CASTRO, Alana Jocelina Montenegro de. Leishmaniose Visceral : avaliação citomorfológica da medula óssea e correlação com a gravidade da doença. 2011. 70 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-20T12:38:54Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:20:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) Previous issue date: 2011 / The visceral leishmaniasis (VL) is a serious problem of public health in the Latin America and has shown an increase mortality in the Brazil. This is a systemic infectious disease involving the bone marrow, causing many hematologic manifestations. Objetives: to describe LV bone marrow features and correlate cytomorphological findings with peripheral blood parameters and the disease severity: Methodology: It is a retrospective study with gathering clinical and laboratory data of patients attended at three references hospital of Ceará State between june 2001 and August 2010. Were included 126 patients with a LV diagnosis confirmed by detection of the parasite in bone marrow and/or by positive sorology, by rK39. The slides of bone marrow aspiration of all patients were evaluated and the parasite load and the hematologic parameters were determined.The gravity was determined by the risk of death using the scoring system. Results: The age ranged from 5 months to 79 years and 74% were male. The patients from urban area accounted 68,2%. Comorbidities were associated in 31,7% patients. The more frequently finding of bone marrow were moderate/high parasite load (57,2%), dysplasia with predominance of dyserythropoiesis (80,9%), hemophagocytosis (30,1%) and granuloma (22,2%).There was one positive association between parasite load and serious neutropenia, neutrophil <500/mm3 (p=0,04), and hemophagocytosis (p=0,05). In this present study, using the model predictions based on scores was observed that 23,8% were classified as high risk of death. Most patients with a score considered with high risk of death had normocelular bone marrow, parasite load moderate/high, dyserythropoiese and dysgranulopoiese. In relation to the presence of granuloma there was a negative association statistically significant in the patients with high risk of death (p=0,02). The study points to possible diagnostic and prognostic indicators identified in the bone marrow of patients with VL. / A leishmaniose visceral (LV) é um sério problema de saúde pública na América Latina e vem apresentando uma letalidade crescente no Brasil. É uma doença infecciosa sistêmica que envolve a medula óssea, causando várias manifestações hematológicas. Objetivos: Descrever as características da medula óssea na LV e correlacionar os achados citomorfológicos com parâmetros do sangue periférico e com os sinais de gravidade da doença. Metodologia: Trata-se de um estudo retrospectivo, com levantamento dos dados clínicos e laboratoriais de pacientes atendidos em três hospitais de referência no Estado do Ceará, entre junho de 2001 a agosto 2010. Foram incluídos 126 pacientes com diagnóstico de LV, confirmado pela detecção do parasito na medula óssea e/ou pela sorologia positiva, através do rK39. As lâminas dos mielogramas de todos os pacientes foram avaliadas e a carga parasitária e os parâmetros hematológicos foram determinados. A gravidade foi determinada pelo risco de óbito, utilizando sistema de escores. Resultados: A idade variou de 5 meses a 79 anos e 74% eram do gênero masculino. Os pacientes residentes em região urbana representaram 68,2% da casuística. Comorbidades estavam associadas em 31,7% dos pacientes. Os achados mais frequentes da medula óssea foram carga parasitária moderada/alta (57,2%), displasia com predomínio de diseritropoese (80,9%), hemofagocitose (30,1%) e granuloma (22,2%). Houve uma associação positiva entre a carga parasitária com neutropenia grave, neutrófilos <500/mm3 (p=0,04) e hemofagocitose (p=0,05). No presente trabalho, utilizando o modelo de prognóstico baseado em escores, foi observado que 23,8% foram classificados como pacientes com alto risco de óbito (≥ 3). A maioria dos pacientes com escore considerado de alto risco de óbito apresentou medula óssea normocelular, carga parasitária moderada/alta, diseritropoese e disgranulopoese. Em relação à presença de granuloma, houve uma associação negativa, estatisticamente significante, nos pacientes com alto risco de óbito (p=0,02). O estudo aponta para possíveis indicadores diagnósticos e de prognósticos identificáveis na medula óssea de pacientes com LV.

Resumo: Os avanços tecnológicos e metodológicos na biologia molecular criaram a possibilidade de obter DNA de amostras teciduais estocadas em blocos de parafina, alternativa esta que permite estudos retrospectivos de grandes bancos de tecidos, contendo inúmeras doenças raras. A quantidade e a qualidade do DNA obtido são considerados de suma importância para os procedimentos pós-extração e a presença de contaminantes pode inibir a amplificação, especialmente em condições de escassez de DNA. Nosso objetivo é realizar a análise quantitativa e qualitativa do DNA extraído de blocos de parafina de casos de anemia aplásica severa (AAS) e analisar a eficiência/qualidade das técnicas de espectrofotometria tradicional e PCR na mensuração da qualidade e quantidade de DNA. Foram utilizadas 48 amostras de blocos de parafina contendo fragmentos de biópsia de medula óssea, do Serviço de Anatomia Patológica do Hospital de Clinicas da UFPR em Curitiba, nas quais o DNA foi extraído pelo método do fenol-clorofórmio. Os resultados estatísticos levantaram a suspeita da não confiabilidade da técnica de espectrofotometria na avaliação da eficiência do DNA extraído para amplificação e a comparação com os resultados da amplificação por PCR confirmam nossa suspeição. Foi realizado análise de correlação, no sentido de tornar mais evidente esta conclusão, a qual demonstrou a não ocorrência de correlação entre os níveis de pureza e a positividade da amostra (amplificação positiva), com rpb= -0.19. A amplificação por PCR ocorreu adequadamente em 45.85% (22 amplificações em 48 amostras) para o gene HLA-DRB1, sendo considerada satisfatória para o tipo de amostra utilizada, extremamente hipocelular e submetida previamente a protocolos de processamento considerados deletérios ao material genético. O estudo da qualidade e da quantidade de DNA também depende das técnicas de mensuração utilizadas; estas são influenciadas por diversos fatores,e podem distorcer o entendimento dos resultados finais. Concluímos que a análise da qualidade e da quantidade de DNA deve ser ponderada conforme as técnicas que estão sendo utilizadas. Por fim, salienta-se a relevância da natureza da amostra sobre os resultados finais de qualidade e quantidade de DNA mensurado.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-27Bitstream added on 2014-06-13T18:58:30Z : No. of bitstreams: 1 rojas_ac_me_botfm.pdf: 611857 bytes, checksum: 6da0fa6f131c9d3fbd13811bf4e64573 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Clicar acesso eletrônico abaixo. / Click electronic access below.

O propósito deste estudo foi verificar o comportamento inflamatório do tecido osteomedular de ratos quando em contato com agregado de trióxido mineral (MTA Angelus®) ou pasta de moldagem zinco-enólica LS (Vigodent®) adicionada de um tipo de substância radiopacificadora (subnitrato de bismuto ou iodofórmio) e acrescida ou não de hidróxido de cálcio. O grupo controle era constituído por tubos vazios. Os implantes foram inseridos no interior da tíbia e fêmur direitos de cada um dos 51 ratos totalizando 102 amostras. Em cada um dos períodos experimentais de 30, 60 e 90 dias, coletou-se 34 espécimes que, após processamento histotécnico, foram microscopicamente analisados e seus fenômenos julgados com base em um sistema de escores.. Os testes estatísticos de Kruskal-Wallis, Mann Whitney e Dunn, nos permitiram verificar que o reparo aconteceu associado a ambos materiais, embora mais tardio nos grupos com óxido de zinco e eugenol (p=0.05). A adição de um ou outro agente radiopacificador não alterou o caráter inflamatório da pasta e a incorporação de hidróxido de cálcio parece não melhorar seu comportamento biológico(p=0.05). / This study investigated the rat bone marrow healing associated to mineral trioxide aggregate (MTA®- Angelus) or a zinc-oxide impression paste (LS® - Vigodent) added of radiopaque substance (iodoform or bismuth subnitrate) and calcium hydroxide. The control group was composed of empty tubes. The tubes were surgically inserted in the right femur and tibia of 45 rats, resulting in 102 specimens . On each experimental period of 30, 60 and 90 days after surgical implantation, seventeen animal were randomly killed, and had their right leg removed to be fixed, decalcified and embedded in parafin. After histological procedures, the tissue phenomena were examined under light microscope, in a blind way, based on a qualitative scale. The statistical tests showed anticipated repair associated with mineral trioxide aggregate (p&#8805; 0.05). No statistical differences were found between inflammatory behaviour of both radiopaque agents (p&#8805;0.05). The calcium hydroxide powder added to zinc-oxide eugenol sealer seemed not to improve its biological performance (p&#8805;0.05).

Submitted by Leonardo Freitas (leonardo.hfreitas@ufpe.br) on 2015-04-15T14:01:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Juliane Aroxa.pdf: 4664916 bytes, checksum: 0ce7c9ff682c0bc133b9b8e25ba624fd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-15T14:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Juliane Aroxa.pdf: 4664916 bytes, checksum: 0ce7c9ff682c0bc133b9b8e25ba624fd (MD5) Previous issue date: 2013-05-20 / Neste trabalho avaliamos a frequência da detecção de células tumorais em medula óssea, através da biópsia com exame anatomopatológico e técnica de imuno-histoquímica utilizando CK-19, nas pacientes com diagnóstico de câncer de mama, assim como correlacionar os casos positivos com estudo morfológico da medula óssea, com critérios histopatológicos e perfil imuno-histoquímico dos tumores primários. Biópsias de medula óssea foram obtidas de 32 pacientes do sexo feminino com câncer de mama. As amostras foram processadas dentro da rotina para microscopia de luz, coradas pela técnica do H&E, Tricrômico de Gomory e Reticulina, assim como complementada com técnica de imuno-histoquímica utilizando a Citoqueratina 19 como imunomarcador, além de correlacionada com o perfil imuno-histoquímico e características morfológicas do tumor primário. Dentre os nossos resultados a 3% das 32 pacientes tiveram positividade na medula óssea para CK-19 indicando presença de metástases. Foi observada uma relação direta entre a positividade para CK19 e presença de fibrose na medula, podendo este último corresponder a um critério indireto morfológico indicador de infiltração medular. Nenhuma associação foi encontrada entre a positividade da medula e tamanho do tumor primário, receptor de estrógeno e progesterona, expressão de HER2/neu, p53, Ki67, CD 34, além da idade da paciente, etnia, tipo de procedimento cirúrgico, mama acometida e local do tumor. Em nossa série concluímos 3% de positividade para micrometástases, não havendo associação estatística com os critérios de agressividade tumoral como: tamanho do tumor, grau histológico, grau nuclear, receptores hormonais (RE/RP), expressão do HER2/neu, reafirmando os dados da literatura, enfatizando a necessidade de avaliar a medula óssea das pacientes com câncer de mama como procedimento de rotina. A presença de fibrose na medula teve significância estatística, podendo a mesma ser utilizada como critério indireto de avaliação de infiltração medular, sugerindo que os resultados das biópsias foram legítimos, podendo esta técnica ser utilizada na prática clínica para pesquisas de micrometástases na MO.

Orientadores: Mary Luci de Souza Queiroz, Giselle Zenker Justo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavalheri_FernandaHonorato_M.pdf: 15232255 bytes, checksum: 67b072a6243e1de49ef3c87948246310 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Neste trabalho investigamos o efeito imunomodulador do extrato seco da raiz de Echinacea purpurea (EEP) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos da medula óssea e do baço para a série granulócito/macrófago (CFU-GM) de animais infectados com Listeria monocytogenes. A atividade dos fatores estimuladores de colônias do soro, alterações no peso do baço e a resistência dos animais à infecção também foram estudados. Camundongos BALB/c receberam um tratamento prévio por 7 dias, via oral, de EEP nas doses de 100 mg/kg, 300 mg/kg, 750 mg/kg e 1000 mg/kg. Ao final deste período os animais foram infectados intraperitonealmente com uma dose letal de Listeria monocytogenes (lxl06 bactérias/animal) para determinação da curva de sobrevida e com uma dose subletal (lxl03 bactérias/animal) para avaliação dos parâmetros hematopoéticos. Os resultados demonstraram que o EEP administrado previamente aos animais infectados, nas doses de 300, 750, e 1000 mg/kg protegeu contra mielossupressão característica deste modelo experimental. Valores similares aos do grupo controle foram obtidos para o número de células progenitoras de granulócitos/macrófagos (CFU-GM) na medula óssea desses animais 48 horas e 72 horas após a infecção com Listeria monocytogenes, enquanto nenhuma alteração estatisticamente significativa neste parâmetro foi encontrada nos animais apenas tratados com o extrato nos quatro níveis de doses experimentais testados. Da mesma forma que para medula óssea, apenas as doses de 300, 750, e 1000 mg/kg inibiram completamente o desenvolvimento da hematopoese extramedular nos animais infectados, apresentando níveis normais de CFU-GM no baço 48 horas e 72 horas após a inoculação da bactéria. Embora o CFU-GM no baço dos animais pré-tratados com 100 mg/kg de extrato e infectados fosse estatisticamente superior ao do grupo controle, esta dose de EEP proporcionou uma redução estatisticamente significativa no número de precursores neste órgão em relação aos grupos somente infectados, nas 48 horas e 72 horas de avaliação. O aumento no peso do baço que acompanha a hematopoese esplénica no modelo murino de listeriose foi apenas parcialmente regulado pelo EEP, quando aàninistrado nas doses de 300, 750 e 1000 mg/kg. Nenhum efeito sobre este parâmetro foi observado nos animais apenas tratados. Na avaliação da atividade do EEP sobre a produção de fatores estimuladores de colônias de células hematopoéticas foi observado um aumento no número de CFU-GM para o grupo de animais pré-tratados e infectados similar ao estímulo produzido apenas pela infecção. Nos grupos de animais somente tratados, a atividade do soro também foi estatisticamente superior à do grupo controle. Este mesmo protocolo de tratamento também aumentou a resistência de animais letalmente infectados com histeria monocytogenes, alcançando 33, 50 e 16% de sobrevida para as doses de 300, 750 e 1000 mg/kg respectivamente. Concluímos, portanto, que o EEP apresenta atividade estimuladora sobre a mielopoese de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes crítica para a resistência à infecção letal observada / Abstract: In this work, we investigated the effects of Echinacea purpurea extract (EPE) on the growth and differentiation of bone marrow and spleen hematopoietic progenitors (CFU-GM) in normal and in Listeria monocytogenes-infected mice. Serum colony-stimulating activity, changes in spleen weight and resistance to a lethal dose of bacteria were also evaluated. BALB/c mice were treated orally with 100, 300, 750 and 1000 mg/kg doses of EPE for 7 consecutive days and, at the end of this period, they were infected intraperitoneally with a sublethal dose of the bacteria (lxlO3 bacteria/animal). As expected, a significant decrease in the number of bone marrow CFU-GM in mice infected with L. monocytogenes was observed during the early phase of infection. This effect was accompanied by the development of splenic hematopoiesis with splenomegaly. Treatment of these animals with 300, 750 and 1000 mg/kg of EPE previously to infection significantly stimulated myelopoiesis, reaching normal values of bone marrow CFU-GM at 48 and 72 h after infection. In addition, these doses of EPE markedly inhibited the extramedullar hematopoiesis and significantly reduced the spleen weight in infected mice. On the other hand, no effects on these parameters were observed with the 100 mg/kg dose. In addition, this extract did not affect myelopoiesis and spleen weight when administered to normal mice. Regarding the production of colony-stimulating factors (CSFs), we observed that serum from infected animals presented a higher stimulatory activity on the CFU-GM generation, and similar degrees of serum colony-stimulating activity were found in EPE-treated infected mice at all doses tested. Treatment of normal mice with all doses of EPE for 7 days also produced higher concentrations of CSFs relative to controls. Resistance to infection was studied in mice submitted to a lethal dose of L. monocytogenes (lxlO6 bacteria/animal). Administration of EPE at 300, 750 and 1000 mg/kg significantly improved the survival of mice lethally infected with L. monocytogenes, given 33%, 50% and 16% of survival, respectively. We suggest that the modulatory effect of EPE on the myelopoietic response is related to its prophylactic activity in infected mice as a mechanism to improve immunity / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Carlos Eduardo Negreiros de Paiva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T16:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Percinoto_AuriaVieira_M.pdf: 2506317 bytes, checksum: e8da7f64503638156eadfd811e74fdfb (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: Com o objetivo de verificar a importância da integridade da medula espinal no desempenho do trabalho de parte e na atividade elétrica miometrial em rata albinas realizou-se uma transecção espinal, a nível 'T IND. 10¿ ¿ 'T IND. 12¿, nos 179 ¿ 189 dias de gestação em 12 animais. Após a cordotomia, o trabalho de parto se iniciava no dia previsto (21º - 22º dias de gestação) mas apresentava sérias distorcidas principalmente relacionadas à extrusão dos fetos do canal de parto. A atividade elétrica miometrial, obtida através de experimentos agudos em animais anestesiados não apresentou diferenças significativas quando compara à atividade das 13 ratas controles. Em ambos os grupos, o padrão de atividade caracterizou-se por descargas de potenciais de ação que apareciam em trens de impulsos (bursts) intermitentes com intervalos irregulares. Observou-se amplas variações na freqüência, amplitude máxima e média, no número de potenciais em cada trem, bem como, na duração e freqüência dos mesmos. A porção justacervical de um dos cornos uterinos freqüentemente apresentava atividade mais acentuada do que no corno oposto. Isto pareceu estar relacionado com a ordem de nascimento do feto. Com base em nossos resultados e nas evidências apresentadas na literatura pudemos concluir que as dificuldades das ratas codotomizadas em completar o parto, não implicam necessariamente, na falta de liberação reflexa de ocitocina e conseqüentemente na redução da atividade do útero...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

O tromboembolismo venoso (TEV) é condição frequente e pode se apresentar com amplo espectro desde pequenos episódios de trombose venosa até quadros fatais de embolia pulmonar maciça. A paresia ou plegia de membros inferiores são consideradas fatores de risco maiores para a ocorrência deste evento. Assim, pacientes com lesão medular são uma população com risco aumentado para este desfecho. A profilaxia do tromboembolismo venoso, em ambiente hospitalar, pode envolver estratégias de mobilização de membros inferiores, uso de sistemas de compressão pneumática intermitente ou uso de fármacos. Existem diversos protocolos de avaliação de risco de TEV em pacientes internos clínicos e cirúrgicos, poucos deles, porém abordam especificamente os pacientes com lesão medular. Alguns estudos indicam que após a fase de choque medular o risco de complicações tromboembólicas reduzem de forma tal, que o uso de profilaxia farmacológica não estaria mais justificado. Expor pacientes ao uso de heparinas, sem uma indicação adequada, significa também exposição ao risco de sangramentos iatrogênicos, além de aumentar os custos. O objetivo do presente estudo foi avaliar o impacto clínico e financeiro da modificação de um protocolo de profilaxia de TEV em pacientes com lesão medular traumática e não traumática em um centro de reabilitação no Brasil. Foi realizada a comparação de duas coortes de pacientes internados para reabilitação submetidas a dois protocolos distintos de indicação de tromboprofilaxia medicamentosa, um baseado apenas no déficit motor e o outro baseado em fatores de risco para TEV. O uso de protocolo baseado em fatores de risco foi capaz de reduzir em 73,2% o consumo médio de doses de enoxaparina profilática, bem como o custo com este insumo e com menor variância no consumo mensal médio. Foi identificada a ocorrência de um episódio de TEV e duas ocorrências de sangramento na primeira coorte e nenhum destes eventos na segunda coorte. A adoção de protocolo de profilaxia farmacológica baseado em fatores de risco foi capaz de reduzir os custos com profilaxia farmacológica, sem aumentar o risco de desfechos negativos para o paciente. / Venous thromboembolism (VTE) is a frequent condition with a broad range of manifestations, from a mild episode of deep vein thrombosis to fatal episodes of massive pulmonary embolism. Both partial and total loss of motor function of lower limbs is considered a major risk factor for the occurrence of this event. Thus, patients with spinal cord injury represent a population with a possible increased risk for this outcome. Prophylaxis of venous thromboembolism in inpatients may involve lower limb mobilization strategies, use of intermittent pneumatic compression systems, or pharmacological prophylaxis. There are several protocols for assessing VTE risk in clinical and surgical internal patients, but few specifically address patients with spinal cord injury. Some studies indicate that after the spinal cord shock phase the risk of thromboembolic complications would be reduced in such a way that the use of pharmacological prophylaxis would no longer be justified. Exposing patients to the use of heparins, without an adequate indication, may increase the risk of iatrogenic bleeding, in addition to increasing costs. The present study evaluated the clinical and financial impact of altering a VTE prophylaxis protocol in patients with traumatic and non-traumatic spinal cord injury in a tertiary rehabilitation center in Brazil. A comparison of two cohorts of patients admitted for rehabilitation submitted to two distinct protocols for indication of drug thromboprophylaxis, one based only on a motor deficit and the other based on risk factors for VTE, was performed. The use of a protocol based on risk factors was able to reduce the monthly average dose use of prophylactic enoxaparin by 73.24%, with lower variance in the mean monthly consumption. One episode of VTE and two episodes of major bleeding in the first cohort and none of these events in the second cohort were identified. The adoption of a pharmacological prophylaxis protocol based on risk factors was able to reduce costs with pharmacological prophylaxis, apparently without increasing the risk of adverse outcomes for the patient.

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-09-06T18:13:45Z No. of bitstreams: 1 JordanBarrosdaSilvaDissertacao2017.pdf: 2923625 bytes, checksum: f4397cfc3ec64b731e5825c3fd8ad2cb (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-09-06T18:15:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JordanBarrosdaSilvaDissertacao2017.pdf: 2923625 bytes, checksum: f4397cfc3ec64b731e5825c3fd8ad2cb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T18:15:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JordanBarrosdaSilvaDissertacao2017.pdf: 2923625 bytes, checksum: f4397cfc3ec64b731e5825c3fd8ad2cb (MD5) Previous issue date: 2017-03-14 / UCB / Myelofibrosis (MF) is a rare disease that has an annual incidence of 1 in every 100,000 inhabitants in world, with an average survival of 69 months after diagnosis. Patients with MF have a delicate prognosis and common findings are increased platelet and erythrocyte counts, extramedullary hematopoiesis, hepatomegaly and splenomegaly, and medullary fibrosis. In recent years, several mutations have been reported in the literature, such as JAK2V617F, CalR and MPL, however, the only commercialized therapy so far (Ruxolitinib) has no curative potential. Extracellular vesicles (EVs) comprise a group of vesicles with a size of approximately 30 to 1000 nm and can carry molecules such as lipids, proteins and RNAs inside them. Due to these characteristics, several recent studies have demonstrated a relationship between the EVs and several types of clonal diseases, where patients with malignancies presented high levels of EV in the serum. Among the RNAs found the interior of the EVs, miRNAs are differentially expressed, since it is known that the small molecules are involved in several cellular processes. The present study has as a characteristic the trace of an EV profiles in patients with Myelofibrosis accompanied at the Hematology and Hemotherapy Unit of the Federal District Base Hospital, as well as a differential expression of the microRNAs miR-29a-3p, miR-155 -5p and miR-223-3p and correlate with the clinical features of the disease. The data show that miR-29a and miR-155 are differentially expressed in MF patients, both of which are downregulated. The miR-223 did not present significant differences. Knowing that the low expression of miR29a is related to an aberrant self-renewal of hematopoietic progenitor cells, the data presented here indicate that the EV may contribute to the pathophysiology of the disease. / A Mielofibrose (MF) ?? uma doen??a rara que possui incid??ncia anual de 1 em cada 100.000 habitantes no mundo, com m??dia de sobrevida de 69 meses ap??s o diagn??stico. Os pacientes com MF geralmente apresentam progn??stico delicado e os achados comuns s??o aumento na contagem plaquet??ria e eritrocit??ria, hematopoiese extramedular, hepatomegalia e esplenomegalia e fibrose medular. Nos ??ltimos anos, v??rias muta????es foram relatadas na literatura, como a JAK2V617F, a CalR e MPL, no entanto, a ??nica terapia comercializada at?? o momento (Ruxolitinib) n??o possui potencial curativo. Ves??culas Extracelulares (VEs) compreendem um grupo de ves??culas com tamanho aproximado de 30 a 1000 nm e podem transportar em seu interior mol??culas como lip??dios, prote??nas citos??licas e RNAs. Devido a essas caracter??sticas, v??rios estudos recentes v??m demonstrando a rela????o entre as VEs e diversos tipos de doen??as clonais, onde os pacientes portadores dessas malignidades apresentaram n??veis elevados de VEs no soro. Dentre os RNAs encontrados no interior das VEs, destacam-se os miRNAs diferencialmente expressos, pois sabe-se que essas pequenas mol??culas est??o envolvidas em diversos processos celulares. O presente estudo se prop??s a caracterizar e tra??ar um perfil das VEs em pacientes portadores de Mielofibrose acompanhados na Unidade de Hematologia e Hemoterapia do Hospital de Base do Distrito Federal, bem como avaliar a express??o diferencial dos microRNAs miR-29a-3p, miR-155-5p e miR-223-3p e correlacionar com as caracter??sticas cl??nicas da doen??a. Os dados encontrados mostram que o miR-29a e o miR-155 se apresentam diferencialmente expresso nos pacientes com MF, sendo ambos pouco expressos. O miR-223 n??o apresentou diferen??as significativas. Sabendo que a baixa express??o do miR29a est?? relacionada a uma auto renova????o aberrante de c??lulas progenitoras hematopoi??ticas, os dados aqui apresentados indicam que as VEs podem contribuir com fisiopatologia da doen??a.

Introdução: A dor neuropática (dor originada como consequência direta de uma lesão ou doença afetando o sistema somatossensorial, em seus elementos periféricos ou no sistema nervoso central - SNC) possui uma alta incidência na população mundial e afeta a qualidade da vida dos pacientes acometidos por ela. O tratamento dessa condição dolorosa é ainda um desafio aos profissionais da saúde, pois os fármacos usados possuem ação limitada e diversos efeitos colaterais. Assim, há um grande interesse na busca por novos fármacos para tratar dor neuropática. Os estudos mostram o envolvimento das espécies reativas de oxigênio (EROs) nos distintos tipos de dor, incluindo a neuropática. Dado ao envolvimento dessas espécies, moléculas com ação antioxidante são fortes candidatas como coadjuvantes no tratamento de condições dolorosas. Diversos estudos mostraram que a administração de N-acetilcisteína (NAC), uma molécula com ações complexas, dentre elas a de antioxidante, produz antinocicepção em animais com constrição crônica no nervo isquiático (CCI, do inglês chronic constriction injury), um modelo de dor neuropática. Contudo, ainda são pouco conhecidos os mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo da NAC. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos temporais da administração intraperitoneal de solução salina e NAC, na dose de 150 mg/kg/dia, dado por 1, 3 ou 7 dias, sobre indicadores de comportamento nociceptivo e de recuperação de função locomotora, e moléculas de sinalização celular e parâmetros de estresse oxidativo em medula espinal lombossacral de ratos sem e com CCI. Esse segmento da medula espinal foi escolhido por ser a região de entrada das informações aferentes do nervo isquiático. O projeto que antecedeu o presente estudo foi aprovado pela Comissão de Ética no uso de animais da UFRGS (número de protocolo: 23407). Metodologia: Foram utilizados 180 ratos Wistar machos, pesando 200-300g, divididos em 3 grupos experimentais: controle (animais que não sofreram nenhuma intervenção cirúrgica), sham (animais que tiveram o nervo isquiático direito apenas exposto) e CCI (animais que tiveram o nervo isquiático direito exposto e recebeu 4 amarraduras em seu terço inicial). Estes grupos experimentais foram subdivididos em subgrupos que receberam administração X intraperitoneal de solução salina ou NAC, na dose de 150 mg/kg/dia, por período de 1, 3 ou 7 dias. Os testes de von Frey eletrônico e do índice funcional do isquiático (IFI) avaliaram a sensibilidade mecânica e a recuperação funcional do nervo, respectivamente, nos períodos antes da lesão e 1, 3 e 7 dias após a lesão nervosa. Ao final dos períodos de 1, 3 e 7 dias, os animais foram mortos por decapitação e a medula espinal lombossacral retirada e usada para as determinações: formação do ânion superóxido, hidroperóxidos lipídicos, capacidade antioxidante total (TAC, do inglês total antioxidante capacity), ácido ascórbico, expressão da proteína p-38 fosforilada, e quantificação do RNA mensageiro (mRNA) do NFкB. Outros grupos de animais foram perfundindos com paraformoldeído 4% preparado em tampão fosfato salino, 0,2 M, pH 7,4. Após a coleta e a crioproteção em solução de sacarose 15 e 30%, a medula espinal e os gânglios da raiz dorsal do nervo isquiático ipsilateral à lesão foram submetidos às técnicas de imunohistoquímica à proteína p-38 e histoquímica a NADPH-diaforase, essa última para marcação de células com atividade da óxido nítrico sintase (NOS), a enzima envolvida na síntese de NO. Os resultados de sensibilidade foram analisados por ANOVA de medidas repetidas; os demais resultados por ANOVA de três vias (fatores: lesão, tratamento e tempo), exceto os do NFκB, que foram por ANOVA de duas vias. O pós-teste usado foi o de Tukey. O P foi considerado significativo quando > 0,05. Resultados: A sensibilidade mecânica aumentou no dia 1 pós-lesão em todos os grupos CCI, e permaneceu elevada nos demais períodos analisados nos ratos com CCI tratados com solução salina. No grupo de ratos com CCI que recebeu tratamento com NAC, o valor da sensibilidade mecânica foi similar ao encontrado na pré-lesão, tanto aos 3 como aos 7 dias. No grupo sham que recebeu salina houve aumento na sensibilidade mecânica no dia 1, estando esse parâmetro com valor similar ao encontrado nos ratos controle nos demais períodos analisados. O aumento na sensibilidade mecânica não foi observado nos ratos sham que receberam NAC. O IFI melhorou nos ratos com CCI que receberam salina e NAC por 7 dias. Porém, enquanto o percentual de recuperação desse índice foi 28% nos ratos tratados com salina, a administração de NAC provocou recuperação de 44%. Paralelamente a essas mudanças, houve aumento estatisticamente significativo na geração de ânion superóxido na medula espinal de todos os ratos com CCI, independente do tratamento e do período de tempo analisado. Os hidroperóxidos lipídicos aumentaram (823%) na medula espinal de ratos com CCI tratados com salina no dia 1, mas o acréscimo foi de apenas 142% nos ratos com CCI que receberam NAC. Aos 3 e 7 dias, os hidroperóxidos lipídicos estavam ainda aumentados na medula espinal de ratos sham e com CCI, mas o aumento foi de 180%. A TAC teve redução apenas nos animais CCI tratados com salina, no dia 7. Os valores de ácido ascórbico aumentaram significativamente na medula espinal de ratos com CCI que receberam salina, nos dias 1 e 3. Apesar de elevado, o valor de ácido ascórbico na medula espinal desses ratos aos 7 dias não foi estatisticamente significativo quando comparado ao encontrado nos ratos controle. Nos ratos com CCI tratados com NAC não houve diferença significativa nos valores de ácido ascórbico da medula espinal comparados àqueles dos ratos controle. Quanto às moléculas de sinalização intracelular, observou-se aumento na expressão da p-38 fosforilada nos ratos sham e com CCI tratados com salina, nos dias 1, 3 e 7, comparados aos controles. O tratamento com NAC provocou o retorno da expressão dessa proteína nos ratos sham nesses dias, e uma redução de aproximadamente 187% nos ratos com CCI nos dias 3 e 7, sendo no dia 1 o valor similar ao do grupo controle. NAC também reduziu o aumento na imunorreatividade a p-38 em neurônios do gânglio da raiz dorsal e neurônios e células semelhantes à glia da medula espinal, aumentos esses induzidos pela CCI nos dias 1, 3 e 7. NAC também XI reduziu o aumento induzido pela CCI no número de neurônios reativos a NADPH-diaforase nas lâminas superficiais do corno dorsal e substância cinzenta localizada em volta do canal central da medula espinal. O tratamento com NAC ainda reduziu o mRNA do NFкB aumentado pela CCI e cirurgia sham. Conclusão: Estes resultados mostram que a administração intraperitoneal de NAC, na dose de 150 mg/kg/dia, reproduziu o efeito antinociceptivo dessa molécula e promoveu melhora no IFI. Paralelamente, o tratamento modificou parâmetros de estresse oxidativo e sinalização intracelular na medula espinal, os quais possivelmente se relacionam com as melhoras na sensibilidade mecânica e recuperação funcional do nervo isquiático nos ratos com CCI. A partir desses resultados, pode-se dizer que o efeito antinociceptivo da NAC em ratos com dor neuropática por CCI envolve não apenas sua ação antioxidante, mas também seu efeito em vias de sinalização intracelular. / Introduction: Neuropathic pain (pain arising as a direct result of an injury or disease affecting the somatosensory system in their peripheral elements or the central nervous system - CNS) has a high incidence in the world population and affects the quality of life of patients affected by it. The treatment of this painful condition is still a challenge for health professionals, since the drugs used have limited action and cause side effects. Thus, there is great interest in the search for new pharmaceuticals to treat neuropathic pain. Research shows the involvement of reactive oxygen species (ROS) in different types of pain, including neuropathic pain. Given the involvement of these species, molecules with antioxidant action are strong candidates as adjuvants in the treatment of painful conditions. Several studies have shown that N-acetylcysteine (NAC), a molecule with complex actions, including an antioxidant one, produces antinociception in animals with chronic constriction of the sciatic nerve (CCI, chronic constriction injury), a neuropathic pain model. However, the mechanisms involved in the antinociceptive effect of NAC are still poorly understood. Thus, this study aimed to evaluate the temporal effects of intraperitoneal administration of saline and NAC at a dose of 150 mg/kg/day, given for 1, 3 or 7 days, on nociceptive behavior and recovery of locomotor function, and cell signaling molecules and oxidative stress parameters in lumbosacral spinal cord of rats with and without CCI. This segment of the spinal cord was chosen because it is the entry region of the sciatic nerve afferent information. The project that preceded this study was approved by the Ethics Committee of UFRGS on the use of animals (protocol number: 23407). Methods: We used 180 male Wistar rats, weighing 200-300g, divided in 3 groups: control (animals which underwent no surgery), sham (animals which had only the right sciatic nerve exposed) and CCI (animals that had the right sciatic nerve exposed and received 4 ligatures in its initial third). These experimental groups were subdivided into subgroups receiving intraperitoneal administration of saline or NAC at a dose of 150 mg/kg/day for a period of 1, 3 or 7 days. Electronic von Frey tests and the sciatic functional index (SFI) evaluated the mechanical sensitivity and functional recovery of the nerve, respectively, in the periods before the injury and 1, 3 and 7 days after the nerve injury. At the end of these periods, the animals were killed by decapitation and the lumbosacral spinal cord was removed and used to determine the formation of superoxide, lipid hydroperoxide, total antioxidant capacity (TAC), ascorbic acid, expression of phosphorylated p-38 protein, and quantification of messenger RNA (mRNA) of NFκB. Other animal groups were perfused with 4% paraformaldehyde prepared in 0.2 M phosphate buffered saline, pH 7.4. After collection and cryoprotection in 15% and 30% sucrose solution, the spinal cord and dorsal root ganglia of the sciatic nerve ipsilateral to the lesion were subjected to immunohistochemistry of protein p-38 and histochemistry of NADPH-diaphorase, the latter for labeling the activity of nitric oxide (NO) synthase, the enzyme involved in the synthesis of NO. The results of sensitivity were analyzed by ANOVA of repeated measures; the other results by three-way ANOVA (factors: injury, treatment, and time), except those of NFκB, which were analyzed by two-way ANOVA. The post-test used was Tukey’s. P was considered significant when <0.05. Results: Mechanical sensitivity increased on day 1 post-injury in all CCI groups, and remained elevated in the other period analyzed in saline-treated CCI rats. In the group of NAC-treated CCI rats, the value of mechanical sensitivity was close to the pre-injury one, both at 3 and 7 days. In the sham group receiving saline, there was an increase in mechanical sensitivity on day 1, whose value was close to those of control rats in the other periods analyzed. Increased mechanical sensitivity was not observed in sham rats receiving NAC. The SFI improved in CCI rats receiving saline and NAC for 7 days. However, while the recovery rate of this index was 28% in the saline-treated rats, NAC administration caused a recovery of 44%. Alongside these changes, there was a statistically significant increase in the generation of superoxide anion in the spinal cord of all CCI rats, regardless of treatment and time period analyzed. Lipid hydroperoxides increased (823%) in the spinal cord of saline-treated CCI rats on day 1, but the increment was only 142% in CCI rats receiving NAC. At 3 and 7 days, lipid hydroperoxides were further increased in the spinal cord of sham and CCI rats, but the increment was 180%. TAC was reduced only in saline-treated CCI animals, on day 7. Ascorbic acid values increased significantly in the spinal cord of CCI rats receiving saline on days 1 and 3. Although high, ascorbic acid in the spinal cord of these rats on day 7 was not statistically significant as compared to control rats. In NAC-treated CCI rats, there was no significant difference in ascorbic acid values of the spinal cord as compared to control rats. As regards intracellular signaling molecules, increased expression of phosphorylated p-38 was observed in saline-treated CCI and sham rats on days 1, 3 and 7 compared to controls. NAC treatment caused a return of expression of this protein in sham rats on these days, and a reduction of approximately 187% in CCI rats on days 3 and 7, with the value of day 1 close to that of the control group. NAC also reduced the increase in p-38 immunoreactivity in dorsal root ganglion neurons and neurons and cells similar to spinal cord glia, such increases induced by CCI on days 1, 3 and 7. NAC also reduced the CCI-induced increase in the number of NADPH diaphorase reactive neurons in the superficial lamina of the dorsal horn and gray matter located around the central canal of the spinal cord. NAC treatment also reduced the mRNA of NFкB increased by CCI and sham surgery. Conclusion: These results show that intraperitoneal administration of NAC at 150 mg/kg/day reproduced the antinociceptive effect of this molecule and promoted improvement in SFI. In addition, the treatment changed oxidative stress parameters and intracellular signaling in the spinal cord, which are possibly related to improvements in mechanical sensitivity and functional recovery of the sciatic nerve in rats with CCI. From these results, one can say that the antinociceptive effect of NAC in rats with neuropathic pain from CCI involves not only its antioxidant action, but also its effect on intracellular signaling pathways.