Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-07-15. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:22Z : No. of bitstreams: 1 000226861.pdf: 928621 bytes, checksum: 36b3397f0893bf6232865ca39606779e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Amostras de sêmen e testículo foram coletadas de exemplares machos e adultos de Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Jundiá (Rhamdia quelen) e Piraputanga (Brycon hilarii) no Centro de Aqüicultura da UNESP (CAUNESP) - Jaboticabal - SP (Brasil) e no Centro Nacional de Pesquisa em Peixes Tropicais (CEPTA) - Pirassununga SP (Brasil). Análises macroscópicas evidenciaram características relacionadas à cor, aspecto e volume. Microscopicamente foram avaliadas: Motilidade, viabilidade e concentração dos espermatozóides. Bioquimicamente foram analisados os principais componentes do plasma seminal, íons (sódio, potássio, magnésio e cálcio), osmolaridade e concentração de glicose. Para a realização dos estudos ultraestruturais, fragmentos dos testículos foram fixados em glutaraldeído 2,5% e processados segundo rotina de microscopia eletrônica de transmissão. O objetivo deste trabalho foi analisar, comparativamente, os parâmetros seminais e a estrutura dos espermatozóides de 3 espécies de peixes neotropicais (Piracanjuba, Brycon orbignyanus, Piraputanga, Brycon hilarii e Jundiá, Rhamdia quelen). Na piracanjuba, o sêmen apresentou coloração amarelada e aspecto aquoso. Em jundiá a cor do sêmen é branca e o aspecto cremoso. Na piraputanga a coloração do sêmen é esbranquiçada e o aspecto leitoso. Se comparamos estas características com a concentração espermática encontrada em piracanjuba (2,72 x 109 ± 1,92 x 109 sp/mL), jundiá (4,57 x 1010 ± 1,50 x 1010 sp/mL) e piraputanga (6,46 x 109 ± 2,72 x 109 sp/mL) e com os valores do espermatócrito (5,5%, 93,5% e 16,6% respectivamente), podemos concluir que quanto mais cremoso for o sêmen, maior será sua concentração espermática. A piracanjuba apresentou o menor valor de porcentagem de motilidade espermática (77±6,74%). Por outro lado, observou-se que a composição iônica varia entre as espécies e dentro das... / Semen and testes samples were collected of male adults of Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Jundiá (Rhamdia quelen) and Piraputanga (Brycon hilarii) in the Aquaculture Center of UNESP (CAUNESP) - Jaboticabal - SP (Brazil) and in the National Center of Research in Tropical Fish (CEPTA) - Pirassununga - SP (Brazil). Macroscopic analyses evidenced characteristics related to the color, aspect and volume. It was microscopically appraised: The motility, viability and cell concentration of the sperm. The main biochemistry components of the seminal plasm, ionic (sodium, potassium, magnesium and calcium), osmolality and glucose concentration were analyzed. For the accomplishment of the ultrastructural studies, fragments of testicular tissue were fixed in glutaraldehyde 2,5% and processed according to transmission electron microscope routine. The aim of this study was analyze comparatively, the seminal parameters and the structure of the spermatozoon of 3 neotropical fish species (Piracanjuba, Brycon orbignyanus, Piraputanga, Brycon hilarii and Jundiá, Rhamdia quelen). In the piracanjuba, the semen is yellowish and with aqueous aspect. In jundiá the color of the semen is white and with creamy aspect. In the piraputanga the coloration of the semen is whitish and milky aspect. Comparing these characteristics with the sperm concentration found in piracanjuba (2,72 x 109 ± 1,92 x 109 sp/mL), jundiá (4,57 x 1010 ± 1,50 x 1010 sp/mL) and piraputanga (6,46 x 109 ± 2,72 x 109 sp/mL) and with the values of the spermatocrit (5,5%, 93,5% and 16,6% respectively), we can observed that the more creamy semen, the bigger the sperm concentration. The piracanjuba presented the smallest value of percentage of sperm motility (77±6,74%). On the other hand, it was observed that the ionic composition varies among the species and inside of the same ones, due to factors as the environment or to the reproduction ...

Orientador: Carlos Alberto Vicentini / Banca: Maíra Aparecida / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Resumo: Amostras de sêmen e testículo foram coletadas de exemplares machos e adultos de Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Jundiá (Rhamdia quelen) e Piraputanga (Brycon hilarii) no Centro de Aqüicultura da UNESP (CAUNESP) - Jaboticabal - SP (Brasil) e no Centro Nacional de Pesquisa em Peixes Tropicais (CEPTA) - Pirassununga SP (Brasil). Análises macroscópicas evidenciaram características relacionadas à cor, aspecto e volume. Microscopicamente foram avaliadas: Motilidade, viabilidade e concentração dos espermatozóides. Bioquimicamente foram analisados os principais componentes do plasma seminal, íons (sódio, potássio, magnésio e cálcio), osmolaridade e concentração de glicose. Para a realização dos estudos ultraestruturais, fragmentos dos testículos foram fixados em glutaraldeído 2,5% e processados segundo rotina de microscopia eletrônica de transmissão. O objetivo deste trabalho foi analisar, comparativamente, os parâmetros seminais e a estrutura dos espermatozóides de 3 espécies de peixes neotropicais (Piracanjuba, Brycon orbignyanus, Piraputanga, Brycon hilarii e Jundiá, Rhamdia quelen). Na piracanjuba, o sêmen apresentou coloração amarelada e aspecto aquoso. Em jundiá a cor do sêmen é branca e o aspecto cremoso. Na piraputanga a coloração do sêmen é esbranquiçada e o aspecto leitoso. Se comparamos estas características com a concentração espermática encontrada em piracanjuba (2,72 x 109 ± 1,92 x 109 sp/mL), jundiá (4,57 x 1010 ± 1,50 x 1010 sp/mL) e piraputanga (6,46 x 109 ± 2,72 x 109 sp/mL) e com os valores do espermatócrito (5,5%, 93,5% e 16,6% respectivamente), podemos concluir que quanto mais cremoso for o sêmen, maior será sua concentração espermática. A piracanjuba apresentou o menor valor de porcentagem de motilidade espermática (77±6,74%). Por outro lado, observou-se que a composição iônica varia entre as espécies e dentro das... / Abstract: Semen and testes samples were collected of male adults of Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Jundiá (Rhamdia quelen) and Piraputanga (Brycon hilarii) in the Aquaculture Center of UNESP (CAUNESP) - Jaboticabal - SP (Brazil) and in the National Center of Research in Tropical Fish (CEPTA) - Pirassununga - SP (Brazil). Macroscopic analyses evidenced characteristics related to the color, aspect and volume. It was microscopically appraised: The motility, viability and cell concentration of the sperm. The main biochemistry components of the seminal plasm, ionic (sodium, potassium, magnesium and calcium), osmolality and glucose concentration were analyzed. For the accomplishment of the ultrastructural studies, fragments of testicular tissue were fixed in glutaraldehyde 2,5% and processed according to transmission electron microscope routine. The aim of this study was analyze comparatively, the seminal parameters and the structure of the spermatozoon of 3 neotropical fish species (Piracanjuba, Brycon orbignyanus, Piraputanga, Brycon hilarii and Jundiá, Rhamdia quelen). In the piracanjuba, the semen is yellowish and with aqueous aspect. In jundiá the color of the semen is white and with creamy aspect. In the piraputanga the coloration of the semen is whitish and milky aspect. Comparing these characteristics with the sperm concentration found in piracanjuba (2,72 x 109 ± 1,92 x 109 sp/mL), jundiá (4,57 x 1010 ± 1,50 x 1010 sp/mL) and piraputanga (6,46 x 109 ± 2,72 x 109 sp/mL) and with the values of the spermatocrit (5,5%, 93,5% and 16,6% respectively), we can observed that the more creamy semen, the bigger the sperm concentration. The piracanjuba presented the smallest value of percentage of sperm motility (77±6,74%). On the other hand, it was observed that the ionic composition varies among the species and inside of the same ones, due to factors as the environment or to the reproduction ... / Mestre

Orientador: Samuel Monroe Cohen / Coorientador: João Lauro Viana de Camargo / Coorientador: Merielen Garcia Nascimento e Pontes / Banca: Juliany Quitzan / Banca: José Carlos Trindade e Filho / Banca: Kátia Ramos Moreira Leite / Banca: Wagner José Fávaro / Resumo: O criptorquidismo é uma anomalia congênito que afeta de 2 a 4% de meninos recém-nascidos, sendo um importante fator de risco para a infertilidade e tumores testiculares de células germinativas (TTCG). A cirurgia que realoca o testículo no escroto, oquidopexia, deve ser realizada entre 6 e 12 meses de idade, a fim de permitir fertilidade normal e reduzir o risco de malignidade. má qualidade do sêmen, testículo não descido, hipospadia e TTCG são elementos que, isolados ou combinados, compõem a chamada síndrome de disgenesia testicular (SDT). O presente estudo teve como objetivo caracterizar as alterações testiculares induzidas por uma modelo experimental de criptorquidia e orquidopexia em ratos, com o eventual objetivo de melhor compreender a SDT. Método mecânico aperfeiçoado de indução criptorquidismo abdominal e uma variação na instalação da orquidopexia ancorando os testículos, e não a cauda do epidídimo, na superfície interna da parede do escroto e puxando-os para o escroto, são apresentados. Para isso, ratos machos Sprague-Dawley foram submetidos cirurgicamente a criptorquidismo, ancorando a tunica albugínea dos testículos à parede abdominal - o passo crítico do presente método - na 3a semana de idade; alguns deles foram sacrificados após 3, 6 ou 11 semanas desta cirurgia, a fim de registrar a progressão morfológica das alterações testiculares induzidas pela criptorquidia. Outros animais criptorquídicos foram submetidos à orquidopexia após 3, 5 ou 9 semanas da criptorquidia; estes animais foram sacrificados 3 ou 8 semanas após orquidopexia. Animais falsamente operados (sham) foram submetidos a criptorquidia e orquidopexia nos mesmos momentos que os grupos cirúrgicos. Pelo menos dez e cinco animais foram utilizados em grupos de cirurgia e sham, respectivamente. Testículos criptorquídicos mostraram diminuição do peso, perda de células germinativas, parada na espermatogênese, apoptose e,... / Abstract: Cryptorchidism is a congenital defect affecting 2-4% of newborn boys, and is a major risk factor for infertility and testicular germ cell tumors (TGCT). The surgery that reallocates the testis into the scrotum, ochiopexy, should be performed between 6-12 months of age in order to allow normal fertility and reduce the risk of malignancy. Poor semen quality, undescended testis, hypospadias and TGCT are elements that, isolated or combined, compose the so-called Testicular Dysgenesis Syndrome (TDS). The present study aimed to characterize the testicular changes induced by a cryptorchidism and orchiopexy experimental model in the rat with the eventual purpose of better understanding TDS. Improved mechanical methods of abdominal cryptorchidism induction and a variation in the orchiopexy installation by anchoring the testes, and not the cauda epididymis, into the internal surface of the scrotal wall and gently pulling them down to the scrotum, are presented. To accomplish that, Sprague-Dawley male rats were surgically submitted to cryptorchidism by anchoring the testicular albuginea to the abdominal wall - the critical step of the present method - at 3 weeks of age; some of them were euthanized 3, 6 or 11 weeks after this surgery in order to register the morphological progression of cryptorchidism-induced testicular alterations. Other cryptorchidic animals were submitted to orchiopexy 3, 5 or 9 weeks after cryptorchidism; these animals were euthanized 3 or 8 weeks after orchiopexy. Sham operated animals underwent to cryptorchidism and orchiopexy at the same times as the surgical groups. At least 10 and 5 animals were used in surgical and sham groups, respectively, at the respective euthanasia moments. Cryptorchidic testis showed decreased weights, germ cell loss, spermatogenesis disruption, apoptosis and eventually some tubules with a Sertoli cells-only pattern, findings already described with other mechanical methods used to induce ... / Doutor

Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Coorientador: Maricy Apparício Ferreira / Banca: Fabricio Singaretti de Oliveira / Banca: Erika da Silva Carvalho Morani / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Resumo: Esta pesquisa teve por justificativa ampliar os estudos acerca da criopreservação de tecido gonadal e células espermáticas de gatos domésticos, podendo servir de modelo experimental para felinos selvagens. Objetivou-se comparar os efeitos da criopreservação sobre diferentes tamanhos de fragmentos testiculares, empregando dois crioprotetores. Utilizaram-se os testículos de 31 gatos domésticos, submetidos à orquiectomia eletiva. Os testículos foram pesados e apenas os que apresentarem pesos entre 1 e 2 g foram empregados. O tecido testicular foi dissecado e cortado em fragmentos de tamanhos pré-determinados (0,3cm3 e 0,5cm3). Uma amostra foi direcionada para as avaliações a fresco: integridade de membrana e do DNA; histopatologia; incidência de apoptoses por imuno-histoquímica; e índice de peroxidação lipídica - TBARS. A criopreservação foi feita em meio Tris-gema Equex STM suplementado com 3% de crioprotetores (glicerol e propanediol) através da técnica congelação rápida. Após a descongelação, foram realizados os mesmos testes iniciais. Os primeiros resultados obtidos com os 12 gatos iniciais apontaram na avaliação histomorfológica e pelo teste de lipoperoxidação lipídica que o glicerol foi mais eficiente que o propanediol na criopreservação de fragmentos testiculares de gatos domésticos de 0,5cm3 (Capítulo 2). No experimento seguinte, avaliaram-se os fragmentos testiculares de outros 31 gatos domésticos, seccionados nos mesmos tamanhos e criopreservados nas mesmas condições d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This research had the justification to broaden the studies about the cryopreservation of gonadal tissue and sperm cells of domestic cats, and could serve as an experimental model for wild cats. The objective of this study was to compare the effects of cryopreservation on different sizes of testicular fragments using two cryoprotectants. The testicles of 31 domestic cats submitted to elective orchiectomy were used. The testes were weighed and only those weighing between 1 and 2 g were used. The testicular tissue was dissected and cut into fragments of predetermined sizes (0.3cm3 and 0.5cm3). A sample was directed to fresh evaluations: membrane integrity and DNA; histopathology; incidence of apoptosis by immunohistochemistry; and lipid peroxidation index - TBARS. Cryopreservation was done on Tris-egg yolk Equex STM medium supplemented with 3% cryoprotectants (glycerol and propanediol) by the rapid freezing technique. After thawing, the same initial tests were performed. The first results obtained with the 12 initial cats showed that glycerol was more efficient than propanediol in the cryopreservation of testicular fragments of domestic cats of 0.5 cm3 (Chapter 2). In the following experiment, the testicular fragments from 31 other domestic cats, sectioned in the same sizes and cryopreserved under the same conditions as in the previous experiment, were evaluated using 3% glycerol or 3% propanediol in the Tris- egg yolk Equex STM medium, using rapid freezing technique, followed b... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Rosicleire Veríssimo Silveira / Banca: Cristiele da Silva Ribeiro / Banca: George Shigueti Yasui / Resumo: Em teleósteos, a utilização de transplante de espermatogônias tronco está criando um cenário novo e promissor na área de biotecnologia e produção em aquicultura, possibilitando a preservação de espécies em perigo de extinção. Esta técnica consiste na remoção de células tronco espermatogoniais do testículo de um animal doador e a sua transferência para o testículo de um receptor. Para garantir a eficiência desta técnica o receptor deve ter sua espermatogênese endógena suprimida, pois a eficiência do transplante depende do sucesso na competição entre células germinativas transplantadas e células germinativas endógenas nos túbulos seminíferos. Este estudo teve por objetivo promover experimentalmente a depleção da espermatogênese endógena de Devario aequipinnatus, por meio da droga quimioterápica Myleran (Busulfan) e sua associação com a temperatura de 30°C. Foram definidas quatro fases de maturação gonadal para o ciclo testicular de D. aequipinnatus: Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, essas definições tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. Para depleção foram testadas duas dosagens, no T15/18 foram aplicadas duas injeções, via intracelomática, com intervalo de 10 dias entre as mesmas, sendo a primeira dose de 15 mg kg -1 Myleran (Busulfan) e a segunda com 18 mg kg -1 de Myleran. No T40 foi aplicado somente uma injeção contendo 40 mg kg -1 de Myleran (Busulfan). Como grupo controle foi utilizado uma unidade experimental sem a inclusão de qualquer tipo de droga, em que os animais permaneceram sob as mesmas condições de temperatura, alimentação e fotoperíodo oferecidas para os animais utilizados dos tratamentos. O T15/18 e o T40 apresentaram uma redução significativa na quantidade de Espermatócitos e consequentemente um aumento na quantidade de lúmen... / Abstract: In teleosts, the use of spermatogonial stem transplant is creating a new and promising scenario in the area of biotechnology and aquaculture production, enabling the preservation of species in danger of extinction. This technique involves the removal of spermatogonial stem cells of the testis of a donor animal and its transfer to the testicle of a receiver. To ensure the efficiency of this technique the receiver shall have its endogenous spermatogenesis deleted because the transplant efficiency depends on the success in the competition between transplanted germ cells and endogenous germ cells in the seminiferous tubules. This study aimed to experimentally promote depletion of endogenous spermatogenesis Devario aequipinnatus through the chemotherapy drug Myleran (Busulfan) and its association with the temperature 30 ° C. Maturation of four phases have been defined for testicular cycle D. aequipinnatus: Maturation Home, Intermediate maturation, maturation and Final Regression, these definitions were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the stages of germ cells present. For depletion two doses were tested in the T15 / 18 were applied two injections via intracelomic with an interval of 10 days between them, the first dose of 15 mg kg-1 Myleran (Busulfan) and second with 18 mg kg- 1 Myleran. T40 was applied only in an injection containing 40 mg kg-1 Myleran (Busulfan). The control group was used an experimental unit without the inclusion of any type of drug, where the animals were kept under the same conditions of temperature, photoperiod and food offered to the animals used treatments. The T15 / 18 and T40 showed a significant reduction in the number of spermatocytes and consequently an increase in the amount tubular lumen in the testes of the animals examined. Three days after application of Busulfan for both single dose and double dose of Busulfan for an increase in pyknosis in spermatogonia ... / Mestre

Orientador : Profª. Drª. Rosana Nogueira de Morais / Coorientador : Prof. Dr. Anderson Joel Martino Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Fisiologia. Defesa: Curitiba, 31/08/2017 / Inclui referências : f. 68-81 / Área de concentração : Fisiologia / Resumo: Malformações e disfunções do sistema reprodutor masculino observadas no indivíduo adulto podem resultar de disfunções da gônada fetal. Um dos fatores que modifica a função testicular fetal é a exposição a xenobióticos, dentre os quais, o antiviral ganciclovir (GCV). A exposição ao GCV no dia 10 de gestação (DG10) causa o desenvolvimento de túbulos seminíferos contendo apenas células de Sertoli (TACS). Como o mecanismo de ação do GCV está relacionado com o metabolismo do DNA e inibição da proliferação celular, aventa-se que os TACS ocorrem por efeito citotóxico do GCV sobre as células germinativas. Para testar esta hipótese, expusemos ratas gestantes a 300 mg/kg de GCV (três injeções subcutâneas de 100 mg/kg) no DG10, 14 e 19, quando as células germinativas apresentam, respectivamente, taxas elevadas de migração, proliferação ou estão mitoticamente quiescentes. Os descendentes masculinos expostos ao GCV no DG 10 e 14 foram avaliados para marcadores de androgenização, andrógenos fecais e séricos e histomorfometria testicular, quando adultos. Nos testículos fetais (DG15 e 20), utilizamos a imunofluorescência de dupla marcação para DAZL (marcador específico de células germinativas) e Ki67 (marcador de proliferação celular) para investigar o número de gonócitos e a atividade proliferativa de células germinativas e somáticas, 24 h após a primeira injeção do GCV. Os ratos adultos expostos no DG14 apresentaram redução de 50% no peso testicular, resultado da redução nos volumes do espaço intersticial e dos túbulos seminíferos, dos quais em torno de 30% eram TACS. Apresentaram, ainda, atraso na puberdade, apesar dos níveis normais de androgênios. Nos animais expostos no DG10 os efeitos foram menos pronunciados, com redução de 30% do peso testicular e 12% de ocorrência de TACS. Em ambos os grupos, a população de células de Sertoli foi reduzida, com aumento no índice de células de Sertoli (razão entre o número de espermátides redondas por célula de Sertoli) nos animais expostos no DG14. Nos testículos fetais, o número de células germinativas foi reduzido em 50% nos ratos expostos no DG14, enquanto permaneceu inalterado naqueles expostos no DG19. No entanto, a exposição ao GCV no DG 19 reduziu a imunomarcação do Ki67 das células de Sertoli, o que indica que o GCV redução da proliferação num período da gestação em que normalmente as células de Sertoli apresentam alta taxa de proliferação. Em conclusão, a exposição ao GCV durante a gestação parece apresentar efeitos tóxicos sobre células somáticas e germinativas testiculares. No entanto, a toxicidade do GCV sobre as células germinativas é mais pronunciada e está diretamente relacionada com a taxa de proliferação. Esse efeito é tempo-dependente e, em ratos, o DG 14 é uma janela crítica de sensibilidade ao GCV, já que a exposição nesse dia causou uma perda maciça aguda das células germinativas, a qual persistiu até a idade adulta. Palavras-chave: Toxicologia. Células germinativas. Desordens reprodutivas masculinas. Antiviral / Abstract: Impairment of fetal gonadal development can lead to malformations and dysfunction of the male reproductive system in adult life. Several factors are potentially disruptors of the fetal testicular function, including exposure to xenobiotics such as the antiviral ganciclovir (GCV). Exposure to GCV at day 10 of gestation (GD10) causes the development of seminiferous tubules containing only Sertoli cells (SCOT). As the mechanism of action of GCV is related to DNA metabolism and inhibition of cell proliferation, SCOT could be a consequence of the cytotoxic effect of GCV on germ cells migration and proliferation. To test this hypothesis, we treated pregnant rats with 300 mg/kg of GCV (three subcutaneous injections of 100 mg/kg) at GD10, 14 and 19, when germ cells show high rates of migration, proliferation or are mitotically quiescent, respectively. Male offspring exposed to GCV at GD10 and 14 were evaluated for androgenic markers, fecal and serum androgens and testicular histomorphometry when adults. In the fetal testis (GD15 and 20), we used double-label immunofluorescence for DAZL (germ cell specific marker) and Ki67 (cell proliferation marker) to investigate the number of gonocytes and the proliferative activity of germ cells and somatic cells, 24 h after the first injection of GCV. The adult rats exposed at GD14 presented a 50% reduction in the testicular weight, as a result of a volume reduction of the seminiferous tubules (30% were SCOT) and of the interstitial space. GD14 animals had also delayed puberty, despite normal levels of androgens. In the animals exposed at GD10, the effects were less pronounced, with a reduction of 30% in testicular weight and 12% of SCOT. In both groups, the Sertoli cell population was reduced, with an increase in the Sertoli cell index (ratio of the number of round spermatids per Sertoli cell) in the animals exposed in GD14. In the fetal testis, the number of germ cells was reduced by 50% in the rats exposed in GD14, while it remained unchanged in GD19 testes. However, exposure to GCV in GD19 reduced Ki87's immunostaining, indicating that GCV reduced the proliferation of Sertoli cells in a period of the gestation when Sertoli cells are expected to have a high proliferation rate. In conclusion, exposure to GCV during gestation causes toxic effects on somatic and testicular germinative cells. However, the toxicity of GCV on germ cells is more pronounced and is directly related to the rate of proliferation. This effect is time-dependent and, in rats, GD14 is a critical window of sensitivity to GCV, since exposure at GD14 caused a massive acute loss of germ cells, which persisted into adulthood. Key-words: Toxicology. Germ cell. Male reproductive disorders. Antiviral.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T16:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 265413.pdf: 3730048 bytes, checksum: f61fcefd12bae9a7111b586b424409ab (MD5) / Hormônios esteróides, vitamina D, retinóides e hormônios da tireóide estimulam respostas celulares através de mecanismos genômicos e não-genômicos. No presente trabalho, hormônios com ação genômica: Tiroxina (T4) e 1?,25-diidróxivitamina D3 (1?,25(OH)2D3 ou 1,25D), foram estudados sob o ponto de vista não-genômico através de dois diferentes sistemas de membrana plasmática: transporte de aminoácidos em testículos de ratos e fluxo de cloreto em células de Sertoli TM4. As células de Sertoli de testículos de mamíferos são células secretoras que além de proteínas, nutrientes e fatores de crescimento, secretam um fluido rico em cloreto (Cl-) e potássio (K+) no lúmen dos túbulos seminíferos que são críticos para espermatogênese. Primeiramente, os resultados desse trabalho demonstraram que os canais de Ca2+ e os canais de K+ dependentes de ATP (K+ATP) são requeridos para o efeito estimulatório do hormônio T4 no transporte de aminoácidos em testículos de ratos imaturos. Além disso, os canais de Cl- e os canais de K+ dependentes da baixa condutância de Ca2+ (SKCa) estão parcialmente envolvidos nesse mecanismo. Esse efeito não-genômico do T4 é dependente da proteína cinase C (PKC) e aponta o T4 como um importante regulador metabólico da função testicular. Posteriormente foi demonstrado o efeito estimulatório da 1,25D no transporte de aminoácidos em testículo de ratos de uma forma dependente da concentração, dependente da idade e específico para esse hormônio. O requerimento dos canais de Ca2+, dos canais SKCa, da proteína cinase A (PKA) e da síntese de proteínas indicam efeitos rápidos e prolongados da 1,25D nesse mecanismo. Através de estudos eletrofisiológicos foi demonstrado que a 1,25D aumenta a permeabilidade ao íon cloreto na membrana plasmática de células de Sertoli TM4 em potenciais despolarizantes através do receptor VDR (receptor de vitamina D) e de uma forma dependente das proteínas PKA e PKC. Com a utilização de análogos esteróis da vitamina D (VDS) específicos para o estudo de respostas não-genômicas, células TM4 individuais foram tratadas com diferentes VDS, 1,25D e 25-diidróxivitamina D3 (25D) (metabólitos naturais); 1?,25(OH)2-lumisterol D3 (JN; agonista não-genômico), e/ou 1?,25(OH)2-vitamin D3 (HL; antagonista não-genômico). Os resultados demonstraram que: 1) 1,25D, 25D e JN são agonistas no estímulo da permeabilidade ao Cl-; 2) HL bloqueia o efeito desses agonistas confirmando a presença de um VDR alternativo de membrana (VDRmem ou VDR-AP). Experimentos de capacitância celular e videomicroscopia demonstraram que a 1,25D estimula processos secretórios em células TM4 importantes para a função reprodutiva. Ensaios de ligação hormônio-receptor e análises computacionais demonstraram que dois curcuminóides, a curcumina (CM) e a bisdemetóxicurcumina (BDC), polifenóis ativos da planta turmérica, se ligam com alta afinidade ao VDR e mais favoravelmente ao VDR-AP. Dessa forma, para verificar a especificidade de ação da 1,25D no VDR-AP, o efeito da CM e da BDC foi testado nas correntes de Cl- em células TM4. Em baixas concentrações, CM e BDC demonstraram um mecanismo de ação similar a 1,25D no aumento da permeabilidade ao íon Cl-. Em altas concentrações, CM e BDC parecem ativar correntes de Cl- através dos canais de cloreto reguladores da condutância transmembrana da fibrose cística (CFTR). Os dados obtidos com esse trabalho contribuem para o entendimento de novas vias de ação nas células de Sertoli desencadeadas por hormônios e substâncias relacionadas importantes para a homeostasia endócrina e exócrina do testículo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T23:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 295248.pdf: 1309608 bytes, checksum: 877fe2be839c033011ce5cf1e14a4f2b (MD5) / A atividade secretória das células de Sertoli é dependente das funções dos canais iônicos e da síntese de proteínas e é essencial para a espermatogênese. Além das ações genômicas dos hormônios tireóideos (HT), ações não-genômicas da tiroxina (T4) e do 3,5,3'-L-triiodotironina (T3) são relatados em testículos de ratos imaturos. O objetivo deste trabalho foi estudar o mecanismo de ação do T4 no transporte de aminoácidos e investigar a função do receptor de integrina neste evento. Também, esclarecer se o efeito estimulatório do T4 no transporte de aminoácidos e a captação de Ca2+ culminam em secreção celular. Descrevemos que o efeito estimulatório do T4 no transporte de aminoácidos parece ser mediado por um receptor de integrina presente na membrana plasmática, já que o tetrac (inibidor da ação do T4 na integrina), assim como o peptídio RGD (bloqueador da ligação do T4 ao receptor ?v?3) foram capazes de anular o efeito do hormônio. Além disso, o T4 aumenta a captação de Ca2+ e o Ca2+ intracelular aumenta a atividade nuclear, mas esta ação genômica parece não influenciar na função secretória das células de Sertoli iniciada pela interação do T4 ao receptor de integrina. Além do mais, o citoesqueleto e os canais de cloreto do tipo ClC-3, envolvidos na secreção celular, contribuem para as respostas rápidas das células de Sertoli que culminam na exocitose. Uma importante conclusão deste trabalho é que as vias de sinalização ativadas pela interação do T4 ao receptor de integrina convergem para determinar respostas rápidas das células de Sertoli, como a exocitose. A compreensão do mecanismo pelo qual o T4 promove o evento rápido de secreção celular, e independe da atividade nuclear, é um campo de investigação e pode levar à identificação de novos alvos terapêuticos.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T00:59:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:23Z : No. of bitstreams: 1 000857979.pdf: 966651 bytes, checksum: 385c62b63db6518267b3de1b7a9250a2 (MD5) / As pesquisas envolvendo a reprodução de gatos domésticos comumente baseiam-se em análise macroscópica e andrológica do sistema reprodutor desses animais, não havendo nenhum estudo até o momento sobre a avaliação ultrassonográfica dos testículos nesta espécie. Sendo assim, este estudo prospectivo visou realizar a varredura ultrassonográfica dos testículos de 45 gatos adultos domésticos, utilizando as técnicas Modo B, Doppler e Ultrassonografia por Contraste com Microbolhas. Os resultados obtidos ao exame ultrassonográfico modo B demonstraram as estruturas testiculares com ecotextura homogênea e com ecogenicidade dentro da normalidade (semelhante à ecogenicidade do tecido esplênico), com presença de linha mediastinal evidente. Ao Doppler colorido testicular, foi possível verificar artéria testicular com padrão de ondas arterial e monofásico, em região de cordão espermático. Utilizando o Doppler Espectral, obtiveram-se os índices vasculares dos testículos direito e esquerdo, respectivamente: VS = 6.23 cm/s, VD = 2.77 cm/s e IR = 0.53; VS = 6.73 cm/s, VD = 2.8 cm/s e IR = 0.54. A avaliação ultrassonográfica contrastada por microbolhas não resultou em efeitos colaterais aos animais, apresentando-se de aplicação confiável e gerando imagens de qualidade. O contraste preencheu as estruturas vasculares subcapsulares, com moderado realce homogêneo do parênquima, além de rápida redução da ecogenicidade após o pico de realce. Os valores de tempo para o contraste de microbolhas, considerando tempo de entrada, pico de realce e tempo de saída para os testículos direito e esquerdo foram, respectivamente: tempo de entrada = 10.76 s, pico de realce = 21.50 s e pico de saída = 81.81; tempo de entrada = 8.78 s, pico de realce = 21.62 s e tempo de saída = 75.36. Esses exames foram facilmente aplicados em gatos domésticos e devem ser utilizados como técnicas auxiliares no diagnóstico de anormalidades testiculares... / Research involving breeding of domestic cats are commonly based on macroscopic and andrologic analysis, there is no study to date with sonographic evaluation of domestic cats testicle. Thus, this study aimed to perform the ultrasound scan of 45 adult domestic cats testicles, using the techniques of B mode, Triplex Doppler ultrasound and contrast-enhanced. The results showed homogeneous testicles, with normal echogenicity and echotexture, with evident mediastinal line. Testicular artery was observed in the spermatic cord with tortuous patter and showed monophasic-patterned waves and low vascular resistance and with systolic peak evident. Values of indices vascular were as follows: SV = 6.73 cm/s, DV = 2.8 cm/s and RI = 0.54 for left testicles; and SV = 6.23 cm/s, DV = 2.77 cm/s and RI = 0.53 for right testicles. The contrast-enhanced resulted in no side effects, being reliable and generating quality images. Contrast filled the subcapsular vascular structures and after a few seconds, a homogeneous moderate enhancement of the parenchyma, with parenchymal vessels still distinguishable and after the peak phase, a rapid homogeneous decrease in echogenicity. Values of time for contrast-enhanced ultrasonography were as follows: wash-in = 8.78 s, peak enhancement = 21.62 s and wash-out = 75.36 for left testicles; and wash-in = 10.76 s, peak enhancement = 21.50 s and washout = 81.81 for right testicles. The examination in Doppler mode showed testicular artery with monophasic-patterned waves in spermatic cord. These tests were easily applied in domestic cats and should be used as auxiliary techniques in the diagnosis of testicular abnormalities in this species