Orientador: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Maria Lúcia Gomes Lourenço / Banca: Moacir Leomil Neto / Resumo: Tumores mamários expressam a enzima cicloxigenase (Cox-2), que caracteriza um processo inflamatório intenso e pode também demonstrar a presença de alterações paraneoplásicas. Este trabalho teve por objetivo estudar a expressão de Cox-2 em tumores mamários de cadelas e avaliar o efeito do anti-inflamatório firocoxibe sobre a mesma. Os animais selecionados foram divididos em dois grupos: controle (9 animais) e tratado (10 animais). As cadelas foram avaliadas por exame clínico, bioquímica sérica, tamanho, volume, localização e avaliação TNM dos tumores e avaliação da qualidade de vida. O grupo tratado recebeu o firocoxibe na dosagem de 5mg/kg ao dia por sete dias e após este período todos os animais foram novamente avaliados e submetidos à mastectomia. As amostras obtidas nos dois momentos foram avaliadas por exame histológico e imunoistoquímica para expressão de Cox-2. Os resultados mostraram que, embora não tenha havido diferença no tamanho do maior nódulo ou na expressão de COX -2 entre os grupos após o tratamento, o aumento na expressão de COX-2 observado no grupo controle não foi verificado no grupo tratado e que os animais que receberam o tratamento por 7 dias apresentaram diminuição dos níveis de proteínas séricas totais (p=0.00588) e aumento dos níveis séricos de uréia (p=0.01388). Estes resultados sugerem que o uso do firocoxibe como coadjuvante no tratamento de cadelas com neoplasia mamária submetidas à mastectomia pode ser benéfico para deter a evolução da doença, embora seja indicado o acompanhamento dos animais para garantir que não haja sangramento gastrintestinal e que a saúde seja preservada / Abstract: Breast tumors express the enzyme cycloxygenase (COX-2), characterizing an inflammatory process and also demonstrate the presence of paraneoplastic alterations. This experiment aimed to study the expression of Cox-2 in mammary tumors of dogs and to evaluate the effect of anti-inflammatory firocoxib on it. The selected animals were divided into two groups: control (9 animals) and treated (10 animals). The animals were evaluated by clinical examination, serum biochemistry, size, volume, location and TNM evaluation of tumors and assessment of quality of life. The treatment group received firocoxib at dosage of 5mg/kg daily for seven days and after this period all animals were re-evaluated and submitted to mastectomy. The samples obtained at both moments were evaluated by histology and immunohistochemistry for the expression of Cox-2. The results showed that, although there was no difference in size of the largest tumor or in the expression of COX-2 between the groups after treatment, increased expression of COX-2 seen in the control group was not observed in the treated group and that those animals that received firocoxib for 7 days showed decreased levels of total serum protein (p = 0.00588) and increased serum levels of urea (p = 0.01388). These results suggest that the use of firocoxib as adjuvant therapy for dogs with breast cancer submitted to mastectomy can be beneficial to halt the progression of the disease, although monitoring of animals is indicated to ensure there is no gastrointestinal bleeding and health is preserved / Mestre

Orientador: Leila Aparecida Chiavacci / Banca: Renata Fonseca Vianna Lopez / Banca: Marcos Antonio Corrêa / Resumo: Nas últimas décadas, têm se observado um interesse crescente na inovação de sistemas nanoestruturados utilizados para a liberação prolongada de diversas substâncias. No caso de fármacos, as formulações de liberação prolongada apresentam diversas vantagens em relação às formas convencionais de administração, tais como alta eficiência de liberação, controle preciso da dosagem por períodos prolongados e diminuição da toxicidade. Dependendo da composição, uma mistura entre tensoativo, óleo e água podem formar diversos sistemas nanoestruturados com os mais variados níveis de organização estrutural, característica que interferi diretamente no processo de liberação. Neste trabalho esses sistemas foram obtidos pela construção de diagramas de fases, utilizando tensoativos com diferentes graus de hidrofilia, o PPG-5-Ceteth-20 e o Oleth 10, como fases oleosas o Ácido Oleico e o Miristato de Isopropila. Através dos diagramas foi possível observar diferenças significativas relacionadas com as características dos sistemas, devido à capacidade que o Oleth 10 como tensoativo e o Ácido Oleico como fase oleosa têm em diminuir a tensão interfacial, facilitando a formação de uma extensa região de sistemas transparentes. A caracterização da estrutura interna dos mesmos foi feita por microscopia de luz polarizada, espalhamento de raios-X a baixo ângulo (SAXS) e medidas reológicas. Através da microscopia foi possível identificar características isotrópicas e anisotrópicas, sendo posteriormente confirmadas pelo SAXS, o qual permitiu não só a identificação das nanoestruturas, mas também uma avaliação mais aprofundada sobre o nível de organização estrutural, principalmente dos arranjos líquido-cristalinos, característica que foi reforçada através das medidas reológicas, as quais proporcionaram uma... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In the last decades it has been observed a growing interest in nanostructure systems innovations, wich are response for control release of several substances. In the case of drugs, the formulations which promote the controlled release present many advantages against the conventional forms of administration, such as high release efficiency, precise dosage control for long periods and toxicity decreasing. Depending on the composition, a surfactants mixture, oil and water can form different nanostructured systems with the most different organization structure degrees, which can directly interfere in the global process of drugs release. In this paper the nanostructured systems were obtained through the building of phases diagrams, using surfactants with different hydrophilic degrees, the PPG-5-Ceteth-20 and the Oleth 10, as oil phases the Oleic Acid and Isopropil Miristate. It was possible to observe significant difference between the diagrams wich are related with the characteristics of the obtained systems, due to a higher capacity that Oleth 10 as a surfactant and the Oleic Acid as oil phase have in decreasing the interfacial tension, and consequently promoting a greater region of transparent systems. The internal structure of these systems was characterized by polarized light microscopy, small angle X-ray scattering (SAXS) and rheological measurements. Through the microscopy it was possible to identify the isotropic and anisotropic characteristics, being later confirmed by SAXS. This characterization through SAXS allowed not only the nanostructures identification, but also a more deeply evaluation on the structure degree, mainly on the arrangement of liquid-crystalline. The rheological test also provided a better understanding about the degree of internal structure of nanostructured systems, mainly those... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: O objetivo deste trabalho foi investigar a migração celular induzida pelo hidróxido de cálcio para bolha de ar subcutânea em camundongos. Observou-se que a migração de neutrófilos ocorreu de maneira dose-dependente, alcançando o pico de migração 96 horas após a injeção do estímulo. Esta migração foi inibida com o pré-tratamento dos animais com indometacina (5mg/Kg), meloxican (5mg/Kg) e dexametasona (1mg/Kg), diferentemente, o MK886 (1mg/Kg) foi inefetivo neste processo. Constatou-se também que os animais estimulados com hidróxido de cálcio apresentaram um aumento significativo na liberação de citocinas e quimiocinas (KC, MIP-2, IL1ß e TNFa). O pré-tratamento com meloxican ou aminoguanidina inibiu a liberação de KC, MIP-2, IL1ß, mas não de TNFa. O pré-tratamento com Tioglicolato a 3% aumentou cerca de 167% a população de macrófagos na bolha de ar subcutânea, entretanto, não alterou a migração de neutrófilos. Pôde-se concluir que a migração de neutrófilos para bolha de ar subcutânea induzida pelo hidróxido de cálcio, em camundongos, foi dependente de KC, MIP-2, IL1ß e TNFa, sendo a liberação destes mediadores independente de mastócitos e de macrófagos. / Abstract: The aim of this study was to investigate the cellular migration induced by calcium hydroxide to air-pouch in mice. It was observed that the migration developed dependently to the doses and achieved the peak 96 hours after the stimulation. Neutrophil migration was inhibited with the pre-treatment with indometacin (5mg/Kg), meloxican (5mg/Kg) and dexamethasone (1mg/Kg). Differently, MK886 (1mg/Kg) was ineffective in this process. It was seen that the animals stimulated with calcium hydroxide showed an increase of cytokines and chymiokines (KC, MIP-2, IL1ß e TNFa) release. Pre-treatment with meloxican or aminoguanidine inhibited KC, MIP-2, IL1ß release, but not TNFa. Release of TNFa was not dependent of prostaglandines and nitric oxide because it was not inhibited by aminoguanidine and meloxican. Pretreatment with Tioglocolate 3% increased 167% the macrophage population in the air-pouch. However, it did not change neutrophil migration. It was possible to conclude that the neutrophil migration to the air-pouch induced by calcium hydroxide in mice was dependent on KC, MIP-2, IL1ß, TNFa and prostaglandins and it was not dependent on the mast cells and macrophages. / Orientador: João Eduardo Gomes Filho / Coorientador: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Carlos Ferreira dos Santos / Banca: Pedro Felício Estrada Bernabé / Mestre

Orientador: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Maria Rita Parisi Fortes / Banca: Luiz Vicente Garcia / Resumo: Fármacos antiinflamatórios, inibidores da síntese de prostaglandinas, são muitas vezes administrados imediatamente antes da cirurgia, ou durante a mesma, para tratamento de dor pós-operatória. Se ocorrer hemorragia intraoperatória, o rim estaria sem a ação protetora das prostaglandinas, com possibilidade de pior lesão isquêmica. Entretanto, estudo mostrou menor lesão com o antiinflamatório cetoprofeno nessa situação. Em vista disso, o objetivo deste estudo foi pesquisar a expressão renal de citocinas TNFα e IL-1, em ratos que receberam cetoprofeno antes de serem submetidos à hemorragia aguda sem ressuscitação fluídica, relacionando esta expressão com o resultado histológico. Método. Este trabalho foi desenvolvido com 20 ratos Wistar machos, anestesiados com pentobarbital sódico, 50 mg. kg-1 por via intraperitoneal, e divididos em dois grupos submetidos a sangria de 30% da volemia, realizada em três momentos com tempo de 10 minutos entre eles. No grupo G1, 10 animais permaneceram apenas com infusão venosa contínua de solução de Ringer com lactato para reposição de perdas mínimas. No grupo G2, 10 animais também receberam, por via venosa, cetoprofeno 1,5 mg. kg-1, 60 minutos antes da hemorragia. Os atributos estudados foram: pressão arterial média, temperatura retal, hematócrito, concentrações séricas de TNF-α e IL-1, análise histológica do rim, imunomarcações teciduais renais de TNF-α e IL-1. Resultados. Os animais foram homogêneos quanto ao peso. Em G1, a redução da pressão arterial média foi intensa e em G2 houve redução, porém não significativa. Ambos os grupos já antes da hemorragia apresentaram animais com hipotermia, a qual foi mais intensa em G2. Em G2, o hematócrito foi significativamente maior que em G1. Os valores séricos de TNF-α já estavam elevados quando da hemorragia, em G1 e G2, porém muito mais neste último... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Anti-inflammatory drugs, inhibitors of prostaglandins synthesis, are several times administered immediately before or during surgery for postoperative pain relief. In case of intraoperative hemorrhage, the kidney would lose the protective action of the prostaglandin, with the possibility of a worse ischemic lesion. In this case, however, study has shown a smaller lesion with the use of the antiinflammatory drug ketoprofen. The aim of this study was to research the renal expression of cytokines TNF- and IL-1 in rats which have received ketoprofen before being submitted to acute hemorrhage without fluid resuscitation, connecting this expression with the histological result. Method: This study was developed with 20 male Wistars rats, anesthetized with 50 mg.kg-1 of sodium pentobarbital intraperitoneal, and divided in two groups submitted to a 30% volemia bleeding, performed in three moments with a 10 minutes lapse between them. In the group G1, 10 animals remained only with continuous venous infusion of lactated Ringer solution to replace the minimum loss. In the group G2, 10 animals received 1,5 mg.kg-1 of ketoprofen intravenously as well, 60 minutes before the hemorrhage. The attributes studied were: medium artery blood pressure, rectal temperature, hematocrit, serum concentration of cytokines TNF- and IL-1, histological analysis of the kidney, immunostaining of TNF- and IL-1 in renal tissues. Results: The animals were homogeneous in weight. The group G1 showed an intense reduction of the medium artery blood pressure while the group G2 showed a non significative reduction. The animals in both groups had already presented hypothermia before the hemorrhage, which was more intense in group G2. Also in this group, the hematocrit was considerably larger than in group G1. The serum values of TNF- were already high at the time of first hemorrhage... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Celso Antonio Rodrigues / Banca: Paulo Sergio Patto dos Santos / Banca: Antonio José de Araújo Aguiar / Banca: Carlos Alberto Hussni / Banca: Júlio Augusto Naylon Lisboa / Resumo: A dor em bovinos, geralmente é negligenciada, seja por falta de métodos diretos no diagnóstico da dor, ou mesmo pelo fato do animal manter-se calmo, sem expressões significativas de dor. Os métodos utilizados para diagnóstico de dor em bovinos são inespecíficos, como variação da freqüência cardíaca e respiratória, mudança de comportamento. Os objetivos deste trabalho foram: Testar a utilização do pedômetro como método de avaliação comportamental da dor em bezerros; Comparar o resultado da mensuração hormonal com os dados comportamentais, obtidos com o pedômetro no pré e pós-cirúrgico de intervenções abdominais de bovinos; comparar a eficiência antiinflamatória entre diferentes doses de flunixin meglumine e meloxicam no pós-operatório de onfalopatias em bovinos. Foram utilizados 24 bovinos, machos e fêmeas, divididos em quatro grupos, com histórico de onfalopatias, sendo seis destes, animais saudáveis que pertenciam ao grupo controle, os demais pertenciam aos grupos tratados As coletas do sangue total para mensuração do cortisol plasmático foram realizadas 11 momentos. Enquanto que as alterações comportamentais foram avaliadas a cada 12 horas, por meio da leitura do pedômetro e exame clínico, respectivamente A utilização do pedômetro foi eficaz como método de avaliação comportamental da dor. A mensuração do cortisol isoladamente, como método para avaliação indireta do estresse, mostrou-se de pouca acurácia. O estresse do manejo, coleta e a docilidade dos bovinos influenciaram decisivamente nas variações dos níveis de cortisol. Conclui-se que o flunixin meglumine nas doses de 1,1, 2,2 mg/kg, bem como o meloxicam na dose de 0,5 mg/kg de, foram igualmente eficientes / Abstract: The pain in cattle is usually neglected, either for lack of direct methods in the diagnosis of pain, or even because of the animal to be calm, without significant expressions of pain. The methods used for diagnosis of pain in cattle are nonspecific, such as changes in heart rate and breathing, behavior change. Our objectives were: To test the use of pedometers as a method of behavioral assessment of pain in calves, compare the result of hormonal measurement with the behavioral data obtained with the pedometer in the pre-and post-surgical abdominal interventions cattle; compare efficiency of different anti-inflammatory doses of meloxicam and flunixin meglumine on postoperative onfalopatias in cattle. We used 24 animals, males and females, divided into four groups, with a history of onfalopatias, six of these animals belonged to the healthy control group, the other belonged to the groups treated whole blood samples for measurement of plasma cortisol were performed 11 moments. While the behavioral changes were evaluated every 12 hours, by reading the pedometer and physical examination, respectively the use of the pedometer was effective as a method of behavioral assessment of pain. The measurement of cortisol alone as a method of indirect evaluation of stress, showed little accuracy. The stress of handling, collection and docility of cattle decisively influenced the variations in cortisol levels. It is concluded that flunixin meglumine at doses of 1.1, 2.2 mg / kg, and meloxicam at a dose of 0.5 mg / kg were equally effective / Mestre

Although the relationship between bone formation and the immune / inflammatory response is extremely important for the bone repair process, such interaction remains poorly understood. While an exaggerated immune / inflammatory response is associated with bone resorption, an ideal transient response of low magnitude is essential in the process. In this context, signaling mediated by Toll receptors (TLRs) and RAGE receptors plays a key role in initiating the immune / inflammatory response through the recognition of molecular patterns associated with damage (DAMPs). One of the major DAMPs recognized by TLR4 and RAGE is the HMGB1 protein. Once activated by HMGB1, these receptors are able to generate several important inflammatory mediators in the process of alveolar bone repair. Nevertheless, the mechanisms of "trigger" of the production of cytokines and inflammatory mediators with respect to the bone repair, nor the amount necessary, are not clear. In view of this, we aimed to investigate the influence of the HMGB1 ligand on the generation of immune / inflammatory response and on the bone repair subsequent to the extraction of the superior incisor of mice. For this, 40 mice were divided into two groups [Control Group - WT; Group GLY - treated with glycyrrhizin (HMGB1 inhibitor)] and analyzed for alveolar bone repair in the periods of 0, 7, 14, 21 days after exodontia. Samples were submitted to histological processing and analyzed under optical microscopy for histomorphometric characterization (qualitative and quantitative), and analyzed by MicroCt for description of bone structures. In the histomorphometric analysis, the results showed a higher clot density in the GLY group in the 14-day period (p <0.05); As well as more inflammatory cells in the period of 7 and 14 days compared to the control (p <0.05). As well, it presented higher density of fibroblasts in the periods of 7, 14 and 21 days and lower density of fibers in 7 days (p <0.05). The GLY group had lower vessel densities in the periods of 7, 14 and 21 days. (P <0.05). The GLY group presented lower osteoblasts and higher osteoclasts compared to the control group at 7 and 14 days (p <0.05). Regarding the MicroCt, the images of both groups were performed and did not present significant difference between the groups. Therefore, inhibiton of HMGB1 protein was not able to interfere in the kinetics of alveolar bone repair in mice, but showed differences in some components involved in alveolar bone repair kinetics. / Embora a relação entre a formação óssea e a resposta imune/inflamatória mostre-se extremamente importante para o processo de reparo ósseo, tal interação permanece pouco compreendida. Enquanto uma resposta imune/inflamatória exacerbada está associada à reabsorção óssea, uma resposta ideal transitória de baixa magnitude é essencial no processo. Nesse contexto, a sinalização mediada por receptores tipo Toll (TLRs) e receptores RAGE desempenha um papel fundamental no inicio da resposta imune/inflamatória através do reconhecimento de padrões moleculares associados a danos (DAMPs). Um dos principais DAMPs reconhecidos pelo TLR4 e RAGE é a proteína HMGB1. Uma vez ativados por HMGB1, estes receptores são capazes de gerar diversos mediadores inflamatórios importantes no processo de reparo ósseo alveolar. Ainda assim, não são claros os mecanismos de “trigger” da produção de citocinas e mediadores inflamatórios com relação ao reparo ósseo, nem a quantidade necessária. Visto isso tivemos como objetivo investigar a influencia do ligante HMGB1 na geração de resposta imune/inflamatória e no reparo ósseo subseqüente à extração do incisivo superior de camundongos. Para isso, foram utilizados 40 camundongos divididos em dois grupos [Grupo controle- WT; Grupo GLY – tratado com glicirrizina (inibidor de HMGB1)] e analisados quanto ao reparo ósseo alveolar nos períodos de 0, 7, 14, 21 dias após exodontia. Amostras foram submetidas ao processamento histológico e foram analisadas ao microscópio óptico para caracterização histomorfométrica (qualitativa e quantitativa), e analisadas por MicroCt para descrição de estruturas ósseas. Na análise histomorfométrica, os resultados mostram maior densidade de coágulo no grupo GLY no período de 14 dias (p<0,05); como também mais células inflamatórias no período de 7 e 14 dias comparado ao controle (p<0,05). Como também, apresentou maior densidade de fibroblastos nos períodos de 7, 14 e 21 dias e menor densidade de fibras em 7 dias ( p<0,05). O grupo GLY apresentou menores densidades de vasos nos períodos de 7, 14 e 21 dias. (p<0,05). Apensar de não demonstrar diferença singnificativa na formação óssea, o grupo GLY apresentou menores quantidades de osteoblastos e maiores de osteoclastos comparado ao grupo controle nos tempos de 7 e 14 dias (p<0,05). Quanto ao MicroCt, as imagens de ambos os grupos foram realizadas e não apresentou diferença significativa entre os grupos. Portanto, a inibição da proteína HMGB1 não foi capaz de interferir na cinética de reparo ósseo alveolar em camundongos, mas apresentaram diferenças em alguns componentes participantes da cinética do reparo ósseo alveolar. / Lagarto, SE

Orientador: Reinaldo Fernandes Cooke / Resumo: Este estudo avaliou os efeitos da administração oral de meloxicam nas respostas metabólicas, inflamatórias e de fase-aguda em bovinos de corte recebendo um desafio de lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (Exp. 1; d -1 a d 6) ou vacina contra patógenos respiratórios (Exp. 2; d 7 a d 21). Vinte e um novilhos (n=11) e novilhas (n=10) foram alocados em baias individuais no d -15 e receberam água, mistura de sais minerais e vitaminas, e feno de alfafa ad libitum até d 21. No d -1, os animais foram classificados por sexo e peso corporal (PC) e designado para um dos três tratamentos a seguir: 1) Administração via oral de Meloxicam (1mg/Kg PC, diariamente; Carlsbad Technologies Inc., Carlsbad, CA, EUA) do d -1 até d 6 (MEL8); 2) Administração via oral de Meloxicam (1mg/Kg PC; Carlsbad Technologies Inc., Carlsbad, CA, EUA) no d 0 e de monoidrato de lactose (1mg/Kg PC; Avantor Performance Materials, Center Valley, PA, EUA) no d -1 e do d 1 até d 6 (MEL1); ou 3) Administração via oral de monoidrato de lactose (1mg/Kg PC, diariamente; Avantor Performance Materials, Center Valley, PA, EUA) do d -1 até d 6 (CON). Para o Experimento 1, no d 0, os animais receberam infusão intravenosa de LPS (0,5 μg/Kg PC; Escherichia coli 0111:B4, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EUA) simultaneamente à administração do tratamento. Temperatura retal (RTEMP) foi medida, e amostras de sangue coletadas nas horas −2, 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 36, 48, 60, 72, 96, 120, e 144 h relativa à administração de LPS. Não foram detectados efeitos de tratamentos (P ≥ 0,36) para RTEMP, concentração sérica de Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNFα), concentrações plasmáticas de haptoglobina, cortisol, insulina e leptina, assim como para expressão de RNAm sanguíneo para TNFα e ciclooxigenase-2 (COX2), contudo todas as variáveis se elevaram (P < 0,01) dentre os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the effects of oral meloxicam administration on metabolic, inflammatory, and acute-phase responses of beef cattle receiving a lipopolysaccharide (LPS) challenge (Exp. 1; d −1 to 6) or vaccinated against respiratory pathogens (Exp. 2; d 7 to 21). Twenty-one Angus steers (n = 11) and heifers (n = 10) were housed in individual pens on d −15 and were offered free-choice water, mineral-vitamin mix, and hay until d 21. In Exp. 1, cattle were ranked on d −1 by sex and BW and assigned to 1) oral meloxicam administration (1 mg/kg BW daily) from day −1 to 6 (MEL8), 2) oral meloxicam administration (1 mg/kg BW) on d 0 and oral lactose monohydrate administration (1 mg/kg BW) on d −1 and from d 1 to 6 (MEL1), or 3) oral lactose monohydrate administration (1 mg/ kg BW daily) from d −1 to 6 (CON). On d 0, cattle received an intravenous LPS bolus (0.5 μg/kg BW) concurrently with treatment administration. Rectal temperature (RTEMP) was assessed, and blood samples were collected at −2, 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 36, 48, 60, 72, 96, 120, and 144 h relative to LPS administration. No treatment effects were detected (P ≥ 0.36) for RTEMP, concentrations of serum tumor necrosis factor α (TNFα), plasma haptoglobin, cortisol, insulin, and leptin, as well as blood mRNA expression of TNFα and cyclooxygenase-2, although all variables increased (P < 0.01) across treatments after LPS administration. In Exp. 2, cattle received the same treatments that they were assigned to in Exp. 1 from d 7 to d 13 and were vaccinated against respiratory pathogens concurrently with treatment administration on d 8. Blood samples were collected, and RTEMP was assessed as in Exp. 1 in addition to 168, 240, and 336 h relative to vaccination. No treatment effects were detected (P ≥ 0.26) for RTEMP, the same plasma and serum variables evaluated in Exp. 1, and serum concentrations of antibodies against... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Antonio de Queiroz Neto / Banca: Guilherme de Camargo Ferraz / Banca: Antonio Raphael Teixeira Neto / Resumo: O estudo objetivou avaliar a segurança da administração oral da dose terapêutica do firocoxib por 14 dias em equinos saudáveis. Foram utilizados 9 equinos, 4 machos e 5 fêmeas, com peso médio de 405±31 Kg e idade média 11±3 anos que receberam uma vez ao dia, 0,1mg/kg de firocoxib. Hemograma, avaliação dos parâmetros de coagulação e bioquímicos séricos e urinálise foram realizados antes do início do tratamento (D1), após 7 e 14 dias de tratamento (D7 e D14) e 7 dias após o final do tratamento (D21). Foi realizado exame gastroscópico 1 dia antes do início do tratamento (D0) e dois dias após a última coleta de dados. O número de leucócitos diminuiu na avaliação do D14 em relação ao D1, voltando aos valores basais no D21- 7 dias após o final do tratamento. A concentração de hemoglobina aumentou nos momentos D14 e D21 em relação ao do D1. A concentração plasmática de fibrinogênio aumentou no momento D21 em relação a D7 e D14. O tempo de tromboplastina parcial ativada e o tempo de protrombina aumentaram em D7 e D14 e D21 quando comparadas as médias em relação à média do D1. A contagem de plaquetas diminuiu nas avaliações em D7, D14 e D21 em relação ao momento D1. A atividade sérica da aspartato aminotranferase aumentou no D14 em relação ao D1. A atividade sérica da fosfatase alcalina aumentou nos momentos D7 e D14 em relação ao D1. A concentração de ureia diminuiu no D14 em relação ao D1. A creatinina se manteve estável no período de tratamento porém, no D21 apresentou diminuição em relação a D1, D7 e D14. A atividade sérica da gama glutamiltranferase diminuiu no D21 quando comparada ao D14, mas não houve diminuição em relação ao D1 e ao D7. Não foram observadas alterações na urinálise e no exame gastroscópico. Conclui-se que a administração do firocoxib em equinos é segura uma vez... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The study aimed to evaluate the safety of oral administration of the therapeutic dose of firocoxib for 14 days in healthy horses. Were used 9 horses, 4 males and 5 females, with a mean weight of 405 ± 31 kg and an average age 11 ± 3 years who received once a day orally 0.1 mg/kg firocoxib. CBC, evaluation of coagulation parameters and serum biochemical and urinalysis were performed before the initiation of treatment (D1) after 7 and 14 days of treatment (D7 and D14) and 7 days after end of treatment (D21). Gastroscopic examination was conducted 1 day prior to initiation of treatment (D0) and two days after the last data collection. The number of leukocytes decreased in evaluating the relative D14 to D1, returning to baseline at D21-7 days after end of treatment. The hemoglobin concentration increased during times D14 and D21 in relation to the D1. The plasma concentration of fibrinogen increased when compared to D7 D21 and D14. The activated partial thromboplastin time and prothrombin time increased at D7 and D14 and D21 compared the averages from the average of D1. Platelet count decreased in assessments in D7, D14 and D21 compared to D0 moment. Serum activity of aspartate aminotranferase increased in D14 compared to D1. The serum alkaline phosphatase activity increased in times D7 and D14 compared to D1. The concentration of urea has decreased compared to the D14 D1. Creatinine remained stable during treatment but showed a decrease in D21 compared to D1, D7 and D14. Serum activity of gamma glutamyltranferase decreased when compared to the D21 D14, but no decrease from D1 and D7. No changes were observed in the gastroscopic examination and urinalysis. It is concluded that administration of firocoxib is safe in horses since it was not able to promote the appearance of adverse effects, allowing... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Cristiane Damas Gil / Coorientador: Sonia Maria Oliani / Banca: Ricardo Luiz Smith / Banca: Patrícia Maluf Cury / Resumo: A conjuntivite alérgica (CA) representa uma doença complexa do sistema imune envolvendo desgranulação dos mastócitos na conjuntiva e liberação de mediadores que provocam o influxo de células inflamatórias nessa membrana mucosa. Entre os mediadores anti-inflamatórios, destacamos a proteína galectina-1 (Gal-1) capaz de controlar o processo de transmigração dos leucócitos, liberação de citocinas e desgranulação de mastócitos. Contudo, seu papel nas inflamações oculares tem sido pouco estudado. Nos dias 0 e 7, camundongos machos Balb/c receberam a administração via subcutânea de ovalbumina (OVA; 5μg) e, nos dias 14, 15 e 16 foram desafiados com OVA (250μg) por instilação direta no saco conjuntival. Para os tratamentos farmacológicos (dias 14-16), foram administrados intraperitonealmente Gal-1 recombinante (rGal-1; 0,3 μg/animal) ou dexametasona (Dex; 1 mg/kg). O escore clínico foi realizado 20 minutos após o desafio. Após 4 e 24 horas do último desafio, os animais foram sacrificados e as análises realizadas por meio de: histopatologia e quantificação de células inflamatórias na conjuntiva bulbar e sangue; dosagem dos níveis de IgE anti OVA no plasma pela técnica de ELISA; dosagens das citocinas (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, TNF-α e IFN-γ) e quimiocinas (RANTES, MCP-1 e eotaxina) nos olhos, fluido lacrimal e linfonodos, por meio de painel multiplex e, imuno-histoquímica para detectar a expressão da Gal-1 na conjuntiva. A CA foi caracterizada pelo aumento significante do escore, principaelmnte no 16º dia (5,7 ± 0,3; P < 0,001) comparado ao controle (2.6±0.6), seguido de nível elevado de IgE anti-OVA após 4 e 24h. Os tratamentos farmacológicos com rGal-1 (1,2 ± 0,5; P <0,001) e Dex (3,0 ± 0,2; P < 0,05) diminuíram os sinais clínicos, e rGal-1 reduziu o nível de IgE anti-OVA (28,6 ± 6,3; P < 0,05), comparado ao grupo CA (70 ± 12,8A). As análises histopatológicas e quantitativas de células... / Abstract: Allergic conjunctivitis (AC) is a complex disease of the immune system which includes mast cell degranulation in the conjunctiva and release of mediators that trigger inflammatory cell infiltration in this mucous membrane. Among the anti-inflammatory mediators, we highlight the protein galectin-1 (Gal-1) which regulates the process of leukocyte transmigration, release of cytokines and mast cell degranulation. However, its role in ocular inflammation has been little studied. BALB/c male mice were sensitized subcutaneously with 5μg of ovalbumin (OVA) on days 0 and 7 and challenged by eye drops containing OVA (250 μg) once daily (days 14, 15 and 16). For pharmacological treatment (days 14-16) animals received intraperitoneally recombinant Gal-1 (rGal-1; 0.3 μg /animal) or dexamethasone (Dex; 1 mg/kg). The clinical score was performed twenty minutes after OVA challenge (days14-16). After 4 and 24 hours of last OVA challenge, the animals were sacrificed and the followed analyses were performed: histopathology and quantification of inflammatory cells in the bulbar conjunctiva and blood; plasma anti-OVA IgE levels by ELISA; cytokines (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-13, TNF-α and IFN-γ) and chemokines (RANTES, MCP- 1 and eotaxin) levels in the eyes, lacrimal fluid and lymph nodes by multiplex panel; and immunohistochemistry to detect Gal-1 expression in the conjunctiva. The CA was characterized by a significant increase in the score, especially on the 16th day (5.7 ± 0.3, P < 0.001)compared with controls (2.6 ± 0.6), followed by high anti-OVA IgE levels after 4 and 24h. Pharmacological treatments with rGal - 1(1.2 ± 0.5, P < 0.001) and Dex (3.0 ± 0.2, P < 0.05) decreased the clinical signs and rGal -1 reduced anti-IgE OVA levels(28.6 ± 6.3, P < 0.05), compared to the CA group (70 ± 12.8). Histopathological and quantitative analysis of inflammatory cellspresented a significant increase of mast cells,intravascular and transmigrated ... / Mestre

Orientador: Jean Leandro dos Santos / Banca: Chung, Man Chin / Banca: Simone Kashima Haddad / Resumo: A reativação da expressão gênica de gama-globina e consequente produção de hemoglobina fetal (HbF) por mecanismos epigenéticos é uma valiosa intervenção terapêutica na anemia falciforme. Estudos recentes mostram que a inibição da enzima Histona Deacetilase (HDAC), principalmente HDAC-1 e HDAC-2, mostrou ser uma estratégia promissora em promover o aumento da expressão gênica de gama-globina e a produção de HbF sem causar alteração no ciclo e proliferação celular. Neste trabalho foram planejadas por modelagem molecular novos compostos inibidores de HDAC 1 e 2. Os estudos de ancoragem molecular revelaram a forma como estes compostos interagem com a HDAC-2, sendo a subunidade N-(2-aminofenil)benzamida responsável por interagir com o átomo de zinco presente no sítio ativo. Durante o processo de otimização das estruturas, os valores de docking score passaram de -9,8 para - 12,3, indicando melhores interações com o receptor. Onze compostos inéditos foram sintetizados e caracterizados por métodos analíticos. Os estudos enzimáticos mostraram atividade inibitória dos novos compostos variaram de 83 à 96% para HDAC-1, 83 à 94% para HDAC-2 e 82 à-89% para HDAC-3. O composto (22) (4-(4-aminofenetil)-N-(2-aminofenil)benzamida) foi um dos mais ativos apresentando, na concentração de 10 μM, atividade inibitória contra as HDACs 1 e 2 com valores superiores a 90%. Estes resultados mostram que os compostos planejados neste trabalho são potenciais inibidores de HDAC, sendo a molécula (22) a mais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Reactivation of gamma-globin gene expression and fetal hemoglobin (HbF) production through epigenetic mechanisms are valuable strategy to sickle cell anemia treatment. Early studies have demonstrated that histone deacetylase inhibition, especially HDAC-1 and HDAC-2, is a promising strategy to increase gamma-globin gene expression and HbF production without alteration in cell cycle or cell proliferation. At this work it was designed, by molecular modeling, new compounds HDAc 1 and 2 inhibitors. The molecular modeling studies has demonstrated how these compounds interacts with HDAC-2, being the subunit N-(2-aminophenyl)benzamide responsible for interact with the zinc atom of active site. During the optimization process, the docking score values hava changed from -9,8 to -12,3, which indicates better interactions with the receptor. It was synthesized and characterized eleven new compounds. Enzimatic assays have demonstrated that the enzymatic inhibition of the compounds varied from 83 to 96% against HDAC 1, 83-94% against HDAC 2 and 82-89% of HDAC 3. Compound (22) (4-(4-aminophenetyl)-N-(2-aminophenyl) benzamide was one of the most promisor among all compounds. At 10uM it was able to inhibit HDAC 1 and 2 more than 90%. These data has demonstrated that the design compounds in this work are potencial inhibitors of HDAC, being...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre