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Produção de cartilagem articular porcina e cultura de condrócitos humanos

Godoy, Camila Schiavinatto January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T21:05:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 330226.pdf: 1644101 bytes, checksum: 190777e8fbb974fe70662898f0ff7c34 (MD5) Previous issue date: 2014 / Cartilagem articular danificada ou doente frequentemente leva à degeneração progressiva que resulta em uma diminuição acentuada na qualidade de vida. Engenharia de tecidos, um campo em expansão dentro das modernas ciências biomédicas, promete a criação de substitutos viáveis para falência total ou parcial de órgãos ou tecidos. Atuais abordagens da engenharia de tecidos baseiam-se, essencialmente, na restauração da estrutura de tecidos patologicamente alterados com base no transplante de células em combinação com matrizes de suporte e biomoléculas. A capacidade de manipular a estrutura do tecido e reconstituir a função in vitro tem tremendas implicações clínicas e é provável que tenha um papel chave em terapias celulares e genéticas nos próximos anos. O presente estudo é focado na geração de implantes condrais para a reparação de cartilagem articular, que consistem em substitutos da cartilagem in vivo pela cartilagem produzida in vitro. Culturas de condrócitos humanos foram realizadas com o intuito de avaliar a eficácia dos soros fetais bovinos, bem como dos fatores de crescimento. A combinação mais eficaz para a cultura tridimensional de condrócitos humanos foi atingida pela suplementação com soro FBS Superior e pelo enriquecimento com IGF-1. Rediferenciação de células porcinas foi realizada, expandidas em gel de alginato, seguida de formação de cartilagem tridimensional em culturas de alta densidade celular. Neste trabalho, diferentes fatores de crescimento para a estimulação da re-diferenciação e formação de cartilagem foram utilizados para melhorar a qualidade dos implantes condrais. Foi demonstrado que a suplementação do meio com fatores de crescimento tem efeitos significativos sobre as propriedades da matriz. Nas amostras porcinas cultivadas com a adição dos fatores de crescimento IGF-1 e TGF-ß1 durante a cultura de alginato, os cortes histológicos mostraram a formação de tecido homogêneo e coloração intensa de colágeno tipo II.<br> / Abstract: Damaged or diseased articular cartilage often leads to progressive debilitation which results in a marked decrease in quality of life. Tissue Engineering, a growing field within the modern biomedical sciences, promises the creation of viable substitutes for total or partial failure of organs or tissues. This represents the fusion of a fast developing of cellular and molecular biology, supported, on the one hand, by the chemical materials, and the other by the biomechanical engineering. Current approaches to tissue engineering are based mainly in the restoration of pathologically altered tissue structure based on cell transplantation in combination with support matrices and biomolecules. The ability to manipulate the tissue structure and reconstitute the function in vitro has tremendous clinical implications and is likely to have a key role in gene and cell therapies in the coming years. The present study focuses on the generation of chondral implants for articular cartilage repair, which consist of cartilage substitutes in vivo, by the in vitro cartilage produced. Cultured human chondrocytes were performed in order to evaluate the effectiveness of fetal bovine serum and growth factors. The most effective combination for the three-dimensional culture of human chondrocytes was achieved by supplementation with whey Superior FBS and the enrichment with IGF-1. Re-differentiation of porcine cells was performed, expanded in alginate gel, then the formation of three-dimensional cartilage cultures at high cell density. In this work, different growth factors for the stimulation the re-differentiation and cartilage formation were used to improve the quality of chondral implants. Was shown that supplementation of the medium with growth factors has significant effects on the properties of the matrix. In the samples cultured with the addition of growth factors IGF-1 and TGF-ß1 during the culture alginate, histological sections showed the formation of homogeneous tissue and intense staining of type II collagen.
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Comportamento ingestivo, desempenho, características de carcaça e componentes não-carcaça de cordeiros Morada Nova alimentados com diferentes níveis de energia metabólizavel / Ingestive behavior, performance, carcass characteristics and non-carcass components of Morada Nova lambs fed different levels of metabolizable energy

Camilo, Danilo de Araújo January 2011 (has links)
CAMILO, D. A. Comportamento ingestivo, desempenho, características de carcaça e componentes não-carcaça de cordeiros Morada Nova alimentados com diferentes níveis de energia metabólizavel. 2011. 99 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-12-05T21:45:23Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_dacamilo.pdf: 840069 bytes, checksum: 300a3da9f4646bd69dfc7045c2ba7ef4 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-22T16:13:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_dacamilo.pdf: 840069 bytes, checksum: 300a3da9f4646bd69dfc7045c2ba7ef4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-22T16:13:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_dacamilo.pdf: 840069 bytes, checksum: 300a3da9f4646bd69dfc7045c2ba7ef4 (MD5) Previous issue date: 2011 / The objective of this study was to evaluate the ingestive behavior, average daily weight gain (ADG), feed conversion (FC), feed efficiency (FE), carcass characteristics, commercial cuts weights and yield, weight of gastrointestinal content and compartments, weight and yield of internal organs of Morada Nova growing lambs fed different levels of metabolizable energy (ME). 32 lambs, non-castrated, with average initial body weight of 12.12 ± 1.69 kg and approximately 60 days of age were used. Animals were distributed into four experimental treatments determined by different levels of metabolizable energy (1.28, 1.72, 2.18 and 2.62 Mcal/kg DM), in a randomized block design with eight replicates per treatment. Tifton 85 hay was used as roughage. Lambs were slaughtered sequentially as the group of animals of each treatment reached an average of 25 kg of body weight. Increasing linear effect was observed of metabolizable energy levels (P<0.05) over dry matter (DM) intake and decreasing linear effect for neutral detergent fiber (NDF) intake, both expressed in g/day, %BW e g/kg0,75. Eating, ruminating and total chewing times, expressed in h/day, decreased linearly (P<0.05) with increasing levels of energy in the rations. Idle time, in turn, increased linearly (P<0.05). Eating and rumination efficiencies were influenced by the energy levels (P<0.05) expressed in g DM/h. The number of ruminal boluses, number of chews and chews per ruminal bolus were not affected by the levels of ME. However, time spent chewing per ruminal bolus was influenced (P<0.05). Increased linear effect (P<0.05) was observed for ADG, without affecting, however FC and FE. Carcass traits such as: empty body weight, hot carcass weight and yield, cold carcass weight and yield, loss by cooling and biological yield were not affected (P>0.05) by the increasing levels of dietary energy. Increased linear effect (P<0.05) was also observed for ribeye area and decreased linear effect (P<0.05) for loss by fasting with the increasing of ME levels. The levels of energy also decreased (P<0.05) the weight of the cuts shoulder and leg (%), and increased linearly the neck (kg), rib, breast and flank expressed in kg and%. There was no effect of energy levels (P>0.05) on weight of gastrointestinal content. Increased linear effect (P<0.05) was observed for the weights of heart, the group of organs lungs, trachea, esophagus and tongue (PTEL), liver and spleen, expressed in kg. Regarding the compartments of the gastrointestinal tract, it was observed increased linear effect (P<0.05) only for rumen-reticulum, in %, and small intestine, in kg. The perirenal, omental and mesenteric fats were also influenced by the energy levels (P<0.05) with linear increase when expressed in kg and %. It was concluded that the increase of ME levels of diets influences the ingestive behavior, promote increases in ADG and ribeye area, and reduction in loss by fasting. Regarding the weights of cuts, levels of ME reduce shoulder and leg and increase neck, rib, chest and flank. Levels of ME also influence positively weight and yield of internal organs, viscera and fats of Morada Nova lambs during the growing period. / Objetivou-se com o presente estudo avaliar o comportamento ingestivo de ovinos, ganho de peso médio diário (GMD), conversão alimentar (CA), eficiência alimentar (EA), características de carcaça, pesos e rendimento dos cortes comerciais, peso do conteúdo e dos compartimentos gastrointestinais, peso e rendimento dos órgãos internos de ovinos Morada Nova em crescimento alimentados com diferentes níveis de energia metabolizável (EM). Foram utilizados 32 animais, não-castrados, peso corporal médio de 12,12 ± 1,69 kg e aproximadamente 60 dias de idade. Os animais foram distribuídos em quatro tratamentos experimentais determinados por diferentes níveis de EM (1,28; 1,72; 2,18 e 2,62 Mcal/kg de MS), em delineamento em blocos casualizados, com oito repetições por tratamento. O feno de Tifton 85 foi utilizado como volumoso. Os cordeiros foram abatidos seqüencialmente, à medida que o grupo de animais de cada tratamento atingia a média de 25 kg de peso vivo. Foi observado efeito linear (P<0,05) crescente dos níveis de energia metabolizável sobre consumo de matéria seca (MS) e decrescente para o consumo de fibra em detergente neutro (FDN), ambos expressos em g/dia, %PV e g/kg0,75. Os tempos de alimentação, ruminação e mastigação total, expressos em h/dia, diminuíram linearmente (P<0,05) com o aumento dos níveis energéticos das rações. O tempo de ócio, por sua vez, aumentou linearmente (P<0,05). As eficiências de alimentação e ruminação foram influenciadas pelos níveis de energia (P<0,05) expressas em g MS/h. O número de bolos ruminais, número de mastigações merícicas por dia e número de mastigações merícicas por bolo ruminal não foram influenciados (P>0,05) pelos níveis de EM das rações. Para o tempo de mastigações merícicas por bolo ruminal houve efeito significativo (P<0,05). Verificou-se efeito linear crescente (P<0,05) dos níveis de EM sobre o GMD sem afetar, no entanto a CA e EA. As características de carcaça: peso de corpo vazio, peso e rendimento de carcaça quente, peso e rendimento de carcaça fria, perda por resfriamento e rendimento biológico não foram influenciados (P>0,05) pelos aumentos nos níveis de energia da dieta. Houve efeito linear crescente dos níveis de energia sobre a área de olho de lombo e perda por jejum (P<0,05). Observou-se ainda efeito linear decrescente dos níveis de EM (P<0,05) sobre o peso dos cortes paleta e perna em %, e crescente sobre os pesos de pescoço em kg e costela, peito e fraldinha expressos em kg e %. Não foi observado efeito (P>0,05) dos níveis de energia sobre o peso do conteúdo gastrointestinal. Verificou-se efeito linear crescente (P<0,05) dos níveis de EM sobre os pesos do coração, do conjunto de órgãos: pulmões, traquéia, esôfago e língua (PTEL), do fígado e baço, expressos em kg. Em relação aos compartimentos do trato gastrointestinal foi observado efeito linear crescente (P<0,05) dos níveis de EM somente sobre o rúmen-retículo em %, e intestino delgado em kg. As gorduras perirenal, omental e mesentérica também foram influenciados pelos níveis de energia (P<0,05) com incremento linear para os pesos em kg e %. Conclui-se que o aumento dos níveis de energia metabolizável da ração influencia o comportamento ingestivo de ovinos e proporciona aumentos no GMD, área de olho de lombo, e redução na perda por jejum. Em relação aos pesos dos cortes comerciais o aumento nos níveis de EM reduz o peso de paleta e perna e aumenta os pesos do pescoço, costela, peito e fraldinha. O nível de EM das rações influencia positivamente no peso e rendimento dos órgãos internos, vísceras e gorduras de ovinos Morada Nova em crescimento.
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Atuação do enfermeiro no processo de doação de órgãos : entrevista familiar

Heberle, Luana Cristina January 2017 (has links)
Orientadora: Profª Drª Elizabeth Bernardino / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação Mestrado Profissional em Enfermagem. Defesa: Curitiba, 04/08/2017 / Inclui referências : f.86-91 / Resumo: O presente trabalho refere-se à atuação do enfermeiro na entrevista familiar no processo de doação de órgãos e tecidos para transplante, com o objetivo de elaborar um guia de orientação para a execução desta complexa etapa. O método da pesquisa caracteriza-se como descritivo e exploratório, de abordagem qualitativa. Os participantes da pesquisa são enfermeiros dos estados do Paraná, Santa Catarina e São Paulo, que atuam em Central de Notificação, Captação e Distribuição de Órgãos, ou em Organizações de Procura de Órgãos, ou são membro de Comissão Intra Hospitalar de Doação de Órgãos e Tecidos para Transplante que executam no processo a etapa da entrevista familiar ou docentes universitários que educam e pesquisam sobre a temática. Após a aprovação do projeto pelo comitê de ética em pesquisa, a seleção dos participantes foi por "Amostragem Bola de Neve", totalizaram 21 participantes. Para a elaboração do guia através do consenso foi empregada a Técnica Delphi. Foi organizado um guia inicial com orientações, para serem pontuadas entre manter, excluir ou reformular, o instrumento foi enviado aos participantes pela plataforma de pesquisa Survey Monkey®, totalizando três rodadas com consenso mínimo estabelecido de 80% e, para a análise dos dados foi empregada a análise de conteúdo. Na primeira rodada foram enviadas 60 questões, 19 participantes responderam, totalizaram 70 comentários, 14 questões obtiveram 100% de consenso, uma foi excluída. Após a análise de conteúdo o guia foi reenviado com 51 questões para a segunda rodada, na qual 16 respondentes participaram, 34 comentários, e, apenas 6 questões não atingiram o consenso mínimo estabelecido, sendo uma excluída e 5 reformuladas e reenviadas. Na terceira rodada 15 participantes completaram a pesquisa, não houve comentários e as questões restantes alcançaram o consenso de 80% ou mais. Os resultados da pesquisa evidenciaram quais as orientações e técnicas são prioritárias na etapa da entrevista familiar no processo de doação. O produto final é um guia de orientação para a entrevista familiar no processo de doação de órgãos e tecidos para transplante, composto de 50 orientações subdivididas em três tópicos referentes ao entrevistador, local da entrevista e entrevista familiar, o qual pode aprimorar a atuação do enfermeiro, e ser utilizado como material auxiliar em capacitações e treinamentos. Palavras-chave: Enfermagem; Entrevista; Família; Obtenção de Tecidos e Órgãos. / Abstract: The present work refers to the nurse's role in the family interview in the process of donating organs and tissues for transplantation, with the objective of elaborating a guideline for the implementation of this complex stage. The research method is characterized as descriptive and exploratory, with a qualitative approach. The research participants are nurses from the states of Paraná, Santa Catarina, and São Paulo, who work in a Notification Center, Organ Procurement and Distribution, or in Organ Procurement Organizations, or are members of the Intra Hospital Organ Donation Committee and Tissues for Transplantation that perform on the stage of the family interview or university teachers who educate and research on the subject. After the approval of the project by the ethics committee, the selection of the participants was by "Snowball Sampling", totaling 21 participants. The Delphi technique was used to construct the guide through consensus. An initial guideline was organized, to be scored between maintaining, deleting or reformulating, this instrument was sent to the participants through the Survey Monkey® platform, totaling three rounds with a minimum consensus of 80% and, for data analysis, content analysis. In the first round 60 questions were sent, 19 participants answered, totaled 70 comments, 14 questions obtained 100% consensus, one was excluded. After the content analysis the guide was resent with 51 questions for the second round, in which 16 respondents participated, 34 comments, and only 6 questions did not reach the minimum consensus established, one being excluded and 5 reformulated and resubmitted. In the third round 15 participants completed the survey, there were no comments and the remaining issues reached a consensus of 80% or more. The results of the research showed that the guidelines and techniques are a priority in the stage of the family interview in the donation process. The final product is a guideline for the family interview in the process of donating organs and tissues for transplantation, composed of 50 guidelines subdivided into three topics pertaining to the interviewer, interview site and family interview, which can improve the nurses' performance, and be used as auxiliary material in training. Keywords: Nursing; Interview; Family; Obtaining Tissues and Organs.
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Características estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos recuperados do epidídimo

Cunha, Andrielle Thainar Mendes 12 February 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2015. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-06-15T14:23:55Z No. of bitstreams: 1 2015_AndrielleThainarMendesCunha.pdf: 1263718 bytes, checksum: d3e361eee393e655519a6623e0bb6ce0 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-06-15T14:24:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_AndrielleThainarMendesCunha.pdf: 1263718 bytes, checksum: d3e361eee393e655519a6623e0bb6ce0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-15T14:24:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_AndrielleThainarMendesCunha.pdf: 1263718 bytes, checksum: d3e361eee393e655519a6623e0bb6ce0 (MD5) / A utilização de espermatozoides do epidídimo (EP) em técnicas de reprodução assistida tem um papel importante na multiplicação e armazenamento de material genético. Entretanto, melhor conhecimento sobre o comportamento fisiológico destes espermatozoides é necessário para otimizar a sua utilização. Objetivou-se avaliar a viabilidade, resistência e longevidade de EP de sete touros da raça Gir, durante e após a criopreservação, usando os espermatozoides do ejaculado (EJ) como controle. O ejaculado foi coletado através de eletroestimulação, posteriormente os animais foram castrados e os espermatozoides da cauda do epidídimo foram coletados pelo método de extravasamento. Primeiramente, verificou-se a resistência dos EJ e EP diante à criopreservação, as células foram avaliadas logo após a recuperação, após quatro horas de refrigeração e após o descongelamento. Em uma segundo etapa, foi avaliada a longevidade após a criopreservação. Foram utilizados três grupos de espermatozoides do EJ, do EP e um grupo em que EP foram incubados com plasma seminal (EPP). Após o descongelamento amostras dos três grupos foram incubadas por zero, três, seis e 24 horas. Em cada momento foi avaliada a motilidade total e progressiva, integridade de membrana plasmática, integridade acrossomal, morfologia espermática capacitação. Finalmente foi avaliada a capacidade dos espermatozoides do epidídimo de se ligarem às células da tuba uterina (CTU). Para isso foram utilizados os grupos EJ, EP e EPP, foram co-incubados, com CTU por zero, três, seis e 24 horas. Devido ao resultado obtido, um segundo teste foi realizado utilizando testículos de quatro touros, coletados em abatedouro. Um testículo de cada animal foi utilizado para o grupo de EP criopreservado (EP-C) e o outro para o grupo de EP fresco (EP-F). Os dados foram analisados usando procedimento GLIMMIX do programa SAS (P≤0,05). Os EP apresentaram características de qualidade semelhantes aos do EJ frescos e após a criopreservação (P>0,05). Entretanto, foram mais resistentes à refrigeração do que os do EJ, apresentado maior MT (79,8±4,5 e 56,8±5,6), maior MP (46,1±3,5 e 29,2±3,2) e maior porcentagem de acrossoma íntegro (68,7±5,8 e 48,5±6,1). Após o descongelamento, e 6h de incubação os grupos EP e EPP comparados com o EJ apresentaram maior porcentagem de membrana plasmática íntegra (29±4,3, 28,2±4,2 e 16,4±3,4), maior porcentagem de espermatozoides com acrossoma intacto (31,6±3,8, 31,6±3,8 e 19,9±3,2) e maior porcentagem de espermatozoides não capacitados (81±3,5, 80,9±3,5 e 70,3±3,7). O número de espermatozoides ligados após a co-incubação das CTU com EJ, EP ou EPP não diferiu (P>0,05) em nenhum grupo, a análise dentro de cada grupo mostrou que ambos apresentaram queda gradativa no número de espermatozoides ligados às CTU, sendo que o menor número foi observado às 24 h para todos os grupos. No segundo teste de ligação, o grupo EP-F apresentou maior numero de células ligadas aos 30 min (130,9±21,2) e às 24 horas (131,7±21,2) de incubação do que o grupo EP-C aos 30 min (88±21,2) e 24 h (20,4±21,2). Pode-se concluir que EP são mais resistentes à refrigeração dos que os do EJ, apresentam maior longevidade e características de capacitação tardia, quando comparados ao EJ. Além disso, os EP se ligam às CTU da mesma forma que os EJ, no entanto a criopreservação pode afetar esta ligação. / The use of epididymal sperm (ES) in assisted reproductive technologies is an important tool form multiplication and conservation of genetic material. However, a better understanding of several aspects of those sperm physiology is needed to optimize its use. The aim of this study was to evaluate the strength, the post thawed viability, longevity and sperm characteristics behavior of ES from 7 Gir bulls, during and after cryopreservation, using ejaculated sperm (EJ) as a control. After ejaculated sperm was collected the testis were removed and sperm from the cauda epididymis were recovered First we evaluate the resistance of ES and EJ to cryopreservation, sperm were evaluated just after recovering, after 4 h of cooling and after freezing. Then, we evaluate the post thawing longevity by examining the sperm after different periods of incubation. Three groups were used ES, EJ, and a third group, in which ES was incubated with seminal plasm for 10 min after thawed (ESS). After thawing, samples from the 3 groups were incubated for 0, 3, 6 e 24 h. In each moment they were evaluated for total motility and progressive motility, plasm membrane integrity. acrosome integrity, morphology and capacitation. Finally, we evaluated the ability of ES, EJ and ESS to bind to oviduct epithelium cells (OEC), Samples from EJ, EP e EPP groups were co-incubated with OEC for 0, 3, 6 e 24 h. Due to the results obtained, another test had to be done to evaluated if the cryopreservation process was affecting ES binding. To do that we used testis form 4 bulls collected at slaughter house. From each animal one testis was used for the fresh sperm (ES-F) and the other for the frozen sperm (EP-C). Data analysis was performed using GLIMMIX from SAS (P≤0.05). Fresh and cryopreserved ES presented all quality parameters similar (P>0.05) to the EJ However, after cooling at 4°C, ES showed to be more resistance to cold than the EJ presenting greater TM (79.8±4.5 and 56.8±5.6), greater PM (46.1±3.5 and 29.2±3.2) and higher percentage of cells with intact acrosome (68.7±5.8 and 48.5±6.1) than EJ. After thawed at 6 h of incubation ES and ESS compared to EJ had a higher percentage of intact membranes (29±4.3, 28.2±4.2 and 16.4±3.4), higher percentage of cells with intact acrosome (31.6±3.8 31.6±3.8 and 19.9±3.2) and higher percentage of non-capacitated sperm (81±3.5, 80.9±3.5 and 70.3±3.7). The number of bounded sperm after co-incubation with OEC was similar (P>0.05) for EJ, ES and ESS groups. The analysis within the group showed that all had a decreased on the number of bounded sperm, with the lowest number of bounded sperm found at 24 h of incubation. In the second biding test the group EF had a higher number of bounded sperm at 30 min (130.9±21.2) and at 24 h (131.7±21.2) of incubation than the EC (30 min=88±21.2 and 24 h=20.4±21.2). It can be concluded that ES are more resistant to cooling than the EJ, presenting a greater longevity and a delay on capacitation process than the EJ. In addition, ES binds to OEC similarly to EJ; however cryopreservation can affect that binding.
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A subversão da morte : um estudo antropológico sobre as concepções de morte encefálica entre médicos

Macedo, Juliana Lopes de January 2008 (has links)
Este trabalho pretende explorar a construção científica do conceito de morte encefálica e a maneira como ele foi incorporado na prática médica. Até 1968, do ponto de vista biológico, o que determinava a morte do corpo era a parada cardíaca. Descobertas como o coma dépassé (um estágio de coma considerado irreversível) e o ventilador mecânico (que substitui o sistema respiratório) tornaram possível que pacientes antes considerados mortos, sobrevivessem por um período indeterminado. Aliada a esta questão, temos técnicas mais avançadas de cirurgias de transplantes de órgãos, mas um número escasso de órgãos que podem ser transplantados. Desse modo, em 1968 foi formado um Comitê pela Escola de Medicina de Harvard que definiu o coma dépassé como morte encefálica. A fim de compreender a operacionalização da morte encefálica na prática médica, foram entrevistados médicos que atuam em Unidades de Terapia Intensiva e médicos que pertencem a equipes de transplantes. Os dados obtidos junto aos informantes demonstram que a morte encefálica é um conceito envolto em ambigüidades e incoerências. A morte encefálica é referida como a morte técnica em oposição à morte natural, não significa a morte biológica do corpo, e representa uma situação de liminariedade, na qual o “ser” nesta condição não é mais o que era antes do evento da morte encefálica (uma pessoa, um paciente), mas ainda não adquiriu o status de morto, pois o coração permanece funcionando. Além disto, foi verificado que o conceito de morte encefálica não está isento de interesses dos atores envolvidos nesta questão. Estes interesses revelam as posições de cada ator no campo médico, e as estratégias usadas para legitimar ou subverter o conceito. Nesse sentido, pretendi contextualizar a morte encefálica enquanto um conceito produzido na esfera científica, demonstrando que ele é datado e localizado social e historicamente. Assim, a morte encefálica só faz sentido na sociedade moderna e ocidental, na qual a ciência tem uma importante centralidade na definição de “verdades”. / This paper intends to explore the scientific construction of the concept of the brain death and the way it was incorporated on the medical practices. Untill 1968, from the biological point of view, what determined the death of the body was the cardiac arrest. Discoveries such as the dépassé coma (a stage of coma considered to be irreversible) and the artificial ventilating (thats substitutes the respiratory system) made possible that pacients that before would be considered death to survive for an indeterminate period of time. Allied to this question, there are more developed techniques of organ transplant surgeries, but a scarce number of organs that can be transplanted. This way, in 1968 the Harvard Medical School Comitee was formed and it defined the dépassé coma as brain death. To try to understand how the brain death acts on the medical practices, doctors that work on the Intensive Care Units and those who belong to trannsplant´s teams were interviewed. The data obtained from the informers show that the brain death is a concept that is involved on ambiquities and incoherences. The brain death is related as technical death in opposition to the natural death, it doesen´t mean biological death of the body, and it represents a situation of uncertain on which the “being” on this conditions is no longer what it was before the event of the brain death (a person, a pacient), but still hasn´t acquired the status of death, since the heart is still working. Besides that, it was verified that the concept of brain death is not exempt of the interests of the actors involved on this question. This interests reveal the positions of each actor on the medical field, and the strategies used to legitimize or to subvert the concept. On this sence, I intended to put a context on the encefálica death as a concept produced on the scientific area, showing that it is dated and located socially and historically. Thus, the brain death only makes sence on modern and occidental society, on which the science plays an important central role on the definition of the “truths”.
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A influência do suco de uvas pretas na biodisponibilidade da ciclosporina oral

Freitas, Vera Lorentz de Oliveira January 2009 (has links)
A Ciclosporina é amplamente utilizada em nosso país como terapia de imunossupressão crônica em transplantes de órgãos e nos tratamentos de doenças auto-imunes. Há evidências na literatura demonstrando que vários agentes terapêuticos, incluindo a ciclosporina, podem ter a sua biodisponibilidade afetada pela ingestão concomitante de vinho tinto ou suco de pomelo. O mecanismo predominante destas interações envolve a modulação da atividade de enzimas do sistema do citocromo P450 (CYP 450) e/ou da proteína de transporte a glicoproteína P por estas substâncias. A enzima P4503A4 (CYP3A4) do CYP 450, por exemplo, é responsável pela metabolização de vários medicamentos e pode ter a sua atuação modificada pela co-ingestão de certos alimentos. Devido a sua vocação vitivinícola, é freqüente o consumo de suco de uvas pretas na Região Sul, sobretudo no Vale dos Vinhedos. Portanto, é de se esperar que muitos pacientes com indicação do uso de ciclosporina oral sejam submetidos à co-administração do suco deste referido tipo de uva. Sendo assim, neste estudo analisamos a potencial interferência da administração concomitante do suco de uvas pretas nos parâmetros farmacocinéticos da ciclosporina. Esse estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), com número de inscrição 07-319 e realizado na Unidade de Pesquisa Clínica do HCPA, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Brasil. Foram selecionados 12 indivíduos adultos do sexo masculino, voluntários saudáveis, que receberam ciclosporina na dose de 200 mg, os quais foram randomizados em dois grupos: um grupo com a droga administrada com suco de uvas pretas (Vinícola Aurora, Bento Gonçalves, Brasil) e outro apenas com água. Após uma semana de intervalo, os pacientes recebiam o tratamento no braço alternativo. As doses foram administradas depois de 10 horas de jejum. Foram estudados os seguintes parâmetros farmacocinéticos: pico de concentração no plasma (Cmax), área sob a curva (AUC0-∞), clearance (CL/F), e o tempo de meia-vida (t½). Amostras de sangue foram obtidas no intervalo de 12 horas após a dose do medicamento. O resultado de uma única dose no estudo com voluntários saudáveis mostrou que o suco de uvas pretas produziu um decréscimo de 30% na AUC da ciclosporina (de 3962 ± 567 para 2771 ± 714 ng·h/mL) e 28% redução no Cmax (de 943 ± 167 para 679 ± 152,5 ng/mL), sem mudanças significativas no clearance e no tempo de meia vida. Em conclusão, o suco de uvas pretas diminuiu significativamente a biodisponibilidade da ciclosporina, podendo comprometer o seu efeito farmacodinâmico e essa observação tem potencial relevância na prática médica.
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Criopreservação de ápices caulinares de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen / Cryopreservation of Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen soot tips

Oliveira, Daniela Vasconcelos de 24 February 2017 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-06-19T21:03:15Z No. of bitstreams: 1 2017_DanielaVasconcelosdeOliveira.pdf: 3772125 bytes, checksum: 7ce470b996f01205102b9c87984b13a3 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-18T18:47:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_DanielaVasconcelosdeOliveira.pdf: 3772125 bytes, checksum: 7ce470b996f01205102b9c87984b13a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-18T18:47:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_DanielaVasconcelosdeOliveira.pdf: 3772125 bytes, checksum: 7ce470b996f01205102b9c87984b13a3 (MD5) Previous issue date: 2017-08-18 / O objetivo geral desse trabalho foi desenvolver um protocolo de criopreservação para ápices caulinares de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen, ginseng-brasileiro, visando assegurar a conservação em longo prazo do seu germoplasma. Inicialmente foram estabelecidas as condições para a introdução e multiplicação clonal in vitro de Pfaffia glomerata, a partir de gemas laterais de segmentos nodais de plantas em crescimento em campo, para obter o lote de plantas doadoras de ápices caulinares para os experimentos de criopreservação. Após 30 dias de cultivo in vitro 92% das gemas laterais retomaram o crescimento dando origem a plântulas inteiras, com sistema radicular e parte aérea bem desenvolvidos. Para a definição do protocolo de criopreservação foram testadas duas técnicas, a vitrificação e a gota-vitrificação. A técnica de vitrificação consistiu dos seguintes procedimentos: isolamento dos ápices caulinares (±2,0 mm) de plântulas em crescimento in vitro, pré-cultivo em meio de cultura MS básico, solidificado com ágar e suplementado com 0,3M de sacarose por aproximadamente 18 hrs, tratamento com meio de saturação (MS básico líquido suplementado com 2,0M de glicerol e 0,4M de sacarose, vitrificação com três soluções crioprotetoras (PVS2, PVS3 e PVS4), três tempos de exposição (20 min, 40 min e 60 min), e duas temperaturas para cada solução (25°C e 0°C), congelamento em nitrogênio líquido (-196°C), descongelamento, diluição (MS suplementado com 1,2 M de sacarose) e cultivo in vitro. Para a metodologia de vitrificação o melhor percentual de regeneração foi 64%, obtido para ápices caulinares tratados com a solução PVS4, por 60 minutos, a 25°C . Para o método de gota-vitrificação, as etapas utilizadas foram semelhantes, consistindo de isolamento dos explantes, pré-cultivo (MS sólido suplementado com 0,3M de sacarose), saturação (MS líquido suplementado com 2,0 M de glicerol e 0,4M de sacarose), vitrificação com três soluções (PVS2, PVS3 e PVS4), três tempos de exposição (20 min, 40 min e 60 min), e duas temperaturas (25°C e 0°C), congelamento dos ápices caulinares dispostos em tiras de alumínio e submersos diretamente em nitrogênio líquido, descongelamento, diluição (MS suplementado com 1,2M de sacarose) e cultivo in vitro. As melhores condições para o congelamento pelo método de gota-vitrificação foi o tratamento com a solução PVS3, por 40 minutos, a 0°C, o que resultou em 82% de regeneração. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que a criopreservação em nitrogênio líquido pode ser usada para a conservação do germoplasma de ginseng brasileiro. O método mais eficiente, com maior percentual de regeneração dos ápices caulinares (82%) foi o método de gota-vitrificação, adotando-se o tempo de 40 minutos de exposição dos explantes à solução crioprotetora PVS3, na temperatura de 0°C. / The main objective of this work was to develop a cryopreservation protocol for Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen shoot tips, in order to ensure the long-term conservation of its germplasm. The conditions for introduction in vitro and clonal multiplication of Pfaffia glomerata from lateral buds of nodal segments of plants growing in the field were established to obtain the batch of stock donor plants for the cryopreservation experiments. After 30 days of culture in vitro 92% of the lateral buds resumed growth giving rise to whole plantlets, with well developed root system and shoots. For the definition of the cryopreservation protocol, two techniques were tested, vitrification and dropvitrification,. The vitrification technique consisted of the following procedures: isolation of shoot apices (± 2.0 mm) from in vitro growing plantlets, pre-culture ( MS culture medium, solidified with agar and supplemented with 0.3M sucrose), loading with MS medium supplemented with 2.0M glycerol and 0.4M sucrose), vitrification with three cryoprotectant solutions (PVS2, PVS3 and PVS4), three exposure times (20 min, 40 min and 60 min), two temperatures for each solution (25°C and 0°C), freezing in liquid nitrogen (-196°C), thawing, dilution (MS medium supplemented with 1.2 M sucrose) and culture in vitro. For the drop-vitrification method, the steps used were similar, consisting of excision of the shoot tips, pre-culture of explants (solid MS supplemented with 0.3M sucrose), loading (liquid MS supplemented with 2.0M glycerol and 0.4M sucrose), vitrification (PVS2, PVS3 and PVS4), three exposure times (20 min, 40 min and 60 min), and two temperatures (25°C and 0°C), freezing of the shoot apices arranged in aluminum strips and submerged directly into liquid nitrogen, thawing, dilution (MS supplemented with 1.2M sucrose) and in vitro culture. The best conditions for cryopreservation using the droplet-vitrification method were treatment with PVS3 solution for 40 minutes at 0°C, which resulted in 82% regeneration. The results obtained with this work indicate that cryopreservation in liquid nitrogen can be used for conservation of germplasm of brazilian ginseng. The most efficient method, with the highest percentage of shoot tip regeneration (82%), was the droplet-vitrification method, with 40 minutes of exposure of the explants to the cryoprotectant solution PVS3 at 0°C.
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Efeito da multiparidade nos tecidos dos órgãos pélvicos e perineais de ratas Wistar

Silva, Maria da Glória da 30 June 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-09-20T13:48:52Z No. of bitstreams: 1 2017_MariadaGlóriadaSilva.pdf: 5858485 bytes, checksum: c158bba67f0a732dd68d393b43da5af7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-02T11:23:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MariadaGlóriadaSilva.pdf: 5858485 bytes, checksum: c158bba67f0a732dd68d393b43da5af7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T11:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MariadaGlóriadaSilva.pdf: 5858485 bytes, checksum: c158bba67f0a732dd68d393b43da5af7 (MD5) Previous issue date: 2017-10-01 / A gestação e o parto vaginal produzem adaptações nos tecidos da pelve e períneo para passagem do concepto, o que aumenta o risco para afecções dos órgãos pélvicos, sobretudo em condições de multiparidade e do mecanismo de parto. As afecções do assoalho pélvico feminino como as incontinências, urinária e fecal, e os prolapsos de órgãos pélvicos constituem um importante problema de saúde pública, pela sua alta prevalência e incidência, bem como pelas repercussões deletérias na qualidade de vida e pelos elevados custos de tratamento. Considerando que os tecidos dos órgãos pélvicos podem sofrer alterações estruturais e funcionais em decorrência de processos lesivos como os advindos da gestação e do mecanismo de parto, torna-se necessário identificar e quantificar essas alterações para compreender os mecanismos envolvidos nesse processo e dar suporte para novas propostas terapêuticas. No entanto, dada a impossibilidade de propor estudos dessa natureza com tecidos humanos, um modelo animal que seja morfofuncionalmente semelhante aos humanos, que inclusive apresentam afecções de pelve e períneo, podem agregar novos conhecimentos. Assim, esse estudo teve como objetivo descrever e comparar a arquitetura tecidual e a força muscular dos órgãos da pelve e períneo de ratas Wistar nulíparas e multíparas. O estudo foi conduzido com grupos de nulíparas e multíparas (n=5) de 12 meses de idade; as multíparas acasalaram por três vezes gerando 10,0±1,5 filhotes por ninhada. Vencidos os 12 meses e tomadas às medidas da força de contração muscular, os animais eram eutanasiados em câmara de CO2 e então submetidos à dissecação para a remoção dos blocos pélvicos. Os espécimes histológicos depois de fixados foram desidratados em álcool, diafanizados em xilol, embebidos e emblocados em parafina para a microtomia e então, as secções histológicas (5 μm) foram coradas com hematoxilina e eosina e com Tricromio de Gomori. Os resultados mostraram que a multiparidade: 1) reduziu a espessura da mucosa da uretra e vagina, aumentou a mucosa do reto, mas não afetou a mucosa do ânus; 2) reduziu a largura da submucosa da vagina, aumento no ânus e não afetou a largura dessa camada na uretra ou no reto; 3) aumentou a largura da camada muscular do reto, reduziu na vagina, mas não afetou essa camada na uretra ou ânus; 4) reduziu o total de fibras musculares lisas da uretra e ânus, aumentou no reto, mas não afetou o total de fibras na vagina; 5) reduziu o diâmetro e total de mionúcleos das fibras musculares esqueléticas do assoalho pélvico; 6) não afetou a largura das camadas visceral ou parietal da fáscia endopélvica ou os parâmetros morfométricos do esfíncter uretral externo; 7) diminuiu o tônus intra-anal e a força de contração evocada; 8) não afetou o tecido conjuntivo; 9) aumentou o número de leucócitos na mucosa da uretra e vagina das multíparas, mas não no reto ou ânus. No conjunto, os resultados mostraram que a multiparidade causaram hipotrofia das estruturas dos músculos do assoalho pélvico, lisos, estriados, bem como no ânus das ratas multíparas que implicaram na redução da efetividade da contração reflexa, mas paralelamente demostrou que a musculatura respondeu positivamente quando eletro estimulada, aumentando a força de contração evocada. Assim, nossos resultados permitem relacionar as alterações estruturais causadas pela multiparidade com o desenvolvimento de afecções de órgãos pélvicos e perineais. / Gestation and vaginal delivery produce adaptations in the tissues of the pelvis and perineum for the passage of the concept, which increases the risk for affections of the pelvic organs, especially in conditions of multiparity and the mechanism of delivery. Female pelvic floor affections such as urinary and fecal incontinence and pelvic organ prolapse constitute an important public health problem because of its high prevalence and incidence, as well as the deleterious repercussions on the quality of life and the high costs of treatment. Considering that pelvic organ tissues undergo structural and functional changes as a result of harmful processes such as those arising from gestation and the mechanism of delivery, it is necessary to identify and quantify these changes in order to understand the mechanisms involved in this process and to support new Therapeutic proposals. However, given the impossibility of proposing studies with human tissues, an animal model that is morphologically similar to humans, which even present pelvic and perineal affections, may aggregate new knowledge. Thus, this study aimed to describe and compare the architecture of the tissues and the muscular strength of pelvic and perineum organs of nulliparous and multiparous Wistar rats. The study was conducted with groups of nulliparous and multiparous (n = 5) of 12 months of age; the multiparous rats mated three times (10.0 ± 1.5 rats/brood). After 12 months, measurements of muscle contraction force were taken and the animals were euthanized and then submitted to dissection to remove the pelvic blocks. After fixation, the specimens were dehydrated in alcohol, diaphanized in xylol, embedded and blocked in paraffin. After that, the histological sections (5 μm) were stained with hematoxylin and eosin and with Gomori trichrome. The results showed that the multiparity: 1) reduced the width of the mucosa in the urethra and vagina, increased the width of the mucosa in the rectum, but does not affect the mucosa of the anus; 2) reduced the width of the submucosa in the vagina, increase in the anus and did not affect the width of this layer in the urethra or rectum; 3) increased the width of the muscular layer of the rectum, reduced in the vagina, but did not affect this layer in the urethra or anus; 4) reduced the total smooth muscle fibers of the urethra and anus, increased in the rectum, but did not affect the total fibers in the vagina; 5) reduced the diameter and total number of myonuclei of the skeletal muscle fibers of the pelvic floor; 6) did not affect the width of the visceral or parietal layers of the endopelvic fascia or the morphometric parameters of the external urethral sphincter; 7) decreased intra-anal muscular tonus and the evoked contraction force; 8) did not affect the parenchyma or the stroma of connective tissue; 9) increased the number of leukocytes in the mucosa of the urethra and vagina of the multiparous, but not in the rectum or anus. The results showed that multiparity structurally reduced the smooth and striated muscles of the pelvic floor and anus of multiparous rats, which implied a reduction in the effectiveness of intra-anal muscular tonus and the evoked contraction force. Thus, our results allow us to relate the structural changes caused by multiparity with the development of affections of pelvic and perineal organs.
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Ensaio clínico randomizado da preservação de enxertos hepáticos com solução de perfusão de UW e HTK no transplante ortotópico de fígado

Meine, Mario Henrique Mendes de Mattos January 2005 (has links)
Introdução: A solução de UW (University of Wisconsin) tem sido utilizada como padrão para preservação de enxertos hepáticos para transplante ortotópico de fígado (TOF) desde 1990. Seu custo é alto, e não existem, em nosso meio, estudos clínicos que comparem a sua efetividade com a de outras soluções. A solução de HTK (histidina-triptofano-cetoglutarato) foi desenvolvida inicialmente para cardioplegia, porém estudos experimentais e alguns estudos clínicos retrospectivos demonstraram sua eficácia na preservação hepática, mesmo com tempos de isquemia prolongados. Objetivos: Comparar a efetividade das soluções de preservação de órgãos HTK e UW com relação as variáveis: disfunção primária do enxerto (DPE), tempo de isquemia fria (TIF), complicações de via biliar (CVB), alterações de provas funcionais hepáticas (PFH) e sobrevida do enxerto e dos pacientes. Método: Foram estudados os fígados de doadores de múltiplos órgãos, implantados nos receptores pela técnica de piggyback, segundo ordem cronológica de ingresso em lista de espera no RS no período janeiro de 2003 a agosto de 2004. As soluções de preservação HTK e UW foram utilizadas de forma randomizada em blocos. A perfusão na aorta foi feita com 4 litros de HTK ou 2 litros de UW e a perfusão venosa portal com 1 litro de ambas as soluções, utilizando-se 500 ml para perfusão venosa e arterial adicional ex-situ e armazenagem do enxerto. Realizou-se biópsia hepática em cunha do lobo esquerdo quando a esteatose macroscópica estava presente. A análise bioquímica sérica foi diária na primeira semana e, em 15 e 30 dias pós-operatórios. Resultados: Foram estudados 102 pacientes submetidos ao TOF, sendo 65 no grupo UW (63,7%) e 37 no grupo HTK (36,3%). As frequências de sexo, raça, estado hemodinâmico, o uso de vasopressores e a presença de esteatose nos doadores foram igual nos dois grupos (pα>,05). A idade média dos doadores foi de 38,1 anos (DP +-14,4) no grupo UW e de 44,6 anos (DP +-14,2) no HTK (pα=,036). A distribuição de sexo, raça, idade, etiologia da cirrose, re-transplante, hepatite fulminante, trombose portal e escore de Child-Pugh dos receptores foi igual nos dois grupos (pα>,05). O grupo HTK teve 8 casos (25,8%) de CVB (4 estenose, 2 fístulas e 2 lesões do tipo isquêmica) contra 5 casos (8,6%) do grupo UW (pα=,033) em 89 pacientes que completaram 4 meses de seguimento (OR=2,0; IC 95%=1,2 a 3,5). A média do TIF nos dois grupos foi semelhante (UW= 579,2 min.; HTK= 527,9 min. pα>,05) e não houve diferenças nas incidências de CVB, DPE e óbito com relação a TIF estratificados entre os grupos. Não houve variação nas medianas das PFH (pα>,05 para BT, AST, ALT, FA, GGT, LDH, Fator 5 e TP). A incidência de óbito foi similar em ambos os grupos: UW= 6 (9,4%) e HTK= 4 (11,1%). A incidências de DPE foi de 2,8% no grupo HTK (1 caso) e 9,4% no grupo UW (6 casos) (pα=0,15), dos quais 5 (71,4%) evoluíram para o óbito por não funcionamento primário do enxerto, com ou sem outras morbidades. Conclusão: As soluções de UW e HTK foram igualmente efetivas na preservação dos enxertos hepáticos de doadores cadavéricos na amostra analisada, considerando-se aspectos clínicos, laboratoriais e sobrevida dos pacientes e dos enxertos. A utilização rotineira da solução de HTK poderá diminuir os custos do TOF. A média de idade maior dos doadores e a utilização de um volume reduzido de solução podem ter contribuído para uma incidência maior de CVB no grupo HTK.
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Efeito de agentes delipidantes durante o cultivo no desenvolvimento embrionário e conteúdo lipídico de embriões bovinos produzidos in vitro / Effect of delipidant agents during cultive on embryonic development and lipid content of bovine embryos produced in vitro

Dias, Luzia Renata Oliveira 14 June 2016 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade em Agronomia e Veterinária, 2016. / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2016-09-14T19:07:12Z No. of bitstreams: 1 2016_LuziaRenatadeOliveiraDias.pdf: 585188 bytes, checksum: c1d67f8ad9c30dc53f569fab1b6a16a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-24T11:06:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_LuziaRenatadeOliveiraDias.pdf: 585188 bytes, checksum: c1d67f8ad9c30dc53f569fab1b6a16a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-24T11:06:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_LuziaRenatadeOliveiraDias.pdf: 585188 bytes, checksum: c1d67f8ad9c30dc53f569fab1b6a16a0 (MD5) / A criopreservação de embriões produzidos in vitro (PIV) é afetada pelas altas concentrações de gotículas lipídicas que se acumulam no interior dos blastômeros. A remoção parcial de lipídios intracitoplasmáticos, por estímulo da lipólise química no citoplasma celular ou pela diminuição da captação e síntese de ácidos graxos pelas células, pode ser uma alternativa para melhorar a criopreservação desses embriões. Neste sentido, objetivou-se estimar o efeito de alguns agentes delipidantes, L-carnitina e o isômero trans-10 cis-12 do ácido linoleico conjugado (CLA), durante o cultivo na quantidade, qualidade e conteúdo lipídico de embriões bovinos produzidos in vitro. Foram utilizados 2.448 ovócitos de grau 1 e 2 obtidos de ovários de abatedouro, que foram maturados in vitro por 24h a 38,5ºC, 5% de CO2. Após a co-incubação dos complexos cumulus ovócitos (COC) com os espermatozoides (16-18 horas), os possíveis zigotos foram distribuídos em quatro tratamentos: T1) Controle (n=616): meio fluido de oviduto sintético (SOF), suplementado com 5% de soro fetal bovino (SFB); T2) L-carnitina (n=648): meio SOF suplementado com 5% de SFB, acrescido de 0,6 mg mL-1de L-carnitina; T3) CLA (n=627): meio SOF suplementado com 5% de SFB, acrescido de 100 μM de trans-10 cis-12 CLA; e T4) L-carnitina+CLA (n=597): meio SOF suplementado com 5% de SFB, acrescido de 0,6 mg mL-1de L-carnitina e 100 μM de trans-10 cis-12 CLA. As taxas de clivagem e blastocisto foram avaliadas no dia 2 e dia 7 de cultivo e, os blastocistos expandidos (Bx) foram armazenados para quantificação de lipídios utilizando o corante Sudan Black B. Os dados de produção de embriões foram analisados pelo teste Chi-quadrado (P<0,05) e os de quantificação de lipídios por análise de variância (ANOVA) (P<0,05). A taxa de clivagem foi semelhante (P>0,05) entre todos os tratamentos (T1=95±4,3; T2=95±3,5; T3=95±3,7 e T4=95±3,1). A taxa de blastocisto foi superior (P<0,05) no grupo controle do que nos demais tratamentos que não diferiram (P>0,05) entre si tanto no D6 (T1=19±2,7; T2=13±2,4; T3=14±2,6 e T4=13±2,6), quanto no D7 (T1=49±3,5; T2=39±3,0; T3=42±3,9 e T4=39±3,9). Não foi observada diferença entre os tratamentos (P>0,05) quanto à velocidade de desenvolvimento, sendo que em todos os grupos a maioria dos embriões de D7 encontravam-se no estágio de blastocisto expandido. Os embriões do T2 apresentaram menor quantidade de lipídios no citoplasma do que os de T1 (P=0,0138) e de T3 (P=0,0261), sendo que os do T4 foram semelhantes (P>0,05) aos demais tratamentos. Os resultados obtidos indicaram que a suplementação com agentes delipidantes não afeta a qualidade, mas afeta negativamente a produção de embriões. Entretanto, a presença de L-carnitina durante o cultivo in vitro (CIV) diminuiu a quantidade de lipídios sugerindo que sua utilização pode resultar em embriões com maior resistência a criopreservação. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cryopreservation of in vitro produced (IVP) embryosis affected by the high concentrations of lipid droplets that accumulate inside the blastomeres. Therefore, the partial removal of intracytoplasmic lipids by chemical lipolysis stimulation or by decreasing uptake or synthesis of fatty acids by cells can be an alternative to improve cryopreservation of IVP embryos. For that, this study aimed to evaluate the effect of some delipidant agents, L-carnitine and the trans-10 cis-12 isomer conjugated linoleic acid (CLA), during culture on the quantity, quality and lipid content of bovine embryos produced in vitro. A total of 2,448 oocytes graded 1 and 2, obtained from slaughterhouse ovaries were matured in vitro for 24 hours at 38.5 ° C, 5% CO2. After co-incubation (16-18 hours) of sperm and cumulus oocyte complex (COC), the presumptive zygotes were distributed into four treatments: T1) Control (n=616): sinthect oviduct fluid (SOF) medium supplemented with 5% bovine calf serum (FCS); T2) L-carnitine (n=648): SOF medium supplemented with 5% FCS plus 0.6 mg ml-1 of L-carnitine; T3) CLA (n=627): SOF medium supplemented with 5% FCS plus 100 uM trans-10 cis 12 CLA; and T4) L-carnitine + CLA (n=597): SOF medium supplemented with 5% FCS plus 0.6 mg ml-1 of L-carnitine and 100 uM of trans-10 cis-12 CLA. The cleavage and blastocyst rates were evaluated on day 2 and day 7 of culture, and expanded blastocysts (Bx) were stored for lipid quantification by Sudan Black B stain. Embryo production data were analyzed by Chi-square test (P<0.05) and lipids quantification by analysis of variance (ANOVA) (P<0.05). Cleavage rate was similar (P>0.05) among all treatments (T1=95±4.3; T2=95±3.5; T3=95±3.7 e T4=95±3.1). Blastocyst rate was higher (P<0.05) on the control group than the other treatments, wich were similar (P>0.05) among on D6 (T1=19 ± 2.7; T2=13±2.4; T3=14±2.6 and T4=13±2.6) and on D7 (T1=49±3.5; T2=39±3.0; T3=42±3.9 and T4=39±3.9). There was no difference between treatments (P>0.05) on the development speed, and for all treatments the majority of D7 embryos were already on expanded blastocyst stage. Embryos from T2 showed lower cytoplasmic lipids than those from T1 (P=0.0138) and T3 (P=0.0261), being T4 similar to all treatments. The results suggested that supplementation with delipidant agents had not affected quality but had negatively affected embryo production. However, the presence of L-carnitine during in vitro culture (CIV) decreased the amount of lipids, suggesting that its use can result in bovine IVP embryos more resistant to cryopreservation.

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