Die Pathophysiologie der akuten Pankreatitis ist durch eine immunologische Dysregulation gekennzeichnet, deren genaue Mechanismen unvollständig verstanden sind. Zur Untersuchung des Einflusses des Stressproteins p8 wurde die akute experimentelle Pankreatitis in einer p8-defizienten Mauslinie induziert und das Immunsystem phänotypisiert. Auf die Entwicklung des Immun- und Organsystems hat eine p8-Deletion keinen Einfluss, jedoch ist die Immunseneszenz verbunden mit einer Splenomegalie, Milzsiderose und extramedullärer Hämatopoese. Die akute Pankreatitis verläuft bei Fehlen von p8 wesentlich schwerer, begleitet von einem stärkeren Verlust an CD4+ T-Zellen in Blut und Milz. In der Phase der Rekonvaleszenz kommt es unter p8-Defizienz zu einem gehäuften Auftreten lymphozytärer Apoptosen in der Milz, begleitet von einer schweren Mikroarchitekturstörung und Verlust von Lymphfollikeln. Es kann erstmals eine antiapoptotische Wirkung von p8 auf aktivierte Milzlymphozyten während der postinflammatorischen Immunrekonstitution postuliert werden, wobei die involvierten Signalwege weiter untersucht werden müssen.

Context: Beta-site alpha-amyloid protein cleaving enzyme1 (BACE1) plays a key role in the pathogenesis of Alzheimer’s disease. Additional to its moderate expression in the brain, high levels of BACE1 mRNA were found in the pancreas. Murine Bace1 has been immunohistochemicaly detected at the apical pole of acinar cells within the exocrine pancreas of mice and Bace1 activity was observed in pancreatic juice. In vitro experiments revealed enteropeptidase as a putative substrate for Bace1 suggesting a role in acute pancreatitis.

Thesis (Ph.D. in Molecular Biology) -- University of Colorado Denver, 2007. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 162-196). Free to UCD affiliates. Online version available via ProQuest Digital Dissertations;

Tumor-infiltrating myeloid-derived suppressor cells (MDSCs), are important mediators of a tumor-permissive microenvironment that contributes to tumor growth and could account for the limited success of immunotherapeutic strategies. MDSCs suppress adaptive immunity by blocking T cell activation, inducing Treg accumulation, and inhibiting natural killer cell cytotoxicity against tumor cells. We investigated the roles of MDSCs in the regeneration of the exocrine pancreas associated with acute pancreatitis and the progression of acinar to ductal metaplasia. Acute pancreatitis was induced in wild type and P48+/Cre;LSL-KRASG12D mice using caerulein and an early influx of MDSCs into the pancreas was observed flow cytometry and immunocytochemistry. Numbers of Gr1(+)CD11b(+) MDSCs increased over 20-fold in pancreata of mice with acute pancreatitis to account for nearly 15% of intrapancreatic leukocytes and have T cell suppressive properties. This marked accumulation of MDSCs returned to normal values within 24 hours of the insult in wild type mice; however, in the oncogenic KRAS mice, MDSCs levels remained elevated. When intrapancreatic MDSCs were depleted by administration of a CXCR2 antagonist (SB265610) in wild type mice the severity of acinar damage was increased. This was also accompanied by a delayed regeneration determined morphologically and with the mitotic immunomarker phospho-histone H3. Isolated intrapancreatic MDSCs from treated mice induce naïve acinar cells to undergo acinar ductal metaplasia when co-cultured in collagen 3D cultures. Purified splenic MDSCs failed to induce the phenotypic transdifferentiation. We conclude that MDSCs are required for adequate pancreatic regeneration in wild type mice with acute pancreatitis and their persistent elevation in oncogenic KRAS mice is not only associated with immune-evasion, but may also function as direct enhancer of malignant proliferation.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / IntroduÃÃo e objetivos: Os neutrÃfilos desempenham importante papel na pancreatite aguda grave. InfiltraÃÃo de neutrÃfilos no pÃncreas à um processo complexo, coordenado por molÃculas de adesÃo especÃficas, tais como a P-selectina. Fucoidina à um polissacarÃdeo sulfatado que bloqueia a funÃÃo da L-e P-selectinas. No presente estudo avaliamos se o tratamento com fucoidina poderia impedir a infiltraÃÃo de neutrÃfilos e, assim, reverter a inflamaÃÃo sistÃmica e dismotilidades gastrintestinais associadas à pancreatite aguda grave. MÃtodos: A pancreatite aguda foi induzida em camundongos Swiss pela infusÃo retrÃgrada de Ãcido taurolitocÃlico (3,0%) (TLC-S) no ducto pancreÃtico ou por injeÃÃes intraperitoneais de ceruleÃna (50 Âg/kg/h). Os grupos experimentais receberam fucoidina (25 mg/kg, iv) antes da induÃÃo da pancreatite, e os grupos de controle receberam apenas soluÃÃo salina. ApÃs 24 horas, os nÃveis sÃricos de amilase, lipase, IL-1β, TNF-α, nitrito e de malondialdeÃdo (MDA) pancreÃtico foram medidos. AlÃm disso, a atividade de mieloperoxidase (MPO) (pulmÃo, pÃncreas, estÃmago e jejuno) e avaliaÃÃo histolÃgica (pÃncreas) foram determinadas. O esvaziamento gÃstrico e trÃnsito gastrintestinal foram medidos pelo mÃtodo de centro geomÃtrico. A contratilidade gastrintestinal in vitro foi registrada atravÃs de transdutores de forÃa conectados a sistema computadorizado de aquisiÃÃo de dados. Carbacol (0,01 ÂM - 30 ÂM), KCl 60 mM e estimulaÃÃo elÃctrica (0,5-8,0 Hz; 1ms, 40 V), foram aplicados sobre o fundo gÃstrico e jejuno dos animais 24 horas apÃs a pancreatite induzida por TLC-S. Resultados: Os nÃveis de MDA pancreÃtico, amilase, lipase, nitrito, TNF-α e IL-1β sÃricos, bem como MPO pancreÃtica e pulmonar estavam aumentados tanto no modelo de pancreatite aguda induzida por TLCS quanto no modelo ceruleÃna quando comparado aos grupos controle correspondentes. Fucoidina reduziu significativamente os nÃveis aumentados de amilase, lipase, MPO pancreÃtica e pulmonar, MDA, TNF-α, IL-1β e nitrito em ambos os modelos de pancreatite aguda. As mudanÃas histolÃgicas observadas no pÃncreas em ambos os modelos foram significativamente atenuadas pela fucoidina. O modelo de pancreatite aguda induzida por TLC-S induziu retardo no esvaziamento gÃstrico e trÃnsito gastrointestinal, aumento de MPO no estÃmago e no jejuno, alÃm de hipercontratilidade de jejuno in vitro. Fucoidina reverteu significativamente os distÃrbios gastrintestinais in vivo e in vitro e os nÃveis aumentados de MPO gÃstrica e jejunal induzidos pela injeÃÃo de TLC-S. ConclusÃo: Fucoidina reduziu a gravidade da pancreatite aguda experimental atravÃs da diminuiÃÃo da infiltraÃÃo de neutrÃfilos, inflamaÃÃo sistÃmica e dismotilidades gastrintestinais, sugerindo que a modulaÃÃo das selectinas, pode constituir uma abordagem terapÃutica promissora para pancreatite aguda. / Background & Aims: Neutrophils play a critical role in severe acute pancreatitis. Tissue infiltration of neutrophils in the pancreas is a multistep process, coordinated by specific adhesion molecules, such as P-selectin. Fucoidin is a sulphated fucosylated polysaccharide that binds to and blocks the function of L- and P-selectins, and the present study has evaluated whether fucoidin treatment could prevent neutrophil infiltration, and thereby reverse the systemic inflammation and gastrointestinal dysmotility associated with severe acute pancreatitis. Methods: Acute pancreatitis was induced in Swiss mice either by the retrograde infusion of taurolithocholic acid (3.0%) (TLC-S) into the pancreatic duct or by intraperitoneal injections of cerulein (50 Âg/kg/h). The experimental groups received fucoidan (25 mg/kg, i.v.) before pancreatitis induction whist control groups received only saline. After 24 hours, pancreatic malondialdehyde (MDA), serum amylase, lipase, IL-1β, TNF- and nitrite were measured. In addition, myeloperoxidase (MPO) activity (lung, pancreas, stomach and jejunum) and histological assessment (pancreas) were determined. Gastric emptying and gastrointestinal transit (using the geometric center method) were also measured. Gastrointestinal contractility in vitro was recorded through force transducers coupled to a computerized data acquisition system, carbachol (0,01 ÂM â 30 ÂM), KCl 60mM and electrical field stimulation (0.5-8.0 Hz; 1ms; 40 V), was applied on gastric fundus and jejunum of mice 24 hours after TLC-S induced pancreatitis. Results: Pancreatic MDA, serum amylase, lipase, nitrite, TNF- and IL-1β, pancreatic and lung MPO, were increased in both TLCS- and cerulein acute pancreatitis compared with respective control groups. Fucoidan significantly decreased the augmented levels of amylase, lipase, pancreatic and lung MPO, MDA, TNF-, IL-1β and nitrite in both acute pancreatitis models. Pancreas histological changes observed in both models were significantly attenuated by fucoidan. The acute pancreatitis model induced by TLC-S caused delayed gastric emptying and gastrointestinal transit, incresead gastric and jejunum MPO, and jejunum hypercontractility in vitro. Fucoidan significantly reversed the gastrointestinal disorders in vivo and in vitro and augmented levels of gastric and jejunum MPO induced by TLC-S. Conclusion: Fucoidan reduced the severity of acute pancreatitis in mice by decreasing neutrophil infiltration, systemic inflammation and gastrointestinal dysmotility, suggesting that modulation of selectins may constitute a promising therapeutic approach for acute pancreatitis.

Introdução: Vários são os mecanismos envolvidos no desenvolvimento da resposta local e sistêmico na pancreatite aguda. O sistema cardiovascular pode ser afetado durante todo o curso clínico da pancreatite aguda. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção local de citocinas pelo miocárdio, assim como, as alterações funcionais e histológicas do miocárdio na pancreatite aguda grave. Métodos: Os animais foram divididos em três grupos: Grupo 1: controle; Grupo 2: controle operado; Grupo 3: pancreatite aguda grave. Foram medidos os níveis séricos de amilase e de citocinas (TNF-alfa IL-6 e IL-10), expressão de RNAm de TNF-alfa, IL-6 e TGF-beta e ecocardiograma com avaliação da função cardíaca. Alterações do tecido cardíaco foram analisadas pelo exame histológico. Resultados: Os níveis séricos de TNF-alfa e IL-10 foram significativamente maiores no grupo pancreatite aguda 2h. Os níveis de RNAm de IL-6 do grupo pancreatite aguda 2h foram estatisticamente superiores. Os níveis de RNAm do TNF-alfa do grupo controle operado e pancreatite aguda 2h foram estatisticamente menores. Mudanças significativas no diâmetro do ventrículo esquerdo foram encontradas nos grupos pancreatite aguda 2h e 12h. Houve alterações estatísticas para a degeneração vacuolar, picnose e perda de núcleo, e os linfócitos. Conclusão: Encontramos alterações cardíacas e histológicas compatíveis com o processo inflamatório desencadeado por pancreatite aguda grave com o incremento da produção de citocinas pelo miocárdio / Background: Several mechanisms are involved in the development of the local and systemic response in acute pancreatitis. Cardiovascular system may be affected throughout the clinical course of acute pancreatitis. The aim was to evaluate local myocardial cytokine production, as well as, functional and histological myocardial alterations in severe acute pancreatitis. Methods: The animals were divided into three groups: Group 1: control; Group 2: sham; Group 3: severe acute pancreatitis. Echocardiographic assessment of cardiac function, serum levels of amylase and cytokines (TNF-alfa, IL-6 and IL-10), and mRNA expression of TNF-alfa, IL-6 and TGF-beta were measured. Myocardial tissue alterations were analysed by histological examination. Results: The serum TNF-alfa, and IL-10 levels were significant higher in acute pancreatitis 2h group. The mRNA IL-6 levels from acute pancreatitis 2h group were statistically higher. The mRNA TNF-alfa levels from sham group and acute pancreatitis 2h group were statistically lower. Significant changes in the left ventricular diameter were found in acute pancreatitis 2h and 12h groups. There were statistical changes for vacuolar degeneration, picnosis and loss of nucleus, and lymphocytes. Conclusion: We found cardiac and histological changes compatible with the inflammatory process triggered by severe acute pancreatitis with the promotion of local myocardial cytokine production

Orientadores: Elinton Adami Chaim, José Carlos Pareja / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T22:56:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gestic_MartinhoAntonio_M.pdf: 3381516 bytes, checksum: 2ac6e6bb2938cf49388dd92cfe4fb63c (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O tratamento cirúrgico da pancreatite crônica é indicado na falência do tratamento clínico da dor e na presença de complicações da doença. O emprego da melhor técnica ainda é um desafio e, ao longo do último século, várias técnicas foram desenvolvidas determinando três padrões de procedimento: descompressivos, ressecativos e mistos. A técnica de Frey é do tipo mista, recentemente desenvolvida e que apresenta excelentes resultados no alívio da dor secundária à pancreatite crônica. Seu princípio propõe baixas taxas de morbidade e mortalidade pós-operatórias e menor dano às funções pancreáticas comparáveis às cirurgias descompressivas (Partington-Rochelle, Puestow) com a mesma efetividade das cirurgias ressecativas (duodenopancreatectomias) no controle da dor. O objetivo deste trabalho é descrever a casuística e analisar os resultados de uma série consecutiva de pacientes com pancreatite crônica submetidos à técnica de Frey no Hospital de Clínicas da UNICAMP. Foram analisados retrospectivamente 73 pacientes consecutivos de janeiro de 1991 a dezembro de 2007, sem tratamento cirúrgico prévio para pancreatite crônica e com pelo menos um ano de seguimento pós-operatório. Estudou-se o perfil da população, indicação cirúrgica, complicações pós-operatórias e resultados a longo prazo no controle da dor e das complicações. Os pacientes apresentaram idade média de 40,6 anos, sendo a maioria homens (97,3%) e a etiologia alcoólica foi a mais freqüente (95,9%). A dor abdominal acometia todos os pacientes, 98,8% com intensidade moderada ou severa. A taxa de morbidade global foi de 28,7% e as complicações mais freqüentes foram as infecciosas (13,7%), dentre elas as pneumonias; a prevalência de fístulas da anastomose pancreática foi de 6,8%. Não houve mortalidade cirúrgica. Em seguimento médio de 77,0 meses, 91,4% dos pacientes apresentavam remissão dolorosa completa e houve aumento do IMC no pós-operatório (p < 0,001). Insuficiência exócrina nova apareceu em 49% dos pacientes e diabetes de novo em 36,7%. A recidiva de ingestão alcoólica ocorreu em 32,9% dos pacientes, os quais apresentaram menor expectativa de vida em relação àqueles que se mantiveram abstêmios (p = 0,02). As principais causas de mortalidade tardia foram as neoplasias do trato aéreo-digestivo superior e complicações de cirrose hepática. Identificaram-se associações estatisticamente significativas entre abstinência alcoólica pré-operatória com menor taxa de complicações infecciosas e fistulas; a quantidade de ingestão de álcool e o tempo de aparecimento de diabetes nova pós-operatória; o calibre do ducto pancreático com o surgimento de diabetes pós-operatória; e níveis elevados de amilase sérica e no liquido do dreno abdominal no primeiro dia pós-operatório com fístulas. A técnica de Frey mostrou-se uma opção segura e eficaz para o tratamento cirúrgico da pancreatite crônica, proporciononando melhora da sintomatologia dolorosa e reganho de peso e não interrompeu a deterioração das funções exócrina e endócrina do pâncreas. A recidiva do abuso da ingestão de etanol é um problema freqüente nesses pacientes e interfere na sobrevida deles / Abstract: Surgical treatment of chronic pancreatitis is indicated for failure in clinical pain management of the disease. Frey's surgery is one of the techniques available for intervention in this process. Application of the best technique is still a challenge today and, over the last century, several techniques were developed by determining three patterns of treatment: decompression, resection and mixed. Frey's procedure is a mixed technique, which was recently developed and shows excellent results in pain relief. Its principle suggests low rates of morbidity and mortality after surgery and less damage to pancreatic function comparable to surgical decompression (Partington-Rochelle, Puestow) with the same effectiveness of the resection procedures (pancreatoduodenectomy) in pain control. The aim of this paper is to describe and analyze the results of a consecutive series of patients with chronic pancreatitis underwent Frey technique at the Hospital de Clínicas of UNICAMP. Seventy-three consecutive patients were retrospectively analyzed from January 1991 to December 2007, with no previous surgical treatment for chronic pancreatitis and with at least one year of follow-up. We studied the profile of the population, surgical indication, postoperative complications and long-term results in controlling pain and complications. Patients had mean age of 40.6 years, most were men (97.3%) and alcoholic etiology was the most frequent (95.9%). Abdominal pain gripped all patients, 98.8% with moderate or severe intensity. The overall morbidity rate was 28.7% and the most frequent complications were infections (13.7%), among them pneumonia. Fistulas of pancreatic anastomosis were 6.8%. There was no surgical mortality. At mean follow-up of 77.0 months, 91.4% of patients had complete pain remission and there was increased of BMI postoperatively (p < 0.001). New exocrine insufficiency appeared in 49% and new diabetes in 36.7%. Recurrence of alcohol consumption occurred in 32.9% of patients, which showed a lower life expectancy than those who remained abstinent (p = 0.02). The main causes of late death were neoplasm of the upper aero-digestive tract and complications of liver cirrhosis. We identified significant associations between preoperative alcohol abstinence with a lower rate of infectious complications and fistulas; the amount of alcohol intake and time of onset of postoperative diabetes; diameter of the pancreatic duct with the onset of postoperative diabetes; and elevated levels of amylase in blood and abdominal drain fluid on the first postoperative day with fistulas. Frey procedure proved to be a safe and effective option for the surgical treatment of disabling pain caused by chronic pancreatitis provided regained weight but did not stop the deterioration of exocrine and endocrine functions of the pancreas. Recurrence of ethanol abuse is a frequent problem in these patients and interferes with their life expectancy / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências da Cirurgia

Acute pancreatitis (AP) is a pancreatic inflammatory disease that usually occurs associated with abdominal pain and presents high mortality in its severe form. There is no specific therapy to treat this disease, as well as the secondary lung injury, which makes of interest the search for new substances to treat AP. In this context, the use of medicinal plants can be a reasonable strategy to treat this inflammatory condition and the associated pain. We investigated therefore the effect of ethanol extract of the inner bark of Caesalpinia pyramidalis Tul. (Fabaceae) (EECp) on AP induced by common bile duct obstruction (CBDO). Firstly, chromatographic analysis of the EECp was performed by high performance liquid chromatography (HPLC) technique. Groups of male Wistar rats (200-250 g, n = 6-8 per group) were submitted to CBDO and euthanized 6 (protocol 1) or 24 h (protocol 2) thereafter. Animals were orally treated with EECp (100, 200 or 400 mg/kg, protocol 1, or 400 mg/kg, protocol 2) or vehicle (Tween 80, 0.2% in saline 0.9%) 1 h before and 12 h after induction of AP or false surgery (sham). Before (-1 h) and after 6, 12 or 24 h, the abdominal hyperalgesia was measured using the electronic von Frey. The locomotor activity of the animals was evaluated by the open field test. After euthanasia and tissue collection the following parameters were measured: (i) the activity of myeloperoxidase (MPO) in pancreas and lung, (ii) the concentration of malondialdehyde (MDA) in pancreas, lung, liver, and kidney, (iii) the pancreatic edema index, (iv) serum amylase, lipase, and nitrate/nitrite and (v) the total and differential leukocyte count in peripheral blood. The chromatographic analysis of EECp suggested that rutin is present in this extract. In both protocols 1 and 2 the CBDO significantly increased all inflammatory and biochemical parameters evaluated, when compared to sham group. The effects caused by EECp on CBDO-induced pancreatitis include the reduction of pancreatic inflammation, because of inhibition of neutrophil infiltration, and pancreatic edema, attenuation of systemic inflammation, by decreasing the leukocyte counts in peripheral blood, as well as reducing the pulmonary neutrophil infiltration, especially in the initial stages of pancreatitis. Also, the EECp decreased the pancreatic and lung lipid peroxidation and the serum nitrate/nitrite, which may contribute to the anti-inflammatory effects observed in these tissues and it partially reduced the amylase and lipase levels. Abdominal hyperalgesia induced by CBDO was completely inhibited by EECp (400 mg/kg), an effect that persists for at least 12 h. No alterations were observed in the locomotor activity of rats treated with EECp in the open field. The results showed that EECp decreases the inflammatory and nociceptive responses in CBDO-induced AP. These activities make this extract of interest to the development of studies or approaches for the treatment of this condition in humans. / A pancreatite aguda (PA) é uma doença inflamatória do pâncreas que geralmente se apresenta acompanhada de dor abdominal e possui elevada mortalidade nas suas formas mais graves. Não há terapia específica para tratar esta doença, ou as complicações pulmonares decorrentes dela, o que torna de interesse a busca de novas substâncias para a sua terapêutica. Neste âmbito, o uso de plantas medicinais pode ser uma estratégia viável para tratar esta condição inflamatória, bem como a dor a ela associada. Neste estudo investigou-se, portanto, o efeito do extrato etanólico da entrecasca de Caesalpinia pyramidalis Tul. (Fabaceae) (EECp) na PA induzida pela obstrução do ducto biliopancreático (ODBP). Inicialmente foi realizada a análise cromatográfica do extrato pela técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Para efeito de estudo, os grupos de animais foram eutanasiados 6 (protocolo 1) ou 24 h (protocolo 2) após a indução da PA. Ratos machos Wistar (200-250 g, n=6-8 por grupo) foram pré-tratados pela via oral com EECp (100, 200 ou 400 mg/kg, protocolo 1 ou 400 mg/kg, protocolo 2) ou veículo (tween 80 0,2% em salina 0,9%) 1 h antes e 12 h após a indução da PA ou falsa cirurgia (sham). Antes (-1 h) e após 6, 12 ou 24 h, foram realizadas medidas da hiperalgesia abdominal com o von Frey eletrônico. A atividade locomotora dos animais foi avaliada pelo teste do campo aberto. Após eutanásia e coleta dos tecidos, determinou-se a atividade de mieloperoxidase (MPO) e a concentração de malondialdeído (MDA) em pâncreas e pulmão, o índice de edema pancreático, as concentrações séricas de amilase, lipase e nitrato/nitrito e a contagem total e diferencial de leucócitos no sangue. A análise cromatográfica do extrato sugeriu a presença do flavonóide rutina em sua composição. Em ambos os protocolos experimentais (6 ou 24 h), a ODBP aumentou significativamente todos os parâmetros inflamatórios e bioquímicos avaliados, quando comparados ao respectivo grupo sham. Os dados obtidos neste estudo permitem afirmar que os efeitos causados pelo EECp, na pancreatite induzida pela ODBP, incluem (i) a redução da inflamação pancreática, devido a inibição do infiltrado de neutrófilos e do edema pancreáticos; (ii) a atenuação da inflamação sistêmica, através do decréscimo da contagem de leucócitos no sangue periférico, bem como, da redução do infiltrado de neutrófilos pulmonar, em especial, nos estágios iniciais da pancreatite; (iii) a diminuição da peroxidação lipídica pancreática e pulmonar, o que pode contribuir para os efeitos anti-inflamatórios observados nestes tecidos; (iv) a diminuição dos níveis séricos de nitrato/nitrito; (v) a redução parcial dos níveis de amilase e lipase e (vi) a inibição da hiperalgesia abdominal, um efeito que persiste por no mínimo 12 h com a maior dose de EECp utilizada e é confirmado pela ausência de alteração da atividade locomotora dos animais no campo aberto. Os resultados demonstram que o EECp diminui a inflamação e a hiperalgesia durante a PA induzida por OBDP. Estas atividades são de interesse para o desenvolvimento de estudos ou abordagens futuras para o tratamento da PA em humanos.

INTRODUÇÃO: A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. MÉTODOS: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises da peroxidação lipídica (MDA), da atividade da mieloperoxidase (MPO) e a análise histológica. Os níveis de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10) foram analisados no líquido ascítico, soro e tecido pancreático. RESULTADOS: Os níveis de TAP e amilase no líquido ascítico e soro, de MDA e MPO no tecido pancreático e a análise histológica mostraram resultados iguais nos três grupos de animais que foram submetidos a PA (ST, SSF e SSH). Observamos redução do volume de líquido ascítico e dos níveis de TNF- , IL-6 e IL-10 no líquido ascítico, soro e tecido pancreático nos animais nos quais foi administrada solução salina hipertônica (grupo SSH) quando comparados com os animais tratados com solução salina fisiológica (grupo SSF) e os animais sem tratamento (grupo ST) (p<0,05). CONCLUSÕES: A administração de solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) na pancreatite aguda experimental foi capaz de reduzir a resposta inflamatória local e sistêmica, sem modificar contudo a intensidade das lesões pancreáticas. / INTRODUCTION: Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). METHODS: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. RESULTS: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP. In the SSH group it was observed a significant decrease in volume of ascitic fluid and inflammatory cytokines levels (TNF-, IL-6, and IL-10) in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue when compared to ST and SSF groups (p<0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that hypertonic saline solution decreases local and systemic inflammatory response in acute pancreatitis without changing the intensity of the pancreatic lesions.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-11T12:21:13Z No. of bitstreams: 1 josemariamendesmoraes.pdf: 291711 bytes, checksum: d0295e24bf772314c091cc1d84a137a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-11T12:55:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 josemariamendesmoraes.pdf: 291711 bytes, checksum: d0295e24bf772314c091cc1d84a137a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-11T12:55:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 josemariamendesmoraes.pdf: 291711 bytes, checksum: d0295e24bf772314c091cc1d84a137a5 (MD5) Previous issue date: 2009-12-18 / Na pancreatite aguda (PA), a necessidade de restringir gordura durante a realimentação ainda não foi estudada. A tese é que iniciar a realimentação oral com dieta sólida completa após PA seria seguro e poderia resultar em um tempo menor de hospitalização. O objetivo deste trabalho foi explorar a segurança e o tempo de internação quando uma dieta sólida completa é utilizada como refeição inicial após quadro de PA leve, comparando com outras duas dietas: líquida e pastosa. Pacientes com PA leve foram randomizados para receber uma entre três dietas: líquida clara, pastosa ou sólida completa como refeição inicial durante realimentação oral. A progressão da dieta e a alta hospitalar foram determinadas por médicos não membros da equipe do ensaio. Os pacientes foram monitorados diariamente para recorrência de dor abdominal (endpoint primário), tolerância à dieta, tempo de internação (endpoint secundário) e durante sete dias após a alta para registrar a frequência da recorrência de dor. Um total de 210 pacientes foi avaliado, 70 em cada tipo de dieta. Baseado no protocolo, não houve diferença na frequência da recorrência de dor durante a realimentação entre os três tipos de dieta: 20% para a dieta líquida, 17% para a pastosa e 21% para a sólida completa (P=0,80). Os pacientes que receberam uma dieta sólida completa sem recorrência de dor abdominal tiveram um tempo menor de internação (mediano de -1,5 dia) quando comparados com os que receberam a dieta pastosa ou líquida (P=0,000). A realimentação com dieta sólida completa após PA leve foi bem tolerada e resultou em um tempo menor de internação em pacientes sem recorrência de dor abdominal. / In acute pancreatitis (AP) the need for fat restriction during refeeding has not been studied. The thesis is that to start oral refeeding with a full solid diet after mild AP would be safe and might result in a shorter length of hospitalization. The objective of this study was to explore the safety and length of hospital stay when a full solid diet is used as the initial meal after a mild AP comparing to two other diets: liquid and pasty. Patients with mild AP were randomized to receive one of three diets: clear liquid, pasty or full solid as the initial meal during oral refeeding. Diet progression and hospital discharge were determined by non-members of the trial team. Patients were monitored daily for abdominal pain recurrence (primary endpoint), diet tolerance, length of hospitalization (secondary endpoint) and during seven days after discharge to record the pain recurrence rates. A total of 210 patients was evaluated, 70 in each type of diet. Based on the protocol, there was no difference in pain recurrence rates during refeeding between the three diet types: 20% for liquid diet, 17% for pasty and 21% for full solid (P=0.80). The patients who received a full solid diet without abdominal pain recurrence had a shorter length of hospitalization (median of -1.5 days) when compared with those who received the liquid or pasty diets (P=0.000). Oral refeeding with a full solid diet after mild AP was well tolerated and resulted in a shorter length of hospitalization in patients without abdominal pain recurrence.