Submitted by Gustavo Claro Monteiro null (gustavoquimica32@yahoo.com.br) on 2018-03-06T15:23:05Z No. of bitstreams: 1 Tese Versão Final Repositório.pdf: 65649987 bytes, checksum: e1fba6a3de3c8c866c26d5a3cfce8e09 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-03-09T11:44:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 monteiro_gc_dr_araiq_int.pdf: 65358605 bytes, checksum: 1767a3640bc025b3ac0e668fb5004e0f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-09T11:44:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 monteiro_gc_dr_araiq_int.pdf: 65358605 bytes, checksum: 1767a3640bc025b3ac0e668fb5004e0f (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / As leishmanioses englobam um espectro de doenças que afetam o ser humano e outros mamíferos nas regiões tropicais e subtropicais do planeta. São causadas por pelo menos 20 tipos de parasitas pertencentes ao gênero Leishmania, e apresentam diversas e complexas manifestações clínicas. Podem ser encontradas em mais de 88 países, sendo que o Brasil é um dos países endêmicos onde a doença está mais disseminada. Em 2010 foram confirmados 21.981 casos de leishmaniose tegumen-tar e 3536 de leishmaniose visceral, com 219 mortes. No mundo cerca de 350 mi-lhões de pessoas estão expostas à infecção e acredita-se que cerca de 12 milhões estejam infectadas, com cerca de 1-2 milhões de novos casos por ano e 60 mil óbi-tos. Pensando nisso, o presente estudo visou obter novas substâncias candidatas a serem utilizadas no combate as chamadas “Doenças Tropicais Negligenciadas”, mais especificamente a Leishmaniose. Neste trabalho foram sintetizados doze aná-logos de meroterpenos, sendo nove compostos inéditos e ainda os compostos natu-rais isolados de Psidium guajava (psidial A, guajadial e pisguadial B), utilizando uma rota curta e linear e com rendimento global em torno de 20%. Um estudo sobre o mecanismo da reação de cicloadição [4+2] possibilitou determinar as barreiras de energia envolvidas nas transformações e permitiu compreender algumas limitações da metodologia empregada. Nos testes biológicos, os análogos sintéticos se mostra-ram promissores para combater a forma promastigota de Leishmania infantum, com valores de CE50 entre 29-98 M. Através do estudo de estrutura-atividade frente à leishmaniose verificou-se que o critério em relação à presença de um grupo metil não substituído em posição α ao oxigênio do anel pirânico e a formação de um anel cromânico são de fundamental importância, e estão em concordância com dados relatados na literatura, e ainda, foi estabelecido como novo critério a necessidade de um grupo metilênico (CH2) no núcleo C3 do anel pirânico, para a atividade leishma-nicída dos análogos de meroterpenos. / Leishmaniasis encompasses a spectrum of diseases that affect humans and other mammals in the tropical and subtropical regions of the planet. They are caused by at least 20 types of parasites belonging to the genus Leishmania, and present diverse and complex clinical manifestations. They can be found in more than 88 countries, and Brazil is one of the endemic countries where the disease is most widespread. In 2010, 21,981 cases of tegumentary leishmaniasis and 3536 cases of visceral leish-maniasis were confirmed, with 219 deaths. Around 350 million people worldwide are exposed to the infection and an estimated 12 million are believed to be infected, with about 1-2 million new cases per year and 60,000 deaths. With this in mind, the pre-sent study aimed to obtain new candidate substances to be used in the fight against "Neglected Tropical Diseases", more specifically Leishmaniasis. In this work, twelve meroterpene analogs were synthesized, with nine new compounds and the natural compounds isolated from Psidium guajava (psidial A, guajadial and pisguadial B) using a short and linear route with a global yield of around 20%. A study of the mechanism of the cycloaddition reaction [4 + 2] made it possible to determine the energy barriers involved in the transformations and allowed to understand some limitations of the methodology used. In biological tests, synthetic analogues were shown to be promising to combat the promastigote form of Leishmania infantum, with EC50 values between 29-98 μM. Through the study of structure-activity against leishmaniasis, it was verified that the criterion regarding the presence of an unsubstituted methyl group in position α to the pyran ring oxygen and the formation of a chromic ring are of fundamental importance and are in agreement with data reported in the literature, and the need for a methylene group (CH2) in the C3 nucleus of the pyro ring was established as a new criterion for the leishmanicidal activity of meroterpene analogues. / 141255/2014-5

Leishmaniasis is a zoonotic disease caused by protozoan parasites of the genus Leishmania spp.. The transmission of leishmaniasis occurs by the bites of infected female sandfly. Studies of clinical, biological and epidemiological characterization are fundamental for the development of individualized action and prevention strategies for leishmaniasis, since the transmission patterns, species of Leishmania vectors and species may present very differently in different regions. Thus, the constant monitoring of circulating sandfly species is extremely important since, if they perceive the increase of species or specimens over the years, one must consider the establishment of control methods for these vectors. This study had as a goal to identify the phlebotomine fauna, as for its abundance (in peri-domiciliary, woods, animal food source) monthly flow and the molecular identification of Leishmania species in three cities of southern Santa Catarina, Brazil. The collecting of the insects occurred in the cities of Criciuma, Imaruí and Tubarão, where three collecting points were set in each city: animal food source, woods and peri-domiciliary. In order to collect the insects, it was used CDC light traps. There were monthly collections from April 2015 to march 2016 passing through the four seasons of the year, giving a total of 108 collections, where 4.200 insects of the family Psychodidae were collected. There was the presence of two subfamilies: Sycoracinae and Phlebotominae. The subfamily Sycoracinae is the one with the highest number of specimens collected, 4.193, while the subfamily Phlebotominae 7 specimens of two species: Nyssomyia neivai and Pintomyia fischeri. The cities of Imaruí and Tubarão were where there was the presence of sand flies, being the habitat more frequently near the peri-domiciliary .The females sand flies went through molecular analysis in order to detect the presence of protozoa of the genus Leishmania spp., however, the samples were negative. / Submitted by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:38:22Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Paula Fassicolo Variza.pdf: 1264063 bytes, checksum: d56f82f20238acf2313cb53257829d80 (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Paula Fassicolo Variza.pdf: 758561 bytes, checksum: 705bcdd99cc55d6320d93a53c5a39a95 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:38:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Paula Fassicolo Variza.pdf: 1264063 bytes, checksum: d56f82f20238acf2313cb53257829d80 (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Paula Fassicolo Variza.pdf: 758561 bytes, checksum: 705bcdd99cc55d6320d93a53c5a39a95 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T18:38:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Paula Fassicolo Variza.pdf: 1264063 bytes, checksum: d56f82f20238acf2313cb53257829d80 (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Paula Fassicolo Variza.pdf: 758561 bytes, checksum: 705bcdd99cc55d6320d93a53c5a39a95 (MD5) Previous issue date: 2016-12-15 / As leishmanioses são zoonoses provocadas pela infecção por protozoários do gênero Leishmania spp.. A transmissão das leishmanioses ocorre por meio da picada das fêmeas de insetos flebotomíneos infectados. Estudos de caracterização clínica, biológica e epidemiológica são fundamentais para que possam ser elaboradas estratégias de ação e prevenção individualizadas para as leishmanioses, visto que os padrões de transmissão, espécies dos vetores e espécies de Leishmania podem apresentar-se de forma muito distinta em diferentes regiões. Dessa forma o monitoramento constante das espécies de flebotomíneos circulantes é extremamente importante uma vez que, se perceber o aumento de espécies ou espécimes ao longo dos anos, deve-se atentar para o estabelecimento de métodos de controle para esses vetores. A presente pesquisa teve como objetivo caracterizar a fauna de flebotomíneos, ao que se refere à riqueza e abundância (em peridomicílio, mata urbana e fonte alimentar animal) e identificação molecular de Leishmania spp. das espécies de três municípios (Criciúma, Imaruí e Tubarão), da região Sul de Santa Catarina, Brasil. As coletas dos insetos foram realizadas nos três municípios em diferentes pontos de coleta: fonte alimentar animal, mata urbana e peridomicílio. Foram realizadas coletas mensais de abril de 2015 a março de 2016, totalizando 108 coletas, onde 4.200 insetos da família Psychodidae foram coletados. Foram identificadas a presença de duas subfamílias: Sycoracinae e Phlebotominae. A subfamília Sycoracinae apresentou um expressivo número de espécimes totalizando 4.193 indivíduos e a subfamília Phlebotominae 7 espécimes de duas espécies: Nyssomyia neivai e Pintomyia fisheri. Os municípios de Imaruí e Tubarão foi onde houve a presença de flebotomíneos, sendo o habitat com maior frequência próximo ao peridomicílio. As fêmeas dos flebotomíneos foram submetidas à análise molecular para detecção da presença de protozoários do gênero Leishmania spp., entretanto nenhuma amostra foi positiva para a presença do parasito.

Submitted by Walter Bertequini Nagata null (walter.bn@hotmail.com) on 2017-01-04T19:05:41Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO DE MESTRADO - Walter Bertequini Nagata.pdf: 726100 bytes, checksum: 44016cb83ccb52d2853fbd5e43a37790 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-01-06T13:34:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nagata_wb_me_araca.pdf: 726100 bytes, checksum: 44016cb83ccb52d2853fbd5e43a37790 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-06T13:34:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nagata_wb_me_araca.pdf: 726100 bytes, checksum: 44016cb83ccb52d2853fbd5e43a37790 (MD5) Previous issue date: 2017-01-03 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente estudo foi investigar, por métodos estatísticos, a ocorrência de reações cruzadas entre Leishmania spp. e Ehrlichia spp. com o uso de técnicas sorológicas e moleculares. Um total de 100 amostras sanguíneas de cães foram colhidas e processadas por meio do ELISA (Ensaio Imunoenzimático Indireto) e PCR (Reação em Cadeia da Polimerase). A análise estatística consistiu nos testes de McNemar e Coeficiente de concordância Kappa. As estatísticas foram consideradas significativas quando p<0,05. A sensibilidade e especificidade dos testes foram determinadas pela curva ROC (Receiver Operator Characteristic), considerando o PCR como teste padrão ouro. A partir das análises pode-se verificar que 48,0% dos animais foram reativos na ELISA e 58,0% foram positivos na PCR, no caso da Leishmania spp. Para Ehrlichia spp., a ocorrência de anticorpos pelo ELISA foi de 54,0% e, pela PCR, 48,0% dos cães foram positivos. Nota-se, também, que 37,0% dos animais foram positivos para os dois patógenos por meio do teste molecular, e quatro cães foram reativos no teste ELISA para ambas as doenças e tiveram resultado negativo apenas no teste molecular de Ehrlichia spp. Estes resultados, na sorologia, podem sugerir possíveis casos de reatividade cruzada entre a Leishmania spp. e Ehrlichia spp.. Entretanto, é mais provável que estes resultados estejam relacionados com a coinfecção desses agentes. Por meio dos resultados obtidos, há mais evidências de coinfecção por estes dois agentes patogênicos no cão, do que reatividade cruzada entre eles. / The aim of this study is to investigate, by statistical methods, the occurrence of cross-reactivity between Leishmania spp. and Ehrlichia spp. using serological and molecular techniques. A total of 100 blood samples from dogs were collected and processed by ELISA (indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) and PCR (polymerase chain reaction). Statistical analysis consists of McNemar tests and agreement coefficient Kappa. The statistics were considered significant when p <0.05. The sensitivity and specificity of the tests were determined by ROC curve (Receiver Operator Characteristic), considering the PCR as gold standard. From the analysis it can be seen that 48,0% of the animals were reactive in ELISA and 58,0% were positive in PCR in the case of Leishmania spp. For Ehrlichia spp., the occurrence of antibodies by ELISA was 54,0% and, by PCR, 48,0% of the dogs were positive. It can be noted also that 37,0% of the animals were positive for both parasites through molecular test and four dogs were reactive in the ELISA test for both diseases and were negative only in molecular test for Ehrlichia spp. These results in serology can suggest possible cases of cross-reactivity between Leishmania spp. and Ehrlichia spp.. However, it is more likely that these results are related to coinfection of these agents. Through the results obtained, there are more evidences of coinfection by these two pathogens in dogs than cross-reactivity between them. / FAPESP: 2014/26413-2

Submitted by Flávia Regina Florencio de Athayde null (flavinhaflorencio@hotmail.com) on 2017-01-27T14:01:09Z No. of bitstreams: 1 Athayde_F_R_F_diss.mestrado.pdf: 1648129 bytes, checksum: a278e99a1cfea6cf938f7ec4bb928519 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-01-31T13:33:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 athayde_frf_me_araca.pdf: 1648129 bytes, checksum: a278e99a1cfea6cf938f7ec4bb928519 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T13:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 athayde_frf_me_araca.pdf: 1648129 bytes, checksum: a278e99a1cfea6cf938f7ec4bb928519 (MD5) Previous issue date: 2016-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os protozoários do gênero Leishmania, da família Trypanosomatidae, são responsáveis por causar as leishmanioses, zoonoses de distribuição mundial que atingem países de regiões tropicais e subtropicais, representando um importante problema de saúde pública. As espécies de Leishmania patogênicas à humanos são classificadas em dois subgêneros, Leishmania e Viannia, sendo responsáveis pelas três formas clínicas mais comuns da doença. O subgênero Leishmania tem representantes no Velho e no Novo Mundo, enquanto que as espécies do subgênero Viannia estão presentes somente nas regiões tropicais das Américas, sendo responsáveis pela manifestação tegumentar na forma cutânea e mucocutânea. O avanço nas tecnologias de sequenciamento e montagem dos genomas de espécies de Leishmania têm possibilitado melhor entendimento das leishmanioses, da relação parasita-hospedeiro e até mesmo a identificação diferencial das espécies, auxiliando no entendimento das diferenças nas manifestações clínicas. Com o intuito de ampliar as informações genômicas das espécies de Leishmania e do subgênero Viannia, trabalhamos com o sequenciamento de DNA genômico e ferramentas de bioinformática para a montagem do genoma e anotação de proteínas de duas espécies, Leishmania (Viannia) guyanensis e Leishmania (Viannia) shawi. / The protozoa of the Trypanosomatidae family Leishmania genus, are responsible for causing leishmaniosis, zoonosis of global distribution that affects countries in tropical and subtropical regions, representing an important public health problem. The Leishmania species pathogenic to humans are classified into two subgenera, Leishmania and Viannia, which are responsible for three of the most common clinical manifestations of this disease. The subgenus Leishmania has representatives in the Old and New World, while the Viannia species are present only in the tropical regions of the Americas. These are responsible for the tegumentary manifestation of the cutaneous and mucocutaneous forms. The advance in the technologies of sequencing and the assembly of the genomes of Leishmania species have allowe to better understand the leishmaniosis, the parasite-host relationship and even the differential identification of the species thus, helping to understand the differences in the clinical manifestations. In order to expand the genomic information of the Leishmania species and the subgenus Viannia, we worked with genomic DNA sequencing and bioinformatics tools for assembling the genome and annotating proteins of two species, Leishmania (Viannia) guyanensis and Leishmania (Viannia) shawi.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BrunaLLM.pdf: 1250428 bytes, checksum: 7d67e17f491bfd5829cbd7133ebe3e40 (MD5) Previous issue date: 2008-07-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Leishmania chagasi infection presents a wide spectrum of clinical outcomes, ranging from asymptomatic self resolving infection to disease, visceral leishmaniasis (VL). The exact mechanisms that lead the evolution of infection to disease are not understood. It is believed that malnutrition is a risk factor associated with VL development, although there are few human studies in the area. We aimed to assess the nutritional factors associated with the response to L. chagasi infection in Rio Grande do Norte. The study was conducted from December 2006 to January 2008. 149 children were assessed: 20 active VL cases, 33 children with VL history, 40 DTH+ asymptomatic children and 56 DTH-. Nutritional status was assessed using z scores for Weight/Age, Weight/Height, Height/Age, Body Mass Index (BMI), and mid-upper arm circumference/height (MUAC/height). Vitamin A status was determined by serum retinol concentrations and the modified-relative-dose-esponse test (MRDR). Breastfeeding time and birth weight were also evaluated. VL children presented compromised nutritional status when compared to the other groups using BMI and MUAC/age, with means -1,53 ? 1,10 and -1,48 ? 1,28 z scores, respectively (ANOVA, p < 0,05). VL children also showed lower vitamin A levels: 43% presented serum retinol < 20 ?g/dL and 15% MRDR > 0,060. Birth weight was inverserly associated with the risk to belong the VL group (&#946; = -0,00; OR = 0,84; 95% CI 0,73 - 0,99; p = 0,047), whereas more breastfeeding time was directly associated with the risk to belong to the DTH+ group (&#946; = 0,02; OD = 1,16; 95% CI 1,01 - 1,33; p = 0,036). The nutritional variables evaluated were associated with the response to the L. chagasi infection, with malnutrition and compromised vitamin A status as markers of children who present with VL. Higher birth weight was associated with protection to disease, and higher breastfeeding time was associated with increased likelihood of an asymptomatic infection. The results show that modifiable nutritional aspects in the study population are associated with the response to the L. chagasi infection / A infec??o por Leishmania chagasi apresenta diversas formas cl?nicas, variando de infec??o assintom?tica e espontaneamente resolvida ? manifesta??o cl?nica da doen?a, que ? denominada leishmaniose visceral (LV). N?o se conhecem os exatos mecanismos que determinam a evolu??o da infec??o ? LV. Acredita-se que a desnutri??o seja um fator de risco associado ao desenvolvimento de LV, por?m s?o poucos os estudos em humanos nesta ?rea. Este trabalho teve como objetivo avaliar fatores nutricionais associados com a resposta ? infec??o por L. chagasi no Rio Grande do Norte. O estudo foi realizado de dezembro de 2006 a janeiro de 2008. Foram avaliadas 149 crian?as, sendo 20 casos de LV ativa, 33 casos de hist?ria de LV, 40 com resposta ao teste de Montenegro positiva (DTH+) e 56 DTH-. Avaliou-se o estado nutricional atrav?s de escores-z para Peso/Idade, Altura/Idade, Peso/Altura, ?ndice de Massa Corporal (IMC) e circunfer?ncia do bra?o (CB)/altura. O estado de vitamina A foi medido atrav?s do retinol s?rico e teste de dose-resposta relativa modificado (MRDR). A hist?ria de amamenta??o e o peso ao nascer das crian?as foram avaliados. As crian?as com LV ativa apresentaram estado nutricional comprometido em rela??o ?s demais crian?as estudadas, segundo IMC e CB/altura, com m?dias -1,53 ? 1,10 e -1,48 ? 1,28 escores-z, respectivamente (ANOVA, p < 0,05). O n?vel de vitamina A tamb?m foi menor nas crian?as com LV aguda com 43% de preval?ncia de retinol s?rico < 20 ?g/dL e 15% de MRDR > 0,060. O peso ao nascer foi inversamente associado com o risco em pertencer ao grupo de crian?as com LV (&#946; = -0,00; OR = 0,84; IC 95% de 0,73 - 0,99; p = 0,047), enquanto que maior tempo de amamenta??o foi diretamente associado com o risco da crian?a em pertencer ao grupo DTH+ (&#946; = 0,02; OD = 1,16; IC 95% de 1,01 - 1,33; p = 0,036). As vari?veis nutricionais avaliadas mostraram-se associadas com a resposta ? infec??o por L. chagasi, sendo a desnutri??o e o estado comprometido de vitamina A caracter?sticas das crian?as que apresentam LV. Al?m disso, o maior peso ao nascer mostrou-se associado com prote??o contra a doen?a, enquanto que o maior tempo de amamenta??o foi associado com maior chance de infec??o assintom?tica. Os resultados indicam que aspectos nutricionais que podem ser modificados na popula??o est?o associados com a resposta ? infec??o por L. chagasi

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PaulaVSQ_TESE.pdf: 2112354 bytes, checksum: 4be2c2ba75cc5941ee80bd6de56cfd71 (MD5) Previous issue date: 2011-11-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / No Brasil, os c?es est?o envolvidos no ciclo de transmiss?o da Leishmania infantum chagasi, agente etiol?gico da leishmaniose visceral (LV), constituindose em fonte de infec??o para o vetor e promovendo a dispers?o da doen?a para ?reas n?o end?micas. N?o h? tratamento eficaz para LV canina, como tamb?m n?o h? vacinas eficientes.. Os mecanismos imunol?gicos que regulam a susceptibilidade ou resist?ncia ? infec??o por Leishmania em c?es n?o foram completamente caracterizados. A express?o das subclasses de IgG anti- Leishmania tem sido testada como marcador de susceptibilidade ou resist?ncia e consequente status cl?nico de animais infectados. O estudo teve como objetivo avaliar as caracter?sticas cl?nicas e imunol?gicas da infec??o por Leishmania em c?es que residem em ?reas end?micas para leishmaniose visceral, em ambientes periurbano e rural no Estado do Rio Grande do Norte. A popula??o examinada foi proveniente de ?reas de preval?ncia da infec??o canina e humana no RN, sendo 589 c?es de ?reas periurbanas do litoral leste do Estado, 97 c?es de ?reas rurais do munic?pio de S?o Miguel e 146 c?es soropositivos do CCZ de Natal. Os animais foram submetidos ao exame cl?nico e ao diagn?stico sorol?gico atrav?s do teste ELISA, utilizando os ant?genos rK39 e SLA. As subclasses de imunoglobulinas IgG1 e IgG2 foram determinadas atrav?s do ELISA. C?lulas obtidas de ba?o de c?es infectados foram cultivadas para isolamento, identifica??o e quantifica??o do parasita. Altos ?ndices de infec??o foram encontrados em ?rea periurbana (SLA:44,5%;rK39:8,2%) e rural (SLA:44,3%;rK39:11,3%). C?es adultos e machos predominaram entre os soropositivos nas tr?s popula??es estudadas. Unha grande, ?lceras, alopecia e perda de peso foram os sinais cl?nicos mais freq?entes, embora percentuais acima de 70% de assintom?ticos tenham sido registrados. C?es infectados por Leishmania apresentaram t?tulos mais elevados da imunoglobulina IgG2 em rela??o ? IgG1. C?es oriundos de ?reas periurbanas e rurais apresentaram, respectivamente, taxas de soroconvers?o de: 20,9% e 8,3% durante um per?odo de seis meses. A esp?cie L. i. chagasi foi identificada como agente etiol?gico da infec??o canina no CCZ Natal

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-14Bitstream added on 2014-06-13T18:59:03Z : No. of bitstreams: 1 000760003.pdf: 3284436 bytes, checksum: eb7831cb9642442476baebeb6fa5a800 (MD5) / Leishmania infantum (syn. L. chagasi) é o agente causador da Leishmaniose Visceral (LV) no Novo Mundo, com áreas endêmicas que se estendem do Sul dos EUA ao norte da Argentina. As leishmanioses assumem grande importância em saúde pública por sua natureza zoonótica e, atualmente, vêm apresentando crescente disseminação nas diferentes regiões do Brasil, em especial no Estado de São Paulo. No Brasil, a Leishmaniose Tegumentar (LT) tem sido assinalada em praticamente todos os Estados e vem crescendo progressivamente nos últimos 20 anos, ocorrendo surtos em todas as regiões do país. Apesar dos registros de ocorrências de infecções esporádicas de leishmaniose felina (LF), são necessários mais estudos para se considerar os felinos como reservatórios importantes nas leishmanioses. Estes animais quase não apresentam sinais clínicos, mesmo estando infectados, constituindo-se em importantes fontes de infecção para outros animais domésticos, o homem ou vice-versa. Coletaram-se amostras de sangue de 50 gatos procedentes do Bosque Municipal de Marília, área de grande concentração de transeuntes e já detectado flebotomíneos no local. Armadilhas do tipo CDC luminosas foram instaladas em dez diferentes pontos do bosque, nos meses de julho a dezembro/2012, tendo-se capturado um total de quatro espécies de Lutzomyia longipalpis (Lu. longipalpis) sendo dois machos e duas fêmeas e quatro espécies fêmeas do gênero Brumptomyia spp. A análise parasitológica do conteúdo intestinal das duas fêmeas da espécie Lu. longipalpis foi negativa. Realizou-se a prova de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para Leishmania infantum, tendo-se quatro (8%) animais reagentes. Todos os animais foram não reagentes à prova de RIFI para Leishmania(Viannia) braziliensis. Em relação ao teste de ELISA indireto para Leishmania infantum, 42% dos animais (21/50) foram reagentes. Para L. braziliensis, 18% dos animais (9/50) foram reagentes... / Leishmania infantum (syn. L. chagasi) is the causative agent of visceral leishmaniasis (VL) in the New World, with endemic areas that spreads from the south of United States until the north of Argentina. Leishmaniasis represents a great importance in public health due to the zoonotic nature, and currently have been presented a great dissemination in different regions of Brazil, specially in Sao Paulo State. In Brazil, cutaneous leishmaniasis has been occurred in almost all States, and have been growing up progressively in the last twenty years, occurring outbreaks in all regions of the country. Even though the sporadic reports of feline leishmaniasis, more studies are necessary to consider cats as the great importance as reservoirs in the feline leishmaniasis. These animals almost do not represent any clinical symptoms, even infected, representing important source of infection to another domestic animals, humans and vice-versa. Blood samples were collected from fifty cats habiting the Municipal Grove from Marília-SP, an area with high number of visitors and already detected sandflies. Traps CDC were installed in ten different points of the Municipal Grove from Marília-SP, since July to December/2012. Four specimens of Lutzomyia longipalpis (Lu. longipalpis) were captured (two males and two females) and four females specimens of the Brumptomyia genre. The parasitological analysis of gut contents of two females of Lu. longipalpis was negative. The Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) for Leishmania infantum was performed, resulting in four (8%) reagent animals. All cats were non-reagent to Leishmania braziliensis by IFAT. Regarding to Indirect Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) test for Leishmania infantum, 42% of the animals (21/50) were reagent. For L. braziliensis, 18% of the animals (9/50) were reagent to ELISA test. The Polimerase Chain Reaction (PCR) for Leishmania infantum and for Leishmania braziliensis from ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:59:43Z : No. of bitstreams: 1 vigilato_man_me_botfmvz.pdf: 383898 bytes, checksum: 088d9c97ec0b06349bc4d8c5a144a390 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A leishmaniose visceral americana (LVA) ou calazar é uma antropozoonose causada pelo protozoário Leishmania (L.) chagasi, transmitida através do repasto sanguíneo de flebotomíneos. O cão é o principal reservatório e fonte de infecção para o ser humano e outros cães. Os objetivos deste trabalho foram: determinar a distribuição espacial da leishmaniose visceral canina (LVC) e da LVA no Município de Birigui (SP) no período de 1998 a 2003, localizar, espacialmente, os casos de LVC e LVA; e avaliar a relação espacial da ocorrência da LVC com a LVA. Foi realizada uma busca por dados epidemiológicos dos cães e seres humanos junto à Secretaria Municipal de Saúde. Os dados sobre a ocorrência da LVA e LVC foram distribuídos espacialmente no mapa do município, subdivido em 16 setores, seguindo o critério do Programa Nacional de Combate à Dengue. Foi utilizado o teste de correlação de Pearson para a associação das variáveis. Com relação aos resultados, verificou-se 1.384 cães positivos para pesquisa de anticorpos anti-Leishmania e 13 seres humanos com LVA. Dos cães com LVC, 51,8% eram machos, 65,5% sem raça definida, 67,3% de porte médio e 29,6% tinha idade entre 7 e 12 meses. O tempo médio de espera do diagnóstico laboratorial da Leishmaniose Visceral Canina foi de 49,7 dias e a taxa de ocorrênciade LVC no município foi de 2,97%, com presença da enfermidade em 15 dos 16 setores. Dos seres humanos com LVA, 76,9% eram do gênero masculino e a idade variou de 1 a 76 anos. A incidência no período estudado foi de 13,8/100.000 hab. e taxa de letalidade de 30,8%. Observou-se que em dez setores do município ocorreram casos de LVA. Houve correlação positiva (r=0,963) entre os casos de Leishmaniose Visceral Canina e Leishmaniose Visceral Americana e baixa correlação (r=0,033) entre a taxa de ocorrência de LVC e o coeficiente... . / American Visceral Leishmaniasis (AVL) or Kalazar, is one antropozoonosis caused by the protozoan Leishmania (L.) chagasi, it is transmitted by the bites of phlebotomous mosquitoes. The dog is the main reservoir to humans and other dogs. The objectives of this work was: to determine the canine visceral leishmaniasis (CVL) and AVL spatial distribution in the City of Birigui, São Paulo State, Brazil, during 1998 thru 2003; to locate, spacially, the CVL and AVL cases; and to evaluate the spatial relation between CVL and AVL occurrence. An epidemiological data search was carried through for the dogs and human in the City Department of Health. The AVL and CVL occurrence data was spacially distributed in the city map, subdivide in 16 sectors, following the Dengue National Combat Program criteria. The Pearsonþs correlation test was used for the variable association. About the results, was verified 1,384 positive dogs for anti-Leishmania antibodies tests, and 13 human with AVL. The dogs with CVL, 51.8% were male, 65.5% without defined race, 67.3% of medium size and 29.6% had age between 7 and 12 months. The average of time to wait the laboratorial diagnosis on CVL was of 49,7 days and the CVL occurrence rate 2,97%, with disease presence in 15 of the 16 sectors. About the human with AVL, 76.9% they were male and the age varied of 1 thru 76 years. The incidence rate in the period was 13,8/100.000 hab. And the lethality was 30,8%. It was observed that in ten sectors of the city had occurred AVL cases. It had positive correlation (r=0,963) between the CVL cases and AVL, and low correlation (r=0,033) between the CVL occurrence and the AVL incidence. It was concluded that the AVL and CVL cases are spacially distributed in all city. The same model, applied in this study, can be used by other cities that has occurrence of AVL and CVL, to assist in the strategies for the control of this important zoonosis.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-05-02T23:09:42Z No. of bitstreams: 1 MarcosAntonioOliveiraFilho_DISSERT.pdf: 2485074 bytes, checksum: fccf471f4339887f4eea52949d0b5005 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-05-07T22:42:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarcosAntonioOliveiraFilho_DISSERT.pdf: 2485074 bytes, checksum: fccf471f4339887f4eea52949d0b5005 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T22:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarcosAntonioOliveiraFilho_DISSERT.pdf: 2485074 bytes, checksum: fccf471f4339887f4eea52949d0b5005 (MD5) Previous issue date: 2018-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O antígeno 503, uma proteína encontrada na forma amastigota de Leishmania i. chagasi, possui potencial para utilização em vacinas e testes para diagnóstico específico da leishmaniose visceral. No entanto, um problema intrínseco à purificação de proteínas expressas em E. coli é a presença de endotoxinas (LPS), componente da parede celular de bactérias gram-negativas, que provoca resposta imune quando em contato com células de defesa humana. Os sistemas aquosos bifásicos (SABs) vêm sendo utilizados na purificação de biomoléculas por apresentar vantagens como eliminar a etapa de clarificação, concentrar e purificar a molécula alvo e, no presente estudo, efetuar a remoção parcial do LPS, durante o protocolo de purificação. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os SABs baseados em polietilenoglicol (PEG 1500) e etanol com sais (fosfato de potássio dibásico (K2HPO4) e sulfato de amônio ((NH4)2SO4)) e acetonitrila com glicose na recuperação e purificação parcial do antígeno 503 de Leishmania i. chagasi expresso em E. coli M15 com remoção simultânea de LPS. Inicialmente, foram obtidas as curvas binodais, pelo método de titulação por ponto de nuvem a temperatura ambiente (25 ± 2 ºC) a fim de determinar as concentrações de trabalho dos componentes dos sistemas avaliados. Esses dados experimentais também foram usados para os cálculos dos parâmetros da equação proposta por Merchuk, e obtenção do comprimento das linhas de amarração – tie lines length (TTL). Definindo-se a composição dos sistemas, aplicou-se 20% de homogeneizado celular de E. coli nos SABs, observou-se que o sistema que mais favoreceu a recuperação e concentração do antígeno 503 foi o constituído por PEG 1500 e K2HPO4, atingindo um fator de purificação de 1,55 e percentual de recuperação de 116,96% na fase de topo, nas condições de 30% de PEG 1500 e 10% de sal (m/m). A remoção de LPS foi promissora para todos os sistemas avaliados, se mantendo acima de 90,0%. O ensaio que apresentou melhor purificação também se destacou na remoção desse contaminante, atingindo 99,90% de LPS removido. Deste modo, os SABs podem ser empregados como etapa precedente à cromatografia para remoção de elevadas concentrações de LPS e aumentar o grau de pureza de proteínas recombinantes expressas em E. coli. / The antigen 503, a protein found in the amastigote phase of Leishmania i. chagasi, can integrate vaccines and specific diagnosis assays for visceral leishmaniasis (VL). However, a problem on the purification of proteins expressed in E. coli is the presence of endotoxins (LPS), natural compound of gram-negative bacterial expression systems, which triggers immune response in human body and interacts with the proteins impairing possible chromatography steps. To solve this problem, Aqueous Two-phase Systems (ATPS) can be employed with the advantages of eliminate clarification steps on the whole process, indeed it also concentrates the molecule of interest and reduces the concentration of LPS, preparing the product for a more efficient adsorption in the following steps. Thus, the present work aimed evaluate ATPS based on Polyethylene glycol (PEG 1500) /Salt, Ethanol/Salt (K2HPO4 and (NH4)2SO4) and Acetonitrile/Dextrose on the partial purification of antigen 503 expressed in recombinant E. coli M15 and simultaneous removal of LPS. For that, firstly, binodal curves of these systems were constructed by cloud point titration method at room temperature (25 ± 2 ºC) in order to determine the concentrations of each evaluated system. The parameters of the equation purposed by Merchuk were calculated by these experimental data and the Tie-Line Lengths (TLL) were obtained. When 20% of cell homogenate from E. coli was applied, the system which exhibited the best results was 30% PEG 1500 and 10% K2HPO4 (m/m) achieving 116,96% of recuperation and 1,55 of purification factor (assay P3). The removal of endotoxins was promising for all the systems evaluated, as it was kept above 90,0%. The assay P3 also stood out for the LPS removal, being able to remove 99,90%. Thus, ATPS can be a precedent step to the chromatography for the removal of high LPS concentration and grow the purity of recombinant proteins from E. coli.

Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: David Luciano Rosalen / Banca: Karina Paes Bürger / Banca: Caris Maroni Nunes / Resumo: Dentre as zoonoses que têm a participação de cães na sua transmissão, merecem destaque a leptospirose e a leishmaniose visceral, presentes em todas as regiões do Brasil. No Estado de São Paulo a leptospirose é endêmica e a ocorrência de leishmaniose visceral vem apresentando aumento significativo. No Distrito de Córrego Rico, Jaboticabal/SP, é grande o número de cães soltos nas ruas e de roedores que invadem as residências. Há relato, na literatura, de um cão reagente à leishmaniose visceral. Recentemente, em 2011, um jovem veio a óbito por leptospirose. Diante desses fatos, o presente estudo teve como objetivo realizar uma avaliação sorológica das duas enfermidades em cães de Córrego Rico e identificar fatores predisponentes ou relacionados à sua ocorrência. Para tanto, as residências que abrigam cães foram visitadas, aplicou-se um questionário semi-estruturado para levantamento de informações que permitissem avaliar as condições gerais de posse e saúde de cada animal, com entrega de panfleto educativo. Amostras de sangue foram obtidas de 274 cães para serem submetidas à prova de soroaglutinação microscópica (SAM) frente a 24 sorovares de Leptospira spp. Vinte e duas amostras mostraram-se reagentes com títulos 1:100, sendo os sorovar butembo, seguido pelo autumnalis, bratislava e pyrogenes os mais frequentemente encontrados. As mesmas amostras passaram por avaliação de anticorpos contra Leishmania chagasi, por meio das técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA). Pela imunofluorescência, duas amostras mostraram-se positivas. Já no teste ELISA, todas as amostras testadas foram negativas. A Análise Multivariada permitiu identificar fatores locais que podem estar relacionados com a ocorrência de leptospirose. Embora não tenha sido detectado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Among the zoonosis transmitted by dogs in Brasil, leptospirosis and visceral leishmaniosis can be found throughout the country. In São Paulo state, leptospirosis is endemic and the occurrence of visceral leishmaniosis is significantly increasing. In the district of Córrego Rico, Jaboticabal/SP, there is a large number of free roaming dogs and homes that are invaded by rodents, and according to the literature, dogs have also tested positive for leishmaniosis in that region. Recently, in 2011, a fatal human case of leptospirosis was reported. This study was conducted to evaluate the serological response of both diseases in the above mentioned district and to identify predisposing factors that could be related to their occurrence. The households with dogs were visited and a questionnaire was filled to compile the information and evaluate the general conditions of dog health and ownership. An educational folder was also distributed to each participant. Blood samples of 274 dogs were submitted to microscopic serum agglutination (SAM) to 24 serotypes de Leptospira spp. Twenty tow samples were positive with titers 1:100. The serotypes butembo, followed by autumnalis, bratislava and pyrogenes were the most commonly found. The blood samples were also evaluated against Leishmania chagasi antibodies using indirect immunoflourescence (IFI) and ELISA. Two samples were positive based on IFI and all tested negative by the ELISA. The multivariate statistical analysis was able to identified local factors related to the incidence of leptospirosis. There were no findings on positive seroconversion of leishmaniosis and the reagents to leptospirosis were 8,0%. However, this study clearly shows the importance of the population control of dogs and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre