Submitted by JOÃO OLAVO FIGUEIREDO QUELHAS null (olavofq@gmail.com) on 2017-03-29T23:13:49Z No. of bitstreams: 1 João Olavo Quelhas.pdf: 2589215 bytes, checksum: 6917db55e488c1ded8443d00719d55c9 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-03-30T18:36:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 quelhas_jof_me_sjrp.pdf: 2589215 bytes, checksum: 6917db55e488c1ded8443d00719d55c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T18:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 quelhas_jof_me_sjrp.pdf: 2589215 bytes, checksum: 6917db55e488c1ded8443d00719d55c9 (MD5) Previous issue date: 2017-03-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O crescimento da produção de cerveja artesanal no Brasil e a consequente utilização de antigas técnicas de produção, como a lupulagem a frio (dry-hopping), esquecida pelas grandes empresas e pouco estudadas, abrem espaço para estudos sobre o melhoramento destas técnicas. Considerando a importância do lúpulo na produção de cerveja, principalmente seu alto teor de compostos considerados bioativos, por exemplo as procianidinas, a lupulagem a frio pode ser uma notável fonte de melhoramento nos aspectos sensoriais da cerveja, assim como no conteúdo de compostos com possíveis benefícios à saúde. Primeiramente, foi analisada a atividade antioxidante, pelos métodos de DPPH e ABTS, de sete variedades de lúpulo (Cascade, Fuggle, Tradition, Saaz, Centennial, Herkules e Magnum), com a finalidade de escolher uma para ser utilizada na lupulagem a frio. O Cascade foi selecionado para utilização na lupulagem a frio, principalmente por ser o atualmente o lúpulo mais produzido e consumido mundialmente. A produção das cervejas se diferenciou apenas na etapa da maturação, onde ela foi dividida em 17 recipientes. Cada cerveja maturou sob diferentes temperaturas (de 0 a 10°C), tempos de contato do lúpulo com a cerveja (de 0 a 20 dias) e concentrações de lúpulo (de 1,5 a 3 gL-1), seguindo um delineamento composto central rotacional, com três repetições do ponto central. As 17 cervejas foram analisadas físico-quimicamente em relação ao extrato original/primitivo, extrato aparente, atenuação aparente, teor alcoólico, amargor, cor, pH, turbidez, compostos fenólicos totais e atividade antioxidante (DPPH e ABTS). Foi realizada também uma análise sensorial, avaliando aceitação pela cor, aroma, sabor e amargor, além da aceitação global. As variáveis analisadas durante a lupulagem a frio não apresentaram influência no produto final em relação as analises físico-químicas e a aceitação sensorial. / The growth of craft beer production in Brazil and the consequent use of old production techniques, such as dry-hopping, forgotten by the large companies and little studied, open space for studies to improve these techniques. Considering the importance of hops in beer production, especially their high content of compounds considered bioactive, for example procyanidins, dry-hopping might be a notable source of improvement in the sensorial aspects of beer, as well as in the content of possible healthy compounds. Firstly, the antioxidant activity of seven hop varieties (Cascade, Fuggle, Tradition, Saaz, Centennial, Herkules e Magnum) was analized by DPPH e ABTS, in order to choose one to be used in the dry-hopping. Among the analyzed hops, the Cascade type was selected and, therefore, used during the dry-hopping process, mainly because it is currently the most produced and consumed hop worldwide. The brewing process was the same until the maturation, when the beer was divided into 17 containers. Each beer matured under different temperatures (from 0 to 10°C), time of contact between beer and hop (from 0 to 20 days) and hop concentration (from 1,5 to 3 gL-1), following a central rotational design, with three replicates of the central point. The 17 beers submitted to physicochemical analysis as original/primitive extract, apparent extract, apparent attenuation, alcohol content, bitterness, color, pH, turbidity, total phenolic compounds and antioxidant activity (DPPH and ABTS). A sensory analysis was also implemented, evaluating the attributes: color, aroma, flavor, bitterness and global acceptance. The variables analyzed during dry-hopping did not show any influence on the final product in the physical-chemical analysis and sensory acceptance.

La determinación de la estereoquímica en los compuestos orgánicos ha sido un problema que la comunidad científica ha ido dando solución a lo largo de los años. Diferentes métodos han surgido, como la difracción de rayos X o los distintos tipos de Resonancia Magnética (RMN). Sin embargo, se acaba de descubrir que el método utilizado hasta ahora en la determinación de la configuración absoluta de los α-ácidos, que provienen del lúpulo utilizado en la elaboración de las cervezas bitter, parece que no era el correcto. / Determination of the stereochemistry of organic compounds has been a problem that the scientific community has been giving solution to over the years. Different methods have emerged, such as X-ray Diffraction or different types of Nuclear Magnetic Resonance (NMR). However, it just has been discovered that the method used in the determination of the absolute configuration of the α-acids derived from hops used in the manufacture of bitter beers, was not the appropriate.

Magíster en Gestión para la Globalización / El objetivo de este estudio, es generar un plan de negocios para un Born Global Business, llamado Chile-Hops ; empresa pionera en el cultivo y exportación de Lúpulo en Chile. El auge del movimiento cervecero artesanal ha sido clave en el aumento de la demanda lúpulo hoy en día, debido a las altas tasas de utilización en su recetas, siendo por ello, el mercado objetivo a abordar dentro de la industria cervecera. Luego de un análisis basado en criterios de knock out, se determinó que el destino preferente de exportación es California, Estados Unidos. Las principales motivaciones radican en la situación país y el alto consumo de lúpulo, gracias a su importante número de cervecerías artesanales. Para alcanzar este mercado, se propone la generación de una alianza estratégica, con un partner que conozca el mercado y permita una conexión más fluida entre el cliente final y Chile-Hops . El producto que ofrece esta empresa sustenta su valor en la potencia de la imagen país, tanto en la calidad silvoagrícola de sus productos, así como en ubicación geográfica, cosecha contra-estación y nuevos ecotipos propios de la zona. El formato de venta es lúpulo pelletizado en bolsas trilaminadas al vacío de 10 ó 20 kg, según sea el requerimiento del comprador, a un valor de 33,5 USD/kg ($22.500 CLP/kg aproximadamente). Así también, se ha determinado el volumen potencial de mercado objetivo y su crecimiento a 10 años, junto con el diseño los planes de operación, implementación, gestión de personas y plan de marketing para el correcto funcionamiento de la empresa. Adicionalmente, éstos se acompañan de una evaluación financiera a 10 años para una superficie inicial cultivable de 4 ha ampliada a 12 ha al final del año 10. Finalmente, como resultado de lo anterior, se obtiene un VAN positivo que asciende a $184.402.038 CLP, TIR igual a 14,39% y Payback al 7 año. Gracias a un análisis de sensibilidad aplicado a las variables: precio, rendimiento y costo de personal, es posible determinar que la principal variable que afecta el VAN es el precio por kilogramo, seguido de rendimiento del cultivo (kg/ha).

In the first chapter, we determined that cucumber plants infected with hop stunt viroid (HSVd) accumulated high levels of sRNAs derived of ribosomal RNA (rb-sRNAs).Moreover, this effect was correlated with an increase of the transcription of the ribosomal RNAs precursors (rRNAs) due to a decrease in DNA methylation in its promoter region, revealing that certain ribosomal genes (usually silenced) reactivated its transcriptional activity during the infection. In the following chapter and in order to determine whether this process could be a common phenomenon to other plant-pathogen systems, we analyzed N.benthamiana transgenic plants that expressed, in a constitutive way, the viroid dimeric sequence. It was observed that the accumulation of the sRNAs in transgenic plants was similar to the one seen in infected cucumbers, promoting the imbalance of the rb-sRNAs accumulation. By bysulfited DNA sequencing we proved that this phenomenon turned to be linked with the loss of cytosine methylation in a symmetrical context. As with that observed in cucumber, this phenomenon was correlated with an increase of the transcription of these hypomethylated DNA regions. These data supported the idea that the HSVd was able to interfere with the regulation mechanisms in the host epigenetic level (methylation), suggesting that this phenomenon could happen generally in other viroid-host systems. In the third chapter, by immunoprecipitation essays, it was possible to determine that both in cucumberas in N. benthamiana plants, the HSVd formed an in vivo stable complex with the HISTONE DEACETYLASE 6 (HDA6), a key component in the process of methylation of diverse repetitive DNAs. These results suggested that the interaction HSVd-HDA6 would generate a functional deficit of HDA6 that might be responsible of the epigenetic alterations observed in the host during the infection. This hypothesis was consistent with the observation that the transient overexpression of HDA6 in infected plants reverted to the hypomethylation status of the rDNA. Unexpectedly, we observed that the HDA6 overexpression induced a significant reduction in the accumulation levels of the viroid in the infected plants. Also, the viroid accumulation in the infected cells increased when we transiently silenced the HDA6 expression, demonstrating the existence of an antagonistic relationship between the HDA6 concentration and the viroid. A hypothesis that allows explaining the information obtained and correlating them with an increase of biological viroid efficacy in the host is described in detail in the discussion of this chapter. Once determined that, in vegetative host tissue, the HSVd induces alterations in the epigenetic map of the promotor areas of rDNA, in the last chapter of this thesis we analyzed whether or not reproductive host tissue showed similar alterations during the infection. We analyzed pollen grains of infected cucumber plants. The structural analysis of these reproductive cells indicated that the HSVd accumulation induced a nuclear chromatin decodensation, responsible of the rRNAs transcription in the nucleus of the generative cell. This alteration was correlated with a significant demethylation of the ribosomal DNAs and transposable elements. By RT-PCR analysis it was possible to determine that this methylation pattern alteration correlated with a significant increase of transcriptional activity. This observation revealed that the HSVd infection also induced alterations in the transcriptional regulation mechanisms in the host reproductive tissue. This result allowed speculating with the possibility that these epigenetic modifications could happen in the next generation plants, awarding to the viroid an advantage for host adaptation. / En el primer capítulo determinamos que plantas de pepino infectadas con el viroide del enanismo del lúpulo (HSVd) acumulaban altos niveles de sRNAs derivados del RNA ribosomal. Además, este efecto se correlacionó con un aumento de la transcripción de los precursores de los RNAs ribosomales debido a una disminución de la metilación del DNA en su región promotora poniendo de manifiesto que ciertos genes ribosomales (normalmente silenciados) reactivaban su actividad transcripcional durante la infección. En el siguiente capítulo y con el objetivo de determinar si este proceso podía ser un fenómeno común a otros sistemas planta-patógeno, analizamos plantas de N.benthamiana transgénicas que expresaban de forma constitutiva la secuencia dimérica del viroide. Se observó cómo la acumulación de los sRNAs en plantas transgénicas era similar a la observada en los pepinos infectados, promoviendo el desequilibrio de la acumulación de rb-sRNAs. Mediante secuenciación de DNA bisulfitado demostramos que este fenómeno volvía a estar ligado con la pérdida de metilación de citosinas en un contexto simétrico. Al igual que en pepino este fenómeno correlacionaba con un aumento de la transcripción de estas zonas de DNA hipometiladas. En el tercer capítulo y mediante ensayos de immuno-precipitación, fue posible determinar que tanto en pepino como en N. benthaminana el HSVd formaba complejos estables in vivo con la proteína HISTONA DEACETILASA 6 (HDA6), un componente clave del proceso de metilación de diversos DNAs repetitivos, entre los que se encuentra el DNA ribosomal. Estos resultados sugerían que esta interacción HSVd-HDA6 generaría un déficit funcional de HDA6 que podría ser responsable de las alteraciones epigenéticas observadas en el huésped durante la infección. Esta hipótesis fue consistente con la observación de que la sobreexpresión transitoria de HDA6 en plantas infectadas revirtió el estado de hipometilación del rDNA inducido por el viroide. Inesperadamente, observamos que la sobreexpresión de HDA6 inducía una significativa reducción en los niveles de acumulación del viroide en la planta infectada. Además, la acumulación del viroide en las células infectadas aumentó al silenciar de forma transitoria la expresión de HDA6 evidenciando la existencia de una relación antagónica entre la concentración de HDA6 y la del viroide. Una vez determinado que, en tejidos vegetativos del huésped, el HSVd induce alteraciones en el mapa epigenético de las zonas promotoras del rDNA, en el último capítulo de esta tesis analizamos si tejidos reproductivos del huésped mostraban alteraciones similares durante la infección. Para ello se analizaron granos de polen de flores provenientes de plantas de pepino infectadas por el HSVd. El análisis estructural de estas células reproductivas indico que la acumulación de HSVd inducía la descondensación de la cromatina nucleolar responsable de la transcripción de los rRNAs en el núcleo generativo. Esta alteración correlacionó con una significativa desmetilación de DNAs ribosomales y los asociados a Elementos Transponibles. Mediante análisis de qRT-PCR fue posible determinar que esta alteración en los patrones de metilación se correspondía con un significativo aumento de su actividad transcripcional lo que permite afirmar que al igual que lo observado en hoja, la infección por HSVd induce alteraciones a nivel de los mecanismos de regulación transcripcional también en tejidos reproductivos del huésped. Esta observación permite especular con la posibilidad de que estas modificaciones epigenéticas podrían pasar a la siguiente generación de plantas, confiriendo de esta manera al viroide una ventaja en la adaptación al huésped. / En el primer capítol determinem que plantes de cogombre infectades amb el viroide del nanisme del llúpol (HSVd) acumulaven alts nivells d'sRNA derivats de l'RNA ribosòmic (rb-sRNA). A més, aquest efecte es va correlacionar amb un augment de la transcripció dels precursors dels RNA ribosòmics (rRNA) a causa d'una disminució de la metilació del DNA en la seua regió promotora, i va posar de manifest que certs gens ribosòmics (normalment silenciats) reactivaven la seua activitat transcripcional durant la infecció. En el següent capítol i amb l'objectiu de determinar si aquest procés podia ser un fenomen comú a altres sistemes planta-patogen, analitzem plantes de N. benthamiana transgèniques que expressaven de forma constitutiva la seqüència dimèrica del viroide. Es va observar como l'acumulació dels sRNA en plantes transgèniques era similar a l'observada en els cogombres infectats, promovent el desequilibri de l'acumulació d'rb-sRNA. Mitjançant la seqüenciació del DNA bisulfitat vam demostrar que aquest fenomen tornava a estar lligat a la pèrdua de metilació de citosines en un context simètric. De la mateixa forma que en el cogombre, aquest fenomen es correlacionava amb un augment de la transcripció d'aquestes zones de DNA hipometilades. En el tercer capítol, mitjançant assajos d'immunoprecipitació, va ser possible determinar que tant en cogombre com en N. benthaminana, l'HSVd formava complexos estables in vivo amb la proteïna HISTONA DEACETILASA 6 (HDA6), un component clau del procés de metilació de diversos DNA repetitius, entre els quals es troba el DNA ribosòmic. Aquests resultats suggerien que aquesta interacció HSVd-HDA6 generaria un dèficit funcional d'HDA6 que podria ser responsable de les alteracions epigenètiques observades en l'hoste durant la infecció. Aquesta hipòtesi va ser consistent amb l'observació que la sobreexpressió transitòria d'HDA6 en plantes infectades revertia l'estat d'hipometilació de l'rDNA induït pel viroide. Inesperadament, observem que la sobreexpressió d'HDA6 induïa una significativa reducció en els nivells d'acumulació del viroide en la planta infectada. A més, l'acumulació del viroide en les cèl·lules infectades va augmentar en silenciar de forma transitòria l'expressió d'HDA6, evidenciant l'existència d'una relació antagònica entre la concentració d'HDA6 i la del viroide. Una vegada determinat que, en teixits vegetatius de l'hoste, l'HSVd indueix alteracions en el mapa epigenètic de les zones promotores de l'rDNA, en l'últim capítol d'aquesta tesi analitzem si teixits reproductius de l'hoste mostraven alteracions similars durant la infecció. Amb aquesta finalitat, es van analitzar grans de pol·len de flors provinents de plantes de cogombre infectades per l'HSVd . L'anàlisi estructural d'aquestes cèl·lules reproductives va indicar que l'acumulació d'HSVd induïa la descondensació de la cromatina nucleolar responsable de la transcripció dels rRNA en el nucli generatiu. Aquesta alteració es va correlacionar amb una significativa desmetilació de DNA ribosòmics i els associats a elements transposables (TE). Mitjançant anàlisi de qRT-PCR va ser possible determinar que aquesta alteració en els patrons de metilació es corresponia amb un significatiu augment de la seua activitat transcripcional, la qual cosa va permetre afirmar que, igual que l'observat en la fulla, la infecció per HSVd induïa, també en els teixits reproductius de l'hoste, alteracions dels mecanismes de regulació transcripcional. Aquesta observació va permetre especular amb la possibilitat que aquestes modificacions epigenètiques pogueren passar a la següent generació de plantes, conferint d'aquesta manera al viroide un avantatge d'adaptació a l'hoste. / Castellano Pérez, M. (2017). ESTUDIO DE LAS ALTERACIONES EN EL PATRON DE METILACIÓN DEL DNA DEL HUÉSPED INDUCIDAS POR UN VIROIDE NUCLEAR [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/77992 / TESIS

O objetivo desta pesquisa foi identificar os voláteis importantes para o aroma da carne de frangos suplementados com diferentes concentrações de beta-ácidos do lúpulo. Para isso, 1440 frangos de corte Cobb 500 foram alimentados ad libitum durante 42 dias com dietas basais suplementadas com 0 (controle negativo), 30, 60 e 120 mg kg-1 de &beta;- ácidos do lúpulo. Após 42 dias de experimento, os animais foram abatidos e o músculo peitoral maior (peito do frango) foi retirado, separado do tecido conjuntivo, da pele e da gordura subcutânea. Os filés de peito foram imediatamente congelados a -80 °C até o momento das análises. Nos filés foi determinado o perfil de ácidos graxos por cromatografia gasosa acoplada a detector de ionização em chama. E a carne dos animais suplementados com 30 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi a que apresentou a maior quantidade dos ácidos graxos insaturados de cadeia longa araquidônico (C20:4-n6) e docosaexaenoico (C22:6-n3), cujas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias são benéficas para saúde humana. Para a caracterização dos voláteis da carne assada foi desenvolvido e otimizado um procedimento de extração dos voláteis da carne por microextração em fase sólida de headspace (HS-SPME) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS). Para isso, foram testados cinco tipos de fibras comerciais de SPME quanto a sua capacidade de extração dos voláteis da carne assada de frango e, para fibra que apresentou maior capacidade de extração (CAR/PDMS), foram otimizadas as condições de temperatura e tempo de extração por meio de delineamento composto central rotacional. As condições ótimas de extração foram: temperatura de extração de 81°C e tempo de extração de 45 min. Foram identificados 70 compostos voláteis na carne assada de frango por GC-MS majoritariamente aldeídos, alcanos, álcoois, ésteres e pirazinas. A análise de componentes principais (PCA) foi capaz de separar as amostras em função da suplementação com beta ácidos, o que indica que os diferentes níveis de suplementação podem originar diferentes voláteis na carne assada. O tratamento controle negativo (0 mg kg-1 de &beta;-ácidos) foi caracterizado principalmente por aldeídos e ácidos como octanal, decanal, benzaldeido e ácido n-hexanóico, o tratamento com 30 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado por pirazinas (2, 6 - dimetil prirazina e 3- etil, 2, 5 dimetil pirazina), o tratamento com 60 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado por uma maior quantidade de álcoois, aldeídos e furanos (hexanal, 1-octen-3 ol e pentilfurano), enquanto que o tratamento com 120 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado pela presença docomposto 2- metil pentanal.<br /> / The aim of this research was to identify volatiles that are important for the aroma of chicken meat supplemented with different concentrations of hops &beta;-acids. To carry out this research, 1440 Cobb 500 broilers were fed ad libitum during 42 days with basal diets supplemented with 0 (negative control), 30, 60, 120 and 240 mg kg-1 of hops &beta;-acids. After 42 days, the animals were slaughtered and the pectoralis major muscle (chicken breast) was removed, separated from the conjunctive tissue, the skin, and the subcutaneous fat. The breast fillets were immediately frozen at -80° C until the time of analysis. The fatty acid profile in the steaks was determined by gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID). The meat of the animals supplemented with 30 mg kg-1 of &beta;-acids presented the highest amount of long-chain unsaturated fatty acids such as arachidonic acid (C20:4-n6) and docosaexaenoico (C22:6-n3), which have antioxidant and anti-inflammatory properties benefical to human health. For the characterization of the roasted meat volatiles, an extraction procedure was developed and optimized by headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) and gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). Six different types of SPME commercial fibers were tested regarding their ability to extract volatiles from chicken roasted meat, and to the fiber that showed the highest extraction capacity (DVB/CAR/PDMS), temperature and time of extraction were optimized through central composite design. The optimum extraction conditions were: extraction temperature of 81 °C and extraction time 45 minutes. It was possible to characterize 70 volatiles in the volatile fraction of roasted chicken meat by GC-MS, The majority of them were aldehydes, alkanes, alcohols, esters and pyrazines. The Principal Component Analysis (PCA) was able to separate the samples according to the supplementation with hops &beta;-acids, which indicates that different levels of supplementation may yield different volatile compounds on roasted chicken meat. The negative control treatment (0 mg kg-1 of &beta;-acids) was characterized mainly by aldehydes and acids like octanal, decanal, benzaldehyde and n-hexanoic acid, the treatment with 30 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by pyrazines (2,6 - dimethyl pyrazine, and 3-ethyl, 2,5- dimethyl pyrazine, the treatment with 60 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by a major quantity of alcohols, aldehydes and furans (hexanal, 1-octen-3-ol and pentylfuran), whereas the treatment with 120 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by the presence of 2 the compound 2-methyl pentanal.

O objetivo desta pesquisa foi identificar os voláteis importantes para o aroma da carne de frangos suplementados com diferentes concentrações de beta-ácidos do lúpulo. Para isso, 1440 frangos de corte Cobb 500 foram alimentados ad libitum durante 42 dias com dietas basais suplementadas com 0 (controle negativo), 30, 60 e 120 mg kg-1 de &beta;- ácidos do lúpulo. Após 42 dias de experimento, os animais foram abatidos e o músculo peitoral maior (peito do frango) foi retirado, separado do tecido conjuntivo, da pele e da gordura subcutânea. Os filés de peito foram imediatamente congelados a -80 °C até o momento das análises. Nos filés foi determinado o perfil de ácidos graxos por cromatografia gasosa acoplada a detector de ionização em chama. E a carne dos animais suplementados com 30 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi a que apresentou a maior quantidade dos ácidos graxos insaturados de cadeia longa araquidônico (C20:4-n6) e docosaexaenoico (C22:6-n3), cujas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias são benéficas para saúde humana. Para a caracterização dos voláteis da carne assada foi desenvolvido e otimizado um procedimento de extração dos voláteis da carne por microextração em fase sólida de headspace (HS-SPME) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS). Para isso, foram testados cinco tipos de fibras comerciais de SPME quanto a sua capacidade de extração dos voláteis da carne assada de frango e, para fibra que apresentou maior capacidade de extração (CAR/PDMS), foram otimizadas as condições de temperatura e tempo de extração por meio de delineamento composto central rotacional. As condições ótimas de extração foram: temperatura de extração de 81°C e tempo de extração de 45 min. Foram identificados 70 compostos voláteis na carne assada de frango por GC-MS majoritariamente aldeídos, alcanos, álcoois, ésteres e pirazinas. A análise de componentes principais (PCA) foi capaz de separar as amostras em função da suplementação com beta ácidos, o que indica que os diferentes níveis de suplementação podem originar diferentes voláteis na carne assada. O tratamento controle negativo (0 mg kg-1 de &beta;-ácidos) foi caracterizado principalmente por aldeídos e ácidos como octanal, decanal, benzaldeido e ácido n-hexanóico, o tratamento com 30 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado por pirazinas (2, 6 - dimetil prirazina e 3- etil, 2, 5 dimetil pirazina), o tratamento com 60 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado por uma maior quantidade de álcoois, aldeídos e furanos (hexanal, 1-octen-3 ol e pentilfurano), enquanto que o tratamento com 120 mg kg-1 de &beta;-ácidos foi caracterizado pela presença docomposto 2- metil pentanal.<br /> / The aim of this research was to identify volatiles that are important for the aroma of chicken meat supplemented with different concentrations of hops &beta;-acids. To carry out this research, 1440 Cobb 500 broilers were fed ad libitum during 42 days with basal diets supplemented with 0 (negative control), 30, 60, 120 and 240 mg kg-1 of hops &beta;-acids. After 42 days, the animals were slaughtered and the pectoralis major muscle (chicken breast) was removed, separated from the conjunctive tissue, the skin, and the subcutaneous fat. The breast fillets were immediately frozen at -80° C until the time of analysis. The fatty acid profile in the steaks was determined by gas chromatography with flame ionization detector (GC-FID). The meat of the animals supplemented with 30 mg kg-1 of &beta;-acids presented the highest amount of long-chain unsaturated fatty acids such as arachidonic acid (C20:4-n6) and docosaexaenoico (C22:6-n3), which have antioxidant and anti-inflammatory properties benefical to human health. For the characterization of the roasted meat volatiles, an extraction procedure was developed and optimized by headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) and gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). Six different types of SPME commercial fibers were tested regarding their ability to extract volatiles from chicken roasted meat, and to the fiber that showed the highest extraction capacity (DVB/CAR/PDMS), temperature and time of extraction were optimized through central composite design. The optimum extraction conditions were: extraction temperature of 81 °C and extraction time 45 minutes. It was possible to characterize 70 volatiles in the volatile fraction of roasted chicken meat by GC-MS, The majority of them were aldehydes, alkanes, alcohols, esters and pyrazines. The Principal Component Analysis (PCA) was able to separate the samples according to the supplementation with hops &beta;-acids, which indicates that different levels of supplementation may yield different volatile compounds on roasted chicken meat. The negative control treatment (0 mg kg-1 of &beta;-acids) was characterized mainly by aldehydes and acids like octanal, decanal, benzaldehyde and n-hexanoic acid, the treatment with 30 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by pyrazines (2,6 - dimethyl pyrazine, and 3-ethyl, 2,5- dimethyl pyrazine, the treatment with 60 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by a major quantity of alcohols, aldehydes and furans (hexanal, 1-octen-3-ol and pentylfuran), whereas the treatment with 120 mg kg-1 of &beta;-acids was characterized by the presence of 2 the compound 2-methyl pentanal.

Submitted by Claudia Rocha (claudia.rocha@udesc.br) on 2018-03-07T16:19:03Z No. of bitstreams: 1 PGCS16MA157.pdf: 1361715 bytes, checksum: 2c336e09922581d425e029f59bc55512 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-07T16:19:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCS16MA157.pdf: 1361715 bytes, checksum: 2c336e09922581d425e029f59bc55512 (MD5) Previous issue date: 2016-12-20 / Capes / Hops (Humulus lupulus L.) is a perennial climbing vine belonging to the family Cannabaceae. It is important in the manufacture of medicines, cosmetic products and mainly in brewing production. The objective of this research was to evaluate the growth of hops (Humulus lupulus L.) as a function of 4 different levels of acidity and 4 different levels of phosphate fertilization. The experiment was carried out in a greenhouse on UDESC - Lages (SC), between December 2015 and March 2016. Hop seedlings were collected from a rural property at São Mateus do Sul (PR). The soil used was an Alumínic Humic Cambisol from Lages (SC) and it were limed, incubated and mixed until they achieved the chosen pH (5.2, 6.0 and 6.5). Following this treatment, 1.5 kg of soil were placed in plastic pots and fertilized with phosphate (90, 180, 360 kg.ha-1). The phosphorous source used was the mono-ammonium phosphate (MAP). The seedlings were transplanted to the plastic pots with soil and left for 120 days until their harvest. The root, stem and shoot were analyzed separately, being determined the dry mass, total nitrogen, phosphorus, potassium, calcium, magnesium and plant height. Calcium, magnesium, potassium, organic matter, aluminum, aluminum plus hydrogen, pH-water, pH-CaCl2 and pH SMP were analyzed using the methodology indicated by Tedesco et al. (1995). In relation to the pH, the dry masses of the aerial part, root and total were also significant, they also had the P, the Ca and the K in the root and in the aerial part were Ca and N. In relation to the P2O5 doses they obtained differences dry mass In the aerial part, root and total, the P in the stem, root and the Mg in the aerial part. The variables: plant height, P and K in aerial part, Mg and N in root and N in stem were interacted with liming and phosphate fertilization. There were no significant differences in dry matter, Ca, Mg and K in the stem. For the conditions performed in the experiment, the analyzed variables that obtained the best results were pH 5,2 and the dose of 180 kg.ha-1 of P2O5 / O lúpulo (Humulus lupulus L.) é uma trepadeira, perene e pertencente à família Cannabaceae. Tendo sua importância na fabricação de remédios, produtos cosméticos e principalmente na produção cervejeira. O objetivo desta pesquisa foi avaliar o crescimento da cultura do lúpulo (Humulus lupulus L.), em relação a 4 diferentes níveis de acidez e 4 diferentes níveis de adubação fosfatada. O experimento foi realizado em casa de vegetação da UDESC - Lages (SC), entre dezembro de 2015 até março de 2016. As mudas de lúpulo foram coletadas de uma propriedade rural da cidade de São Mateus do Sul (PR). O solo utilizado foi um Cambissolo Húmico Alumínico do município de Lages (SC), os solos foram calcareados, incubados e misturados até ficarem no pH (pH natural; pH 5,2; pH 6,0 e pH 6,5). Logo após esse período foram postos 1,5 kg de solo em vasos plásticos e adubados níveis de adubação fosfatada (0 ; 90 ; 180 ; 360 kg.ha-1), sendo a fonte utilizada a solução de mono - amônio fosfato (MAP). As mudas foram transplantadas para os vasos plásticos com solo e deixadas por 120 dias até a sua colheita. Foram analisadas separadamente a raiz, o caule e a parte aérea, sendo determinadas a massa seca, nitrogênio total, fósforo, potássio, cálcio, magnésio e altura de planta. No solo foram analisados os teores de cálcio, magnésio, potássio, matéria orgânica, alumínio, alumínio mais hidrogênio, pH-água, pH-CaCl2 e pH SMP utilizando a metodologia indicada por Tedesco et al (1995). Em relação ao pH tiveram diferenças significativas as massas secas da parte aérea, raiz e total, também tiveram o P, o Ca e o K na raiz e na parte aérea foram Ca e N. Já em relação às doses de P2O5 Obtiveram diferenças massa seca na parte aérea, raiz e total, o P no caule, raiz e o Mg na parte aérea. Tiveram interação calagem e adubação fosfatada as variáveis: altura de planta, P e K na parte aérea, Mg e N na raiz e o N no caule. Não obtiveram diferenças significativas a massa seca, o Ca,o Mg e o K no caule. Para as condições realizadas no experimento, as variáveis analisadas que obtiveram melhores resultados foram no pH 5,2 e a dose de 180 kg.ha-1 de P2O5

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-08-14T17:49:15Z No. of bitstreams: 2 Tese- Jerônimo Raimundo de Oliveira Neto - 2017.pdf: 3024039 bytes, checksum: b381958f2c5d4a901e5c5cb791c482a7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-16T11:36:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese- Jerônimo Raimundo de Oliveira Neto - 2017.pdf: 3024039 bytes, checksum: b381958f2c5d4a901e5c5cb791c482a7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:36:48Z (GMT). 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In addition, the antioxidant activity and the phenolic profile of hops and malts from different origins were also verified. From the raw materials, hops samples showed better antioxidant activity when compared to malt samples (p <0.05). The correlation between electrochemical index (EI) and total phenols (TPC), and radical scavenging methods, 1,1-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis (3-ethylbenzthiazoline -6-sulphonic acid) (ABTS) was 0.86, 0.77 and 0.85 respectively for the hop samples. From the beers, ale group showed better antioxidant activity and TPC values when compared to the lager group. However, according to the Pearson correlation matrix, the correlation between IE with TPC, DPPH and ABTS was 0.86, 0.89 and 0.96 respectively for the lager group. While for the ale group, the correlations were not statistically significant (p> 0.05), mainly due to the turbidity interference of the samples during spectrophotometric assays. This fact reiterates the use of electrochemical methods, which minimize this type of problem besides being more sensitive and quick. Following the proposed electrochemical methodology, using the IE calculation, LB10 and AB1 samples obtained the highest indices. In the results of the principal components analysis (PCA) three groups were observed, where group III confirms LB10 and AB1 as the best antioxidants potential. LB10, AB1 and AB6 showed a maximal vasodilator effect of 92 ± 4, 88 ± 3 and 79 ± 3%, respectively. Both the vasodilator effect and the lipid peroxidation inhibition capacity may be associated with the presence of phenolic compounds in the beer samples, identified by mass spectrometry. This study, therefore, verified that the proposed IE methodology is an important tool to evaluate antioxidant properties and showed a good correlation with radical scavenging assays. Moreover, the study showed that beers may have a beneficial effect on the cardiovascular system, showing a good correlation of the vasodilator effect and antioxidant potential, which may be useful for future research on health, sensorial properties and quality parameters. Still from the standpoint of the quality of the beers, hop extracts as well as malt exhibited statistically results, corroborating to the applicability of these tools in the choice of these major ingredients improve the quality of the final product. / A cerveja é uma das bebidas mais antigas e populares consumidas pela humanidade, a principal classificação das cervejas é quanto ao tipo de fermentação, dividindo-se em ale ou lager, alta e baixa fermentação, respectivamente. Neste estudo, as amostras de cerveja foram divididas em duas porções, a primeira para os ensaios espectrofotométricos e eletroquímicos, a qual foi utilizada de forma in natura. E a segunda parte foi liofilizada, para padronização da concentração de uso, retirada do álcool e garantir uma maior durabilidade, e então utilizada nos ensaios farmacológicos e cromatográficos. O objetivo deste estudo foi investigar o potencial antioxidante, a atividade vasodilatadora e correlacionar com os perfis fenólicos de vinte e duas cervejas comerciais. Adicionalmente foi também verificada a capacidade antioxidante e o perfil fenólico de lúpulos e maltes de diferentes origens. Das matérias-primas, as amostras de lúpulo mostraram uma melhor atividade antioxidante quando comparadas com as amostras de malte (p<0,05). A correlação entre o índice eletroquímico (IE) com os fenóis totais (TPC), e os ensaios de captura de radicais, 1,1- difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e 2,2’-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) (ABTS) foi de 0,86, 0,77 e 0,85 respectivamente para as amostras de lúpulo. Enquanto que para as amostras de malte foi 0,49, 0,69 e 0,96, respectivamente. Análise de variância (ANOVA) foi utilizada para verificar diferenças dentro de cada grupo de matéria-prima, sendo observadas diferenças a nível de 95% de confiança (p<0,05). Das cervejas, o grupo ale mostrou melhores capacidade antioxidante e valores de fenóis totais quando comparado com o grupo lager. Porém, de acordo com a matriz de correlação de Pearson, a correlação entre o IE com TPC, DPPH e ABTS foi de 0,78, 0,82 e 0,89 respectivamente para o grupo lager. Enquanto que para o grupo ale as correlações não foram estatisticamente significativas (p>0,05), principalmente devido à interferência da turbidez das amostras durante ensaios espectrofotométricos. Este fato reitera o uso de métodos eletroquímicos, que minimizam este tipo de problema além de serem mais sensíveis e rápidos. Seguindo a metodologia eletroquímica proposta, através do cálculo do IE, as amostras LB10 e AB1 obtiveram os maiores índices. Nos resultados da análise de componentes principais foram observados três grupos, onde o grupo III confirma LB10 e AB1 como as de melhores potenciais antioxidantes. LB10, AB1 e AB6 mostraram efeito vasodilatador máximo de 92 ± 4, 88 ± 3 e 79 ± 3%, respectivamente. Tanto o efeito vasodilatador quanto a capacidade de inibição da peroxidação lipídica, podem estar associados à presença de compostos fenólicos nas cervejas, identificados via espectrometria de massa. Este estudo, portanto, verificou que a metodologia proposta do IE é uma importante ferramenta para avaliar as propriedades antioxidantes e mostrou uma boa correlação com ensaios de eliminação de radicais. Além disso, o estudo mostrou que as cervejas podem ter um efeito benéfico sobre o sistema cardiovascular, apresentando boa correlação do efeito vasodilatador e o potencial antioxidante, o que pode ser útil para pesquisas futuras sobre a saúde, propriedades sensoriais e parâmetros de qualidade. Ainda sobre o ponto de vista da qualidade das cervejas, os extratos de lúpulo, assim como de malte, apresentaram resultados estatisticamente diferentes entre si, corroborando para aplicabilidade destas ferramentas na escolha destes ingredientes majoritários em prol da qualidade do produto final.

Interés del estudio: Los viroides son patógenos exclusivos de plantas que infectan un gran número de especies de interés agronómico. Sin capacidad descrita para codificar proteínas, todas las fases de su ciclo vital son estrictamente dependientes de su interacción con factores del huésped. Históricamente se ha asumido que la patogénesis es consecuencia de la competencia huésped-patógeno por factores celulares implicados en el ciclo vital del viroide. En los últimos años se ha propuesto que la respuesta de silenciamiento de RNA (RNAi) del huésped frente a estos patógenos es la responsable de la respuesta patogénica de los viroides. En el presente trabajo se ha tratado de estudiar en profundidad la relación entre el mecanismo de silenciamiento de RNA y la patogénesis viroidal (en concreto del viroide del enanismo del lúpulo, HSVd). Objetivos: 1- Estudiar el proceso de patogénesis inducido por HSVd y la maquinaria de RNAi 2- Caracterizar mediante secuenciación masiva los sRNAs derivados de HSVd (vd-sRNAs). 4- Analizar la distribución diferencial de vd-sRNAs en distintos tejidos (hoja y floema). 5- Determinar las alteraciones inducidas por la infección en las vías endógenas de RNAi. Elementos de la metodología a destacar: - Uso de un sistema transgénico para estudiar el fenómeno de la patogénesis. - Uso de técnicas de secuenciación masiva para la caracterización de sRNAs. - Análisis bioinformático de los datos generados por la secuenciación masiva. Resultados logrados: - Primera publicación en la literatura de la relación de un componente de las rutas de RNAi en la patogénesis viroidal ocasionada por HSVd. - Publicación de una de las primeras secuenciaciones masivas de sRNAs derivados del HSVd. - Primera caracterización de las poblaciones de sRNAs endógenos de C.sativus, incluyendo la primera caracterización de microRNAs en esta especie. - Identificación y detección de nuevos microRNAs en C.sativus. / Martínez Arias, GE. (2011). Relación entre el silenciamiento de RNA y la patogénesis inducida por un viroide con replicación nuclear [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/11302 / Palancia

Orientador: Rodrigo Máximo Sánchez-Román / Resumo: O cultivo de lúpulo (Humulus Lupulus L) exige um adequado fornecimento de água, principalmente na fase de desenvolvimento, o qual envolve a formação e crescimento dos ramos laterais, florescimento, formação das inflorescências e maturação dos cones. Sabendo da importância do fornecimento de água na fase de desenvolvimento, a irrigação passou a ser utilizada nas áreas de cultivo desde o século XIX. No contexto da irrigação, a qualidade da água é um fator importante e que, quando não se dá a devida atenção, pode causar efeitos deletérios no sistema de irrigação, solo e na planta. O potencial hidrogeniônico (pH) é um dos parâmetros que caracteriza a qualidade de água para irrigação podendo influenciar na microbiologia do solo e no processo de intercâmbio de cátions (solo para a solução e vice-versa). Em virtude da importância da irrigação e dos poucos estudos relacionados ao pH da água da irrigação da cultura do lúpulo, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da irrigação com diferentes faixas de pH da água sob o desenvolvimento agronômico do lúpulo, variedade Cascade, cultivado em ambiente protegido. A pesquisa foi conduzida em casa de vegetação no Departamento de Bioprocessos e Biotecnologia – DBB da Faculdade de Ciências Agronômicas – FCA/UNESP, Campus de Botucatu. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizados (DIC) com três tratamentos e dez repetições. Os tratamentos foram constituídos por três faixas de pH da água, sendo: T1 – pH 6 a 6,5, T... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hop cultivation (Humulus Lupulus L) requires a adequate supply of water, especially at the developmental stage, or as involved in lateral branch formation and growth, flowering, inflorescence formation and cone maturation. Knowing the importance of water supply in the development phase, irrigation has been used in cultivated areas since the 19th century. In the context of irrigation, water quality for irrigation is an important factor which, when not given due attention, can have deleterious effects on the irrigation system, soil and the plant. The hydrogen potential (pH) of water is one of the parameters that characterizes the quality of water for irrigation and can influence soil microbiology and the cation exchange process (soil for solution and vice versa). Due to the importance of irrigation and the few studies related to the water pH of the irrigation of the hop culture, this work had as objective evaluate the effect of irrigation with different water pH ranges on the agronomic development of hops, Cascade variety cultivated in protected environment. The research was conducted in a greenhouse at the Department of Bioprocesses and Biotechnology – DBB of the Faculty of Agronomic Sciences - FCA/UNESP, Botucatu Campus. The statistical design used was the completely randomized design (CRD) with three treatments and ten replications. The treatments consisted of three water pH ranges: T1 - pH 6 to 6.5, T2 - pH 6.5 to 7 and T3 - 7 to 7.5. To obtain the treatments, 0,1 mol L-1 s... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre