O objetivo primordial em radiologia veterinária é a produção de radiografias com qualidade diagnóstica, em uma primeira tentativa. Esse objetivo deve atender a três propósitos: (1) diminuir a exposição à radiação do paciente e trabalhadores; (2) diminuir o custo do estudo para o cliente e (3) produzir dados diagnósticos para rápida interpretação e tratamento do paciente. Esse trabalho teve por objetivo a determinação das doses em cães submetidos a radiografias de tórax e abdômen utilizando a técnica da dosimetria termoluminescente (TL). As doses de radiação foram avaliadas com a utilização de dosímetros termoluminescentes de sulfato de cálcio dopado com disprósio (CaSO4:Dy) e fluoreto de lítio dopado com magnésio e titânio (LiF:Mg,Ti). Os resultados obtidos indicam que é extremamente importante a avaliação das doses de radiação envolvidas em procedimentos diagnósticos de radiologia veterinária, para a avaliação das doses nos animais e para ser usado como um parâmetro para a monitoração individual dos proprietários de animais, que auxiliam no posicionamento, e para a proteção dos trabalhadores ocupacionalmente expostos nas Clínicas de Radiologia Veterinária. / The primary goal in veterinary radiography is to produce radiographs of diagnostic quality on the first attempt. This goal serves three purposes: (1) to decrease radiation exposure to the patient and veterinary personnel; (2) to decrease the cost of the study for the client; and (3) to produce diagnostic data for rapid interpretation and treatment of the patient. This work aimed to determine the doses in dogs submitted to chest and abdomen Xrays using the technique of thermoluminescence (TL) dosimetry. The radiation doses were assessed using thermoluminescent dosimeters of calcium sulphate doped with dysprosium (CaSO4:Dy) and lithium fluoride doped with magnesium and titanium (LiF:Mg,Ti). The obtained results indicate that is extremely important the assessment of radiation doses involved in veterinary diagnostic radiology procedures, to evaluate the delivered doses to the animals, to be used as a parameter in the individual monitoring of pets owners, who assist the animal positioning, and to protect occupationally exposed workers at the Veterinary Radiology Clinics.

No description available.

La superòxid dismutasa (SOD) és efectiva en processos inflamatoris i per tant actua enels efectes que produeix de forma aguda la radioteràpia. En aquest treball es revisen elsmecanismes d'acció de les radiacions ionitzants i s'analitzen les causes dels seus efectesbiològics en el tractament radioteràpic de la patologia oncològica pèlvica. Es revisal'experiència de diversos autors en aquest camp, en les distintes àrees irradiades, ambl'administració del fàrmac durant el tractament radioteràpic.Una vegada avaluats els treballs anteriors, sembla lògic pensar que la SOD podria actuarde forma preventiva en els efectes secundaris tardans utilitzant-la una vegada finalitzatel tractament radioteràpic. Per tant, s'ha dissenyat un treball experimental en el que escomparen dos grups homogenis de 50 pacients cadascun, administrant SOD a un d'ells,durant un període de temps, una vegada finalitzada la irradiació i utilitzant l'altre com agrup control, sense tractament. Com a objectiu secundari s'han avaluat l'eficàcia i laseguretat de la SOD en el tractament dels efectes secundaris aguts del tractamentradioteràpic.S'avalua l'eficàcia i la seguretat de l'administració de SOD en les diferentslocalitzacions: pell, tracte digestiu alt i baix i aparell genitourinari, així com la toxicitatmàxima i la rellevant en cada localització.La discussió contempla tots els aspectes dels resultats de l'estudi amb una anàlisi finalde l'efectivitat del tractament amb SOD i la rellevància clínica dels resultats obtinguts.Les conclusions finals són les següents:- La SOD és un fàrmac segur ja que no s'ha presentat cap efecte advers.- Per prevenir els efectes secundaris aguts, la SOD s'ha d'administrar durant eltractament radioteràpic.- La pauta de tractament per prevenir els efectes aguts de la irradiació no és la mésadequada per prevenir els efectes tardans.- La SOD administrada després d'acabar la radioteràpia durant 7 setmanes, és capaç dereduir la toxicitat global tardana al llarg de tot el període d'estudi, manifestant-se ja elseu efecte a partir del dia 90, moment en el que comencen a aparèixer els fenòmensradioinduïts tardans.- La SOD utilitzada per prevenir els efectes tardans radioinduïts, és capaç d'evitarl'aparició global de toxicitat tardana de forma significativa, de manera que un pacient notractat amb SOD té de forma significativa un 37% més de probabilitats de desenvolupartoxicitat fins als 24 mesos, que un tractat amb SOD.- La reducció de toxicitat es manifesta especialment en el tracte digestiu baix, demanera que un pacient no tractat amb SOD té un 26% més de possibilitats dedesenvolupar toxicitat en el tracte digestiu baix, de forma significativa fins als 24mesos, que un tractat amb SOD. / La superóxido dismutasa (SOD) es efectiva en procesos inflamatorios y por tanto actúaen los efectos que produce de forma aguda la radioterapia. En este trabajo se revisan losmecanismos de acción de las radiaciones ionizantes y se analizan las causas de susefectos biológicos en el tratamiento radioterápico de la patología oncológica pélvica. Serevisa la experiencia de diversos autores en este campo, en las distintas áreas irradiadas,con la administración del fármaco durante el tratamiento radioterápico.Una vez evaluados los trabajos anteriores, parece lógico pensar que la SOD podríaactuar de forma preventiva en los efectos secundarios tardíos utilizándola una vezfinalizado el tratamiento radioterápico. Por tanto, se ha diseñado un trabajoexperimental en el que se comparan dos grupos homogéneos de 50 pacientes cada uno,administrando SOD a uno de ellos, durante un período de tiempo una vez finalizada lairradiación, y utilizando el otro como grupo control sin tratamiento. Como objetivosecundario se han evaluado la eficacia y la seguridad de la SOD en el tratamiento de losefectos secundarios agudos del tratamiento radioterápico.Se evalúa la eficacia y la seguridad de la administración de SOD en las distintaslocalizaciones: piel, tracto digestivo alto y bajo y aparato genitourinario, así como latoxicidad máxima y la relevante en cada localización.La discusión contempla todos los aspectos de los resultados del estudio con un análisisfinal de la efectividad del tratamiento con SOD y la relevancia clínica de los resultadosobtenidos.Las conclusiones finales son las siguientes:- La SOD es un fármaco seguro ya que no se ha presentado ningún efecto adverso.- Para prevenir los efectos secundarios agudos, la SOD se debe administrar durante eltratamiento radioterápico.- La pauta de tratamiento para prevenir los efectos agudos de la irradiación no es la másadecuada para prevenir los efectos tardíos.- La SOD administrada después de terminar la radioterapia durante 7 semanas, es capazde reducir la toxicidad global tardía a lo largo de todo el periodo de estudio,manifestándose su efecto a partir ya del día 90, momento en el que empiezan a aparecerlos fenómenos radioinducidos tardíos.- La SOD utilizada para prevenir los efectos tardíos radioinducidos, es capaz de evitar laaparición global de toxicidad tardía de forma significativa, de manera que un pacienteno tratado con SOD tiene de forma significativa un 37% más probabilidades dedesarrollar toxicidad hasta los 24 meses, que uno tratado con SOD.- La reducción de toxicidad se manifiesta especialmente en el tracto digestivo bajo, demanera que un paciente no tratado con SOD tiene un 26% más posibilidades dedesarrollar toxicidad en el tracto digestivo bajo, de forma significativa hasta los 24meses, que uno tratado con SOD. / Superoxide dismutase (SOD) is effective in inflammatory processes and therefore it actsin radiation therapy induced acute effects. In this work, the mechanisms of action ofionising radiation are reviewed and the causes of their biological effects in oncologicalpelvic radiation treatment are analysed. The experience of several authors in this field,in the different irradiated areas, with drug administration during radiotherapy treatmentis reviewed.Once evaluated the previous studies, it seems logical to think that SOD could preventlate side effects by using it after termination the radiation treatment. Therefore, anexperimental work has been designed to compare two homogenous groups of 50patients each. One group has been administered SOD during a period of time after thecompletion of radiation, and the other one, as a control group without treatment. Thesecondary aim is to evaluate the SOD efficacy and safety in the treatment of acute sideeffects of radiation therapy.Effectiveness and security of SOD administration is analysed in different localisations:skin, high and low digestive tract and genitourinary system, as well as the maximumand the outstanding toxicity in each location.The discussion contemplates all the aspects of the study results with a final analysis ofthe effectiveness of SOD treatment and the clinical relevance of the obtained results.The final conclusions are:- SOD is a safe drug since any adverse effect has not appeared.- To prevent acute side effects, SOD has to be administered during radiotherapytreatment.- The treatment schedule for administering SOD to prevent acute side effects is notadequate to prevent late side effects.- SOD, administered during 7 weeks after finishing radiotherapy, is able to reduce theglobal delayed toxicity throughout all the period of the study, showing its effect fromthe 90th day when late radiation induced phenomena starts to appear.- SOD, used to prevent late radiation induced side effects, is able to avoid the globalappearance of delayed toxicity in a significant form. So that, a patient not treated withSOD has, in a significant form, a 37% more probabilities of developing toxicity until to24 months that one treated with SOD.- The toxicity reduction is specially pronounced in the low digestive tract, so that apatient not treated with SOD has, in a significant form, a 26% more probabilities ofdeveloping toxicity in the low digestive tract until to 24 months that one treated withSOD.

La incorporación en el mercado farmacéutico de los llamados medicamentos genéricos ha generado una problemática compleja que afecta un gran rango de entidades comenzando por el ámbito de la salud pública hasta llegar a la propia industria farmacéutica. Cuando el período de patente de un fármaco está próximo a expirar, el laboratorio farmacéutico que desarrolló la marca registrada de este producto comúnmente designado como "innovador" o de "referencia" (R) puede intentar desarrollar una nueva formulación o forma farmacéutica, con el mismo principio activo para extender su marca de exclusividad. Paralelamente, otros laboratorios pueden intentar desarrollar marcas genéricas que contienen el mismo principio activo que el producto innovador, formulación de prueba (P). Un tratamiento efectuado con un genérico tiene un coste indudablemente inferior a un medicamento de marca (el mismo principio activo y forma farmacéutica), y esta diferencia se debe principalmente a que el medicamento de marca refleja el costo de la gran inversión para desarrollarlo (estudios clínicos de eficacia y seguridad) que a diferencia del medicamento genérico no lo precisan. Para poder realizar una comparación de estos dos tipos de medicamentos e investigar si son intercambiables se recurre a la "biodisponibilidad" (BD) y "bioequivalencia promedio" (BE). (Zapater et al., 1999).La BE de medicamentos constituye un área en continuo desarrollo. Es una problemática que presenta algunas complejidades, lo que ha generado la necesidad de continuar realizando investigaciones para mejorar entre otros aspectos tan trascendentales como los diseños experimentales y las metodologías estadísticas asociadas a estos diseños. En especial abordaremos el caso de las drogas de alta variabilidad, que constituyen un gran problema para su evaluación en la actualidad.Los objetivos planteados en esta tesis doctoral son los siguientes: a.- Conocer, describir y analizar algunos factores que afectan la evaluación de la bioequivalencia promedio en drogas de alta variabilidad. b.- Describir y aplicar las metodologías clásicas y las más actuales utilizadas en la determinación de la bioequivalencia promedio relacionadas con las drogas de alta variabilidad. c.- Conocer, describir y analizar cómo el carryover asociado a diseños crossover impacta el análisis de la bioequivalencia promedio. d.- Conocer y analizar como el tamaño de muestra de un crossover de y la variabilidad de la droga evaluada afectan la evaluación de la bioequivalencia promedio, tanto en ausencia y presencia de carryover. e.- Describir la problemática asociada al cálculo del factor de similitud en la comparación de dos perfiles de disolución en su aplicación práctica a la bioequivalencia in vitro. f.- Describir los conceptos principales asociados a la Farmacogenética para comprender mejor la complejidad de este tipo de estudios. g.- Crear una base de datos con información de estudios farmacogenéticos efectuados con polimorfismos de nucleótido único (SNP) y variables dicotómicas. h.- Revisar y analizar la base de datos en términos del diseño, aspectos metodológicos y resultados, que pueden influir en el resultado final de un estudio de Farmacogenética. Estos objetivos han dado lugar a una serie de investigaciones, cuyos resultados están plasmados en una serie de artículos citados a continuación: [1] Jordi Ocaña, Ma. Pilar Sánchez O, Alex Sánchez, Josep L. Carrasco J. "On Equivalence and Bioequivalence Testing". 2008. SORT. 32(2):151-176. Con este artículo se han cumplido los objetivos a y b. [2] Ma. Pilar Sánchez O, Carolina Gómez G, Josep L. Carrasco J, Jordi Ocaña, Carlos Von Plessing R, C. Gloria Godoy M, Rolando Reinbach H, Ricardo Godoy R. "Evaluating Average Bioequivalence using methods for high variability drugs: A case study". International Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2008, 46(10):527-537, cumpliendo así con los objetivos propuestos a y b. [3] Ma. Pilar Sánchez O, Jordi Ocaña, Josep Lluís Carrasco. "The Effect of Variability and Carryover on Average Bioequivalence Assessment: A Simulation Study". Enviada "minor revision" a Pharmaceutical Statistics, Octubre 2009. Con este artículo se han cumplido los objetivos definidos en c y d. [4] Albert Cobos, Ma. Pilar Sánchez, Jaume Aguado, Josep L Carrasco. "A systematic review on the methods used in pharmacogenetic studies with binary assessment of treatment response." Enviado a Pharmacogenetics and Genomics, Noviembre de 2009, para verificar los objetivos f, g y h. [5] Jordi Ocaña, Gloria Frutos, Ma. Pilar Sánchez O. "Using the similarity factor f2 in practice. A critical revision and suggestions for its standard error estimation". Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems, 2009, 99(1):49-56, cumpliendo de esta forma con el objetivo e de la presente tesis.

El melanoma es un tumor de estirpe melanocítica con un elevado potencial metastático y una incidencia en aumento. La técnica de la Biopsia Selectiva del Ganglio Centinela (BSGC) se acepta como la forma más específica, sensible y con menor morbilidad para realizar la estadificación patológica ganglionar. Objetivos:1) Analizar la capacidad de detección de un protocolo extenso, frente a un método simple de procesamiento del ganglio centinela comparando dos cohortes de pacientes; 2) buscar relación entre el resultado de la técnica de BSGC y otras variables con valor pronóstico establecido, tanto clínicas como histológicas; 3) realizar un estudio de supervivencia y de falsos negativos; 4) estudiar subgrupos de pacientes (melanomas ≥1 mm de Breslow, <1 mm de Breslow y melanomas en extremidades);y 5) comparar ambas técnicas desde el punto de vista económico. Metodología: Realizamos un estudio de cohortes con un diseño observacional analítico longitudinal. Se seleccionaron a los pacientes sometidos a la técnica desde el año 1998 hasta el 2010. La muestra a su vez se subdividió en dos series: la serie correspondiente a los años 1998-2004 y, la serie 2007-2010. En la primera de ellas se realizó un procesamiento simple (sección única de hematoxilina-eosina) mientras que en la segunda se realizó un estudio extenso (protocolo transhiliar bivalvo con secciones seriadas cada 250 µm y múltiples tinciones inmunohistoquímicas (HMB 45, Melan A y S100)). Conclusiones: El protocolo histopatológico extenso de análisis ganglionar ha demostrado mejorar la capacidad de detección de la técnica en nuestro medio. No hay diferencias en la tasa de falsos negativos, pero eliminando el factor de confusión correspondiente a los drenajes múltiples, la tasa disminuye a la mitad. El procesamiento por niveles al menos duplica el coste económico de la serie anterior. El porcentaje de pacientes sometidos a la técnica con melanomas delgados (índice de Breslow menor a 1 mm) es cada vez mayor (40%), aunque el rango de positividad es bajo (2%). La aparición de nuevas opciones de tratamiento en el melanoma metastásico obliga a optimizar la técnica con objeto de identificar el subgrupo de pacientes que podrían beneficiarse de estas nuevas terapias. / Melanoma is a melanocytic lineage tumor with high metastatic potential and increasing incidence. Sentinel lymph node biopsy (SLNB) is accepted as the most specific, sensitive and with less morbidity technique for pathologic nodal staging. Objectives: 1) To analyze the detection capability of an extensive protocol, versus a simple method of lymph node processing, comparing two cohorts of patients; 2) To seek a relationship between the outcome of the SLNB technique and other variables with established prognostic value, both clinical and histological; 3) To conduct a survival and false negatives study; 4) To study subgroups of patients (melanomas with Breslow thickness of 1 mm or more, <1 mm Breslow melanomas and extremity melanomas) and 5) To compare both lymph node processing methods from the economic point of view. Methods: Cohort study with a longitudinal observational analytic design was conducted. Patients undergoing SLNB in our institution from 1998 to 2010 were selected. The sample was divided into two cohorts, patients treated from 1998 to 2004 and those from 2007 to 2010. In the first subgroup, a simple method of processing was performed (single hematoxylin-eosin slide), while in the second, an extensive protocol (transhiliar bivalving 250µm serial sectioning with multiple immunohistochemical stains (HMB 45, Melan A and S100)) was carried out. Conclusions: Extensive histopathologic protocol for assessing sentinel node has shown an improved detection capability of the technique in our institution. No differences in false negatives rate were detected, but removing multiple drains confusion factor, this rate decreases by half. Extensive histopathologic protocol at least double the economic cost of the previous method. Percentage of patients undergoing SLNB technique with thin melanomas (less than 1 mm of Breslow thickness) is growing (40%), although positivity range is low (2%). New emerging treatment options in metastatic melanoma force to optimize the technique in order to identify the subgroup of patients who might benefit from these new therapies.

Un punto interesante, no estudiado adecuadamente, es qué aporta la tecnología multimedia a la enseñanza práctica. Precisamente este trabajo aporta un acercamiento real, práctico y útil al aprovechamiento de las nuevas tecnologías de la información para la enseñanza universitaria práctica de la Tecnología Farmacéutica, investigando pedagógicamente la aplicabilidad del sistema y su validez.

La resistencia múltiple a drogas (MDR) es un importante mecanismo involucradoen el fracaso de la quimioterapia en neoplasias humanas. MDR está asociada a laexpresión del gen mdr1 y la glicoproteína P-gp 170 que codifica. Esta glicoproteína actúacomo una bomba expulsora de fármacos que reduce su acción citotóxica intracelular. Laposible aplicación clínica de fármacos con acción moduladora de la bomba pero conaceptables efectos secundarios, abriría una vía terapéutica muy importante en pacientescon neoplasias resistentes que expresen el fenotipo MDR ya que se podría conseguir laresensibilización de las células tumorales a la quimioterapia. La existencia de formasalternativas de MDR, no P-gp 170 dependientes, dificulta el estudio específico de P-gp 170y de su modulación en ensayos clínicos o muestras procedentes de enfermos conneoplasias quimiorresistentes.El objetivo de este trabajo es desarrollar un método que permita el estudio delfenómeno MDR atribuïble específicamente a la acción de P-gp 170 y su modulación encondiciones experimentales de laboratorio y comprobar la supuesta acción moduladora dePSC 833, tamoxifeno y combinaciones de ambos.Hemos puesto a punto un modelo experimental basado en líneas celularessensibles y resistentes (células NIH-3T3 salvajes y transfectadas con el gen mdr1),sustancias fluorescentes substratos de la bomba (daunorrubicina) y lectura por citometríade flujo, que permite valorar específicamente el fenómeno MDR-P-gp 170 de una formafuncional. En experimentos de incorporación y expulsión, se ha validado el modelo y se haestudiado la acción moduladora de PSC 833, tamoxifeno y combinaciones de ambos encomparación con un"reconocido modulador de P-gp 170 como es verapamilo.Los resultados del estudio demuestran que PSC 833 a dosis de 0.5 pM es capazde modular de forma completa la acción de P-gp 170 en experimentos de incorporación.Sin embargo, con tamoxifeno o combinaciones de tamoxifeno y PSC 833 a dosis de 0.1 uMsolo se consigue una modulación parcial de la bomba.

Las fluoroquinolonas son fármacos antimicrobianos bactericidas con excelente actividad frente a un amplio espectro de bacterias aerobias y contra micoplasmas. Concretamente danofloxacino es una fluoroquinolona que fue desarrollada exclusivamente para uso veterinario. En su espectro antimicrobiano, ha mostrado ser efectivo frente a bacterias gram-negativas y algunas bacterias gram-positivas, micoplasmas, y patógenos intracelulares, tales como Brucella y especies de Chlamydia. Bacterias responsables de múltiples infecciones en el tracto intestinal, respiratorio o tejido mamario. Dadas sus buenas cualidades farmacocinéticas, como son su bajo porcentaje de unión a proteínas plasmáticas, volúmenes de distribución elevados y buena penetración en células y tejidos, son valiosos agentes para el tratamiento de infecciones causadas por bacterias intracelulares. Po otra parte, la liberación controlada de fármacos administrados por vía parenteral ha adquirido una importancia creciente en el desarrollo de nuevas formulaciones farmacéuticas. Resulta interesante poder administrar el medicamento con amplios intervalos, lo que supone un menor coste y un menor estrés de manejo de los animales. OBJETIVOS Después de lo anteriormente mencionado, se plantearon los siguientes objetivos para el presente estudio: 1. Determinación de los parámetros farmacocinéticos de danofloxacino tras la administración intravenosa y subcutánea, en solución acuosa, en ovino. 2. Determinación de los parámetros farmacocinéticos de danofloxacino tras su administración subcutánea, en solución de P407 al 25% y en solución de P407 al 25% más carboximetilcelulosa al 2%, en ovino. 3. La determinación y cuantificación de la eliminación de dicha fluoroquinolona en la leche, dependiendo de la vía de administración y la formulación, como base para determinar su utilidad en el tratamiento de mamitis. 4. Determinación de las CMI de este antibiótico para Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus aureus como gérmenes representativos de procesos infecciosos respiratorios y mamarios en la especie a estudiar. 5. Obtención de la formulación, vía/s de administración y pauta/s posológica/s más adecuada/s en la oveja para el tratamiento de infecciones sistémicas, en base a las CMI obtenidas y al estudio PK/PD. METODOLOGÍA El estudio se ha realizado sobre 5 ovejas todas ellas sanas y adultas y con pesos que oscilaban entre 72 y 106 Kg. Con una edad entre 2,5 y 3,5 años y de raza Lacaune. A cada animal se le administró una dosis única única IV o SC de danofloxacino a la dosis de 6 mg/kg o de 18 mg/kg en solución del polímero P407 al 25% (SC1) y en solución del polímero P407 al 25% más carboximetilcelulosa al 2% (SC2). Las muestras de sangre fueron recogidas antes de inyectar el fármaco (tiempo 0 o pre-tratamiento), y a 0,083, 0,167, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 32, 48, 72 y 96 horas tras la administración. Las muestras de leche fueron ordeñadas inmediatamente antes y después de la administración del fármaco a 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 32, 48, 72 y 96 horas. Este estudio fue aprobado por el comité bioético de la universidad de Murcia. La determinación de danofloxacino en plasma y leche se realizó mediante HPLC con detección fluorimétrica y el ajuste a modelos farmacocinéticos compartimentales y no compartimentales se realizó mediante el programa farmacocinético WinNonlin Professional® (Versión 5.2.1). Además se determinó la concentración mínima inhibitoria de dicha fluoroquinolona frente a Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis. RESULTADOS Y CONCLUSIONES La semivida plasmática en la fase terminal para danofloxacino en las distintas formas de administración IV, SC, SC1, y SC2 fueron: 3,87 ± 0,65, 5.18 ± 0.84, 10.27 ± 3.59 y 13.49 ± 2.90 h, respectivamente. En el análisis farmacocinético de la leche se determinan parámetros como Cmax reportando valores para las vías IV, SC, SC1 y SC2 de 28734.02 ± 11069.35, 20344.02 ± 4636.72, 44370.58 ± 20548.37 y 30829.29 ± 8400.38 µg/L respectivamente. Los valores de la ratio AUCleche/AUCplasma fueron de 12.81 ± 3.62, 13.53 ± 3.46, 25.42 ± 9.25 y 27,12 ± 8.02 respectivamente para las distintas vías y la ratio Cmáx-leche/Cmáx-plasma de 4.73 ± 1.81, 12.04 ± 4.89, 17.38 ± 6.55 y 18.11 ± 4,85 respectivamente. De las cepas estudiadas frente a danofloxacino, con un rango de concentraciones entre 0,250 mg/L – 0,0625 mg/L se obtuvo como CMI90, un valor de 0,125 mg/L para danofloxacino. Por lo tanto las ratios AUC/CMI obtenidos fueron: 83,7±13,34 para IV, 85,1±10,19 para SC, 57,67±12,21 para SC1 y 73,94±18,92 para SC2, y los valores de las ratios Cmáx/CMI fueron 36,88±4,56, 13,67±2,08, 6,76±1,08 y 8,23±1,3 respectivamente. De dicho estudio se puede concluir que: 1. La permanencia de danofloxacino es superior tras la administración subcutánea SC1 y SC2, por tanto, serían las mejores formas de administración a fin de obtener concentraciones plasmáticas durante un mayor tiempo. 2. Que los valores de los ratios Cmáxleche/Cmáx plasma y AUCleche/AUCplasma, son muy superiores a uno en todos los casos para las vías extravasculares, e indican que el fármaco tiene un alto grado de acceso y acumulación desde el plasma hacia la leche. 3. Con una dosis de 18 mg/kg de danofloxacino administrado mediantes las formulaciones SC1 y SC2, obtendríamos según los parámetros farmacocinéticos/farmacodinámicos, el éxito clínico y evitaríamos la aparición de resistencias. / Fluoroquinolones are bactericidal antimicrobial agents with excellent activity against a broad spectrum of aerobic bacteria and mycoplasma. Concretely danofloxacin is a fluoroquinolone that was developed exclusively for veterinary use. In its antimicrobial spectrum, it has been shown to be effective against gram negative bacteria and some gram-positive, mycoplasma, and intracelular pathogens, such as Brucella and Chlamydia. Bacteria responsible for multiple intestinal and respiratory infections or breast tissue infections. Given the good pharmacokinetic properties, such as their low percentage of protein binding, high volume of distribution and good penetration in cells and tissues, are valuable agents for treating infections with intracellular bacteria. In other hand, the controlled release of drugs administered parenterally has become increasingly important in the development of new pharmaceutical formulations. It is interesting to administer the drug with broad ranges, which means lower costs and less stress in the handling of the animals. OBJECTIVES After the above, the following objectives for this study were raised: 1. Determination of pharmacokinetic parameters of danofloxacino after intravenous and subcutaneous administration in aqueous solution in sheep. 2. Determination of pharmacokinetic parameters of danofloxacino after subcutaneous administration at a dose of 18 mg / kg with the p407 polymer solution of 25% (SC1) and P407 polymer solution of 25% plus carboxymethylcellulose 2% (SC2). 3. Determination and quantification of danofloxacin elimination in milk, depending on the route of administration and formulation as a base to determine their utility in mastitis treatment. 4. MIC determination of this antibiotic for Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus like representative germs for respiratory and mammary infections in this species studied. 5. Obtention of formulation, route of administration and regimen dosage more appropriate for the treatment of systemic infections in sheep, based on the MIC obtained and PK/ PD study. METHODOLOGY The study has been carried on five healthy adult sheep of Lacaune breed with weights ranging from 72 to 106 kg and aged between 2.5 and 3.5 years. Administration routes and doses have been intravenous (IV) and subcutaneous (SC) doses of 6 mg/kg and subcutaneous administration at a dose of 18 mg / kg with the P407 polymer solution of 25% (SC1) and P407 polymer solution of 25% plus carboxymethylcellulose 2% (SC2). The samples were obtained immediately before dosing (blank) and 0.083, 0.167, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2. 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48 and 72 h after dosing. This study was approved by the bioethical committee of the University of Murcia. Danofloxacin determination in plasma and in milk was done with HPLC with fluorimetric detection and the compartmental and non compartmental pharmacokinetic adjustment modeling was done using WinNonlin® Professional (Version 5.2.1). In addition, the minimum inhibitory concentration of the fluoroquinolone was determined against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. RESULTS AND CONCLUSIONS Plasma half-life for danofloxacin in the terminal phase for the different forms of administration IV, SC, SC1, and SC2 were: 3,87 ± 0,65, 5.18 ± 0.84, 10.27 ± 3.59 y 13.49 ± 2.90 h, respectively. Pharmacokinetics analysis of milk parameters like Cmax were determined and reporting values for the IV, SC, SC1 and SC2: 28734.02 ± 11069.35, 20344.02 ± 4636.72, 44370.58 ± 20548.37 y 30829.29 ± 8400.38 µg/L respectively. AUCleche/AUCplasma ratio values were de 12.81 ± 3.62, 13.53 ± 3.46, 25.42 ± 9.25 y 27,12 ± 8.02 respectively f or different routes and the ratio Cmáx-leche/Cmáx-plasma values were 4.73 ± 1.81, 12.04 ± 4.89, 17.38 ± 6.55 y 18.11 ± 4,85 respectively. The strains were studied against danofloxacin, with a concentration range of 0.250 mg /L - 0.0625 mg/L reported MIC90, value of 0.125 mg / L. The ratios AUC / MIC were: 83.7 ± 13.34 for IV, 85.1 ± 10.19 for SC 57.67 ± 12.21 for SC1 and 73.94 ± 18.92 for SC2, and values of Cmax / MIC ratios were 36.88 ± 4.56, 13.67 ± 2.08, 6.76 ± 1.08 and 8.23 ± 1.3 respectively. From this study it can be concluded that: 1. Permanence of danofloxacin is higher after SC1 and SC2, therefore, SC1 and SC2 will get plasma concentrations for a longer time. 2. Cmáx leche/Cmáx plasma and AUC leche/AUC plasma ratio values for extravascular routes are elevated in all cases, which indicate that the drug reaches high penetration and accumulation in milk. 3. With 18 mg/kg de danofloxacino administered through SC1 and SC2 formulation, we would obtain clinical success and the prevention of bacterial resistance development according to pharmacokinetic / pharmacodynamic parameters.

La disposición cinética de enrofloxacino y su metabolito cirprofloxacino se determinaron en cabras lactantes (n = 5), después de administrar una dosis de 5mg/kg por vía intravenosa y subcutánea, y de 15mg/kg por vía subcutánea SC-P407 y SC-CMC. Las concentraciones se determinaron por cromatografía líquida de alta resolución con detección por fluorescencia. Los datos de concentración-tiempo fueron analizados por métodos cinéticos compartimentales y no compartimentales. El volumen de distribución en el estado estacionario y el aclaramiento de enrofloxacino después de su administración intravenosa fue de 0,79&#61617;0,24L/kg y 0,24&#61617;0,06L/h•kg, respectivamente. Tras la administración subcutánea, subcutánea-P407 y subcutánea-CMC de enrofloxacino se alcanzó una concentración plasmática máxima de 1,91&#61617;0,13, 2,93&#61617;1,15 y 2,03&#61617;0,29mg/L a las 2.43&#61617;0.21, 4.03&#61617;0,95 y 4,33&#61617;0,69 h, respectivamente. La biodisponibilidad absoluta después d e la administración subcutánea, subcutánea-P407 y subcutánea-CMC fue de 71,01&#61617;11,75, 55,8&#61617;11,4 y 52,83±10,98%, respectivamente. La penetración de enrofloxacino de sangre a leche fue amplia y rápida, detectándose durante 32h tras la administración intravenosa y subcutánea, y durante 96 y 120h después de la administración subcutánea-P407 y subcutánea-CMC. / The single-dose disposition kinetics of enrofloxacin and its metabolite cirprofloxacin were determined in clinically normal lactating goats (n=5) after intravenous, subcutaneous, SC-P407 and SC-CMC administration of 5mg/kg (i.v. and s.c.) and 15mg/kg (SC-P407 and SC-CMC). Enrofloxacin and ciprofloxacin concentrations were determined by high performance liquid chromatography with fluorescence detection. The concentration-time data were analyzed by compartmental and non-compartmental kinetic methods. Steady-state volume of distribution of enrofloxacin after intravenous administration were 0.79&#61617;0.24L/kg and clearance 0.24&#61617;0.06L/h•kg, respectively. Following subcutaneous, subcutaneous-P407 and subcutaneous-CMC administration enrfloxacin achieved maximum plasma concentration of 1.91&#61617;0.13, 2.93&#61617;1.15 and 2.03&#61617;0.29 mg/L at 2.43&#61617;0.21, 4.03&#61617;0.95 and 4,33&#61617;0.69h, respectively. The absolute bioavailabilities after subcutaneous, subcu taneous-P407 and subcutaneous-CMC routes were 71.01&#61617;11.75, 55.8&#61617;11.4 and 52.83±10.98%, respectively. Enrofloxacin penetration from the blood into the milk was extensive and rapid, and the drug was detected for 32h after intravenous and subcutaneous dosing, and for 96 and 120h after subcutaneous-P407 and subcutaneous-CMC administration.

El gran número y diversidad de analíticas que requieren los productos farmacéuticos hacen necesario el desarrollo de metodologías de análisis rápidas y fiables. Actualmente, la aplicación de nuevas técnicas instrumentales para control de calidad, que permitan la obtención de resultados de forma rápida y más económica, es un campo de investigación muy activo en la industria farmacéutica. En esta tesis se han utilizado dos técnicas de reciente aparición: la electroforesis capilar (EC) y la espectroscopia en el infrarrojo cercano (NIR) para desarrollar metodologías de análisis para productos farmacéuticos. Ambas técnicas, aunque muy diferentes, han sido aplicadas con éxito para cubrir distintas necesidades analíticas.EC se ha utilizado para el desarrollo y la validación de un método para la separación y determinación de los componentes de un preparado farmacéutico. Dado el carácter iónico de los componentes, se trabaja con la modalidad de electroforesis capilar de zona (CZE). La resolución y alta eficacia obtenidas permiten aplicar este método tanto a la determinación del contenido en principio activo como al seguimiento de la estabilidad del preparado. Para resolver los seis posibles isómeros posicionales de un producto derivado del preservante del fármaco se han comparado tres opciones: HPLC, CZE y la cromatografía electrocinética micelar (MEKC). Ésta última es la que permite obtener la mejor resolución, separando cinco de los seis isómeros posibles.NIR ha sido aplicado tanto en análisis cualitativo como en el análisis cuantitativo de distintos fármacos. La identificación se ha realizado desarrollando bibliotecas de espectros y para mejorar la discriminación entre productos semejantes se ha propuesto una estrategia de trabajo de bibliotecas en cascada (identificación en la biblioteca general y si es necesario en una segunda más restringida y discriminante) que permiten identificar completamente una muestra. También se ha utilizado la técnica NIR en el desarrollo de métodos para la determinación de los principios activos en dos preparados farmacéuticos con presentaciones distintas: un granulado y un gel. Para el granulado, se han comparado distintas estrategias posibles en el desarrollo del método, mientras que para el gel se han discutido las posibilidades para el registro de los espectros. Ambos métodos han sido desarrollados y validados con éxito.Las metodologías analíticas desarrolladas han demostrado su eficacia en la resolución de varios aspectos del control de calidad farmacéutico. Tanto la electroforesis capilar como la espectroscopia NIR poseen un gran potencial como alternativas a los métodos ya implantados, permitiendo optimizar tiempos y costes. / The high number and diversity of analytical tests required for pharmaceutical products encourages the development of expeditious and reliable analytical methods. Nowadays, the application of analytical techniques to obtain results more and economic and rapidly is a very active research field in pharmaceutical industry. In this work, two recently appeared techniques: capillary electrophoresis (CE) and near-infrared spectroscopy (NIR), have been used in the development of analytical methodologies for different drug products. Despite its differences, both techniques have been successfully applied to solve different analytical problems.CE has been used in the development and validation of a method for separation and determination of all components in a formulation. Due to ionic condition of all components, capillary zone electrophoresis (CZE) has been chosen as the better electrophoretic mode. The high resolution and efficiency obtained allow to apply this method not only in the determination of the active substance but also for stability control of the formulation. In order to resolve the six possible isomers of a product derived of the preservative in the formulation, three different options have been compared: HPLC, CZE and micellar electrokinetic chromatography (MEKC). Characteristics of the last, which includes a surfactant as pseudostationary phase, allow to obtain a higher resolution, resolving five of the six possible isomers.NIR has been applied in qualitative and quantitative analysis. In qualitative analysis, NIR has been used in the development of spectral libraries for identifying a vast number of products. A new strategy has been proposed, with the design of cascade libraries (a first identification in a general library and, if necessary, a second one in a more reduced and discriminating sub-library) for complete identification of a sample. In quantitative analysis, NIR has been employed in the development of methods for determining the active in two drug products with different presentations: a granulate and a hydrogel. In the granulate method, different calibration strategies have been compared, while in the hydrogel method the spectral register method has been discussed. Both methods have been successfully developed and validated, yielding very good results.Analytical methodologies developed have confirmed its usefulness for pharmaceutical quality control. Both CE and NIR show a great potential as alternative methods to conventional techniques, allowing the optimisation of costs and times of analysis.