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Relación entre resistencia a rifampicina por pruebas rápidas de sensibilidad y tb mdr por prueba de sensibilidad convencionales, Lima-Callao, 2013

Imán Izquierdo, Fernando Jeancarlos January 2013 (has links)
Introducción: El Perú es el segundo país con mayor carga de Tuberculosis y el primero en reportar casos de tuberculosis multidrogorresistente (TB MDR) en Sudamérica. La resistencia a la rifampicina es considerada por la Organización Mundial de Salud como un marcador para tuberculosis multidrogorresistente, ya que diversos estudios han demostrado que más del 90% de cepas con resistencia a rifampicina en escenarios de alta prevalencia de TB MDR, se comportan como multidrogorresistentes. Por otra parte, la mono resistencia a rifampicina es un fenómeno poco frecuente que no ha sido estudiado ampliamente en nuestro medio. Objetivos: Determinar la proporción de casos con resistencia a rifampicina por prueba de sensibilidad rápida que resultan multidrogorresistente mediante la respectiva prueba de sensibilidad convencional. Asimismo, determinar la proporción de pacientes con mono resistencia a rifampicina y describir su distribución según condición infección por VIH y tratamiento antituberculosis previo. Diseño Se evaluó a los pacientes con tuberculosis pulmonar que cuenten con pruebas de sensibilidad rápida (MODS, GRIESS, Genotype ® MTBDRplus ) con resistencia al menos a rifampicina y cuya cepa haya sido estudiada con una prueba de sensibilidad a drogas de primera línea (proporciones en agar en placa o MGIT) que figuran en la base de datos del Registro Médico Electrónico de la Estrategia Sanitaria Nacional de Prevención y Contra de la Tuberculosis (ESN PCT), durante el año 2013 y que pertenezcan a la jurisdicción Lima y Callao. Resultados: El 93% de las pruebas con resistencia a rifampicina por prueba de sensibilidad rápida correspondió a cepas con multidrogo resistencia. Asimismo se determinó que el 5% de la muestra total eran monorresistentes a rifampicina por la prueba de sensibilidad convencional, con una proporción de pacientes con infección por VIH baja y con una mayor frecuencia en aquellos sin tratamiento antituberulosis previo. Conclusiones: El alto porcentaje de TB MDR en las cepas con resistencia a rifampicina por prueba de sensibilidad rápida y la baja proporción de mono resistencia a rifampicina permiten considerar a la resistencia a rifampicina como un marcador de TB MDR Palabras claves: Tuberculosis resistente a múltiples medicamentos, rifampicina, pruebas de sensibilidad microbiana, resistencia a medicamentos. / *** Background: Peru is the second country with more burden TB disease and the first in reporting cases with MDR TB in South America. Rifampicin resistant is recommended by WHO as a proxy of MDR TB, because several studies have demonstrated that a high proportion of rifampicin resistant strains are multidrug-resistant. On the other hand, rifampicin mono-resistance is uncommon, which have not studied broadly in our country Objectives: We determine the proportion of rifampicin resistant tests that are MDR. Furthermore, we determine the proportion of rifampicin mono-resistance and describe the frequency of HIV infection and previous tuberculosis treatment in patients with mono-resistance tests. Design: We evaluated pulmonary TB patients with rapid DST with rifampicin resistant (mono-resistance and MDR) with their respective first line drug susceptibility testing (proportion method or MGIT) which data belong to Electronic Medical Register (EMR) of ESN PCT of time period 2013 and Lima and Callao region. Results: 93% of rifampicin resistance tests were multidrug-resistant. Besides, we found that 5% of total tests were rifampicin mono-resistant. Patient with rifampicin mono-resistance had low proportion of HIV infection and previous TB treatment in our country. Conclusions: Rifampicin resistant is a marker of TB MDR in our country because the high proportion of rifampicin resistant strains that are MDR and low proportion of rifampicin mono-resistance. Keywords: Tuberculosis Multidrug Resistant, rifampicin, microbial sensitivity test, drug resistance.
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Influencia de la depresion´sobre la adherencia al tratamiento en pacientes TB-MDR de la Red Almenara de Essalud - Lima , Año 2015

Morales Miranda, Helen Elizabeth January 2015 (has links)
INTRODUCCIÓN: Se efectuó un estudio sobre la depresión y su asociación con la adherencia al tratamiento de fármacos antituberculosos en pacientes con Tuberculosis Multidrogorresistente (TB-MDR) que asisten al Programa de Control de Tuberculosis (PCT) de la Red Asistencial Almenara de EsSalud- Lima. OBJETIVO: Determinar si la depresión influye en la adherencia al tratamiento en los pacientes multidrogorresistentes (TB-MDR) de la Red Asistencial Almenara en EsSalud- Lima, año 2015. PACIENTES Y MÉTODOS: El presente estudio analítico transversal prospectivo se desarrolló con una población de 81 pacientes con TB-MDR. Para la medición del nivel de depresión se utilizó el Test de depresión de Zung; mientras que para la medición de la adherencia al tratamiento antituberculoso se utilizó el Test de Morisky- Green y la revisión de las Fichas de control de tratamiento antituberculoso de cada paciente. El análisis de los resultados se realizó mediante la Prueba de la Exacta de Fisher para lo cual se consideró un intervalo de confianza de 95% (p<0.05). RESULTADOS: Los pacientes que no presentan depresión tienen el 82.14% de adherencia al tratamiento, además los que presentan depresión leve tienen 76.67% de adherencia al tratamiento. Mientras que los pacientes con depresión moderada presentan 17.65%.Es decir, se encuentra una asociación estadísticamente significativa entre la Depresión y la adherencia al tratamiento (p<0.05) CONCLUSIONES: Según los resultados del el estudio la depresión se asocia a la mala adherencia al tratamiento antituberculoso en los pacientes con tuberculosis multidrogorresistente (TB-MDR).
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Avaliação da influência da tensão residual na instabilidade de cascos resistentes de submarinos / Residual stress assessment in submarine pressure hull instability

Franquetto, Paulo Rogério 16 September 2015 (has links)
Na construção de cascos resistentes de submarinos são utilizados, frequentemente, os processos de conformação a frio e de soldagem. Estes processos produzem na estrutura deformações plásticas permanentes originando tensões residuais. A presença das tensões residuais é equivalente a introduzir uma pré-carga inicial na estrutura, o que acelera o processo de plastificação, reduzindo à capacidade de resistência da estrutura à pressão hidrostática. Para quantificar esta redução foi realizado, inicialmente, um estudo considerando a presença das tensões residuais devido à conformação a frio das chapas do casco e do flange das cavernas, para submarinos com 6, 8 e 10 m de diâmetro, em aço HY100. Para isso, um modelo não-linear foi produzido considerando não-linearidades geométricas e de material. Complementarmente, também foi estudada a influência de perfis de tensões residuais definidos a partir de resultados experimentais na redução da pressão de colapso do casco resistente do submarino espanhol S-80. Estes perfis consideram a presença simultânea de tensões residuais de conformação e de soldagem. Em todos os modelos estudados, as tensões residuais foram introduzidas no modelo numérico utilizando o comando INISTATE disponível no software comercial Ansys. Este comando é frequentemente utilizado na literatura em modelos numéricos envolvendo tensões residuais e foi validado utilizando três modelos de referência disponíveis na literatura. Ao final, pôde-se verificar que a presença das tensões residuais acelera a plastificação do casco resistente e reduz a pressão de colapso em até 5%, sendo a tensão residual de conformação a que mais contribuí nesta redução. De qualquer forma, pôde-se concluir que a influência das tensões residuais é pequena quando comparada com a pressão de colapso obtida para cada casco resistente analisado. / During the manufacturing of submarine pressure hull are often applied processes like cold forming and welding. Those processes lead to permanent plastic deformations which are associated with residual stresses. The presence of residual stresses is equivalent to the introduction of an initial pre-load in the structure, which accelerates the plastification process, decreasing hull pressure resistance. To quantify this reduction, a case study that considers residual stresses due to cold forming on hull and flange plates has been performed. The study encompasses hull diameters of 6, 8 and 10 m, made of HY100 steel. A nonlinear model has been done, considering material and geometric non-linearity. Complementarily, the influence of experimental residual stresses profiles on the reduction of collapse pressure of the Spanish S-80 submarine has been studied. These profiles consider the simultaneous presence of residual stresses due to cold forming and welding. In all studied models, the residual stresses have been introduced in the numerical models through INISTATE Ansys software command. This command has been validated using three reference models available in open source literature. In the end, it has been possible to verify that the presence of residual stresses increase the hull plastification and reduces the collapse pressure up to 5%, being the cold forming induced stress which most contributes to this reduction. Finally, it could be concluded, in the end of the study, that the influence of the residual stresses is small when compared with the collapse pressure obtained for the analyzed pressure hulls.
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Vulnerabilidade e resiliência familiar na visão de adolescentes maltratadas

De Antoni, Clarissa January 2000 (has links)
Este trabalho possibilitou conhecer a visão de adolescentes que sofreram maus tratos na família sobre os construtos vulnerabilidade e resiliência familiar, através do conceito de família, da identificação de indicadores de risco e de proteção intra e extrafamiliar e das suas expectativas de futuro. O método utilizado para coleta de dados foi o Grupo Focal. Foram realizados dois grupos com seis participantes cada, formados por adolescentes do sexo feminino com 12 a 17 anos abrigadas em uma instituição pública. Os dados foram interpretados pela Análise de Conteúdo. Cada grupo foi compreendido como um contexto ecológico diferente e, portanto, analisado e discutido separadamente. Conclui-se que há idealização do microssistema familiar e o predomínio e a severidade dos indicadores de risco sobre os de proteção, o que revela a vulnerabilidade dessas famílias frente aos eventos de vida e/ou causadores de stress. Em contrapartida, as expectativas de futuro dessas adolescentes e os momentos de insight promovidos pelo grupo apontam para a resiliência individual de algumas delas.
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Aspectos epidemiológicos e de resistência à Ralstonia solanacearum na cultura da batata no Rio Grande do Sul

Silveira, José Ricardo Pfeifer January 2002 (has links)
Plantas de batata (Solanum tuberosum L.) com sintomas de murcha bacteriana (MB) foram coletadas em 25 lavouras de 10 municípios de quatro regiões produtoras do Rio Grande do Sul (RS), de setembro a dezembro de 1999. Quatrocentos e noventa isolados de Ralstonia solanacearum foram obtidos e 96 e 4% identificados como biovares 1 e 2, respectivamente. A análise dos resultados da PCR-ERIC e BOX de 13 estirpes da biovar 1 e 72 da biovar 2 demonstrou baixa variabilidade genética. Através de RAPD foi possível associar local de origem do isolado com perfil eletroforético. Em outro experimento avaliou-se o comportamento de 14 cultivares e clones de batata cultivados nos períodos das safras de primavera de 1999 e 2000, em uma área naturalmente infestada com a biovar 2, em Caxias do Sul, RS. O número de plantas com sintomas foi registrado semanalmente. Os tubérculos produzidos por plantas assintomáticas foram coletados e submetidos a testes para detectar a presença de R. solanacearum. A área sob a curva de progresso da doença foi utilizada para comparar a resistência dos genótipos de batata à MB e o modelo logístico foi o que melhor se ajustou. A cultivar cruza 148 e o clone MB 03 mostraram-se como os mais resistentes, apresentando, no entanto, tubérculos com infecções latentes. As implicações da incidência de R. solanacearum em lavouras de batata e de sua variabilidade genética, assim como da resistência dos genótipos acompanhada de infecções latentes, no manejo integrado da MB no RS foram discutidas.
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Avaliação da influência da tensão residual na instabilidade de cascos resistentes de submarinos / Residual stress assessment in submarine pressure hull instability

Paulo Rogério Franquetto 16 September 2015 (has links)
Na construção de cascos resistentes de submarinos são utilizados, frequentemente, os processos de conformação a frio e de soldagem. Estes processos produzem na estrutura deformações plásticas permanentes originando tensões residuais. A presença das tensões residuais é equivalente a introduzir uma pré-carga inicial na estrutura, o que acelera o processo de plastificação, reduzindo à capacidade de resistência da estrutura à pressão hidrostática. Para quantificar esta redução foi realizado, inicialmente, um estudo considerando a presença das tensões residuais devido à conformação a frio das chapas do casco e do flange das cavernas, para submarinos com 6, 8 e 10 m de diâmetro, em aço HY100. Para isso, um modelo não-linear foi produzido considerando não-linearidades geométricas e de material. Complementarmente, também foi estudada a influência de perfis de tensões residuais definidos a partir de resultados experimentais na redução da pressão de colapso do casco resistente do submarino espanhol S-80. Estes perfis consideram a presença simultânea de tensões residuais de conformação e de soldagem. Em todos os modelos estudados, as tensões residuais foram introduzidas no modelo numérico utilizando o comando INISTATE disponível no software comercial Ansys. Este comando é frequentemente utilizado na literatura em modelos numéricos envolvendo tensões residuais e foi validado utilizando três modelos de referência disponíveis na literatura. Ao final, pôde-se verificar que a presença das tensões residuais acelera a plastificação do casco resistente e reduz a pressão de colapso em até 5%, sendo a tensão residual de conformação a que mais contribuí nesta redução. De qualquer forma, pôde-se concluir que a influência das tensões residuais é pequena quando comparada com a pressão de colapso obtida para cada casco resistente analisado. / During the manufacturing of submarine pressure hull are often applied processes like cold forming and welding. Those processes lead to permanent plastic deformations which are associated with residual stresses. The presence of residual stresses is equivalent to the introduction of an initial pre-load in the structure, which accelerates the plastification process, decreasing hull pressure resistance. To quantify this reduction, a case study that considers residual stresses due to cold forming on hull and flange plates has been performed. The study encompasses hull diameters of 6, 8 and 10 m, made of HY100 steel. A nonlinear model has been done, considering material and geometric non-linearity. Complementarily, the influence of experimental residual stresses profiles on the reduction of collapse pressure of the Spanish S-80 submarine has been studied. These profiles consider the simultaneous presence of residual stresses due to cold forming and welding. In all studied models, the residual stresses have been introduced in the numerical models through INISTATE Ansys software command. This command has been validated using three reference models available in open source literature. In the end, it has been possible to verify that the presence of residual stresses increase the hull plastification and reduces the collapse pressure up to 5%, being the cold forming induced stress which most contributes to this reduction. Finally, it could be concluded, in the end of the study, that the influence of the residual stresses is small when compared with the collapse pressure obtained for the analyzed pressure hulls.
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Evolución de un brote epidémico por Staphylococcus Aureus resistente a la meticilina (SARM)

Sopena Galindo, Nieves 06 June 2001 (has links)
SARM se ha convertido en un patógeno nosocomial mundial en las últimas dos décadas. Desde diciembre de 1990 se ha producido en el Hospital Universitario Germans Trias i Pujol (HUGTiP) de Badalona una situación endemico-epidémica de infección por SARM. El objetivo de esta tesis doctoral es estudiar la epidemiología descriptiva, fenotípica y molecular del SARM en el HUGTiP, y analizar el impacto de las medidas de control adoptadas sobre la evolución del brote. Material y métodos: Entre diciembre de 1990 (inicio del brote) y diciembre de 1996 se registraron 462 casos de SARM en el HUGTiP, de los que se obtuvieron 119 cepas para posterior estudio fenotípico (antibiograma) y molecular (electroforesis en campo pulsante). Resultados y Conclusiones: El brote de SARM en el HUGTiP se originó en la UCI, desde donde se diseminó ampliamente al resto del hospital. La mayoría de los pacientes adquirieron el SARM en la UCI (58,1%) y en resto en las áreas de hospitalización general (AHG) (42,8%), mientras que sólo 11 casos se originaron en la comunidad (8) o en otro hospital (3). Los casos originados en las AHG se distribuyeron ampliamente en los distintos servicios médicos y quirúrgicos del hospital, mientras que el hospital materno infantil permaneció prácticamente libre de SARM. Las características de los pacientes con SARM no difieren de las de otros brotes. Doscientos dieciséis pacientes (46,7%) presentaron alguna infección por SARM, 248 (53,7%) eran portadores nasales y 169 (36,6%) estuvieron colonizados. Las infecciones más frecuentes fueron la herida quirúrgica (38,4%), la bacteriemia (19,4%) y la neumonía (13,4%). La mortalidad de las infecciones por SARM fue de 7,9% y de la bacteriemia del 19,4%. El estudio fenotípico demostró dos antibiotipos: el primero presente desde el principio del brote (resistente a los aminoglucósidos) fue sustituido progresivamente a partir de 1996 por otro sensible a los aminoglucósidos. La disminución en el consumo de aminoglucósidos en este período, podría haber favorecido la aparición de cepas sensibles a estos. El estudio molecular de las cepas de SARM demostró que el brote estuvo causado por un clon predominante, que sufrió pocas variaciones con el tiempo y tendió a ser sustituido por un segundo clon. Asimismo, existió una clara correlación entre los dos antibiotipos y los dos clones predominantes. Las medidas de control adoptadas han conseguido disminuir la incidencia de SARM en nuestro hospital, hasta una situación de endemia. / In the last two decades, MRSA has become a nosocomial pathogen around the word. Since December 1990 there has been an epidemic-endemic situation of infection by MRSA, in the University Hospital Germans Trias i Pujol (HUGTiP), The aim of this doctoral thesis was to study the descriptive, phenotypic and molecular epidemiology of MRSA in the HUGTiP, and to analyze the impact of control measures in the evolution of the outbreak. Material and methods: From December 1990 (beginning of the outbreak) to December 1996, 462 cases of MRSA were registered in the HUGTiP. We also obtained 119 strains for phenotypic (antibiotic sensitivity) and molecular (pulsed field gel electrophoresis) studies. Results and Conclusions: The outbreak of SARM in the HUGTiP began in the Intensive Care Unit (ICU), and disseminated extensively in the hospital. Most of the patients were infected in ICU (58.1%) and in general hospitalization wards (42.8%), while only 11 cases originated in the community (8) or another hospital (3). MRSA was distributed extensively in most of the medical and surgical departments, while obstetric and pediatric wards remained practically free of MRSA.The characteristics of the patients were similar to those observed in others outbreaks. Two hundred and sixteen patients (64.7%) had infection by MRSA, 248 (53.7%) were nasal carriers and 169 (36.6%) were colonized. The most frequent Infections seen were surgical wound (38.4%), bacteremia (19.4%) and pneumonia (13.4%). The mortality related to infections was 7.9% and to bacteremia was 19.4%. The phenotypic study showed two antibiotypes: the first was present from the beginning of the outbreak (resistant to aminoglucosides) and was progressively substituted in 1996 by other clone sensitive to aminoglucosides. The reduction in the use of aminoglucosides in this period could have favored the appearance of resistant strains. The molecular study of MRSA strains showed that outbreak was caused by a predominant clone with few variations over time, which was progressively substituted by a second clone. On the other hand, we observed a correlation between the two antibiotypes and the two clones. Control measures have diminished the incidence of MRSA in our hospital up to the present endemic situation.
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Epidemiologia molecular e estudo dos fatores de virulência de Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina isolados de feridas em pacientes atendidos em unidades básicas de saúde da cidade de Botucatu

Franchi, Eliane Patricia Lino Pereira January 2016 (has links)
Orientador: Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Resumo: Diante da importância de S. aureus resistente à meticilina (Methicillin-resistant Staphylococcus aureus - MRSA) em feridas, este estudo objetivou estudar a prevalência, fatores de risco e epidemiologia molecular de S. aureus coletados de feridas e narinas de pacientes atendidos nas 17 Unidades Básicas de Saúde do município de Botucatu-SP, Brasil. Após a identificação dos isolados de S. aureus, foram realizados: teste de susceptibilidade à 13 drogas antimicrobianas, identificação do gene de resistência (mecA) e dos genes codificadores da Leucocidina PantonValentine- PVL (pvl), enterotoxinas A-E (sea, seb, sec, sed, e see), hemolisinas α, β e δ (hla, hlb e hld), esfoliatinas A, B e D (eta, etb e etd), biofilme (icaAD) e Toxina-1 da Sindrome do choque tóxico - TSST-1 (tst); tipagem molecular por Pulsed-Field Gel Eletroforese (PFGE), Multilocus sequence typing (MLST) e spa typing. Foram incluídos 171 pacientes, dos quais foram isolados 119 S. aureus. Amostras nasais foram coletadas apenas em 74 pacientes do total estudado. A prevalência de S. aureus e MRSA foi de 51,5% e 8,7%, respectivamente. No geral foram isolados 101 MSSA de 73 pacientes, destes 98 foram isolados de feridas e 21 de narinas; e 18 MRSA de 15 pacientes, sendo 4 isolados de narinas e 14 de feridas, com 6 MRSA com SCCmec tipo II e 12 com SCCmec tipo IV. Os isolados mostraram alto nível de resistencia a penicilina (85%), seguido pela eritromicina (27%), gentamicina (12%), clindamicina (11%), e levofloxacina (6%). N... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Given the importance of methicillin resistant S. aureus (Methicillin-resistant Staphylococcus aureus - MRSA) and wounds, this study aimed to study the prevalence, risk factors and molecular epidemiology related to the presence of S. aureus sensitive and resistant to methicillin in wounds of patients who attended BHUs in a city in Sao Paulo state, Brazil. After the identification of S. aureus isolates was performed: susceptibility testing to 13 antimicrobial drugs, identification of the resistance gene (mecA) and the genes encoding Panton-Valentine Leukocidin - PVL (pvl), enterotoxins AE (sea, seb, sec, sed and see) hemolysins α, β and δ (hla, hlb and hld), esfoliatinas A, B and D (eta, etb and etd), biofilm (icaAD) and Toxin-1 syndrome of toxic shock - TSST-1 (tst); Molecular typing by Pulsed-Field gel electrophoresis (PFGE), multilocus sequence typing (MLST) and spa typing. 171 patients were included and 119 S. aureus isolates. Nasal samples were collected only in 74 patients of the total sample. The prevalence of S. aureus and MRSA was 51.5% and 8.7%, respectively. Overall 101 MSSA were isolated from 73 patients, 98 of these were isolated from wounds and 21 nostrils; MRSA and 18 of 15 patients, 4 isolates from nostrils and 14 wounds, with six MRSA with SCCmec type II and 12 SCCmec type IV. The strains showed high-level resistance to penicillin (85%) followed by erythromycin (27%), gentamicin (12%), clindamycin (11%) and levofloxacin (6%). There was no resistance to sulfame... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Identificação de genes envolvidos na interação entre Magnaporthe grisea e arroz (Oryza sativa L.)

Lamb, Caren Regina Cavichioli January 2006 (has links)
A brusone, causada pelo fungo Magnaporthe grisea (Hebert) Barr, é uma das mais importantes doenças da cultura do arroz. A resistência genética é a forma mais efetiva para o controle da doença. Os objetivos do presente trabalho foram: identificar genes envolvidos na resposta de resistência à infecção de M. grisea em arroz através das técnicas de expressão diferencial; obter e caracterizar uma biblioteca de cDNAs utilizando como modelo linhas quase-isogênicas de arroz (NILs = Near Isogenic Lines), contendo os genes de resistência Pi-1 e Pi-2; e avaliar e comparar a expressão diferencial de mRNAs, através dos cDNAs isolados em uma série de cultivares com resposta distinta à infecção de M. grisea. Foram identificados dois isolados com virulência diferencial para as NILs e um isolado para os cultivares. Os cDNAs relacionados à resistência do arroz à M. grisea foram identificados a partir de mRNAs isolados das NILs. Foram obtidos 30 fragmentos de cDNAs e 232 clones de cDNAs pelas técnicas de cDNA-AFLP e SSH, respectivamente. A análise das seqüências permitiu identificar genes envolvidos nos processos de metabolismo, transporte de íon inorgânico; transdução de sinais; fatores de transcrição; metabolismo de coenzima; conversão e produção de energia; metabolismo e transporte de carboidrato e biossíntese de proteína. Noventa clones isolados através da técnica de SSH foram selecionados e a expressão diferencial foi avaliada via hibridização em macroarranjos de cDNAs. A ausência de conservação entre os mRNAs diferencialmente expressos nas interações analisadas e a diversidade dos grupos de genes reflete a complexidade das respostas. A análise funcional in vivo desses genes poderá contribuir para utilização dos mesmos na obtenção de uma resistência de espectro amplo à brusone do arroz.
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Caracterização da mutagênese por inserção do retrotransposon Tos17 em genótipos de arroz

Ferreira, Flavia Vanina January 2006 (has links)
O aumento do potencial produtivo da cultura de arroz via melhoramento genético está principalmente relacionado ao rendimento, a qualidade de grãos e a obtenção de plantas resistentes a doenças e pragas. Neste caso, deve ser explorada a variabilidade genética natural ou induzida através de agentes mutagênicos físicos, químicos ou biológicos. A vantagem do uso de mutagênicos biológicos, como os transposons e os retrotransposons, é que ao serem inseridos podem interrompem um gene causando uma mutação. Esta retrotransposição deixa uma marca que possibilita a identificação molecular do local de inserção. No presente trabalho, foi utilizada a estratégia de mutagênese insercional através de eventos de transposição do retrotransposon Tos17, induzido por cultura in vitro. A análise de diferentes genótipos de arroz é muito importante para avaliar se a transposição ocorre de forma similar em genótipos distintos. Foram avaliados calos embriogênicos de cultivares que têm um histórico de variabilidade genética em homozigose, linhagens obtidas através de cruzamentos com espécies silvestres e ecótipos de arroz vermelho, submetidos a 6 meses de cultura in vitro. O método escolhido para avaliar o número de cópias de Tos17 em calos embriogênicos foi a quantificação relativa por PCR em tempo real. A identificação dos genes mutados pela inserção do retrotransposon foi feita através do isolamento e amplificação das seqüências que flanqueiam os insertos de Tos17. O resultado deste experimento indica um aumento no número de cópias de Tos17 em 8 dos 21 genótipos avaliados. O seqüenciamento dos fragmentos de DNA que flanqueiam os insertos do retrotransposon Tos17, indicaram alta similaridade com seqüências genômicas não codificantes de arroz. / The increase of the rice crop potential through genetic improvement is related mainly to the yield, grain quality, and plant disease and insect resistance. In this case, natural genetic variability should be exploited or induced through physical, chemical, or biological mutagens. The advantage of using biological mutagens, like transposons and retrotransposons, is that their insertion interrupts a gene causing a mutation. This retrotransposition provides a tag that enables the molecular identification of the insertion site. In the present work, it was used the strategy of insertional mutations through events of transposition of the retrotransposon Tos17. The analysis of different genotypes of rice is very important to evaluate whether the transposition occurs in a similar fashion among them. Cultivars that have a history of genetic variability in homozygosity, breeding lines derived from crossings with wild species, and ecotypes of red rice were evaluated. Embriogenic callus of all those genotypes were submitted to 6 months of tissue culture. The method chosen to evaluate the number of copies of Tos17 from embryogenic callus was the relative quantification by real time PCR. The identification of the mutated genes by the insertion of retrotransposon was performed by the isolation and amplification of flanking sequences of Tos17 insertions The results of this experiment indicate an increase in the number of copies of Tos17 in 8 out of 21 genotypes. Sequencing DNA fragments flanking the retrotransposon Tos17 insertions indicates high similarity with genomic no coding sequences of rice.

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