Resumo: Agentes imunossupressores provocam alterações severas no metabolismo ósseo mineral podendo resultar em osteopenia. Tais alterações podem ser prejudiciais no processo e manutenção da osseointegração. Este estudo teve o objetivo de avaliar a influência da administração de ciclosporina-A (CSA) na osseointegração de implantes de titânio, através da avaliação: durante a cicatrização óssea ao redor de implantes dentais (Estudo I); da densidade óssea ao redor implantes dentais (Estudo II); da retenção do implante após a cicatrização óssea de implantes dentais (Estudo III) e radiográfica da qualidade óssea ao redor de implantes dentais já osseointegrados (Estudo IV). Os resultados permitiram concluir que a administração de CSA durante a cicatrização óssea resulta em diminuição da osseointegração e da densidade óssea ao redor do implante dental. Ainda, a administração de CSA após o período de cicatrização óssea ao redor do implante reduz a sua retenção mecânica ao tecido ósseo e promove a diminuição da qualidade e da densidade óssea radiográfica ao redor do implante dental. / Abstract: Immunosupressive agents may induce severe changes on bone mineral metabolism resulting in osteopenia. These alterations may impair the osseointegration processes. The purposes of this study were evaluate the cyclosporin-A (CSA) influence: on bone healing around dental implants (Study I); on bone density around dental implants (Study II); on mechanical retention of dental implants integrated to the bone (Study III) and on radiographic bone density and quality around dental implants integrated to the bone (Study IV). The CSA administration may impair the osseointegration and bone density during the bone healing. Besides, the administration of CSA after bone healing may impair the dental implant mechanical retention and decrease the radiographic bone density and bone quality around dental implants integrated to the bone. / Orientador: Gulnara Scaf / Coorientador: Elcio Marcantonio Junior / Banca: Guilherme Monteiro Tosoni / Banca: Maria Lúcia Rubo de Rezende / Banca: Jamil Awad Shibli / Banca: Francisco Haiter Neto / Doutor

Orientador: Sérgio Swain Muller / Banca: Trajano Sardenberg / Banca: Claudia Patrícia Cardoso Martins Siqueira / Resumo: Com o objetivo de investigar as repercussões clínicas, biomecânicas e densitométricas, nos ossos de animais exercitados e com menopausa induzida por meio de ooforectomia, foram estudadas 84 ratas adultas e virgens, da linhagem Rattus norvegicus albinus (Wistar). Os animais foram divididos em doze grupos em relação ao tratamento: ooforectomia bilateral ou cirurgia placebo, realizada aos quatro meses de idade; ao tipo de atividade, exercício aeróbio ou sedentarismo e momento de avaliação, três, seis e nove meses. O protocolo de exercício foi padronizado: 20 m/min de velocidade, 10º de inclinação, duração de 30 minutos, cinco dias por semana. Para o estudo clínico foi considerado o peso dos animais no momento do sacrificio. O estudo biomecânico foi realizado na tíbia direita, por meio de ensaio de flexão em três pontos, com velocidade de 30 mm/min, obtendo-se a carga máxima, o limite de elasticidade e o coeficiente de rigidez (calculados a partir do diagrama carga deformação). O estudo densitométrico utilizou a tíbia direita com análise da área metáfisaria (ROI); a dimensão da área foi de seis mm² na região proximal da tíbia, próximo ao disco epifisário. O estudo das variáveis peso, carga máxima, limite de elasticidade, coeficiente de rigidez e densitometria foi realizado por meio da técnica da análise de variância para o esquema fatorial 2 X 2 X 3 (dois tratamento, dois tipo de atividade e três momentos de sacrificio) no modelo inteiramente casualizado complementando com o teste de comparações de médias. A análise dos resultados obtidos permitiu concluir que a menopausa induzida pela ooforectomia causou aumento de peso corpóreo nos grupos ooforectomizado sedentários com seis e nove meses; nos grupos que realizaram o exercício o peso foi menor. Na avaliação da carga máxima, limite de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: With the aim to investigate the clinical, biomechanics and densitometric effects in the bones of exercised female rats, and with induced menopause through ooforectomy. It had been studied 84 virgin female adult rats, the lineage Rattus norvegicus albinus (Wistar). The animals had been divided into twelve groups according to the treatment: ooforectomy bilateral or simulated surgery, carried through when they were four months old; to the type of activities, aerobic exercises or sedentarism and time of sacrifice, three, six and nine months. The exercise protocol was standardized: running on treadmill at 20 m/min speed, with 10 º inclination, in 30 minutes, five days a week. For clinical study, the animals weight at the sacrifice time was considered. The mechanical study was carried through in the right tibia, by means of bending test in three points, with 30 mm/min speed, getting the maximum load, the yield point and the stiffnes coefficient (calculated from the load-deformation diagram).The concluded densitometric study uses the right tibia, analyzing the area metaphisis (ROI).The size of the area was six mm ² in region proximal the tibia, proximal disc epifisario. The variables study, weight, maximum load, yield point, stiffness coefficient, trabecular area densitometric, was carried through the analysis of variance technique to the factorial project 2 X 2 X 3 (two treatment, two types of activity and three moments of sacrifice) in the entirely casual model, completed with the averages comparisons test. The results have allowed to conclude that the induced menopause by the ooforectomy, produced increase corporeal weight to the sedentary six and nine months groups ooforectomy; groups that had carried through the exercise the weight was lesser. According to the evaluation of the sedentary placebo and the exercised group, maximum load, yield... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:07:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000436763-Texto+Completo-0.pdf: 467410 bytes, checksum: f234f7135286713fce26da90200be9a5 (MD5) Previous issue date: 2011 / Objective : compare the therapeutic efficacy of intramuscular midazolam (IM-MDZ) and intravenous diazepam (IV-DZP) to 529treat seizures in children. Methods : Randomized controlled study enrolling children (2months-14years) presenting seizures admitted to the Pediatric Emergency Department of the Hospital Universitário de Santa Maria between August 2010-August 2011; being randomized to receive IV-DZP or IM-MDZ as initial treatment. The groups were compared regarding the length of time to start medication, to interrupt seizures after being medicated and the total length of time to achieve the seizures interruption. Results : Venous access was not obtained in 4 minutes in 4 patients (20%) assigned to the IV-DZP. 32 children completed the study (16 in each group). IV-DZP compared to the IM-MDZ, presented the longest interval to cease seizures (10. 6 x 7. 3min; p=0. 006). Two children of each group (12. 5%) the seizures did not stop after 10 minutes, being 3 children transferred to the PICU after tracheal intubation: 1 belonging to the IM-MDZ (6. 25%0 and 2 in the IV-DZP group (12. 5%). There were not differences regarding adverse effects between the groups (p=0. 171): one child in the IM-MDZ presented hypotension (6. 3%) and 5 (31%) presented hyperactivity or vomit after receiving IV-DZP. Conclusion : Intramuscular midazolam presented lower interval to cease seizures than IV diazepam. Intrauscular midazolam demonstrate be ans excellent o treat seizures in children as a result of its efficacy, facility and fast administration. / Objetivo : Comparar a eficácia terapêutica da administração de Midazolam Intramuscular (MZ-IM) e do Diazepam Endovenoso (DZP-EV) em crianças com crise convulsiva.Método : Estudo randomizado e controlado, envolvendo crianças com crise convulsiva (2 meses a 14 anos) admitidas ao serviço de Emergência do Hospital Universitário de Santa Maria no período de agosto de 2010 a agosto 2011, sendo randomizadas a receber DZP-EV ou MZ-IM como tratamento inicial para convulsões. Os grupos foram comparados em relação ao tempos necessário para iniciar a medicação, para ceder a crise após a administração do fármaco e o tempo total para ceder a crise. Resultados : Não foi obtido acesso venoso aos 4 minutos em 4 pacientes (20%) assinalados ao grupo DZP-EV. Resultaram 32 crianças que completaram o estudo (16 em cada grupo). O DZP-EV apresentou tempo total maior para ceder à crise convulsiva quando comparado ao MZ-IM (10,6 x 7,3 min; p=0,006). Em 2 crianças de cada grupo (12,5%) a crise não cedeu após 10 minutos de tratamento, 3 crianças foram transferidos para a UTI pediátrica, após serem intubadas: 1 (6,25%) do grupo MDZ-IM e 2 (12,5%) do DZP-EV. Não houve diferença quanto a efeitos adversos entre os grupos (p=0,171): uma criança (6,3%) apresentou (hipotensão) após receber MDZ-IM e outras cinco crianças (31%) apresentaram (hiperatividade ou vomito) após receberem DZP-EV. Conclusão : Midazolam intramuscular apresentou menor tempo total para ceder a crise convulsiva que o diazepam endovenoso. Midazolam intramuscular mostrou ser excelente opção no tratamento de crises convulsivas na infância pela eficácia, facilidade e rapidez de aplicação.

Orientador: Katachi Okosh / Banca: Marcos Ferreira Minicucci / Banca: Silvio Assis de Oliveira Júnior / Resumo: Introdução: A hipertensão arterial sistêmica (HAS) constitui doença de alta prevalência em nosso meio. A HAS induz alterações cardíacas caracterizadas por hipertrofia do ventrículo esquerdo (VE), disfunção ventricular diastólica e/ou sistólica e manifestações clínicas como arritmia e insuficiência cardíaca (IC). O processo pelo qual sobrecargas hemodinâmicas crônicas, como a HAS, induzem tais alterações é denominado remodelamento cardíaco. Dentro desse processo, alterações da matriz colágena intersticial apresentam papel fundamental. A sobrecarga de pressão causada pela HAS pode gerar mudança na arquitetura do colágeno e favorecer o aumento de fibrose e rigidez miocárdica, com consequente disfunção diastólica do VE. O exercício físico tem mostrado benefício como medida coadjuvante no tratamento da IC, porém seu efeito sobre o remodelamento cardíaco, particularmente associado à HAS não controlada, ainda não está esclarecido. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar a influência do treinamento físico sobre o remodelamento cardíaco de ratos espontaneamente hipertensos na fase de desenvolvimento da IC. Métodos: Foram constituídos os seguintes grupos experimentais: ratos espontaneamente hipertensos machos, com 16 meses de idade, sedentários (SHR-SED, n=25); SHR exercitados machos (SHREX, n=25); ratos controle Wistar-Kyoto sedentários machos (WKY-SED, n=17) e; WKY exercitados machos (WKY-EX, n=18). Os animais dos grupos exercitados foram submetidos a protocolo de exercício em esteira, cinco dias por semana, durante quatro meses. A avaliação estrutural e funcional in vivo do coração foi realizada por meio de ecocardiograma. A função miocárdica in vitro foi avaliada em preparações de músculo papilar isolado do VE. Amostras de tecido do VE foram obtidas para quantificação de hidroxiprolina, análises histológicas e quantificação das frações solúvel e insolúvel do colágeno ... / Abstract: Introduction: The systemic arterial hypertension (SAH) is a highly prevalent disease worldwide. SAH induces cardiac alterations characterized by left ventricular (LV) hypertrophy, ventricular diastolic and / or systolic dysfunction and clinical manifestations such as arrhythmia and heart failure (HF). The process by which chronic hemodynamic overload, such as hypertension, induces these alterations is known as cardiac remodeling. Within this process, changes in interstitial collagen matrix play a fundamental role. The pressure overload caused by hypertension may lead to changes in collagen architecture increasing myocardial fibrosis and stiffness, with consequent LV diastolic dysfunction. Physical exercise has shown benefit as coadjuvant measure in the treatment of HF, but its effect on cardiac remodeling, particularly associated with uncontrolled hypertension, remains unclear. Therefore, the aim of this study was to evaluate the influence of physical training on cardiac remodeling in spontaneously hypertensive rats (SHR) during the development of HF. Methods: Four experimental groups were constituted as follows: male SHR, 16 month old, sedentary (SHR-SED, n=25); exercised male SHR (SHR-EX, n=25), sedentary control male rats Wistar-Kyoto (WKY-SED, n=17); and exercised male WKY (WKYEX, n=18). Animals from the exercised groups were submitted to a treadmill exercise protocol, five days a week, for four months. The in vivo cardiac structural and functional evaluation was performed by echocardiography. The in vitro myocardial function was evaluated by isolated left ventricular papillary muscle preparations. LV tissue samples were obtained for quantification of hydroxyproline concentration, histological analysis and quantification of interstitial collagen soluble and insoluble fractions. Genic expression of collagen types I and III and lysyl oxidase was assessed by real time RT-PCR. Comparisons between ... / Mestre

O presente estudo teve como objetivo a avaliação dos efeitos analgésicos do tramadol na dose de 2mg/kg, administrado pela via oral e intramuscular, em equinos submetidos à claudicação induzida com modelo de ferradura modificada. Para o modelo experimental, utilizou-se ferradura comercial modificada e adaptada para induzir claudicação nos animais. Os graus de claudicação foram registrados antes e após a administração do fármaco pelas duas vias utilizadas. O primeiro grupo (seis animais) recebeu o cloridrato de tramadol por via oral em cápsulas (grupo PO), através de sonda nasogástrica, na dose de 2mg/kg e o segundo grupo (seis animais) recebeu cloridrato de tramadol na formulação injetável pela via intramuscular profunda na região glútea (grupo IM), na dose de 2mg/kg. Os graus de claudicação foram avaliados no tempo 0 (antes da administração do fármaco) e nos tempos 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300 e 360 minutos após a administração do fármaco. Foram avaliados nos mesmos tempos parâmetros fisiológicos como frequência cardíaca, frequência respiratória, motilidade intestinal nos quadrantes superior direito, superior esquerdo, inferior direito e inferior esquerdo, além da temperatura retal. Parâmetros hemogasométricos foram avaliados no tempo 0 (antes da administração do fármaco), 30 e 60 minutos após a administração do fármaco, sendo mensurados pH sanguíneo, paCO2, paO2, HCO3-, Na, Ca, K e glicose. Os animais não apresentaram sinais adversos com a administração do tramadol, pelas vias e dose utilizadas, como disforia, hiperexcitabilidade, aumento na atividade locomotora e hipomotilidade intestinal, porém não houve diminuição significativa no grau de claudicação (P>0,05). O modelo de ferradura modificado utilizado para induzir claudicação nos equinos, mostrou-se eficiente como modelo experimental de dor. / This study aimed to evaluate the analgesic effects of tramadol the dose of 2mg/kg by oral and intramuscular administration in horses undergoing induced lameness with modified horseshoe model. For the experimental model we used commercial horseshoe modified and adapted for inducing lameness in animals. The degrees of lameness were recorded before and after drug administration for the two routes used. The first group (six animals) received tramadol hydrochloride orally in capsules (group PO) via a nasogastric tube at a dose of 2mg/kg and the second group (six animals) received tramadol hydrochloride in the formulation by intramuscular injection deep in the gluteal region (group IM) at a dose of 2mg/kg. The degrees of lameness were evaluated at time 0 (before drug administration) and at times 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300 and 360 minutes after drug administration. Were assessed at the same times physiological parameters such as heart rate, respiratory rate, intestinal motility in the upper right quadrant, upper left, lower right and lower left and rectal temperature. Blood gas parameters were evaluated at time 0 (before drug administration), 30 and 60 minutes after drug administration, and measured blood pH, PaCO2, PaO2, HCO3-, Na, K, Ca and glucose. The animals showed no adverse signs with the administration of tramadol, by routes and dose used, such as dysphoria, hyperexcitability, increased locomotor activity and intestinal hypomotility, but there was no significant decrease in lameness (P> .05). The modified horseshoe model used to induce lameness in horses was effective as an experimental model of pain.

Resumo não disponível

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Introdução: após os tumores de pele não - melanoma o câncer de próstata é o tumor maligno mais comumente diagnosticado e a segunda causa de morte relacionada ao câncer na população masculina. A maioria dos pacientes que morrem por câncer de próstata possuem metástases ósseas e esta doença é pouco responsiva ao tratamento quimioterápico. O microambiente ósseo, através de uma interação bidirecional com as células cancerígenas prostáticas provoca, nessas células, alterações fenotípicas. Uma dessas alterações é a expressão das células cancerígenas metastáticas anteriormente c-KIT negativas de receptores c- KIT. Hipotetizamos, aqui, que essas alterações poderiam contribuir para a quimiorresistência desses tumores. Objetivo: avaliar a hipótese de que a expressão de c-KIT pelas células de câncer de próstata contribui para a reduzida sensibilidade dessa neoplasia ao agente quimioterápico Docetaxel. Métodos: estudo experimental, utilizando células PC3, derivadas de metástases de câncer de próstata humano andrógeno-independente e C42b derivadas de metástases ósseas de câncer de próstata de coluna lombar de ratos atímicos . Ambas linhagens celulares c-KIT negativas foram tratadas em meio celular adequado e, sempre que atingiram a confluência de 90 %, foram isoladas para experimento ou expansão celular. Com o objetivo de mimetizar a expressão de c-KIT in vitro, parte das células foram submetidas a transfecção celular estável de c-KIT. Para isso foi utilizada uma formulação para transfecção de ácidos nucleicos em células eucarióticas (LIPOFECTAMINE 2000, Invitrogen) e, após isso, foi realizada a seleção de clones transfectantes estáveis. Os grupos foram divididos em c-KIT positivo, com ou sem o tratamento de SCF e c- KIT negativo com ou sem o tratamento de SCF, submetidos a doses crescentes do quimioterápico Docetaxel. Resultados: utilizando-se o índice da metade da concentração de inibição máxima (IC50), foi observado que nos experimentos com tratamento com Docetaxel por 2 dias os IC50 dos grupos C42b c-KIT e PC3 c-KIT, na presença ou não do ligante SCF, foram bastante superiores aos IC50 dos grupos C42b e PC3 que não sofreram a transfecção estável do c-KIT, na presença ou não do ligante SCF (p<0,001 grupoxdose). Nos experimentos com tratamento de Docetaxel por 3 dias, não foi observada diferença com significância estatística dos IC50 entre os grupos das células C42b transfectadas ou não com c-KIT e PC3 transfectadas ou não com c-KIT, na presença ou não do ligante SCF, principalmente quando foram usadas doses de Docetaxel mais próximas aos IC50 encontrados nos experimentos precedentes (tratamento com Docetaxel por 2 dias, doses inferiores a 10 nM de Docetaxel). Na tentativa de entender o aumento da quimiorresistência ao tratamento do Docetaxel por 3 dias aos grupos sem a transfecção de c-KIT, realizou-se o tempo de duplicação celular (TD) nos grupos C42b e PC3, o qual também não demonstrou diferença entre os grupos (PC3 EV TD = 40 horas, PC3 c-KIT TD 32 horas, C42b EV TD = 12 horas, C42b c-KIT TD = 14 horas). Conclusões: o presente estudo não demonstrou aumento da quimiorresistência das células C42b e PC3 ao quimioterápico Docetaxel quando transfectadas com c-KIT. / Introduction: after non-melanoma skin tumors, prostate cancer is the most commonly diagnosed malignant tumor and the second greatest cancer-related cause of death among men. Most patients who die of prostate cancer have bone metastases. This disease does not respond well to chemotherapy. The bone microenvironment, through a bidirectional interaction with prostatic cancerous cells, causes phenotypic alterations in these cells. One of these alterations is the expression of previously c-KIT negative metastatic cancerous cells of c-KIT receptors. Here we hypothesize that these alterations might contribute to the chemoresistance of such tumors. Objective: evaluating the hypothesis that the c-KIT expression by prostate cancer cells contributes to the reduced sensibility of this neoplasia to chemotherapeutic agent Docetaxel. Methods: experimental study, using PC3 cells derived from metastases of androgen-independent human prostate cancer and C42b cells derived from prostate cancer bone metastases from the lumbar spine of athymic mice. Both c-KIT negative cell lines were treated in the proper cellular medium and isolated for experiment or cellular expansion whenever they reached 90% confluence. Aiming at mimicking the c-KIT expression in vitro, part of the cells was submitted to stable c-KIT cell transfection. In order to do so, we used a formulation for the transfection of nucleic acids into eukaryotic cells (LIPOFECTAMINE 2000, Invitrogen). Following, the selection of stable transfectant clones was made. The groups were divided into c-KIT positive, with or without SCF treatment, and c-KIT negative, with or without SCF treatment, receiving increasing doses of the chemotherapeutic agent Docetaxel. Results: using the half maximal inhibitory concentration index (IC50), we observed that in the experiments treated with Docetaxel for 2 days, the IC50 values of the groups C42b c-KIT and PC3 c-KIT, in the presence or absence of the ligand SCF, were very superior to the IC50 values of the groups C42b and PC3 that had not undergone the stable c-KIT transfection, in the presence or absence of the ligand SCF (p<0.001 groupxdose). In experiments treated with Docetaxel for 3 days, we did not observe any statistically significant difference of IC50 values between the groups of C42b cells transfected or not transfected with c-KIT and PC3 cells transfected or not transfected with c-KIT, in the presence or absence of the ligand SCF, especially when using doses of Docetaxel that were more similar to the IC50 values found in previous experiments (treatment with Docetaxel for 2 days, doses below 10 nM of Docetaxel). In an attempt to understand the increased chemoresistance to the treatment with Docetaxel for 3 days in the groups without c-KIT transfection, we performed the cell doubling time (DT) in the groups C42b and PC3, which also showed no difference between groups (PC3 EV DT = 40 hours, PC3 c-KIT DT = 32 hours, C42b EV DT = 12 hours, C42b c-KIT DT = 14 hours). Conclusions: the present study showed no increased chemoresistance of C42b and PC3 cells to the chemotherapeutic agent Docetaxel when they are transfected with c-KIT.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-11-05T19:34:28Z No. of bitstreams: 1 2014_SarahCaixêtaCardoso.pdf: 1606140 bytes, checksum: 8b76d403152c961113043d6b912e3933 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-11-06T18:36:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_SarahCaixêtaCardoso.pdf: 1606140 bytes, checksum: 8b76d403152c961113043d6b912e3933 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-06T18:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_SarahCaixêtaCardoso.pdf: 1606140 bytes, checksum: 8b76d403152c961113043d6b912e3933 (MD5) / O câncer de próstata é o tumor mais comum diagnosticado em homens. As opções terapêuticas incluem a prostatectomia, radioterapia e até mesmo a vigilância ativa, em estágio inicias. Para doença em estágio avançado é indicada terapia local definitiva combinada com radioterapia adjuvante e/ou terapia hormonal de privação androgênica, porém sua eficácia é limitada. Assim os produtos naturais têm um papel importante como fonte na busca de novos agentes antitumorais. A biodiversidade brasileira, destacando o bioma Cerrado por sua enorme variedade de espécies, vem se tornando alvo importante na busca de novas biomoléculas com potencial terapêutico. O presente estudo tem como objetivo investigar a existência de atividade citotóxica de extratos de plantas e extratos de fluido de cultivo de fungos em linhagens de células de adenocarcinoma de próstata humano. Sob cultivo de duas linhagens de adenocarcinoma de próstata humano LNCaP clone FGC (sensível a androgênios), e PC3 (resistente a androgênios), e de uma linhagem controle de queratinócitos humanos normais (HaCat), foram investigados 31 extratos obtidos de plantas e 11 extratos de fluido de cultivo de fungos. O ensaio de viabilidade celular foi utilizado para avaliar a citotoxicidade e a curva dose-resposta. Foi analisado o perfil de morte celular e alterações no ciclo celular por meio de citometria de fluxo, utilizando kit comercial de anexina V e iodeto de propídeo. Foi realizada microscopia eletrônica de transmissão (MET) com o intuito de confirmar morfologicamente o perfil de morte celular. A fim de identificar compostos presentes nos extratos utilizou-se cromatografia em camada delgada. Entre os 31 extratos analisados, 12 extratos de plantas e 3 extratos de fluido de cultivo de fungos apresentaram atividade citotóxica maior que 50% em linhagem de adenocarcinoma de próstata andrógeno sensível (LNCaP). Sete extratos de plantas e 2 de fluido de cultivo de fungos apresentaram resposta dose dependente e índice de seletividade maior para a célula LNCaP. Estes apresentaram tendência a apoptose inicial e tardia e 4 extratos apresentaram parada do ciclo celular na fase G0/G1 estatisticamente significativa. Na análise global do efeito citotóxico em LNCaP, considerando também os índices de seletividade, destacaram-se os extratos de: Pouteria ramiflora caule etanólico (E), Pouteria torta fruto E, Bauhinia rufa folha E, Sapindus saponaria fruto E e Alamanda blanchetii folha E. Na linhagem PC3, 10 extratos de plantas apresentaram inicialmente resposta citotóxica maior que 50%, porém apenas 3 apresentaram resposta dose dependente. Destacaram-se extratos de B. rufa e P. caimito, com repressão significativa do ciclo celular e indução expressiva de apoptose tardia. Foi possível obter imagens de MET apenas de células LNCaP tratadas com A. blanchetii fruto E e de células PC3 tratadas com A. blanchetti folha hexânico (H), que confirmaram os achados pela citometria. Os compostos acetato de lupeíla, friedelenol e acetato de α amirina foram identificados nos extratos Pouteria ramiflora caule E e Pouteria torta fruto E. Todos os extratos com atividade citotóxica identificados foram etanólicos ou hexânicos. Os extratos citotóxicos identificados possuem potencial como fonte natural de compostos ativos e estudos futuros são necessários para caracterização de sua atividade farmacológica. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Prostate cancer is the most common cancer diagnosed in men. Therapeutic options include prostatectomy, radiation therapy and active surveillance for initial stage tumors. For advanced disease, definitive local therapy combined with adjuvant radiotherapy and / or androgen deprivation hormone therapy are indicated, but their effectiveness is limited, with high mortality. Due to limited therapeutic options, natural products have an important role as a source for discovery of new antineoplastic agents. Brazilian biodiversity, particularly the Cerrado biome and its huge variety of species, is becoming an increasingly important target for the search of new biomolecules with therapeutic potential. The present study aimed to investigate the existence of anti-proliferative activity of plant and fungi extracts in cell lineages of human prostate adenocarcinoma. Under cultivation of two human prostate adenocarcinoma cell lineages, LNCaP clone FGC (androgen-sensitive) and PC3 (androgen-resistant), and a control cell lineage of human keratinocytes (HaCaT), 31 extracts of plants and 11 extracts of culture fluid of fungi were investigated. Cell viability assay was used to assess the cytotoxicity and to determine the dose-response curves. Cell death profile and changes in cell cycle were analyzed by flow cytometry, using propidium iodide and annexin V commercial kits. Transmission electron microscopy was performed to confirm the morphological profile of cell death. Thin layer chromatography was used to identify compounds in selected extracts, which presented significant time- and dose-dependent activity. Among 31 analyzed extracts, 12 extracts of plants and three extracts of culture fluid of fungi showed cytotoxicity greater than 50% in LNCaP cell lineage. Seven plant extracts and 2 extracts of culture fluid of fungi were shown to have a dose-dependent cytotoxic effect, with higher selectivity for cancer cell lineage LNCaP. These extracts showed a tendency to induce early and late cellular apoptosis and 4 extracts exerted a statistically significant inhibitory effect on cell cycle. Upon global analysis of the cytotoxic effect on LNCaP, including the selectivity index, the following extracts showed the most featured effects: Pouteria ramiflora stem ethanolic (E), Pouteria torta fruit E, Bauhinia rufa sheet E, Sapindus saponaria fruit E and Alamanda blanchetii leaf E. In the androgen-resistant PC3 cell lineage, plant extracts showed a cytotoxic effect initially greater than 50%, but for only 3 extracts 10 this effect was dose-dependent. The most prominent effects were observed for extracts from B. rufa and P. caimito, which induced significant cell cycle arrest and late apoptosis. It was possible to obtain images of LNCaP cells treated only with A. blanchetii E, and PC3 cells treated with A. blanchetti sheet H, which confirmed the findings by flow cytometry. The compounds lupeyl acetate, friedelenol and α amyrin acetate were identified in extracts Pouteria ramiflora stem and Pouteria torta fruit E. All cytotoxic extracts identified were E or H. The cytotoxic plant extracts identified herein represent a potential natural source of active compounds. Future studies are needed to characterize their pharmacological activity.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2011-05-23T19:44:40Z No. of bitstreams: 1 2010_AnaLuciaAArruda.pdf: 2128936 bytes, checksum: 4b2f897a75279760dc52ee0e0f4ea462 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(tempestade_b@hotmail.com) on 2011-05-24T11:59:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_AnaLuciaAArruda.pdf: 2128936 bytes, checksum: 4b2f897a75279760dc52ee0e0f4ea462 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-24T11:59:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_AnaLuciaAArruda.pdf: 2128936 bytes, checksum: 4b2f897a75279760dc52ee0e0f4ea462 (MD5) / O presente trabalho descreve a análise fitoquímica, o isolamento dos constituintes majoritários e as atividades biológicas de Jacaranda cuspidifolia Mart., espécie pertencente à família Bignoniaceae, conhecida como caroba, jacarandá e bolacheira, comum no bioma Cerrado de Mato Grosso do Sul e usada na medicina popular como anti-inflamatória, antisifilítica e antigonorreica. Da análise do extrato hexânico de folhas por CG/EMS, RMN1 H e RMN13 C, foi obtida uma mistura contendo hidrocarbonetos de 15 carbonos (pentadecano), 17 carbonos (heptadecano) e 20 carbonos (icosano). A prospecção fitoquímica dos extratos metanólicos brutos das cascas, folhas e do caule realizada por cromatografia em camada delgada permitiu detectar a presença de taninos, flavonoides, naftoquinonas, terpenos, esteroides, saponinas e alcaloides. O perfil em cromatografia líquida de alta eficiência dos extratos metanólicos das cascas mostrou 4 grandes picos com tempos de retenção e comprimentos de onda similares aos derivados do verbascosídeo. Da fração clorofórmica da casca foi isolado o fenilpropanoide glicosilado, verbascosídeo. Os extratos hexânicos brutos das cascas, caule e folhas de J. cuspidifolia apresentaram inibição da acetilcolinesterase in vitro, similar à fisostigmina. Os extratos metanólicos das cascas apresentaram atividade anti-inflamatória in vitro e antigonorreica, as quais confirmam o seu uso na medicina popular. Nenhuma atividade antifúngica foi encontrada para os extratos e frações de J. cuspidifolia Mart. Para os quatro modelos de atividade antioxidante propostos, os extratos metanólicos das cascas e folhas apresentaram atividade. É a primeira vez que a espécie Jacaranda cuspidifolia Mart. é investigada quanto à sua composição micromolecular e quanto à atividade biológica. Além disso, é o primeiro relato da presença do verbascosídeo nesta espécie. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present work describes the phytochemical analysis, the isolation of the major micromolecular components and the biological activities of Jacaranda cuspidifolia Mart., species that belongs to the Bignoniaceae family, known as caroba, jacarandá and bolacheira, commonly found in the Brazilian Cerrado biome of Mato Grosso do Sul and used as an anti-inflammatory, antisyphilitic and anti-gonorrhea drug in traditional medicine. A mixture containing hydrocarbons of 15 carbons (pentadecane), 17 carbons (heptadecane) and 20 carbons (icosane) was obtained from the analysis of the hexane extract of leaves by CG/EMS, RMN1H, RMN13C. The phytochemical analysis of the crude methanolic extracts taken from barks, stem, and leaves through thin layer chromatography allowed the detection of the presence of tannins, flavonoids, naphthoquinones, terpenes, steroids, saponins and alkaloids. The high-performance liquid chromatography profile of methanol extracts of barks showed 4 major peaks with retention times and wavelengths similar to verbascoside derivates. Verbascoside, a glycoside phenylpropanoid, was obtained from the chloroform fractions. The crude hexane extracts of barks, stem and leaves of J. cuspidifolia presented inhibition profile of anticholinesterasic in vitro, similar to physostigmine. The methanol extract of barks presented in vitro anti-inflammatory activity and antigonorrhea activity, confirming its use in traditional medicine. No antifungal activity was found for the extracts and fractions of J. cuspidifolia Mart. For the four proposed model assays of antioxidant activity, the methanol extracts of barks and leaves presented activity. It is the first time that the Jacaranda cuspidifolia Mart. species is analyzed as to its micromolecular components and biological activity. In addition, this is the first report about the occurrence of verbascoside in this species.