Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-08T20:21:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Diego Moura Soares.pdf: 1795202 bytes, checksum: 5acbafbcd9505be445c74529d09f5ac5 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-16T22:36:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Diego Moura Soares.pdf: 1795202 bytes, checksum: 5acbafbcd9505be445c74529d09f5ac5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T22:36:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Diego Moura Soares.pdf: 1795202 bytes, checksum: 5acbafbcd9505be445c74529d09f5ac5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-16 / FACEPE / O citrato de sildenafila é um potente inibidor seletivo da fosfodiesterase-5 e a sua descoberta representou um grande avanço no tratamento da disfunção erétil. Atualmente, este fármaco vem mostrando efeitos positivos no que diz respeito à diminuição do processo inflamatório e redução do estresse oxidativo, com conseqüente redução do dano tecidual, em diversas patologias. Como o processo inflamatório é um fator primordial na destruição dos tecidos periodontais decorrente da periodontite, objetivou-se avaliar o efeito do citrato de sildenafila na prevenção e progressão da periodontite experimental (PE) em ratos. Este estudo foi dividido em dois grupos. Grupo 1 (n=18), a droga foi administrada previamente e apenas 15 dias depois a PE foi induzida, permanecendo mais 15 dias de administração diária da droga. No grupo 2 do estudo (n=18) a administração da droga e a indução da PE iniciaram no mesmo dia e se mantiveram por mais 15 dias. Nos dois grupos os animais foram divididos em três subgrupos (n=6). Subgrupo placebo, doses diárias de veículo e indução da PE. Subgrupo controle, doses diárias de 10mg/kg de sildenafila sem indução da PE. Subgrupo sildenafila, indução da PE e doses diárias de 10mg/kg de sildenafila. A PE foi induzida no primeiro molar inferior esquerdo, através de ligadura e decorrido o período experimental, os animais foram eutanasiados e as mandíbulas removidas e analisadas através de microtomografia computadorizada (microCT), histologia e histomorfometria. Os dados foram tabulados e submetidos ao teste T para amostras independentes ou teste de Mann Whitney, de acordo com a distribuição das variáveis, considerando um intervalo de confiança de 95%. No grupo 1 do estudo, não observou-se diferenças significativas quando comparado o grupo que recebeu veículo associado a PE com o grupo tratado com droga, em nenhuma das análises realizadas. No grupo 2, a partir da análise por microCT verificou-se, diferença estatística na área de furca quando comparado o subgrupo controle com o subgrupo que recebeu doses diárias de sildenafila associado a PE, com um menor padrão de reabsorção óssea para o grupo sildenafila. Da mesma forma, o grau de inflamação mostrou diferença estatística quando comparou a área de furca dos subgrupos controle e sildenafila, com menores escores de inflamação para o grupo sildenafila, no grupo 2 do estudo. Além disso, observou-se formação de microabscessos e áreas de osso necrótico em todos os espécimes avaliados do subgrupo placebo no segundo grupo do estudo, este fato não foi verificado no subgrupo tratado com sildenafila. Na análise histomorfométrica houve uma tendência a menor reabsorção óssea para o subgrupo sildenafila quando comparado com o subgrupo placebo, no grupo 2 do estudo, porém sem significância estatística. Conclui-se que doses diárias de 10 mg/kg de citrato de sildenafila, diminuiu o processo inflamatório na região de furca, bem como a reabsorção óssea quando utilizado para fins de tratamento da periodontite experimental em ratos. / Sildenafil Citrate is a potent selective phosphodiesterase-5 inhibitor and its discovery represented a breakthrough in the treatment of erectile dysfunction. Currently, this drug has been showing positive effects with regard to the reduction of inflammatory process and reduction of oxidative stress, with consequent reduction of tissue damage, in several pathologies. The effect of sildenafil citrate on the prevention and progression of experimental periodontitis (PE) in rats was evaluated as the inflammatory process is a primary factor in the destruction of periodontal tissues due to periodontitis. This study was divided into two groups. Group 1 (n = 18), the drug was administered previously and only 15 days later PE was induced, remaining another 15 days of daily administration of the drug. In group 2 of the study (n = 18) the administration of the drug and the induction of PE started the same day and were maintained for another 15 days. In both groups, the animals were divided into three subgroups (n = 6). Placebo subgroup, daily vehicle doses and PE induction. Subgroup control, daily doses of 10mg / kg sildenafil without induction of PE. Subgroup sildenafil, induction of PE and daily doses of 10mg / kg of sildenafil. PE was induced in the lower left first molar by ligation and after the experimental period the animals were euthanized and the jaws removed and analyzed by computerized microtomography (microCT), histology and histomorphometry. The data were tabulated and submitted to the T test for independent samples or Mann Whitney test, according to the distribution of the variables, considering a 95% confidence interval. In group 1 of the study, no significant differences were observed when comparing the group that received vehicle associated to PE with the drug-treated group, in none of the analyzes performed. In group 2, a statistical difference was observed in the furcation area when the control subgroup was compared with the subgroup receiving daily doses of sildenafil associated with PE, with a lower bone resorption pattern for the sildenafil group. Likewise, the degree of inflammation showed statistical difference when comparing the furcation area of the control and sildenafil subgroups, with lower inflammation scores for the sildenafil group in group 2 of the study. In addition, formation of microabscesses and necrotic bone areas were observed in all assessed specimens of the placebo subgroup in the second study group, this fact was not found in the subgroup treated with sildenafil. In the histomorphometric analysis, there was a trend towards lower bone resorption for the sildenafil subgroup when compared to the placebo subgroup, in group 2 of the study, but without statistical significance. It is concluded that daily doses of 10 mg / kg sildenafil citrate decreased the inflammatory process in the furca region as well as bone resorption when used for the treatment of experimental periodontitis in rats.

CARVALHO, M. A. J. Efeito do sildenafil em modelo colinérgico de convulsão em camundongos e de estresse In vitro: abordagem comportamental e neuroquímica. 2016. 103 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T11:57:34Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_majcarvalho.pdf: 1426126 bytes, checksum: 2bf8f7e395ae3f30d2ddf4f50c50f3c2 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T11:57:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_majcarvalho.pdf: 1426126 bytes, checksum: 2bf8f7e395ae3f30d2ddf4f50c50f3c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T11:57:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_majcarvalho.pdf: 1426126 bytes, checksum: 2bf8f7e395ae3f30d2ddf4f50c50f3c2 (MD5) Previous issue date: 2016-05-27 / Seizures are the transient behavior changes resulting from rhythmic outbreaks, synchronic and disordered populations of brain neurons. Sildenafil is a selective inhibitor of PDE5 which enhances erectile function due to increased cytoplasmic levels of cGMP. Some experimental studies and case reports suggest that sildenafil may exert pro convulsive activity. This work aimed to study the effects of sildenafil on seizure pilocarpine model in mice and on the viability of astrocytes in vitro before the cholinergic stress. Swiss male mice (25-34g) were pre-treated with sildenafil (2.5, 5,. 10 or 20mg / kg, ip, n = 8) and in acute treatment for 7 days. Half an hour after the last dose of sildenafil convulsion was induced in all animals by the administration of pilocarpine 400 mg / kg, ip. (P400). In behavioral analysis, the time to occurrence of the first seizure and death after the tests were dissected three brain areas were recorded (pre-frontal cortex, hippocampus and striatum) to determine the activity of acetylcholinesterase, the degree of lipid peroxidation, by measuring the concentration of malondialdehyde (MDA), the concentration of nitrite and also the participation of glutathione reductase antioxidant defense (GSH). In vitro assay, cell viability was determined cortical astrocytes after treatment with different concentrations of Sildenafil + pilocarpine. Data were analyzed by ANOVA and Student-Newman-Keuls test and post-test, for in vivo tests and ANOVA followed by Bonferroni post-test, for in vitro experiments. It was observed that sildenafil reduced the latency of convulsions and death at doses of 10 and 20 mg / kg in both acute pretreatment such as 7 days. Regarding the parameters of oxidative stress and antioxidant defense, an increase of MDA levels in all areas at doses of 10 and 20 mg / kg in the acute pretreatment, whereas in pretreatment for 7 days there were increasing levels of MDA in the prefrontal cortex at the dose of 20 mg / kg and the hippocampus in the dose of 10 and 20 mg / kg. The nitrite concentration was increased at doses of 10 and 20 mg / kg in the prefrontal cortex and hippocampus in doses of 10 and 20 mg / kg and in the striatum at a dose of 20 mg / kg pre-treatment for 7 days, and in acute pretreatment was increased in the frontal cortex pre dose of 20 mg / kg and in the striatum at a dose of 10mg / kg. Regarding the reduced glutathione did not change in group pretreated with sildenafil compared to P400 + P400 group. The combined treatment of sildenafil (1000, 500, 250, 125, 75, 37 ug / ml) and pilocarpine (IC 50 - Cytotoxicity index to 50% of the cell population study corresponding to 31.83 mM) caused a reduction in viability cells only in the concentration of 1000 ug / mL, suggesting that astrocytes can be involved in the possible neurotoxicity of sildenafil in the convulsive process, requiring further studies.. Our findings suggest sildenafil has a proconvulsivant activity related to cholinergic mechanisms and demonstre oxidizing action in the highest doses studied. / Convulsões consistem em alterações transitórias do comportamento decorrente das deflagrações rítmicas, sincrônicas e desordenadas de populações de neurônios cerebrais. Sildenafil é um inibidor seletivo da PDE5 que potencializa a função erétil devido ao aumento dos níveis citoplasmáticos de GMPc. Alguns estudos experimentais e relatos de caso apontam que o sildenafil pode exercer uma atividade pró-convulsiva. Esse trabalho teve como objetivo estudar os efeitos do sildenafil em modelo de convulsão induzida por pilocarpina em camundongos e sobre a viabilidade de astrócitos in vitro diante do estresse colinérgico. Camundongos Swiss machos (25-34g) foram pré-tratados com o sildenafil (2,5; 5; 10 ou 20mg/kg, ip., n= 8) em tratamento agudo e por 7 dias. Meia hora após a última dose de sildenafil foi induzida a convulsão em todos os animais através da administração de pilocarpina 400 mg/kg, ip. (P400). Na análise comportamental, foram registrados os tempos para ocorrência da primeira convulsão e morte e, após os testes, foram dissecadas três áreas cerebrais (córtex pré-frontal, hipocampo e corpo estriado) para determinar a atividade da acetilcolinesterase, o grau de peroxidação lipídica, pela mensuração da concentração de malondialdeido (MDA), a concentração de nitrito e também a participação da defesa antioxidante glutationa redutase (GSH). No ensaio in vitro, foi determinada a viabilidade celular de astrócitos corticais após o tratamento com diferentes concentrações de sildenafil+pilocarpina. Os dados foram analisados por ANOVA e Student-Newman-Keuls como pós-teste, para os ensaios in vivo, e ANOVA seguido pelo pós-teste de Bonferroni, para as experimentações in vitro. Foi observado que o sildenafil reduziu a latência de convulsão e de morte nas doses de 10 e 20 mg/kg tanto no pré-tratamento agudo como por 7 dias. Em relação aos parâmetros de estresse oxidativo e defesa antioxidante, houve aumento dos níveis de MDA em todas as áreas nas doses de 10 e 20 mg/kg no pré-tratamento agudo, enquanto que no pré-tratamento por 7 dias houve aumento dos níveis de MDA no córtex pré-frontal na dose de 20 mg/kg e no hipocampo nas doses de 10 e 20 mg/kg. A concentração de nitrito foi aumentado nas doses de 10 e 20 mg/kg no córtex pré-frontal e hipocampo nas doses de 10 e 20 mg/kg e no corpo estriado na dose de 20 mg/kg no pré-tratamento por 7 dias e no pré-tratamento agudo houve aumento no córtex pré frontal na dose de 20 mg/kg e no corpo estriado na dose de 10mg/kg. Em relação a glutationa reduzida, não houve alteração nos grupos pré-tratados com sildenafil+P400 em relação ao grupo P400. O tratamento combinado entre sildenafil (1000, 500, 250, 125, 75, 37 μg/mL) e pilocarpina (IC 50 - índice de citotoxicidade para 50% da população celular em estudo que correspondente a 31,83 mM) causou redução da viabilidade das células apenas na concentração de 1000 μg/mL, sugerindo que os astrócitos podem estar envolvidos na possível neurotoxicidade do sildenafil no processo convulsivo, sendo necessário mais estudos. Nossos achados sugerem que o sildenafil possui uma atividade pró-convulsivante relacionado a mecanismos colinérgicos e que apresentou ação oxidante nas doses mais altas estudadas.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T19:12:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Willian Ricardo da Rosa de Almeida.pdf: 1728935 bytes, checksum: add5d55f493e0f08fd42042f07a7a9b7 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T19:15:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Willian Ricardo da Rosa de Almeida.pdf: 1728935 bytes, checksum: add5d55f493e0f08fd42042f07a7a9b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-22T19:15:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Willian Ricardo da Rosa de Almeida.pdf: 1728935 bytes, checksum: add5d55f493e0f08fd42042f07a7a9b7 (MD5) Previous issue date: 2016 / A sildenafila é um fármaco utilizado como tratamento de primeira escolha para a disfunção erétil, sendo disponível comercialmente na forma farmacêutica de comprimidos. Atualmente, a sildenafila está entre os medicamentos mais vendidos no mercado mundial. Por esta razão, também está entre os medicamentos que mais são contrabandeados e/ou falsificados. O desenvolvimento de métodos analíticos para avaliar a qualidade de produtos farmacêuticos bem como aqueles voltados para análise de amostras forenses são de extrema importância e constituem-se como ferramentas para a disponibilização de medicamentos com qualidade garantida. Desta forma, o presente trabalho teve por objetivo desenvolver e validar um método analítico indicativo de estabilidade por UFLC para a quantificação de sildenafila em comprimidos, bem como avaliar a cinética de degradação fotolítica e a segurança biológica dos fotoprodutos de degradação obtidos. Ainda, amostras suspeitas de falsificação de comprimidos de sildenafila (cedidas pela Superintendência Regional da Polícia Federal do Rio Grande do Sul) foram avaliadas em relação aos critérios de qualidade estabelecidos em compêndios internacionais através dos testes de: (a) resistência mecânica, (b) desintegração, (c) dissolução, (d) teor, (e) perfil químico por espectrometria no infravermelho médio e (f) perfil físico (diâmetro, peso e altura). Os resultados foram avaliados utilizando ferramentas de controle estatístico de processo e análise multivariada. No desenvolvimento do método por UFLC, as seguintes condições foram estabelecidas: fase móvel acetonitrila:trietilamina pH 4,0 (60:40, v:v), fluxo 0,7 ml min-1, coluna C18 (100mm x 4,6mm x 5μm), temperatura 50°C e detecção em 290 nm. O método foi validado segundo a normativa do ICH e mostrou-se específico, linear, preciso, exato e robusto. A segurança biológica foi determinada pelos ensaios de: (a) de Azul de Tripan, (b) Teste de Micronúcleos e (c) Ensaio Cometa. O fármaco e seus produtos de fotodegradação apresentaram citotoxicidade, no entanto não foram observados mutagenicidade e genotoxicidade. Na avaliação dos comprimidos suspeitos de falsificação não foram encontrados desvios de qualidade e a análise multivariada (por Análise Hierárquica de Agrupamentos) se mostrou adequada para classificação das amostras quanto ao perfil físico. / Sildenafil is the first choice pharmaceutical product for erectile dysfunction treatment and commercially available in tablets dosage form. Nowadays, Sildenafil is among the largest selling pharmaceutical products in the worldwide marketing. For this reason, is also among the most falsified and/or smuggled in the world. The development of analytical techniques that aim to evaluate pharmaceutical products’ quality, as well as those that aim forensic samples, are extremely valuable, once they are resources for quality guaranteed pharmaceutical products availability. Thus, our present study aimed to develop and validate a stability-indicative analytical method by UFLC, in order to quantify Sildenafil in tablets. Photolytic degradation’s kinetics and biological safety of Sildenafil’s photoproducts were evaluated. Additionally, Sildenafil tablets that were suspect of falsification (conceded by Regional Superintendence of Federal Police), were evaluated according to quality criteria previously established by international compendiums, being them: (a) mechanical resistance, (b) disintegration, (c) dissolution, (d) assay, (e) chemical profile by infrared spectroscopy, and (f) physical profile. The results were evaluated by control-process statistical and multivariate analysis. The following conditions were established for UFLC method: acetonitrile:triethylamine (60:40, v:v) as mobile phase, flux at 0.7mL.min-1, C18 column (100mm x 4,6mm x 5μm), 50°C, pH 4.0 and 290 nm. Proposed method was validated following ICH’s guidance, and showed specificity, linearity, precision, accuracy, and robustness. Biological safety was determined by the following assays: (a) Trypan Blue, (b) Micronucleus, and (c) Comet assay. The intact molecule, as well as its photoproducts showed cytotoxicity even no mutagenicity or genotoxicity was detected. Finally, tablets (suspected of falsification) had no quality deviation and multivariate analysis (Hierarchical Component Analysis) applied in physical profile showed adequate for sample’s classification.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2560.pdf: 1909631 bytes, checksum: 34db098669e19b9e74332c54f977cc2a (MD5) Previous issue date: 2009-08-12 / Financiadora de Estudos e Projetos / The development of electroanalytical procedures for acetylsalicylic acid (ASA), propranolol (PROP), atenolol and sildenafil (Viagra®) in pharmaceutical formulations using a boron doped diamond (BDD) electrode, square wave and differential pulse voltammetric techniques are described. ASA was directly determined in a 0.01 mol L-1 H2SO4 solution without the need of a previous alkaline hydrolysis step with the BDD electrode and square wave voltammetry (SWV). The analytical curve was linear in the ASA concentration range 2.5 × 10-6 to 1.0 × 10-4 mol L-1 with a detection limit of 2.0 × 10-6 mol L-1. Then, the analytical determination of PROP was carried out in a 0.1 mol L-1 H2SO4 solution using a cathodically pre-treated BDD electrode employing SWV. The analytical curve was linear in the PROP concentration range 2.0 × 10-7 to 9.0 × 10-6 mol L-1 with a detection limit of 1.8 × 10-7 mol L-1. The determination of atenolol was accomplished in 0.5 mol L-1 NaNO3 (pHcond 1.1 adjusted with concentrated HNO3) on a cathodically pre-treated BDD electrode employing SWV. The analytical curve was linear in the atenolol concentration range from 2.0 × 10-6 to 4.1 × 10-5 mol L-1 with a detection limit of 9.3 × 10-7 mol L-1. Finally, a procedure for the determination of sildenafil in 0.1 mol L-1 H2SO4 on a cathodically pre-treated BDD electrode employing differential pulse voltammetry was developed. The analytical curve was linear in the sildenafil concentration range 7.3 × 10-7 to 7.3 × 10-6 mol L-1 with a detection limit of 4.8 × 10-7 mol L-1. / Neste trabalho, descreve-se o desenvolvimento de procedimentos eletroanalíticos para a determinação de ácido acetilsalicílico (AAS), propranolol (PROP), atenolol e sildenafila (Viagra®) em formulações farmacêuticas utilizando um eletrodo de diamante dopado com boro (BDD) e as técnicas voltamétricas de onda quadrada e pulso diferencial. O AAS foi determinado diretamente em H2SO4 0,01 mol L-1, sem a necessidade da etapa de hidrólise alcalina, com um eletrodo de BDD e voltametria de onda quadrada (SWV). A curva analítica foi linear no intervalo de concentração de AAS de 2,5 × 10-6 a 1,0 × 10-4 mol L-1, com limite de detecção de 2,0 × 10-6 mol L-1. Na sequência, a determinação do propranolol foi realizada em H2SO4 0,1 mol L-1 sobre o eletrodo de BDD pré-tratado catodicamente empregando a SWV. A curva analítica foi linear no intervalo de concentração de propranolol de 2,0 × 10-7 a 9,0 × 10-6 mol L-1, com limite de detecção de 1,8 × 10-7 mol L-1. Ademais, a determinação do atenolol foi realizada em NaNO3 0,5 mol L-1 (pHcond 1,1 ajustado com HNO3 concentrado) sobre o eletrodo de BDD pré-tratado catodicamente empregando a SWV. A curva analítica foi linear no intervalo de concentração de atenolol de 2,0 × 10-6 a 4,1 × 10-5 mol L-1, com limite de detecção de 9,3 × 10-7 mol L-1. Finalmente, foi desenvolvido um procedimento para a determinação do sildenafila em H2SO4 0,1 mol L-1 sobre o eletrodo de BDD prétratado catodicamente empregando a voltametria de pulso diferencial. A curva analítica foi linear no intervalo de concentração de sildenafila de 7,3 × 10-7 a 7,3 × 10-6 mol L-1, com limite de detecção de 4,8 × 10-7 mol L-1.

Orientador: Juliany Gomes Quitzan / Resumo: A laparoscopia tem sido cada vez mais empregada na rotina médica e veterinária com o intuito de promover intervenções cirúrgicas e diagnósticas menos invasivas. Apesar de seus benefícios, há evidências de que a insuflação abdominal pode levar à isquemia dos órgãos, seguida pela injúria de reperfusão. Algumas medicações tem sido utilizadas na tentativa de prevenir ou minimizar os danos que podem ser causados pela injúria isquemia/reperfusão. O presente estudo teve por objetivo avaliar se o uso do sildenafil via oral, antes da realização do pneumoperitôneo, seria capaz de atenuar estes efeitos da isquemia/reperfusão. Foram utilizados 26 ratos Wistar machos, divididos em 3 grupos: controle (6), Sham (10) e S/P (10). O grupo S/P foi suplementado com 1mg/kg de citrato de sildenafil via oral. Os animais dos grupos Sham e S/P foram submetidos ao pneumoperitônio por 60 minutos, com pressão intra-abdominal de 12mmHg. A artéria carótida direita foi dissecada e canulada para que fossem colhidas amostras sanguíneas e avaliadas variáveis de oxigenação e ventilação (pressão parcial de oxigênio, pressão parcial de gás carbônico e saturação de oxigênio). Durante o procedimento também foram avaliadas variáveis hemodinâmicas (frequência cardíaca, frequência respiratória e pressão arterial média). Após 24 horas os animais foram submetidos à eutanásia e foram colhidos os rins para dosagem do estresse oxidativo, através da mensuração da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase, glutationaperoxidase e catalase, além do subproduto da peroxidação lipídica, o hidroperóxido. Os resultados observados em relação às variáveis hemodinâmicas e também de oxigenação e ventilação, não apresentaram diferença quando comparados os diferentes momentos dentro de um mesmo grupo, e na comparação entre os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Laparoscopy has been increasingly used in medical and veterinary routine in order to promote less invasive surgical and diagnostic interventions. Despite its benefits, there is evidence that abdominal insufflation can lead to ischemia of the organs, followed by reperfusion injury. Some medications have been used in attempts to prevent or minimize the damage that can be caused by injury ischemia/reperfusion. This study aimed to assess whether the use of oral sildenafil, prior to the pneumoperitoneum, was able to mitigate these effects of ischemia/reperfusion. We used 26 male Wistar rats, divided in 3 groups: control (6) Sham (10) and S/P (10). The S/P group was supplemented with 1 mg/kg of oral sildenafil citrate. The animals of the sham group and S/P were subjected to pneumoperitoneum for 60 minutes with intra-abdominal pressure of 12mmHg. The right carotid artery was dissected and cannulated in order to collect blood samples and evaluated oxygenation and ventilation variables (partial pressure of oxygen, partial pressure of carbon dioxide and oxygen saturation). During the procedure, hemodynamic variables were also evaluated (heart rate, respiratory rate and mean arterial pressure). After 24 hours the animals were euthanized and their kidneys were collected for dosage of oxidative stress by measuring the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutationaperoxidase, besides the byproduct of lipid peroxidation, hydroperoxide. The results observed for the hemodynamic variables and also oxygenation and ventilation, showed no difference when comparing the diferente times whithin the same group, and compared between groups. The values found for the antioxidant enzyme activity were similar in the S/P and control group. It was observed that the activities of the enzymes glutathione peroxidase and catalase were markedly increased, while... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Gilberto de Nucci / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T20:24:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Toque_HaroldoAlfredoFlores_D.pdf: 1734292 bytes, checksum: a664da49d6a032202e54c1490b0647dc (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O sildenafil, inibidor específico de PDE5, é utilizado no tratamento da disfunção erétil. Na procura de um inibidor mais potente e seletivo de PDE5, testamos vinte novos análogos do sildenafil (6a-v), caracterizados pela presença de um grupo sulfonil ou de um substituinte n'n'etilendiamina na posição do grupo metil da piperazina. Os objetivos deste trabalho foram: 1) Avaliar a atividade inibitória da PDE5 de plaquetas humanas; 2) Avaliar o efeito relaxante dos análogos do sildenafil em corpo cavernoso de coelho; 3) Avaliar o efeito relaxante dos análogos do sildenafil em anéis de aorta de coelho. Foi utilizado sangue de voluntários sadios para a atividade inibitória da PDE5 e coelhos New Zealand machos (2-3 kg) procedentes do CEMIB-UNICAMP para os estudos funcionais. Os animais foram anestesiados com uretana, o corpo cavernoso e a artéria aorta foram rapidamente removidos. O tecido cavernoso e anéis de aorta foram montados em banho para órgão isolado contendo solução de Krebs (37oC, 95% O2 / 5% CO2). Os tecidos foram ligados a transdutores isométricos conectados a um sistema PowerLab® de aquisição de dados. Nossos resultados mostraram que a atividade inibitória da PDE5 induzida pelos análogos do sildenafil em plaquetas humanas foi de maneira dependente da concentração. Os compostos 6m, 6n e 6q mostraram valores elevados de IC50 para inibir a PDE5 plaquetária, enquanto que os compostos 6a, 6b, 6d, 6g e 6p produziram inibição inferior a 50%. A potência inibitória (IC50) dos compostos 6c, 6e, 6f, 6h, 6i, 6l e 6o foi similar ao sildenafil (IC50: 0,05 µM) com valores variando entre 0,05 e 0,15 µM. Os análogos que derivaram da molécula n'n'etilendiamina (6r, 6s, 6t e 6v) mostraram uma boa atividade inibitória com valores entre 0,20-0,51 µM. Interessantemente, o composto 6u mostrou uma potência de 0,04 µM, o qual representou o menor valor obtido dos análogos do sildenafil. Nos estudos funcionais, todos os análogos do sildenafil, à exceção do análogo 6m, relaxaram preparações de corpo cavernoso de coelho de maneira dependente da concentração. Particularmente, o análogo 6f mostrou o melhor perfil farmacológico no relaxamento, com potência similar ao sildenafil, e pode servir de base para o desenvolvimento de novos inibidores de PDE5 para o tratamento da disfunção erétil. Além disso, nossos resultados mostraram que os análogos do sildenafil produzem relaxamento dependente da concentração em anéis de aorta de coelho com endotélio íntegro ou removido. Somente o análogo 6b e 6m apresentaram valores de potência inferiores quando comparados ao sildenafil em tecidos com endotélio íntegro. A remoção do endotélio ou a adição do LNAME ou do ODQ (inibidor da NO sintase e da guanilil ciclase solúvel, respectivamente) em tecidos com endotélio íntegro, provocou deslocamento à direita para o sildenafil e seus análogos, à exceção do 6r e 6u que não apresentaram diminuição da potência decorrente da inibição do NO, seja pela remoção do endotélio, pela inibição da NO sintase ou pela inibição da guanilil ciclase solúvel. Nossos dados também mostram que o 6r e 6u, em combinação com o BAY 41-2272, aumentam a potência evocada por estes análogos tanto em anéis de aorta com endotélio íntegro ou removido. O relaxamento evocado pelo sildenafil, 6r e 6u não envolve a participação de canais de potássio e de cálcio, nem envolve a formação de prostanóides. As respostas relaxantes destes dois análogos não foram alteradas em tecidos desprovidos de endotélio, mostrando-se independentes da via NO/GMPc. Isto sugere que estes dois análogos podem ser de particular interesse em patologias decorrentes de disfunção endotelial. / Abstract: Sildenafil, a cGMP-specific phosphodiesterase-5 (PDE5) inhibitor, is used for the treatment of erectile dysfunction. In the search for a potent and selective PDE5 inhibitor, new sildenafil analogues (6a-v), characterized by the presence on the sulphonyl group in the 5' position of novel N-4-substituted piperazines or ethylenediamine moiety, were synthesized. The aim of this work was 1) To evaluate the PDE5 inhibitory activity in human platelets; 2) To evaluate the relaxing effect of sildenafil analogues in rabbit corpus cavernosum; 3) To evaluate the relaxing effect of sildenafil analogues in rabbit isolated aorta. Blood from human volunteers were collected and used for PDE5 inhibitory activity and Male New Zealand rabbit (2-3 kg) for functional studies. The rabbits were anaesthetized with urethane and sacrificed. The cavernosal tissue and aortic rings were mounted in organ bath containing Krebs solution (37oC, 95% O2 / 5% CO2). Each tissue was connected to an isometric transducer which was connected to a data acquisition system Powerlab®. Our results showed that sildenafil and its analogues concentration-dependently inhibited PDE5 activity in human platelets. Compounds 6m, 6n and 6q showed higher values of IC50 to inhibit PDE5 of platelets, whereas compounds 6a, 6b, 6d, 6g and 6p did not reach 50% of inhibition. The inhibitory potency of PDE5 for 6c, 6e, 6f, 6h, 6i, 6l and 6o were similar with sildenafil (IC50: 0,05 µM) with values between 0,05-0,15 µM. Derived analogues from n'n' substitution showed great PDE5 inhibitory activity. Interesting, compound 6u exhibited greater IC50 value (0,04 µM). In functional studies, all sildenafil analogues with exception of 6m, relaxed concentration-dependently rabbit corpus cavernosum. Compound 6f exhibited great pEC50 value in corpus cavernosum and could be used as base for developing new PDE5 inhibitors. Moreover, our results showed that sildenafil analogues concentration-dependently relaxed both endothelium-intact and - denuded aortic rings with similar potency values of sildenafil. Compounds 6b and 6m showed lower values of potency when compared to sildenafil in endothelium intact. Endothelium denudation or addition of L-NAME or ODQ (NOS and sGC inhibitors, respectively) caused marked rightward shifts in the curve to sildenafil and its analogues, whereas the relaxation curves for 6r and 6u were not altered after endothelium removal or either by the NO synthase or sGC inhibition. Moreover, our data also suggest that compound 6r and 6u increased the potency values in combination with BAY 41-2272 in both intact and denuded endothelium. The relaxation evoked by sildenafil, 6r and 6u does not involve either calcium or potassium channels or prostanoids formation. The relaxing responses by these compounds were independent of NO/cGMP pathway, suggesting that these compounds may be used in several diseases involving endothelium dysfunction. / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Heitor Moreno Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T22:07:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ThiagoQuinagliaAraujoCosta_D.pdf: 1420649 bytes, checksum: e60823c9257fdc54d91d49f992550d11 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Objetivo: A falha no controle da pressão arterial (PA), apesar do uso de três ou mais antihipertensivos caracteriza hipertensão arterial resistente (HAR). A disfunção endotelial está intrinsecamente associada a esta condição e inibidores da fosfodiesterase 5 (iPDE5)-inibindo a degradação de GMP cíclico (GMPc)-reduzem a PA em pacientes com HAR. A administração aguda de iPDE5 poderia melhorar parâmetros hemodinâmicos, endoteliais e de função diastólica do ventrículo esquerdo (FDVE) em pacientes com HAR e o polimorfismo T-786C da sintase de óxido nítrico (NO) endotelial (eNOS) modularia essas respostas. Métodos: Os pacientes (n = 26) foram dispostos em três grupos de acordo com o genótipo da eNOS T-786C: CC (n = 8), a CT (n = 9) e TT (n = 9). Doses crescentes de sildenafil oral (37,5, 50 e 100 mg) e placebo (em datas separadas por pelo menos 2 semanas) foram administradas a intervalos de 30 minutos, enquanto parâmetros hemodinâmicos (não invasivos e contínuos) foram obtidos. Também foram determinados: FDVE; vasodilatação mediada por fluxo (VMF); e nitrito e GMPc plasmáticos ao início e término do protocolo. Resultados: PA média (PAM) e resistência periférica total (RPT) diminuíram no grupo total (n=26) após o sildenafil (84,17 ± 21,04-75 ± 17,21 mmHg, 1149 ± 459,7-1,037 dyn.s/cm-5 ± 340, respectivamente; p<0,05). Similarmente, o sildenafil melhorou a FDVE (volume atrial esquerdo: 25 ± 5,8-20 ± 4,4; Tempo de relaxamento isovolumétrico: 104 ± 19,33-88 ± 15,22; E/e'septal: 9,7 ± 3,8-7,9 ± 2,9; E/e' lateral: 7,7 ± 3,4-6,4 ± 3,2; p<0,05). Os grupos TT e TC obtiveram redução sustentada da RPT ao longo do protocolo. No CC, os valores da RPT retornaram aos basais após as doses. Não houve alterações significativas da VMF, nitrito e GMPc após a administração do sildenafil. Conclusão: A administração aguda de iPDE5 melhora o perfil hemodinâmico e função diastólica em HAR e o polimorfismo T-786C da eNOS modula a resposta hemodinâmica, mas não a FDVE / Abstract: Purpose: Failure to control blood pressure (BP) despite the use of three or more drugs characterizes resistant hypertension (RHTN). Impaired endothelial function is associated to this condition and phosphodiesterase-5 inhibitors (PDE5i)-inhibiting cGMP breakdown-reduce BP in RHTN patients. We hypothesized that acute administration of PDE5i could ameliorate hemodynamic, endothelial parameters and left ventricular diastolic function (LVDF) in RHTN patients and that the T-786C nitric oxide (NO) endothelial synthase (eNOS) polymorphism could modulate these responses. Methods: Subjects (n= 26) were arranged into three groups: CC (n= 8), TC (n= 9) and TT (n= 9) according to T-786C eNOS genotype. Increasing doses of oral sildenafil (37.5, 50 and 100 mg) and placebo (in protocols at least 2 weeks apart) were given at 30 minute intervals while continuous non-invasive hemodynamic measures were assessed. LVDF, Flow Mediated Dilation (FMD), plasma nitrite and cGMP were also determined. Results: Mean arterial pressure (MAP) and total peripheral resistance (RPT) decreased in all patients (84.17 ± 21.04 to 75 ± 17.21 mmHg; 1149 ± 459.7 to 1037 ± 340 dyn.s/cm-5, respectively; p<0.05). Likewise, sildenafil improved LVDF parameters (Left atrial volume: 25 ± 5.8 to 20 ± 4.4; Isovolumetric relaxation time: 104 ± 19.33 to 88 ± 15.22; E/e' septal: 9.7 ± 3.8 to 7.9 ± 2.9; E/e' lateral: 7.7 ± 3.4 to 6.4 ± 3.2; p<0.05). While TT and TC genotype groups sustained RPT reduction during the increasing sildenafil doses, CC group failed to sustain the RPT drop, by the end of the protocol. No statistical changes were found in FMD, nitrite and cGMP after PDE5i administration. Conclusion: Our data suggest PDE5i acutely improves hemodynamic profile and diastolic function in RHTN, also T-786C eNOS polymorphism modulates the hemodynamic response, but not diastolic function / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Carlos Arturo Levi D'Ancona, Edson Antunes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T14:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RicardoRegesMaiade_D.pdf: 1519142 bytes, checksum: f2835a2052000035eb2c8fe2d199ca7b (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Sintomas do trato urinário inferior (STUI) estão associados com a piora da Qualidade de Vida dos pacientes e geram custos substanciais para a sociedade. Nos últimos anos houve aumento no conhecimento da fisiopatologia e história natural do STUI e obstrução benigna da próstata (OBP). O óxido nítrico (NO) tem sido implicado como neurotransmissor em vários sítios do sistema nervoso de mamíferos, incluindo as sinapses periféricas do trato urogenital em homens. Estudos recentes avaliaram os efeitos dos inibidores da enzima fosfodiesterase tipo 5 (PDE5) em pacientes com STUI secundário à OBP e observou-se melhora dos sintomas. Como, atualmente, não se sabe o exato papel da sildenafila no tratamento da disfunção miccional associado à OBP foi sugerido em um desses estudos que novas bases fisiopatológicas seriam necessárias para avaliar o efeito do inibidor da fosfodiesterase no trato urinário inferior. Objetivos: Os objetivos deste estudo foram determinar os efeitos urodinâmicos da inibição da síntese de óxido nítrico pela N-nitro-L-arginina metil éster (L-NAME), bem como a ação da sildenafila no trato urinário inferior de ratos com deficiência crônica de NO. Materiais e Métodos: No estudo foram utilizados 27 ratos da espécie Wistar que foram submetidos a estudo urodinâmico, sendo nove controles (Grupo 1), oito tratado com L-NAME (60mk/Kg/dia dissolvido em água) por 30 dias (Grupo 2), quatro tratados somente com sildenafila (100µg/Kg intravenoso) (Grupo 3) e seis tratados com L-NAME por 30 dias seguidos de administração aguda de sildenafila intravenoso(100µg/Kg) (Grupo 4). Resultados: A administração crônica e sistêmica de L-NAME resultou em aumento significativo no número de contrações não associado à micção (0,98 ±0,75 versus 2,71 ±0,89), limiar de volume (1,26 ±0,38 versus 2,8 ±1,64) e frequência dos ciclos de micção (1,2 ±0,65 versus 1,79 ±0,78), comparando Grupos 1 e 2, respectivamente. A administração intravenosa de sildenafila para os animais do Grupo 3 não alterou a frequência (pré-sildenafila 1,23 ±0,37 versus pós-sildenafila 1,3 ±0,15) e a amplitude dos ciclos de micção (pré-sildenafila 8,5 ±3,16 versus pós-sildenafila 9,0 ±2,99). Foi encontrada diferença significativa entre os Grupos 3 e 4 em relação a frequência dos ciclos de micção após administração da sildenafila (1,3 ±0,15 versus 0,35 ±0,25). A amplitude, antes da administração da sildenafila foi maior no Grupo 4 (8,50 ±3,16 versus 27,0 ±8,73; Grupos 3 e 4, respectivamente), porém tornou-se semelhante aos animais do Grupo 3 após a sildenafila (9,0 ±2,99 versus 7,5 ±6,6; Grupos 3 e 4, respectivamente). Conclusões: A redução sistêmica de óxido nítrico promove contrações involuntárias do detrusor e ciclos de micção de menor intervalo. A administração da sildenafila, em animais com deficiência crônica de óxido nítrico, promove diminuição do número de ciclos de micção e da amplitude das contrações. / Abstract: The lower urinary tract symptoms (LUTS) are associated with a worsening in patients' Quality of Life and lead to substantial costs for society. There is a special interest in the development of effective treatment options, with low morbidity, for detrusor overactivity (DO) secondary to benign prostatic obstruction (BPO). Nitric oxide (NO) has been involved as a neurotransmitter in several sites of the nervous system of mammals, including peripheral synapses of the urogenital tract. Sildenafil has been used in the clinical treatment of men with LUTS associated with BPO, with improvement in symptoms. However, this is just one assumption as it has not been proven by experimental studies and the precise role of sildenafil in the treatment of voiding dysfunction associated with BPO is not known. Objective: The aims of this study were evaluate the urodynamic effects of nitric oxide inhibition synthesis by N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), as well the action of sildenafil in the lower urinary tract of rats with chronic deficiency of nitric oxide.Materials and Methods: Twenty-seven adult Wistar rats underwent anesthetized cystometrograms: nine controls (Group 1), eight treated with oral L-NAME (60mg/kg/day dissolved in drinking water) for 30 days (Group 2), four treated with sildenafil only (100µg/kg intravenously, IV) (Group 3) and six treated with oral L-NAME for 30 days followed by acute IV sildenafil (100µg/Kg ) (Group 4). Results: The chronic and systemic administration of L-NAME resulted in a significant increase in non voiding contractions (0,98 ±0,75 versus 2,71 ±0,89), volume threshold (1,26 ±0,38 versus 2,8 ±1,64) and frequency of micturition cycles (1,2 ±0,65 versus 1,79 ±0,78), comparing Groups 1 e 2, respectively. The others parameters were not differences. The intravenous administration of sildenafil to Group 3 animals did not significantly alter the frequency (pre-sildenafil 1,23 ±0,37 versus post-sildenafil 1,3 ±0,15) or amplitude of micturition cycles (pre-sildenafil 8,5 ±3,16 versus post-sildenafila 9,0 ±2,99). A significant difference was found between the groups in relation to: void cycles after administration of sildenafil (1,3 ±0,15 versus 0,35 ±0,25). The amplitude before administration was large in Group 4 (8,50 ±3,16 versus 27,0 ±8,73; Groups 3 e 4, respectively), however become similar to that of the Group 3 animals after sildenafil (9,0 ±2,99 versus 7,5 ±6,6; Groups 3 e 4, respectively). Conclusion: The systemic reduction of nitric oxide increase non voiding contractions and frequency of micturition cycles. The administration of sildenafil in animals with chronic deficiency of nitric oxide decreases the number of micturition cycles as well as the contractions amplitude. / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Cirurgia

Orientador: Heitor Moreno Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T19:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_SilviaElainedeSousaFerreiraCarvalhode_D.pdf: 6801672 bytes, checksum: d5d157af717b53ac33305c8ec554a2d0 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O óxido nítrico (NO) é um mediador biológico multifuncional que serve como molécula chave em muitos processos fisiopatológicos, sintetizado nas células endoteliais em resposta a estímulos fisiológicos ou patológicos. Sua síntese se dá a partir da clivagem do terminal nitrogênio-guanidina do aminoácido L-arginina, em uma reação catalizada pela enzima óxido nítrico sintase (NOS). Há três isoformas de NOS: a NOS endotelial (eNOS), a NOS neuronal (nNOS) e a NOS induzível (iNOS). A eNOS e a nNOS são isoformas expressas constitutivamente nas células endoteliais vasculares e nas células neuronais, respectivamente; e a iNOS que a forma induzível, expressa em células inflamatórias após a indução por citocinas e outros mediadores inflamatórios. Após sua síntese o NO se difunde para as células do músculo liso vascular ativando a enzima guanilato ciclase solúvel (GCs), que converte guanosina-tri-fostato (GTP) em guanosina-3¿,5¿-monofosfato cíclica (GMPc), um segundo mensageiro para seus diversos efeitos biológicos, dentre os quais o relaxamento da musculatura lisa vascular. A síntese de NO pode ser inibida por vários compostos análogos à L-arginina, como L-NMMA, L-NAA, L-NAME e L-NIO de forma dose-dependente. A inibição crônica da síntese de óxido nítrico pela administração crônica de L-NAME é um modelo complexo e bem estabelecido de hipertensão arterial e miocardiopatia hipertensiva. É caracterizado por elevação da pressão arterial (PA) de forma severa, redução na freqüência cardíaca, no fluxo coronário e débito cardíaco (DC), aumento da resistência vascular periférica total (RVPT), diminuição do relaxamento vascular e alterações na contratilidade cardíaca, hipertrofia cardíaca, aumento do tamanho cardiomiócito, remodelamento miocárdico e microvascular com fibrose perivascular, sendo que o índice peso cardíaco/peso corporal e peso ventricular esquerdo/peso corporal estão usualmente aumentados. As fosfodiesterases são enzimas que degradam os nucleotídeos cíclicos GMPc e AMPc nas suas formas inativas. São conhecidas 11 famílias de enzimas (PDE1 ¿ PDE11) que diferem com relação ao padrão distribuição, especificidade de substrato, regulação pelas PKs e proteínas ligantes. Estão envolvidas em diversos processos fisiológicos e patológicos, tais como ereção peniana, asma, hipertensão pulmonar, aterosclerose, insuficiência cardíaca e diabetes. Consequentemente, os inibidores seletivos de PDE são interessantes e promissores alvos farmacológicos. Os inibidores das PDEs inpedem a degradação do AMPc, GMPc, elevando seus níveis intracelulares. Esses inibidores mimetizam as estruturas do AMPc e GMPc, mas não são degradados. Sildenafil é um inibidor seletivo da PDE5 induzindo o e relaxamento do músculo vascular liso e têm sido utilizados com sucesso no tratamento da disfunção erétil. A base racional para este projeto é a hipótese de que o sildenafil, por inibir de forma seletiva a PDE5 e conseqüentemente aumentar a disponibilidade de GMPc, possa ter efeitos cardiovasculares benéficos na inibição crônica da síntese de NO que reduz os níveis de GMPc no músculo cardíaco e vascular. Para isso foram estudados 4 grupos experimentais divididos aleatoriamente em: CONTROLE, L-NAME, SILDENAFIL e SILDENAFIL + L-NAME, durante 8 semanas de tratamento. Analisamos as alterações hemodinâmicas através das medidas da pressão arterial média, débito cardíaco, freqüência cardíaca e resistência vascular. As análises histológicas foram feitas através de técnicas morfométricas para determinação do diâmetro de miócito, lesões miocárdicas e espessura da camada média vascular e análises imunohistológicas. Nossos resultados demonstraram que a administração crônica de sildenafil altera os padrões hemodinâmicos e histolólgicos do modelo de miocardiopatia hipertensiva induzida pela inibição da síntese de NO por L-NAME. A inibição da PDE5 restaurou parcialmente os padrões hemodinâmicos, avaliados através da PA, DC e RVPT, além de protege parcialmente o miocárdio e músculo vascular liso contra as lesões e remodelamento cardiovascular característicos deste modelo experimental. A biodisponibilidade de GMPc, nos animais do grupo L-NAME + sildenafil, foi totalmente restaurada após 8 semanas de tratamento e a expressão das enzimas PDE3 e PDE5 estavam modificadas no músculo vascular liso e nos discos intercalares dos miócitos. Dessa forma, concluimos que o sildenafil, através da inibição da PDE5, aumentando a biodisponibilidade do GMPc, resulta em um efeito cardioprotetor e antiproliferativo contra as alterações cardiovasculares descritas no modelo de miocardiopatia hipertensiva induzida pela inibição crônica da síntese de NO em ratos Wistar / Abstract: Many of the physiological responses to nitric oxide (NO) are mediated by cyclic 5'-guanosine monophosphate (cGMP), the intracellular levels of which are regulated by phosphodiesterase type 5 (PDE5). In situations of reduced NO formation, the inhibition of PDE5 by selective inhibitors such as sildenafil could be beneficial in restoring physiological functions by enhancing the intracellular levels of cGMP. In this study, we evaluated the effects of sildenafil on the hemodynamic and histological alterations induced by the chronic treatment of rats with Nw¿nitro-L¿arginine¿methyl ester (L-NAME). After 8 weeks of concomitant treatment with sildenafil and L-NAME, arterial blood pressure was significantly lower (P<0.05) than in L-NAME treated rats. The fall in blood pressure was associated with a slight reduction in the total peripheral vascular resistance (P<0.05). Sildenafil partially restored the decrease in cardiac output seen in L-NAME-treated rats. Morphologically, sildenafil reduced the total area of the myocardial lesions and attenuated the cardiomyocyte and vascular smooth muscle remodeling seen with L-NAME. These results show that sildenafil reversed the deleterious hemodynamic and morphological alterations associated with L-NAME-induced hypertension. This beneficial effect was probably mediated by an increase in cardiac and vascular cGMP levels as reflected in circulating plasma cGMP levels / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: José Eduardo Tanus dos Santos / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T01:21:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Muniz_JaquelineJoice_D.pdf: 7837632 bytes, checksum: 844dee1536b7f55bbad3427a977bde29 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A disfunção erétil (DE) é uma doença que atinge milhões de homens em todo o mundo e tem sua prevalência aumentada com a idade. O tratamento via oral mais utilizado para pacientes com DE é o sildenafil, um inibidor de fosfodiesterase do tipo 5, que age aumentando níveis de monofosfato cíclico de guanosina, melhorando assim a função erétil. O óxido nítrico (NO) é o principal responsável pela dilatação dos corpos cavernosos e consequente ereção peniana. Polimorfismos no gene da enzima sintase de NO endotelial (eNOS) foram mostrados estarem associados a formação de NO e suscetibilidade à DE. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se marcadores genéticos e bioquímicos poderiam afetar a resposta ao tratamento com sildenafil em pacientes com DE. Polimorfismos no gene da eNOS (SNP na região promotora, T-786C; VNTR no intron 4, 4b4a; SNP no exon 7, Glu298Asp), marcadores da formação de NO (nitrito no sangue total) e estresse oxidativo (glutationa reduzida, FRAP, TBARS e proteínas carboniladas) foram utilizados para avaliar uma possível correlação com resposta terapêutica ao sildenafil em dois estudos. A função erétil de todos participantes foi avaliada utilizando o questionário Índice Internacitonal de Função Erétil (IIEF). No estudo de marcadores genéticos e resposta ao sildenafil foram selecionados 118 pacientes (63 pacientes com DE pós operatória e 55 pacientes com DE clínica) divididos em bons e maus respondedores ao sildenafil de acordo com a pontuação no IIEF. Foi observado neste estudo que a presença do alelo C para o polimorfismo T-786C em pacientes com DE pós operatória, e do alelo 4a para o polimorfismo 4b4a em pacientes com DE clínica, foi mais frequente em bons respondedores comparado aos maus respondedores ao sildenafil. Além do mais, em pacientes com DE pós operatória, o haplótipo constituído pelos alelos C 4a Glu foi mais comum em bons respondedores comparados aos maus respondedores ao sildenafil. No estudo de marcadores bioquímicos e resposta ao sildenafil foram recrutados 44 pacientes e 28 homens saudáveis. Os 44 pacientes foram divididos em dois grupos: 26 pacientes com DE (grupo DE) e 18 pacientes com DE e diabetes mellitus do tipo II (grupo DE/DM). Os resultados do nosso estudo bioquímico sugerem que baixos níveis de NO em pacientes nos dois grupos de DE clínica (grupo DE e grupo DE/DM) são benéficos em relação ao tratamento com sildenafil nesses pacientes. Além disso, baixo nível do marcador antioxidante FRAP mostrou ser melhor para resposta ao sildenafil em pacientes do grupo DE/DM. Em conclusão, nossos achados mostram que polimorfismos no gene da eNOS e marcadores da formação de NO e estresse oxidativo estão associados a resposta ao tratamento com sildenafil em pacientes com DE / Abstract: Erectile dysfunction (ED) affects millions of men around the world. Its prevalence increases with age. The most common treatment for patients with ED is sildenafil, an inhibitor of phosphodiesterase type 5, which acts by increasing levels of cyclic guanosine monophosphate, thereby improving erectile function. Nitric oxide (NO) is the mainly responsible for the corpus cavernosum dilatation, and consequent penile erection. Polymorphisms in the gene of the enzyme NO synthase (eNOS) have been shown to be associated with the formation of NO and susceptibility to DE. The objective of this study was to evaluate if genetic and biochemical markers could affect response to treatment with sildenafil in patients with ED. Polymorphisms in eNOS gene (SNP in the promoter region, T-786C; VNTR in the intron 4, 4b4a; SNP in the exon 7, Glu298Asp) and markers of NO formation (whole blood nitrite) and oxidative stress (reduced glutathione, FRAP, TBARS and carbonyl) were used to evaluate a possible association with therapeutic response to sildenafil in two studies. The erectile function of all participants was assessed using the IIEF questionnaire. In the study of genetic markers and response to sildenafil were selected 118 patients (63 patients with postoperative ED and 55 patients with clinic ED) divided into good and poor responders to sildenafil according to IIEF score. It was observed in that study that the C allele for the SNP T-786C in patients with postoperative ED, and the 4a allele for the VNTR 4b4a in patients with clinical ED were more common in good responders compared to poor responders to sildenafil. Moreover, in patients with postoperative ED, the haplotype consisting of C 4a Glu alleles was more common in good responders compared to poor responders to sildenafil. In the study of biochemical markers and response to sildenafil were recruited 44 patients and 28 healthy men. The 44 patients were divided into two groups: 26 patients with ED (ED group) and 18 patients with ED and type II diabetes mellitus (ED/DM group). The results of our biochemical study suggest that lows level of NO in patients in two clinical groups of DE (DE and ED/DM groups) are beneficial in the treatment with sildenafil in that patients. Moreover, low level of the antioxidant FRAP marker showed be better for sildenafil responsiveness in ED/DM group. In conclusion, our findings show that eNOS gene polymorphisms and markers of NO formation and oxidative stress affect the response to treatment with sildenafil in patients with ED / Doutorado / Farmacologia / Doutora em Farmacologia