Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniera Agrónoma / El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de diferentes concentraciones de 1-metilciclopropeno (1-MCP) sobre la maduración de kiwi (Actinidia chinensis) ‘Jintao’. Los frutos una vez cosechados, provenientes de la localidad del Lontué, fueron trasladados al laboratorio de AgroFresh, donde se realizó el tratamiento de curado por 48 horas. Se evaluó color de pulpa (101,2±1,9 H º), firmeza de pulpa (9,1±2,5 Lbf) y solidos solubles (15,3±1,2 º Brix) de 130 frutos para determinar estado inicial. Se embalaron en cajas con 100 unidades. Se enfriaron para luego aplicar las diferentes concentraciones (500 ppm y 1000 ppm) de 1-MCP (SmartFresh, 0,14 % i.a) por 24 horas a 0 °C. Luego de almacenar por 60 días a 0 °C la fruta tratada y la no tratada (control) se aplicó etileno (34 mL) por 6 horas a 20 °C a la mitad de cajas de cada tratamiento, generando 6 tratamientos, T: almacenamiento refrigerado a 0 °C, T+E: Almacenamiento refrigerado a 0 ºC+aplicación de etileno, M1: Almacenamiento refrigerado con aplicación de 500 ppm 1-MCP, M1+E: almacenamiento refrigerado con aplicación de 500 ppm de 1-MCP+aplicación de etileno, M2: Almacenamiento refrigerado a 0 °C con aplicación de 1000 ppm de 1-MCP, M2+E: almacenamiento refrigerado con aplicación de 1000 ppm de 1-MCP+aplicación de etileno. Se hicieron evaluaciones a salida de frío a los 60, 90 y 120 días de: color de pulpa (H °), firmeza de pulpa (Lbf), contenido de sólidos solubles (%), tasa de producción de etileno (μL C2H4∙kg−1∙h−1), tasa de respiración (mL CO2∙kg−1∙h−1). Además luego de 90 y 120 días a 0 °C, se hizo un periodo de comercialización simulada (7 días a 20 °C) para una caja de cada tratamiento, donde se evaluó los mismos parámetros que a salida de frío agregando dureza de columela y acidez titulable. Ambas concentraciones de 1-MCP lograron evitar la caída de firmeza de pulpa, aumentando la vida postcosecha a 0 °C hasta los 120 días de almacenamiento. La aplicación de mayor concentración de 1-MCP, tuvo un efecto inicial mayor en el mantenimiento de la firmeza de pulpa que la aplicación de menor concentración, pero a lo largo del tiempo de almacenaje en frío y periodo de comercialización simulada, ambas perdieron su efectividad. No hubo diferencias estadísticamente significativas sobre los parámetros de calidad evaluados entre las diferentes concentraciones de 1-MCP. La aplicación de etileno, no tuvo un efecto estadísticamente significativo en conjunto con las aplicaciones de 1-MCP, además no logró disminuir la dureza de columela.

Submitted by GIOVANNA ALENCAR LUNDGREN null (giolundgren@gmail.com) on 2017-04-03T13:32:35Z No. of bitstreams: 1 GIOVANNA LUNDGREN - DISSERTAÇÃO.pdf: 3870598 bytes, checksum: 7581ab6f530188ee4e1822bbc2367d32 (MD5) / Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: No campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” foi informado que seria disponibilizado o texto completo porém no campo “Data para a disponibilização do texto completo” foi informado que o texto completo deverá ser disponibilizado apenas 6 meses após a defesa. Caso opte pela disponibilização do texto completo apenas 6 meses após a defesa selecione no campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” a opção “Texto parcial”. Esta opção é utilizada caso você tenha planos de publicar seu trabalho em periódicos científicos ou em formato de livro, por exemplo e fará com que apenas as páginas pré-textuais, introdução, considerações e referências sejam disponibilizadas. Se optar por disponibilizar o texto completo de seu trabalho imediatamente selecione no campo “Data para a disponibilização do texto completo” a opção “Não se aplica (texto completo)”. Isso fará com que seu trabalho seja disponibilizado na íntegra no Repositório Institucional UNESP. Por favor, corrija esta informação realizando uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2017-04-11T19:44:38Z (GMT) / Submitted by GIOVANNA ALENCAR LUNDGREN null (giolundgren@gmail.com) on 2017-04-11T19:50:15Z No. of bitstreams: 1 GIOVANNA LUNDGREN - DISSERTAÇÃO.pdf: 3870598 bytes, checksum: 7581ab6f530188ee4e1822bbc2367d32 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-11T20:00:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lundgren_ga_me_bot.pdf: 3870598 bytes, checksum: 7581ab6f530188ee4e1822bbc2367d32 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-11T20:00:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lundgren_ga_me_bot.pdf: 3870598 bytes, checksum: 7581ab6f530188ee4e1822bbc2367d32 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A atemoia é um fruto climatérico altamente perecível, e para sua comercialização é necessário que se faça uso de métodos de conservação pós colheita. O presente trabalho teve como objetivo a conservação da Atemoia com a utilização de 1-metilciclopropeno (1-MCP). Os frutos após a colheita foram selecionados e submetidos a diferentes concentrações de 1-MCP (200 µL.L-1, 300 µL.L-1 e 400 µL.L-1) e após o procedimento foram armazenados sob refrigeração em câmara fria a 15ºC±1 e 90±5% de UR. Foram avaliados pH, acidez titulável (AT), sólidos solúveis (SS), índice de maturação, perda de massa fresca, atividade respiratória, açúcares redutores, amido, coloração, ácido ascórbico, compostos fenólicos totais, capacidade antioxidante, atividade das enzimas polifenoloxidase (PFO), peroxidase (POD), poligalacturonase (PG) e pectinametilesterase (PME), análise visual e sensorial. As análises foram realizadas nos frutos em triplicata a cada 3 dias, durante 18 dias. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial (4x7), com 3 repetições por tratamento. O uso de 1-metilciclopropeno na maior dose, de 400 µL.L-1 juntamente com o armazenamento refrigerado é recomendado para conservação e aumento da vida de prateleira. / The atemoya is a highly perishable climacteric fruit, and marketing is necessary to make use of post harvest conservation methods. This work aimed at the conservation of atemóia with the use of 1-methylcyclopropene (1-MCP). The fruits after harvest were selected and subjected to different concentrations of 1-MCP (200 ppm, 300 ppm and 400 ppm) and after the procedure were stored under refrigeration in cold storage at 15 ° C ± 1 and 90 ± 5% RH. pH were evaluated, titratable acidity (TA), soluble solids (SS), maturation index, loss of weight, respiratory activity, reducing sugars, starch, coloring, ascorbic acid, total phenolic compounds, antioxidant capacity determined by DPPH, activity enzyme polyphenol oxidase (PPO), peroxidase (POD), polygalacturonase (PG) and pectin methyl esterase (PME), visual and sensory analysis. The analyzes were performed in triplicate in fruits every 3 days for 18 days. The design was completely randomized with three replicates per treatment. The use of 1-methylcyclopropene at all doses along with the refrigerated refrigerator is recommended for shelf life and shelf life.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-07-25T16:50:30Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 591221 bytes, checksum: 94b8e550dab3a251af01eaa5b55d8b5a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-25T16:50:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 591221 bytes, checksum: 94b8e550dab3a251af01eaa5b55d8b5a (MD5) Previous issue date: 2001-12-18 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A década de 90 representou um período de profundas transformações para toda a cadeia produtiva do leite. O processo de abertura da economia, a integração com o MERCOSUL, o fim da intervenção governamental e a estabilização econômica provocaram uma reorganização, voltada, principalmente, para a questão da competitividade. Como resposta ao novo ambiente institucional e, especificamente, com o objetivo de garantir melhor qualidade e volume de produção, o segmento industrial estimulou um processo de modernização da pecuária leiteira, com a introdução do método de coleta a granel do leite refrigerado. O novo sistema de coleta representou uma estratégia para melhorar a qualidade da matéria-prima, reduzir custos de transporte, proporcionando vantagens desde a produção até o consumo. Tendo como referencial teórico a Economia dos Custos de Transação, foi realizada uma análise da cadeia agroindustrial do leite em Minas Gerais, enfocando os efeitos destas transformações sobre as transações entre os agentes da cadeia, mais precisamente, sobre a especificidade dos ativos e sobre os custos de xiiitransação. O estudo buscou verificar se a mudança tecnológica, representada pela coleta granelizada, influenciou no surgimento de novas estruturas de governança. Na primeira parte da análise, mostra-se a evolução de todos os segmentos da cadeia de lácteos, com ênfase para as repercussões das mudanças ocorridas nos ambientes institucional, organizacional e tecnológico. Na segunda parte, a análise direciona-se para a experiência específica da implantação da coleta granelizada na cooperativa ITAMBÉ, como uma forma de abordar a estratégia tecnológica, como garantia de eficiência, e os seus efeitos sobre as transações da cadeia. Os efeitos da implantação da coleta granelizada na ITAMBÉ incluíram, além de redução nos custos para o produtor e para a indústria, uma tendência ao estabelecimento de relações mais formais na cadeia. A mudança tecnológica implicou alteração na especificidade do produto, criando condições para a emergência de novas instituições para governar as transações. O pagamento por qualidade configurou-se, no novo ambiente da década de 90, como uma estrutura de governança eficiente, pré- condição essencial para a emergência de contratos mais formais nas relações entre o produtor e a indústria. Mudanças significativas foram comprovadas em todos os segmentos da cadeia, mas a adoção de uma nova estrutura de governança é um processo gradativo, que, embora facilitado pela mudança no ambiente tecnológico, ainda deve demorar para se concretizar. Restam, ainda, muitas imperfeições harmoniosas entre na os cadeia, agentes, impedindo mas, a ocorrência certamente, as de relações transformações apresentadas no estudo representam um importante passo para a adoção de uma estrutura de governança mais eficiente, no sentido de permitir a garantia de competitividade e menores custos de transação. / The 90-ies represented a period with deep transformations throughout the productive milk chain. The process of economy opening, the integration with MERCOSUL, the end of the government intervention and the economic stabilization have provoked a reorganization mainly directed toward the competitiveness matter. As a response to the new institutional environment, and specifically aiming to assure either a better quality and production volume, the industrial segment stimulated a modernization process for the dairy cattle raising, by introducing the in bulk-collection method of the refrigerated milk. The new collection system represented a strategy to improve the quality of the raw material, and reduce the transport costs, so providing some advantages from the production until consumption. Taking the Transaction Costs Economy as a theoretical referential, an analysis of the agroindustry milk chain was performed in Minas Gerais State, by focusing the effects from these transformations on transactions among the agents in this chain, and more precisely on the xvspecificity of the assets and on transaction costs. The study looked for verifying if the technological change, represented by the in-bulk collection, had influenced the appearance of new governance structures. In the first part of the analysis, the evolution of all segments in the dairy chain are shown with emphasis on repercussions of the changes occurred in the institutional, organizational and technological environments. In the second part, the analysis is addressed to the specific experience in implantation of the in-bulk collection in cooperative ITAMBÉ, as a form to treat the technological strategy as an efficiency warranty, as well as its effects on the transactions of the chain. Besides a reduction in the costs for both producer and industry, the effects from implantation of the in-bulk collection in ITAMBÉ included a tendency to the establishment of more formal relationships in the chain. The technological change implied an alteration in the product specificity, then generating conditions for the emergency of new institutions charged in controlling the transactions. Under the new environment of the 90-ies, the payment for quality was configured as a structure of efficient governance, an essential precondition for emergency of more formal contracts in the relationships between producer and industry. Significant changes were verified in all segments of the chain, but the adoption of a new governance structure is a gradual process, that although facilitated by the change in the technological environment yet should take much time to concretize. Many imperfections still remain in the chain, so hindering the occurrence of harmonious relationships among agents, but certainly the transformations presented in this study also represent an important step for the adoption of a structure provided with a more efficient governance, in the sense to allowing the competitiveness warranty and lower transaction costs.

Magíster en Gestión y Dirección de Empresas / El placer y la conveniencia son importantes fuerzas que modelan el mercado de los alimentos en el mundo, donde Chile no está ajeno a las tendencias presentando un crecimiento en las categorías de alimentos refrigerados de corta vida útil, a partir de la cual, se gesta la necesidad de aumentar su red de distribución especializada, constituyendo un área de oportunidad para el desarrollo empresarial. Este Plan de Negocios, pretende implementar una cadena de comercialización y distribución de productos refrigerados de corta vida útil, que permita a proveedores y clientes, aumentar su red de distribución y mejorar su plan de comercialización. Se abordará temas relevantes para la elaboración del plan de negocios, tales como, estudio de mercado, plan de marketing, además de, una planificación adecuada de las necesidades organizacionales, operacionales, y financieras que le otorguen sustentabilidad al negocio a largo plazo. El elemento central del mismo, será entregar valor agregado a todos los actores de la cadena de valor, a través de la consolidación y comercialización de productos refrigerados que permita a los clientes intermedios, optimizar sus procesos internos, y al cliente final, contar con la disponibilidad del producto en punto de venta. El estudio de mercado demuestra que, existe una demanda insatisfecha de productos refrigerados y que los potenciales clientes valoran la posibilidad de realizar alianzas estratégicas que les permita estar a la vanguardia en el desarrollo de este tipo de productos, y más aún, que éste se encuentre acompañado de un servicio de logística eficiente. De acuerdo a lo anterior se define que la ventaja competitiva de este negocio será, ser especialistas en desarrollo y distribución. La segmentación de mercado será definida de acuerdo al tipo de servicio, ubicación geográfica, actividad y tamaño. Los canales de distribución serán formatos de Conveniencia, canal Horeca y Supermercados, inicialmente en la RM pero con posible ampliación a la IV y VIII región en los años 3 y 5. La evaluación financiera se realizó con un horizonte de 10 años e indica que el proyecto es rentable, siendo la estrategia de inversión 50% de crédito y 50% aportado por inversionistas, el mejor escenario para maximizar la rentabilidad del proyecto, donde el VAN alcanza 969 MM$, con una tasa del 20% y una TIR del 35%. El análisis de sensibilidad y de escenario, indica que la empresa es estable ante variaciones de precio, costos variables, IPC, entre otras, pero es altamente sensible a cualquier cambio en el margen y la demanda de los productos. Una vez finalizado el plan de negocio, se puede concluir que, existe una oportunidad real para la implementación de una cadena de distribución y comercialización de productos refrigerados de corta vida útil.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of this work was to evaluate the effect of the application of aminoethoxyvinylglycine (AVG) and 1-methylcyclopropene (1-MCP) on the quality of Eldorado peaches during cold storage. The treatments were combinations among AVG ([S]-Trans-2-Amino-4-(2-aminoethoxy)-3-butenoic acid hydrochloride) preharvest sprays on the trees in different dates (0, 15 and 21) days before harvest, and 1000ppb of 1-MCP applied in postharvest. The AVG concentrations were 0, 125, 187.5 and 249.0 g ha-1. The fruit were stored during 3 weeks at 0°C plus 5 days at 20ºC. According to the results the AVG sprays did not show effect on the quality of fruit considering periods of application and concentrations. However 1-MCP treatment was efficient in the maturation control and maintenance postharvest of qualities: pulp firmness, acidity, background color, ethylene production and respiration. / O objetivo deste trabalho foi o de avaliar o efeito da eficiência da aplicação de aminoetoxivinilglicina (AVG) e 1-metilciclopropeno (1-MCP) na manutenção da qualidade de pêssegos cultivar Eldorado, durante o ao armazenamento refrigerado. Os tratamentos foram combinações entre pulverizações pré-colheita de soluções com AVG (ácido clórico [S]-trans-2-amino-4-(2-aminoetoxi)-3-butenoico: Aminoetoxivinilglicina) sobre as plantas em diferentes épocas de aplicação (0, 15 e 21 dias) antes da colheita, e a aplicação de 1-MCP em pós-colheita na dose de 1000ppb. As doses de AVG utilizadas foram 0, 125, 187,5 e 249,0 g ha-1. Os frutos foram armazenados em ambiente refrigerado na temperatura de 0ºC durante 3 semanas e mais cinco dias de exposição a 20ºC. Segundo os resultados não houve diferença nos parâmetros de qualidade com relação às diferentes doses de AVG aplicadas e as diferentes épocas de aplicação. Já aplicação de 1-MCP mostrou-se eficiente no controle do amadurecimento e na manutenção da qualidade pós-colheita com relação aos seguintes parâmetros: firmeza de polpa, acidez titulável, cor de fundo da epiderme, produção de etileno e respiração.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8613_1.pdf: 1727943 bytes, checksum: 5d6cde26d9926aec0b3082da7004a2dd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O comércio de alimentos com alto valor agregado, como as frutas e hortaliças minimamente processadas, foi introduzido no Brasil na década de 90. Apesar do Brasil ser um dos maiores exportadores de manga in natura, este fruto não é encontrado minimamente processado. Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da adição de cloreto de cálcio na qualidade de manga espada minimamente processada em cubos e fatias e armazenada a 5±1ºC. As mangas após sofrerem o processamento mínimo na forma geométrica de cubos e fatias, foram submetidas a tratamentos com diferentes percentuais de CaCl2, tempo de imersão e tempo de armazenamento. As análises físicoquímicas para determinações de pH, sólidos solúveis totais acidez total titulável e ácido ascórbico foram realizadas de acordo com o planejamento estabelecido para o estudo da adição do cloreto de cálcio, bem como as análises microbiológicas de Salmonella e coliformes a 45°C. Os resultados permitem inferir, para manga espada minimamente processada com geometria de cubo, que a interação entre o tempo de armazenamento e o percentual de cloreto de cálcio apresentou efeito positivo sobre o teor de sólidos solúveis totais em contraposição ao tempo de imersão, que teve um efeito negativo. A acidez total titulável e o ácido ascórbico não sofreram influência de nenhuma das variáveis estudadas. O pH foi influenciado linearmente e com sinal negativo pelo tempo de armazenamento e tempo de imersão. Os sólidos solúveis totais, pH e acidez total titulável da manga espada minimamente processada com geometria de fatia não receberam influência de nenhuma das variáveis, salientando que este último teve uma leve influência significativa e negativa do termo quadrático do percentual do cloreto de cálcio; O ácido ascórbico foi influenciado linearmente com sinal positivo pelo tempo de armazenamento e percentual de cloreto de cálcio, tendo os maiores valores com 1,25% de CaCl2 e 5 e 10 dias de armazenamento. Nos ensaios microbiológicos para mangas espada minimamente processadas nas geometrias de cubo e fatia não foi detectada a presença de Salmonella ssp e coliformes a 45°C nas amostras analisadas, demonstrando eficiência dos cuidados higiênicos tomados e sanitizante utilizado durante a produção de mangas minimamente processadas, mostrando que o produto está dentro dos padrões de segurança de acordo com a legislação vigente

Ingeniero Civil Industrial / En la presente memoria se pretende solucionar el problema de una cadena de farmacias respecto a la conservación de la cadena de frío en todas las etapas del proceso logístico de los productos refrigerados que comercializa. Una cadena de frío es una cadena de suministro con temperatura controlada, una serie ininterrumpida de actividades de almacenamiento y distribución de productos en un rango entre 2° y 8°C. La importancia de establecer una cadena de frío se basa en los requerimientos de la norma N° 147 sobre almacenamiento y distribución de productos farmacéuticos, en la necesidad de contar con el petitorio mínimo, a la importancia comercial de los medicamentos refrigerados y a las posibles sanciones por no cumplir con la normativa. El objetivo de la memoria es asegurar que la cadena de frío de los productos refrigerados que se comercializan no sea rota durante el proceso logístico, a través de un rediseño de procesos, para lo cual se tiene como objetivos específicos levantar el proceso, identificar los factores de riesgo para la cadena de frío, proponer mejoras al proceso, validar la solución crítica del proceso y priorizar las medidas a implementar. La cadena de farmacias cuenta con 417 locales a lo largo de chile, el 64% en la zona central y el 12% en regiones extremas, cuenta con un centro de distribución en Santiago y recibe los productos refrigerados de 35 proveedores. El proceso logístico que siguen los medicamentos se resume en la siguiente secuencia: recepción, almacenamiento, picking, packing, transporte, recepción en farmacia, almacenamiento en farmacia y venta. Se encontraron distintos problemas para asegurar que la cadena de frío se conserva durante todas las etapas del proceso. El problema crítico es asegurar las condiciones de temperatura durante el transporte, para lo cual se modificó el proceso de packing y se validó la conservación de la cadena de frío en el envío de medicamentos a locales en los peores casos de operación, conservándose la temperatura por 36 horas durante el transporte. Para apoyar esto se proponen mejoras al proceso y capacitación a los colaboradores implicados. Además, se hicieron otras modificaciones al proceso para asegurar a la autoridad sanitaria el cumplimiento de la cadena de frío de los productos refrigerados. El proyecto considera una inversión de 45,5 millones de pesos y un costo operacional el primer año de 109 millones; tomando en cuenta un aumento de la demanda de productos refrigerados mayor a 6% el proyecto tiene un VAN positivo evaluado en 5 años y una TIR de 10% (igual a la tasa de descuento).

O plasma seminal é o constituintes não celular do sêmen suíno e contém uma série de componentes orgânicos e inorgânico que desempenham ações variadas tanto no trato reprodutivo masculino como no feminino. No entanto, este fluido de constituição complexa, exerce ações ambiguas sobre os espermatozoides suínos, pois pode atuar ao mesmo tempo de forma benéfica ou deletéria sobre a viabilidade destas células. Nesse sentido, alguns estudos sugerem que este não é o melhor meio para a conservação de espermatozoides. Desta forma o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do plasma seminal sobre a integridade das membranas plasmática e acrossomal e o potencial de membrana mitocondrial do espermatozoide suíno armazenado sob refrigeração a 17°C por 72 horas. Para tanto, foram obtidos 4 ejaculados de 6 cachaços. Em seguida o sêmen in natura foi avaliado quanto às características da motilidade pelo sistema computadorizado de análise do sêmen, morfologia espermática por contraste de interferência diferencial e concentração espermática. Após essa primeira avaliação, os ejaculados foram acondicionados em tubos cônicos de 50 mL para serem divididos em três tratamentos, a saber: não centrifugado (NC), centrifugado e com o plasma seminal retirado pós-centrifugação (CS) e centrifugado resuspendido (CR). A força de centrifugação utilizada foi de 500xg por 10 minutos. Todos os tratamentos foram submetidos à diluição em meio BTS para que se obtenha uma concentração de 30 x 106 espermatozoides por mililitro (mL). Em seguida, as amostras permaneceram por 90 minutos em temperatura ambiente e protegidas da luz antes de serem armazenadas. As doses com os diferentes tratamentos foram acondicionadas à temperatura de 17°C e foram avaliadas nos intervalos 0 (90 min pós-diluição), 24, 48 e 72 horas para os seguintes parâmetros: características da motilidade (CASA), integridade das membranas plasmática e acrossomal, estabilidade da membrana plasmática e peroxidação das membranas espermáticas (citometria de fluxo). Os tratamentos foram submetidos à análise de variância (PROC GLM), empregando-se o programa SAS (1998). Quando o principal efeito foi significativo, as médias foram comparadas pelo teste de Tukey-kramer ao nível de 5% de significância. Os resultados do presente estudo mostram que a ausência do plasma seminal foi deletéria para algumas características de motilidade, o mesmo ocorreu para a integridade das membranas plasmática e acrossomal uma vez que houve diminuição na percentagem de celulás espermáticas com membrana plasmatica integra e acrossomo integro no tratamento sem plasma seminal. A peroxidação lipídica das membranas e a manutenção da estabilidade da membrana plasmática não foram influenciadas pelo tratamento. Assim, conclui-se que a presença do plasma seminal em doses inseminantes refrigeradas por 72 h é importante para a manutenção das características de motilidade e para a integridade das membranas plasmáticas e acrossomal / The present study aimed to evaluate the effects of seminal plasma, from the rich fraction of the ejaculate, on kinetics, plasma and acrosome membrane integrity, lipid peroxidation and capacitation of extended liquid boar semen stored under refrigeration at 17° C for 72 hours. For this purpose, four ejaculates from each of six boars were used. Shortly after collection and raw semen evaluation, ejaculates were extended in BTS medium and then assigned to one of three treatments, as follows: non-washed seminal plasma (NWSP), washed-seminal plasma (WSP) centrifuged with own seminal plasma suspended (CWSSP). All treatments were evaluated for sperm motility parameters by the sperm class analyzer (SCA). Plasma and acrosome membrane integrity, lipid peroxidation and sperm capacitation were evaluated by flow cytometry at 0, 24, 48 and 72 hours post dilution. The mean percentage of sperm motility (total and progressive) were lower (p<0.05) in the WSP treatment. There was an increase (p<0.05) in the percentage of sperm with damaged acrosome and damage plasma membrane in the WSP treatment. Membrane lipid peroxidation did not differ (p>0.05) irrespective of treatment nor did sperm capacitation, which was similar (p>0.05) among treatments. Our results show that seminal plasma from the sperm rich fraction is important to maintain adequate structural and functional characteristics of extended liquid boar and should be present in seminal doses throughout the period of store

O sêmen eqüino é muito utilizado na forma refrigerada, porém, para alguns garanhões, a longevidade espermática é baixa. Durante a refrigeração o espermatozóide pode ser afetado por vários fatores, que podem causar a perda da integridade da membrana plasmática, danos no acrossomo e disfunções mitocondriais, resultando em perda irreversível de motilidade e capacidade fecundante. A composição e concentração do plasma seminal podem causar efeitos deletérios ao espermatozóide, sendo a centrifugação do sêmen uma alternativa para minimizar estes efeitos. Este experimento foi realizado para verificar o efeito da centrifugação nas características de movimento, integridade e peroxidação lipídica das membranas do espermatozóide eqüino refrigerado a 5°C por até 72h. Foram realizadas cinco colheitas de sêmen de quatro garanhões. O sêmen foi avaliado quanto ao volume e concentração, e em seguida dividido em dois tratamentos, sem centrifugação (S) e centrifugado (C) (300g/10min). Ambos foram diluídos na concentração final de 30 x106 eptz/mL em diluidor a base de leite desnatado e então refrigerados. Foram analisadas as características do movimento espermático (CASA), morfologia espermática (DIC), integridade das membranas plasmática e acrossomal (PI/FITC-PSA), potencial de membrana mitocondrial (JC-1) e peroxidação lipídica das membranas (C11-BODIPY581/591), sendo estas três últimas análises por citometria de fluxo. As análises foram realizadas no tempo 0 e 24, 48 e 72 horas após a refrigeração. O delineamento experimental foi em blocos generalizados adicionado do fator medidas repetidas no tempo. Os dados foram analisados pelo programa SAS, submetidos à análise de variância e às interações determinadas pelo teste de Greenhouse-Geisser ao nível de 5% de significância. O espermatozóide do sêmen centrifugado apresentou valores médios maiores de motilidade total e progressiva, ALH, STR e LIN (P<0,05), porém os valores das velocidades e BCF foram menores (P<0,05). Houve efeito do tempo nas características de movimento espermático (P<0,05), exceto para STR. Não houve efeito da centrifugação e nem do tempo quanto às características morfológicas dos espermatozóides refrigerados, esta só diferiu entre os garanhões (P<0,05). Por sua vez, a integridade das membranas plasmática e acrossomal e o potencial de membrana mitocondrial espermáticas foram maiores nos sêmen centrifugado (P<0,05) e suas porcentagens decresceram com o tempo (P<0,05). A peroxidação lipídica da membrana do espermatozóide refrigerado aumentou somente nas primeiras 24h (P<0,05) e não foi influenciada pela centrifugação. Conclui-se que a centrifugação e a retirada do plasma seminal melhoram a qualidade do sêmen refrigerado eqüino, principalmente em garanhões com baixa longevidade, sendo esta influenciada pelas características iniciais da morfologia espermática. Ainda, tempo de refrigeração induz a um declínio da qualidade seminal. E, por fim, a peroxidação lipídica da membrana do espermatozóide parece não ser a principal causa de alterações da integridade das membranas e do potencial de membrana mitocondrial durante a refrigeração do sêmen eqüino. / Equine cooled semen is frequently used, although the longevity for some stallions is low. During the cooling process the spermatozoon can be affected by several factors that can cause loss of plasma membrane integrity, acrosomal damage and mitochondrial dysfunctions, resulting in irreversible loss of motility and fertilizing capacity. The composition and concentration of seminal plasma could cause harmful effects to the sperm, being semen centrifugation an alternative to minimize these effects. This experiment was designed to verify the effects of the centrifugation in motion characteristics, membranes integrity and lipid peroxidation of cooled equine sperm to 5°C until 72 hours. Five ejaculates from four stallions were collected. The semen was evaluated for volume and concentration, then split in two treatments, no centrifugation (N) and with centrifugation (W) (300g/10min). Both were diluted in the final concentration 30 x106 spermatozoa/mL in a skin milk extender and then cooled. The following analyses were performed: the sperm motion characteristics (CASA), morphology (DIC), plasma and acrosomal membranes integrity (PI/FITC-PSA), mitochondrial membrane potential (JC-1) and membrane lipid peroxidation (C11-BODIPY581/591), the last three analyses were assessed in flow citometry. The analyses were performed in time 0 and 24, 48 and 72 hours after cooling. The experimental design was random blocks with repeated-measures. The data were analyzed by the SAS program, submitted to analysis of variance and the interactions by the test of Greenhouse-Geisser at the level of 5% of significance. The values were larger in W semen for total and progressive motility, ALH, STR and LIN (P<0,05), however the values of the three types of speed and BCF were smaller (P<0,05). There was effect of time in the motion characteristics of sperm (P<0,05), except for STR. There was not any effect of centrifugation and time for the morphologic characteristics of cooled spermatozoa, that only differed among stallions (P<0,05). On the other hand, the sperm integrity of plasma and acrosomal membranes and the potential of mitochondrial membrane were larger in W semen (P<0,05) and their percentages decreased within time (P<0,05). The membrane lipidic peroxidation of the cooled sperm only increased in the first 24 hours (P<0,05) and it was not influenced by centrifugation. In conclusion, the centrifugation and withdrawal of the seminal plasma improve semen quality of the cooled equine sperm, mainly in stallions with low longevity, which is influenced by the initials characteristics of sperm morphology. Moreover, time of cooling induces a decline of seminal quality. Finally, the membrane lipidic peroxidation of the cooled sperm seems not to be the main cause of alterations in the sperm integrity of plasma and acrosomal membranes and the potential of mitochondrial membrane during the cooling of equine semen.

O sêmen eqüino é muito utilizado na forma refrigerada, porém, para alguns garanhões, a longevidade espermática é baixa. Durante a refrigeração o espermatozóide pode ser afetado por vários fatores, que podem causar a perda da integridade da membrana plasmática, danos no acrossomo e disfunções mitocondriais, resultando em perda irreversível de motilidade e capacidade fecundante. A composição e concentração do plasma seminal podem causar efeitos deletérios ao espermatozóide, sendo a centrifugação do sêmen uma alternativa para minimizar estes efeitos. Este experimento foi realizado para verificar o efeito da centrifugação nas características de movimento, integridade e peroxidação lipídica das membranas do espermatozóide eqüino refrigerado a 5°C por até 72h. Foram realizadas cinco colheitas de sêmen de quatro garanhões. O sêmen foi avaliado quanto ao volume e concentração, e em seguida dividido em dois tratamentos, sem centrifugação (S) e centrifugado (C) (300g/10min). Ambos foram diluídos na concentração final de 30 x106 eptz/mL em diluidor a base de leite desnatado e então refrigerados. Foram analisadas as características do movimento espermático (CASA), morfologia espermática (DIC), integridade das membranas plasmática e acrossomal (PI/FITC-PSA), potencial de membrana mitocondrial (JC-1) e peroxidação lipídica das membranas (C11-BODIPY581/591), sendo estas três últimas análises por citometria de fluxo. As análises foram realizadas no tempo 0 e 24, 48 e 72 horas após a refrigeração. O delineamento experimental foi em blocos generalizados adicionado do fator medidas repetidas no tempo. Os dados foram analisados pelo programa SAS, submetidos à análise de variância e às interações determinadas pelo teste de Greenhouse-Geisser ao nível de 5% de significância. O espermatozóide do sêmen centrifugado apresentou valores médios maiores de motilidade total e progressiva, ALH, STR e LIN (P<0,05), porém os valores das velocidades e BCF foram menores (P<0,05). Houve efeito do tempo nas características de movimento espermático (P<0,05), exceto para STR. Não houve efeito da centrifugação e nem do tempo quanto às características morfológicas dos espermatozóides refrigerados, esta só diferiu entre os garanhões (P<0,05). Por sua vez, a integridade das membranas plasmática e acrossomal e o potencial de membrana mitocondrial espermáticas foram maiores nos sêmen centrifugado (P<0,05) e suas porcentagens decresceram com o tempo (P<0,05). A peroxidação lipídica da membrana do espermatozóide refrigerado aumentou somente nas primeiras 24h (P<0,05) e não foi influenciada pela centrifugação. Conclui-se que a centrifugação e a retirada do plasma seminal melhoram a qualidade do sêmen refrigerado eqüino, principalmente em garanhões com baixa longevidade, sendo esta influenciada pelas características iniciais da morfologia espermática. Ainda, tempo de refrigeração induz a um declínio da qualidade seminal. E, por fim, a peroxidação lipídica da membrana do espermatozóide parece não ser a principal causa de alterações da integridade das membranas e do potencial de membrana mitocondrial durante a refrigeração do sêmen eqüino. / Equine cooled semen is frequently used, although the longevity for some stallions is low. During the cooling process the spermatozoon can be affected by several factors that can cause loss of plasma membrane integrity, acrosomal damage and mitochondrial dysfunctions, resulting in irreversible loss of motility and fertilizing capacity. The composition and concentration of seminal plasma could cause harmful effects to the sperm, being semen centrifugation an alternative to minimize these effects. This experiment was designed to verify the effects of the centrifugation in motion characteristics, membranes integrity and lipid peroxidation of cooled equine sperm to 5°C until 72 hours. Five ejaculates from four stallions were collected. The semen was evaluated for volume and concentration, then split in two treatments, no centrifugation (N) and with centrifugation (W) (300g/10min). Both were diluted in the final concentration 30 x106 spermatozoa/mL in a skin milk extender and then cooled. The following analyses were performed: the sperm motion characteristics (CASA), morphology (DIC), plasma and acrosomal membranes integrity (PI/FITC-PSA), mitochondrial membrane potential (JC-1) and membrane lipid peroxidation (C11-BODIPY581/591), the last three analyses were assessed in flow citometry. The analyses were performed in time 0 and 24, 48 and 72 hours after cooling. The experimental design was random blocks with repeated-measures. The data were analyzed by the SAS program, submitted to analysis of variance and the interactions by the test of Greenhouse-Geisser at the level of 5% of significance. The values were larger in W semen for total and progressive motility, ALH, STR and LIN (P<0,05), however the values of the three types of speed and BCF were smaller (P<0,05). There was effect of time in the motion characteristics of sperm (P<0,05), except for STR. There was not any effect of centrifugation and time for the morphologic characteristics of cooled spermatozoa, that only differed among stallions (P<0,05). On the other hand, the sperm integrity of plasma and acrosomal membranes and the potential of mitochondrial membrane were larger in W semen (P<0,05) and their percentages decreased within time (P<0,05). The membrane lipidic peroxidation of the cooled sperm only increased in the first 24 hours (P<0,05) and it was not influenced by centrifugation. In conclusion, the centrifugation and withdrawal of the seminal plasma improve semen quality of the cooled equine sperm, mainly in stallions with low longevity, which is influenced by the initials characteristics of sperm morphology. Moreover, time of cooling induces a decline of seminal quality. Finally, the membrane lipidic peroxidation of the cooled sperm seems not to be the main cause of alterations in the sperm integrity of plasma and acrosomal membranes and the potential of mitochondrial membrane during the cooling of equine semen.