Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-10-09. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:37Z : No. of bitstreams: 1 000830930_20161009.pdf: 528336 bytes, checksum: 2584c6b09449ed93f647987c98b7c1c6 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-10-10T12:18:28Z: 000830930_20161009.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-10-10T12:19:00Z : No. of bitstreams: 1 000830930.pdf: 2248627 bytes, checksum: accddf23493d2bfab5e3f401310fb7d7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Alterações epigenéticas, incluindo as alterações da metilação do DNA, das modificações de histonas e da atividade de RNAs não codificadores, são eventos frequentes em células tumorais e estão associados às mudanças da estrutura da cromatina e dos níveis de expressão gênica. O gene RASSF1, localizado em 3p21.3, é responsável pela transcrição de sete variantes a partir de regiões promotoras distintas, associadas a duas ilhas CpG. Dentre os transcritos estão RASSF1A e RASSF1C, codificados por regiões promotoras diferentes, e que têm sido descritos na literatura como codificadores de proteínas com funções celulares opostas: RASSF1A é caracterizado como supressor tumoral e é frequentemente silenciado por metilação anormal em vários tipos de câncer, enquanto RASSF1C tem sido associado a atividades oncogênicas, e não há relatos de metilação de ilha CpG associada à sua região promotora. Com a finalidade de investigar uma possível associação entre parâmetros clínicos e histopatológicos em pacientes diagnosticadas com câncer de mama e o padrão de metilação de RASSF1A e RASSF1C, foram analisadas 84 amostras de carcinomas mamários pela técnica de MS-PCR (Methylation-Specific Polymerase Chain Reaction). Para RASSF1A, foi encontrada uma frequência de metilação de 84,5% das amostras, enquanto que para RASSF1C todas as amostras apresentaram alelos exclusivamente não-metilados, o que sugere uma regulação de expressão diferente da observada para RASSF1A. Devido ao fato de 75 das 84 amostras utilizadas serem diagnosticadas como carcinomas ductais invasivos, as análises estatísticas incluíram apenas esse subtipo histológico. Não foi encontrada diferença estatística significativa para as características clínicas/histopatológicas e presença/ausência de metilação de RASSF1A. Foi também analisado o padrão de metilação das ilhas CpGde RASSF1 em 17 linhagens celulares derivadas de carcinomas ... / Alterações epigenéticas, incluindo as alterações da metilação do DNA, das modificações de histonas e da atividade de RNAs não codificadores, são eventos frequentes em células tumorais e estão associados às mudanças da estrutura da cromatina e dos níveis de expressão gênica. O gene RASSF1, localizado em 3p21.3, é responsável pela transcrição de sete variantes a partir de regiões promotoras distintas, associadas a duas ilhas CpG. Dentre os transcritos estão RASSF1A e RASSF1C, codificados por regiões promotoras diferentes, e que têm sido descritos na literatura como codificadores de proteínas com funções celulares opostas: RASSF1A é caracterizado como supressor tumoral e é frequentemente silenciado por metilação anormal em vários tipos de câncer, enquanto RASSF1C tem sido associado a atividades oncogênicas, e não há relatos de metilação de ilha CpG associada à sua região promotora. Com a finalidade de investigar uma possível associação entre parâmetros clínicos e histopatológicos em pacientes diagnosticadas com câncer de mama e o padrão de metilação de RASSF1A e RASSF1C, foram analisadas 84 amostras de carcinomas mamários pela técnica de MS-PCR (Methylation-Specific Polymerase Chain Reaction). Para RASSF1A, foi encontrada uma frequência de metilação de 84,5% das amostras, enquanto que para RASSF1C todas as amostras apresentaram alelos exclusivamente não-metilados, o que sugere uma regulação de expressão diferente da observada para RASSF1A. Devido ao fato de 75 das 84 amostras utilizadas serem diagnosticadas como carcinomas ductais invasivos, as análises estatísticas incluíram apenas esse subtipo histológico. Não foi encontrada diferença estatística significativa para as características clínicas/histopatológicas e presença/ausência de metilação de RASSF1A. Foi também analisado o padrão de metilação das ilhas CpGde RASSF1 em 17 linhagens celulares derivadas de ...

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-15. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:37Z : No. of bitstreams: 1 000831296_20150915.pdf: 712631 bytes, checksum: c611834a7a54c590d534dbfa5c08e1dc (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-15T11:21:48Z: 000831296_20150915.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-15T11:22:39Z : No. of bitstreams: 1 000831296.pdf: 1949173 bytes, checksum: beeb683c24b9380e93e17d2eaac28060 (MD5) / O gene SFN (stratifin; 14-3-3sigma) atua como um gene supressor tumoral cuja expressão é induzida em resposta a danos ao DNA, promovendo o bloqueio do ciclo celular no checkpoint G2/M. A inativação ou redução da expressão gênica por hipermetilação de sua ilha CpG foi apontada como um mecanismo comum a vários tipos de cânceres humanos e também foi associada com resposta ao tratamento. O objetivo desse estudo foi caracterizar alterações genéticas e epigenéticas do gene SFN em carcinomas mamários primários e investigar a sua relação com parâmetros clínicos e histopatológicos. Em adição, linhagens derivadas de epitélio mamário normal e de carcinomas mamários foram utilizadas para a caracterização do efeito do número de cópias e do padrão de metilação do DNA na expressão gênica e para o estudo do efeito combinado do tratamento com o agente desmetilante 5-Aza-dC (5-Aza-2'-Desoxicitidina) e da exposição à radiação nas taxas de sobrevivência celular. O padrão de metilação do DNA foi determinado por MS-PCR (Methylation Specific-Polimerase Chain Reaction), após modificação do DNA por bissulfito de sódio, em uma série de 84 carcinomas mamários (76 ductais infiltrantes, 5 lobulares infiltrantes, 1 metaplásico, 1 apócrino e 1 papilífero) , bem como em um painel de 20 linhagens celulares (3 normais e 17 derivadas de carcinomas). O número de cópias foi determinado por qPCR (quantitative Polimerase Chain Reaction) em 82 destas amostras. Os níveis de expressão do transcrito foram avaliados por RT-qPCR em 8 linhagens celulares selecionadas com base no número de cópias, padrão de metilação e o status da proteína p53. O efeito da exposição à radiação ionizante, em uma única dose de 4 Gy em intervalos de tempo de 12, 24, 48 e 72h foi estudado através do ensaio de MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) em três linhagens celulares (T47D, MDA-MB-231 e MDA-MB-436) ... / The SFN gene (Stratifin; 14-3-3 sigma) plays roles as a tumor suppressor gene and its expression is induced in response to DNA damage by disabling the cell cycle arrest at the G2/M checkpoint. Inactivation or down-regulation of gene expression levels has been generally attributed to the hypermethylation of its CpG island, identified as a common mechanism in a variety of human cancers, also associated to treatment response. The aim of the present study was to characterize epigenetics and genetics alterations of the SFN gene in primary breast cancer and to investigate the relationship with clinical and histopatological variables. In addition, cell lines derived from normal breast and breast cancer tissues, were employed to identify the effect of copy number dosage and DNA methylation pattern in gene expression, besides the study of combined response to 5-Aza-dC (5-Aza-2'-Deoxycytidine) and radiation exposure on cell survival. After sodium bisulfite modification, the DNA methylation pattern was determined by Methylation-Specific Polymerase Chain Reaction (MS-PCR) in a series of 84 Breast cancer samples (76 infiltrating ductal carcinomas, 5 infiltrating lobular, 1 metaplasic, 1 apocrine and 1 papillary) as well as in a panel of 20 human cell lines (3 derived from normal breast and 17 from breast cancer). SFN copy number was performed using relative quantification, by qPCR (quantitative Polimerase Chain Reaction) in 82 samples. Transcript levels were evaluated by RT-qPCR within a selection of 8 cell lines, based on DNA methylation, SFN copy number dosage and p53 status. Ionizing radiation effect was studied through MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay, by using a single dose of 4 Gy at different time intervals (12, 24, 48 and 72h) in tree cell lines (T47D, MDA-MB-231 e MDA-MB-436) treated or not with 5-Aza-dC. SFN methylation was observed in 79% of primary breast cancer, while copy number alterations ...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-08. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:18Z : No. of bitstreams: 1 000842360_20151108.pdf: 387370 bytes, checksum: 631e8b48aea68bc38f5c085f7c65b648 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-11-10T12:03:46Z: 000842360_20151108.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-11-10T12:04:32Z : No. of bitstreams: 1 000842360.pdf: 1540751 bytes, checksum: fdf8249df089cc2e3eb6a81bba6c7dc5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O câncer de mama é uma das maiores causas de morte dentre as mulheres, seguido pelo câncer de colo de útero. Os tratamentos geralmente utilizados são extremamente agressivos e na maioria das vezes causando efeitos deletérios as células do hospedeiro. Os macrófagos são as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunológica propriamente dita, são células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, espécies reativas de nitrogênio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunológica e/ou inflamatória. Qualea grandiflora Mart (Q. grandiflora) da família Vochysiaceae é uma planta do cerrado brasileiro, utilizada na medicina popular no tratamento de úlceras, gastrites, amebíase, diarréia com sangue, cólicas intestinais e inflamações. Estudos realizados anteriormente em nosso laboratório demonstraram que espécies de Qualea sp. apresentou atividade antitumoral in vitro extremamente seletiva para tumor de mama murino (linhagem LM3) e ainda apresenta características anti-inflamatórias através da inibição expressiva da produção dos mediadores imunológicos NO, IL-1 e IL-12 pelos macrófagos peritoneais murinos ativados com LPS. A partir destes resultados, propusemos avaliar neste trabalho uma forma alternativa de tratamento contra o câncer de mama experimental empregando-se um extrato bruto (EH), uma fração terpênica (FT) derivada do extrato hexânico de Q. grandiflora e a substância isolada β-sitosterol (BS), em modelo experimental de Ehrlich concomitante à avaliação dos efeitos imunológicos das substâncias testadas, no animal. Como droga padrão dos experimentos realizados, utilizou-se o Taxol® (Paclitaxel- TX). Foi determinado in vitro a citotoxicidade celular de células do exsudado peritoneal de camundongos e células tumorais de Ehrlich, após incubação com os diferentes tratamentos pela técnica de MTT, analise da angiogênese pela dosagem... / Breast cancer is a leading cause of death among women, followed by cervix cancer. The treatments normally used are highly aggressive, and most often causing deleterious effects on host cells. Macrophages are the first cells to be activated to participate in an immune response itself, cells are able to secrete more than hundred biologically active products, among these, reactive nitrogen species and cytokines that act in the context of immune and / or inflammatory. Qualea grandiflora Mart (Q. grandiflora) family Vochysiaceae is a plant of the Brazilian Cerrado, used in folk medicine in the treatment of ulcers, gastritis, amebiasis, bloody diarrhea, intestinal cramps and inflammation. Previous studies in our laboratory have shown that species Qualea sp. showed in vitro antitumor activity extremely selective murine breast tumor (line LM3) and also has anti-inflammatory characteristics by the significant inhibition of the production of immune mediators NO, IL-1 and IL-12 by murine peritoneal macrophages activated with LPS. From these results, we propose to evaluate this work an alternative form of treatment for breast cancer by employing a crude extract (EH), a fraction terpene (FT) derived from the hexane extract of Q. grandiflora and substance isolated β-sitosterol (BS) in an experimental model of Ehrlich concomitant evaluation of the immunological effects of the tested substances in the animal. As standard drug of experiments, we used Taxol ® (Paclitaxel-TX). It has been determined in vitro cytotoxicity of peritoneal exudate cells of mice and Ehrlich tumor cells after incubation with the different treatments using the technique of MTT analysis of VEGF angiogenesis by measuring the ocorência apoptosis in tumor cells by techniques Tunel and annexin V as well as the inhibition of nitric oxide (NO) and TNF-α, IL-1, IL-12 and IL-6. In addition, it was determined the rate of in vivo tumor inhibition and histological analysis by light ...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:17Z : No. of bitstreams: 1 000845406.pdf: 1146282 bytes, checksum: 60f04846ef59edc815960a1c18e29bf7 (MD5) / A inflamação é um componente crítico para a progressão de tumores e sua malignidade está correlacionada com a resposta inflamatória induzida por citocinas e leucócitos infiltrados no sítio tumoral. O presente estudo teve por objetivo caracterizar, por imuno-histoquímica, o infiltrado inflamatório e citocinas pró e anti-inflamatórias nos carcinomas mamários caninos e determinar a identidade molecular dos tumores em luminal A ou B, C-erbb-2 ou basal. Para isso fez-se a imunodetecção de macrófagos, linfócitos (CD4, CD8, Treg), citocinas (MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β e IFN-ɣ), além de C-erbb-2, receptor de estrógeno e receptor de progesterona e avaliou-se as médias das imunomarcações por meio do Teste T e análise de variância nos tecidos mamários com ou sem carcinomas. Houve diferença estatística (p<0,0001) entre o grupo controle e o grupo de animais com carcinoma mamário simples em todos os parâmetros avaliados, apresentando aumento nas médias de animais acometidos por neoplasias. Quando ocorreu a divisão por tipo histológico, todos os anticorpos apresentaram diferença com o grupo controle (p<0,0001). Os carcinomas mamários simples (tubulares e papilares) apresentaram aumento na contagem de macrófagos, linfócitos T, linfócitos T auxiliares, T regulatórios, assim como, aumento na imunomarcação das citocinas MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β em comparação ao grupo controle. Os carcinomas mamários sólidos tiveram menor detecção de macrófagos e das subpopulações de linfócitos T, bem como de IFN-ɣ, IL-4 e TGF-β, possivelmente por um menor estímulo do sistema imune como mecanismo de evasão. Os macrófagos e linfócitos T CD4, bem como a citocina IL-10 foram predominantes no padrão tubular. Os carcinomas mamários caninos apresentam um perfil celular e de citocinas com ação pró-tumor, favorecendo seu crescimento e metástase. Na identificação molecular os tumores basais apresentaram menor... / Inflammation is a critical component of tumor progression and its malignancy is correlated with the inflammatory response induced by cytokines and infiltrating leukocytes in the tumor site. This study aimed to characterize, by immunohistochemistry, the inflammatory infiltrate and pro- and anti-inflammatory cytokines in canine mammary carcinomas and determine the molecular identity of tumors in luminal A or B, C-erbB-2 or basal. For this, we made immunodetection of macrophages, lymphocytes (CD4, CD8, Treg), cytokines (MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β and IFN-ɣ), further on c-erbB-2, estrogen receptor and progesterone receptor and evaluated the average of immunostainings through the T test and analysis of variance in the breast tissue with or without carcinomas. There was statistical difference (p <0.0001) between the control group and the group of animals with simple breast carcinoma in all parameters, an increase in average animal affected by cancer. When the split occurred by histological type, all antibodies showed differences with the control group (p <0.0001). Simple breast carcinoma (papillary and tubular) showed increased macrophage counts, T lymphocytes, T helper lymphocytes, regulatory T as well as increase in the immunostaining of the cytokines MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β compared to control group. The solid breast carcinomas have had a decreased of macrophages and subsets of T lymphocytes and IFN-ɣ, IL-4 and TGF-β, possibly for less stimulation of the immune system as evasion mechanism. The macrophages and T CD4 + lymphocytes and IL-10 cytokine were prevalent in the tubular pattern. The canine mammary carcinomas have a cell profile and cytokines with pro-tumor action, favoring their growth and ...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2014-08-13T17:59:55Z : No. of bitstreams: 1 000768745_20150228.pdf: 448138 bytes, checksum: faf4d96fde034b88f626e7ee07ca5d97 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-03-03T12:45:12Z: 000768745_20150228.pdf,Bitstream added on 2015-03-03T12:45:54Z : No. of bitstreams: 1 000768745.pdf: 2035607 bytes, checksum: 73f59485b964f852ae8fb14f7dc26946 (MD5) / O crescimento, a maturação e a manutenção estrutural e funcional da próstata são eventos hormônio-dependentes, principalmente de andrógenos, e alterações endócrinas no período crítico de desenvolvimento prostático poderão causar efeitos adversos sobre a próstata, inclusive câncer. Bisfenol A (BPA) é um desregulador endócrino, presente em embalagens de alimentos e detectado em praticamente todos os fluidos humanos, capaz de alterar o desenvolvimento do trato reprodutivo de ratos machos por meio de exposição gestacional/pré-natal. A genisteína (GEN), um fitoestrógeno da soja, mostrou propriedades quimiopreventivas contra carcinogênese em roedores. Este estudo objetivou avaliar se a exposição gestacional ao BPA causa efeitos deletérios precoces e tardios sobre a morfogênese prostática da prole de machos Sprague-Dawley, e se a exposição concomitante à GEN modificaria estes efeitos deletérios. Fêmeas prenhes foram divididas em grupos que receberam BPA (25 ou 250 μg/kg p.c.) ou dimetilsulfóxido (DMSO – grupo controle)/óleo de canola, por gavage e dieta basal ou contendo GEN (250 μg/kg). A prole recebeu apenas ração basal e foi eutanasiada nos dias pós-natal (DPN) 21 ou 180. A exposição gestacional à menor dose de BPA induziu alterações prostáticas precoces e tardias. A ingestão gestacional de GEN reverteu os efeitos deletérios do BPA sobre os níveis de proliferação celular no epitélio prostático, a arquitetura prostática e a expressão de receptores androgênicos na prole no DPN 21. Um aumento na incidência de inflamação multifocal e de hiperplasia prostática atípica foi observado na prole, no DPN 180, das mães tratadas com a menor dose de BPA, enquanto a ingestão gestacional de GEN atenuou estes efeitos. Desta forma, os resultados do presente estudo indicam que a ingestão de GEN durante a gestação tem ação preventiva contra efeitos adversos do BPA sobre a próstata da prole

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-26Bitstream added on 2014-11-10T11:57:54Z : No. of bitstreams: 1 000790294_20150101.pdf: 1339495 bytes, checksum: 9608cd234e360d7d9834c3e9a30bffc6 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-01-05T11:00:52Z: 000790294_20150101.pdf,Bitstream added on 2015-01-05T11:01:49Z : No. of bitstreams: 1 000790294.pdf: 4234145 bytes, checksum: f0880c0e8a8108d6d7a6801648e5a50a (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-12T12:00:45Z: 000790294_sub.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T12:01:20Z : No. of bitstreams: 1 000790294.pdf: 2780767 bytes, checksum: 07f6082eb9b1ea8f07a04e4c107bdeac (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de mama apresenta altas taxas de incidência e mortalidade, sendo a neoplasia mais comum entre as mulheres. O rápido crescimento do tumor resulta em hipóxia no microambiente tumoral, levando a uma cascata de eventos que induzem a angiogênese e conseqüente progressão do câncer. Assim, a identificação de agentes terapêuticos que possam inibir a angiogênese é essencial para o controle da progressão tumoral. Nesse sentido, tem sido demonstrado que a administração exógena da melatonina, um hormônio naturalmente secretado pela glândula pineal, apresenta diversos efeitos oncostáticos em diferentes tipos de câncer. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a efetividade do tratamento com melatonina sobre a angiogênese do câncer de mama, em estudos in vitro e in vivo. No estudo in vitro, as linhagens de câncer de mama MCF-7 e MDA-MB-231 foram tratadas com melatonina sob condições de hipóxia mimetizadas pelo Cloreto de Cobalto (CoCl2). A viabilidade celular foi verificada pelo ensaio MTT, a expressão do fator de transcrição induzido por hipóxia (HIF-1α) e do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF-A) foi avaliada por PCR em tempo real e imunocitoquímica. Além disso, demais proteínas envolvidas na angiogênese foram avaliadas por Protein Array. No estudo in vivo, as células MDA-MB-231 foram implantadas em camundongos nude atímicos, os quais foram tratados com melatonina (40 mg/kg) por 21 dias. O tumor foi medido semanalmente e a avaliação da angiogênese foi realizada pela técnica de tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), com o radiotraçador Tc- 99m-HYNIC-VEGF-c, agente específico para os receptores de VEGF (VEGFR2/VEGF3). Além disso, as proteínas VEGFR2, VEGFR3, fator de fator de von Willebrand (vWF) e marcador de proliferação celular (Ki-67) foram avaliados no tecido tumoral por imuno-histoquímica, e demais proteínas angiogênicas por Protein Array. O estudo in ... / Breast cancer has high rates of incidence and mortality, and it is the most common cancer among women. The rapid tumor growth results in hypoxia on tumor microenvironment, leading to a cascade of events that induce angiogenesis and subsequent cancer progression. Thus, the identification of therapeutic agents that can inhibit angiogenesis is essential for the control of tumor progression. Exogenous administration of melatonin, a hormone secreted by the pineal gland, has been shown several oncostatics effects on different types of cancers. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of melatonin treatment on angiogenesis in breast cancer, in the in vitro and in vivo studies. In the in vitro study, breast cancer cell lines (MCF-7 and MDA-MB-231) were treated with melatonin under cobalt chloride (CoCl2)-induced hypoxic conditions. Cell viability was measured by MTT assay, the expression of hypoxia-inducible factor 1-alpha (HIF-1α) and vascular endothelial growth factor (VEGF-A) was assessed by real-time PCR and immunocytochemistry. Additionally, other proteins involved in angiogenesis were evaluated by the Protein Array. In the in vivo study, the MDA-MB-231 cells were implanted in athymic nude mice, which were treated with melatonin (40 mg/kg) for 21 days. The tumor was measured weekly and evaluation of angiogenesis was performed by single-photon emission computed tomography (SPECT) with Tc-99m-HYNIC-VEGF-c, which is specific for VEGF receptors (VEGFR2/VEGF3). Moreover, VEGFR2, VEGFR3, von Willebrand factor (vWF) and cell proliferation marker (Ki-67) were evaluated in tumor tissue by immunohistochemistry, and other angiogenic proteins by Protein Array. Results from the in vitro study showed that 1 mM of melatonin under hypoxic conditions (200 μM CoCl2) led to decreased cell viability, protein levels of HIF- 1α and gene and protein expression of VEGF-A in both cell lines (p < 0.05). Among other proteins evaluated, melatonin ...

Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20Bitstream added on 2014-12-02T11:21:28Z : No. of bitstreams: 1 000799149.pdf: 16911809 bytes, checksum: 5ae0f4f9ce082f48f090a3e32c1d47fb (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O câncer de mama representa a neoplasia mais comum entre as mulheres, sendo classificado como o segundo mais frequente no mundo. O crescimento do tumor requer a formação de novos vasos que são estimulados por fatores angiogênicos e seus receptores. As células neoplásicas são capazes de modificar seu fenótipo para promover alterações funcionais e estimular a produção de proteínas envolvidas na angiogênese. A curcumina, componente do extrato de Curcuma longa L, é utilizada como alimento e na medicina tradicional, no entanto algumas evidências indicam que esse extrato possui ação oncostática em diferentes tipos de câncer. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com curcumina na progressão tumoral e angiogênese em modelo experimental de câncer de mama. Células da linhagem de câncer de mama receptor triplo negativo (MDA-MB-231) foram cultivadas e a taxa de viabilidade celular verificada pelo ensaio MTT após tratamento com diferentes doses de curcumina. Para o estudo in vivo, as células foram implantadas em camundongos nude atímicos, os quais foram aleatoriamente divididos em animais tratados (n = 5) e controles (n = 8). Os animais receberam diariamente 300 mg/kg de curcumina ou veículo administrados intraperitonealmente durante 21 dias, cinco vezes por semana. O tamanho do tumor foi avaliado semanalmente com paquímetro digital. Ao final do tratamento, a angiogênese foi verificada in vivo pela técnica de tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), com o radiotraçador Tc-99m acoplado a proteína recombinante VEGF-c, que possui afinidade pelos receptores VEGFR2/3. Além disso, a expressão de VEGF-A, VEGF-C, VEGFR2/3, marcador de proliferação celular (Ki-67) e o fator de Von Willebrand (vWF) foram verificados pelo procedimento imuno-histoquímico. No estudo in vitro, houve diminuição da taxa de viabilidade das células tratadas com curcumina, quando comparadas ... / Breast cancer is the most common cancer in women being rated as the second most common in the world. Tumor growth requires the formation of new vessels that are stimulated by angiogenic factors and their receptors. The neoplastic cells are able to modify their phenotype to promote functional changes and stimulate the production of proteins involved in angiogenesis. Curcumin, a component of the extract of Curcuma longa L, is used both as food and in traditional medicine, however some evidence indicates that this extract has oncostatic effects in different types of cancer. The aim of this study was to evaluate the effects of treatment with curcumin in tumor progression and angiogenesis in an experimental model of breast cancer. The cell line of human breast cancer (MDA-MB-231) was cultured and the rate of cell viability was measured by MTT assay after treatment with different doses of curcumin. For in vivo study, the cells were implanted in female athymic nude mice, which were randomly divided into treated (n = 5) and control animals (n = 8). The animals received daily 300 mg/kg of curcumin or vehicle daily, starting in the same day as tumor implantation and continued for 21 days five times per week. Tumor size was measured weekly with a digital caliper. The end of treatment, angiogenesis was assessed in vivo by the technique of computed tomography single photon emission tomography (SPECT) with the radiotracer Tc-99m-HYNIC-VEGF-c protein coupled recombining, which has affinity for VEGFR2/3. Furthermore, the expression of VEGF-A, VEGF-C e VEGFR2/3 marker of cell proliferation (Ki-67) and von Willebrand factor (vWF) receptors were verified by immunohistochemical. Curcumin treatment in vitro was able to significantly decrease cell viability (p < 0.05) Animals treated with curcumin showed less tumor volume (232.5 ± 53.2 mm 3) compared to control animals (282.0 ± 88.5 mm3), however, no significant difference (p > 0,05). The radioactivity of ...

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-16Bitstream added on 2015-01-26T13:30:37Z : No. of bitstreams: 1 000793042_20160220.pdf: 95696 bytes, checksum: 6438b62215ddf19c908b92f29a7da6a3 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-22T11:12:45Z: 000793042_20160220.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-22T11:13:40Z : No. of bitstreams: 1 000793042.pdf: 404315 bytes, checksum: 6fac64781d4b9c7be4daf0ea672a3846 (MD5) / A avaliação microscópica dos linfonodos em cadelas portadoras de carcinoma de mama pode desempenhar um papel fundamental no direcionamento terapêutico, já que a drenagem linfática representa a via mais comum de metástases. Nos últimos anos tem-se desenvolvido técnicas que oferecem excelente acurácia na remoção dos linfonodos, como a Técnica do Linfonodo Sentinela (TLS), que se baseia no princípio de progressão escalonada na drenagem linfática de neoplasias e que atualmente é o principal fator prognóstico e diagnóstico em mulheres portadoras de carcinomas de mama. O objetivo da pesquisa foi avaliar de forma inédita a acurácia da biópsia do linfonodo sentinela em cadelas portadoras de carcinoma de mama. Foram utilizadas 41 cadelas com diagnóstico citológico do tumor. Após injeção do corante azul patente V, procedeu-se a mastectomia, juntamente com a linfadenectomia (sentinelas e não sentinelas). O material foi submetido a cortes seriados e avaliado microscopicamente pela coloração rotineira de H&E e imuno-histoquímica com os marcadores para pan-citoqueratina AE1/AE3 e células mioepiteliais CK14, que revelou que 46,3% (19/41) dos animais apresentavam metástase nodal. Os valores de sensibilidade e especificidade encontrados para a TLS foram de 89,5% e 100%, respectivamente, com índice kappa igual a 0,90 e p<0,0001. Portanto, a TLS oferece alta sensibilidade no diagnóstico precoce de micrometástases, permitindo maior precisão no estadiamento do paciente oncológico e consequentemente, maiores chances de sobrevida / Microscopic evaluation of lymph nodes in bitches with mammary carcinomas may have fundamental importance in guidance the therapy since lymphatic drainage constitutes the most common route for metastasis. In recent years, several techniques have been used to detect and remove Sentinel Lymph Nades (SLN) based on the principIe of stepwise progression of cancer and lymphatic drainage. In human medicine, SLN biopsy and analysis constitutes the main prognostic factor in women with mammary , carcinomas. This study was designed to evaluate, in an unprecedented manner, the accuracy of sentinel lymph no de biopsy in bitches with mammary carcinomas. Forthyone dogs with no predilection for breed or age, with previous cytological diagnosis of mammary carcinoma were submitted to inoculation of patent blue V dye in peritumoral skin, followed by radical mastectomy and radicallymphadenectomy. Lymphanedectomy included sentinel and non- sentinel lymph nades in order to detect lymph nade metastasis. Both groups were compared in order to determine the accuracy of SLN technique in the detection of node metastasis. The lymph nades were subject to a standard serial sectioning method, stained by routine H&E or submitted to immunohistochemistry using pan-cytokeratins AEl/AE3 and the myoepitelial marker CK14. Nineteen animaIs (46.3%) had nodal metastasis. Sensibility and specificity for SLN technique were 89.5 % and 100 %, respectively, with a kappa value of 0.90 (p<O.OOOl). Therefore, SLN biopsy offers high sensitivity in the early diagnosis of lymph no de metastasis allowing a more accurate clinical staging. These results probably impacts on greater chances of patient survival

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-24Bitstream added on 2015-01-26T13:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000793393_20160630.pdf: 58766 bytes, checksum: 28d73643330edc921da6c93a84455f3d (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-01T13:02:15Z: 000793393_20160630.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:03:14Z : No. of bitstreams: 1 000793393.pdf: 451608 bytes, checksum: d0d0415afd5814c83407f5972fe8d9fc (MD5) / O objetivo do presente estudo foi analisar de forma comparativa o perfil lipídico sérico e de ácidos graxos do tecido adiposo entre cadelas controle e com tumores mamários. Foram utilizados 20 cadelas hígidas, não castradas, sem evidência à palpação de nódulos mamários, e 20 cadelas com neoplasia mamária já sugerida pelo exame de citologia aspirativa por agulha fina. Todos os animais foram submetidos à anamnese geral e específica do histórico nutricional e reprodutivo. Foi realizado o exame físico para a determinação do escore corporal, e no grupo com tumor de mama a classificação clínica (TNM) e o exame histopatológico dos tumores mamários. Para a avaliação do perfil lipídico sérico foi realizada a dosagem do colesterol total e triglicérides. Foi utilizada a cromatografia gasosa para a identificação dos ésteres metílicos dos ácidos graxos do tecido adiposo abdominal das cadelas submetidas à cirurgia. Os ácidos graxos foram expressos em porcentagem da fração lipídica de cada ácido graxo em relação ao conteúdo total de ácidos graxos da amostra de cada animal. Os dois grupos avaliados eram alimentados, em sua maioria (80%), por ração comercial e alimento caseiro. A alimentação caseira, em sua maior parte, era a mesma preparada para os proprietário, em sua maioria foi relatado o uso de óleo de soja e a carne mais fornecida era a bovina. Houve uma número maior de animais que recebiam alimentação caseira preparada com óleo de soja no grupo de cadelas com tumores mamários. Não houve uma associação da obesidade e dos níveis séricos de colesterol total e triglicérides com o risco de desenvolvimento de tumores mamários em cadelas. A quantificação relativa dos níveis de ácido alfa-linolênico (C 18:3) e cis-linoleico (C18:2) não apresentaram diferença quando comparado o grupo controle e com tumor de mama. A relação de ômega-6/ômega-3 no grupo controle foi 21:1 e no grupo com tumor de ... / The aim of this study was to analyze comparatively the lipid profile in serum and fatty acid profile in adipose tissue from dogs with and without mammary tumors. Twenty bitches, all healthy, none spayed, and that had non mammary tumor evidence during palpation (control group) and twenty bitches with mammary tumor, already diagnosed using fine needle aspiration cytology, were used in this study. All animals were submitted to anamnesis, general and specific to nutritional and reproductive history. A physical exam was performed in order to determine the body condition of those animals, and in the group of animals with neoplasia, a clinical (TNM) and a histopathology exam were performed in the tumors. To evaluate the serum lipid profile the triglycerides and total cholesterol were measured. Gas chromatography was used to identify methyl esters from fatty acid obtained from abdominal adipose tissue from the dogs during surgery. All fatty acids were expressed in percentage of lipid fraction of each fatty acid in relation to total content in each sample from each animal. Both groups (80%) were fed with commercial dog food adding homemade food. When homemade food was used, usually it was the same prepared for the human consumption, most of them used soy oil to prepare and beef was the most provided kind of protein. None association between obesity, serum total cholesterol levels and triglycerides increasing the risk of development mammary tumors were observed in this study. Total cholesterol and triglycerides serum levels average had higher values in animals that were overweight or morbid obese. Alfa-linoleic (C 18:3) and cis-linoleic acid (C 18:2) levels did not had any difference when comparing control group and tumor group. The proportion of omega6/omega3 in control group was 21:1 and in tumor group it was 23:1. None correlation was found between the fatty acid profile in the adipose tissue with histopathology classification of tumors and ...

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Sônia Maria Oliani / Banca: Angelo Gustavo Zucca Matthes / Resumo: O câncer de mama representa a neoplasia mais comum entre as mulheres, sendo classificado como o segundo mais frequente no mundo. O crescimento do tumor requer a formação de novos vasos que são estimulados por fatores angiogênicos e seus receptores. As células neoplásicas são capazes de modificar seu fenótipo para promover alterações funcionais e estimular a produção de proteínas envolvidas na angiogênese. A curcumina, componente do extrato de Curcuma longa L, é utilizada como alimento e na medicina tradicional, no entanto algumas evidências indicam que esse extrato possui ação oncostática em diferentes tipos de câncer. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com curcumina na progressão tumoral e angiogênese em modelo experimental de câncer de mama. Células da linhagem de câncer de mama receptor triplo negativo (MDA-MB-231) foram cultivadas e a taxa de viabilidade celular verificada pelo ensaio MTT após tratamento com diferentes doses de curcumina. Para o estudo in vivo, as células foram implantadas em camundongos nude atímicos, os quais foram aleatoriamente divididos em animais tratados (n = 5) e controles (n = 8). Os animais receberam diariamente 300 mg/kg de curcumina ou veículo administrados intraperitonealmente durante 21 dias, cinco vezes por semana. O tamanho do tumor foi avaliado semanalmente com paquímetro digital. Ao final do tratamento, a angiogênese foi verificada in vivo pela técnica de tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), com o radiotraçador Tc-99m acoplado a proteína recombinante VEGF-c, que possui afinidade pelos receptores VEGFR2/3. Além disso, a expressão de VEGF-A, VEGF-C, VEGFR2/3, marcador de proliferação celular (Ki-67) e o fator de Von Willebrand (vWF) foram verificados pelo procedimento imuno-histoquímico. No estudo in vitro, houve diminuição da taxa de viabilidade das células tratadas com curcumina, quando comparadas ... / Abstract: Breast cancer is the most common cancer in women being rated as the second most common in the world. Tumor growth requires the formation of new vessels that are stimulated by angiogenic factors and their receptors. The neoplastic cells are able to modify their phenotype to promote functional changes and stimulate the production of proteins involved in angiogenesis. Curcumin, a component of the extract of Curcuma longa L, is used both as food and in traditional medicine, however some evidence indicates that this extract has oncostatic effects in different types of cancer. The aim of this study was to evaluate the effects of treatment with curcumin in tumor progression and angiogenesis in an experimental model of breast cancer. The cell line of human breast cancer (MDA-MB-231) was cultured and the rate of cell viability was measured by MTT assay after treatment with different doses of curcumin. For in vivo study, the cells were implanted in female athymic nude mice, which were randomly divided into treated (n = 5) and control animals (n = 8). The animals received daily 300 mg/kg of curcumin or vehicle daily, starting in the same day as tumor implantation and continued for 21 days five times per week. Tumor size was measured weekly with a digital caliper. The end of treatment, angiogenesis was assessed in vivo by the technique of computed tomography single photon emission tomography (SPECT) with the radiotracer Tc-99m-HYNIC-VEGF-c protein coupled recombining, which has affinity for VEGFR2/3. Furthermore, the expression of VEGF-A, VEGF-C e VEGFR2/3 marker of cell proliferation (Ki-67) and von Willebrand factor (vWF) receptors were verified by immunohistochemical. Curcumin treatment in vitro was able to significantly decrease cell viability (p < 0.05) Animals treated with curcumin showed less tumor volume (232.5 ± 53.2 mm 3) compared to control animals (282.0 ± 88.5 mm3), however, no significant difference (p > 0,05). The radioactivity of ... / Mestre