±33.6, 31.1±2.5 Nm). There was also an increase in PCR cam 48h post (0.140±0.04, 0.06±0.04 mg/L) and inhibiting an increase in fibrinolysis by increasing PAI-1 after 48 hours when compared to the concentric (13, 5±7.5, 7.3 ± 6.7 ug/L). Furthermore, we found a positive correlation between CRP and PAI-1 in the protocol 48h after eccentric r = 0.69, p<0.05. We conclude from this study that eccentric exercise causes greater loss of strength, a greater inflammatory response and the inflammatory response increases the inhibition of fibrinolysis.

Orientadores: Lilian Tereza Lavras Costallat, Kleber Gomes Franchini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T01:28:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soledade_CiniraSantana_D.pdf: 1680992 bytes, checksum: 98f3f468653137a8796c59f9d6297f89 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A inflamação é apontada como o principal processo mediador das diversas doenças do tecido conjuntivo e um componente importante da fisiopatologia das doenças infecciosas. Mais recentemente também tem lhe sido atribuído papel de destaque na obesidade, diabetes e doenças cardiovasculares, em especial a aterosclerose. Dentre os vários mediadores envolvidos no processo inflamatório, a adenosina tem sido apontada como um potente mediador endógeno. A adenosina é um autacóide, cuja ação se dá pela interação com quatro receptores de superfície celular (A1, A2A, A2B e A3), sendo a sua concentração modulada pelo equilíbrio entre os processos de síntese (5- nucleotidases), fosforilação (adenosina quinase), e deaminação (adenosina deaminase). A adenosina sabidamente age em múltiplos aspectos do processo inflamatório, como: apoptose, migração de leucócitos, liberação de mediadores (citocinas, quimiocinas) e mecanismos vasoregulatórios. No nível celular os efeitos da adenosina incluem várias vias de sinalização, modulando a ativação de importantes fatores de transcrição como o NF-?B. Neste contexto, a imunomodulação exercida pela adenosina tem seu potencial terapêutico reconhecido e avaliado na literatura, através do estudo de compostos que agem sobre seus receptores específicos ou através do aumento de sua concentração. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar as propriedades antiinflamatórias e mecanismos de ação de um novo composto, inibidor de adenosina quinase (6,7-dimetóxi-4-N-(3'-N,N-dimetilfenil)aminoquinazolina, DMA), cuja ação resulta no aumento da concentração tecidual de adenosina. Para isso, foram utilizados modelos de inflamação aguda em animais de experimentação e ensaios in vitro em cultura de células. No modelo de peritonite aguda induzida por thioglicolato em camundongos, o tratamento com DMA reduziu o acúmulo de neutrófilos, (?55%, p < 0,05) e esse efeito foi bloqueado por um antagonista de receptor de adenosina, a 8-sulpho-phenil- theophilina. Ainda neste modelo, houve diminuição de Interleucina-6 no exudato dos animais tratados com DMA (?35%; p < 0,005). O DMA também foi efetivo na redução da inflamação nos modelos de artrite aguda em ratos, reduzindo o volume articular (?30% na segunda hora e ?35% na quarta hora; p < 0,05), número de leucócitos no líquido sinovial (?50% ; 28,6 x 106 ± 5,2 células/ml vs. 13,8 x 106 ± 1,7 células/ml; p < 0,05) e escala de dor (2,62 ± 0,18 vs. 1,53 ± 0,136; p < 0,05). No modelo de edema de pata induzidos por carragenina demonstrou-se uma redução do edema / Abstract: : Inflammation has a main role in several connective tissue diseases and is an important element of infectious disease physiopathology. Recently it has been linked to obesity, diabetes and cardiovascular diseases. Adenosine, among the various inflammatory process mediators, is a potent autocoid and its bioavailability is limited by catabolism to inosine by adenosine deaminase or by salvage following cellular uptake via adenosine kinase (ADK). Once in extracellular space adenosine interacts with specific cell-surface receptors (A1, A2, A2B, A3) and acts on multiples aspects of the inflammatory process: apoptosis, leukocyte migration, release of proinflammatory cytokines and vascular regulation. At cellular level adenosine acts in a wide-range of pathways, modulating important transcription factors like NF-?B. Based on these premises, adenosine immune regulatory properties and potential in therapeutics have been acknowledged and investigated through the study of specific receptors agonists and compounds able to increase its concentration. The main objective of this study was to evaluate the antiinflammatory properties and mechanisms of DMA, a novel adenosine kinase inhibitor, which increases adenosine tissue concentration. In order to accomplished that, animal models of acute inflammation and cell culture assay were used. DMA was orally effective to reduce neutrophils migration (~55%; p < 0,05) and IL-6 concentration (~35%; p < 0,005) in the aseptic thioglycollate peritonitis model. DMA significantly inhibited arthritis in an acute arthritis carrageenan model, decreasing articular volume (~30% second hour and ~35% fourth hour, p < 0,05), leukocytes on synovial liquid (~50% ; 28,6 x 106 ± 5,2 cells/ml vs. 13,8 x 106 ± 1,7 cells/ml; p < 0,05) and pain score (2,62 ± 0,18 vs. 1,53 ± 0,136; p <0 ,05). DMA was also effective in reducing edema in the carrageenan-induced paw edema model (~30% second hour and 36% fourth hour; p < 0,05) and pain in the second phase of the "Liking test" induced by formalin (~40% in liking time; p < 0,01). In vitro, macrophage expression of TLR4, an important cell receptor in recognizing and processing antigens, was decreased after DMA treatment. The results suggest that DMA also impacts the inflammatory cascade by modulating inflammatory related nuclear transcription. It was demonstrated that DMA was also able to inhibit macrophages and neutrophils, LPS induced NF-?B activation and promote PPAR activation in THP-1 cells. Antiinflammatories are drugs in high demand, but their use is still limited by side-effects. The DMA is a novel, potent non-nucleoside ADK inhibitor, orally effective to improve inflammation in some well characterized animal models and in vitro assays. New studies, based on this data, will be design to further explore the therapeutic use of DMA in inflammatory diseases / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Otavio Rizzi Coelho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T19:13:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tornatore_ThaisFranchini_M.pdf: 1907097 bytes, checksum: 5b1b181996681047fcf543481e55173d (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A aterosclerose é caracterizada pelo recrutamento de monócitos e linfócitos para a parede do vaso. O efeito desencadeador deste processo é o acúmulo de partículas de LDL minimamente oxidadas, as quais estimulam as células endoteliais a produzirem moléculas pró-inflamatórias. Em adição à LDL oxidada, vários outros fatores modulam a inflamação tais como forças hemodinâmicas, hormônios sexuais e infecção. O objetivo deste estudo foi demonstrar o efeito anti-aterogênico do DMA, 6,7-Dimetoxi-4-N-(3¿-N¿,N¿-dimetil)fenilaminoquinazolina, em camundongos LDLr-/- . Este efeito pode ser relacionado com a propriedade anti-inflamatória do composto estudado, por evidências de que o mesmo aumenta a biodisponibilidade de adenosina nos tecidos pela inibição da adenosina quinase. Nossos resultados mostraram que o DMA administrado via oral, tanto no tratamento preventivo, quanto no tratamento de lesões pré estabelecidas, em camundongos LDLr-/- alimentados com dieta hipercolesterolêmica (1,25% colesterol e 0,5% ácido cólico) diminui o tamanho das placas ateroscleróticas em 67% e 52%, respectivamente, em relação ao grupo controle que recebeu veículo. Esses dados foram obtidos através da planimetria das lesões ateroscleróticas na base da artéria aorta com a coloroção Oil Red O específica para lipídios. A dieta hipercolesterolêmica (HC) por 15 e 30 dias reduziu o triglicéride sérico, medido pelo sistema de cromatografia líquida, em cerca de 50% sendo que o tratamento com DMA cancelou esta redução. A dieta HC por 15 e 30 dias aumentou o colesterol sérico, em cerca de 2 vezes nos camundongos LDLr-/-. Camundongos tratados com DMA e dieta HC apresentaram níveis de colesterol total maiores do que o grupo alimentado somente com dieta HC. Dados revelaram que este aumento foi devido ao maior nível de HDL circulante nos camundongos tratados com o composto DMA. Todos os camundongos em tratamento, tanto com DMA quanto com veículo, apresentaram redução do peso corporal em relação ao grupo de camundongos alimentados com dieta hipercolesterolêmica (HC) / Abstract: Atherosclerosis is characterized by the recruitment of monocytes and lymphocytes to the artery wall. A triggering event for this process is the accumulation of minimmally oxidized LDL, which stimulates the overlying endothelial cells to produce a number of pro-inflammatory molecules, including hemodynamic forces, sex hormones and infection. We demonstrated that DMA, ,7-Dimethoxi-4-N-(3¿-N¿,N¿-dimethyl)phenilaminoquinazoline, have an anti-atherogenic effect in mice LDLr-/-. This effect could have a relationship with an anti-inflammatory property of adenosine in tissues, by the inhibition of adenosine kinase. Results showed that DMA administrated by oral via, as prevent treatment, as pre-established lesions, in mice LDLr-/- with hypercholesterolemic diet (1,25% cholesterol and 0,5% colic acid), decreases atherosclerotic lesions in 67% and 52% respectively in relation of the vehicle group. These data was obtained by planimmetric study of atherosclerotic lesions in the base of aortic arthery with Oil Red O especific for lipids. The hypercholesterolemic diet by 15 and 30 days, decreases serum tryglicerides in 50%, in the other way, the treatment with DMA cancelled this reduction. At the same time, HC diet by 15 and 30 days increases total cholesterol serum, in 2 times in mice LDLr-/-. Mice treatment with DMA and hypercholesterolemic diet showed serum cholesterol higher than the HC group (control). Results demonstrated that this increase have relationship with higher HDL serum level in mice treated with compound. All mice in treatment (DMA and Vehicle group) had the weight decreased. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Jà està estabelecido que a liberaÃÃo de produtos da cicloxigenase e aminas simpatomimÃticas, mediadores finais da dor inflamatÃria à precedido pela geraÃÃo, por cÃlulas residentes, de uma cascata de citocinas. Recentemente dados do nosso laboratÃrio demonstraram que no modelo de contorÃÃes abdominais (CA) a ativaÃÃo dessa cascata à dependente tambÃm da presenÃa de cÃlulas residentes como macrÃfagos e mastÃcitos. Dados da literatura apontam algumas citocinas capazes de modular negativamente a funÃÃo dessas cÃlulas: IL-4,. IL-10, IL-13, IL-6, TGF-&#946; e IFN-&#945; . Com base nesses dados, o objetivo do presente trabalho foi estudar uma possÃvel atividade analgÃsica de trÃs citocinas: IL-4, IL-13 e IL-10. Para tanto injetou-se, via ip, IL-4 (1â5ng/animal), IL-13 (0.4-2.5ng/animal) ou IL-10 (0.4-10ng/animal) 30 min antes da administraÃÃo de zymosan (Zym) ou Ãcido acÃtico (AAc) para o teste de CA. IL-4 (2.5 e 5ng/animal), IL-13 (1 e 2.5ng/animal) ou IL-10 (2 e 10ng/animal) foi injetada, ip, 30 min antes do Zym (1 mg/animal; intra-articular) e logo apÃs foi medida a incapacitaÃÃo articular (IA) atà a 4 hora e na 6 hora foi feita a contagem de leucÃcitos no fluido articular. As interleucinas estudadas tambÃm foram administradas (30 min antes) na dose que melhor inibiu as CA no teste da placa quente (PQ) e em camundongos que haviam recebido ou nÃo a naloxona previamente ao estÃmulo (AAc) no teste de CA. IL-4 (5 ng/animal) ou IL-10 (10 ng/animal) foi injetada ip 30 min antes do Zym (ip) e apÃs 15 min os animais foram sacrificados e o exsudato peritoneal foi colhido e posto em cultura para a dosagem de IL-1&#946; e TNF-&#945; no sobrenadante. No presente trabalho ficou demonstrado que as interleucinas-4, 13 e 10 sÃo analgÃsicas tanto no modelo de CA induzidas por AAc (58.7, 89.2, 52% de inibiÃÃo, efeito mÃximo, respectivamente, p<0.05) ou Zym (62.6, 61.7, 74.4% de inibiÃÃo, efeito mÃximo, respectivamente, p<0.05) como tambÃm no modelo de IA induzido por Zym (49.2, 56.6, 69,9% de inibiÃÃo, efeito mÃximo, respectivamente, p<0.05). As citocinas estudadas foram capazes de inibir o influxo de leucÃcitos para a cavidade articular (53.8, 92.1 e 62%, respectivamente - p<0,05). Foi demonstrado que o efeito analgÃsico parece ser de domÃnio perifÃrico visto que nenhuma das citocinas modificou o tempo de reaÃÃo na PQ, teste algesimÃtrico sensÃvel apenas para drogas que exercem efeito central. TambÃm foi demonstrado que a atividade analgÃsica das interleucinas testadas nÃo depende da liberaÃÃo de opiÃides endÃgenos, visto que o prÃ-tratamento com naloxona nÃo foi capaz de reverter a atividade analgÃsica de nenhuma das interleucinas no modelo de CA. Contudo essa atividade analgÃsica parece depender da inibiÃÃo da liberaÃÃo de citocinas por cÃlulas residentes visto que IL-4 e IL-10 foram capazes de diminuir a liberaÃÃo de TNF-&#945; (42 e 41.2% de inibiÃÃo respectivamente - p<0.05) e IL-1&#946; (61.9 e 80.9% de inibiÃÃo respectivamente - p<0,05) por macrÃfagos peritoneais residentes. / The release of cyclo-oxigenase products and sympathomimetics amines, the final mediators of inflammatory pain, is preceded by the generation of cytokines by resident cells. In recent years a number of cytokines such as IL-4, IL-10, IL-13, IL-6, TGF-&#946; e IFN-&#945; have been described to inhibit the production of TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 (cytokines regarded as prÃ-inflammatory) and possibly to exert their modulatory effect on macrophages and mast cells. Since it is known the capacity of those cytokines to inhibit the production of pro-inflammatory cytokines and the pivotal role of resident cells in the development of inflammatory pain we have decided to test the possibility of IL-4, IL-13 and IL-10 to modulate inflammatory pain. In short, IL-4 (1 â 5ng/animal), IL-13 (0.4 - 2.5ng/animal) or IL-10 (0.4 - 10ng/animal) was given 30 min before acetic acid (AAc) or zymosan (Zym) administration in the writhing model. IL-4 (2.5 e 5 ng/animal), IL-13 (1 e 2.5 ng/animal) or IL-10 (2 e 10 ng/animal) were injected, ip, 30 min before Zym (1 mg/animal; intra-articular) in the rat knee joint incapacitation test up to the 4th hour (the number of leukocytes was determined in the articular exsudate 6 hours later). Doses of those cytokines that exerted maximum effect in the writhing test were also injected 30 min before the hot plate test. These same doses were injected ip before naloxone administration in the AAc-induced writhing model in mice. TNF-&#945; and IL-1&#946; were determined in the supernatant of a macrophage culture which were collected from peritoneal fluid of mice treated with Zym and pre-treated with the cytokines under test. Our results show that interleukins 4, 13 and 10 inhibit writhing response in mice induced by AAc or Zym up to 58.7, 89.2 and 52%, and up to 62.6, 61.7 and 74.4%, respectively (p<0.05). Similar results were observed in the rat knee joint incapacitation test induced by Zym: 49.2, 56.6, 69,9% of inhibition (p<0.05). The same interleukins were able to inhibit Zym-induced leukocyte influx into articular cavity (53.8, 92.1 e 62% of inhibition, respectively - p<0,05). The analgesic activity of IL-4, IL-13 and IL-10 seems to be peripheral, since these cytokines presented no effect in the reaction time of the animals on hot plate test. This antinociceptive effect seems to have no relation with endogen opioid release since naloxone (opioid receptor antagonist) had no effect in reverting the antinociceptive effect of cytokines in the AAc-induced writhing in mice. However, IL-4 and IL-10 inhibit the release of TNF-&#945; (42 e 41.2%, respectively - p<0.05) and of IL-1&#946; (61.9 e 80.9%, respectively - p<0,05) by macrophages stimulated in vivo by Zym, indicating that their antinociceptive activities may be due to the inhibition of those cytokines release by resident cells.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Periodontal disease is an infectious-inflammatory disease, and drugs have been studied as modulators of this inflammatory process. In this context, this thesis, constituted by 3 articles had by objective: (1) Perform a review about the effect of Bisphosphonates (BPs) on periodontal disease; (2) Investigate the effect of Alendronate (ALD) on Bone-specfic Alkaline Phosphatase (BALP) on alveolar bone loss (ABL) in rats; (3) Evaluate the effect of ALD and Atorvastatin (ATV) combination on ABL in rats. On study 1, we sought in data basis, using the keywords âBisphosphonatesâ and âPeriodontitisâ, pre-clinical and clinical studies, published in English and Portuguese, in the last 10 years. On study 2, 36 Wistar male rats, submitted to ligature-induced periodontitis, received 0.9% Saline (SAL) or ALD on the doses of 0.01; 0.05; 0.25 mg/kg-s.c., 30 min before ligature placement and daily during 11 days. It was evaluated: ABL (morphometry and histology) serum levels of Bone-specific Alkaline Phosphatase (BALP), transaminases, and Total Alkaline Phosphatase (TAP); and leukogram and corporal mass. On study 3, 78 Wistar male rats, submitted to ligature-induced periodontitis, received prophylactically (P): SAL or ALD (0.01; 0.25 mg/kg-s.c) or ATV (0.3; 27 mg/kg-v.o.) or the combination ALD+ATV (0.25+27; 0.01+0.3; 0.25+0.3; 0.01+27 mg/kg), 30 min before ligature and daily for 11 days; or the combination ALD+ATV (0.01+0.3 mg/kg) administered therapeutically (T), from the 5th day after ligature until the sacrifice. It was evaluated: ABL [morphometry, histology, histometry; immunohistochemistry for tartrate resistant acid phosphatase (TRAP); myeloperoxidase (MPO); BALP, transaminases; Leukogram and corporal mass]. The study 1 showed that BPs presented anti-resorptive and anti-inflammatory effects, reduced FAO and Telopeptide N-terminal of type I collagen (NTx) and improved periodontal clinical parameters. On article 2, ALD (0.25 mg/kg) prevented BALP and ABL reduction, and did not alter transaminases serum levels, but reduced TAP serum levels (p<0.05), it reduced neutrophilia and lymphomonocytosis (p<0.05), without causing important loss of weight. On the 3rd study, the isolated treatments in high doses, and all combinations controlled ABL (p<0.05). Low doses combination of ALD+ATV controlled ABL (P [38.96%] or T [53.53%]). The histological, histometric (p<0.05) and immunohistochemical analysis corroborated macroscopical findings. The low dose combination of ALD+ATV reduced MPO activity, prevented BALP reduction, reduced neutrophilia and lymphomonocytosis (p<0.05), without altering transaminases serum levels and without causing loss of weight. In this way, we can conclude that BPs presented anti-resorptive and anti-inflammatory effects reduced levels of biochemical markers of bone metabolism and improved periodontal parameters. ALD, administered isolated prevented BALP and ABL reduction, without causing systemic problems, and the combination of ALD+ATV, in low doses, reduced ABL and periodontal inflammation, without causing important systemic alterations as well. / A doenÃa periodontal à uma desordem infecto-inflamatÃria, e fÃrmacos tÃm sido estudados como moduladores deste processo inflamatÃrio. Neste contexto, esta tese, constituÃda por 3 artigos, teve por objetivo: (1) Realizar uma revisÃo sobre o efeito de Bisfosfonatos (BFs) na doenÃa periodontal; (2) Investigar o efeito do Alendronato (ALD) nos nÃveis de Fosfatase Alcalina Ãssea (FAO) na perda Ãssea alveolar (POA) em ratos; (3) Avaliar o efeito da combinaÃÃo entre ALD e Atorvastatina (ATV) na POA em ratos. No estudo 1 buscou-se, em bases de dados, utilizando as palavras chave: âBisphosphonatesâ e âPeriodontitisâ, estudos prÃ-clÃnicos e clÃnicos, publicados em lÃngua Inglesa ou Portuguesa, nos Ãltimos 10 anos. No estudo 2, 36 ratos Wistar machos, submetidos à periodontite induzida por ligadura, receberam soluÃÃo Salina (SAL) 0,9% ou ALD nas doses de 0,01; 0,05; 0,25 mg/kg-s.c, 30 min antes da colocaÃÃo do fio e diariamente por 11 dias. Avaliou-se: POA (morfometria e histologia); nÃveis sÃricos de FAO, transaminases e Fosfatase Alcalina Total (FAT); Leucograma e Peso. No estudo 3, 78 ratos Wistar machos, submetidos à periodontite induzida por ligadura, receberam de forma profilÃtica (P): SAL ou ALD (0,01; 0,25 mg/kg-s.c) ou ATV (0,3; 27 mg/kg-v.o.) ou a combinaÃÃo ALD+ATV (0,25+27; 0,01+0,3; 0,25+0,3; 0,01+27 mg/kg), 30 min antes da ligadura e diariamente por 11 dias; ou ainda a combinaÃÃo ALD+ATV (0,01+0,3 mg/kg) na forma terapÃutica (T), ou seja administrada a partir do 5 dia apÃs ligadura, atà o sacrifÃcio. Avaliou-se: POA [morfometria, histologia, histometria; imunohistoquÃmica para fosfatase Ãcido tÃrtaro resistente (TRAP); mieloperoxidase (MPO); FAO, transaminases; Leucograma e Peso]. O artigo 1 mostrou que BFs apresentaram efeitos antirreabsortivo e anti-inflamatÃrio, reduziram FAO e TelopeptÃdeo N-terminal de colÃgeno tipo I (NTx) e melhoraram os parÃmetros clÃnicos periodontais. No artigo 2, o ALD (0,25 mg/kg) preveniu a reduÃÃo de FAO e POA, nÃo alterou nÃveis de transaminases, mas nÃo preveniu reduÃÃo dos nÃveis de FAT (p<0,05), preveniu neutrofilia e linfomonocitose (p<0,05), sem causar perda de peso importante. No 3 estudo, os tratamentos isolados, em altas doses, e todas as combinaÃÃes avaliadas controlaram POA (p<0,05). A combinaÃÃo de ALD+ATV em baixas doses controlou POA (P [38,96%] ou T [53,53%]). As anÃlises histolÃgicas, histomÃtricas (p<0,05) e imunohistoquÃmicas corroboraram os achados macroscÃpicos. A combinaÃÃo de ALD+ATV em baixas doses reduziu a atividade de MPO, preveniu reduÃÃo de FAO, reduziu neutrofilia e linfomonocitose (p<0,05), sem alterar os nÃveis de transaminases e causar perda de peso. Desta forma conclui-se que os BFs apresentaram efeitos antirreabsortivo e anti-inflamatÃrio, reduziram nÃveis de marcadores bioquÃmicos do metabolismo Ãsseo e melhoraram os parÃmetros clÃnicos periodontais. O ALD, administrado isoladamente, preveniu reduÃÃo de FAO, POA, sem repercussÃes sistÃmicas e a combinaÃÃo de ALD+ATV, em baixas doses, reduziu POA e inflamaÃÃo periodontal, tambÃm sem causar alteraÃÃes sistÃmicas importantes.

A meta-clorofenilpiperazina (1-(3-clorofenil)piperazina; mCPP) é uma piperazina sintética que vem sendo apreendida de forma crescente no mercado de drogas ilícitas, primeiro na Europa e, a partir de 2006, também no Brasil. Recentemente há relatos de aumento significativo da apreensão de comprimidos vendidos como ecstasy e que na realidade contêm mCPP, porém estudos sobre potenciais riscos dessa utilização à saúde ainda são escassos. O papel da mCPP como agonista de receptores serotoninérgicos já está bem descrito na literatura, razão pela qual esta substância é amplamente empregada em trabalhos científicos, principalmente psiquiátricos. No entanto, poucos são os trabalhos realizados com o intuito de investigar mais profundamente as ações desencadeadas no organismo pela substância em si. É sabido que a serotonina é um neurotransmissor liberado por plaquetas no local de inflamação e que exerce papel imunomodulatório importante sobre as células imune Assim, considerando (1) a relevância atual da mCPP no contexto de apreensão de drogas de abuso, (2) a necessidade de estudos sobre efeitos das drogas de abuso no organismo, (3) escassez de avaliações dos efeitos da mCPP sobre o sistema imunológico e (4) sua provável correlação com este sistema a partir de suas ações em receptores serotoninérgicos, o presente trabalho pretendeu iniciar investigações acerca da atividade da mCPP sobre as respostas imune inatas e sobre os mecanismos da mobilização leucocitária. Para tanto, ratos Wistar machos foram tratados com mCPP (1mg/kg, v.o.) e foram realizadas quantificações de leucócitos na medula óssea, no compartimento circulante e no foco inflamatório (peritônio), em presença ou ausência de estímulo inflamatório (LPS, 1 mg/mL, i.p.), como também da mieloperoxidase presente em tecido hepático, pulmonar e do baço. Complementando os estudos in vivo, ainda foi quantificada a cortisona plasmática em animais que receberam tal tratamento tendo seus receptores de glicocorticoides previamente antagonizados (RU38486). Neutrófilos coletados do exsudato peritoneal foram incubados nas concentrações de 10 &#181;M, 100 &#181;M e 1000 &#181;M in vitro e investigados a migração neutrofílica, a expressão das moléculas de adesão na superfície neutrofílica, a quantificação de mediadores inflamatórios no sobrenadante de cultura de neutrófilos e o processo de adesão neutrófilo-endotélio, com células endoteliais coletados a partir do cremáster. Os resultados demonstram que a mCPP diminuiu a quantificação de leucócitos no exsudato peritoneal e, concomitantemente, aumentou o influxo de PMN para o tecido pulmonar, em vigência de estímulo inflamatório. Ainda, in vivo, não foi possível observar diferenças na concentração de cortisona sérica entre animais cujos receptores de glicocorticóides foram antagonizados e aqueles cujos receptores em questão encontravam-se normais. In vitro, a mCPP, nas três concentrações empregadas, e tanto na vigência quanto na ausência de estímulo (LPS ou fMLP), causou alterações na migração dos neutrófilos, na adesão deste tipo celular ao endotélio, na expressão de moléculas de adesão (Lselectina, &#946;2-integrina e PECAM-1) na superfície neutrofílica e na quantificação das concentrações de mediadores inflamatórios (NO, IL-1&#946;, IL-10, TNF-&#945;) no sobrenadante de cultura de neutrófilos. Os resultados obtidos sugerem, em conjunto, que a mCPP exerce atividade pró-inflamatória no que se refere à atividade neutrofílica, bem como sugerem que o fármaco seja capaz de amplificar a resposta inflamatória em modelo animal de rato, tanto in vivo quanto in vitro. / The meta-chlorophenylpiperazine is a synthetic piperazine which has been seized increasingly in the illicit drug market, primarily in Europe and after 2006, in Brazil. Recently, there has been a significant increase on the apprehension of tablets sold as ecstasy but that in reality contain mCPP. Despite its importance, studies over its potential health risks are few. The mCPP role as serotonergic receptor agonist is well known in the literature, reason why this substance is widely employed in scientific research, particularly in psychiatric studies. But there are few reports that aim to investigate thoroughly the actions that this substance triggers in the organisms. It is also known that serotonin is a neurotransmitter released by platelets at the site of inflammation and plays important immunomodulatory role on immune cells. Therefore, considering (1) the relevance of mCPP in the drug abuse context nowadays, (2) the necessity of researching the effects of the drug abuse in the organisms, (3) the lack of studies containing analysis of the mCPP effects over the immune system and (4) the probable correlation between mCPP and this system, through its activity in serotoninergic receptors, this report intended to lead investigations about the mCPP activity over the innate immune response and over the leukocyte mobilization mechanisms. For this purpose, Wistar male rats were treated with mCPP (1mg/kg, v.o.), their leukocytes were measured in the bone marrow, in the circulating compartment and in the inflammatory foci (peritoneum) in the presence or absence of inflammatory stimuli (LPS, 1 mg/mL, i.p.) and the myeloperoxidase present in liver tissue, lung and spleen was also quantified. In addition to in vivo studies, the cortisone plasma was quantified in animals receiving such treatment with glucocorticoid receptors antagonized previously (RU38486). Neutrophils collected from the peritoneal exudate were incubated at concentrations of 10 mM, 100 mM and 1000 mM in vitro. It was then investigated the neutrophil migration and the expression of adhesion molecules on the surface of neutrophils as well as the quantification of inflammatory mediators in the culture supernatant. The process of neutrophil-neutrophil adhesion to endothelium was also analyzed and endothelial cells were collected from the cremaster. Results reflect that mCPP decreased the amount of leukocytes at the peritoneal exudate and, concomitantly, increased the influx of PMN into the lung tissue during an inflammatory stimulus. Also, in vivo, it was possible to observe differences in the concentration of serum from animals which cortisone glucocorticoid receptors were previously antagonized and those in which the receptors in question were normal. In vitro, mCPP in three concentrations employed, and both in the presence or absence of stimulus (LPS or fMLP) caused changes in the migration of neutrophils, in the cell adhesion to the endothelium, in the expression of adhesion molecules (L-selectin, integrin-&#946;2 and PECAM-1), on the surface of neutrophils and in the concentrations of inflammatory mediators (NO, IL-1&#946;, IL-10, TNF-&#945;) in the culture supernatant of neutrophils. The results suggest that, together, mCPP exerts pro-inflammatory activity with respect to neutrophil activity. They also suggest that the drug is able to amplify the inflammatory response in an animal model rat both in vivo and in vitro.