La glia és el grup de cèl·lules del sistema nerviós més abundant en el cervell, durant molt de temps es va considerar només com un element de suport neuronal sense importància. D'aquí la necessitat d'investigar el comportament i caracterització de la mateixa en resposta a la pèrdua de memòria i l'activació tant de senyals intracel·lulars com de supervivència i deteriorament cognitiu. En cultiu mixt de còrtex de ratolí C57BL/6J, tractament al 9 dia de creixement després de la sembra, activació a una hora amb leptina i prolactina, després la incubació de citoquines (IFNγ, IL-1β i TNFα) durant 48 hores. En especial, es va centrar en la connexió de les molècules de senyalització activades per l'estrès oxidatiu com ho són p38-MAKP i iNOS. Els efectes neuroprotectors d´adipoquines com la Melatonina, la Leptina i la Prolactina i els seus efectes sobre la inhibició de la producció d'òxid nítric i l'expressió de iNOS a través de p38-MAKP després dels tractaments de citoquines, inhibint el dany cel·lular d'astròcits donant suport al potencial antiinflamatori i antioxidant d'aquests compostos, i la seva potencial aplicació en el tractament de trastorns neurològics específics, els quals suggereixen les rutes implicades en les primeres etapes de la malaltia d'Alzheimer. / La glía es el grupo de células del sistema nervioso más abundante en el cerebro, por mucho tiempo se le consideró sólo como un elemento de soporte neuronal sin importancia. De ahí la necesidad de investigar el comportamiento y caracterización de la misma en respuesta a la pérdida de memoria y la activación tanto de señales intracelulares, de supervivencia y deterioro cognitivo. En cultivo mixto de cortex de ratón C57Bl/6J, tratamiento al 9 día de crecimiento después de la siembra, activación a una hora con leptina y prolactina, luego la incubación de citoquinas (IFNγ, IL-1β y TNFα) durante 48 horas. en especial, se centró en la conexión de las moléculas de señalización activadas por el estrés oxidativo como lo son p38-MAKP e iNOS. los efectos neuroprotectores de adipoquinas como Melatonina, Leptina y Prolactina y sus efectos sobre la inhibición de la producción de óxido nítrico y la expresión de iNOS a través de p38-MAKP después de los tratamientos de citoquinas, inhibiendo el daño celular de astrocitos dando apoyo al potencial antinflamatorio y antioxidante de estos compuestos, y a su potencial aplicación en el tratamiento de trastornos neurológicos específicos, los cuales sugiere las rutas implicadas en las primeras etapas de la enfermedad de Alzheimer. / Glia is the group most abundant cells in the brain nervous system, for a long time it was considered only as an element of support neuronal unimportant. Hence the need to investigate the behavior and characterization of it in response to the loss of memory and both intracellular signal activation, survival and cognitive impairment. In mixed culture of mouse cortex C57Bl / 6J, 9 day treatment growth after planting, one hour activation with leptin and prolactin after incubation of cytokines (IFNy, IL-1β and TNF) for 48 hours. Of particular note the connection of signaling molecules activated by oxidative stress as they are p38 and iNOS MAKP focused. Neuroprotective effect of adipokines as: Melatonin, prolactin and leptin and its effects on the inhibition of nitric oxide production and iNOS expression, through p38-MAKP after treatments cytokine inhibiting cell damage astrocyte supporting the anti-inflammatory and antioxidant potential of these compounds, and their potential application in the treatment of specific neurological disorders, suggesting pathways involved in the early stages of Alzheimer's disease.

Els polifenols presents a la dieta s’han estudiat extensament pel seus efectes positius sobre diferents components de la síndrome metabòlica (MetS). En aquesta Tesi, es va proposar avaluar els efecte beneficiós dels polifenols de pinyol de raïm sobre la disfunció endotelial i la hipertensió (HTN) associada a la MetS, utilitzant el model de dieta de cafeteria com a model de MetS. Els resultats mostraren que una dosi aguda de 375 mg/Kg d’un extracte de polifenols de baix pes molecular de pinyol de raïm (LM-GSPE) 6 hores post- administració va ser la més efectiva per a baixar la pressió arterial en aquest model de HTN induït per dieta. En questa millora va ser veure la implicació de la Sirtuina-1 (Sirt-1) així com bloqueig del Sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA), que com a conseqüència va millorar la funció endotelial. Per una altra banda, es va veure com alguns dels polifenols més abundants del LM-GSPE, com l’(-)-epicatequina, la (+)-catequina o l’àcid gàl·lic, actuaren com a moduladors de la funció endotelial. A més a més, es demostrà que a una baixa dosi de 7 mg/Kg, l’àcid gàl·lic, l’àcid fenòlic més abundant de l’extracte, baixava la pressió arterial de manera aguda en rates espontàniament hipertenses, millorant a més la funció endotelial a través del bloqueig el SRAA, com succeí amb LM-GSPE. No obstant això, i al contrari que LM-GSPE, es trobaren nivells elevats de bradiquinina i descartà la implicació de les sirtuïnes en aquest efecte antihipertensiu. Finalment, es demostrà que la administració crònica de polifenols de pinyol de raïm atenuaren el desenvolupament de HTN així com d’altres factors de risc associats amb la MetS. Per tant, es proposen els polifenols de pinyol de raïm, inclòs l’àcid gàl·lic, com a bons candidats per a ser utilitzats en el tractament de la HTN associada a la MetS. / Los polifenoles presentes en la dieta se han estudiado extensivamente por sus efectos positivos sobre diferentes componentes del síndrome metabólico (MetS). En esta Tesis, se propuso evaluar el efecto positivo de los polifenoles de pepita de uva sobre la disfunción endotelial y la hipertensión (HTN) asociada al MetS, utilizando el modelo de dieta de cafetería como modelo de HTN asociada al MEtS. Los resultados mostraron que la una dosis aguda de 375 mg/Kg de un extracto de polifenoles de bajo peso molecular de pepita de uva (LM-GSPE) 6 horas post-administración fue la más efectiva para reducir la presión arterial en este modelo de HTN inducido por dieta. La implicación de la Sirtuina-1 (Sirt-1) y el bloqueo del Sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA), y por consiguiente, la mejora de la función endotelial, fueron demostrados. Por otro lado, se observó como algunos de los polifenoles más abundantes del LM-GSPE, como la (-)- epicatequina, la (+)-catequina o el ácido gálico, actuaron como moduladores de la función endotelial. Además se demostró que el ácido gálico, el ácido fenólico más abundante del extracto, a una dosis baja de 7 mg/Kg bajaba la presión arterial de manera aguda en ratas espontáneamente hipertensas, mejorando además la función endotelial mediante el bloqueo del SRAA, como sucedía con LM-GSPE. No obstante, y al contrario que el extracto, el ácido gálico aumentó la concentración de bradiquinina en plasma y además no se vio implicación de Sirt-1 en el efecto antihipertensivo. Finalmente se demostró que la administración crónica de polifenoles de pepita de uva atenúa la elevación de la presión arterial y el empeoramiento de otros factores de riesgo asociados al MetS. Por tanto, se proponen los polifenoles de pepita de uva, incluido el ácido gálico, como buenos agentes para el control de la presión arterial asociada al MetS. / Dietary polyphenols have been widely studied for their health effects on different components of metabolic syndrome (MetS). In the present Thesis it was aimed to evaluate the beneficial effect of grape-seed polyphenols on endothelial dysfunction and hypertension (HTN) associated with MetS using cafeteria diet-fed rats as a model of MetS. Results showed that an acute dose of 375 mg/kg of a low-molecular grape seed extract (LM- GSPE) 6h after-administration was the most effective in lowering BP in this diet induced HTN model. This improvement was seen to be mediated by Sirtuin-1 (sirt-1) and blockage of the Renin-Angiotensin-Aldosterone System (RAAS) at reducing Ang I and in turns Ang II plasma levels, and as a consequence, improving the endothelial function. Otherwise, some of the principal polyphenol forms in LM-GSPE, such as (-)-epicatechin and (+)-catechin, also showed to act as modulators of endothelial dysfunction. Furthermore, it was demonstrated that at a low dose of 7mg/Kg of gallic acid, the main phenolic acid present in LM-GSPE, acutely reduced BP in spontaneously hypertensive rats, improving endothelial dysfunction by blockage of the RAAS as LM-GSPE. However, gallic acid in contrast to LM-GSPE increased plasma bradykinin levels and not involved Sirt-1 in its antihypertensive effect. Finally it was demonstrated that a chronic administration of grape-seed polyphenols attenuated the development of HTN and other cardiometabolic risk factors associated with MetS. Therefore, grape-seed polyphenols, including gallic acid, are proposed as good candidates to be used as as BP lowering agents in HTN associated with MetS.

La consulta íntegra de la tesi, inclòs l'article no comunicat públicament per drets d'autor, es pot realitzar prèvia petició a l'Arxiu de la UPC / The global incidence of bone fractures, and subsequently that of non-healing ones, is expected to rise in the coming decades, mostly due to an increased risk of age-related conditions. Currently, the biomaterials field is moving towards the design of scaffolds mimicking the cell microenvironment to guide stem cells differentiation and recapitulate the development of target tissues. Biomimicry is a wide concept and several approaches have been adopted to produce cellinstructive scaffolds. Herein, we have explored the use of citric acid and lysyl oxidase, both of them related to bone nanostructure and mechanical performance, to develop scaffolds resembling the extracellular matrix of developing bone. First, elastin-like recombinamers (ELRs) hydrogels were achieved through a one-step chemical crosslinking reaction with citric acid, a molecule currently considered to be essential for the proper performance of bone tissue. By systematically studying the crosslinking reaction and its contribution to hydrogel properties, we were able to control the architecture and stiffness of citric acid-crosslinked hydrogels while preserving the integrity of adhesion sequences in ELRs. Interestingly, the use of citric acid conferred so-produced hydrogels the ability to nucleate calcium phosphate. Mechanically-tailored citric acid-crosslinked hydrogels were shown to be able to support the growth of human mesenchymal stem cells and to lead to seemingly biocompatible degradation products. Despite in vitro differentiation studies weren¿t conclusive as to their osteogenic potential, both mechanically-tailored and non-tailored citric acid-crosslinked hydrogels were shown to integrate into bone and to be partially degraded upon implantation in critical size defects in mouse calvaria. Despite cell invasion in mechanically-tailored scaffolds was seemingly lower than in non-tailored counterparts, both types of matrices allowed the formation of bone tissue, by intramembranous ossification, to a similar extent by the end of the study. At the time points selected for the in vivo study, both tailored and non-tailored hydrogels were found to be osteoconductive; osteoinduction was not observed in any of the cases. Mechanically-tailored hydrogels not being seemingly superior to control matrices at selected time points could to be due to (i) a high surface polymer density hindering cell invasion and thus delaying osteoinduction, or to (ii) a non-osteoinductive combination of properties (chemical + physical) despite hydrogels possessing theoretically osteoinductive stiffness. These results point out that scaffolds must be seen as a whole given the high complexity of the in vivo cell niche, whose signals act synergistically to define cell behavior. Thus, more complex designs are required if recapitulation of bone development is to be targeted. Additionally, recombinant lysyl oxidase (LOX) from human aorta was successfully produced in Escherichia coli to high purity. Despite achieving LOX with copper cofactor amounts and activity higher than those found in the literature, overall activity was low and the insolubilization of ELRs was not achieved, suggesting that novel expression and purification systems not compromising enzymatic activity are required if LOX is to be used to produce scaffolds. / S'espera que la incidència global de fractures òssies, i per extensió la d'aquelles que no són capaces de consolidar per si soles, augmenti en les pròximes dècades, principalment degut a l'increment del risc de patologies associades a l'envelliment. Actualment, el camp dels biomaterials es mou cap al disseny de bastides que mimetitzen el microambient cel·lular per tal de guiar la diferenciació de cèl·lules mare i recapitular el desenvolupament de teixits diana. El biomimetisme és un concepte ampli i diverses aproximacions han sigut dutes a terme per tal de produir bastides capaces de guiar el comportament cel·lular. En aquesta tesi hem explorat l'ús d'àcid cítric i l'enzim lisil oxidasa, ambdós relacionats amb la nanoestructura i propietats mecàniques del teixit ossi, per desenvolupar bastides que mimetitzin la matriu extracel·lular de l'os en desenvolupament. En primer lloc, es va produir hidrogels basats en polímers recombinants de tipus elastina (Elastin-like recombinamers; ELRs) mitjançant una reacció d'entrecreuament en un pas amb àcid cítric, una molècula actualment considerada una peça essencial per l'adequat funcionament mecànic del teixit ossi. Havent fet un estudi sistemàtic de la reacció d'entrecreuament i de la seva contribució a les propietats dels hidrogels, vam ser capaços de controlar l'arquitectura i la rigidesa de les bastides entrecreuades amb àcid cítric, tot preservant la integritat de les seqüències d'adhesió cel·lular contingudes als ELRs. És interessant remarcar que l'ús d'àcid cítric com agent entrecreuant conferí als hidrogels capacitat de nucleació de fosfats de calci. Es va demostrar que els hidrogels entrecreuats amb àcid cítric i amb propietats mecàniques diana permeten el creixement de cèl·lules mare mesenquimals humanes i donen lloc a productes de degradació aparentment biocompatibles. Tot i que els estudis de diferenciació in vitro no van ser concloents pel que fa al potencial osteogènic d'aquestes bastides, tant les matrius amb propietats mecàniques diana com aquelles control van ser capaces d'integrar-se amb l'os natiu i van ser parcialment degradades un cop implantades en defectes de mida crítica en calotes de ratolí. Tot i que la invasió cel·lular en hidrogels amb propietats mecàniques diana va ser inferior en comparació amb l'observada en bastides control, ambdós tipus de matrius van permetre la formació d'os nou, mitjançant ossificació intramembranosa, en quantitats similars al final de l'estudi. Als punts temporals seleccionats, ambdós tipus de bastides van demostrar ser osteoconductives, però no es va observar evidències d'osteoconducció en cap cas. El fet que les bastides amb propietats mecàniques diana no fossin superiors a les matrius control pel que fa a formació òssia, podria ser degut a (i) a una elevada densitat superficial que hauria dificultat la invasió cel·lular i retrassat l'osteoinducció, o (ii) a una combinació de propietats (químiques + físiques) no osteoinductiva tot i que les bastides posseïen una rigidesa teòricament osteoinductiva. Aquests resultats demostren que les bastides han de ser vistes com un tot donada l'elevada complexitat del nínxol de cèl·lules mare in vivo, les senyals del qual actuen de forma sinèrgica per definir el comportament cel·lular. Així, és necessari assolir bastides amb un nivell de complexitat més elevat per tal de recapitular el desenvolupament ossi. Addicionalment, es va produir lisil oxidasa (LOX) d'aorta humana en forma recombinant a elevada puresa a partir de cultius d'Escherichia coli. Tot i que es va aconseguir produir LOX amb un contingut del cofactor coure i una activitat superiors a aquells trobats en la literatura, l'activitat de l'enzim va ser generalment baixa i no es va assolir la insolubilització d'ELRs. Això evidencia la necessitat de desenvolupar nous sistemes d'expressió i purificació de l'enzim per tal que aquest pugui ser aplicat a la producció de bastides.

Les uroplaquines (UPKs) són proteïnes integrals de membrana que formen les plaques de l’uroteli. Tot i que aquestes plaques es troben solament a l’uroteli de mamífers, les UPKs existeixen també en vertebrats inferiors que els hi manca l’uroteli. Aquestes poden dividir-se en dos tipus, les UPK1a i UPK1b, pertanyent a la família de les tetraspanines, i les UPK2/3, composades per UPK2, UPK3a i UPK3b, les quals travessen la membrana una sola vegada i es desconeix la relació evolutiva que pugen tindre amb altres famílies de proteïnes. Nosaltres, hem identificat 3 nous ortòlegs de les UPK2/3 (UPK3c, expressada en humans, UPK2b i UPK3d); hem identificat l’origen de les UPKs en l’ancestre comú de vertebrats i hem establert una relació evolutiva entre les UPK2/3s i el més antic dels receptors de tirosina fosfatasa (R3 PTPRs). Analitzant l’expansió dels loci genètics de l’UPK3c i les duplicacions segmentals que van tenir lloc en el goril•la, ximpanzé i humà, hem trobat que, possiblement, la transposició intracromosomal d’una de les duplicacions segmentals va ser a través d’un intermediari circular. Mitjançant l’ús de tècniques de biologia molecular, hem trobat que l’UPK3c s’expressa en un ampli rang de teixits, principalment a la còrnia; que està N-glicosilada en còrnia humana, pterígion i a tumors de bufeta; així com, que es localitza principalment a les capes basal i intermèdia de l’uroteli de ratolí però es absent a les plaques de l’uroteli. En tumors de bufeta humà, l’expressió de l’UPK3c està augmentada en tumors de baix grau (9/11), mentre que en aquells d’alt grau (6/11) o invasius (3/9) està disminuïda. / Las uroplaquinas (UPKs) son unas proteínas integrales de membrana que forman las placas del urotelio. Indistintamente de que estas placas se encuentran solamente en el urotelio de mamíferos, las UPKs también existen en vertebrados inferiores que carecen de urotelio. Las UPKs pueden ser divididas en dos tipos, por un lado UPK1a y UPK1b, quepertenecen a la familia de las tetraspaninas y por otro lado las uropalkinas UPK2/3 (UPK2, UPK3a y UPK3b), que atraviesan la membrana solo una vez y de las cuales se desconoce que estén relacionadas evolutivamente con otras familias de proteínas. Nosotros, hemos identificado 3 nuevos ortólogos de las UPK2/3 (UPK3c que se expresa en humanos, UPK2b y UPK3d); localizado el origen de las UPKs en el ancestro común de vertebrados; encontrado una relación evolutiva entre UPK2/3s y llas tirosina fosfatasas (R3 PTPRs) que son proteínas más antiguas;analizado la expansión de los loci genéticos de UPK3c y las duplicaciones segmentales que tuvieron lugar en gorila, chimpancé y humano, y encontrado que posiblemente la transposición intracromosomal de una de las duplicaciones segmentales se produjese a través de un intermediario circular. Mediante el uso de técnicas de biología molecular, hemos encontrado que UPK3c se expresada en un amplio rango de tejidos huamnos predominantemente en cornea. Además, hemos observado que UPK3c está N-glicosilada en cornea humana, pterigion y en tumores de vejiga; que UPK3c se localiza predominantemente en las capas basal e intermedia del urotelio de ratón y no se encuentra en las placas del urotelio. En muestras de tumores de vejiga humanos, pudimos observar que el numero de tumores que expresan UPK3c es mayor en tumores superficiales de bajo grado (9/11) y disminuye en los tumores de alto grado (6/11) y en los invasivos (3/9). / Uroplakins (UPKs) are integral membrane proteins that form the urothelial plaques. Despite the fact that these plaques are unique to the urinary bladder of mammals, UPKs also exist in lower vertebrates without a typical urothelium. Uroplakins can be divided into two types. UPK1a and UPK1b, which belong to the tetraspanin family and UPK2/3 uroplakins that comprises UPK2, UPK3a and UPK3b, span the membrane only once and are not known to be related to any other protein family. We have identify three novel UPK2/3 ortholog groups (UPK3c that is expressed in humans, UPK2b and UPK3d), report the origin of UPKs in the common ancestor of vertebrates and the evolutionary relationship between UPK2/3s and the more ancient tyrosine phosphatase receptors (R3 PTPRs). The joint expansion of the UPK3c genetic loci and segmental duplications in the gorilla, chimpanzee and homo and we found that intrachromosomal transposition of one of these segmental duplication could have been produced by a circular intermediate Using molecular biology techniques we found UPK3c expression widespread in human tissues, particularly strong in corneal tissue. Additionally, UPK3c is N-glycosilated in human normal corneal tissue, pterygium and bladder tumors; localizes predominately to the basal and intermediate cell layers of the mouse urothelium and is absent in the urothelial plaques. Finally in human bladder cancer the number of superficial low grade tumors expressing UPK3c assessed by immunoblot was higher than in superficial superficial high grade tumors or invasive tumors .

Introdução: O cãncer de mama com fenótipo triplo negativo é definido como um tumor com receptor de estrógno e progesterona negativos e human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) negativo. Desde sua primeira descrição, alguns artigos tentaram descrever sua aparência radiológica, sem nenhum consenso. Estas pacientes podem ter características clínicas e imaginológicos distintas. Seria interessante verificar se as características radiológicas desses tumores são as mesmas relatadas no câncer de mama familiar e com mutação do gene BRCA1, muitas vezes associados a esse subtipo tumoral. Estas características que muitas vezes simulariam doenças benignas poderiam atrasar o diagnóstico precoce, refletindo a necessidade de seu conhecimento radiológico na prática. Neste contexto, este estudo poderia auxiliar no reconhecimento precoce de lesões mamárias e alertar o médico para solicitar uma biópsia, consequentemente, resultando num diagnóstico precoce. Objetivo: O principal objetivo desse estudo foi avaliar as características radiológicas dos carcinomas ductais invasivos de mama nos seguintes métodos de diagnóstico por imagem: mamografia, ultrassonografia e ressonância magnética, utilizando a padronização do American College of Radiology Breast Imaging Reporting and Data System (ACR BI-RADS®), comparando os casos de carcinomas com fenótipo triplo negativo dividindo-os em não basal e basal com o uso da citoqueratina 5. Pacientes e Métodos: Revisamos os arquivos de imagens do Instituto de Radiologia (InRad) da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (FMUSP) e do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo (ICESP), durante o período da coleta de dados, que envolveu 12 anos. Trata-se de estudo descritivo observacional, realizado após a aprovação do comitê de ética. Foram avaliadas 6.952 resultados de biópsias cirúrgicas ou percutâneas por agulha grossa de mama e após a verificação do material radiológico e histológico, chegamos ao resultado de 106 casos. Todas as reações imunohistoquímicas foram lidas por dois patologistas e os exames radiológicos foram avaliados por dois radiologistas, todos especialistas em doenças da mama em suas respectivas áreas. Resultados: A maioria das pacientes incluídas foram mulheres brancas, com idade entre 24-81 anos. Na mamografia, a principal lesão observada foi o nódulo (74,7%), com margem espiculada (36,9%) e forma oval (60,0%), seguido pela assimetria focal (12,6%), lesões ocultas (9,2%) e assimetria global (3,4%). Nenhuma lesão principal se manifestou como microcalcificações. Os tumores avaliados pela ressonância magnética se manifestaram principalmente como lesão nodular (92,0%), com forma irregular (60,0%), margem irregular (44%) e realce heterogêneo (56,0%). A curva tipo 3 (91,7%) foi comumente observada. O isosinal em T2 foi mais freqüentemente observado (52,2%). A ausência de áreas císticas foi observada na maioria das lesões (47,8%). Todos os tumores avaliados pelo ultrassom foram vistos, principalmente como nódulos (98,1%), hipoecoicos (90,3%), com forma irregular (61,2%), margem mal definida (34,7%) e o reforço acústico posterior (32,0%) e halo ecogênico (46,6%) foram comumente observados. Conclusão: Não foram encontradas associações estatisticamente significativas das características tumorais e demográficas com os subtipos de tumores (p > 0,05) na mamografia, ultrassom e ressonância magnética. Houve correlaçãos inversa entre a idade e o tamanho do tumor. Apenas no USG os linfonodos positivos apresentaram em média estatisticamente maior tamanho tumoral associado que os linfonodos negativos (p=0,045). Em nossa série, observamos que embora algumas características tenham sido mais frequentes, não houveram características que mostraram diferença estatisticamente significante entre os subtipos. Assim, não se pode atribuir qualquer característica específica que possa melhorar a acurácia diagnóstica / Introduction: Breast cancer with triple negative phenotype is defined as estrogen receptor negative tumor, progesterone receptor negative and human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) negative. Since its first description, some articles have tried to describe its radiological appearance, with no consensus. These patients can have adverse clinical and imaging characteristics. It would be interesting to check if the radiological characteristics of these tumors are the same related in the familiar breast cancer and associated to the mutation of gene BRCA1, many times associated to this tumor subtype. These characteristics, that many times would simulate benign diseases, could delay the early diagnosis, reflecting the need of its radiological knowledge in practice. In this context, this study could help in the early recognition of breast lesions and alert the doctor to require a biopsy, consequently resulting in an early diagnosis. Objectives: The main objective of this study was to evaluate the radiological characteristics of breast invasive ductal breast carcinomas with triple negative invasive phenotype in the following diagnostic image methods: mammography, ultrasound and magnetic resonance, using the American College of Radiology Breast Imaging Reporting and Data System (ACR BIRADS ®) criteria, divided in basal and not basal subtypes with the use of cytokeratin 5. Patients and Methods: We\'ve reviewed the images from the Radiology Institute (InRad) from Faculty of Medicine of the University of São Paulo (FMUSP) and from the Cancer Institute of São Paulo (ICESP), during the period of data collecting, which took 12 years. This aims to be an observational descriptive study, realized after the Ethic Committee\'s approval. 6952 results of breast surgical or percutaneous needle biopsies were evaluated and after checking the radiological and histological material, we came to the result of 106 cases. All the immunohistochemical reactions were read by two pathologists and the radiological exams were evaluated by two radiologists, all specialists in breast illnesses in their respective areas. Results: Most patients included were white women, aging between 24-81 years old. In the mammography, the main lesion observed was the nodule (74,7%), spiculated margin (36,9%) and oval shape (60%), followed by focal asymmetry (12,6%), hidden lesions (9,2%) and global asymmetry (3,4%). No main lesion showed microcalcifications. The tumors evaluated by magnetic resonance imaging showed mainly as nodule (92,0%), irregular shaped (60,0%), irregular margin (44,0%) and heterogeneous enhancement (56,0%). The curve type 3 (91,7%) was generally observed. The isosignal in T2 was most frequently observed (52,2%). The absence of cystic areas was observed in most of the lesions (47,8%). The tumors evaluated by the ultrasound were seen principally as nodules (98,1%), hypoechoic (90,3%), irregular shaped (61,2%), ill-defined margin (34,7%) and with posterior acoustic enhancement (32,0%) and echogenic halo (46,6%). Conclusion: There were no statistically significant associations of tumor and demographic characteristics with tumor subtypes (p > 0.05) in mammography, ultrasound and magnetic resonance imaging. There were inverse correlations between the age and the size of the tumor. Only in USG positive lymph nodes had on average larger tumor size with a statistically significant result that the negative lymph nodes (p = 0,045). In our series, we\'ve observed that, although some characteristics have been more frequent, there were no characteristics which showed difference statistically significant among the subtypes. Therefore, we can not attribute any specific characteristic that can improve the diagnostic accuracy

Os sistemas de apoio à decisão são softwares que se propõem ajudar o clínico nas decisões diagnósticas e terapêuticas no cuidado ao paciente. Simplificando o acesso a dados precisos na literatura científica, agilizando possibilidades propedêuticas, estabelecimento de diagnóstico diferencial com menor probabilidade de erro, padronização da linguagem técnica utilizada, além de favorecer o aprendizado e atualização dos profissionais da área de saúde. Propusemos-nos construir um software de computador, que auxiliasse o processo de interpretação, de diagnóstico radiográfico e pedagógico das alterações ósseas do complexo maxilo-mandibular. Utilizou-se o software Delphi 7® na formulação da interface de avaliação, o programa MS Access® na construção do banco de dados e o programa MS SQL Server® no gerenciamento deste banco de dados. As informações contidas no banco de dados seguiu a classificação WHO-CTPG/2003. Para validação do software foram selecionadas 20 radiografias panorâmicas que possuíam o laudo anátomopatológico e que apresentavam características de lesões ósseas radiolúcidas uni ou multiloculares, 12 cirurgiões-dentistas (6 especialistas e 6 generalistas), participaram da metodologia, a qual se constituiu de 3 fases: I Interpretação da imagem da radiografia panorâmica e fornecimento de hipóteses diagnósticas pelos C.D., II Utilização do software na interpretação das radiografias, III Comparação das respostas da fase I e II. Após as avaliações, os C.D. responderam uma pesquisa de opinião referente ao software. Os resultados foram submetidos à análise discriminante e aos testes Wilcoxon e Mann-Whitney. Concluiu-se que o nível de conhecimento entre especialistas e clínicos generalista não interferiu no resultado final da utilização do software. O software possui aplicabilidade no processo de decisão clínica por meio das ferramentas de identificação das características radiográficas e aplicabilidade pedagógica como meio colaborativo na construção de hipóteses diagnósticas. Somado todos os achados obtivemos a validação do Software proposto. / The decision support systems are softwares that intend to help the clinical diagnostic decisions and therapeutics on the patient care. Simplifying the access of precise data in the scientific literature, activating possibilities therapeutics, establishment of diferential diagnoses with smaller mistake probability, standardizing technical language used, besides favoring the learning and the professional atualisation on the health area. We intended to build a computer software, that aided the interpretation process, of radiography diagnostic and pedagogic of the dento maxilo facial complex bony alterations. The software used in the formulation of the evaluation interface was Delphi 7®, the MS Access® program in the database construction and the MS SQL Server® program in the database manangerment. The information contained in the database followed the classification WHO-CTPG/2003. For validation the software, 20 panoramic radiography was selected which possessed the anatomic pathological diagnosis and presented carcteristics of radiolucid united or multi-loculate bony lesions. Dentists in number of 12 (6 Specialists and 6 Generalists), participated in the methodology, which constituted of 3 phases: I - Reading of the panoramic radiography and supply of hiagnostic Hypothesis by Dentist, II - Use the Software to interpret the radiography, III - Comparison the answers of the phase I and II. After the evaluations, the Dentist answered an opinion research regarding the software. The obtained results were submitted to discriminate analysis and to the tests Wilcoxon and Mann-Whitney. It Concluded that the knowledge level between specialists and clinical generalists, didn\'t interfere in the result end of the used software. The software possesses applicability in the clinical decision process by means the identification tools of the radiography characteristic and in the pedagogic as a collaborative way in the construction of the diagnostic hypothesis. Added all those discoveries obtained the validation of the proposed Software.

A dosimetria de pacientes associada à avaliação das condições de funcionamento dos equipamentos médicos e aos procedimentos empregados na realização dos exames, desempenha um papel fundamental no sistema de proteção radiológica das exposições médicas. Nesse sentido, foi realizado um levantamento em grande escala das doses recebidas pelos pacientes submetidos a exames radiológicos convencionais realizados em uma amostra representativa de estabelecimentos de saúde do estado de São Paulo. Nesse levantamento foi empregado um kit dosimétrico postal originalmente desenvolvido, que permitiu a determinação da dose de entrada na pele (DEP) através da técnica de dosimetria termoluminescente. Paralelamente foram realizadas visitas in-loco a uma sub-amostra de estabelecimentos, onde as condições de funcionamento dos equipamentos de raios X médicos e do sistema de imagem foram avaliadas empregando-se procedimentos e equipamentos já estabelecidos em protocolos de controle de qualidade. O estudo completou-se com a elaboração de um catálogo de espectros na faixa de energia do radiodiagnóstico, que, através de procedimento desenvolvido, permitiu inferir espectros equivalentes em equipamentos médicos. Na determinação dos espectros foi empregado um detector semicondutor de telureto de cádmio e zinco (CdZnTe), cujas curvas de eficiência e escape foram determinadas experimentalmente para realização do processo de correção dos espectros (stripping procedure). O processo de amostragem de estabelecimentos de saúde realizado neste estudo permitiu verificar a distribuição de equipamentos de diagnóstico por imagem e a freqüência de exames radiológicos no estado de São Paulo. A partir desses resultados foram escolhidos os exames de tórax, crânio (e seios da face) e coluna para avaliação de DEP, uma vez que os mesmos apresentam as maiores freqüências anuais de exames por 1.000 habitantes: 100, 46 e 29, respectivamente. Na técnica de amostragem dos estabelecimentos de saúde incluídos neste estudo foi empregado como critério de estratificação a quantidade anual de exames radiológicos associados ao município de localização do estabelecimento. Do total de 200 estabelecimentos sorteados, 50 participaram da primeira etapa e 38 da segunda. Um total de 83 salas de exames (ou equipamentos) e 868 pacientes foram incluídos, e um conjunto de 1415 valores de DEP foi determinado. O resultado da distribuição dos valores de DEP permitiu determinar os chamados níveis de referência, que, no caso de pacientes adultos, se mostraram bastante semelhantes aos encontrados em outros estudos internacionais. No caso de pacientes infantis, a situação é bem diferente, obtendo-se valores pelo menos 2 vezes superiores a outros recomendados internacionalmente para a radiografia infantil mais freqüente (tórax). Esse fato sugere que as práticas empregadas na realização dos exames devem ser revisadas e que recomendações específicas a esse grupo de pacientes, a partir de estudos dirigidos, sejam publicadas. Constatou-se também alguns casos de DEP elevada pelo uso desnecessário de radioscopia de localização. Os testes de desempenho dos equipamentos e a avaliação das imagens realizadas sugerem que há possibilidade de melhoria das condições de realização dos exames, sem perda de informação diagnóstica presente na imagem e com redução das doses. Alguns espectros de raios X determinados experimentalmente apresentaram divergência em relação a outros catálogos já estabelecidos, numa faixa específica de energia do espectro (entre 25 e 40 keV). Para a sua utilização em situações práticas há necessidade de algumas correções na curva de eficiência, o que não inviabiliza a metodologia e os procedimentos estabelecidos. De forma geral, os resultados encontrados neste estudo permitem traçar um panorama das exposições médicas em radiologia convencional no estado de São Paulo, contribuindo para o aperfeiçoamento de futuras pesquisas que sejam realizadas na área, ou mesmo, para a implementação de políticas públicas. / Patients dosimetry, associated with the assessment of the performance of the radiological equipment and of the series of procedures employed in the accomplishment of the examinations, plays fundamental role in the radiation protection system of medical exposures. Therefore, a large-scale survey of absorbed doses was carried out in health services localized in the state of São Paulo, including patients submitted to conventional radiological examinations. In this survey a postal dosimetric kit, originally developed, was employed. It allows the evaluation of the entrance surface dose (ESD) to patients with thermoluminescence dosimeters. Also a series visits to a sub-sample of services was carried out, giving rise to the in-loco evaluation of the performance of the medical x-ray equipment and of the image system, using procedures and equipments already established in protocols of quality control. The study is completed with the elaboration of a catalogue of x-ray spectra, which provides means to infer the spectra generated by medical x-ray equipments. Measurements of x-ray spectra were carried out with a cadmium zinc telluride detector (CdZnTe), and the stripping procedure was performed taking into account both the contributions of efficiency and x-ray escape fraction, experimentally determined in this work. The stratified sampling technique furnished important data on the distribution of equipments and the annual frequency of examinations performed in the state of São Paulo. From these results radiological examinations of the chest, skull and sinus, and spine were selected for the evaluation of ESD, as their annual frequencies are the highest observed: 100, 46 and 29 per thousand inhabitants, respectively. The number of x-ray examinations carried out annually in the cities of the state was employed as the stratification criterion to construct the sample. From a total of 200 health services sampled, 50 agreed to participate of the first stage, and 38 of the second. A total of 83 rooms (or x-ray equipments) and 868 patients was included, and a set of 1415 values of ESD was measured. Diagnostic reference levels were determined with the outcomes of the distribution of ESD. For adult patients, the reference levels achieved are very similar to others obtained in international surveys. However, as far as pediatric patients are concerned, the situation is very different: the values found in this survey are twice larger than the international recommendations to chest radiography of children. This points out that the practices need to be revised and that specific recommendations to this patient group, following specific surveys, should be provided. Also, a series of high ESD values due to unnecessary localizing radioscopy were detected among our data. The results of the equipment performance tests and of the evaluation of image quality suggest that it is possible to improve the conditions of the examinations and to reduce doses to patients, without impairment of the diagnostic information. Some of the experimentally determined x-ray spectra show a discrepancy, when compared to other catalogue spectra, in a particular energy range 25 to 40 keV. The practical application of them will require some corrections in the efficiency curve, but the established methodology and procedures remain legitimate. In an extensive approach, the results of this study supply a panorama of medical exposures in conventional radiology in the state of São Paulo, contributing with resources to future research in the field and also to governmental actions.

RESUMO A Expansão Rápida da Maxila é um recurso clínico adotado pelos ortodontistas no tratamento das más oclusões com deficiência transversa real ou relativa da maxila. Esta, inclui uma fase ativa, promovendo a desarticulação dos ossos maxilares por meio da sutura, e uma fase passiva, onde uma série de eventos levam à remodelação óssea e restauração da sutura, com o aumento clínico na largura do palato. Discute-se qual a melhor época para a disjunção e o tempo necessário para que haja a perfeita remodelação óssea. A radiografia oclusal assume aqui um importante papel, pois é por meio desta que se obtém a imagem da sutura palatina mediana permitindo uma análise descritiva de suas condições em todas as etapas do tratamento A nossa proposta no presente estudo, foi a de medir as densidades ópticas da sutura palatina mediana antes da disjunção (Fase I), imediatamente após a disjunção, (Fase II) e após contenção de três meses (Fase III), usando um sistema de imagem digital, comparando-as e correlacionando-as com a radiografia oclusal convencional. A amostra, constituída por 31 (trinta e um) pacientes que se submeteriam à disjunção palatina e que se encontravam em fase de crescimento, foi dividida em:grupo I, constituído pelos pacientes de dentadura mista e grupo II, pelos pacientes de dentadura permanente. Foram obtidas radiografias oclusais e imagens digitais nas fases Fase I, Fase II e na Fase III. Áreas de interesse foram demarcadas nas radiografias digitais, procedendo-se a leitura das densidades ópticas pelo programa Digora for Windows-2.1, e comparando os resultados entre si e com a avaliação subjetiva feita nas radiografias oclusais. Após a análise dos dados pelo teste t de Student pareado, pode-se concluir que 1) as densidades ópticas da sutura palatina mediana na fase final, mostram valores inferiores aos da fase inicial nos pacientes do grupo I; 2) as densidades ópticas da sutura palatina mediana na fase final, mostram valores semelhantes aos da fase inicial nos pacientes do grupo II; 3) as densidades ópticas finais da sutura palatina mediana não correspondem às iniciais nos pacientes do sexo feminino do grupo I; 4) as densidades ópticas finais da sutura palatina mediana são semelhantes às iniciais nos pacientes do sexo masculino do grupo II; 5) para os pacientes do grupo II não houve diferença significante entre os valores de densidade óptica inicial e final, tanto no sexo masculino como feminino; 6) os resultados encontrados nas imagens digitais são compatíveis com os encontrados nas radiografias oclusais convencionais. / SUMMARY The Fast Expansion of the Jaw is a clinical resource adopted by the ortodontists in the treatment of the bad occlusions with real or relative deficiency transversal, of the jaw. This, includes a phase, promoting the disarticulation of the maxilarys bones by means of the suture, and a passive phase, where a series of events takes to the bone remodelling and restoration of the suture, with the clinical increase in the width of the palate. The best time for the disjunction and the necessary time is argued which so that it has the perfect bone remodelling. The oclusal radiography assumes an important role here, therefore it is for way of this that if gets the image of the medium palatine suture allowing to a descriptive analysis of its conditions in all the stages of the treatment our proposal in the present study, was to measure the optic densities of the medium palatine suture before the disjunction (Phase I), immediately after the disjunction, (Phase II) and after containment three months (Phase III), using a system of digital image, comparing and correlating them with the conventional oclusal radiography. The sample, consisting of 31 (thirty one) patient that would submitted the palatine disjunction and that found in growth phase, divided in Grave I, constituted of the patients of mixing set of teeth and group II, for the permanent set of teeth patients. Oclusal radiography and digital images in the phases had been gotten Phase I, Phase II and in Phase III. Areas of interest had been demarcated in the digital x-rays, proceeding it reading from the optic densities for the Digora program for Windows-2.1, and comparing the results among themselves. With the subjective evaluation in the oclusal radiographies.(After the analysis of the data by student T test could be concluded that1) the opitic densities of the medium palatine suture in the final phase, show inferior values to the ones of the initial phase in the patients of group I;2) the optic densities of the medium palatine suture in the final phase, show similar values to the ones of the initial phase in the patients of group II;3) the final optic densities of the medium palatine suture do not correspond to the initials in the patients of the female groupI;4) the final opitic densities of the medium palatine suture are similar to the initials in the patients of the male group II;5) for the patients of group II it did not have significant difference betweenthe values of initial and final opitic density, as much in the male and female groups6) the results found in the digital images are compatible wit those found in the conventional oclusal radiographics.

A documentação odontológica é utilizada como ferramenta indispensável para identificação humana uma vez que possibilita a comparação entre registros ante mortem (AM) e post mortem (PM), levando a resultados objetivos e confiáveis. A constante evolução tecnológica ocasionou grande avanço na qualidade dos exames por imagens, auxiliando o processo de identificação por arco dentário. Nesse contexto, as imagens radiográficas digitais ganharam espaço frente às convencionais e as tomografias computadorizadas (TC) passaram a ser comumente utilizadas na Odontologia, devido à multiplicidade dos detalhes oferecidos pelas imagens tridimensionais. Estudos recentes revelam as tentativas de se reproduzir imagens semelhantes às intraorais por meio de TC. No entanto, ainda não há estudos efetivos no campo das ciências forenses, utilizando tomografias computadorizadas de feixe cônico (TCFC) com o propósito de identificação. O presente estudo teve como objetivo desenvolver uma metodologia para simulação de imagens radiográficas intraorais em tomografias computadorizadas de feixe cônico, visando repetir a incidência e geometria da radiografia de origem, contemplando os possíveis erros de angulação, além de verificar a eficácia e confiabilidade desse princípio entre os examinadores. Para isso, foi realizada a aquisição de vinte TCFC de crânios secos e os dados do seu odontograma inseridos nas fichas PM do WinID. Para cada crânio, um segundo observador realizou três radiografias periapicais digitais, simulando as AM, uma delas contendo alteração de posicionamento. As 60 radiografias foram randomizadas, três pontos foram selecionados, suas distâncias lineares e angulação mensurados no Photoshop e catalogados em planilha do Microsoft Excel. Os dados odontológicos das radiografias foram incluídos como fichas AM do WinID. O software indicou similaridade ao confrontar os elementos AM com os PM. e os valores tabulados das radiografias conduziram as análises do primeiro, sem o conhecimento prévio dos erros. As regiões de interesse (ROI) das imagens radiográficas foram localizadas nas TCFC e a geometria de incidência simulada, mediante a manipulação dos planos espaciais e ferramentas disponíveis no software Osirix, buscando valores semelhantes aos originais. Por fim, a sobreposição de imagens foi realizada utilizando artifícios do Photoshop, comprovando a similaridade entre as imagens originais e as replicadas na tomografia. Os resultados mostraram que foi possível replicar a geometria das imagens radiográficas nas TCFC em 100% da amostra. Testes estatísticos como o coeficiente de variação, diferenças de médias e coeficiente de Pearson evidenciaram forte correlação para todas as variáveis estudadas e todos os valores foram estatisticamente significantes (p<0.05). O protocolo desenvolvido possibilitou a reprodução da geometria e incidência das radiografias convencionais em TCFC, inclusive na presença de alterações na angulação. As imagens produzidas puderam ser comparadas às originais, assegurando o resultado por sobreposição. Em todas elas ficou comprovada a viabilidade do uso do protocolo para fins de identificação humana e sua aplicação, portanto, foi considerada confiável e segura, visto que a concordância entre os observadores ficou demonstrada pelos testes estatísticos. / Dental Records are used as a necessary tool for human identification, as it enables the comparison of Antemortem (AM) and Postmortem (PM) data, leading to objective and reliable results. The constant evolution of technology brought advances in the quality of images, aiding the dental arch identification process. In this context, the digital radiographic images gained ground among conventional radiographs and Computed Tomography (CT) became usual in dentistry, due to the multiple details available in the tridimensional images. Recent studies shown attempts of reproducing intraoral images from CT. But there was no effective studies in the forensic science field using Cone-Beam Computed Tomography (CBCT) with identification purposes. The present study aims on developing a methodology that could simulate intra-oral images in CBCT exams, in order to repeat the incidence and image geometry of the original radiography, covering possible angulation errors and testing the reliability of the process. To do so, 20 CBCT were acquired from dry skulls and their dental charts were registered in WinID. In each cranium, a second observer made three periapical radiographs, simulating the AM records in WinID, and one should contain and incidence error. The 60 radiographs were randomized and in each three points were selected with linear distances and angle between them were measured in photoshop and recorded in a MS Excel chart. The data from the radiographs were included in WinId as AM records. The Sotware indicated similarities of the records by matching AM and PM, and the values from the radiographs directed the analysis made by the first examiner, with no knowledge of the previous errors and the AM data registered in WinID. The Region of Interest (ROI) in the radiographs were located in the CBCT and the geometry and incidence were simulated using the manipulation of the orientation planes and tools of the software Osirix, in search of similar to the original values. Finally, the superimposition of images was made in Photoshop, to prove the achievement of similarity between the original images and those extracted from the CBCT. The results showed a possible repeatability of image geometry in 100% of the sample. Statistic test of the variance coefficient, average difference and Pearson coefficient highlighted the strong correlation of all variables and significance of all tested values (p<0.05). The developed protocol enabled the reproduction of conventional radiographs geometry and incidence in CBCT exams, including in the presence of incidence errors. The produced images could be compared to the original, assuring a result by superimposition. In every analysis, the use of this protocol has been confirmed as viable for human identification purposes, and its usage was considered reliable and secure, as the concordance between examiners was demonstrated by the statistic analysis.

A unicidade da cavidade sinusal frontal é um importante fator para a identidade humana. O uso de registros de imagens dessa cavidade para a identificação forense é amplamente difundido, sendo uma metodologia secundária segundo a INTERPOL. Recentes avanços nas tecnologias de imagem permitiram o registro de imagens tridimensionais dessa cavidade. Nosso objetivo foi validar a metodologia proposta por Beaini et al. (2015), padronizando critérios para a obtenção de imagens tridimensionais da cavidade sinusal frontal com tomografia computadorizada de feixe cônico e avaliando a capacidade desses dados para a identificação humana. Para tanto, utilizamos um banco de imagens tomográficas de 200 pacientes randomizados e analisados por três observadores. As imagens foram exportadas em formato DICOM e submetidas a dois processos de segmentação distintos e sobreposição tridimensional. Realizou-se a metodologia descrita para estabelecer a identificação entre pacientes randomizados. Os resultados mostraram que há uma diferença significativa entre os processos de segmentação, sendo mais indicada a técnica de segmentação manual. A metodologia proposta por Beaini et al. (2015) foi validada e um total de 166 pacientes foram identificados. O volume da cavidade sinusal possui um elevado potencial de identificação com uma probabilidade aproximada de 85% para determinar o gênero dos indivíduos. / The uniqueness of the frontal sinus cavity is an important factor for establishing human identity. The usage of imaging records of this cavity for human identity is a secondary methodology according to the INTERPOL protocols. Recent advances in imaging technologies have enabled the three-dimensional imaging records of this cavity. Our goal was to validate the methodology proposed by Beaini et al. (2015), by developing standardized criteria for the use of cone beam computed tomography three-dimensional images of the front sinus and evaluating the ability of these data for human identification. The aim of this study was to investigate a total of 200 imaging records from randomized patients that were analyzed by three observers. Images were exported in DICOM format and underwent two distinct segmentation processes and a three-dimensional overlap. The Beaini et al. (2015) technique was applied to establish identification of the randomized patients. My results showed a significant difference between both segmentation processes, with manual segmentation showing the best results. Beaini et al. (2015) technique was validated and a total of 166 patients were identified. The volume of the sinus cavity has a high identification probability with a rough probability of 85% to determine the sex of individuals.