Thesis (doctoral)--Lund University, 1997. / Added t.p. with thesis statement inserted.

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:40:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000015.pdf: 28187182 bytes, checksum: 7c5d1bdc37db0b9acc0900ca0cd85dce (MD5) Previous issue date: 2008 / O Bacillus sphaericus (Bsp) é uma bactéria entomopatógena eficiente para o controle de Culex quinquefasciatus, um importante vetor da filariose e arboviroses. O fator larvicida do Bsp é a toxina binária (Bin) e a sua ação em C. quinquefasciatus depende da ligação ao receptor Cqm1. A ausência deste receptor no epitélio intestinal é o principal mecanismo de resistência à toxina Bin. Larvas resistentes a esta toxina, são susceptíveis ao Bsp IAB59 que, além da Bin, produz as toxinas Cry48Aa e Cry49Aa. O principal objetivo deste estudo foi caracterizar os efeitos de toxinas do Bsp nas células do epitélio intestinal de C. quinquefasciatus, utilizando como modelos larvas de uma colônia susceptível a todas as toxinas estudadas (S), de uma colônia resistente à toxina Bin (R2362) e de uma colônia resistente à Bin e Cry48Aa/Cry49Aa (RIAB59). Na primeira etapa, larvas não tratadas das colônias S e R2362 disseccionadas 30 min, 4, 6 e 48 h após a muda para o 4° estádio foram fixadas e processadas para microscopia eletrônica de transmissão (MET). A avaliação morfológica do epitélio intestinal mostrou que células de larvas R2362, ao final do 4° estádio, são caracterizadas por um intenso acúmulo de inclusões lipídicas, sugerindo que a ausência da a-glicosidase Cqm1 pode estar envolvida com alterações no metabolismo. Para caracterizar os efeitos causados pelas toxinas no epitélio intestinal, as larvas foram disseccionadas 1 e 6 h após o tratamento e processadas para MET. A avaliação ultra-estrutural da ação da toxina Bin nas células do epitélio intestinal mostrou que os principais efeitos em larvas S foram a vacuolização citoplasmática e destruição de microvilosidades. Estes foram observados exclusivamente em células que possuem o receptor Cqm1, demonstrando que esta molécula é essencial para mediar a ação da toxina Bin. Em células de larvas das colônias S e R2362, susceptíveis à Cry48Aa/Cry49Aa, o principal efeito destas toxinas foi a vacuolização mitocondrial, e este parece estar associado à Cry48Aa que possui estrutura de 3 domínios típica de toxinas da família Cry. Efeitos similares aos da toxina Bin também foram observados e parecem resultantes da ação da Cry49Aa que possui homologia com toxinas do tipo binária. Os dados mostram que a Cry48Aa/Cry49Aa possui uma ação complexa nas células e seu sítio de ligação é diferente do Cqm1. Combinações da toxina Bin com as toxinas Cry11Aa e Cyt1Aa do Bti também provocaram alterações em células de larvas R2362, desprovidas do receptor Cqm1. A combinação Bin/Cry11Aa causou efeitos similares aos induzidos pela toxina Cry48Aa/Cry49Aa, e sugerem que as toxinas de 3 domínios, Cry11Aa e Cry48Aa, podem mediar os efeitos das toxinas Bin e Cry49Aa, respectivamente, nos modelos estudados. A combinação Bin/Cyt1Aa provocou efeitos drásticos como a perda precoce de microvilosidades e a lise celular, característica da toxina Cyt1Aa que apresenta ação citolítica. Os resultados deste trabalho contribuem para o entendimento do modo de ação de toxinas do Bsp, bem como do efeito sinergístico de suas toxinas com aquelas do Bti

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-01Bitstream added on 2014-06-13T21:02:21Z : No. of bitstreams: 1 gomes_mos_dr_jabo.pdf: 698875 bytes, checksum: afd518bba945181192347fd290a0c60e (MD5) / As possíveis diferenças que acometem cães de diferentes idades ainda são pouco estudadas e descritas para esta espécie. O presente estudo avaliou e comparou a composição da microbiota nas fezes e seus produtos de fermentação, aspectos histológicos da mucosa intestinal e a imunidade de cães filhotes, adultos e velhos. Para tal, 30 cães beagle foram divididos igualmente em três grupos: o grupo filhotes (GF), composto por filhotes do desmame aos 10 meses de idade; o grupo adultos (GA), composto por cães adultos entre cinco e seis anos e o grupo velhos (GV), composto por cães velhos entre 10 e 13 anos. Os animais receberam a mesma dieta e nenhum outro tipo de intervenção por 30 dias e após este período amostras de fezes frescas foram colhidas para a mensuração de: pH, determinação da concentração de lactato, ácidos graxos de cadeia curta e ramificada, amônia, indol, fenol, aminas, imunoglobulina A e composição da microbiota. Também foi adquirida amostra de sangue periférico para quantificação das populações linfocitárias CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, e CD21+ por citometria de fluxo, sendo esta analisada em cinco idades (45, 66, 87, 105 e 300 dias) do GF e a média destas avaliações comparada com GA e GV. Após esta análise, foi realizado teste de hipersensibilidade cutânea tardia e ao final destes, os animais foram anestesiados e submetidos a procedimento endoscópico para coleta de fragmentos do estômago e intestinos delgado e grosso para análise histológica dos mesmos. Considerou-se como significativos valores de P≤0,05 e como tendência valores de P<0,1. Observou-se que o GF apresentou maior número de Bifidobacterium spp. e Cluster IV. GV apresentou indicativo de menor atividade sacarolítica bacteriana observada pela menor concentração de acetato, propionato, butirato e ácidos graxos voláteis totais o que... / Possible differences that may occur in dogs of different ages have been little studied and described in this specie. The aim of this study was to evaluate and compare the composition of microbiota and some fermentation products in the feces, histological aspects of intestinal mucosa and immunity of puppies, adults and senior dogs. To perform this, 30 beagle dogs were divided into three groups: Puppy group (GF), composed of puppies from weaning to 10 months old, Adult group (GA), composed of adult dogs between five and six years and Old group (GV), composed of old dogs between 10 and 13 years. Animals received the same diet and no other intervention for 30 days, and after this period, fresh fecal samples were collected for measurement of pH, determining the concentration of lactate, short and branched chain fatty acids, ammonia, indol, phenols, amines, immunoglobulin A and composition of the microbiota. It was also acquired a peripheral blood sample for quantification of lymphocyte populations CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, and CD21+ by flow cytometry, which was analyzed in five ages of GF (45, 66, 87, 105 and 300 days) and the average of these evaluations compared with GA and GV. After this analysis was performed the delayed type hypersensitivity test and by the end of this, animals were anesthetized and submitted to an endoscopic procedure for collecting fragments of stomach and small and large intestines for histological analysis. P values ≤0.05 was considered significant and P values <0.1 as a trend. GF showed greater number of Bifidobacterium spp. and Cluster IV. GV presented an indication of reduced bacterial saccharolytic activity observed by the lower concentration of acetate, propionate, butyrate, and total volatile fatty acids which resulted in higher pH in the feces of this group. GF showed... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-30Bitstream added on 2014-06-13T20:45:01Z : No. of bitstreams: 1 kim_yj_dr_arafo.pdf: 1176074 bytes, checksum: 46110c11d5e206c41d176d1fef40ea28 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Artin M é uma lectina purificada de sementes de Artocarpus heterophyllus que, recentemente, mostrou-se capaz depromover aceleração da cicatrização de lesões por queimadura de pele ou por abrasão da córnea em ratos e coelhos. O objetivo desta tese foi avaliar os efeitos da Artin M no processo de reparação da mucosa mastigatória bucal, por meio de modelos de estudo in vivo. Primeiro estudo: Três feridas cirúrgicas circulares de 6 mm de diâmetro foram criadas na mucosa palatina de 20 cães, e divididas aleatoriamente em 3 grupos de acordo com os tratamentos: C – controle (não tratados), A - Artin M, V - veículo. Quatro animais de cada grupo foram sacrificados após 2, 4, 7, 14 e 21 dias póstratamento e suas maxilas analisadas clinicamente quanto ao padrão de cicatrização, seguido de análise histológica, imuno-histoquímica para antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e atividade de mieloperoxidase. Clinicamente, o grupo A demonstrou melhor cicatrização em todos os períodos quando comparada aos outros grupos (p<0,05). A análise histológica mostrou ter havido no grupo A maior estimulação na produção de fibras colágenas, maturação do tecido de granulação e organização do epitélio. A imunolocalização de PCNA mostrou uma maior tendência na proliferação celular em lesões do grupo A principalmente nos dias iniciais (p<0,05). O influxo de neutrófilos mostrou-se estatisticamente aumentado no grupo A quando comparado aos outros grupos nos dias 2 e 4 (p<0,05). Conclui-se que a Artin M promoveu aceleração na reparação das feridas na mucosa mastigatória em cães, via recrutamento de neutrófilos e indução da proliferação celular. É bem conhecido o envolvimento de mediadores biológicos como citocinas... / Artin M, lectin from Artocarpus heterophyllus seeds, has been demonstrated to stimulate recruitment and activation of neutrophil and mast cells. Furthermore, it has been shown to accelerate the process of wound healing on burn injuries and corneal epithelial lesions in rats and rabbits, respectively. The aim of this study was to evaluate the effects of Artin M on wound healing in palatal mucosa in two animal models. Study 1: Three wounds of 6 mm full thickness were surgically created in the hard palate mucosa of twenty dogs. The wounds of each animal were randomly divided into three groups according to one of the treatment assigned: C– Control (nontreated), A- Artin M gel, and V– Vehicle (carboxymethylcellulose 3% gel). Four animals per group were sacrificed at 2, 4, 7, 14 and 21 days post-surgery. Before sacrifice, wounded areas were photographed and scored for macroscopic healing evaluation. Afterwards, maxillary tissue were harvested and divided to perform histological analysis, immunohistochemical staining against Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) and measurement of myeloperoxidase activity. Clinical analysis showed that wound closure was accelerated in group A in comparison to other groups in all periods. Histological features showed enhanced reepithelization and collagen fiber formation resulting in faster maturation of granular tissue in group A compared to the other groups, by day 14. Artin M treatment significantly induced cells proliferation at day 2 and 4 (p<0.05). Neutrophils infiltration in the group A was significantly higher than in the other groups at days 2 and 4 (p<0.05). The results suggest that Artin M gel may potentially facilitate wound healing on palatal mucosa via the recruitment of neutrophils and promotion of cells proliferation. It is well known that cytokines and growth... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Áulus Cavalieri Carciofi / Banca: Áureo Evangelista Santana / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Banca: Lilian Rose Marques de Sá / Banca: Márcio Antonio Brunetto / Resumo: As possíveis diferenças que acometem cães de diferentes idades ainda são pouco estudadas e descritas para esta espécie. O presente estudo avaliou e comparou a composição da microbiota nas fezes e seus produtos de fermentação, aspectos histológicos da mucosa intestinal e a imunidade de cães filhotes, adultos e velhos. Para tal, 30 cães beagle foram divididos igualmente em três grupos: o grupo filhotes (GF), composto por filhotes do desmame aos 10 meses de idade; o grupo adultos (GA), composto por cães adultos entre cinco e seis anos e o grupo velhos (GV), composto por cães velhos entre 10 e 13 anos. Os animais receberam a mesma dieta e nenhum outro tipo de intervenção por 30 dias e após este período amostras de fezes frescas foram colhidas para a mensuração de: pH, determinação da concentração de lactato, ácidos graxos de cadeia curta e ramificada, amônia, indol, fenol, aminas, imunoglobulina A e composição da microbiota. Também foi adquirida amostra de sangue periférico para quantificação das populações linfocitárias CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, e CD21+ por citometria de fluxo, sendo esta analisada em cinco idades (45, 66, 87, 105 e 300 dias) do GF e a média destas avaliações comparada com GA e GV. Após esta análise, foi realizado teste de hipersensibilidade cutânea tardia e ao final destes, os animais foram anestesiados e submetidos a procedimento endoscópico para coleta de fragmentos do estômago e intestinos delgado e grosso para análise histológica dos mesmos. Considerou-se como significativos valores de P≤0,05 e como tendência valores de P<0,1. Observou-se que o GF apresentou maior número de Bifidobacterium spp. e Cluster IV. GV apresentou indicativo de menor atividade sacarolítica bacteriana observada pela menor concentração de acetato, propionato, butirato e ácidos graxos voláteis totais o que... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Possible differences that may occur in dogs of different ages have been little studied and described in this specie. The aim of this study was to evaluate and compare the composition of microbiota and some fermentation products in the feces, histological aspects of intestinal mucosa and immunity of puppies, adults and senior dogs. To perform this, 30 beagle dogs were divided into three groups: Puppy group (GF), composed of puppies from weaning to 10 months old, Adult group (GA), composed of adult dogs between five and six years and Old group (GV), composed of old dogs between 10 and 13 years. Animals received the same diet and no other intervention for 30 days, and after this period, fresh fecal samples were collected for measurement of pH, determining the concentration of lactate, short and branched chain fatty acids, ammonia, indol, phenols, amines, immunoglobulin A and composition of the microbiota. It was also acquired a peripheral blood sample for quantification of lymphocyte populations CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, and CD21+ by flow cytometry, which was analyzed in five ages of GF (45, 66, 87, 105 and 300 days) and the average of these evaluations compared with GA and GV. After this analysis was performed the delayed type hypersensitivity test and by the end of this, animals were anesthetized and submitted to an endoscopic procedure for collecting fragments of stomach and small and large intestines for histological analysis. P values ≤0.05 was considered significant and P values <0.1 as a trend. GF showed greater number of Bifidobacterium spp. and Cluster IV. GV presented an indication of reduced bacterial saccharolytic activity observed by the lower concentration of acetate, propionate, butyrate, and total volatile fatty acids which resulted in higher pH in the feces of this group. GF showed... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Fabio Cesar Braga de Abreu e Lima / Banca: Rosane Lizarelli / Banca: Marcelo Chaves Donizeti / Banca: Cyneu Pansani / Banca: Elaine Maria Sgavioli Massucato / Resumo: A cavidade oral é alvo freqüente dos efeitos tóxicos dos agentes antineoplásicos por apresentar tecidos com rápida divisão celular, comparável à dos tumores malignos. Uma das complicações orais mais freqüentes da quimioterapia é a mucosite, uma alteração de caráter inflamatório para a qual ainda não existe tratamento definido. Considerando-se a relevância clínica da mucosite, é importante encontrar meios para tratá-la. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do LILT na redução da incidência e da severidade da mucosite induzida em hamsters. O quimioterápico 5-FU foi aplicado em 60 animais (distribuídos em 5 grupos) nos dias 0 e 2 do experimento, nas doses de 90 e 60 mL/Kg de peso, respectivamente. Para simular o efeito de uma irritação crônica, as mucosas jugais dos animais foram escarificadas nos dias 3 e 4. Aplicou-se o LILT em 3 pontos da mucosa jugal direita dos animais dos Grupos I, II, III e IV em dias alternados. Os animais do Grupo V não receberam tratamento. Nos dias 8 e 12 do experimento, as mucosas de 6 animais por grupo foram removidas para avaliação histopatológica. A partir de fotografias tiradas diariamente, a mucosite foi classificada clinicamente. O teste de Mann-Whitney demonstrou haver diferenças estatisticamente significantes (p<0,05) entre os grupos tratados com laser e o grupo não tratado quando se comparou, clinica e histopatologicamente, a intensidade da mucosite induzida. Concluiu-se que a aplicação do LILT, nos parâmetros determinados para este estudo, promoveu a redução da severidade da mucosite oral e acelerou a cura das lesões, parecendo haver maior melhora nos animais que receberam 12 e 72 J/cm2. / Abstract: Toxic and dose-limiting effects of antineoplastic agents in oral cavity are frequently observed during cancer therapy. The available therapies are not able to destroy tumor cells without causing damage to the rapid dividing cells in normal tissues like the epithelial cells in the oral mucosa. Mucositis is the most debilitating side effect, for which there is no established treatment. Considering the clinical significance of mucositis, it is important to find ways to treat this condition. The present study was conducted to evaluate the LILT effects on reduction of chemotherapy-induced mucositis in hamsters. Mucositis was induced in 60 animals with intraperitoneal injections of 5-fluorouracil (5-FU) on days 0 and 2, associated with cheek pouches scarification on days 3 and 4. Animals were dived in 5 groups and groups I, II, II, IV and V received laser irradiation at three points in right cheek pouch, at alternate days. Group V received no treatment. The cheek pouches of 6 animals in each group were dissected for histophatological examination on days 4 and 12. Daily photographs were taken and mucositis was clinically scored. The nonparametric test of Mann- Whitney showed statistical difference between treated and non treated group (p<0.05). It was concluded that the LILT protocols established for this study reduced the severity of oral mucositis and accelerated the healing process, with better results when 12 and 72 J/cm2 were used. / Doutor

A mucosite induzida por quimioterapia e radioterapia representa um dos principais efeitos colaterais indesejáveis no tratamento do câncer. A dor associada à mucosite, dificulta a mastigação, a deglutição e freqüentemente é causa de interrupção temporária do tratamento e de atraso na recuperação do paciente. Ela se manifesta por eritema generalizado e/ou lesões ulcerativas na mucosa bucal, laringe e no trato gastrointestinal. O grupo estudado foi composto por 33 pacientes com câncer de cólon com idades entre 28 e 66 anos, 15 mulheres e 18 homens. Noventa e nove ciclos de quimioterapia foram analisados. O esquema de tratamento utilizado foi uma combinação da droga antineoplásica 5-fluorouracil, com o agente modulador ácido folínico. Idade, gênero, fluxo salivar antes e durante o tratamento foram associados à ocorrência de mucosite OMAS e mucosite WHO, tanto para pacientes com fluxo salivar normal quanto para pacientes com fluxo salivar reduzido. Também foram analisados os sítios de maior ocorrência das lesões e o tamanho das lesões em relação aos fluxos normais e reduzidos. A partir dessas associações obtivemos os seguintes resultados: os pacientes com fluxo salivar reduzido antes e durante a quimioterapia desenvolveram mais mucosite OMAS e WHO em comparação com os pacientes com fluxo normal. Os pacientes com fluxo salivar reduzido tiveram mais ulceração, considerando qualquer tamanho de lesão. A semimucosa do lábio inferior e as bordas laterais de língua foram os sítios em que ocorreram a maior incidência de ulceração e as úlceras de maior severidade. / Mucositis induced by chemotherapy and radiotherapy represents one of most undesirable side effects in the cancer treatment. The pain associated to mucositis raise difficulties to patients ability to chew and swallow and frequently causes temporary interruption of treatment and delay in patient recovery. It presents itself as redness and/or ulcerative sores in the soft tissues of the mouth, throat and gastrointestinal tract. The studied group was composed by 33 patients with colon cancer with ages between 28 and 66 years, 15 women and 18 men Ninety nine cycles of chemotherapy were analyzed. A combination of 5-fluorouracil, with folinic acid was used. Age, gender, salivary flow before and during treatment were associated to the occurrence of OMAS and WHO mucositis for patients with normal and reduced salivary flow. Size and sites of ulceration occurrence were also analyzed. The following results were found: the patients with reduction of salivary flow, before and during chemotherapy developed more OMAS and Who mucositis comparing to normal flow patients. Patients with reduced flow also had more ulceration and the mucosal surfaces of inferior lips and the lateral borders of tongue were the sites with more severe ulceration rates.

Orientadores: Francisco Carlos Groppo, Eneida de Paula / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T23:31:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franz-Montan_Michelle_M.pdf: 573727 bytes, checksum: adca86b59035ee8f175fca2d22f1e4f6 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O objetivo deste estudo cruzado e cego foi avaliar a eficácia da anestesia tópica de ropivacaína a 1% (forma lipossomada ou não) em Odontologia. Trinta voluntários foram submetidos à anestesia tópica com quatro anestésicos, em oito sessões (tratamentos) determinadas aleatoriamente: 20mg de gel de ropivacaína a 1% -Ropi-20, 60mg de gel de ropivacaína a 1% -Ropi-60, 20mg de gel de ropivacaína a 1% encapsulada em lipossomas -RopiLipo-20, 60mg de gel de ropivacaína a 1% encapsulada em lipossomas -RopiLipo-60, 20mg da mistura eutética de lidocaína a 2.5% e prilocaína a 2.5% (EMLA cream AstraZeneca®) - EMLA-20, 60mg de EMLA cream -EMLA-60, 20mg de gel de benzocaína a 20% (Benzotop® DFL) -Benzo-20 e 60mg de gel de benzocaína a 20% -Benzo-60. Cada tratamento foi aplicado no fundo de sulco da região de canino superior direito durante dois minutos; o intervalo entre os tratamentos foi de uma semana. Foram avaliadas a anestesia pulpar, por meio de estímulo elétrico (pulp tester); a dor durante a punção por meio das escalas analógica visual (EAV) e de 11 pontos em caixa (E11); e a anestesia em tecido mole por meio de estímulo físico. A influência do anestésico na resposta pulpar foi avaliada durante 20 minutos após a aplicação do anestésico tópico. Não houve diferença estatisticamente significante entre os tratamentos com relação às escalas EAV e E11 (p>0.05). A duração da anestesia em tecido mole com o EMLA-60 e RopiLipo-60 foi maior (p<0.05) do que com os outros tratamentos. No entanto, entre EMLA-60 e RopiLipo-60 não houve diferença estatisticamente significante (p>0.05). Nenhum dos tratamentos avaliados exerceu efeito anestésico sobre o tecido pulpar. Assim, a ropivacaína a 1% encapsulada ou não em lipossomas apresentaram eficácia semelhante em reduzir a dor à punção em comparação aos outros anestésicos avaliados, no entanto, nas condições avaliadas, nenhum dos anestésicos exerceu influência sobre a resposta pulpar / Abstract: The objective of this blind and crossover study was to evaluate the efficacy of 1% ropivacaine (liposomal and nonliposomal) for topical anesthesia in Dentistry. Thirty healthy volunteers randomly received the following treatments in eight sessions: 20mg of 1% ropivacaine -Ropi-20, 60mg of 1% ropivacaine -Ropi-60, 20mg of liposome encapsulated 1% ropivacaine -RopiLipo-20, 60mg of liposome encapsulated 1% ropivacaine -RopiLipo-60, 20mg of the eutectic mixture of 2.5% lidocaine and 2.5% prilocaine (EMLA cream AstraZeneca®) -EMLA-20, 60mg of EMLA cream -EMLA-60, 20mg of 20% benzocaine gel (Benzotop® DFL) -Benzo-20 and 60mg of 20% benzocaine gel -Benzo-60. At different sessions each treatment was applied in the maxillary-buccal fold of the right canine for two minutes; one week of interval between treatments. Pulpal anesthesia was evaluated using an electrical pulp tester; pain during needle insertion by using a visual analogue scale (VAS) and 11-point box scale (BS-11) and soft tissue anesthesia by using a pinprick test. The influence on pulpal response was assessed for 20 minutes after topical application. There were no statistically significant differences among treatments considering VAS and BS-11 scores (p=0.177 and p=0.179, respectively). RopiLipo-60 and EMLA-60 provided a statistically significant longer duration of topical anesthesia than the other topical agents (p<0.05), however, RopiLipo-60 was not significantly different from EMLA-60 (p>0.05). There was no influence on the pulpal response provided by the topical anesthetics evaluated. Liposome and nonliposomal ropivacaine gel at 1% concentration showed similar efficacy for topical anesthesia in oral mucosa when compared to the other topical anesthetics. However, none of the topical anesthetics evaluated were effective in inducing pulpal anesthesia under the evaluated conditions / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Orientador: Maria Heloísa de Souza Lima Blotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T20:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_RosianeMariada_M.pdf: 6290627 bytes, checksum: d2988b9310700896c1ab013ae1e3a509 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM), micose sistêmica causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis, apresenta um largo espectro de manifestações clínicas e imunológicas, variando de formas benignas e localizadas a quadros graves e disseminados. A forma crônica ou adulta (FA) se caracteriza por lesões localizadas com acometimento da pele, mucosa oral (MO) e pulmões; enquanto a forma aguda ou juvenil (FJ) é mais grave e disseminada com acometimento do fígado, baço e linfonodos (LNs). Nós examinamos a resposta inflamatória/imunológica em lesões de pacientes com formas clínicas distintas da PCM. Foram analisados a expressão de citocinas e o fenótipo das células presentes nos infiltrados de biópsias de mucosa oral de 15 pacientes com a forma adulta e de linfonodos de 15 pacientes com a forma juvenil da PCM por imuno-histoquímica (IHQ) e qPCR. Anticorpos monoclonais ou policlonais foram utilizados para caracterizar o infiltrado celular (CD68, CD15, CD3, CD8, CD56 e FOXP3), citocinas...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic disease caused by the fungus P. brasiliensis, presents with a wide spectrum of clinical and immunological manifestations, varying from benign and localized forms to severe and disseminated forms. The chronic or adult form (AF) is characterized by localized lesions with involvement of the skin, oral mucosa (OM) and lungs. While the acute or juvenile form (JF) is more severe and presents disseminated widespread with the involvement of the liver, spleen and lymph nodes (LNs). In order to examine the inflammatory/immune response in lesions of patients with different clinical forms of PCM, we analyzed the expression of cytokines as well as the phenotype of the cells in the inflammatory infiltrate. Paraffin-embedded OM biopsies from 15 patients with the localized AF of PCM and LN from 15 patients with the JF of PCM were analyzed by immunohistochemistry (IHC) and qPCR. Monoclonal or polyclonal antibodies were used to characterize the cellular infiltrate (CD68, CD15, CD3, CD8, CD56, and FOXP3), cytokines...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

PDase II activity was determined using a synthetic substrate, the 2,4-dinitrophenyl ester of thymidine 3'-phosphate. The enzyme activity was estimated in fractions obtained by differential centrifugation of homogenates of epithelial cells fromt.the small intestinal mucosa of guinea pigs and rats. In guinea pig preparations PDase II occurred with highest specific activity in those fractions rich in succinate dehydrogenase and acid phosphatase. A lysosomal location for the guinea pig enzyme was indicated by its structure-linked latency and by its association with particles which underwent a characteristic decrease in equilibrium density when Triton WR-1339 was injected into the animals. With rat preparations a much greater proportion of the PDase II activity was found in the soluble fraction after uult-ra;c;entrifugation. The rat enzyme exhibited a lower degree of latency and administration of Triton WR-1339 had no effect. The rat enzyme activity in these crude preparations further differed from that of the guinea pig in other respects; it was more labile at 60°C, exhibited a slightly lower pH optimum, had a higher molecular weight as determined by gel filtration chromatography and displayed a much smaller tendency to aggregate under Llow salt conditions. Both enzymes were purified by chromatography on DEAE-cellulose, CM-cellulose and agarose, the extensive purification (550 fold) of the rat enzyme being largely due to its behaviour oh the latter material where it was found to bind tenaciously in low ionic strength solutions. On the other hand, only a fifteen-fold purification of the guinea pig enzyme was obtained because of its tendency tofform insoluble aggregatesdduring the chromatographic steps. In the main, the properties of the partially purified enzymes were quite similar. Both displayed pH optima between pH 6 and 7, were inhibited in solutions of high ionic strength, were unaffected' by divalent cations or EDTA, were similarly inactivated by heating at a temperature of 60°G displayed discontinuous Arrhenius plots _5 and exhibited Km values of the order 2-5x10 M for dTpDNP. In most casestfche differences between the enzymes were just differences of degree and could probably be accounted for byethe different extents to which the enzymes were purified. A more extensive characterization of the highly purified rat PDase was carried out. The fall-off in PDase II reaction rate observed at high enzyme levels with dTpDNP as substrate was found to be due to competitive inhibition of the enzyme by dTp, a reaction product which showed a of 2x10 M. The isoelectric point of PDase II was estimated by electrofocusing but since multiple peaks of activity were found at pH 3.4, 4.2-4.5, and pH 7.2 a conclusive result was not obtained. Polyacrylamide gel electrophoresis of purified rat PDase II indicated that the pattern obtained was, in part, dependent on whether the preparation was fresh or not; freshly purified PDase II contained up to 10 bands in gels stained for protein whereas only 1-2 bands were obtained when the preparations were "aged". A molecular weight of 150000-170000 for the enzyme was estimated in experiments performed by gel-filtration chromatography on dextran and agarose gels. Investigation of the interaction with, and hydrolysis by, rat PDase II of a number of possible phosphodiester substrates indicated that'-, the enzyme required a nucleoside 3'-phosphoryl residue for the initiation of hydrolysis which then proceeded in a 5'+3' direction. Finally, the effect of some enzyme inhibitors was investigated. PDase II activity was inhibited in the presence; of NEM, PCMB, PCMPS and iodoacetic acid. It was further found that the inactivation by iodoacetic acid could be prevented by the presence of a PDase substrate or, better still, by dTp. This is good evidence that iodoacetate alkylates an essential residue at the active center of PDase II and is the first time that such an effect has been shown for a PDase. / Medicine, Faculty of / Biochemistry and Molecular Biology, Department of / Graduate