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Perfil parasitológico e hematológico entre usuários atendidos em serviço público de saúde

Vieira, Dhane Eyre Albuquerque 13 March 2008 (has links)
Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-08-24T15:03:34Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Dhane Eyre Albuquerque Vieira.pdf: 1448191 bytes, checksum: 404adad0c12251e7d4440b21b7f30f15 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-26T20:10:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Dhane Eyre Albuquerque Vieira.pdf: 1448191 bytes, checksum: 404adad0c12251e7d4440b21b7f30f15 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-08-26T20:22:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Dhane Eyre Albuquerque Vieira.pdf: 1448191 bytes, checksum: 404adad0c12251e7d4440b21b7f30f15 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-26T20:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Dhane Eyre Albuquerque Vieira.pdf: 1448191 bytes, checksum: 404adad0c12251e7d4440b21b7f30f15 (MD5) Previous issue date: 2008-03-13 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The intestinal parasitosis and anaemia constitute a publish health problem. The geographical distribution and predominance are associated to several factors, being mainly the low economical level part of the population. Such motives took us when Frank Calderon Rosemberg was carrying out a analytically descriptively sectional study through a lifting data collected between the users attended in the Health Center with objective to know the mainly intestinal parasitosis and to know how associate in with the hematologic parameters (hemoglobin, eosinophils, reticulocyte) and environmental factors that could contribute to infection of the enteroparasitosis infection and anaemia in the C.S.F.C.R’s patient. In the survey were identified and interviewed 373 patients, being collected these informations: demographic aspects, socioeconomics aspects, dwelling characteristics, supply of water, hygiene habits and participants food. The ones interviewed handed over a sample of feces and collected in five mL the blood for punch veined. The feces parasitologic examination was used like identification of the sorts of intestinal parasites. The blood collected in the examinations was carried out: counting of eosinophils and reticulocyts, hemoglobin determination (Hb). The totals of wrapped patients on the project were 373, but 86.9 % presented positivite results for some of intestinal parasites. Between the helminths A.lumbricoides it had a predominance of 25.2 %, The T.trichiura with 7.2 %, The E. vermicularis with 2.4 %, The Ancilostomídeos with 1.6 %, The H. nana with 1.3% and S. stercoralis with 1.1 %. The sorts of pathogenic protozoarios revealed a positivity of 19.3 % and 18.8 % for G. lamblia and E. histolytica, the mixed infection was a 37.3 %. The global frequency of anaemia was 25.7 % and the average to hemoglobin was of 10.8±0.7. When became entrenched by sex anaemia predominance was 59 (62.1 %) and 37 (38.5 %) for the feminine and masculine sex respectively. In the association between hemoglobin and the parasites frequency, statistically significant difference was observed at the 5 % of the level between E. nana (p = 0.002), G. lamblia (p=0.001) and the I. butschlii (p = 0.014), being witch at least the biggest proportion was of parasites among the patients with hemoglobin ≥12 (17.7 %). In comparison between the eosinophils result regarding the presence of intestinal parasite 5 % was not found statistical difference at signification level. The Statistical difference was observed at the level of 5 % only for patients who presented at least a parasite regarding the reticulocyte that become entrenched by the hemoglobin. We finalizear this, though that has not been statistical association between the parasitological profile and hematological profile in the present study, and it revealed an elevated predominance of the intestinal parasitosis as well as the anaemia, reinforcing the necessity of the preventive introduction of measures and treatment for governmental authorities part, allowing a better quality of life for population that have low income. / As parasitoses intestinais e anemia constituem um problema de saúde publica, sua distribuição geográfica e prevalência estão associadas a vários fatores, sendo principalmente o baixo nível sócio econômico da população. Tais motivos nos levaram a realizar um estudo seccional descritivo analítico através de um levantamento de dados coletado entre os usuários atendidos no Centro de Saúde Frank Calderon Rosemberg – Manaus/AM com objetivo de conhecer as principais parasitoses intestinais compará-las com parâmetros hematológicos (hemoglobina, eosinófilos, reticulócitos) e associá-los aos fatores ambientais que possam contribuir para disseminação das enteroparasitoses. No presente estudo, foram identificados e entrevistados 373 usuários, nos quais foram coletados informações sobre: aspectos demográficos, condições socioeconômicas, características de moradia, abastecimento de água, hábitos de higiene e alimentares dos participantes. Os entrevistados entregaram uma amostra de fezes e coletaram e 5 mL de sangue por punção venosa. O exame parasitológico de fezes foi utilizado para identificação das espécies de parasitas intestinais. Do sangue coletados foram realizados os seguintes exames: contagem de eosinófilos e reticulócitos, determinação da hemoglobina (Hb). Dos 373 usuários envolvidos no estudo 86,9% apresentaram positividade para alguma espécie de parasito intestinal. Entre os helmintos A.lumbricoides teve uma prevalência de 25,2%, T.trichiura com 7,2% , E. vermicularis 2,4%, Ancilostomídeos com 1,6%, H. nana com 1,3% e S. stercoralis com 1,1%. Os protozoários entre as espécies patogênicas revelaram uma positividade de 19,3% e 18,8% para G. lamblia e E. histolytica, a infecção mista foi 37,3%. A freqüência de anemia foi de 25,7% e a média de hemoglobina ficou entre 10,8±0,7. Quando os dados foram estratificados por sexo, a prevalência de anemia foi de 59 (62,1%) e 37 (38,5%) para o sexo feminino e masculino. Na comparação entre hemoglobina e a freqüência de parasitos, observou-se diferença estatisticamente significante ao nível de 5% entre E. nana (p = 0,002), G. lamblia (p=0,001) e I. butschlii (p = 0,014), sendo que este último à proporção maior foi de parasitos entre os pacientes com hemoglobina ≥12 (17,7%). Na comparação dos eosinófilos em relação à presença de parasito intestinais não foi encontrada diferença estatística ao nível de significância 5% . Observou-se diferença estatística ao nível de 5% apenas para os pacientes que apresentaram pelo menos um parasito em relação ao reticulócitos estratificado pela hemoglobina. Concluímos que, não houve associação estatisticamente significativa entre o perfil parasitológico e hematológico e os fatores ambientes estudados. No entanto o presente estudo revelou uma elevada prevalência das parasitoses intestinais e a anemia entre os usuários do C.S.F.C.R, reforçando a necessidade de implementar medidas preventiva e de tratamento por parte das autoridades, permitindo assim uma melhor qualidade de vida para população carente.
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Estudo dos efeitos da geléia real e da proteína MRJP3 em modelos de colite induzida por TNBS e DSS / Study of the effects of royal jelly and protein MRJP3 models of colitis induced by TNBS and DSS

Manzo, Luis Paulo Bognoni, 1981- 21 August 2018 (has links)
Orientadores: Alba Regina Monteiro Souza Brito, Anderson Luiz Ferreira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T14:15:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manzo_LuisPauloBognoni_M.pdf: 4711838 bytes, checksum: 0267d7f30b132c874529cd6a03786252 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A retocolite Ulcerativa Inespecífica e a Doença de Chron são as principais doenças inflamatórias intestinais. Apesar dos crescentes esforços, não se sabe ainda suas causas. Os tratamentos ainda não são eficazes, as drogas atuais são eficazes na indução da remissão mas não determinam sua cura. Os efeitos colaterais são severos, o que acarreta em baixa adesão ao tratamento. Os produtos naturais tem sido fonte de compostos usados por todo o mundo em diferentes áreas da medicina e ciência. O tratamento oral com geléia real na dose de 100 mg/Kg mostrou-se capaz de aumentar os níveis de grupamentos sulfídrica (GSH) e também a atividade da enzima glutationa peroxidase (GSH-Px) em camundongos com colite induzida por TNBS. A expressão de COX-2 e NF-kB também foram diminuídos, tais resultados demonstram efeitos antioxidantes e antiinflamatórios da geléia real nesta dose neste modelo de colite experimental. O Tratamento intrarretal com a proteína MRJP3 (50 ?g/animal) foi capaz de diminuir os níveis de IL-1? no cólon dos camundongos Balb/c submetidos a colite induzida por DSS. Uma vez que os níveis de IL-6 e IL-10 não foram alterados pelo tratamento intrarretal com MRJP3 50 ?g/animal, podemos afirmar que a proteína não atua pela via da IL-10. Estes efeitos antioxidantes e anti-inflamatórios observados durante o desenvolvimento da colite induzida por TNBS e por DSS em camundongos, podem ser de significativa importância pois abrem portas e encorajam novas pesquisas com a geléia real e sua respectiva proteína MRJP3, motivando novos estudos acerca de outos agentes antioxidantes e outros mediadores anti-inflamatórios envolvidos nestes modelos de colite experimental / Abstract: Ulcerative Colitis and Chron's Disease are the two major forms of IBD. Despite all efforts, these complications of the GTI are still lacking an effective therapy for their cure. Side effects, high cost and low adhesion to treatment are among the negative aspects. Natural products have been a source of widely used compounds in distinct areas of medicine and research. Royal Jelly (RJ) 100 mg/Kg was capable of augmenting the levels of glutathione (GSH) and the activity of glutathione peroxidase (GSH-Px) in mice undergoing TNBS-induced colitis. Furthermore, COX-2 and NF-kB had their expression decreased by the oral administration of RJ 100 mg/Kg. Intra-rectal MRJP3 treatment (50 ?g/animal) was capable of decreasing the levels of IL-1? in mice undergoing DSS-induced colitis, whereas the levels of IL-10 and IL-6 were not altered by MRJP3 50 ?g instillation, what indicates that this decrease is not IL-10-induced. The antioxidant and anti-inflammatory effects observed during the development of DSS and TNBS-induced colitis in mice, may be of crucial importance, since they open and encourage new studies focused on this nourishing substance, especially in experimental models of colitis / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia
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Estudo da dinâmica familiar de pacientes com doenças inflamatórias intestinais (DII) / Study of family dynamics in patients with inflammatory bowel disease (IBD)

Maldaun, Daisy, 1944- 12 July 2012 (has links)
Orientadores: Claudio Saddy Rodrigues Coy, Raquel Franco Leal / Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T16:55:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maldaun_Daisy_D.pdf: 1445844 bytes, checksum: ff748e47d7a55e600aa2c0b5596a7b15 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Denominam-se doenças inflamatórias intestinais (DII) afecções crônicas consideradas auto-imunes, que acometem principalmente o aparelho digestório sendo que duas são mais representativas: retocolite ulcerativa inespecífica (RCUI) e doença de Crohn (DC). Apresentam incidência progressiva, não apenas em nosso meio mas também em âmbito mundial. A importância das DII na gastroenterologia e na saúde publica, em particular se deve a: serem afecções crônicas, que atingem principalmente os jovens; terem crescente incidência com impacto na qualidade de vida e consequentemente nas relações sociais; abordagem complexa; e resposta terapêutica variável. A forma como os pacientes vivenciam a doença está associada a fatores de organização e interação familiar. Na investigação clínica, pacientes acometidos por DII podem vivenciar de forma singular, o seu processo de adoecer em função da estrutura e da dinâmica da família a qual pertencem. Assim, a investigação dos fatores emocionais e da influência da dinâmica familiar na evolução das DII e a constatação da existência de poucas pesquisas realizadas sobre esse tema, nos levaram à realização desse estudo. Objetivo: compreender a influência da dinâmica familiar do paciente com DII, seja ela afetiva ou conflitante na percepção da enfermidade, sob a visão do paciente e de seus genitores. Método;: como escolha foi utilizado o Método Clinico Qualitativo. Foram avaliadas as seguintes categorias: :a) conhecimento da DII; b) o sentido que a DII representa; c) o inter-relacionamento familiar e as modificações advindas da doença; d) a forma como convivem com a sintomatologia da doença; e) o momento da hospitalização. Quinze pacientes com idade entre 18 e 39 anos e seus respectivos genitores, provenientes do Ambulatório de Doença Inflamatória Intestinal "Prof. Dr. Juvenal Ricardo Navarro Góes" do Centro de Diagnóstico de Doenças do Aparelho Digestivo (GASTROCENTRO) da FCM-UNICAMP) sem distinção de raça, naturalidade, condição social, escolaridade, nível sócio-econômico e crença. A coleta de dados envolveu a aplicação, para os pacientes e respectivos genitores, de: Entrevista Inicial e Roteiro de entrevista semi-estruturada, (elaborada pelos pesquisadores desse estudo), para obtenção de informações clinicas e de estrutura familiar. Resultados: a família, como uma unidade dinâmica, é o mais importante suporte social e pode ser considerada como uma importante fonte de estress, que exerce uma significativa influência sobre a saúde e doença de seus membros Os achados, nas categorias selecionadas, mostraram que os pacientes com DII e seus respectivos genitores vivenciam a enfermidade, tanto na exacerbação quanto na remissão de sua sintomatologia, de forma única e singular, com conseqüências psicológicas, sociais e profissionais, de acordo com o convívio e a influência da dinâmica familiar a qual pertencem. Conclusão: A influência da dinâmica familiar, seja afetiva ou conflitante, é relevante em relação à convivência com os sintomas da doença e suas conseqüências, em virtude da dificuldade de ambos, pacientes e genitores, em administrar as características de suas personalidades / Abstract: Inflammatory Bowel Diseases (IBD) are chronic conditions, considered autoimmune, which affects specially the digestive system with two of them being more representative: ulcerative colitis (UC) and Crohn disease (CD). These are diseases with progressive incidence, not only in our local environment but also worldwide. The IBD importance in gastroenterology and public health care, is due to: being chronic conditions that affects mainly young people; they have growing incidence with impact on quality of life and consequently on social relations; complex approach and therapeutic response variable. The way patients experience the disease is associated to organizational factors and family interaction. In clinic investigation, patients affected by IBD experience, in a unique way, the process of becoming ill in function of the family structure and dynamics that they belong. Thus, the investigation of emotional factors, family dynamics influence in the IBD evolution and confirmation of a few available research made over this topic, have leaded us to accomplish this study. Objective; to understand the influence of family dynamics with IBD patients, either arising from affective or conflicting with the perception of the illness from the patient's and his/her parent's perspective/point of view. Method; Qualitative Clinic method was employed and the following categories were evaluated: (a) IBD knowledge, (b) the meaning of what IBD stands for, (c) family interrelationship and modifications originating from the illness (d) how they live with the disease's symptomatology and (e) hospitalization.: Fifteen patients, age varying between 18 and 39 and their respective parents, from the IBD outpatients unit "Prof. Dr. Juvenal Ricardo Navarro Góes" (GASTROCENTRO) of FCM-UNICAMP) without distinction of race, origin, education or social-economic level, education, were evaluated. The data were collected by the application of semi-structural interview (elaborated by the researches of this study) with the patients and their respective parents in order to obtain clinical and family structure information. Results; The family, as a dynamic unit, is the most important core of social support and can be considered as an important source of stress, exercising significant influence on the health and illness of its members. The findings of the selected categories have shown that patients with IBD and their respective genitors experienced the illness, both in grave condition or remission, in a unique manner with psychological, social and professional consequences, according to the relationship and family dynamics. Conclusion;: The influence of family dynamics, whether emotional or conflicting, it is relevant in relation to living with the symptoms of the disease and its consequences, due to the difficulty of both, patients and parents, to manage the characteristics of their personalities / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutora em Ciências
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Avaliação da resposta anti-inflamatória intestinal de proantocianidinas de Rhizophora mangle L. no tratamento de colite experimental induzida por ácido tri-nitro-benzeno sulfônico (TNBS) em ratos e dextrana sal sódico (DSS) em camundongos / Evaluation of the intestinal anti-inflammatory response of proanthocyanidins of Rhizophora mangle in the treatment of experimental colitis induced by trinitro benzene sulfonic acid (TNBS) in rats and dextran sodium sulfate (DSS) in mice

Faria, Felipe Meira de, 1984- 22 August 2018 (has links)
Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-22T00:33:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_FelipeMeirade_D.pdf: 5634635 bytes, checksum: 78374f3fbaac985834cc384c5652485c (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: As doenças inflamatórias intestinais (DII) compreendem doença de Crohn e reto-colite ulcerativa inespecífica, ambas caracterizadas por processo inflamatório crônico e descontrolado no intestino mediado por células do sistema imune. DII tem sido objeto de extensas pesquisas nos últimos anos; indefinição sobre etiologia e ausência de tratamento eficaz os justificam. Nesse cenário, produtos naturais surgem como alternativas terapêuticas, uma vez que moléculas com atividade farmacológica pronunciada, especialmente compostos fenólicos, têm merecido destaque. Neste trabalho foram avaliadas três frações orgânicas (aquosa - Aq, butanólica - BuOH, e acetato de EtOAc) obtidas a partir das cascas de Rhizophora mangle em modelos experimentais de colite induzida por dextrana sal sódico (DSS) em camundongos e ácido 2,4,6-tri-nitro-benzeno-sulfônico (TNBS) em ratos. BuOH (0.5 e 1.5 mg.Kg-1) e EtOAc (1.5 mg.Kg-1) foram efetivas no modelo de colite por DSS, enquanto BuOH 0.5 mg.K-1 e EtOAc 1.5 mg.Kg-1 mostraram-se eficazes na colite aguda por TNBS. No modelo sub-crônico de colite os tratamentos BuOH e EtOAc reduziram novamente os danos causados pelo TNBS, embora BuOH tenha se mostrado mais eficiente. A avaliação de mediadores envolvidos nesses modelos experimentais mostrou que tanto BuOH quanto EtOAc exercem ação sobre a atividade da glutationa peroxidase (GSH-Px) e mieloperoxidase (MPO) bem como sobre os níveis das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral-? (TNF-?), interferon-? (IFN-?), interleucinas 1?, 6 e 12 (IL-1?, IL-6 e IL-12), além de reduzirem a expressão de ciclo-oxigenase-2 (COX-2) no modelo de DSS. No modelo sub-crônico de colite induzida por TNBS, às duas frações atuaram sobre a atividade da GSH-Px e catalase (CAT) e sobre os níveis de glutationa (GSH), TNF-? e IL-12; EtOH também reduziu os níveis de IL-6 e levou ao aumento de citocina anti-inflamatória interleucina-10 (IL-10), BuOH por sua vez mostrou-se eficaz em reduzir o índice de peroxidação lipídica (TBARS) e atividade da MPO, atuando também sobre a expressão de ciclo-oxigenase-1 (COX-1). A análise fitoquímica revelou presença de procianidinas oligoméricas nas duas frações ativas, BuOH e EtOAc, sugerindo que estas substâncias sejam responsáveis pelos efeitos produzidos pelos tratamentos experimentais. As frações BuOH e EtOAc apresentaram efeitos importantes sobre os componentes imune, inflamatório e oxidante em modelos experimentais de colite induzida por TNBS e DSS em doses consideradas baixas para uma mistura de substâncias. As procianidinas de R. mangle surgem então como alternativa terapêutica interessante sobre as DII / Abstract: Inflammatory bowel diseases (IBD) comprises Crohn's disease and ulcerative colitis, both are characterized by an immune-mediated chronic inflammatory process in the gut. IBD have been studied over the past few years; undefined etiology and the absence of effective treatments justify these studies. In this scenario, natural products arises as therapeutic alternative, once various studies in animal models have shown efficient treatments. Nowadays, molecules with pronounced pharmacological activities, especially phenolic compounds, have been highlighted. In this work three organic fractions (aqueous - Aq, butanolic - BuOH and ethyl acetate - EtOAc) obtained from Rhizophora mangle barks were evaluated in experimental models of dextran sodium sulphate (DSS)-induced colitis in mice and 2,4,6-tri-nitro-benzene sulphonic acid (TNBS)-induced colitis in rats. BuOH (0.5 and 1.5 mg.Kg-1) and EtOAc (1.5 mg.Kg-1) were effective in the DSS-induced model, while BuOH (0.5 mg.Kg-1) and EtOAc (1.5 mg.Kg-1) were also effective in acute TNBS-induced model of colitis, which lead to the evaluation of these last ones in sub-chronic TNBS-induced models of colitis. In this model, both treatments reduced the injury provoked by the instillation of TNBS, although BuOH has shown more efficiency. The evaluation of the mediators involved in these experimental models showed that either BuOH as EtOAc act on the glutathione peroxidase (GSH-Px) and myeloperoxidase activities as well as on pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor- (TNF-?), interferon- (IFN-?) and interleukins -1?, 6 and 12 (IL-1, IL-6 and IL-12) levels, and down-regulation of ciclo-oxygenase-2 (COX-2) expression in the DSS-induced model of colitis. Whereas in the sub-chronic TNBS-induced model of colitis, both fractions showed effects on the GSH-Px and catalase (CAT) activities, and glutathione (GSH), TNF-? and IL-12 levels; EtOAc also reduced IL-6 levels and lead to the enhancement of the levels of an anti-inflammatory cytokine, interlukin-10 (IL-10), on the other hand BuOH showed to be efficient in reducing lipid peroxidation index (TBARS) and MPO activity, acting on the upregulation of cyclo-oxygenase-1 (COX-1). Phytochemistry analysis reveals the presence of oligomeric procyanidins in both fractions, BuOH and EtOAc, suggesting that these substances are responsible for the effects produced by the experimental treatments. BuOH and EtOAc fractions presented important effects on the immune, inflammatory and oxidant components in the experimental models of TNBS and DSS-induced colitis using doses, considered, lower for a mixture of substances. The procyanidins of R. mangle became an interesting alternative therapeutic for IBD / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia
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Desenvolvimento e caracterização de micro/nanossuspensões com propriedades mucoadesivas para liberação cólon-específica de metotrexato /

Santos, Aline Martins dos. January 2015 (has links)
Orientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Coorientador: Flávia Chiva Carvalho / Banca: Beatriz Stringuetti Ferreira Cury / Banca: Marco Vinícius Chaud / Resumo: O metotrexato (MTX) é um fármaco com solubilidade pH dependente, utilizado no tratamento de doenças do trato gastrointestinal, como a doença de Crohn, retocolite ulcerativa e carcinomas colorretal. O desenvolvimento de micro/nanossuspensões podem ser uma estratégia promissora para incorporação de fármacos que possuem solubilidade pH dependente, oferecendo vantagens como a redução do tamanho da partícula do fármaco que pode levar ao aumento da taxa de dissolução e da permeabilidade. Adicionalmente, polímeros estímulo-responsivos podem sofrer transição de fase sol-gel in situ, promovendo a mucoadesão e uma maior retenção do sistema no local de ação. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver micro/nanossuspensões contendo polímeros mucoadesivos para liberação cólon-específica do MTX. As partículas foram obtidas pelo método Bottom-up, utilizando reações de ácido-base e estabilizadas com hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) e poloxâmero 407 (P407), através de agitação em Ultra-turrax ou Sonicador. Foram incorporados polímeros derivados do ácido poliacrílico como, Carbopol® ETD 2020 e Ultrez 10NF, poloxâmero 407 e goma gelana, pois estes polímeros atuam por diferentes mecanismos na mucoadesão como pH, temperatura e concentração iônica. A caracterização fíquico-química das micro/nanossuspensões foi realizada por espalhamento de luz, medida do potencial zeta, microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise de textura (TPA) e ensaios de mucoadesão ex vivo. No método Bottom-up foram otimizadas condições para alcançar a solubilização e principalmente a precipitação do fármaco. Essa variação nas condições de precipitação, demonstrou que o aumento da proporção de ácido, permite modular o tamanho da partícula para a escala micro/nanométrica, na ausência... / Abstract: The methotrexate (MTX) is pH-dependent solubility drug used in the treatment of gastrintestinal diseases, such as Crohn's disease, ulcerative colitis and colorectal carcinomas. The micro/nanosuspensions development is a promising strategy to incorporate this type of drug, since it offers important advantages, such as particle size reducing of drug, which may lead to the increase of the dissolution and permeability rates of the drug. Additionaly, responsive-polymers can undergo in situ sol-gel phase transition, promoting mucoadhesion process followed by a greater retention of system in the action site. In this sense, the aim of this work was to develop micro and nanosuspensions associated to mucoadhesive polymers for colon specific release of MTX. The particles were obtained from Bottom-up method by acid-base reactions, employing the Ultra- Turrax or Sonicator and hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) and poloxamer 407 (P407) as stabilizing. Polyacrylic acid (PAA), poloxamer 407 and gellan gum, which have different mucoadhesion mechanisms (pH, temperature and ionic concentration) were incorporated. The physic-chemical characterization of micro/nanosuspensions was realized by light scattering, measurement of zeta potential, scanning electron microscopy (SEM), texture profile analysis (TPA) and ex vivo mucoadhesion test. In the bottom-up method, the conditions were optimized to reach the solubilization and, mainly, the precipitation of drug. This variation in precipitation conditions showed that increasing the acid proportion is possible to modulate the particle size to the micro/nano-range, in the absence of stabilizer. The nanosuspensions exhibited pH above 5.0, while the microsuspensions below 4.0. For microsuspensions, analysis of the results showed that depending on the stirring process and type of stabilizer used it was possible ... / Mestre
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Avaliação do efeito do alcaloide índigo em modelos experimentais de colite / The effect of indigo alkaloid in experimental colitis

Almeida, Ana Cristina Alves de, 1982- 26 August 2018 (has links)
Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T17:16:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_AnaCristinaAlvesde_D.pdf: 2447485 bytes, checksum: 029d5569d7c4d1eaaffa8f4a530937dd (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII), que compreende a Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU), é marcada por resposta inflamatória exacerbada a componentes da microbiota, com danos à mucosa do cólon. O tratamento de DII envolve drogas ineficazes para a remissão de todos os parâmetros da doença, com vários efeitos colaterais e custo elevado, o que motiva a busca de novos agentes terapêuticos. Sendo os produtos naturais uma importante fonte para desenvolvimento de medicamentos, buscou-se, nesse trabalho, avaliar o efeito do alcaloide índigo em modelos experimentais de colite. Inicialmente, foi avaliado o tratamento oral com índigo em colite aguda induzida por ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS) em ratos HanUnib: WH (Wistar), um modelo experimental de DC. O tratamento com índigo resultou em redução da lesão macroscópica, medida através de escore, na dose de 3 mg/kg, e da área de lesão ulcerativa (doses 0,1; 3; 10 e 30 mg/kg). Apenas a administração da maior dose (30 mg/kg) evitou o aumento da razão peso/comprimento do cólon e não houve diminuição da diarreia e aderência do cólon, após tratamento com o alcaloide. Danos histológicos foram minimizados no cólon de animais tratados com índigo (3, 6 e 12 mg/kg). Como a lesão macroscópica por TNBS é bastante severa, a dose de 3 mg/kg, que reduziu tanto o índice (escore) quanto a área de lesão, foi selecionada para as análises posteriores. Nos ratos tratados com índigo (3 mg/kg), houve aumento na atividade da superóxido dismutase (SOD) e redução da atividade da glutationa peroxidase (GPx), redução dos níveis de peroxidação lipídica (LPO) e, parcialmente, de glutationa (GSH), sem alteração significativa na atividade da glutationa redutase (GR) e catalase (CAT). O tratamento com índigo (3 mg/kg) evitou aumento da expressão de ciclooxigenase 2 (COX-2), e não mostrou efeito significativo na expressão de fator nuclear de transcrição ?B (NF-?B) e na concentração de citocina anti-inflamatória interleucina 10 (IL-10). O segundo modelo experimental empregado neste trabalho foi a indução de colite aguda por dextrana sal sódico (DSS), em camundongos Unib: SW (Swiss), que apresenta similaridades com a RCU. A administração de índigo (3 mg/kg) não levou à redução significativa do índice de atividade da doença (DAI), o qual engloba alteração de peso corporal, presença de diarreia e sangue nas fezes; entretanto, foi eficaz em evitar o aumento da razão peso/comprimento do cólon. Em análise histológica, notou-se menor gravidade dos danos causados pelo DSS (aumento da parede do cólon, com infiltração celular na mucosa e submucosa, desorganização do epitélio). No cólon de animais tratados com índigo, observou-se aumento na atividade da SOD, não acompanhada de mudanças nos níveis de GSH e atividade da GPx, GR e CAT. O alcaloide inibiu aumento na concentração cólica da citocina IL-6, mas não da interleucina IL-1?. Em modelo experimental de colite crônica, com recidiva, associada a câncer de cólon por azoximetano e DSS (AOM/DSS) em camundongos Unib: SW (Swiss) machos, a administração de índigo reduziu a mortalidade, minimizou a perda de massa corporal dos animais e evitou o aumento da razão peso/comprimento do cólon. A substância teste, entretanto, não foi capaz de reduzir o DAI, nesse experimento, por não minimizar a perda de consistência e o aparecimento de sangue nas fezes. No modelo de colite crônica por AOM/DSS (9 semanas), animais sadios tratados com salina fisiológica (veículo) ou índigo (3 mg/kg) foram monitorados para análise de sinais de toxicidade do alcaloide, a partir dos parâmetros: mortalidade, evolução de peso corporal, consumo de ração, peso e avaliação macroscópica dos órgãos coração, pulmões, rins e fígado. Não foram encontrados indícios de toxicidade nos parâmetros avaliados, mas devido à mortalidade de 17 % dos camundongos tratados com índigo, foi realizado teste de toxicidade aguda de dose única. Após 14 dias da administração oral e intraperitoneal de índigo (1000 mg/kg), em camundongos Unib:SW (Swiss) machos e fêmeas, não foram observadas alterações na evolução de peso corporal, consumo de água e ração, peso de órgãos vitais, comportamento e sobrevivência dos animais. Em suma, o alcaloide índigo apresentou efeito anti-inflamatório em modelos de colite por TNBS, DSS e AOM/DSS. A redução do estresse oxidativo deve ter papel central na redução das lesões causadas pelo TNBS, enquanto que na colite por DSS, a regulação da IL-6 parece ser determinante para redução dos danos. Apesar de não minimizar todos os parâmetros de danos causados pela colite, o tratamento com índigo possibilitou que os animais ficassem, em geral, menos debilitados (evidenciado pelo maior peso e consumo de ração) que os animais não tratados / Abstract: Inflammatory Bowel diseases (IBD) are known as na exacerbated imune response within the intestinal tract, mainly the mucosa of the colon. The IBD treatment is rather ineffective, including various side effects and high costs. Thus, the research with active compounds may bring therapeutic alternatives for IBD. Since natural products have been a vast source for pharmacology, we decided to investigate the effect of Indigo alkaloid in experimental models of IBD. The oral administration of Indigo (3 mg/Kg) in trinitrobenzenesulphonic acid (TNBS) -induced colitis showed beneficial results in the macroscopic and microscopic lesions, without significant results in the other evaluated parameters (diarrhea and intestine adhesion). We observed a reduction in the sulfhydryl groups (GSH) and in the activity of Glutathione peroxidase (GPx), an increase in the activity of Superoxide Dismutase (SOD) and Lipid Peroxidation (LPO). The treatment with Indigo (3 mg/Kg) prevented an increase in the LPO levels, and partially, the reduction of GSH levels. Furthermore, Indigo inhibited the increase of Cycloxigenase 2 (COX-2) expression. In the Indigo-treated animals, the expression of the Nuclear Factor kB (NF-kB) and the concentration of interleukin 10 (IL-10) were kept at intermediary levels between the healthy group and the non-treated colitic group (Veículo + TNBS). In the Dextran Sodium Salt (DSS), Indigo showed no effect on the disease associated index (DAI), which includes body weight reduction, consistence and blood in feces. However, the 7-day oral treatment with Indigo was capable of avoiding the weight/length ratio of the colon, which is usually augmented in the intestinal inflammation. In the histological, we observed a thickening of the intestinal wall, with mucosal and submucosal cell infiltration, necrotic areas as well as epithelium disorganization in the DSS-induced inflammation. The treatment with Indigo showed less severe morphological lesions. In the Dss-induced colitis, IL-6 and IL-1? levels were higher in the negative control group (DSS), which was prevented with the treatment with Indigo. In the azoximethane/DSS-cancer associated recidive model of colitis, the administration of Indigo lowered the death rate, minimized the body weight loss and also prevented the increase in the wejght/length ratio of the colon. The test substance, however, was not capable of of reducing DAI in this model, since it didn't minimize the loss of consistence and neither the blood in feces. Animals treated with saline or Indigo for 9 weeks were used for the analyses of Indigo toxicity through the following parameters: body weight evolution, chaw consumption, organ weight and macroscopic evaluation (heart, kidneys, lung and liver). In this analysis, no signs of toxicity were found for this dose of Indigo. Although it did not enhance all the parameters studied in this model of colitis, we observed that the Indigo-treated animals were, in general, less debilitated than the non-treated ones. Other studies and parameters have to be performed for a better understanding of the alkaloid effects in the intestinal inflammation / Doutorado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Doutora em Ciências
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Avaliação epidemiológica de parasitoses intestinais entre escolares assistidos por microáreas de unidades de saúde do município de Poços de Caldas-MG / Epidemiologic evaluation of enteric parasitoses in pre-school and school choldren in Poços de Caldas MG, Brazil

Fernandez, Sílvia Cristina Lopes 24 November 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-05-02T13:54:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao completa Silvia Cristina Lopes Fernandez.pdf: 309786 bytes, checksum: 0998ae4c9bd35208a4394152308f7622 (MD5) Previous issue date: 2006-11-24 / Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nïvel Superior / Intestinal parasitoses are diseases closely related to sanitary conditions and a serious problem of public health in underdeveloped countries Many studies have shown that children are more susceptible to parasitic infections due to poor hygienic habits and therefore the effects of parasitism are more significant in them In face of the growth of cities and a higher participation of women in the work market mothers have to take their small children to day-care centers where they are exposed to a potentially contaminated environment In Brazil more than half the population of pre-school and school children have parasitoses In the present study epidemiological variables were surveyed by means of a questionnaire applied to 200 children at their homes who were cared for in microareas of Basic Heathcare Units (Unidades Basics de Saudi) and Family Health Program (Programa de Saúde da Família) of the city of Poços de Caldas State of Minas Gerais Brazil Parasitologic examinations were conducted by the spontaneous sedimentation Technique Results showed that Entamoeba coli and E hystolitica were the most prevalent Parasites The socieconomical conditions of the city are indicative of the population s Good quality of life The most marked risk factors for parasitic infection were the permanent presence of vectors such pets flies mosquitoes cockroaches and/or rats in the house The preventive measures proposed to the Vigilância Sanitária e Epidemiológica (Service of Sanitary and Epidemiological Vigilance) are the implementation of basic sanitation and continuous programs of sanitary education routine follow-up of parasitic infections and checking the effectiveness of the treatment prescribed / Parasitoses intestinais são doenças que estão intimamente relacionadas às condições sanitárias e representam um importante problema de saúde pública nos países subdesenvolvidos Estudos mostram a criança como alvo da infecção parasitária devido a hábitos de higiene e saúde não suficientemente consolidados sendo que nela repercussões das parasitoses tornam-se mais significativas Em função da maior urbanização e maior participação feminina no mercado de trabalho as creches passaram a ser o primeiro ambiente externo ao doméstico que a criança freqüenta tornando-se potenciais ambientes de contaminação No Brasil mais da metade de pré-escolares e escolares encontram-se parasitadas No presente estudo analisaram-se variáveis epidemiológicas através de um inquérito domiciliar de 200 crianças assistidas por micro-áreas de Unidades Básicas de Saúde e Programa de Saúde da família (PSF) do município de Poços de Caldas-MG e exames parasitológicos através da técnica de Sedimentação Espontânea para possível diagnóstico de parasitoses intestinais Os resultados evidenciaram que no município de Poços de Caldas foi predominante o diagnóstico de protozooses intestinais entre crianças na faixa escolar destacando-se a Entamoeba coli e a E histolytica como as parasitoses mais prevalentes o quadro socioeconômico do município é favorável ou indicativo de uma boa qualidade de vida da população os fatores de risco para as infecções parasitárias com maiores destaques foram a presença permanente de possíveis vetores como animais domésticos e o aparecimento também freqüente de vetores como moscas mosquitos baratas e/ou ratos na casa as atividades preventivas propostas à vigilância sanitária e epidemiológica são a implementação de medidas de saneamento básico e programas contínuos concomitantemente visando a educação sanitária acompanhamento rotineiro das infecções parasitárias bem como participação e verificação da eficácia do tratamento preconizado
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Estudo da interação de cumarinas e proteína envolvida na doença inflamatória intestinal por ressonância magnética nuclear /

Benzatti, Fernanda Paulin. January 2017 (has links)
Orientador: Fátima Pereira de Souza / Coorientador: Marcelo Andrés Fossey / Banca: Alexandre Suman de Araujo / Banca: Luis Octávio Regasini / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Flavio Augusto Vicente Seixas / Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é um conjunto de desordens inflamatórias, crônica e, até o momento, sem cura do trato gastrointestinal. Engloba principalmente a doença de Cohn e a retocolite ulcerativa, que podem gerar manifestações extra intestinais. Pacientes com DII apresentam níveis elevados de fator de necrose tumoral-α (TNF-α), um importante mediador inflamatório com papel chave na patogênese dessa doença. A etiologia complexa e incerta da DII é um fator limitante para a descoberta e desenvolvimento de novos tratamentos farmacológicos, já que os atuais medicamentos além de possuírem alto custo e inúmeros efeitos colaterais, uma parcela significativa de pacientes não respondem a nenhuma terapia farmacológica. A cumarina, assim como seus derivados, revelaram potente atividade anti-inflamatória intestinal em modelos experimentais de DII, sugerindo ser um candidato para o tratamento desta doença. O objetivo desse trabalho foi investigar através das técnicas espectroscópicas de STD-RMN, fluorescência e de docking molecular se existe e quais são os mecanismos envolvidos nas interações da cumarina e seus derivados com a proteína TNF-α, além de verificar também, a interação desses ligantes com a albumina sérica humana (HSA). A investigação da interação entre os ligantes e a HSA mostrou que a 4-metilesculetina, cumarina e esculetina interagiram com a HSA através de um processo estático, enquanto que a interação da HSA com a esculina ocorreu por um processo dinâmico... / Abstract: Inflammatory bowel disease (IBD) is an inflammatory, chronic and until now, incurable disease of the gastrointestinal tract. IBD consists of two main forms, Crohn's disease and ulcerative colitis, which can generate extra intestinal manifestations. Patients with inflammatory bowel disease have elevated levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), an important inflammatory mediator involved in the pathogenesis of this disease. The complex and unclear etiology of IBD is a limiting factor for the discovery and development of new treatments; whereas the standard treatments used to treat IBD have high-cost, numerous side effects and a significant number of patients do not respond to none pharmacological therapy. Coumarin and their derivatives have shown potent intestinal anti-inflammatory in IBD experimental models, suggesting coumarins and their derivative might be candidates in the treatment of IBD. The aim of this work was to investigate through the spectroscopic techniques of STD-NMR, fluorescence and molecular docking if it exits and which are the mechanisms involved in the interactions of coumarin and its derivatives with TNF-α protein, in addition to also verifying, the interaction with human serum albumin (HSA). Investigation of interactions between ligands and HSA showed 4-methylesculetin, coumarin and esculetin interacted with HSA through a static quenching mechanism, esculin/HSA interaction occurred by a dynamic quenching mechanism. Hydrophobic interactions and hydrogen ... / Doutor
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Biotransformação da B-lapachona utilizando culturas microbianas: uma alternativa para estudos de metabolismo in vitro / Biotransformation of B-lapachone using microbial cultures: an alternative to in vitro metabolism studies

Paludo, Camila Raquel 05 March 2013 (has links)
A B-lapachona é uma orto-naftoquinona consagrada por suas atividades farmacológicas, principalmente pela antitumoral, porém não há descrição de estudos de biotransformação microbiana da ?-lapachona. Tais estudos podem propiciar a obtenção de novos derivados dessa naftoquinona, além de fornecerem informações importantes sobre seu metabolismo. Muitos trabalhos descrevem que micro-organismos podem catalisar reações mimetizando enzimas humanas. Para o desenvolvimento dessa pesquisa, a ?-lapachona foi obtida por semissíntese a partir do lapachol. Nos processos de biotransformação foram utilizados os fungos filamentosos Mucor rouxii, Cunninghamella elegans, Cunninghamella echinulata, Penicillium crustosum e Papulaspora immersa e as bactérias gastrointestinais Escherichia coli, cultivada em aerobiose e anaerobiose, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium sp. e cultura mista composta por Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium sp. e Streptococcus salivarius subesp. thermophilus. Com o intuito de estabelecer uma comparação entre o metabolismo microbiano da ?-lapachona com o do seu isômero ?-lapachona, estudos de biotransformação utilizando o fungo M. rouxii foram também conduzidos com a ?-lapachona. Sete derivados de biotransformação da ?-lapachona com o fungo M. rouxii foram identificados, sendo um inédito, cinco já descritos na literatura em um trabalho de metabolismo dessa naftoquinona utilizando sangue de mamíferos e humanos e uma espirobenzolactona relatada em um trabalho de síntese. Outros dois derivados inéditos da ?-lapachona, os quais são regioisômeros conjugados com glicose, foram produzidos após formação de hidroquinona no processo coduzido com o fungo C. elegans. O fungo P. immersa forneceu duas lactonas isoméricas também obtidas com a biotransformação com o fungo M. rouxii. Houve resultados positivos, com detecção de possíveis produtos de biotransformação da ?-lapachona por CLAE-DAD, com as bactérias E. coli em aerobiose e Bifidobacterium sp. No entanto, esses processos apresentaram um baixo rendimento, sendo possível a identificação de apenas um derivado com a E. coli, que também foi obtido com a biotransformação com o fungo M. rouxii. Um derivado glicosilado da ?-lapachona foi produzido após 24 horas de incubação no processo desenvolvido com o fungo M. rouxii, sendo posteriormente convertido em hidroxilapachol, que por sua vez originou a ?-lapachona novamente e também a ?-lapachona, a qual foi metabolizada também. O derivado glicosilado majoritário, obtido da biotransformação com a ?-lapachona com o fungo C. elegans, foi submetido à avaliação da atividade citotóxica frente à linhagem de câncer de mama humano SKBR-3 apresentando IC50 igual a 312,5 ?M, sendo o IC50 da ?-lapachona frente à mesma linhagem igual a 5,6 ?M. O derivado majoritário não apresentou citotoxidade frente à linhagem de fibroblastos normais humanos GM07492-A, enquanto a ?-lapachona foi altamente citotóxica (IC50 igual a 7,25 ?M). Esse mesmo derivado inédito foi também produzido em pequena quantidade no processo desenvolvido com o fungo C. echinulata. Na metabolização microbiana da ?-lapachona ocorreram tanto reações de fase I como de fase II, havendo mimetização do metabolismo de mamíferos, inclusive de humanos, como relatado em trabalhos da literatura. / B-lapachone is considered an important ortho-naphthoquinone by their pharmacological activities, mainly antitumor, but there is no description of microbial biotransformation studies of ?-lapachone. These researches may furnish new derivatives and significant information on its metabolism. Many studies describe that microorganisms can catalyze reactions mimicking human enzymes. ?-lapachone was obtained by semisynthetic procedure from lapachol. Biotransformation processes were carried out using the filamentous fungi Mucor rouxii, Cunninghamella elegans, Cunninghamella echinulata, Penicillium crustosum and Papulaspora immersa and the gastrointestinal bacteria Escherichia coli grown aerobically and anaerobically, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium sp. and mixed culture with Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium sp. and Streptococcus salivarius subsp. thermophilus. In order to establish a comparison between ?-lapachone microbial transformation and those of its isomer ?-lapachone, biotransformation studies of ?-lapachone were also carried out using M. rouxii. Seven derivatives of ?-lapachone were produced in the process performed by M. rouxii, including one unpublished, five already described in a study of metabolism by mammalian and human blood and one spirobenzolactone reported in a syntetic study. Other two unpublished derivatives of ?-lapachone, which are regioisomers conjugated with glucose, were produced after formation of hydroquinone in the process carried out by C. elegans. P. immersa provided two isomeric lactones also obtained by biotransformation with M. rouxii. Possible biotransformation products were detected by using HPLC-DAD in the processes carried out by the bacteria E. coli under aerobic condition and Bifidobacterium sp. However, these processes exhibited a low yield, and it was possible to identify only one derivative produced by E. coli, which was also obtained in the process performed by M. rouxii. A glycosylated derivative of ?-lapachone was produced by biotransformation with M. rouxii after 24 hours of incubation and subsequently was converted in hydroxylapachol, which in turn gave rise to ?-lapachone again and also to ?-lapachone, which was also metabolized. The major derivative produced in the process carried out by C. elegans was submitted to cytotoxic activity evaluation using human breast cancer cell line SKBR3 showing IC50 312.5 ?M, being the ?-lapachone IC50 5.6 ?M against the same cell line. The major derivative did not show cytotoxicity to normal human fibroblast GM07492-A cell line, while ?-lapachone was highly cytotoxic (IC50 7.25 ?M). The same major derivative was also produced in smaller yield in the process performed by C. echinulata. In the ?-lapachone microbial transformation studies occurred phase I and phase II reactions, mimicking the metabolism of mammals, including humans, as reported in literature.
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Efeito das drogas Dexametasona e Azatioprina na viabilidade, morfologia e comportamento migratório de células-tronco mesenquimais

Schneider, Natália January 2014 (has links)
Glicocorticoides e outras drogas imunossupressoras são comumente utilizados para o tratamento de condições inflamatórias, como as Doenças Inflamatórias Intestinais (DIIs). Apesar dos avanços na terapia medicamentosa, a remissão da doença ainda é difícil de ser mantida. Devido às suas propriedades imunomodulatórias, as Células-Tronco Mesenquimais (MSCs – Mesenchymal Stem Cells) têm emergido como reguladoras da resposta imune, e sua viabilidade e propriedades migratórias são essenciais para o sucesso da terapia celular. Entretanto, pouco se conhece sobre os efeitos das drogas convencionalmente utilizadas no tratamento das DIIs no comportamento das MSCs. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade, a morfometria nuclear, a polaridade celular, a distribuição da actina-F e da FAK (Focal Adhesion Kinase), e o comportamento migratório das MSCs na presença das drogas Azatioprina (AZA) e Dexametasona (DEXA). As células foram isoladas de membranas coriônicas humanas e caracterizadas pela diferenciação em adipócitos e osteócitos, bem como pela expressão de um painel de marcadores de superfície. As MSCs foram previamente tratadas com AZA ou DEXA por 24h ou 7d nas concentrações de 1μM ou 10μM, respectivamente. Ambas as drogas não afetaram a viabilidade celular analisada por MTT (3-(4,5-dimethyltiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) e morfometria nuclear. Entretanto, a análise do índice de polaridade resultou em uma morfologia mais alongada após o tratamento com AZA, enquanto células mais arredondadas foram observadas na presença de DEXA. Os filamentos de actina foram marcados por Rodamina-Faloidina e sua análise mostrou que a AZA preservou parcialmente a formação de lamelipódios e aumentou a presença de fibras de estresse ventrais, enquanto que a DEXA inibiu a formação de lamelipódios, evidenciou uma maior presença de fibras de estresse ventrais e diminuiu a estabilidade das protrusões de membrana, observadas em vídeo. Através da análise de microscopia de série temporal, foi observado que as células sob o efeito da AZA por 7d migraram por maiores distâncias e tiveram um aumento em sua velocidade de migração (24,35%; P < 0,05; n = 4), ao passo que a DEXA diminuiu a velocidade migratória em 24h e 7d (-28,69% e -25,37%, respectivamente; P < 0.05; n = 4) e diminuiu a distância alcançada pelas células. Em conclusão, nossos dados sugerem que as drogas AZA e DEXA podem afetar diferentemente a morfologia e o comportamento migratório das MSCs, possivelmente afetando o resultado da terapia celular. O protocolo de migração celular utilizado neste estudo foi estabelecido por nosso grupo de pesquisa, sendo que um artigo científico contendo todas as etapas do protocolo foi escrito para que outros laboratórios possam utilizá-lo de maneira simples e eficaz. / Glucocorticoids and other immunosuppressive drugs are commonly used to treat inflammatory disorders, such as Inflammatory Bowel Disease (IBD) and, despite few improvements, the remission of IBD is still difficult to maintain. Due to its immunomodulatory properties, Mesenchymal Stem Cells (MSCs) have emerged as regulators of immune response, and its viability and activation of migratory properties are essential for a successful cell therapy. However, little is known about the effects of immunosuppressant drugs used on IBD treatment on MSCs behavior. In this way, the aim of this study was to evaluate MSCs viability, nuclear morphometry, cell polarity, F-actin and FAK (Focal Adhesion Kinase) distribution and cell migration properties in the presence of the immunosuppressive drugs Azathioprine (AZA) or Dexamethasone (DEX). MSCs were isolated from human chorionic membranes and characterized through adipogenic and osteogenic differentiations, as well as a panel of surface markers. Cells were previously treated with AZA or DEX for 24 hrs or 7 days at 1μM and 10μM, respectively. Both drugs had no effects on cell viability analyzed through MTT (3-(4,5- dimethyltiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) and nuclear morphometry. However, polarity index analysis showed that AZA treatment induced a more elongated cell shape while a greater presence of rounded cells was observed under DEX exposure. F-actin was stained by Rhodamine-Phalloidin and showed that AZA could partially preserve lamellipodia formation and increase the presence of ventral actin stress fibers, while DEX inhibited lamellipodia formation and increased the presence of ventral actin stress fibers while decreasing protrusion stability, observed in video. Through time-lapse microscopy, it was observed that after 7 days of treatment, AZA improved cell the spatial trajectory (ST) and increased migration speed (24.35%, P < 0.05, n = 4) while DEX impaired ST and migration speed after 24 hrs and 7 days treatment (- 28.69% and -25.37%, respectively; P < 0.05, n = 4). In conclusion our data suggests these immunosuppressive drugs can differently affect MSCs morphology and migration capacity, possibly impacting the success of cell therapy. The migration protocol used in this study was successfully established by our group, leading to the writing of a protocol paper to facilitate the usage of this technique by other laboratories in a simple and efficient manner.

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