Com os sistemas adesivos autocondicionantes, o uso prévio do ácido fosfórico passou a ser dispensado em dentina. Assim, outras soluções foram propostas a fim de se promover uma limpeza da cavidade e otimizar um melhor embricamento do adesivo ao substrato. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de soluções químicas à adesão à dentina bovina, por meio da resistência ao microcisalhamento, de três sistemas adesivos autocondicionantes em função do tempo. Duzentos e quarenta incisivos bovinos foram incluídos, desgastados e polidos em série com lixas de carbeto de silício, obtendo uma superfície planificada de dentina de 10 mm de diâmetro. Os espécimes foram divididos aleatoriamente em 4 grupos, de acordo com a solução aplicada: SF- aplicação de soro fisiológico com 0,9% NaCl (grupo controle); HS- desproteinização com hipoclorito de sódio a 5%, por 2 minuto e HSAA- hipoclorito de sódio a 5%, por 2 minuto seguida da aplicação de ácido ascórbico (ascorbato) a 10%, por 1 minuto; CHX- aplicação de solução clorexidina a (2% por 1 minuto). Às superfícies preparadas foram aplicados três sistemas adesivos autocondicionantes, por grupo - Optibond All-in-One (KERR), Filtek P90-System Adhesive (3M-ESPE) e Adper SE (3M-ESPE), todas seguidas da inserção de resina composta (Filtek Z250 ou Filtek P90). Metade dos espécimes de cada grupo foram armazenados por 24 horas e metade por 6 meses. Após esses períodos, os espécimes foram submetidos ao teste de microcisalhamento, em uma máquina de ensaios universal (Emic, na velocidade de 0,5mm/min). Os dados foram avaliados estatisticamente através de análise de variância (ANOVA) a três critérios e testes de comparações múltiplas de Tukey ambos considerando a=0,05. O adesivo Filtek P90-System Adhesive foi o único que manteve a resistência adesiva após o envelhecimento, porém, os dois tratamentos de superfície contendo hipoclorito de sódio influenciaram negativamente. Já com a clorexidina não houve diferença estatisticamente significante comparada ao grupo controle. O adesivo OptiBond All- In-One (Kerr) foi influenciado positivamente pelo hipoclorito de sódio e hipoclorito de sódio mais ascorbato, no tempo de 24 horas. Sendo de iqual resultado com o envelhecimento em solução aquosa. Adper SE (3M-ESPE) sofreu influência dos tratamentos à base de hipoclorito de sódio. O melhor resultado, comparando dois tratamentos com hipoclorito, após o envelhecimento, foi obtido pelo tratamento com o hipoclorito de sódio mais ascorbato sendo estatisticamente idêntico ao grupo controle. Foi concluído que os tratamentos de superficie influenciam na resistência adesiva dos adesivos testados. A clorexidina possibilitou os melhores resultados em quase todos os testes. / With the Self-etching adhesives, acid-etching with phosphoric acid has to be dispensed in dentin. Than, other solutions have been proposed in order to promote the cavity cleaner and improvement in bonding effectiveness. The aim of this study was to investigate the microshear bond strength, with the influence of chemical solutions and time, in three adhesive systems used on bovine dentin. Two hundred and forty bovine incisors were included, and the surface was polished in series with silicon carbide paper, getting flattened dentin surface of 10 mm in diameter. The specimens were randomly divided into four groups, according to the applied solution: SF- saline solution with 0.9% NaCl (control group), HS-deproteinization with sodium hypochlorite at 5%, for 2 minutes and HSAA- sodium hypochlorite 5% for 2 minutes followed by the application of ascorbic acid (ascorbate) and 10% for 1 minute;CHXapplication of chlorhexidine solution (2% for 1 minute). Were applied to surfaces prepared three adhesive systems, per group - Optibond All-in-One (Kerr), Filtek-P90 System Adhesive (3M-ESPE) and Adper SE (3M-ESPE), all followed by the insertion of composite resin ( Filtek Z250 and Filtek P90). Half of the specimens of each group / treatment were stored for 24 hours and half for six months. After these periods were tested using the microshear in a universal testing machine (Emic, the speed of 0.5 mm / min). Results were submitted to three way ANOVA and TUKEY test multiple comparison both considering a = 0.05. The adhesive Filtek P90 System Adhesive was the one who kept the bond strength after aging, however, the two surface treatments containing sodium hypochlorite influenced negatively. With chlorhexidine, there was no statistically significant difference compared to the control group. The adhesive OptiBond All-in-One (Kerr) was affected by the sodium hypochlorite, sodium hypochlorite more ascorbate, at 24 hours. As a result of iqual with aging in aqueous solution. Adper SE (3M-ESPE) was influenced by the treatments using sodium hypochlorite. The best result, comparing two treatments with hypochlorite, after aging, was obtained by treatment with sodium hypochlorite more ascorbate was statistically identical to the control group. It was concluded that the influence of surface treatments on bond strength of adhesives tested. The chlorhexidine resulted in better results in almost every test.

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Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Resumo: Introdução: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de diferentes protocolos de Irrigação Ultrassônica Passiva (PUI) por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Métodos: Seis cavidades foram confeccionadas ao longo da seção vestibular de 20 canais radiculares de pré-molares inferiores humanos e preenchidas com detritos. 10 grupos foram criados de acordo com o protocolo final de irrigação: Grupo 1- controle positivo (sem detritos); Grupo 2- controle negativo (com detritos); Grupo 3 - irrigação convencional com hipoclorito de sódio a 2,5% (NaOCl); Grupo 4 - irrigação convencional com 17% de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) seguido de NaOCl; Grupo 5- PUI com 3 ciclos de 20 segundos (NaOCl-NaOCl-NaOCl); Grupo 6- PUI com 3 ciclos de 20 segundos (NaOCl-EDTA-NaOCl); Grupo 7- PUI com um ciclo de 60 segundos (NaOCl); Grupo 8 - PUI com ciclo de 180 segundos (NaOCl); Grupo 9 - PUI com 2 ciclos de 60 segundos (EDTA-NaOCl); Grupo 10 - PUI com 2 ciclos de 60 segundos (NaOCl-EDTA). Os espécimes foram observados em MEV para a análise da remoção dos detritos (scores 1 a 5) e exposição dos túbulos dentinários (score 1 ou 2) dentro das cavidades. O teste de Kruskal-Wallis foi realizado para a análise estatística, com significância de 5%. Resultados: Os grupos PUI apresentaram melhores resultados na limpeza de detritos do que os grupos de irrigação convencionais nas cavidades 1, 2 e 3. As cavidades 4, 5 e 6 foram limpas em todos os grupos experimentais. Em relação à expos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Abstract: Introduction: The aim of this study was to evaluate the effectiveness of different Passive Ultrasonic Irrigation (PUI) protocols by means of scanning electron microscopy. Methods: Six hemispherical cavities were made along the buccal section of 20 root canals of human lower premolars and filled with debris. 10 groups was created according to the final irrigation protocol: Group 1-positive control(no debris); Group 2-negative control(with debris); Group 3-conventional irrigation with 2.5% sodium hypochlorite (NaOCl); Group 4-conventional irrigation with 17% ethylenediamine tetracetic acid (EDTA) followed by NaOCl; Group 5-PUI with 3 cycles of 20 seconds (NaOCl-NaOCl-NaOCl); Group 6-PUI with 3 cycles of 20 seconds (NaOCl-EDTA-NaOCl); Group 7-PUI with a 60 seconds cycle (NaOCl); Group 8-PUI with a 180 seconds cycle (NaOCl); Group 9-PUI with 2 cycles of 60 seconds (EDTA-NaOCl); Group 10-PUI with 2 cycles of 60 seconds (NaOCl-EDTA).Scores were given for the analysis of debris removal in SEM, as well as for the exposure of dentinal tubules within the cavities. Kruskal-Wallis test was performed for statistical analysis.Results: The PUI groups presented better results in cleaning of debris than the conventional irrigation groups in cavities 1, 2 and 3. Cavities 4, 5 and 6 were well cleansed in all experimental groups. Regarding the exposure of the dentinal tubules, the PUI groups were able to achieve a better result than the conventional irrigation groups.Conclusions: Passi... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Rogério Lopes Vieites / Banca: Angela Vacaro de Souza / Banca: Pricila Veiga dos Santos / Banca: Regina Marta Evangelista / Banca: Renata Saad Diniz de Castro / Resumo: A couve-folha ocupa 5,6 % da área de produção de hortaliças no Brasil, sendo a cultivar 'Manteiga' a que possui maior aceitabilidade de mercado. Em função da mudança do estilo de vida da população brasileira está mais frequente a procura por uma alimentação mais saudável, onde as frutas e hortaliças estão se sobressaindo nas vendas. Como alternativa o consumidor tem optado por produtos minimamente processados, que estão ganhando mercado devido a sua praticidade. A higienização é uma etapa de extrema importância no processamento mínimo, onde geralmente é utilizada solução clorada, mas a grande preocupação está sendo com os resíduos deixados pelo cloro. Devido a esses resíduos, outros agentes higienizantes estão sendo propostos em substituição ao cloro, como é o caso do ácido acético, ácido peracético, compostos quaternários de amônio e as biguanidas. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes concentrações de higienizantes à base de biguanidas (comercialmente, o Frexus DC®) e oxicloreto de cálcio (comercialmente o Frexus CH®). O trabalho foi conduzido em duas etapas, no primeiro experimento a couve foi higienizada de acordo com os seguintes tratamentos: T1 (água); T2 (0,1 mL L-1 Higienizante 1), T3 (0,2 mL L-1 Higienizante 1), T4 (0,3 mL L-1 Higienizante 1), T5 (0,4 mL L-1 Higienizante 1), por 15 minutos, seguidas por enxágue em água corrente, e cortadas mecanicamente. Após o corte passaram por uma segunda higienização com o Higienizante 1 e enxágue, centrifu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cauliflower occupies 5.6% of the vegetable production area in Brazil, being the cultivar "Butter" the one with the highest market acceptability. Due to the changing lifestyle of the Brazilian population, the search for a healthier diet is more frequent, where fruits and vegetables are excelling in sales. Alternatively the consumer has opted for minimally processed products, which are gaining market due to their practicality. Hygienization is an extremely important step in minimal processing, where chlorinated solution is generally used, but the major concern is with the residues left by chlorine. Due to these residues, other sanitizing agents are being proposed in place of chlorine, such as acetic acid, peracetic acid, quaternary ammonium compounds and biguanides. Thus, the objective of this work was to evaluate different concentrations of biguanide-based sanitizers (commercially Frexus DC®) and calcium oxychloride (commercially Frexus CH®). The work was conducted in two stages, in the first experiment the cabbage was sanitized according to the following treatments: T1 (water); T2 (0.1 mL L-1 Sanitizer 1), T3 (0.2 mL L-1 Sanitizer 1), T4 (0.3 mL L-1 Sanitizer 1), T5 (0.4 mL L-1 Sanitizer 1) for 15 minutes, followed by rinsing under running water, and mechanically cut. After cutting, they underwent a second sanitization with Sanitizer 1 and rinse, centrifugation for 5 minutes and packaging in expanded polystyrene trays with polyvinyl chloride (PVC) film (± 180 g each tray) and refrigerated in cold room (5 ± 1 ° C and 85 ± 5 % relative humidity). In the second experiment the cabbage was sanitized according to the following treatments: T1 (water); T2 (15 g L-1 Sanitizer 2), T3 (30 g L-1 Sanitizer 2), T4 (60 g L-1 Sanitizer 2), T5 (90 g L-1 Sanitizer 2) for 15 minutes, followed by rinse under running water, and cut into semi-industrial processor. After cutting, they underwent a second cleaning and ... / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-22T17:33:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 226738.pdf: 7998368 bytes, checksum: 9628cbe288784e31e6db5413f4e49dc0 (MD5) / O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar a influência da oclusão tubular e da desproteinização dentinária na adesão entre dentina e resina composta. As metodologias utilizadas foram: análise em microscopia eletrônica de varredura (MEV) das superfícies dentinárias tratadas, antes da aplicação do sistema adesivo; teste de resistência de união à microtração; análise em MEV das interfaces resina-dentina formadas; teste de microinfiltração marginal. Conclui-se que a técnica da oclusão tubular não afeta a resistência de união, nem a microinfiltração quando comparada ao protocolo tradicional. A desproteinização, quando não associada à oclusão tubular, pode aumentar a resistência de união e reduzir a microinfiltração.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-09-04T23:14:49Z No. of bitstreams: 1 EXPEDITO KENNEDY ALVES CAMBOIM - TESE PPGMV 2012..pdf: 1710872 bytes, checksum: c527311a481ea2baaf5080340bd08c0c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-04T23:14:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EXPEDITO KENNEDY ALVES CAMBOIM - TESE PPGMV 2012..pdf: 1710872 bytes, checksum: c527311a481ea2baaf5080340bd08c0c (MD5) Previous issue date: 2012-11-09 / O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar bactérias capazes de degradar fluoroacetato de sódio (FS) em amostras de solo e plantas, coletadas em áreas onde são encontradas plantas que contêm fluoroacetato tais como Mascagnia rigida e Palicourea aenofusca. As amostras foram cultivadas em meio mineral acrescido de 20 mmol L−1 de fluoroacetato de sódio. Através do sequenciamento do gene 16S rRNA os sete isolados foram identificados como Paenibacillus sp. (ECPB01), Burkholderia sp. (ECPB02), Cupriavidus sp. (ECPB03), Staphylococcus sp. (ECPB04), Ancylobacter sp. (ECPB05), Ralstonia sp. (ECPB06), e Stenotrophomonas sp. (ECPB07). Todos os sete isolados degradaram o FS contido no meio, alcançando uma taxa de degradação de 20 mmol L−1 de íon flúor. Dos isolados, seis são descritos pela primeira vez como capazes de degradar FS. No futuro, alguns destes microorganismos podem ser utilizados para estabelecer no rúmen uma população bacteriana capaz de degradar o fluoroacetato de sódio e proteger ruminantes de intoxicações por este composto.

Orientador: Carlos Alan Candido Dias Junior / Resumo: As desordens hipertensivas gestacionais são complicações que acometem em torno de 5-10% das gestações. Essas desordens são as maiores causas de morbidade e mortalidade tanto materna quanto fetal. Estudos demonstram redução da biodisponibilidade do óxido nítrico (NO) em doenças hipertensivas gestacionais, tornando uma das condições responsáveis por agravar a disfunção endotelial durante o curso desta doença. Neste sentido, trabalhos demonstram que a administração oral de nitrito de sódio (NaNO2) e a administração de citrato de sildenafil podem reverter a redução da biodisponibilidade de NO e potencializar a via de sinalização NO-GMPc respectivamente. Para realização dos trabalhos foram utilizadas ratas Wistar, no qual, após confirmação da prenhez receberam L-NAME i.p para indução da hipertensão e tratamentos com nitrito de sódio e/ou citrato de sildenafil via oral entre os dias 14-21 de prenhez. A pressão arterial sistólica foi aferida pelo método de pletismografia de cauda. Parâmetros materno-fetais como: peso fetal e placentário, número de fetos viáveis e reabsorvidos foram realizados após a morte das ratas no 21º dia gestacional. O plasma das ratas foram armazenados para dosagens dos níveis plasmáticos de nitrito+nitrato, guanosina monofosfato cíclico (GMPc), mieloperoxidase (MPO), peroxidação lipídica (TBARS), TEAC, MTT sFlt-1 e VEGF. Além disso o plasma das ratas foram incubadas com células endoteliais de cordão umbilical humano (HUVECS) para avaliar a produção de NO endo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Gestational hypertensive disorders are complications that affect around 5-10% of pregnancies. These disorders are the major causes of both maternal and fetal morbidity and mortality. Studies have demonstrated a reduction in the bioavailability of nitric oxide (NO) in gestational hypertensive diseases, making it one of the conditions responsible for aggravate the endothelial dysfunction during the course of this disease. In this sense, studies demonstrate that oral administration of sodium nitrite (NaNO2) and administration of sildenafil citrate may reverse the reduction of NO bioavailability and potentiate the NO-cGMP signaling pathway, respectively. Wistar rats were used to perform the study, in which, after confirmation of pregnancy, they received L-NAME i.p for induction of hypertension and treatments with sodium nitrite and/or sildenafil citrate orally between days 14-21 of pregnancy. Systolic blood pressure was measured by the tail plethysmography method. Maternal-fetal parameters such as: fetal and placental weight, number of viable and reabsorbed fetuses were performed after the death of the rats on the 21st gestational day. Plasma of the rats were stored for plasma levels of nitrite + nitrate, cGMP, myeloperoxidase (MPO), lipid peroxidation (TBARS), TEAC, MTT sFlt-1 and VEGF. In addition the plasma of the rats were incubated with human umbilical vein endothelial cells (HUVECS) to evaluate endothelial NO production. In both studies, we found reduction of systolic blood... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Victor Hugo Gonçalves Rizzi (victor.rizzi@hotmail.com) on 2018-09-06T18:30:07Z No. of bitstreams: 1 tese victor.pdf: 3098588 bytes, checksum: c82c3535b448e04bc144e33e93ef47f9 (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-09-11T19:49:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rizzi_vhg_dr_bot.pdf: 3098588 bytes, checksum: c82c3535b448e04bc144e33e93ef47f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T19:49:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rizzi_vhg_dr_bot.pdf: 3098588 bytes, checksum: c82c3535b448e04bc144e33e93ef47f9 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As desordens hipertensivas gestacionais são complicações que acometem em torno de 5-10% das gestações. Essas desordens são as maiores causas de morbidade e mortalidade tanto materna quanto fetal. Estudos demonstram redução da biodisponibilidade do óxido nítrico (NO) em doenças hipertensivas gestacionais, tornando uma das condições responsáveis por agravar a disfunção endotelial durante o curso desta doença. Neste sentido, trabalhos demonstram que a administração oral de nitrito de sódio (NaNO2) e a administração de citrato de sildenafil podem reverter a redução da biodisponibilidade de NO e potencializar a via de sinalização NO-GMPc respectivamente. Para realização dos trabalhos foram utilizadas ratas Wistar, no qual, após confirmação da prenhez receberam L-NAME i.p para indução da hipertensão e tratamentos com nitrito de sódio e/ou citrato de sildenafil via oral entre os dias 14-21 de prenhez. A pressão arterial sistólica foi aferida pelo método de pletismografia de cauda. Parâmetros materno-fetais como: peso fetal e placentário, número de fetos viáveis e reabsorvidos foram realizados após a morte das ratas no 21º dia gestacional. O plasma das ratas foram armazenados para dosagens dos níveis plasmáticos de nitrito+nitrato, guanosina monofosfato cíclico (GMPc), mieloperoxidase (MPO), peroxidação lipídica (TBARS), TEAC, MTT sFlt-1 e VEGF. Além disso o plasma das ratas foram incubadas com células endoteliais de cordão umbilical humano (HUVECS) para avaliar a produção de NO endotelial. Em ambos os trabalhos, nós encontramos redução da pressão arterial sistólica com nitrito e sildenafil, tanto isolado quanto em associação. Somente o sildenafil foi capaz de aumentar o peso fetal, enquanto o peso placentário foi melhorado por ambas as drogas. Tanto nitrito quanto sildenafil foram capaz de reduzir a reabsorção, possivelmente por aumentar a viabilidade fetal. Foi encontrado aumento de NO plasmático em todos os grupo que receberam nitrito, enquanto curiosamente a síntese de NO em HUVECS incubadas com plasma das ratas foi aumentada em ambas as drogas. Ainda em relação a cultura celular, nós encontramos aumento da viabilidade celular em ratas hipertensas tratadas com sildenafil. A concentração plasmática de GMPc estava aumentada em ratas normotensos que receberam sildenafil. Ambas as drogas apresentam efeito antioxidante, mas somente o sildenafil foi capaz de reduzir a atividade plasmática da MPO. Fatores angiogênicos (VEGF) e anti-angiogênicos (sFlt-1) presentes em doenças hipertensivas gestacionais estavam aumentados em ratas que receberam L-NAME, porém o nitrito de sódio foi capaz de reduzir esses fatores. Nosso dados sugerem que o nitrito e o sildenafil, tanto isolado 2 quanto em associação apresentam efeitos anti-hipertensivos e antioxidantes. Portanto, nossos resultados sugerem que a ativação da via NO-GMPc aumentou o fluxo sanguíneo na interface materno-fetal e protegeu contra a hipertensão e a restrição do crescimento fetal induzidas pelo L-NAME. / Gestational hypertensive disorders are complications that affect around 5-10% of pregnancies. These disorders are the major causes of both maternal and fetal morbidity and mortality. Studies have demonstrated a reduction in the bioavailability of nitric oxide (NO) in gestational hypertensive diseases, making it one of the conditions responsible for aggravate the endothelial dysfunction during the course of this disease. In this sense, studies demonstrate that oral administration of sodium nitrite (NaNO2) and administration of sildenafil citrate may reverse the reduction of NO bioavailability and potentiate the NO-cGMP signaling pathway, respectively. Wistar rats were used to perform the study, in which, after confirmation of pregnancy, they received L-NAME i.p for induction of hypertension and treatments with sodium nitrite and/or sildenafil citrate orally between days 14-21 of pregnancy. Systolic blood pressure was measured by the tail plethysmography method. Maternal-fetal parameters such as: fetal and placental weight, number of viable and reabsorbed fetuses were performed after the death of the rats on the 21st gestational day. Plasma of the rats were stored for plasma levels of nitrite + nitrate, cGMP, myeloperoxidase (MPO), lipid peroxidation (TBARS), TEAC, MTT sFlt-1 and VEGF. In addition the plasma of the rats were incubated with human umbilical vein endothelial cells (HUVECS) to evaluate endothelial NO production. In both studies, we found reduction of systolic blood pressure with nitrite and sildenafil, both alone and in combination. Both nitrite and sildenafil were able to reduce reabsorption, possibly by increasing fetal viability. No increase in plasma NO was found in all groups receiving nitrite, while curiously NO synthesis in HUVECS incubated with plasma from rats was increased in both drugs. Still in relation to cell culture, we found increased cell viability in hypertensive rats treated with sildenafil. Plasma cGMP concentration was increased in normotensive rats receiving sildenafil. Both drugs have an antioxidant effect, but only sildenafil was able to reduce plasma myeloperoxidase activity (MPO). Angiogenic (VEGF) and anti-angiogenic (sFlt-1) factors present in gestational hypertensive diseases were increased in rats receiving L-NAME, but sodium nitrite was able to reduce these factors. Our data suggest that both nitrite and sildenafil, both alone and in combination, have antihypertensive and antioxidant effects. Therefore, our results suggest that activation of the NO-cGMP pathway increased blood flow at the maternal-fetal interface and protected against hypertension and fetal growth restriction induced by L-NAME. / FAPESP 16/18782-3 / FAPESP 12/21305-1

O objetivo do presente trabalho foi determinar o efeito do estresse hiperosmótico ou hiposmótico, in vivo, sobre o balanço oxidativo, os níveis de atividade de Na+/K+ATPase e a s expressões das Hsp 70 e 90 em Neohelice granulata. O peso seco das brânquias anteriores, brânquias posteriores, hepatopâncreas e músculo mandibular foram determinados em diferentes tempos experimentais (15, 30, 45, 60 e 360 minutos) e escolhidos os tempos de 1 e 6 horas de estresse. Entre os grupos controles foi o hepatopâncreas o tecido que apresentou maior concentração de peróxido de hidrogênio. As brânquias anteriores e posteriores, o hepatopâncreas reduziram significativamente a formação de peróxido de hidrogênio após 1 e 6 horas de estresse hiposmótico ou hiperosmótico. No músculo mandibular, foram verificados valores significativamente menores de peróxido de hidrogênio em ambos os estresses, exceto após 1 hora de estresse hiperosmótico. Nas brânquias anteriores e posteriores foi verificada uma diminuição na relação da glutationa oxidada/reduzida após uma hora em ambos os estresses. Após 6 horas de estresses, as brânquias posteriores e brânquias anteriores apresentaram uma relação de glutationa oxidada/reduzida mais elevada que o controle. Mesmo padrão de resposta foi verificado no hepatopâncreas e músculo mandibular. A atividade da catalase nas brânquias anteriores apresentou-se significativamente mais elevada, em ambos os tempos, nos dois estresses, enquanto nas brânquias posteriores apenas após 6 horas foi encontrado um aumento significativo da atividade. No hepatopâncreas a atividade da catalase no estresse hiposmótico diminuiu significativamente após 6 horas de estresse, enquanto no estresse hiperosmótico foi verificada uma diminuição significativa da atividade da catalase em ambos os tempos experimentais. O músculo mandibular apresentou uma diminuição significativa da catale somente após uma hora de estresse hiperosmótico. Quanto à atividade da enzima Na+/K+ATPase, esta apresentou-se diminuída em todos os tecidos estudados após 10 a submissão dos animais aos diferentes estresses em ambos os tempos. Alterações na expressão da Hsp 70 foram verificadas apenas nas brânquias posteriores, a expressão desta proteína foi significativamente maior no estresse hiposmótico quando comparada ao grupo controle. Ao final deste trabalho pode-se concluir que o caranguejo N. granulata, no período inicial de aclimatação às alterações de salinidade, possui respostas coordenadas de seus sistemas de defesas antioxidantes como estratégias para minimizar ou evitar os danos do choque osmótico. Os resultados também demonstraram que o sistema antioxidante do animal pode ser modulado durante o estresse oxidativo, contudo, a capacidade de modulação não é padronizada, sendo tecido-específica. Outra estratégia utilizada por este caranguejo em resposta ao estresse osmótico curto é uma diminuição da atividade da bomba Na+, K+-ATPase, reduzindo o consumo celular de ATP. A Hsp 70 aumenta somente nas brânquias posteriores, confirmando a afirmação de Chang (2005), que os tecidos não respondem uniformemente a um determinado estresse. No caso do estresse osmótico cabe às brânquias posteriores uma resposta protetora devido à função de principal órgão regulador iônico nos crustáceos.

Submitted by Pós graduação Farmácia (ppgfar@ufba.br) on 2017-05-15T19:02:04Z No. of bitstreams: 1 ELIZABETE DE JESUS.pdf: 2250219 bytes, checksum: 4edb78551b0744264cf70e273e7072bc (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2017-05-23T21:16:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ELIZABETE DE JESUS.pdf: 2250219 bytes, checksum: 4edb78551b0744264cf70e273e7072bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T21:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ELIZABETE DE JESUS.pdf: 2250219 bytes, checksum: 4edb78551b0744264cf70e273e7072bc (MD5) / FAPESB / O diagnóstico definitivo da estrongiloidíase é realizado pela pesquisa de larvas nas fezes utilizando o método de Baermann-Moraes, apesar da cultura em placa de agar (CPA) apresentar maior sensibilidade. Na maioria das infecções pelo Strongyloides stercoralis, a carga parasitária é baixa e a eliminação das larvas se faz de maneira intermitente, comprometendo a eficácia e precisão do diagnóstico. A pesquisa de anticorpos circulantes através do imunoensaio (ELISA) possui elevada sensibilidade e é utilizado também no auxílio ao diagnóstico da estrongiloidíase. Os objetivos deste trabalho foram (1) comparar os métodos de CPA, Baermann-Moraes e sedimentação espontânea para o diagnóstico da estrongiloidíase (2) avaliar o padrão de migração das larvas de S. stercoralis e ancilostomídeos em placas de agar e o tempo para positividade das culturas, (3) avaliar a interferência da refrigeração das fezes na viabilidade das larvas e (4) padronizar o ELISA para pesquisa de anticorpos anti-S. stercoralis. Para avaliar as sensibilidades dos métodos parasitológicos foram utilizadas 725 amostras de fezes de pacientes atendidos no Laboratório de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia, UFBA, e amostras de soros de 50 pacientes com S. stercoralis, 80 de indivíduos com outras parasitoses e 60 soros controles negativos. A CPA mostrou maior sensibilidade tanto para Strongyloides stercoralis (95%) como para os ancilostomídeos (77%). As sensibilidades da CPA e do método de Baermann-Moraes reduziram aproximadamente 50% quando as amostras foram conservadas a 4ºC. Através do padrão de migração das larvas foi possível realizar a diferenciação de 95,7% das amostras positivas para Strongyloides stercoralis e de 96,7% para os ancilostomídeos, confirmadas através da microscopia. O tempo de visualização macroscópica dos caminhos, deixados pelas larvas também variou significativamente (p < 0,05) entre S. stercoralis e ancilostomídeos, ocorrendo principalmente no primeiro e quarto dias de incubação, respectivamente. No ELISA para detecção de IgG a sensibilidade variou de 72 a 76%, e a especificidade foi de 92,8%, não apresentando diferenças significativas quando o antígeno foi tratado ou não com metaperiodato de sódio. Por outro lado, o ELISA para pesquisa de IgE apresentou sensibilidade de 80 % e após o tratamento do antígeno com metaperiodato de sódio reduziu para 74% (p > 0,05). Enquanto não houve variações nas especificidades, obtidas nos ensaios utilizando soros normais como controles negativos. O número de reações cruzadas de soros de pacientes com outras helmintoses aumentou em torno de 16% quando o antígeno foi tratado com o oxidante. Neste estudo, foi observado que houve uma redução nas médias das densidades ópticas dos soros de pacientes infectados com S. stercoralis com relação aos soros normais, quando o antígeno foi tratado com metaperiodato de sódio, demonstrando a importância dos epitopos glicosilados para o reconhecimento dos anticorpos anti-S. stercoralis. A depleção de IgG dos soros falso-negativos elevou a sensibilidade do ELISA-IgE, porém houve um aumento do número de reatividades cruzadas. A CPA é o método parasitológico mais sensível para o diagnóstico da estrongiloidíase e deve ser recomendado no diagnóstico de rotina. O ELISA pode ser utilizado no auxílio diagnóstico, principalmente em casos pacientes de imunossuprimidos ou antes de terapia imunossupressora. / Definitive diagnosis of strongyloidiasis is usually made by detection of larvae in stool samples using the Baermann-Moraes method, although fecal cultures in agar plate (CPA) have shown higher sensitivity. In the majority of Strongyloides stercoralis infections, the parasite load is low and the larvae output is irregular, influencing the effectiveness and accuracy of diagnosis. The detection of circulating antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has high sensitivity and it is also used as a tool for strongiloidiasis diagnosis. The objectives of this work were (1) to compare the methods of CPA, Baermann-Moraes and sedimentation for diagnosis of strongyloidiasis, (2) to evaluate the migration pattern of the S. stercoralis and hookworm larvae and the time for positivity of cultures, (3) to evaluate the influence of stool refrigeration on the viability of larvae and (4) to standardize the ELISA protocol to dilution serum anti-S. stercoralis IgG antibodies. To determine the sensitivity of the diagnosis methods, 725 stool samples from patients attending to the Clinical Laboratory Analysis of Faculty of Pharmacy, UFBA and serum samples from 50 patients with S. stercoralis, 80 with other parasitic infections and 60 negative control sera were used. The CPA was the most sensitive for both S. stercoralis (95%) and for hookworm (77%). The sensitivities of CPA and Baermann-Moraes decreased about 50% when samples were stored at 4º C. The migration pattern of larvae permitted the differentiation of 92 (95.7%) S. stercoralis and of 89 (96.7%) hookworm positive samples, confirmed by microscopy. The time for visible tracks on agar varied significantly (P < 0.05) between S. stercoralis and hookworms, occurring mainly in the first and fourth day of incubation, respectively. The sensitivity of ELISA for IgG anti-S. stercoralis range from 72% to 76%, and specificity was 91.7%, not showing significant differences when the antigen was treated or not with sodium metaperiodate. On the other hand, the ELISA for IgE had a sensitivity of 80% and after treatment of the antigen with sodium metaperiodate it significantly decreased to 74% (P > 0.05), while the specificities of ELISA-IgE, calculated using normal sera as negative controls, did not present significant variations. However, the number of cross-reactions in ELISA-IgE increased approximately 18% when the antigen was treated with the oxidizing agent. In this study, it was observed a reduction in the mean optical densities of sera from patients infected with S. stercoralis, compared with normal serum, when the antigen was treated with sodium metaperiodate, demonstrating the importance of glycosylated epitopes for the recognition by anti-S. stercoralis antibodies depletion of IgG from false-negative serum, increased the sensitivity of ELISA-IgE, even though there was an increase in cross-reactivity. The CPA is the most sensitive method for the parasitological diagnosis of strongyloidiasis and it should be recommended for routine diagnosis. ELISA should be used for diagnosis of S. stercoralis, especially in cases of immunosuppressed patients or before immunosuppressive therapy.