Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-07-16T21:01:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 316512.pdf: 4091568 bytes, checksum: e830780984f331f72bf0735a379714c8 (MD5) / Os óleos de peixe, bem como alguns vegetais apresentam quantidades significantes de ácidos graxos poliinsaturados ômega-3, sendo que os principais encontrados em derivados marinhos são: o ácido graxo eicosapentaenóico (EPA) e o ácido graxo docosahexaenóico (DHA). Estudos prévios têm demonstrado que uma dieta rica em óleo de peixe pode exercer efeitos benéficos sobre inúmeras doenças com características inflamatórias, dentre as quais se destacam as doenças inflamatórias intestinais (IBD). Um novo mediador lipídico derivado do DHA, denominado maresina 1 (MaR1) têm apresentado potente atividade analgésica, antiinflamatória e pró-resolutiva em distintos modelos experimentais de inflamação, sendo assim, foi hipotetizado que o processo de resolução desencadeado pela MaR1 também poderia prevenir ou atenuar a inflamação intestinal em camundongos. Dessa forma, o presente estudo buscou avaliar o papel da MaR1, no modelo de colite aguda induzida pelo sulfato sódico de dextrana (DSS) (com um ou dois ciclos de DSS), e no modelo de colite aguda induzido pelo ácido trinitrobenzenosulfônico (TNBS) em camundongos. Os resultados observados demonstraram que o tratamento sistêmico com a MaR1 reduziu o escore clínico experimental e o dano tecidual colônico nos modelos de colite induzida pelo DSS (tanto no primeiro quanto no segundo ciclo), bem como na colite aguda induzida pelo TNBS. O efeito benéfico da MaR1 parece estar associado com sua habilidade em reduzir a liberaçaõ das citocinas: interleucina (IL)-1?, factor de necrose tumoral (TNF)-?, IL-6 e interferon (IFN)-? no modelo agudo com um único ciclo com DSS, e IL-1? e IL-6, mas não TNF-? e IFN-? no modelo agudo com dois ciclos com DSS, além da inibição da expressão da molécula de adesão ICAM-1, e de proteínas relacionadas ao inflamassoma, como o NALP3 e a pró-caspase-1, e pela ação sobre a ativação do fator nuclear ?B (NF-?B). Adicionalmente, através de experimentos in vitro, evidenciou-se que a MaR1 reduziu a liberação de IL-1?, TNF-?, IL-6 e IFN-? provenientes de macrófagos, e parece induzir a polarização de macrófagos para o fenótipo antiinflamatório M2. Em conclusão, o conjunto dos resultados contribui para estender os conhecimentos acerca dos mecanismos de ação antiinflamatório e pró-resolutivos da MaR1 e sugere uma nova abordagem terapêutica para o tratamento das IBD.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Nutrição, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321482.pdf: 2081835 bytes, checksum: 59bbd0a63ac2b75ce2c57effe88fbc29 (MD5) Previous issue date: 2013 / A insuficiência cardíaca (IC) é um estado patológico das fases avançadas das cardiopatias, podendo ocasionar hipertrofia e dilatação miocárdica, comprometendo o desempenho cardíaco. O exercício físico tem sido indicado como tratamento não farmacológico eficaz para a melhora da qualidade de vida, diminuição da taxa de morbidade e mortalidade e de re-hospitalização dos pacientes com IC. A suplementação com ácidos graxos ômega-3 (w-3) também é considerada estratégia eficiente na prevenção primária e secundária de eventos cardiovasculares em pacientes saudáveis e cardiopatas, por meio da redução de fatores de risco como dislipidemias e inflamação sistêmica de baixo grau. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da suplementação de w-3 no perfil lipídico e inflamatório de pacientes portadores de IC participantes de um programa de exercícios físicos. O estudo é caracterizado como ensaio clínico, controlado e de intervenção e foi realizado em indivíduos do sexo masculino (n=16) com IC crônica, de etiologia isquêmica, hipertensiva ou idiopática, classificados como classe funcional II ou III, participantes de um programa de reabilitação cardíaca. Os pacientes apresentaram concentrações séricas de colesterol total acima de 150 mg/dL e de triglicerídeos entre 150 e 500 mg/dL, idade média de 58,8 ± 1,2 anos e IMC de 29,9 ± 1,1 kg/m2. Os participantes ingeriram 4,8 g de óleo de peixe diariamente (2,8 g de w-3) por 60 dias, concomitante à prática de atividades físicas supervisionadas três vezes porsemana. Amostras de sangue foram coletadas antes (basal; duas coletas em 30 dias) e após 30 e 60 dias de suplementação para as análises laboratoriais. Para detectar as diferenças temporais promovidas pela suplementação foi aplicado o teste t pareado de Student. A associação das variáveis do consumo alimentar ou antropométricas com os parâmetros laboratoriais foi avaliada pela correlação de Pearson ou de Spearman. Para todas as análises foi considerado p = 0,05 como significativo. A suplementação promoveu redução significativa nas concentrações de triglicerídeos (TG) de 21,6 mg/dL (11,8%) e 53,8 mg/dL (29,5%, p<0,001) e nas concentrações de LDL pequena e densa (sd-LDL-c) de 9,6 mg/dL (12,8%) e 10,7 mg/dL (16,4%, p<0,05), após 30 e 60 dias, respectivamente. Também se observou redução de 12,5 mg/dL (7,1%) nos valores de colesterol total (CT) e de 13,2 mg/dL (9,3%) na fração não-HDL-c após 60 dias (p<0,05). Além disso, foi observado diminuição significativa de 19,5% nas concentrações de TNF-a (2,7 pg/mL; p<0,05) e redução de 62,4% (1,98 pg/mL; p<0,05) nas concentrações de PCR-us em 62% dos pacientes participantes. Porém,não houve diferença expressiva nos demais mediadores inflamatórios avaliados(IL-1ß, IL-4, IL-6, IL-10, MCP-1, VEGF). Foi demonstrada também redução significativa nos valores de circunferência da cintura (CC) de 1,2 cm ± 2,9 (p<0,05) após 60 dias de suplementação. Além disso, a CC correlacionou-se positivamente com os valores de TG (r = 0,70; p = 0,03) e de CT (r = 0,78; p = 0,01). Não foram observadas alterações significativas nos demais parâmetros antropométricos. Apesar da ausência de redução no peso corpóreo, este parâmetro esteve diretamente relacionado à variação nos valores de LDL-c (r = 0,69; p = 0,03) e inversamente associadoà ingestão de fibras (r = -0,78; p = 0,01). Os indivíduos não apresentaram modificações significativas ou expressivas no consumo de macronutrientes, ácidos graxos ou fibras. Por outro lado, a ingestão de AGMI esteve inversamente relacionada com os valores de TG (r = -0,66; p = 0,05). Os resultados indicaram que a suplementação com w-3 melhorou os parâmetros lipídicos e alguns marcadores inflamatórios nos indivíduos com IC submetidos a exercício físico supervisionado, evidenciando que pode ocorrer efeito sinérgico importante entre a ingestão de w-3 e a prática de atividade física. Com base nestes resultados, sugere-se que a suplementação de w-3 associada ao exercício físico supervisionado possa reduzir os fatores de risco associados à insuficiência cardíaca, como a dislipidemia e inflamação de baixo grau. <br> / Abstract : Heart failure (HF) is a pathological condition of advanced stages of heart diseases, leading to myocardial hypertrophy and dilatation, compromising cardiac performance. Physical exercise has been suggested as an effective non-pharmacological treatment for improving life quality and decreasing morbidity and mortality rates and re-hospitalization in HF patients. Omega-3 (n-3) supplementation has also been considered an efficient strategy for primary and secondary prevention of cardiovascular events in healthy individuals and heart disease patients, by reducing risk factors such as dyslipidemia and low-grade systemic inflammation. The aim of this study was to evaluate the effect of n-3 supplementation on lipid and inflammatory profile of HF patients, enrolled in a cardiac rehabilitation program. The study was characterized as a controlled clinical trial with nutritional intervention. All patients were male (n=16) with chronic, ischemic, hypertensive or idiopathic HF, classified as functional class II or III. Patients had serum total cholesterol (TC) above 150 mg/dL and triglycerides (TG) between 150 and 500 mg/dL, mean age was 58.8 ± 1.2 y and BMI 29.9 ± 1.1 kg/m2. Patients ingested 4.8 g of fish oil daily (2.8 g of n-3) and were submitted to supervised physical activities three times a week for 60 days. Blood samples were collected during baseline period (two samples in 30 days) and after 30 and 60 days of supplementation for laboratory analysis. Paired t-Student test was applied to detect temporal differences promoted by n-3 supplementation. Associations of food intake or anthropometric variables with laboratory parameters were assessed by Pearson or Spearman correlation. All analyses were considered significant with p=0.05. Omega-3 supplementation promoted significant reductions of TG levels by 21.6 mg/dL (11.8%) and 53.8 mg/dL (29.5%, p<0.001) and sd-LDL-cholesterol by 9.6 mg/dL (12.8%) and 10.7 mg/dL (16.4%, p<0.05) after 30 and 60 days, respectively. We also observed a reduction of 12.5 mg/dL (7.1%) in TC and 13.2 mg/dL (9.3%) in the non-HDL-cholesterol levels after 60 days (p<0.05). Furthermore, TNF-a concentrations had a significant reduction of 19.5% (2.7 pg/mL, p<0.05). In addition, CRP-us levels were decreased by 62.4% (1.98 pg/mL, p<0.05) in 62% of the evaluated patients. However, there was no difference in others inflammatory parameters assessed (IL-1ß, IL-4, IL-6, IL-10, MCP-1, VEGF). It was also demonstrated a significant reduction in the waist circumference (WC) values of 1.2 cm ± 2.9 (p<0.05) after 60 days of supplementation. Moreover, WC was positively correlated with TG values (r = 0.70; p = 0.03) and TC (r = 0.78; p = 0.01). No significant changes were observed in other anthropometric parameters. Despite the absence of reduction in the body weight, this parameter was directly related to LDL-c variation (r = 0.69; p = 0.03) and inversely associated with fiber intake (r = -0.78; p = 0.01). Individuals showed no significant changes in the consumption of macronutrients, fatty acids, and fiber. On the other hand, MUFA intake was inversely related to TG values (r = -0.66; p = 0.05). These results indicated that n-3 supplementation improved lipid parameters and some inflammatory markers in HF patients submitted to supervised exercise, showing that an important synergistic effect may occur between the n-3 intake and physical activity. Based on these results, we suggest that n-3 supplementation associated with supervised exercise may reduce the risk factors associated with heart failure, as dyslipidemia and low-grade inflammation.

O glutamato, principal neurotransmissor excitatório no sistema nervoso central (SNC), está envolvido em várias funções cerebrais e da retina, como aprendizado/memória, desenvolvimento e envelhecimento cerebral e função visual. No entanto, o aumento da concentração do glutamato na fenda sináptica pode levar a neurotoxicidade. A excitotoxicidade glutamatérgica está relacionada a várias desordens cerebrais, tanto agudas quanto crônicas. Manter o nível de glutamato em concentrações fisiológicas relevantes ao adequado funcionamento do SNC se faz necessário. Para tanto, existem transportadores específicos para o glutamato, responsáveis por controlar os níveis de glutamato na fenda sináptica. Os ácidos graxos essenciais ω3 vêm ganhando especial atenção de pesquisadores por seus efeitos sobre o SNC, tanto responsáveis pelo adequado desenvolvimento e funcionamento cerebral e da retina, quanto por sua ação neuroprotetora frente a patologias relacionadas com a excitotoxicidade glutamatérgica. Na presente tese, nós demonstramos que os ácidos graxos ω3 são importantes para a homeostasia do sistema glutamatérgico tanto no hipocampo quanto na retina de ratos. Uma dieta deficiente em ácidos graxosω3, mantida durante todo o período de desenvolvimento do SNC até a vida adulta, foi capaz de atrasar o desenvolvimento normal das sinapses glutamatérgicas, onde houve uma redução de proteínas sinápticas (NMDA, AMPA e α-CaMKII) no período pós-natal, promovendo alterações comportamentais na vida adulta de ratos, como comportamentos de hiperatividade e ansiedade. Os animais deficientes em ω3 também apresentaram déficits na memória aversiva de longa duração, que foi relacionado com uma baixa interação do receptor NMDA com a proteína cinase Fyn, bem como a redução dos níveis de DHAω3 e BDNF no hipocampo dos ratos. Os ácidos graxos ω3 preveniram as alterações sobre parâmetros do sistema glutamatérgico (queda na captação de glutamato, aumento de transportadores de glutamato GLAST e GLT-1) provocadas por um único evento convulsivo neonatal. Além disso, os animais deficientes em ácidos graxos ω3 apresentaram aumento no conteúdo de GFAP (proteína astrocitária) e redução no conteúdo de NeuN (proteína neuronal) independente do evento convulsivo. Os ácidos graxosω3 também preveniram o déficit de memória de curta duração na vida adulta dos ratos causado pela convulsão 5 neonatal. Na retina de ratos, a deficiência dos ácidos graxos ω3 causou alterações na captação de glutamato e no conteúdo do transportador GLT-1. Após um insulto isquêmico na retina, os animais deficientes em ácidos graxos ω3 apresentaram alterações em parâmetros do sistema glutamatérgico (queda na captação de glutamato, aumento de GLT-1 e EAAC1). Já nos animais que receberam ácidos graxos ω3, o conteúdo de GLT-1 foi maior tanto basal quanto isquêmico, e somente o EAAC1 foi modulado. Nossos resultados mostram a importância dos ácidos graxos ω3 em manter a homeostasia glutamatérgica, contribuindo para o adequado desenvolvimento, funcionamento e proteção do SNC e da retina. / The main excitatory neurotransmitter in central nervous system (CNS), glutamate, is involved in many functions in brain and retina, such as learning / memory, brain and retina development and aging, and visual process. However, increased glutamate concentrations in synaptic cleft could lead to neurotoxicity. Glutamate excitotoxicity was related to many neurological acute and chronic disorders. Keeping glutamate at relevant physiological concentrations to adequate CNS function is necessary. The high affinity glutamate transporters are responsible to maintain glutamate below neurotoxic levels, preventing excitotoxicity. The essential omega-3 fatty acids (ω3) have received attention from scientific community because of its effects on brain development and neuroprotection against pathologies related to glutamatergic excitotoxicity. In the present thesis, we demonstrated that dietary ω3 fatty acids are important for glutamatergic system homeostasis in the hippocampus and retina of rats. A ω3 deficient diet, maintain since gestation until adulthood, was capable to delay the normal glutamatergic synapse development, with a reduction in synaptic proteins (NMDA, AMPA and αCaMKII) in the postnatal period, promoting behavioral alterations in adulthood in rats (hyperactivity and anxiety-like behavior). The deficient animals also presented aversive long-term memory deficit, which was related to reduction in the interaction of NMDA receptor with Fyn kinase protein, as well as in DHA and BDNF hippocampal content in rats. Dietary ω3 fatty acids prevented alterations on glutamatergic system functionality (decrease in glutamate uptake activity, increase in glutamate transporters GLAST and GLT-1 contents) caused by one single neonatal seizures episode. Dietary ω3 fatty acids also prevented aversive short-term memory deficit in adulthood caused by neonatal seizures. In the retina, ω3 deficiency caused decrease in glutamate uptake and reduction in GLT-1 content in basal conditions. After ischemic insult in the retina, ω3 deficient rats presented alteration on parameters of glutamatergic system evaluated (decrease in glutamate uptake activity, increase in GLT-1 and EAAC1 transporters). In ω3 adequate rats, GLT-1 content was higher in basal and ischemic conditions, and only EAAC1 was increase after ischemia. Taking together, our data show the importance of dietary ω3 fatty acids to maintain glutamatergic system homeostasis, contributing to adequate development, function and protection of CNS and retina.

Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde para obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / Schizophrenia is considered a neurodevelopmental psychiatric disorder severe that usually affects the individual in the young stage. For this reason, prevention and early diagnosis become a goal to improve the long-term results. The omega 3 fatty acids (ω-3) have demonstrated efficacy for preventing the conversion of schizophrenia in a population of ultra high risk. The present study aimed to evaluate the effect of supplementation of ω-3 through behavioral and biochemical parameters in an animal model of schizophrenia induced by ketamine. The research used 144 male Wistar rats 30 days old that were separated into two groups for administration of ω-3 or vehicle for 15 days. Subsequently, these groups were subdivided into four groups of 12 mice for intervention with ketamine or saline for 7 days. The locomotor activity, social interaction test and memory tests were evaluated at day 52 of life of the animals. The blood was collected minutes before the animals were killed and serum obtained after 24 hours to evaluate the levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF). The animals were sacrificed after the behavioral tests and striatum, prefrontal cortex and hippocampus extracted for mRNA BDNF expression analysis. The results showed, for the times of 5, 10 and 15 minutes, there was an increase in locomotor activity in the ketamine group compared to control. It was observed in group ω-3 plus ketamine that hyperlocomotion caused by ketamine was prevented at 10 and 15 minutes upon administration of ω-3. Regarding the social interaction test, it was found that animals treated with ketamine did not show difference in latency to the start of the test compared to the control group. However, showed less contacts with each other, as well as a lower total time of interaction when compared to the control. The group ω-3 plus ketamine did not show impaired social interaction. This study showed that there was significant impairment of immediate memory, short and long term in the ketamine treated group compared to control. In group ω-3 plus ketamine, memories immediate, short and long term have been preserved. Serum levels of BDNF were significantly higher in ω-3 plus ketamine group compared to control, ω-3 and ketamine group. The results of the expression mRNA BDNF showed no significant difference among the four groups analyzed in different brain regions. These findings prove that the administration of ω-3 prevents the positive symptoms, negative and cognitive impairment in an animal model of schizophrenia induced by ketamine in the prodromal phase, providing thus, important evidence for future clinical trials in confirming the use of ω-3 to prevent this disorder. It also reinforces the beneficial role of fatty acids in brain protection of individuals at ultra high risk for psychosis. / The estimated new cancer cases worldwide in 2007 were 12 million, with 5.4 million cases diagnosed in developed and 6.7 millions in developing countries. The number of cancer-related deaths was 7.6 million, 2.9 million in developed and 4.7 million in developing countries. Malignant neoplasm ranks second (12.5%) as causes of death worldwide, surpassed by cardiovascular causes (19.6%). Gastric Cancer (GC) ranks fourth as the most frequent cause of cancer worldwide, with one million new cases in 2007, behind lung, breast and colon and rectum. 70% of new cases occur in developing countries. Currently, GC is the second most common cause of cancer deaths, accounting for 800,000 deaths annually. In Brazil, estimates for 2010 point to the occurrence of 489,270 new cases of cancer, and the GC occupying fifth place in attendance with 21,500 new cases. The acquisition of the migratory behavior of cancer cells is a prerequisite to break up organized tissue structures, invade and metastasize. Recently, the expression of proteins that block actin has been associated with the invasive behavior of tumors. The Cofilin is an actin-blocking protein, which regulates the actin cytoskeleton to maintain and depolymerize actin filaments. The interest for cofilin and its cascade have increased because of its relationship with tumor invasion, metastasis and be a potential prognostic factor in cancer. We conducted a retrospective study, observational, descriptive and analytical. We used all the pathological reports of patients undergoing gastrectomy for adenocarcinoma between June 2002 and June 2009, totaling 130 cases. Of these, 44 cases were selected randomly. The average age of patients was 68 years, with 63.6% of male sex. In assessing the depth of invasion, advanced lesions with involvement beyond the submucosa corresponded with 72.7% of cases. The diffuse type in Lauren's classification was the most prevalent with 68.1%. The bacterium H. pylori was positive in 72.7% of carcinomas. Lymph nodes involvement accounted for 70.4% of cases. At the end of the study 56.8% of patients were alive. When applied statistical tests to assess the relationship of cofilin with the other independent variables, only the depth of tumor invasion and the presence of positive lymph node were statistically significant. In conclusion, despite the cofilin is present in locally advanced tumors and lymph node metastases, and the small number of patients in the sample, we cannot conclude that it can be used as a prognostic factor.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:36:37Z : No. of bitstreams: 1 talon_lc_me_botfm.pdf: 202513 bytes, checksum: 424cb8103b61e4e540132f7f43225f75 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A síndrome metabólica (SM) é composta por uma constelação de doenças caracterizadas por resistência insulínica, dislipidemia aterogênica e hipertensão arterial, acompanhadas de comorbidades pró-trombóticas, pró-oxidantes e pró-inflamatórias. Apresenta, como principal fator de risco a obesidade e, como etiologia, o estilo de vida não saudável, pela inadequação alimentar e/ou inatividade física. A atenção primária efetiva se faz pela mudança do estilo de vida e, na intervenção alimentar, vem ganhando força a suplementação com ácidos graxos poli-insaturados ômega-3, pelas suas propriedades redutoras dos triglicerídios, da resistência insulínica, cardioprotetoras e anti-inflamatórias. O presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos adicionais dos AGPI ômega-3 sobre os componentes da SM e comorbidades de adultos submetidos a programa de modificação do estilo de vida (MEV). Em ensaio clínico prospectivo, foram estudados 61 indivíduos adultos (50 ± 13,8 anos), 85% mulheres, clinicamente triados para participarem de MEV, com supervisão multiprofissional. A amostra foi dividida em 2 grupos: o controle (G1, n = 26) apenas com MEV (exercício físico de caminhada e academia supervisionados e aconselhamento alimentar) e o grupo suplementado (G2, n = 35), com intervenção com AGPI ômega-3 (3g/dia) + MEV. A duração do experimento foi de 20 semanas, com avaliações nos momentos basal (M0), após 10 semanas (M1) e 20 semanas (M2) de MEV. As avaliações incluíram atividade (tempo de esteira e VO2max) e aptidão (força muscular) físicas, hábito dietético (IAS) e ingestão alimentar (recordatório de 24 horas), antropometria (IMC e CA), pressão arterial (PA) e biomarcadores plasmáticos de dislipidemia, resitência insulínica... / The metabolic syndrome (MS) consists of a constellation of disorders characterized by insulin resistance, atherogenic dyslipidemia and hypertension, accompanied by pro-thrombotic, pro-oxidant and pro-inflammatory comorbidities. Obesity is its major risk factor, and its etiology consists of unhealthy lifestyles due to inadequate diet and/or physical inactivity. Primary care is effective if lifestyle change and dietary intervention occur, and supplementation with omega-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) has gained strength as a result of its cardio-protective and anti-inflammatory properties in reducing triglycerides and insulin resistance. This study aimed to investigate the additional effects of omega-3 PUFA on the components of the metabolic syndrome and comorbidities of adults participating in a lifestyle change program (LSC). In a prospective clinical trial, we studied 61 adults (50±13.8 years), 85% of whom were women clinically screened to participate in LSC with multi-professional supervision. The sample was divided into two groups: control (G1, n=26), only undergoing LSC (supervised physical exercises which included walking and a fitness program as well as nutritional counseling) and the supplemented group (G2, n=35), intervention with omega- 3 PUFA (3 g/day) + LSC. The experiment lasted 20 weeks, with assessments at the baseline time (M0), after 10 weeks (M1) and 20 weeks (M2) of LSC. The assessments included physical activity (VO2max) and fitness (muscular strength), dietary habits (HEI) and food intake (24-hour recall), anthropometric measures (BMI and WC), blood pressure (BP) and plasma biomarkers for dyslipidemia, insulin resistance (HOMA-IR), oxidative (MDA) and inflammatory (CRP) stress. For statistical comparisons, we used the SAS software, version 9.2 for Windows, with significance... (Complete abstract click electronic access below)

Orientadora : Profª. Drª. Anete Curte Ferraz / Coorientadora : Profª. Drª. Janaína M. Zanoveli / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Fisiologia. Defesa: Curitiba, 11/12/2017 / Inclui referências : f. 57-66 / Resumo: A depressão é uma doença psiquiátrica grave, com uma grande prevalência durante a vida. De acordo com a Organização Mundial da Saúde aproximadamente 320 milhões de pessoas sofrem de depressão em todo o mundo. O tratamento atual é baseado na Teoria Monoaminérgica, porém muitas evidências apontam para o envolvimento da inflamação na patogênese da depressão. Alguns autores mostram que a ligação entre a inflamação e a depressão é feita pela enzima Indoleamina-2,3- dioxygenase (IDO), que é responsável por catabolizar o triptofano dando origem às kinureninas, o que leva à diminuição da síntese de serotonina e promove sintomas depressivos. Estudos já mostraram que compostos com atividade anti-inflamatória, como os Ácidos Graxos Poli-insaturados Ômega-3, apresentam atividade antidepressiva, e são capazes de aumentar os níveis de serotonina no hipocampo de ratos. Devido a essas evidências, nós hipotetizamos que o efeito antidepressivo do ômega- 3 está relacionado com suas propriedades anti-inflamatórias, levando à inibição da enzima IDO e consequentemente aumentando os níveis de serotonina. Para testar essa hipótese, realizamos dois experimentos independentes, nos quais os animais foram suplementados com óleo de peixe (rico em ômega-3) por 50 dias. Após a suplementação, foi realizada uma única injeção sistêmica com o Lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), capaz de induzir uma resposta inflamatória, e 24 horas após os animais foram submetidos aos testes do campo aberto e natação forçada modificado. No primeiro experimento, os animais receberam um pré-tratamento com com o inibidor competitivo da IDO 1-metil-DL-Triptofano (1-MT) e no experimento 2 os animais foram tratados com minociclina, um inibidor indireto dessa enzima. O pré-tratamento com esses inibidores foi feito 23h, 5h e 1h antes dos testes comportamentais. Após os testes, os animais foram ortotanasiados e os hipocampos obtidos para a quantificação de serotonina e seu metabólito ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA) através da técnica de HPLC e para a expressão da IDO através do western blot. A injeção com LPS foi capaz de induzir um comportamento tipo-depressivo, que foi bloqueado pelo 1-MT, pela minociclina e pela suplementação. Os animais suplementados apresentaram maior fequência de natação comparados aos animais tratados com 1-MT e minociclina. A suplementação e a minociclina foram capazes de diminuir a expressão da IDO, sem efeitos adicionais sobre esta enzima quando os tratamentos foram combinados. Como esperado, o 1-MT não foi capaz de diminuir a expressão da IDO, uma vez que esta droga inibe diretamente esta enzima, impedindo apenas sua atividade. Os dados neuroquímicos mostram que o LPS foi capaz de diminuir a concentração de serotonina e aumentar seu turnover, e esses efeitos foram bloqueados pelos compostos anti-inflamatórios minociclina e óleo de peixe, mas não pelo 1-MT. Ainda, a suplementação com óleo de peixe teve efeito antidepressivo relacionado com o aumento de serotonina no hipocampo. É importante destacar que os animais suplementados que receberam apenas injeções de salina apresentaram níveis de serotonina, expressão da IDO e frequência de natação semelhantes aos animais que foram suplementados e receberam os outros tratamentos combinados. Esse fato indica que a inibição da IDO, embora importante, não é a única explicação para o efeito antidepressivo do ômega-3, e que este composto aumenta os níveis de serotonina através de outros mecanismos. Palavras-chave: depressão, ômega-3, óleo de peixe, inflamação, LPS, Indoleamina- 2,3-Dioxigenase, IDO, serotonina / Abstract:Depression is a severe psychiatric disease, with a high prevalence during life. Is twice common in women and according to World Health Organization approximately 320 million people suffer from depression worldwide. The Monoaminergic Theory is the basis of current treatment, but there are many evidence pointing out to the role of inflammation on pathogenesis of depression. Depressed patients have an increased rate of autoimmune disorders, and patients with inflammatory diseases, like cancer, HIV and rheumatoid arthritis have higher rates of depression. In animal models, systemic injection of bacterial endotoxin lipopolysaccharide evokes an acute inflammatory response and 24h after the injection rodents exhibit a depressive-like behavior, seen by higher immobility in the forced swim test. The link between inflammation and depression is made by the enzyme Indoleamine-2,3-dioxygenase (IDO), which is activated by pro-inflammatory cytokines. This enzyme catabolizes tryptophan into kynurenines, decreasing the levels of serotonin and promoting depressive symptoms. Anti-inflammatory compounds, such as Omega-3 Polyunsaturated Fatty Acids, have antidepressant activity, increasing serotonin levels in hippocampus of rats. Here we hypothesized that this antidepressant effect of omega-3 is due to its antiinflammatory properties, and the mechanism is through IDO inhibition. In order to test this hypothesis, we performed two independent experiments, using the LPS model in fish-oil supplemented animals. In the first experiment, animals received a pretreatment with 1-MT and in the experiment 2 they were treated with minocycline. The use of these two inhibitors of IDO was made to test a possible potentiation of omega- 3 antidepressant activity. The supplementation was made for 50 days and LPS was injected 24h before the open field test and the modified forced swimming test. The pretreatment with the inhibitors was made 23h, 5h and 1h before these behavioral tests. After the tests, the hippocampi were obtained for quantification of serotonin and its metabolite, 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) by HPLC and IDO expression by western blot. We found a depressive-like state induced by LPS, which was blocked by 1-MT, Minocycline and fish-oil supplementation. Also, the supplemented animals presented higher swimming behavior compared to 1-MT and Minocycline. Minocycline and fish oil suppressed IDO expression, with no additional effects when these treatments were combined. LPS induced a decrease in serotonin levels and an increase in 5-HIAA/5-HT ratio, both blocked by the anti-inflammatory compounds minocycline and fish oil. The antidepressant-like behavior induced by omega-3 was related to an increase in serotonin levels in hippocampus, compared to all nonsupplemented groups. The fact that IDO expression in non-stressed animals is not significant, and the supplemented animals who received only saline presented higher levels of serotonin, support the idea that IDO inhibition is not the only explanation for antidepressant effect of fish-oil supplementation, and this compound increases serotonin through diffrent mechanisms. Key-words: depression, omega-3, fish oil, inflammation, LPS, Indoleamine-2,3- Dioxygenase, IDO, serotonin.

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Banca: Sueli Aparecida Calvi / Banca: Rita Cristina Chaim / Resumo: Atualmente a Aids é considerada doença crônica controlada com baixa morbidade e mortalidade. A terapia com antiretrovirais têm sido eficaz, porém associada com sérios efeitos metabólicos colaterais, dentre eles a hipertrigliceridemia..Ensaios epidemiológicos demonstram correlação entre níveis elevados de triglicérides, alterações de adipocitocinas e doença arterial coronariana.O uso do acido graxo omega-3( w-3) tem sido preconisado para a hipertrigliceridemia embora sem consenso. Avaliar o efeito do acido graxo ômega-3 em pacientes com HIV em tratamento antiretroviral (HAART) com níveis de triglicérides entre 200 e 400 mg/dl, correlacionando com os níveis de adipocitocinas. Foram estudados 17 pacientes de ambos os sexos com HIV/Aids em uso de antiretrovirais, no Serviço de Ambulatórios Especializados de Infectologia Domingos Alves Meira- UNESP, divididos em 2 grupos (G 1 e G 2)em dois momentos ( início e após 4 meses) todos com a mesma orientação alimentar e prática de atividade física. Ômega-3 foi preconizado no G1 . Em ambos os grupos foram avaliados: perfil antropométrico, hematimétrico, lipídico e imunológico. Dos 17 estudados , 7 eram do Grupo 1, 43% do sexo feminino,46,1±19,1 anos de idade, e o Grupo 2 foi composto por 10 pacientes, 40% do sexo feminino, 54,5± 25,4 anos de idade . Sobrepeso ocorreu em ambos os grupos, com tendência a melhora não muito significativa no Grupo 1 após 4 meses, e no Grupo 2 um leve aumento do peso no M2. Circunferência da cintura (CC), massa magra, gordura corporal, água corporal, perfil hematimétrico, imunológico não mostraram diferenças significativas nos dois grupos. Colesterol total e Triglicérides revelaram uma tendência a diminuir no M2 nos dois Grupos, o LDL teve um leve aumento no Grupo 1 no M2. As adipocitocinas mostraram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, AIDS is considered a chronic disease controlled with low morbidity and mortality. The antiretroviral therapy has been effective, but associated with serious metabolic side effects, including hypertriglyceridemia. Epidemiological trials demonstrate correlation between elevated triglyceride levels, changes in adipocytokines and arterial coronary disease. The use of omega-3 fatty acid (w -3) has been recommended to hipertrigliceridemia, although no agreement. Evaluating the effect of omega-3 fatty acid in patients with HIV on antiretroviral therapy (HAART) with triglyceride levels between 200 and 400 mg / dl, correlating with the levels of adipocytokines. We studied 17 patients of both sexes with HIV / AIDS on antiretroviral use in Specialized Outpatient Service of Infectious Diseases "Domingos Alves Meira" - UNESP, divided into two groups (G1 and G2) on two occasions (beginning and after four months) all with the same nutritional guidance and physical activity. Omega-3 has been recommended in G1. Both groups were evaluated: anthropometric profile, erythrocyte, lipid and immune systems. From the 17 studies, 7 were in Group 1, 43% were female, 46.1 ± 19.1 year-age; Group 2 comprised ten patients, 40% were female, 54.5 ± 25, 4 year-age. Overweight occurred in both groups, with a trend towards improvement not very significant in Group 1 after four months, and in Group 2, there was a slight weight increase in M2. Waist circumference (WC), lean mass, body fat, body water, erythrocyte and immune profiles showed no significant differences in the two groups. Total cholesterol and triglycerides showed a tendency to decrease in M2 in both groups, LDL increased slightly in Group 1 in M2. The adipocytokines showed a tendency to... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O glutamato, principal neurotransmissor excitatório no sistema nervoso central (SNC), está envolvido em várias funções cerebrais e da retina, como aprendizado/memória, desenvolvimento e envelhecimento cerebral e função visual. No entanto, o aumento da concentração do glutamato na fenda sináptica pode levar a neurotoxicidade. A excitotoxicidade glutamatérgica está relacionada a várias desordens cerebrais, tanto agudas quanto crônicas. Manter o nível de glutamato em concentrações fisiológicas relevantes ao adequado funcionamento do SNC se faz necessário. Para tanto, existem transportadores específicos para o glutamato, responsáveis por controlar os níveis de glutamato na fenda sináptica. Os ácidos graxos essenciais ω3 vêm ganhando especial atenção de pesquisadores por seus efeitos sobre o SNC, tanto responsáveis pelo adequado desenvolvimento e funcionamento cerebral e da retina, quanto por sua ação neuroprotetora frente a patologias relacionadas com a excitotoxicidade glutamatérgica. Na presente tese, nós demonstramos que os ácidos graxos ω3 são importantes para a homeostasia do sistema glutamatérgico tanto no hipocampo quanto na retina de ratos. Uma dieta deficiente em ácidos graxosω3, mantida durante todo o período de desenvolvimento do SNC até a vida adulta, foi capaz de atrasar o desenvolvimento normal das sinapses glutamatérgicas, onde houve uma redução de proteínas sinápticas (NMDA, AMPA e α-CaMKII) no período pós-natal, promovendo alterações comportamentais na vida adulta de ratos, como comportamentos de hiperatividade e ansiedade. Os animais deficientes em ω3 também apresentaram déficits na memória aversiva de longa duração, que foi relacionado com uma baixa interação do receptor NMDA com a proteína cinase Fyn, bem como a redução dos níveis de DHAω3 e BDNF no hipocampo dos ratos. Os ácidos graxos ω3 preveniram as alterações sobre parâmetros do sistema glutamatérgico (queda na captação de glutamato, aumento de transportadores de glutamato GLAST e GLT-1) provocadas por um único evento convulsivo neonatal. Além disso, os animais deficientes em ácidos graxos ω3 apresentaram aumento no conteúdo de GFAP (proteína astrocitária) e redução no conteúdo de NeuN (proteína neuronal) independente do evento convulsivo. Os ácidos graxosω3 também preveniram o déficit de memória de curta duração na vida adulta dos ratos causado pela convulsão 5 neonatal. Na retina de ratos, a deficiência dos ácidos graxos ω3 causou alterações na captação de glutamato e no conteúdo do transportador GLT-1. Após um insulto isquêmico na retina, os animais deficientes em ácidos graxos ω3 apresentaram alterações em parâmetros do sistema glutamatérgico (queda na captação de glutamato, aumento de GLT-1 e EAAC1). Já nos animais que receberam ácidos graxos ω3, o conteúdo de GLT-1 foi maior tanto basal quanto isquêmico, e somente o EAAC1 foi modulado. Nossos resultados mostram a importância dos ácidos graxos ω3 em manter a homeostasia glutamatérgica, contribuindo para o adequado desenvolvimento, funcionamento e proteção do SNC e da retina. / The main excitatory neurotransmitter in central nervous system (CNS), glutamate, is involved in many functions in brain and retina, such as learning / memory, brain and retina development and aging, and visual process. However, increased glutamate concentrations in synaptic cleft could lead to neurotoxicity. Glutamate excitotoxicity was related to many neurological acute and chronic disorders. Keeping glutamate at relevant physiological concentrations to adequate CNS function is necessary. The high affinity glutamate transporters are responsible to maintain glutamate below neurotoxic levels, preventing excitotoxicity. The essential omega-3 fatty acids (ω3) have received attention from scientific community because of its effects on brain development and neuroprotection against pathologies related to glutamatergic excitotoxicity. In the present thesis, we demonstrated that dietary ω3 fatty acids are important for glutamatergic system homeostasis in the hippocampus and retina of rats. A ω3 deficient diet, maintain since gestation until adulthood, was capable to delay the normal glutamatergic synapse development, with a reduction in synaptic proteins (NMDA, AMPA and αCaMKII) in the postnatal period, promoting behavioral alterations in adulthood in rats (hyperactivity and anxiety-like behavior). The deficient animals also presented aversive long-term memory deficit, which was related to reduction in the interaction of NMDA receptor with Fyn kinase protein, as well as in DHA and BDNF hippocampal content in rats. Dietary ω3 fatty acids prevented alterations on glutamatergic system functionality (decrease in glutamate uptake activity, increase in glutamate transporters GLAST and GLT-1 contents) caused by one single neonatal seizures episode. Dietary ω3 fatty acids also prevented aversive short-term memory deficit in adulthood caused by neonatal seizures. In the retina, ω3 deficiency caused decrease in glutamate uptake and reduction in GLT-1 content in basal conditions. After ischemic insult in the retina, ω3 deficient rats presented alteration on parameters of glutamatergic system evaluated (decrease in glutamate uptake activity, increase in GLT-1 and EAAC1 transporters). In ω3 adequate rats, GLT-1 content was higher in basal and ischemic conditions, and only EAAC1 was increase after ischemia. Taking together, our data show the importance of dietary ω3 fatty acids to maintain glutamatergic system homeostasis, contributing to adequate development, function and protection of CNS and retina.

PIMENTEL, Catarina Sofia Gonçalves, também é conhecida em citações bibliográficas por: GONÇALVES PIMENTEL, Catarina Sofia / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-06T22:02:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ricielle Lopes Augusto.pdf: 2494238 bytes, checksum: a8a7c7802ad6141b292e2129ae3e928e (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-14T23:24:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ricielle Lopes Augusto.pdf: 2494238 bytes, checksum: a8a7c7802ad6141b292e2129ae3e928e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-14T23:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ricielle Lopes Augusto.pdf: 2494238 bytes, checksum: a8a7c7802ad6141b292e2129ae3e928e (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CNPq / Evidências recentes têm indicado que a Dieta Básica Regional (DBR), usada como modelo de má-nutrição severa multifatorial, contém elevada proporção de ácido linolênico e baixa de ácido linoleico, sendo capaz de aumentar a incorporação do ácido docosahexaenóico (DHA) no cerebelo e hipocampo, mas não no córtex cerebral de ratos adultos. Neste trabalho investigamos se a má-nutrição induzida pela DBR é capaz de alterar a capacidade antioxidante do cerebelo de forma diferenciada em relação ao córtex cerebral, em ratos jovens e adultos. A má-nutrição materna foi induzida 30 dias antes do acasalamento, durante a gestação e aleitamento pela DBR. Três grupos experimentais foram analisados: grupo controle, grupo desnutrido até 90 dias e grupo desnutrido até o desmame e então submetido à reposição nutricional até a vida adulta. Parâmetros relacionados ao status oxidativo, como, níveis de lipoperoxidação (LP), níveis de glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) e atividade das enzimas antioxidantes, catalase (CAT) e superóxido dismutase total (t-SOD), estimação de espécies reativas de oxigênio (ROS), nos níveis de óxido nítrico (NO) e nicotinamida adenina dinucleótido reduzida (NADH) e/ou fosfato reduzida (NADPH), foram analisados em homogenados de córtex cerebral e cerebelo. Nos animais jovens desnutridos houve maiores níveis de ROS e LP no córtex cerebral (~53%) e menores níveis no cerebelo (72% e 20%) em relação ao grupo controle. Consistentemente, menor (~35%) e maior (~153%) atividade da t-SOD foi detectada respectivamente nessas regiões em relação ao controle. A atividade da CAT não foi diferente no córtex cerebral, mas foi maior (~38) no cerebelo dos animais desnutridos comparados ao grupo controle. Em animais adultos desnutridos, o equilíbrio redox foi mantido no cerebelo e recuperado no córtex cerebral (níveis mais baixos de ROS e LP e maior razão GSH/GSSG). Produção NO foi prejudicada pela desnutrição em qualquer idade, principalmente no cerebelo. Os resultados evidenciam uma menor vulnerabilidade do cerebelo ao insulto oxidativo induzido pela DBR quando comparado ao córtex cerebral. Embora as diferenças no estágio de desenvolvimento e o gasto metabólico das duas regiões devam ser considerados, os dados sugerem que mesmo diante de uma deficiência nutricional multifatorial, uma baixa razão nos níveis de ômega 6/ômega 3 na dieta e uma menor produção de NO pode favorecer a reserva antioxidante em regiões encefálicas onde a incorporação de DHA é favorecida. / Recent evidence has indicated that the Regional Basic Diet (RBD), used as multifactorial severe malnutrition model, contains a high proportion of alpha-linolenic acid and low proportion of linoleic acid, being able to increase the incorporation of docosahexanoic acid in the cerebellum and hippocampus, but not in cerebral cortex of adult rats. In this work we investigated whether malnutrition induced by RBD can differentially alter the antioxidant capacity of the cerebellum and cerebral cortex in young and adult rats. Maternal malnutrition was induced 30 days before mating, during pregnancy and lactation by RBD. Three experimental groups were analyzed: control group, malnourished group up to 90 days and malnourished group until weaning and then submitted to nutritional supplementation to adulthood. Parameters related to oxidative status, such as lipid peroxidation levels (LP), reduced (GSH) and oxidized (GSSG) glutathione levels and the activity of antioxidant enzymes, catalase (CAT) and superoxide dismutase total (T-SOD), estimation of reactive oxygen species (ROS), nitric oxide levels (NO) and reduced nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) and / or phosphate reduced (NADPH) were analyzed in homogenates of cerebral cortex and cerebellum. In young animals malnourished there were higher levels of ROS and LP in the cerebral cortex (~ 53%) and lower levels in the cerebellum (72% and 20%) compared to the control group. Consistently lower (~ 35%) and higher (~ 153%) activity of t-SOD was detected respectively in these regions compared to the control. The CAT activity was not different in the cerebral cortex, but was higher (~ 38) in the cerebellum of the malnourished animals compared to the control group. In malnourished animals adults, the redox balance was maintained in the cerebellum and the cerebral cortex recovered (lower levels of LP and increased ROS and GSH / GSSG ratio). NO production was impaired by malnutrition at any age, especially in the cerebellum. The results show a lower vulnerability of the cerebellum to oxidative insult induced by DBR compared to the cerebral cortex. Although the differences in the development stage and the metabolic cost of the two regions must be considered, the data suggest that even taken into account the multifactorial nutritional deficiency, a low ratio in the levels of omega 6/omega 3 in the diet and a smaller production of NO, can favor antioxidant resource in brain regions where the DHA incorporation is favored.

Orientador: Maria Regina Bueno Franco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-02T22:34:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Visentainer_JesuiVergilio_D.pdf: 849502 bytes, checksum: 486822a4271b4e239876fac706e3217e (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado