A terapia celular para doenças cardiovasculares representa uma nova e promissora opção terapêutica, principalmente para a cardiopatia isquêmica. A injeção de células mononucleares de medula óssea (CMMO) pela via intracoronariana (ICO) é a mais estudada em ensaios clínicos. Embora já se tenha documentado efeitos benéficos com essa terapia, dados relativos aos mecanismos de interação entre as células transplantadas e o ambiente microvascular cardíaco são escassos. A avaliação das CMMO na microcirculação miocárdica tem o potencial de esclarecer seus mecanismos de ação, abrindo novas possibilidades terapêuticas. O objetivo do estudo foi descrever e avaliar uma inovadora técnica de injeção ICO direta e visualização in vivo das CMMO na microcirculação miocárdica de pequenos roedores, após um período de isquemia miocárdica global (IMG) seguida de reperfusão, na presença e na ausência da aterosclerose. Materiais e Métodos: A técnica de transplante cardíaco heterotópico cervical (TCHC) em murinos foi modificada com a inserção e fixação de um microcateter conectado a uma seringa, no tronco braquiocefálico do animal doador. IMG foi induzida ocluindo-se a artéria nutridora do enxerto com um microclamp vascular, por 1 hora. As CMMO foram isoladas e marcadas antes da injeção ICO. Microscopia intravital de fluorescência (MIF) foi usada para análise da microcirculação coronariana do ventrículo direito (VD), incluindo arteríolas, capilares e vênulas pós-capilares. Parâmetros de perfusão e permeabilidade microvasculares e as interações entre as CMMO e células endoteliais foram estudados. O impacto da aterosclerose na recuperação, fenótipo e função celular também foi avaliado. Resultado: A MIF permitiu análise detalhada da microcirculação coronariana e da cinética das CMMO injetadas pela via ICO. A IMG afetou a microcirculação, reduzindo a densidade capilar funcional (DCF). Tal redução foi maior na presença de aterosclerose. A principal área de retenção celular foi a rede capilar e não as arteríolas ou vênulas. Nem a presença de isquemia, nem de aterosclerose alterou o número de células retidas. O número de CMMO retidas não aumentou na presença de isquemia, nem de aterosclerose e não se correlacionou com a perfusão microvascular ou inflamação prévios à injeção. Houve forte correlação entre o número de CMMO retidas e a expressão de CXCR4. A injeção de CMMO não afetou negativamente a DCF e a microcirculação. Aterosclerose não alterou o número de CMMO obtidas após isolamento por gradiente de Ficoll. A expressão de CD54 estava reduzida em camundongos ApoE-/-. CMMO de doadores ateroscleróticos geraram um número aumentado de unidades formadoras de colônias de granulócitos e macrófagos. A análise ecocardiográfica da função do VD do enxerto cardíaco cervical foi exeqüível. Conclusões: A injeção ICO direta e a visualização detalhada da cinética das CMMO na microcirculação coronária in vivo por MIF foi possível. A IMG provocou redução da densidade capilar funcional. A retenção das CMMO após injeção ICO se deu nos capilares e provavelmente depende da expressão de CXCR4. / Cell therapy for cardiovascular disease represents a promising new therapeutic option, especially for ischemic heart disease. The intracoronary (ICo) injection of bone marrow mononuclear cells (BMMC) is the most commonly studied rote in clinical trials. Although it has been documented beneficial effects with this therapy, data pertaining the mechanisms of interaction between transplanted cells and cardiac microvascular environment are lacking. Assessment of BMMC in myocardial microcirculation has the potential to clarify its mechanisms of action, opening new therapeutic possibilities. The objective of the study was to describe and to evaluate an innovative technique of direct ICo injection and in vivo visualization of BMMC in myocardial small rodents, after a period of global cardiac ischemia (GMI) and reperfusion, in the presence and absence of atherosclerosis. Materials and Methods: The syngeneic murine cervical heterotopic heart transplantation (CHHT) technique was modified by inserting and fixing a catheter connected to a syringe into the donor animal brachiocephalic trunk. GMI was induced occluding the nutritive artery of the graft for 1 hour. Bone marrow mononuclear cells were isolated and labeled prior to ICo injection. Intravital fluorescence microscopy (IFM) was used for analysis of the coronary microcirculation of the right ventricle (RV), including arterioles, capillaries and venules. Parameters of microvascular perfusion, microvascular permeability and the interactions between the BMMC and endothelial cells were studied. The impact of atherosclerosis on the recovery, phenotype and cellular function was also evaluated. Results: The IFM has allowed detailed analysis of both the coronary microcirculation, as the kinetics of BMMC. The GMI affected microcirculation, reducing the functional capillary density (FCD). This reduction was higher in the presence of atherosclerosis. The main area of cell retention was the capillary network, not the arterioles or venules. The number of BMMC retained was not increased in the presence of ischemia, neither of atherosclerosis and didnt correlate with microvascular perfusion or inflammation before injection. Cell retention was strongly correlated with BMMC expression of CXCR4. BMMC injection didnt affect negatively the FCD and microcirculation. Atherosclerosis didnt change the number of BMMC recovered after Ficoll gradient isolation. BMMC expression of CD54 was reduced in ApoE-/- mice. BMMC of atherosclerotic donors have generated a greater number of colony forming units of granulocytes and macrophages. The RV function analyses of the cardiac graft could be performed by echocardiography. Conclusions: The direct ICo injection and detailed visualization of BMMC kinetics in the coronary microcirculation in vivo was possible. The IRCG caused reduction of functional capillary density. Retention BMMC after ICo injection occurred in the capillaries and probably depends on the expression of CXCR4.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T05:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 195296.pdf: 2670800 bytes, checksum: c49992a8a9b75af144b3c2287202d155 (MD5) / A agricultura moderna tem se tornado cada vez mais dependente da mecanização e do uso de insumos como os agrotóxicos. A utilização destes produtos em larga escala, combinada às diferentes formas pelas quais o ser humano pode ser exposto aos mesmos, tem resultado em freqüentes contaminações humanas e ambientais. A literatura científica tem associado a exposição crônica aos agrotóxicos com conseqüências para a saúde humana, tais como alterações hematológicas, imunológicas e o desenvolvimento de neoplasias. O glifosato é um herbicida sistêmico, pós-emergente e não seletivo, derivado da glicina, amplamente utilizado no Brasil para o controle de cerca de 70 espécies de plantas daninhas perenes e 80 espécies de anuais e normalmente é comercializado na forma de sal de isopropilamina. Toxicologicamente é classificado como produto da Classe IV - Pouco Tóxico, sendo sua DL50 para ratos de 4.870 mg/kg de peso corporal. Quanto a periculosidade ambiental pertence a Classe III - Produto Perigoso. Dados da literatura referentes aos efeitos deste produto sobre a saúde humana são contraditórios e em alguns aspectos como o imunológico, escassos. Em consonância com o exposto o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da exposição crônica ao glifosato sobre o fígado, sangue periférico, medula óssea e sistema imunológico, em ratos. Para isso três grupos de animais receberam o agrotóxico por via oral em doses equivalentes a 1/1000, 1/100 e 1/10 da DL50 do produto, em intervalos de 48 horas, por um período de 75 dias. No grupo controle foi administrado água. Ao término do período foram coletadas amostras de sangue, fígado, medula óssea e linfonodos. Foram realizadas as seguintes análises: controle do ganho de peso, hemograma; dosagem de uréia, medida da atividade sérica das enzimas aspartato aminotranferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT); análises histológicas do fígado e da medula óssea; contagem de células CD4+ e CD8+ no sangue periférico e linfonodos. Os animais tratados apresentaram redução no ganho de peso, alterações no hemograma, aumento dos níveis séricos das enzimas e da uréia, aumento da reticulina e do número de células de Kupffer no fígado, redução de células CD4+ e CD8+ no sangue periférico, redução de células CD4+ e aumento de células CD8+ no linfonodo e redução da relação CD4+/CD8+ neste último, o qual apresentou-se hipertrofiado. Os resultados demonstraram que a exposição ao glifosato compromete vários parâmetros do sangue periférico, a função hepática e o sistema imune.

Introdução: Avaliar o impacto das intervenções em saúde passa a ser obrigação, principalmente, daqueles que são responsáveis pelas decisões em saúde. Entre estes, estão os profissionais que prescrevem e determinam tratamentos, atuando como fontes geradoras de despesa, bem como os gestores, que devem garantir a melhor aplicação de recursos e ampliação do atendimento à população. A escassez de recursos tem levado os sistemas de saúde do mundo inteiro a incorporar metodologias de avaliação econômica para a tomada de decisão. Entre as demandas crescentes da população está a necessidade de transplantes, entre os quais o transplante de medula óssea (TMO). Um procedimento de alto custo, pela grande utilização de recursos no tratamento, tempo elevado de internação, além do investimento em prevenção de desfechos aos quais estes pacientes ficam sujeitos: infecções, rejeição ao enxerto e mortalidade. Objetivos: Este estudo tem como propósito avaliar a relação de custobenefício da criação de uma unidade de ambiente protegido (UAP) destinada a pacientes hematológicos submetidos a TMO em um hospital universitário brasileiro. Identificar os custos da criação e manutenção da UAP, estimar os custos associados à realização de transplantes de medula óssea em pacientes portadores de doenças hematológicas bem como os benefícios da implantação desta unidade em relação à freqüência de ocorrência de agravos de morbidade e mortalidade. Delineamento: Quase-experimento. Métodos: Trata-se de um estudo retrospectivo, onde a população é formada por coorte de pacientes adultos que realizaram TMO entre 5 de janeiro de 2004 e 7 de maio de 2007 – denominado Período 1 (P1) – e 4 de junho de 2007 e 18 de março de 2008 – denominado Período 2 (P2). Para a identificação do custo do paciente foram analisados todos os recursos utilizados por este a partir de sua primeira internação para a realização do transplante e as posteriores, num período de até seis meses de acompanhamento, considerando: custo da unidade de internação; nutrição; recursos de Serviços de Apoio ao Diagnóstico e Tratamento (SADT); custo em nota de sala; custos de procedimentos realizados; hemoterapia; oxigenoterapia; medicamentos utilizados; nutrição parenteral; radioterapia e quimioterapia. Para efeitos de comparação todos os custos foram ajustados para jan/08. Para medir o impacto assistencial, foram pesquisados desfechos como ocorrência de infecções e doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Resultados: Foram analisadas 166 pacientes e 233 internações no período pré-intervenção enquanto no período posterior foram analisados 45 pacientes e 58 internações hospitalares. O custo mediano por paciente foi de R$ 43.087,81 em P1 e R$ 37.303,87 em P2 (p= 0,466), esse mesmo custo quando estratificado por tipo de transplante resultou em redução de R$ 122.944,69 para R$ 100.555,48 em casos alogênicos (p=0,011) e mantevese igual em casos autólogos, sendo R$ 28.453,05 em P1 e R$ 28.305,24 em P2 (p=0,237). O índice de proteção da UAP sobre a variável infecção hospitalar, demonstrado através da razão de densidade de incidências foi de 0,83 (IC de 95% 0,56 a 1,23) e a taxa de infecção foi reduzida de 2,08% para 1,75%, sendo observada uma redução de 0,17 na incidência da mesma. A mortalidade na internação de realização do transplante foi reduzida de 0,16 em P1 para 0,11 em P2 e o índice de reinternação, de 0,40 para 0,28, respectivamente. Conclusão: A intervenção realizada no tratamento de pacientes submetidos a TMO, internação em UAP, demonstrou uma redução de 13% no custo mediano dos pacientes. O resultado por tipo de TMO demonstrou-se fortemente custo-benéfico nos casos alogênicos, aqueles considerados de maior complexidade e custo. Os dados de infecção, mortalidade e reinternação sugerem uma intervenção eficaz quando analisada sob a perspectiva dos desfechos assistenciais. Do ponto de vista econômico, também foi observado resultado favorável à intervenção em estudo, ainda que o mesmo também não tenha apresentado força estatística. / Objective: To evaluate the cost-benefit of creating a protected environment (PE) ward for hematological patients undergoing bone marrow transplantation (BMT) at Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), public school hospital with 740 beds, located in Southern Brazil. Methods: A retrospective study, quasi-experimental design, with a population made up of cohort of adult patients who underwent BMT from Jan/2004 to May/2007 (P1) and Jun/2007 to Mar/2008 (P 2). Cost information was obtained by identifying the resources used by patients from the query of the computerized system of HCPA. To measure the impact of care, outcomes, such as occurrence of infections and mortality were investigated. Results: We analyzed 166 patients and 233 admissions in the preintervention while in the later period 45 patients and 58 hospitalizations were investigated. The median cost per patient was R$ 43.087,81 in P1 and R$ 37.303,87 in P2 (p = 0.466). This same cost when stratified by type of transplant resulted in a reduction from R$ 122.944,69 to R$ 100.555,48 in allogeneic cases (p = 0.011) and remained the same in autologous cases, of which R $ 28,453.05 in P1 and R $ 28,305.24 in P2 (p = 0.237). The index of protection of the PE on the variable infection, shown through the ratio of incidence density was 0.83 (CI 95% 0.56 to 1.23) and the rate of infection was reduced from 2.08% to 1.75%, and a reduction of 0.17 in its incidence was seen. The level of mortality on hospital stay during the transplantation was reduced from 0.16 in P1 to 0.11 in P2 and the rate of rehospitalization, 0.40 to 0.28, respectively. Conclusion: The intervention performed in the treatment of patients undergoing bone marrow transplantation, hospitalization in PE ward, showed a 13% reduction in the average cost of patients, although this difference was not considered statistically significant. The result by type of BMT showed strongly cost-beneficial in allogeneic cases, those considered of greater complexity and cost. The data of infection, mortality and reinteração suggest an effective intervention when viewed from the perspective of welfare outcomes. From the economic point of view, it was also observed a favorable outcome to the intervention under study, although it has not presented statistical power.

Submitted by CAIO JOSÉ XAVIER ABIMUSSI null (caioabimussi@fmva.unesp.br) on 2016-01-17T16:54:36Z No. of bitstreams: 1 TESE_VERSÃO FINAL_CORRIGIDA.pdf: 2286468 bytes, checksum: 496c8f6ffc7595636c5c52c061679bc7 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-01-18T15:52:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 abimussi_cjx_dr_araca.pdf: 2286468 bytes, checksum: 496c8f6ffc7595636c5c52c061679bc7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-18T15:52:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 abimussi_cjx_dr_araca.pdf: 2286468 bytes, checksum: 496c8f6ffc7595636c5c52c061679bc7 (MD5) Previous issue date: 2015-12-14 / Não recebi financiamento / Objetivou-se avaliar a anestesia raquidiana com ropivacaína em cães alterando a baricidade do anestésico local, investigando as alterações hemodinâmicas e complicações. Foram utilizados seis cães, Beagle, 4 anos, submetidos a anestesia inalatória com isofluorano e aos tratamentos: Ghipo = anestesia raquidiana hipobárica (0,5 mL NaCl 0,9% + 0,5 mL ropivacaína 0,75%); Giso = anestesia raquidiana isobárica (0,5 mL NaCl 1,53% + 0,5 mL ropivacaína 0,75%); Ghiper = anestesia raquidiana hiperbárica (0,5 mL glicose 10% + 0,5 mL ropivacaína 0,75%). Após indução anestésica e manutenção com isofluorano, os animais foram posicionados em decúbito lateral direito para a passagem de um cateter de artéria pulmonar pela veia jugular esquerda. Após esse procedimento, a punção subaracnóide foi realizada entre L5-L6 com uma agulha espinhal 22G, seguida da administração de 1 mL de anestésico local em 1 min. Os animais foram mantidos por 60 minutos anestesiados em decúbito ventral. A FC, f, PAM, DC, PAPm e TºC apresentaram aumento progressivo em todos os grupos enquanto que a PCPm, apenas no GHIPO, aumentou ao longo de todos os momentos. O IRPT no GISO apresentou valores significativamente superiores no M1, M5 e M10 comparado aos demais grupos, exceto no M5, em que o GISO diferiu somente do GHIPER. O IRVP no GISO aumentou no M5 em comparação ao MB. Foram observados efeitos adversos como déficit motor unilateral, atonia vesical, excitação, dor aguda e quemose. Conclui-se que as alterações hemodinâmicas não foram relevantes, embora a anestesia inalatória com isofluorano tenha influído sobre os resultados obtidos. / The aim of the study was to assess spinal anesthesia with ropivacaine in dogs altering the local anesthetic agent’s baricity in order to investigate hemodynamic changes and complications. Six beagle dogs aged 4 years old were anesthetized with isoflurane and subjected to the treatments: Ghypo = spinal anesthesia with hypobaric ropivacaine (0.5 mL of 0.9% NaCl + 0.5 mL ropivacaine at 0,75%); Giso = isobaric spinal anesthesia (0.5 mL of 0,906% NaCl + 0.5 mL ropivacaine at 0,75%); Ghyper = hyperbaric spinal anesthesia (0.5 mL of 10% glucose + 0.5 mL ropivacaine at 0.75%). After induction to anesthesia and maintenance with isoflurane, animals were positioned in right lateral recumbency for pulmonary artery catheterization through the left jugular vein. Rightafter, spinal anesthesia was performed between L5-L6 using a 22G Quincke tip needle, followed by administration of 1 mL of local anesthetic during 1 minute. Animals were maintained under anesthesia for 60 minutes in ventral recumbency. HR, FR, MAP, CO, mPAP and body temperature progressively increased in all groups. whereas PCWP increased only in GHYPO at all time points. The TPRI showed significantly higher values in GISO at M1, M5 and M10 compared to the other groups, except for M5, during which GISO differed only from GHYPER. The PVRI increased at M5 compared to MB in GISO. Side effects such as unilateral motor deficit, bladder atony, excitation, acute pain and chemosis were observed. In conclusion, the hemodynamic changes were not relevant, although inhalation anesthesia with isoflurane might have influenced the results.

Submitted by GABRIELA MARCHIORI BUENO null (gabi_marchiori@hotmail.com) on 2016-03-07T17:15:57Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO versão final.pdf: 1797120 bytes, checksum: 0d77becbe16bbbc7fd472c5e4119d56b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-07T20:01:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bueno_gm_me_jabo.pdf: 1797120 bytes, checksum: 0d77becbe16bbbc7fd472c5e4119d56b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T20:01:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bueno_gm_me_jabo.pdf: 1797120 bytes, checksum: 0d77becbe16bbbc7fd472c5e4119d56b (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Devido à escassez de estudos mielográficos em bovinos e relatos de complicações no procedimento, o presente estudo teve por objetivo estudar a eficácia e segurança dos meios de contrastes utilizados a fim de nortear a escolha mais adequada para o diagnóstico de afecções vertebrais e medulares em bovinos. Foram utilizados dez bezerros holandeses, hígidos de sete dias a dois meses de idade. Os bezerros formaram dois grupos, um deles recebeu Ioexol e o outro Iopamidol, na cisterna cerebelomedular. Foi realizado estudo mielográfico da coluna vertebral na posição látero-lateral, que foram reproduzidas em tempos determinados em minutos totalizando 20 tempos, para posterior análise da opacidade, detalhes da imagem, distensão do canal medular e progressão da linha de contraste. Após a mielografia os animais foram observados durante a recuperação até deambulação. Após intervalo de sete dias foi realizado segundo período experimental, que compreendeu na inversão do meio de contraste dentro de cada grupo. Diferenças significativas em relação à qualidade da imagem e velocidade do preenchimento da coluna medular entre os dois meios de contrastes estudados não foram observadas. Não foram observadas anormalidades clínica após o exame mielográfico. Conclui-se que para a obtenção de imagens mielográficas com excelente radiopacidade, rica em detalhes, com distensão do espaço subaracnoide adequada e completa progressão da linha do contraste é necessário que as tomadas radiográficas sejam no segmento cervical de 6 a 8 minutos após a administração do contraste, no segmento torácico oitenta minutos após inoculação do contraste e nos segmentos lombar, sacral e cauda equina após vinte minutos da aplicação do meio de contraste. Os dois meios de contraste propostos foram seguros e equivalentes. / Due to the shortage of myelographic studies in cattle and reports of complications in the procedure, this study aimed to study the efficacy and safety of contrast media used to guide the most appropriate choice for the diagnosis of vertebral and spinal cord diseases in cattle. Ten Holstein calves, healthy seven days to two months of age were used. Calves formed two groups, one received iohexol and iopamidol other in cerebelomedular tank. Myelographic study was conducted on the spine side-to-side position, they are reproduced in time determined 20 minutes total time for analysis of the opacity image, details, distension medullary canal and contrast line progression. After myelography animals were observed during recovery to ambulation. After seven days interval was performed according to experimental period understood that the inversion of the contrast medium within each group. Significant differences in image quality and speed of fulfillment of the spinal column between the two means of studied contrasts were not observed. There were no clinical abnormalities after myelographic examination. We conclude that to obtain myelographic images with excellent radiopacity, rich in detail, with distension of subarachnoid space adequate and complete progression of contrast is line necessary that the radiographs are in the cervical segment 6 to 8 minutes after contrast administration in the thoracic segment eighty minutes after inoculation contrast and lumbar segments, sacral and cauda equina twenty minutes after the application of the contrast medium. The two contrast media were proposed insurance and the like.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-13Bitstream added on 2014-06-13T20:01:45Z : No. of bitstreams: 1 maia_l_dr_botfmvz.pdf: 18060170 bytes, checksum: 35902efcd3573630e0675fd37df370df (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / O interesse terapêutico e biológico nas células-tronco tem aumentando nos últimos anos, fato este demonstrado pelo número crescente de pesquisas e publicações na área. Na espécie equina, as pesquisas envolvendo o uso da terapia celular com células-tronco mesenquimais (CTMs) estão focadas, particularmente para o tratamento de lesões tendíneas e osteoarticulares, havendo poucos relatos da sua utilização em outros tecidos, tais como o sistema nervoso. Desta forma, as vias de aplicação mais utilizadas até então para uso clínico em equino são as intralesionais e intra-articulares, carecendo assim na medicina equina de estudos pré-clínicos que avaliem a segurança de administração das CTMs em outras vias, tais como a intratecal por via liquórica. Nesse sentido, o objetivo geral deste estudo foi a obtenção, o cultivo e a caracterização das CTMs provenientes da medula óssea (MO) de equinos, além da avaliação da viabilidade e da segurança de aplicação dessas células autólogas por via intratecal através do espaço atlanto-occiptal. Também foi avaliado in vitro o potencial de transdiferenciação das CTMs-MO em fenótipos neurais, utilizando-se dois protocolos de diferenciação neural: P1 (forksolin e ácido retinóico) e P2 (2- mercaptoetanol). Ao término do cultivo primário, a análise imunofenotípica revelou a presença de CTMs com elevada expressão do marcador CD90, seguida de menor expressão para o marcador CD44 e ausência de expressão do marcador CD34. Nos ensaios de diferenciação nas tri-linhagens mesodermais ficou evidenciada a resposta positiva às diferenciações osteogênica (OST), condrogênica (CDG) e adipogênica (ADP) caracterizadas pela deposição de matriz extracelular rica em cálcio (OST), proteoglicanos e colágeno... / Biological and therapeutic interest in stem cells has increased in recent years, a fact demonstrated by the crescent number of research and publications in the area. In equine species, research involving the use of cell therapy with mesenchymal stem cells (MSCs) are focused, particularly for the treatment of tendineous and osteoarticular injuries, having scarces reports of its use in other tissues such as the nervous system. Thus, the pathways of administration most used so far for clinical use in equines are the intralesional and intra-articular, needing thereby in equine medicine of preclinical studies that asses the security of administration of MSCs in other pathways such as intrathecal by liquoric way. In this sense, the general aim of this study was the obtaining, cultivation and characterization of MSCs from bone marrow (BM) of equines, besides the evaluation of the feasibility and safety of application of these autologous cells by intrathecal pathway through atlanto-occipital space. It was also evaluated in vitro the potential of transdifferentiation of MSCs-MO in neural phenotypes, using two protocols of neural differentiation: P1 (forksolin and retinoic acid) and P2 (2- mercaptoethanol). At the end of the primary culture immunophenotypic analysis revealed the presence of MSCs with high expression of marker CD90, followed by the lower expression for the marker CD44 and absence of expression of marker CD34. In tests of differentiation in the tri-lineage mesodermal became evidenced the positive response to osteogenic (OST), chondrogenic (CDG) and adipogenic (ADP) differentiation characterized by the deposition of extracellular matrix rich in calcium (OST), proteoglycans and collagen II (CDG) and deposition of intracellular lipid droplets (ADP). In immunocytochemical characterization MSCs were... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-31Bitstream added on 2014-06-13T19:43:57Z : No. of bitstreams: 1 assuncao_lrs_dr_araca.pdf: 22650454 bytes, checksum: 031a7b3f676e002170ba15a72073e127 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A avulsão dentária é um tipo de trauma que resulta na perda da continuidade de um complexo e múltiplo compartimento de tecidos. Componentes derivados do sangue, incluindo o plasma pobre em plaquetas (PPP) e o plasma rico em plaquetas (PRP) constituem uma opção terapêutica para o reparo tecidual. O gel de PRP tem sido usado como arcabouço para células-tronco da medula óssea em Engenharia Tecidual. O propósito da presente investigação foi avaliar o efeito do PPP, PRP ativado ou não por trombina e células-tronco (CT) originárias da medula óssea associadas ao PRP no reparo de reimplantes dentários. Quatro cães foram utilizados neste estudo. PRP e PPP foram obtidos pelo método de dupla centrifugação a partir do sangue coletado da veia jugular dos animais. CT foram obtidas por aspiração da medula óssea (AMO) e isoladas pelo método de centrifugação por densidade de gradiente. A citometria de fluxo (CF) foi realizada após AMO utilizando marcadores celulares CD34 e CD90. Após 30 minutos da extração, os dentes foram reimplantados e, de acordo com a proposta metodológica, divididos em 5 grupos: Grupo I – dentes reimplantados sem material (Controle); Grupo II – dentes reimplantados com o Plasma Pobre em Plaquetas (PPP); Grupo III – dentes reimplantados com o Plasma Rico em Plaquetas ativado por cloreto de cálcio (PRP); Grupo IV – dentes reimplantados com o Plasma Rico em Plaquetas ativado por trombina de origem bovina e cloreto de cálcio (PRP + TR) e Grupo V – dentes reimplantados com células-tronco da medula óssea associadas ao PRP ativado por cloreto de cálcio (CT + PRP). Análises histológica, histomorfométrica e imuno histoquímica foram realizadas 120 dias após o reimplante. Análise de variância (ANOVA) e o teste post-hoc de Tukey foram utilizados para a análise estatística, com nível de significância de 5%. CF mostrou... / Dental avulsion constitutes a traumatism which results in the loss of a complex and multiple tissue compartments. Blood-components products, including platelet-poor plasma (PPP) and platelet-rich plasma (PRP), constitute a therapeutic option for tissue healing. PRP gel has also been used as a scaffold for bone marrow stem cells in Tissue Engineering. This study aimed to evaluate the effect of PPP, PRP activated or not with thrombin and bone marrow stem cells (BMSC) associated with PRP on the healing of replanted teeth. Four adult hybrid dogs were used in this study. PRP and PPP were obtained trough double centrifugation technique of blood collected from the jugular vein of the animals. CTM were obtained from bone marrow aspiration (BMA) and isolated by density gradient centrifugation method. Flow Cytometry Analysis (FCA) was performed after BMA using CD34 and CD90 cells markers. After 30 minutes of extraction, teeth were replanted and, according to the methodological proposal, divided into 5 Groups: Group I – teeth replanted without any material (Control); Group II – teeth replanted with Platelet-poor Plasma (PPP); Group III – teeth replanted with Platelet-rich plasma activated by sodium chloride (PRP); Group IV – teeth replanted with Platelet-rich plasma activated by bovine thrombin and sodium chloride (PRP + TR) and Group V – teeth replanted with bone marrow stem cells associated with PRP activated by sodium chloride (BMSC + PRP). Histological, histomorphometric and immunohistochemical analysis were assessed 120 days after reimplantation. Analysis of variance (ANOVA) and Tukey post-hoc test were used for the statistical analysis, with the level of significance set at 5%. FCA showed 55.98% of CD34+ and 33.28% of CD90+ after BMA. Group V (BMSC + PRP) presented the largest areas of replacement resorption, confirmed... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-26Bitstream added on 2015-05-14T16:59:12Z : No. of bitstreams: 1 000829044.pdf: 414488 bytes, checksum: 9ccb90602e34bd027befe2e9c3a9d742 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: O câncer é doença caracterizada por desvio dos mecanismos de controle que regulam a sobrevida, proliferação e diferenciação de células. A cirurgia, quimioterapia e a radioterapia são os tratamentos utilizados em pacientes oncológicos. Agentes quimioterápicos como o metotrexate (MTX) são considerados antineoplásicos efetivos. Ele pertence à classe dos antimetabólitos que atuam sobre o metabolismo intermediário das células em proliferação. Por ser cada vez mais utilizado nos protocolos de tratamento de câncer, e com doses progressivamente maiores, a ocorrência de toxicidade do tecido nervoso central pelo MTX está aumentada. O mecanismo exato desencadeador de neurotoxicidade não foi elucidado. A manifestação clínica da neurotoxicidade após sua administração pela via subaracnóidea é a aracnoidite química e ocorre em aproximadamente 50% dos pacientes. Relatos de casos associaram-no também a síndrome da cauda equina. Objetivo: Avaliar os efeitos que doses múltiplas de MTX administradas pela via subaracnoidea determinam sobre a medula espinal e as meninges de coelhos. Método: Trinta coelhos adultos jovens, machos, da raça Grupo Genético de Botucatu, pesando entre 3000 g e 3900 g, comprimento de coluna vertebral entre 36 e 40 cm e superfície corpórea entre 0,19 e 0,22 m2 foram divididos, por sorteio, em três grupos (G): G1, punção subaracnóidea, G2, solução fisiológica e G3, MTX. Após anestesia venosa com xilaziana e cetamina foi realizada a punção subaracnoidea em S1-S2 e injetada a solução sorteada no G2 e G3. Os animais de G3 receberam MTX em volume correspondente a 12 mg.m2 de superfície corpórea (0,1mL), os de G2 igual volume de solução fisiológica e nos de G1 foi realizada somente punção subaracnóidea. Este procedimento foi repetido quatro vezes em intervalos de 7 dias. Os animais foram avaliados clinicamente quanto à sensibilidade e motricidade por 21 dias e após ... / Background: Cancer is a disease characterized by deviation of control mechanisms that regulate the survival, proliferation and differentiation of cells. Surgery, chemotherapy and radiotherapy are treatments used in oncology patients. Chemotherapeutic agents such as methotrexate (MTX) are considered effective antineoplastic agents. MTX belongs to the class of antimetabolites that act on the intermediary metabolism of cells on proliferation. For being increasingly used in cancer treatment protocols with progressively larger doses, the occurrence of central nervous tissue toxicity by MTX is increasing. The exact mechanism for triggering neurotoxicity has not been elucidated. The most common clinical manifestation of neurotoxicity after MTX administration is chemical aracnoiditis. Cases of cauda equina syndrome were also described. Objectives: To evaluate the effects of multiple subarachnoid doses of MTX over spinal cord and meninges of rabbits. Method: Thirty male young adults rabbits, breed genetic Group Botucatu, weighing between 3000 and 3900 g, with spinal length between 36 and 40 cm, and corporeal surface area between 0.22 and 0.19 m2 were divided by lot into three groups (G): G1, subarachnoid puncture; G2, saline solution; and G3, methotrexate. After intravenous anesthesia with xilaziana and ketamine, subarachnoid puncture was performed in S1-S2. Solution ion was performed inject in G2 and G3. G3 animals received MTX volume corresponding to 12 mg. m2 (0.1 mL); in G2, an equal volume of saline solution, was administered G1 only subarachnoid puncture was performed in S1- S2 intervertebral space. Solution injection was performed in G2 and G3. G3 animals received intrathecal MTX volume corresponded to 12mg.m2 (0.1 ml); in G2, an equal volume of saline solution was administered, while in G1 only subarachnoid puncture was performed. The same procedure was repeated four times at 7 days interval. Animals ... / FAPESP: 2011/02291-7

Resumo não disponível.

Lesões agudas da medula espinhal são de ocorrência comum em certas raças condrodistróficas como a Dachshund. Nessa raça, um desenvolvimento anormal do disco intervertebral causa uma precoce desidratação e mineralização do núcleo pulposo. Como conseqüência da degeneração discal, esses cães são propensos à extrusão discal aguda que resulta em lesão da medula espinhal contusiva e compressiva. A cirurgia descompressiva é o método de tratamento para cães com disfunção neurológica secundária à compressão da medula espinhal e o prognóstico para recuperação funcional é determinado principalmente pela severidade da lesão na medula espinhal. A perda da sensação de dor profunda em cães com doença do disco intervertebral indica lesão grave da medula espinhal e costuma ser considerada como um mau prognóstico. Existem poucos estudos com um número significativo de casos documentando a recuperação após cirurgia descompressiva em cães com ausência de percepção de dor profunda. A cirurgia raramente é recomendada se a percepção de dor profunda está ausente por mais de 48 horas, mas não foi comprovado um período de tempo mais preciso para tal recomendação. Este trabalho teve como objetivo avaliar a recuperação funcional dos membros pélvicos de cães da raça Dachshund paraplégicos com ausência de percepção de dor profunda por um período inferior e superior a 48 horas, devido à extrusão discal, submetidos à cirurgia descompressiva. Trinta cães paraplégicos foram distribuídos em dois grupos, sendo o primeiro formado por animais com ausência da sensação de dor profunda nos membros pélvicos por um período inferior a 48 horas e o segundo por um período superior a 48 horas. Em todos os pacientes foram realizados exame mielográfico e cirurgia descompressiva (hemilaminectomia). Posteriormente, esses animais foram submetidos a exame neurológico e avaliados quanto ao grau de locomoção e percepção de dor profunda. Apenas foram considerados recuperados os animais que demonstraram grau 3, 4 ou 5 de locomoção (paresia leve, ataxia ou exame neurológico normal). Os resultados comprovaram que pacientes com ausência de dor profunda devido à extrusão do disco intervertebral devem ser considerados candidatos à cirurgia descompressiva. O argumento de um prognóstico ruim, como afirmado em alguns estudos prévios, não se justifica baseado na duração da ausência de dor profunda antes do procedimento cirúrgico. O retorno da percepção de dor profunda dentro de 4 semanas pode ser associado com prognóstico favorável para retorno da locomoção (grau 3, 4 ou 5). A nova escala estabelecida dos graus de locomoção foi útil na avaliação da recuperação funcional de cães paraplégicos. / Acute lesions of spinal cord are a common occurrence in certain chondrodystrophic breeds such as Dachshund. In this race, an abnormal development of the intervertebral disc causes an early dehydration and mineralization of the pulposus core. As a result of disc degeneration, these dogs are prone to acute disc extrusion, resulting in a compressive and contusive spinal cord injury. Surgical decompression is the treatment method for dogs with neurological dysfunction secondary to spinal cord compression and the prognosis for functional recovery is mainly determined by the severity of spinal cord injury. The loss of deep pain perception in dogs with IVDD indicates severe injury of the spinal cord and is often considered as a bad prognosis. There are few studies with a good number of cases documenting the recovery after decompressive surgery in dogs with no deep pain perception (DPP). Surgery is rarely recommended if DPP is absent for more than 48 hours, but an exact period of time for such a recommendation has not been clearly established. This study aims to evaluate the functional recovery of pelvic limbs of paraplegic Dachshund breed dogs paraplegic with no deep pain perception for a period inferior and superior to 48 hours due to disc extrusion and submitted to surgical decompression. Thirty dogs were divided into two groups; the first consists of paraplegic dogs with no sense of deep pain in the pelvic limbs for less than 48 hours and the second, formed by dogs more than 48 hours. All patients underwent to myelographic examination and surgical decompression (hemilaminectomy). Thereafter, these animals were submitted to neurological examination and evaluated about their degree of movement and deep pain perception. Only were considered as recovered animals that reached locomotion grade 3, 4 or 5. The results showed that patients with absence of deep pain due to intervertebral disc extrusion should be considered candidates for decompressive surgery. The argument of a poor prognosis, as stated in some previous studies, was not justified based on duration of deep pain absence before surgery. The return of deep pain perception within 4 weeks may be associated with favorable prognosis for return of locomotion (grade 3, 4 or 5). The established grade of movement degrees was useful in evaluating the functional recovery of paraplegic dogs.