Made available in DSpace on 2015-05-14T13:00:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2935405 bytes, checksum: a27c6a172bf89039f257e78b64b11891 (MD5) Previous issue date: 2010-06-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A microbiological screening tested ten essential oils and three phytochemicals in solid discs with a sterile medium to evaluate the susceptibility of diferent fungal strains. Oils from C. zeylanicum, O. majorana, O. vulgare were chosen due to their efficient antifungical activity against twenty-one strains analyzed. The tests that determine CIM and CFM have proven through essential oils from C. zeylanicum and O. vulgare were able of causing death on yeast and filamentous strains. The analyze about of the inhibition mycelial growth potential by kinetics of microbial death indicates which essential oils from cinnamon and oregano obtained a important antifungal activity compared with essential oil of marjoram. The oils were able to interfere accentually in the logarithmic phase of yeast during twenty-four hours exposure. This antifungal activity was compared with fungistatic and fungicidal effect of ketoconazole. In regard to count of yeasts, there was not a significant difference (p> 0.05) between to essential oils and the standard antifungal, ketoconazol. The fumigant effect of the essential oils examined in an optical microscope indicates that the possible mechanism of action is an interference with cell wall formation. In agreement with what research suggests, this study tested the effect of sorbitol, an osmotic protector which is a complement, this way, microscopic changes, such as: decreased percentage of cytoplasm, loss of pigmentation, deficient development of hyphae and empty hyphae were observed. This present study also analyzed the essential oils tested against resistant strains caused in part by the presence of efflux proteins on the membrane of some them. / Após triagem microbiológica por meio de difusão, avaliou-se a susceptibilidade fúngica de dez óleos essenciais e três fitoconstituintes. Os óleos de C. zeylanicum, O. majorana, O. vulgare foram escolhidos por apresentarem elevada atividade antifúngica sobre vinte e uma cepas testadas. Os ensaios para determinação da CIM e a CFM mostraram que os óleos essenciais de canela e orégano foram letais sobre as cepas leveduriformes e filamentosas, o que confirmou a boa atividade antifúngica destes óleos. A avaliação do potencial de inibição do crescimento micelial, pela cinética de morte microbiana, mostra que os óleos essenciais de canela e orégano, exibiram atividade antifúngica relevante em relação ao óleo essencial de manjerona. Os óleos foram capazes de interferir acentuadamente na fase logarítmica da levedura, num período de 24 horas, com pronunciado efeito fungicida e fungistático, após 4 horas de exposição. Esta atividade antifúngica foi comparada ao efeito fungistático e fungicida do cetoconazol. Não houve diferença significativa (p> 0,05), encontrada entre as contagens das leveduras frente aos óleos essenciais e o antifúngico padrão, cetoconazol. O efeito fumigante, dos óleos essenciais, quando analisado sob a luz da microscopia óptica, mostra que o possível mecanismo de ação destes óleos essenciais acontece por interferir na formação da parede celular. Para confirmar o modo de ação sugerido, o presente trabalho testou o efeito do sorbitol, protetor osmótico, adicionado ao meio. Observaram-se modificações microscópicas, como: diminuição do teor de citoplasma, perda de pigmentação, desenvolvimento distorcido de hifas e hifas vazias. Também, verificou-se grande resistência dos fungos, causadas em parte, pela presença de proteínas de efluxo na membrana de algumas cepas.

Made available in DSpace on 2015-05-14T13:21:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2123772 bytes, checksum: b269616ec63526991be608ffe359c0bb (MD5) Previous issue date: 2011-05-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of plant molluscicide in controlling schistosomiasis has motivated the survey in the search for new, among them the essential oils. This survey, the essential oils extracted from the leaves of Pepper dioica Lindl, bark of Citrus limon Linneo and Rhizome of Zingiber officinale Roscoe through hydrodistillation, determining the physico-chemical properties, quantifying the majority and minority components of each essential oil by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS), where the majority constituent of Pepper dioca Lindl was eugenol, content of 85.673 %, in Citrus limon Linneo, the majority was limonene, 48.996 % and Zingiber officinale Roscoe, where the was zingibereno, with 27.14 %, characterizing by in the region infrared spectrometry compared with the standards. The results showed an income (m/m) 1.80 % for oil Pepper dioica Lindl 0.96 % for Citrus limon Linneo and 0.71 % of Zingiber officinale Roscoe. These oils have been tested for toxicity (lethality test with Artemia salina), using the criterion of Dolabella and as a molluscicide, through the technique recommended by the World Health Organization (WHO). Estimated the lethal concentration (Lc50) of oils beyond the limit of the 95 % interval by Reed-Muench and Pizzi respectively. Between the analysed oils in this research, the extracted from the peel of Citrus limon Linneo were consedered to be nontoxic with Lc50 263,03 mg.L-1, achieving the best result as a molluscicide with Lc50 activity 13, 18 mg.L-1, thus being the most active front in the snail Biomphalaria glabrata in comparation with the oil stracted of Pepper dioca Lindl and the oil of the rhizome of Zingiber officinale Roscoe that Lc50 from 39,81 and 56,2 mg.L-1, respectively being actives. / O uso de moluscicida de origem vegetal no controle da esquistossomose tem motivado pesquisas de novas substâncias, entre elas, os óleos essenciais. Nesta pesquisa, os óleos essenciais foram extraídos das folhas de Pimenta dioica Lindl, da casca de Citrus limon Linneo e do rizoma de zingiber officinale Roscoe por meio de hidrodestilação, determinando-se as propriedades físico-químicas, quantificando-se os componentes majoritários e minoritários pela técnica de cromatografia gasosa acoplado à espectrometria de massas (CG-EM), sendo o constituinte majoritário da Pimenta dioica Lindl, o eugenol, com teor de 85,67 %, do Citrus limon Linneo, o limoneno, com 48,99 % e do Zingiber officinale Roscoe, o zingibereno, com 27,14 % e caracterizando os majoritários por espectrometria na região do infravermelho comparando-se com os padrões. Os resultados mostraram um rendimento (m/m) de 1,80% para o óleo da Pimenta dioica Lindl de 0,96 % para o Citrus limon Linneo e de 0,71 % para o zingiber officinale Roscoe. Os óleos foram testados quanto á toxicidade (ensaio de letalidade com Artemia salina), utilizando o critério de Dolabela e como agente moluscicida, através da técnica preconizada pela Organização Mundial de Saúde (OMS). Calculou-se a concentração letal (CL50) dos óleos, além do limite de confiança a 95 % de probabilidade pelo método Reed-Muench e Pizzi respectivamente. Dentre os óleos estudados, o extraído da casca de Citrus limon Linneo além de ser atóxico, com CL50 de 263,03 mg.L-1 alcançou o melhor resultado quanto a atividade moluscicida com CL50 de 13,18 mg.L-1, mostrando-se, portanto, ser o mais ativo frente ao caramujo Biomphalaria glabrata comparado ao óleo extraído das folhas de Pimenta dióica Lindl e do rizoma de zingiber officinale Roscoe que obtiveram CL50 de 39,81 e 56,2 mg.L-1 respectivamente, não sendo considerados ativos.

O gênero Salvia L. (Lamiaceae), constituido de aproximadamente 900 espécies, possui 60 representantes no Brasil. Dentre suas propriedades medicinais destacam-se as atividades antitumoral, anti-inflamatória, cicatrizante e antibacteriana. Óleos essenciais e diterpenos de núcleos abietano, clerodano, primarano estão entre os principais constituintes químicos relatados para as espécies. O objetivo deste trabalho foi a caracterização química dos óleos essenciais obtidos por hidrodestilação de seis espécies de Salvia nativas da região Sul do Brasil (S. guaranitica, da Seção Coerulae; S. ovalifolia, S. cordata e S. borjensis, da Seção Rudes e S. procurrens e S. uliginosa, da Seção Uliginosae), utilizando cromatografia à gás/espectrometria de massas. A análise química dos óleos essenciais mostrou que todas as espécies apresentaram apenas sesquiterpenos, além de compostos alifáticos como aldeidos e ácidos graxos de cadeia longa. Entre estes últimos, nonadecanal estava presente em todas as espécies, sendo abundante (13% a 56%) em S. procurrens, S. ovalifolia e S. borjensis. Em relação à composição dos sesquiterpenos, observou-se que espatulenol estava presente em quantidades relativamente grandes (10% - 40%) nas espécies S. cordata, S. borjensis e S. ovalifolia. Estas espécies também apresentaram β-cariofileno, sesquiterpeno encontrado, ainda, em S. guaranitica. S. cordata apresentou o sesquiterpeno epi-globulol (32,3%) e 2E, 6Z-farnesol (11,4%). O óleo essencial de S. uliginosa apresentou ácido hexadecanóico (30,1%), n-nonadecano (17,5%) e nonadecanal (4,5%) como componentes majoritários. Os óleos essenciais e os extratos diclorometano das espécies da Seção Uliginosae (S. uliginosa e S. procurrens) mostraram atividade contra Staphylococcus aureus, quando testados pelo método de bioautografia. As analises preliminares sugerem a presença de diterpenos de núcleo abietano-quinona nos extratos orgânicos destas espécies. Os extratos diclorometano dessas duas espécies foram também avaliados quanto à atividade amebicida contra amebas de vida livre Acanthamoeba polyphaga. Entre estes, apenas o de S. uliginosa foi ativo, apresentando 100% de atividade nas concentrações de 7,5 e 5 mg/mL. / The genus Salvia L. (Lamiaceae) has about 900 species, 60 of them found in Brazil. Among the medicinal properties it is possible to highlight anti-tumor, anti-inflammatory, antioxidant and antibacterial activities. Essential oils and diterpenes with abietane, clerodane and primarane skeletons are the main componentes of these plants. In this sense, the purpose of this study was to characterize the essential oils obtained by hydrodistillation from Salvia species native to southern Brazil (S. guaranitica, Section Coerula; S. ovalifolia, S. cordata and S. borjensis, Section Rudes and S. procurrens and S. uliginosa, Section Uliginosae), using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Chemical analysis of the essential oils showed that all species had only sesquiterpenes, and aliphatic compounds such as aldehydes and long chain fatty acids. Among the latter, nonadecanal was present in all species, being abundant (13% to 56%) in S. procurrens, S. borjensis and S. ovalifolia. Regarding the composition of the sesquiterpenes, it was observed that spathulenol was present in relatively large amounts (10% - 40%) in S. cordata, S. borjensis and S. ovalifolia oils. These species also showed β-caryophyllene, a sesquiterpene also found in S. guaranitica. S. cordata showed the sesquiterpene epi-globulol (32.3%) and 2E, 6Z-farnesol (11.4%). S. uliginosa essential oil presented hexadecanoic acid (30.1%), n-nonadecane (17.5%) and nonadecanal (4.5%) as the main compound. The essential oils and the dichloromethane extracts of of the species from the Section Uliginosae (S. uliginosa and S. procurrens) demonstrated antimicrobial activity against Staphylococcus aureus when investigated by the bioautography method. Preliminary analyses indicated theat the main compounds present in the organic extracts are diterpenes with the abietane type-diterpene quinone nucleous. The dichloromethane extracts of these two species were also evaluated for the activity against Acanthamoeba polyphaga. Only the extract of S. uliginosa was active, with 100% activity at concentrations of 7.5 and 5 mg/mL.

Espécies reativas de oxigênio (ERO) são produzidas através da respiração aeróbica e durante processos inflamatórios. Além disso, agressões externas como radiações, poluição, estresse, alcoolismo e tabagismo aumentam a sua produção. Altos níveis de ERO podem ocasionar dano oxidativo à lipídios, proteínas e DNA, comprometendo a função normal da célula, podendo estar envolvidos na patogênese e agravamento de diversas doenças. Há evidências que sugerem que antioxidantes naturais presentes em alimentos conferem benefícios adicionais à saúde, atuando como anticarcinogênicos, antiinflamatórios ou agentes antimutagênicos. O orégano (Oreganum sp) é uma especiaria mediterrânea usada como condimento na alimentação e pela medicina popular para diversos tipos de moléstias. O óleo possui forte ação antimicrobiana, devido ao elevado conteúdo de monoterpenos, sendo os principais o carvacrol, o timol e o para-cimeno. O carvacrol (5-isopropil-2metilfenol) é um fenol monoterpênico, com sabor picante e odor característico e tem sido amplamente usado na indústria de alimentos como aditivo seguro para aumentar a vida útil dos alimentos, como aromatizante em produtos assados, doces, bebidas e gomas de mascar, e/ou agente antimicrobiano com atividades contra bactérias, fungos e leveduras. Estudos têm relatado efeito antidepressivo e ansiolítico do carvacrol em camundongos, assim como proteção contra a radiação UVB diminuindo a peroxidação lipídica, estresse oxidativo e danos no DNA em células linfocitárias humanas e atividade antioxidante em diferentes sistemas de lipídios. Nós avaliamos a viabilidade celular e parâmetros de citotoxicidade do carvacrol em células de neuroblastoma humano SH-SY5Y. Este parece modificar levemente a morfologia das células, sem modificar significativamente a biomassa celular, parecendo ser tóxico na concentração de 100 μg/mL. Nas demais concentrações (1 a 50 μg/mL) não houve citotoxicidade. No ensaio de DCFH-DA o carvacrol reduziu a produção de ERO intracelular e diminui significativamente a produção de radicais peroxil no ensaio TRAP. Esses dados reforçam a ideia do carvacrol ser um potencial antioxidante, sendo necessários mais estudos para avaliar o mecanismo de ação deste composto. / Reactive oxygen species (ROS) are produced through aerobic respiration and during inflammation. Besides, external aggressions such as radiation, pollution, stress, alcoholism and smoking increase their production. Elevated levels of ROS can cause oxidative damage to lipids, proteins and DNA, compromising the normal cell function, and may be involved in the pathogenesis and progression of several diseases. There is suggesting that natural antioxidants found in foods provide additional health benefits, acting as anticarcinogenic, anti-inflammatory agents or antimutagenic. Oregano (Oreganum sp) is a Mediterranean spice used in food as a condiment and in popular medicine to treat several types of diseases. The essential oil has strong antimicrobial activity, due to the high content of monoterpenes, the main ones being carvacrol, thymol and para-cymene. Carvacrol (5-isopropyl-2metilfenol) is a phenol monoterpene with spicy taste and odor and has been widely used in food industry as additive to preserve foods, as flavoring agent in baked goods, candy, drinks and chewing gums, and/or antimicrobial agent with activity against bacteria, fungi and yeasts. Studies have reported antidepressant and anxiolytic effects of carvacrol in mice, as well as protection against UVB radiation, decreased lipid peroxidation, oxidative stress and DNA damage in human lymphocyte cells, and antioxidant activity in different lipid systems. We evaluated cell viability and cytotoxicity parameters of carvacrol in human neuroblastoma cells SH-SY5Y. Carvacrol induced morphology changes in cells without significant modification of the cellular biomass content and it was toxic at the concentration of 100 μg/mL. In other concentrations (1-50 μg/mL) it showed no cytotoxicity. In DCFH-DA assay carvacrol reduced the intracellular ROS production and significantly decreased the production of peroxyl radicals in the TRAP assay. These data reinforce the idea of carvacrol as a potential antioxidant and more research is needed to evaluate the mechanism of action of this compound.

O gênero Salvia L. (Lamiaceae), constituido de aproximadamente 900 espécies, possui 60 representantes no Brasil. Dentre suas propriedades medicinais destacam-se as atividades antitumoral, anti-inflamatória, cicatrizante e antibacteriana. Óleos essenciais e diterpenos de núcleos abietano, clerodano, primarano estão entre os principais constituintes químicos relatados para as espécies. O objetivo deste trabalho foi a caracterização química dos óleos essenciais obtidos por hidrodestilação de seis espécies de Salvia nativas da região Sul do Brasil (S. guaranitica, da Seção Coerulae; S. ovalifolia, S. cordata e S. borjensis, da Seção Rudes e S. procurrens e S. uliginosa, da Seção Uliginosae), utilizando cromatografia à gás/espectrometria de massas. A análise química dos óleos essenciais mostrou que todas as espécies apresentaram apenas sesquiterpenos, além de compostos alifáticos como aldeidos e ácidos graxos de cadeia longa. Entre estes últimos, nonadecanal estava presente em todas as espécies, sendo abundante (13% a 56%) em S. procurrens, S. ovalifolia e S. borjensis. Em relação à composição dos sesquiterpenos, observou-se que espatulenol estava presente em quantidades relativamente grandes (10% - 40%) nas espécies S. cordata, S. borjensis e S. ovalifolia. Estas espécies também apresentaram β-cariofileno, sesquiterpeno encontrado, ainda, em S. guaranitica. S. cordata apresentou o sesquiterpeno epi-globulol (32,3%) e 2E, 6Z-farnesol (11,4%). O óleo essencial de S. uliginosa apresentou ácido hexadecanóico (30,1%), n-nonadecano (17,5%) e nonadecanal (4,5%) como componentes majoritários. Os óleos essenciais e os extratos diclorometano das espécies da Seção Uliginosae (S. uliginosa e S. procurrens) mostraram atividade contra Staphylococcus aureus, quando testados pelo método de bioautografia. As analises preliminares sugerem a presença de diterpenos de núcleo abietano-quinona nos extratos orgânicos destas espécies. Os extratos diclorometano dessas duas espécies foram também avaliados quanto à atividade amebicida contra amebas de vida livre Acanthamoeba polyphaga. Entre estes, apenas o de S. uliginosa foi ativo, apresentando 100% de atividade nas concentrações de 7,5 e 5 mg/mL. / The genus Salvia L. (Lamiaceae) has about 900 species, 60 of them found in Brazil. Among the medicinal properties it is possible to highlight anti-tumor, anti-inflammatory, antioxidant and antibacterial activities. Essential oils and diterpenes with abietane, clerodane and primarane skeletons are the main componentes of these plants. In this sense, the purpose of this study was to characterize the essential oils obtained by hydrodistillation from Salvia species native to southern Brazil (S. guaranitica, Section Coerula; S. ovalifolia, S. cordata and S. borjensis, Section Rudes and S. procurrens and S. uliginosa, Section Uliginosae), using gas chromatography coupled to mass spectrometry. Chemical analysis of the essential oils showed that all species had only sesquiterpenes, and aliphatic compounds such as aldehydes and long chain fatty acids. Among the latter, nonadecanal was present in all species, being abundant (13% to 56%) in S. procurrens, S. borjensis and S. ovalifolia. Regarding the composition of the sesquiterpenes, it was observed that spathulenol was present in relatively large amounts (10% - 40%) in S. cordata, S. borjensis and S. ovalifolia oils. These species also showed β-caryophyllene, a sesquiterpene also found in S. guaranitica. S. cordata showed the sesquiterpene epi-globulol (32.3%) and 2E, 6Z-farnesol (11.4%). S. uliginosa essential oil presented hexadecanoic acid (30.1%), n-nonadecane (17.5%) and nonadecanal (4.5%) as the main compound. The essential oils and the dichloromethane extracts of of the species from the Section Uliginosae (S. uliginosa and S. procurrens) demonstrated antimicrobial activity against Staphylococcus aureus when investigated by the bioautography method. Preliminary analyses indicated theat the main compounds present in the organic extracts are diterpenes with the abietane type-diterpene quinone nucleous. The dichloromethane extracts of these two species were also evaluated for the activity against Acanthamoeba polyphaga. Only the extract of S. uliginosa was active, with 100% activity at concentrations of 7.5 and 5 mg/mL.

Espécies reativas de oxigênio (ERO) são produzidas através da respiração aeróbica e durante processos inflamatórios. Além disso, agressões externas como radiações, poluição, estresse, alcoolismo e tabagismo aumentam a sua produção. Altos níveis de ERO podem ocasionar dano oxidativo à lipídios, proteínas e DNA, comprometendo a função normal da célula, podendo estar envolvidos na patogênese e agravamento de diversas doenças. Há evidências que sugerem que antioxidantes naturais presentes em alimentos conferem benefícios adicionais à saúde, atuando como anticarcinogênicos, antiinflamatórios ou agentes antimutagênicos. O orégano (Oreganum sp) é uma especiaria mediterrânea usada como condimento na alimentação e pela medicina popular para diversos tipos de moléstias. O óleo possui forte ação antimicrobiana, devido ao elevado conteúdo de monoterpenos, sendo os principais o carvacrol, o timol e o para-cimeno. O carvacrol (5-isopropil-2metilfenol) é um fenol monoterpênico, com sabor picante e odor característico e tem sido amplamente usado na indústria de alimentos como aditivo seguro para aumentar a vida útil dos alimentos, como aromatizante em produtos assados, doces, bebidas e gomas de mascar, e/ou agente antimicrobiano com atividades contra bactérias, fungos e leveduras. Estudos têm relatado efeito antidepressivo e ansiolítico do carvacrol em camundongos, assim como proteção contra a radiação UVB diminuindo a peroxidação lipídica, estresse oxidativo e danos no DNA em células linfocitárias humanas e atividade antioxidante em diferentes sistemas de lipídios. Nós avaliamos a viabilidade celular e parâmetros de citotoxicidade do carvacrol em células de neuroblastoma humano SH-SY5Y. Este parece modificar levemente a morfologia das células, sem modificar significativamente a biomassa celular, parecendo ser tóxico na concentração de 100 μg/mL. Nas demais concentrações (1 a 50 μg/mL) não houve citotoxicidade. No ensaio de DCFH-DA o carvacrol reduziu a produção de ERO intracelular e diminui significativamente a produção de radicais peroxil no ensaio TRAP. Esses dados reforçam a ideia do carvacrol ser um potencial antioxidante, sendo necessários mais estudos para avaliar o mecanismo de ação deste composto. / Reactive oxygen species (ROS) are produced through aerobic respiration and during inflammation. Besides, external aggressions such as radiation, pollution, stress, alcoholism and smoking increase their production. Elevated levels of ROS can cause oxidative damage to lipids, proteins and DNA, compromising the normal cell function, and may be involved in the pathogenesis and progression of several diseases. There is suggesting that natural antioxidants found in foods provide additional health benefits, acting as anticarcinogenic, anti-inflammatory agents or antimutagenic. Oregano (Oreganum sp) is a Mediterranean spice used in food as a condiment and in popular medicine to treat several types of diseases. The essential oil has strong antimicrobial activity, due to the high content of monoterpenes, the main ones being carvacrol, thymol and para-cymene. Carvacrol (5-isopropyl-2metilfenol) is a phenol monoterpene with spicy taste and odor and has been widely used in food industry as additive to preserve foods, as flavoring agent in baked goods, candy, drinks and chewing gums, and/or antimicrobial agent with activity against bacteria, fungi and yeasts. Studies have reported antidepressant and anxiolytic effects of carvacrol in mice, as well as protection against UVB radiation, decreased lipid peroxidation, oxidative stress and DNA damage in human lymphocyte cells, and antioxidant activity in different lipid systems. We evaluated cell viability and cytotoxicity parameters of carvacrol in human neuroblastoma cells SH-SY5Y. Carvacrol induced morphology changes in cells without significant modification of the cellular biomass content and it was toxic at the concentration of 100 μg/mL. In other concentrations (1-50 μg/mL) it showed no cytotoxicity. In DCFH-DA assay carvacrol reduced the intracellular ROS production and significantly decreased the production of peroxyl radicals in the TRAP assay. These data reinforce the idea of carvacrol as a potential antioxidant and more research is needed to evaluate the mechanism of action of this compound.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-07-04T18:53:14Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 779413 bytes, checksum: 34c03d8607ebd1e024e216b127ffce73 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T18:53:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 779413 bytes, checksum: 34c03d8607ebd1e024e216b127ffce73 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / O uso de bioinseticidas, como os óleos essenciais e seus compostos, no manejo integrado de pragas tem sido efetivamente avaliado nos últimos anos. Entretanto, poucos trabalhos avaliaram a difusão desses compostos na massa de grãos. Com a difusão destes compostos, é necessário avaliar o seu efeito inseticida quando aplicados em uma massa de grãos. O objetivo desse trabalho foi determinar o coeficiente de difusão do eugenol em meio contendo grãos de arroz com casca a partir da fase líquida de eugenol com elevada pureza e a partir do óleo essencial de cravo (Eugenia caryophillata Thumberg (Myrtaceae)); caracterizar as fases líquida, volátil e após a difusão; avaliar a mortalidade de Sitophilus zeamais Motschulsky (Coleoptera: curculionidae) após fumigação com eugenol com elevada pureza e óleo essencial de cravo. Otimizou-se e validou-se o método de microextração em fase sólida (MEFS) associado à análise em cromatógrafo a gás com detector por ionização em chama (CG/DIC) para quantificação do eugenol. A determinação do coeficiente de difusão foi realizada em uma adaptação do protótipo da célula de diafragma de Stokes. Para caracterização das diferentes fases, associou-se a técnica de MEFS à análise em cromatógrafo à gás acoplado a espectrômetro de massas (CG-EM). A mortalidade de S. zeamais foi avaliada após fumigação por 4 e 7 dias com eugenol com elevada pureza e óleo essencial de cravo no protótipo de difusão com aproximadamente 5,5 kg de grãos. O método MEFS – CG/DIC para quantificação do eugenol apresentou boa resposta analítica, com limite de detecção e quantificação de 0,82 e 2,48 μL L -1 , respectivamente. Não houve diferença estatística (α = 0,05) entre o coeficiente de difusão do eugenol calculado a partir do eugenol 99% e a partir do óleo essencial de cravo. O coeficiente de difusão foi de 1,09 x 10 -3 cm 2 s -1 . A caracterização do óleo essencial de cravo utilizado confirmou a presença do eugenol como componente majoritário (75,89%). Observou-se uma diferença na composição das diferentes fases avaliadas. A mortalidade de S. zeamais submetido à fumigação com eugenol 99% alcançou em torno de 40% após 7 dias. Apesar de haver diferença significativa na mortalidade dos insetos submetidos à fumigação com eugenol 99% ou óleo essencial de cravo, não houve diferença estatística entre a mortalidade de insetos colocados em diferentes posições ao longo da coluna de grãos para o mesmo tratamento. / The use of biopesticides, like essential oils and their compounds, in integrated pest management has been effectively evaluated in recent years. However, few studies have evaluated the diffusive behavior of these compounds through the grains. Given the diffusion of these compounds, it is necessary to reassess their insecticidal effect when applied in grains. This work aimed to determine the diffusion coefficient of eugenol through rice grains using the liquid phase as high purity eugenol or clove essential oil (Eugenia caryophillata Thumberg (Myrtaceae)) as source of volatile eugenol; characterize the liquid, volatile, and after diffusion phases; to evaluate the mortality of Sitophilus zeamais Motschulsky (Coleoptera: curculionidae) after fumigation with high purity eugenol and clove essential oil. To quantify eugenol, the solid phase micro extraction (SPME) method associated to gas chromatographic analysis with flame ionization detector (GC/FID) was optimized and validated. The determination of the diffusion coefficient was performed in an adaptation of the Stokes diaphragm cell’s prototype. To characterize the different phases, the optimized and validated SPME method was associated to the analysis in gas chromatograph coupled to mass spectrometer (GC-MS). The mortality of S. zeamais was evaluated after fumigation for 4 and 7 days with high purity eugenol and clove essential oil in the diffusion prototype with approximately 5.5 kg of grains. The SPME - GC/FID method presented good analytical response for quantification of eugenol, with limit of detection and quantification of 0.82 and 2.48 μL L -1 , respectively. There was no statistical difference (α = 0.05) between the diffusion coefficient of eugenol calculated from eugenol 99% and from clove essential oil. The diffusion coefficient was 1.09 x 10 -3 cm 2 s -1 . The characterization of clove essential oil confirmed the presence of eugenol as the major component (75.89%). A difference in the composition of the distinct phases evaluated was observed. Mortality of S. zeamais submitted to fumigation with eugenol 99% reached around 40% after 7 days. Although there was a significant difference in the mortality of insects submitted to fumigation with eugenol 99% or clove essential oil, there was no statistical difference between the mortality of the insects placed at distinct positions along the grain column for the same treatment.

Submitted by Raquel Vergara Gondran (raquelvergara38@yahoo.com.br) on 2016-04-27T00:00:15Z No. of bitstreams: 1 fabiano de andrade ferreira -filmes nanocompsitos antimicrobianos obtidos - fabiano.pdf: 1339665 bytes, checksum: 6d9b23ae68b29ab5bf3a34d2d80e6ce3 (MD5) / Approved for entry into archive by Gilmar Barros (gilmargomesdebarros@gmail.com) on 2016-04-29T21:16:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 fabiano de andrade ferreira -filmes nanocompsitos antimicrobianos obtidos - fabiano.pdf: 1339665 bytes, checksum: 6d9b23ae68b29ab5bf3a34d2d80e6ce3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-29T21:16:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 fabiano de andrade ferreira -filmes nanocompsitos antimicrobianos obtidos - fabiano.pdf: 1339665 bytes, checksum: 6d9b23ae68b29ab5bf3a34d2d80e6ce3 (MD5) Previous issue date: 2014 / As indústrias de alimentos, entre elas a indústria pesqueira, geram uma grande quantidade de resíduos que, quando descartados de maneira inadequada, podem causar sérios problemas para o meio ambiente. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar filmes antimicrobianos nanocompósitos, de proteínas recuperadas da carne mecanicamente separada de pescado de baixo valor comercial, incorporados com óleos essenciais. Para este fim, utilizou-se proteína recuperada da corvina (Micropogonias furnieri), glicerol, montmorilonita e óleos essenciais de orégano e cravo. A proteína recuperada foi caracterizada quanto a sua composição proximal e funcionalidade apresentando um conteúdo proteico de 94,62% em base seca. Na obtenção dos filmes utilizou-se a técnica de casting onde forma realizados vários experimentos variando a composição da solução filmogênica em relação à quantidade de proteína, glicerol, nanoargila montmorilonita e óleos essenciais de orégano e de cravo. Os filmes foram caracterizados em relação à opacidade, solubilidade em água, propriedades mecânicas e permeabilidade ao vapor de água, sendo selecionados os filmes incorporados com óleos essenciais que apresentaram os melhores resultados, enfatizando-se a característica de elongação. A atividade antimicrobiana dos filmes, em relação à Escherichia coli, Staphylococcus coagulase positiva e Salmonella Enteretidis, foi verificada pelo método de difusão em disco. Os filmes incorporados com óleos essenciais na concentração mínima de 1 mL foram os que desenvolveram atividade antimicrobiana em relação aos microrganismos avaliados. As soluções filmogênicas destes filmes foram utilizadas como revestimento através da técnica dipping para avaliar as mudanças ocorridas em camarões branco (Litopenaeus vannamei) crus, descascados e refrigerados a 4±1°C durante 10 dias. Foram avaliadas características como perda de massa, cor, firmeza, pH, N-BVT, TBARS e crescimento microbiológico sendo que, em todos os tratamentos, onde os camarões foram revestidos com as soluções que continham óleo essencial os resultados foram melhores do que o tratamento controle onde a solução não era incorporada de óleo essencial. Neste aspecto o tratamento que continha em sua formulação 4,0 g de proteína recuperada, 1,35 g de glicerol, 0,6 g de montmorilonita, 1,0 mL de óleo essencial de orégano e 1,0 mL de óleo essencial de cravo foi o que apresentou o melhor resultado em todas as características analisadas. O filme correspondente a este tratamento também foi avaliado em relação a sua microestrutura e propriedades térmicas, onde foi verificado que a incorporação dos óleos essenciais altera a superfície do filme deixando-a mais porosa em relação ao filme sem óleos essenciais, por outro lado, a presença de óleos essenciais na estrutura do filme aumentou a estabilidade térmica do mesmo comparando com o filme sem óleos. Os resultados indicam que os filmes incorporados com óleos essenciais de orégano em uma concentração de 1% (v/v) apresentaram ação inibitória em relação aos microrganismos avaliados e que a vida útil dos camarões revestidos com soluções filmogênicas contendo óleos essenciais, em relação aos camarões sem revestimentos, aumentou de 5 para 8 dias. / The food industries, including the fishing industry, generate a lot of waste when disposed of improperly, can cause serious problems for the environment. The aim of this study was to develop and evaluate antimicrobial nanocomposite films from recovered proteins of mechanically separated fish meat of low commercial value, incorporated with essential oils meat. To this end, we used protein recovered croaker (Micropogonias furnieri), glycerol, montmorillonite and essential oils of oregano and clove. The recovered protein was characterized with respect to their composition and function having a protein content of 94.62% on a dry basis. To obtain the films we used the technique of casting where they performed several experiments varying the composition of the film solution for the quantity of protein, glycerol, montmorillonite nanoclay and essential oils of oregano and clove. The films were characterized with respect to opacity, water solubility, mechanical properties and permeability to water vapor, being selected films incorporated with essential oils that showed the best results, emphasizing the characteristic elongation. The antimicrobial activity of the films in relation to Escherichia coli, Staphylococcus coagulase positive and Salmonella Enteretidis was verified by the disk diffusion method. Films incorporated with essential oils at the minimum concentration of 1mL were those who developed antimicrobial activity towards microorganisms evaluated. The film formation solutions of these films were used as coating by dipping technique to evaluate changes in white shrimp (Litopenaeus vannamei) raw, peeled and chilled at 4 ± 1°C for 10 days. Characteristics such as weight loss, color, firmness, pH, TVB-N, TBARS and microbiological growth were being evaluated, in all treatments, where shrimp were coated with solutions containing essential oil were better than treatment control where the solution was not incorporated essential oil. In this respect the treatment that contained in its formulation 4.0 g of recovered protein, 1.35 g glycerol, 0.6 g montmorillonite, 1.0 mL of oregano essential oil and 1.0 mL of clove essential oil showed the best results in all traits. The film corresponding to this treatment was also evaluated for its thermal properties and microstructure, which found that the incorporation of essential oils alters the film surface making it more porous compared to the film without essential oils, on the other hand, presence of essential oils in the structure of the film increased thermal stability compared with the same film without oils. The results indicate that the films incorporated with oregano essential oils in a concentration of 1% (v / v) showed inhibitory activity towards microorganisms evaluated and that the life of shrimp coated film formation solutions containing essential oils in relation to shrimp without coatings increased from 5 to 8 days.

O óleo essencial de Citrus latifolia Tanaka (limão Tahiti) possui grande valor comercial e aplicações em diversos tipos de indústrias. A extração enzimática de óleos vegetais fixos aumenta o rendimento, consome pouca energia e causa um mínimo impacto ambiental, porém poucos estudos avaliaram o seu emprego para a extração de óleos essenciais de plantas aromáticas. Em vista disso, este trabalho teve como objetivo contribuir para o desenvolvimento de uma tecnologia enzimática para a extração do óleo essencial de cascas de C. latifolia Tanaka, além de avaliar a percentagem de compostos bioativos, como cumarinas, nos resíduos dos processos de extração. Para tanto, foram realizados pré-tratamentos enzimáticos nas cascas, através de um complexo constituído principalmente por celulases, caracterizado em papel filtro (FPA), e posterior extração do óleo por hidrodestilação. Nos três primeiros experimentos foram avaliados o efeito da carga enzimática (5, 7 e 12 FPA/g de substrato), o efeito do tempo de pré-tratamento enzimático (1, 2 e 3 horas) e o efeito do pré-tratamento em cascas trituradas sobre o rendimento e a composição do óleo essencial obtido por 1 hora de hidrodestilação. Em outro experimento foi avaliada a possibilidade de redução no tempo de hidrodestilação através do pré-tratamento enzimático, utilizando-se cargas de 5, 7 e 12 FPA/g em cascas trituradas, calculando-se o rendimento em óleo durante a hidrodestilação em diferentes intervalos de tempo (10, 15, 20, 30, 40, 50 e 60 minutos). As cumarinas foram extraídas com hexano dos resíduos líquidos e sólidos das hidrodestilações através de extração líquido-líquido e soxhlet, respectivamente. As análises dos compostos dos óleos essenciais e das cumarinas foram feitas por cromatografia gasosa (GC) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC/MS). Nos três primeiros experimentos descritos não foram verificadas diferenças estatísticas entre os rendimentos em óleo das amostras pré-tratadas enzimaticamente e os controles, demonstrando que o pré-tratamento enzimático não alterou o rendimento em óleo obtido por 1 hora de hidrodestilação. Porém, a análise dos componentes dos óleos permitiu observar um aumento nas proporções de alguns compostos oxigenados (p<0,05), responsáveis pela qualidade do aroma. No experimento onde foi avaliada a diminuição do tempo de hidrodestilação, verificou-se que o pré-tratamento com carga de 5 FPA/g atingiu o rendimento máximo em torno de 30 minutos do processo de destilação, enquanto que no controle o rendimento máximo foi em torno de 50 minutos. Utilizando-se a carga de 7 FPA/g, o rendimento máximo foi atingido em torno de 20 minutos, o mesmo ocorrendo com a carga de 12 FPA/g, enquanto que no controle foi em torno de 40 e 50 minutos, respectivamente. Estes resultados indicam que o pré-tratamento enzimático reduz o tempo de hidrodestilação apresentando vantagens do ponto de vista de custo energético e de integridade dos componentes do óleo, visto a redução do tempo de exposição do material vegetal à temperatura de ebulição da água, preconizando as bases para um processo tecnológico que envolve pré-tratamento enzimático associado à hidrodestilação para ser empregado na obtenção de óleo essencial de C. latifolia Tanaka. Em relação às cumarinas, os resultados obtidos indicaram que a percentagem da maioria desses compostos não foi alterada quando as amostras sofreram pré-tratamento enzimático. Entretanto, propõe-se que os resíduos gerados pela hidrodestilação podem ser aproveitados e utilizados como fonte de cumarinas. / Citrus latifolia Tanaka (Tahiti lime) essential oil has a high commercial value and a large application in different industries. The enzymatic extraction of vegetable oils increases yields extraction, energy efficient and cause minimal environmental impact, but few studies have evaluated its use for the extraction of essential oils from aromatic plants. As a result, this study aimed to contribute to the development of enzymatic technology for extraction of essential oil from peels of C. latifolia Tanaka, and assess the proportion of bioactive compounds such as coumarins, in wastes extraction processes. To do so, it was performed enzymatic pretreatment of the peels, through a complex composed primarily of cellulases, characterized in filter paper (FPA), and subsequent extraction of oil by hydrodistillation. In the first three experiments were evaluated the effect of enzyme loading (5, 7 and 12 FPA/g substrate), the effect of time of enzymatic pretreatment (1, 2 and 3 hours) and the effect of pretreatment on crushed peels, on yield and composition of essential oil obtained by 1 hour hydrodistillation. In another test, it was evaluated the possibility of reducing the time hydrodistillation by enzymatic pretreatment, using loads of 5, 7 and 12 FPA/g of crushed peels, calculating the oil yield during the hydrodistillation at different intervals time (10, 15, 20, 30, 40, 50 and 60 minutes). The coumarins were extracted from the liquid and solid wastes from hydrodistillations with hexane through liquid-liquid extraction and soxhlet, respectively. The analysis of the compounds of essential oils and coumarins were made by gas chromatography (GC) and gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS). In the first three experiments described not statistical differences were found between the oil yields of enzymatically pretreated samples and controls, demonstrating that the enzymatic pretreatment did not affect the oil yield obtained by 1 hour hydrodistillation. However, the analysis of the oil components allowed to observe an increase in the proportions of some oxygenated compounds (p < 0,05), responsible for the quality of aroma. In the experiment where was evaluated the short-time hydrodistillation, it was found that pretreatment with a load of 5 FPA/g reached the maximum yield of about 30 minutes from the distillation process, while in the control the maximum yield was about 50 minutes. Using the load of 7 FPA/g, the maximum yield was reached in about 20 minutes, the same happened with the load of 12 FPA/g, while in the control was around 40 and 50 minutes, respectively. These results indicate that enzymatic pretreatment reduces the time hydrodistillation with advantages in terms of cost efficiency and integrity of the oil components, since the reduction in exposure time of the plant material at a temperature of boiling water, pointing out the foundation for a technological process that involves enzyme pretreatment associated with hydrodistillation to be employed in obtaining essential oil of C. latifolia Tanaka. For the coumarins, the results indicated that the percentage of most of these compounds was not altered when the samples were enzymatically pretreated. However, it is proposed that the waste generated by hydrodistillation can be recovered and used as a source of coumarins.

O Brasil é um dos países com maior biodiversidade mundial, porém, poucas espécies vegetais tiveram suas propriedades avaliadas. Os óleos essenciais são compostos voláteis produzidos pelas plantas que contribuem para a sua adaptação ao meio ambiente. Estudos que ampliem o conhecimento sobre o potencial tóxico de plantas medicinais são extremamente relevantes, permitindo que se avalie a segurança do seu uso. Os óleos essenciais da parte aérea de cinco espécies de Aloysia nativas no Rio Grande do Sul e uma cultivada foram obtidos por hidrodestilação em aparelho do tipo Clevenger e a composição química foi determinada por cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas. As espécies que apresentaram 1.8-cineol como composto majoritário foram Aloysia dusenii (16.2%), A. citrodora (32.8%) e A. lycioides coletada em Guaiba (49.5%) e São Marcos (17.6%). A espécie A. polygalifolia e A. virgata tiveram maiores proporções de germacreno-D (11.2% e 12%, respectivamente) e A. chamaedryfolia apresentou espatulenol (15.6%). A espécie A. lycioides coletada em Rosário do Sul teve β-felandreno (23.7%) como o composto principal. Para as espécies A. citrodora, A. lycioides e A. dusenii também se avaliou a toxicidade dos seus óleos essenciais através do teste de letalidade frente a Artemia salina. Para as mesmas espécies, mas nas soluções 1%, 10% e óleo puro (v/v) também se testou os efeitos dos óleos essenciais sobre a germinação e o desenvolvimento inicial de Allium cepa (cebola). No bioensaio de A. salina observouse 100% de letalidade nas concentrações 1000 μg/mL e 500 μg/mL para as três espécies avaliadas. Nas demais concentrações avaliadas o grau de letalidade foi diretamente proporcional à concentração dos mesmos. O LC50 para A. citrodora foi de 55.96 μg/mL, para A. lycioides 48.12 μg/mL e A. dusenii o LC50 foi de 48.98 μg/mL. As espécies possuem composição química distinta o que resulta em respostas citotóxicas diversas. Os valores encontrados no LC50 para os óleos testados são considerados extremamente tóxicos. Os óleos voláteis de A. citrodora, A. lycioides e A. dusenii também apresentaram efeito inibitório sobre o tempo médio de germinação e sobre o crescimento inicial de A. cepa. Ainda, observou-se efeito inibitório significativo desses óleos essenciais sobre a atividade mitótica e metafásica na cebola. Os voláteis também induziram a ocorrência de anormalidades cromossômicas, como cromossomos não-orientados na metáfase, aderências, c-mitoses, micronúcleos e brotos nucleares. O óleo essencial de A. citrodora demonstrou ser o mais tóxico entre as espécies avaliadas. O presente estudo sugere que os compostos majoritários e minoritários das espécies de Aloysia têm ação sinérgica resultando nos efeitos observados, tanto para a atividade citotóxica como genotóxica. Esse trabalho contribuiu significativamente para ampliar os conhecimentos sobre a diversidade e composição química dos voláteis das espécies de Aloysia do RS e também para o entendimento do modo de ação dos produtos naturais com potencial alelopático e a relação ecológica entre as espécies, além de reportar sobre a toxicidade do óleo essencial dessas espécies que são muito utilizadas pela medicina popular. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior. / Brazil is one of the countries with the highest global biodiversity, but few plant species had their properties evaluated. Essential oils are volatile compounds produced by plants that contribute to their adaptation to the environment. Studies that advances knowledge on the toxic potential of medicinal plants are extremely relevant, allowing you to assess the safety of their use. Essential oils of five species of native Aloysia in Rio Grande do Sul and a cultivated were obtained by hydrodistillation in a Clevenger type apparatus and the chemical composition was determined by gas chromatography coupled to mass spectrometer. The species showing 1.8-cineole as major compound were Aloysia dusenii (16.2%), A. citrodora (32.8%) and A. lycioides collected in Guaiba (49.5%) and São Marcos (17.6 %). The species A. virgata and A. polygalifolia had higher proportions of germacrene-D (11.2% and 12%, respectively) and A. chamaedryfolia spathulenol (15.6%). The species A. lycioides collected in Rosário do Sul had β-phellandrene (23.7%) as the main compound. For A. citrodora, A. lycioides and A. dusenii also evaluated the cytotoxicity of their essential oils through the lethality test front of Artemia salina. For the same species, but the solutions 1%, 10% and pure oil (v / v) also tested the effects of volatiles on the germination and initial growth of Allium cepa (onion). In bioassay A. salina there was 100% lethality in concentrations 1000 μg/mL and 500 μg/mL for the three species evaluated. Others concentrations tested the degree of mortality was directly proportional to the oil concentration. The LC50 for A. citrodora was 55.96 μg/mL, while for A. lycioides 48.12 μg/mL and A. dusenii the LC50 was 48.98 μg/mL. Species have different chemical composition resulting in various cytotoxic responses. The values found in the LC50 for the tested oils are considered highly toxic. The volatile oils of A. citrodora, A. lycioides and A. dusenii also showed inhibitory effect on the average germination time and on the initial growth of A. cepa. There was a significant inhibitory effect of essential oils in the mitotic index and index metaphase onion. Volatile also induced the occurrence of chromosomal abnormalities, such as non-oriented chromosomes in metaphase, sticky, c-mitosis, micronuclei and buds at interphase. The essential oil of A. citrodora proved to be the most toxic among the species assessed. The present study suggests that the majority compounds and minority species of Aloysia have synergistic action resulting in the observed effects, both for the cytotoxic activity as genotoxic. This work contributed significantly to increase knowledge of the diversity and composition essential oils of species of Aloysia and also to the mode of action of the understanding of natural products with allelopathic potential and the ecological relationship between the species, and report on the toxicity of the volatile oil of these species that are widely used in folk medicine.