Orientador: Hans Ingo Weber / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-21T16:53:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_FranciscoJoseVicentede_M.pdf: 6703520 bytes, checksum: aa677f747599094668ea06d0f7536ad9 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O conhecimento do comportamento dinâmico de equipamentos é importante, seja para o desenvolvimento e otimização de projetos ou para o monitoramento e diagnóstico de falhas de operação. Técnicas de processamento para extrair dos complicados sinais de vibrações mecânicas as informações pertinentes a cada análise têm sido investigadas. A análise de Fourier é capaz de revelar o conteúdo frequencial dos sinais. Porém. tal técnica é limitada à análise de sinais estacionários, já que os resultados obtidos são médias dentro do período amostrado, não distinguindo o instante de tempo em que um determinado evento ocorreu. Atualmente, cresce o interesse por sinais não estacionários, complexos. Em sua estrutura mas muito ricos em informações. Ateoria wavelet, capaz de fornecer informações locais de um sinal, é o objeto do presente estudo. A técnica consiste na decomposição do sinal em ondículas (wavelets) que, além de estarem relacionadas a um conteúdo frequencial. possuem um caráter localizado na linha do tempo. Assim, partindo da análise de Fourier, introduzimos os conceitos dessa nova técnica, bem como alguns exemplos práticos de aplicação / Abstract: The knowledge of the dynamic behaviour of machinery is important to develop modern design and condition monitoring. Thus, it is necessary to adequate appropriate processing methods in order to extract the desired informations from the complicated time domain mechanical vibration signals. The Fourier analysis has been extensively used to extract the frequency content from the signals. However, such technique is suitable only for stationary signals, since the given results correspond to average values on the sample period and do not discern the time location of discrete events. Nowadays, there has been a special interest on non-stationary signals, which have a complex structure but are very rich in informations about the real nature of the system. The wavelet theory, which is able to give local properties of a signal, is the subject of this workpiece. The technique consists on decomposing the given signal on small waves (wavelets), which are localised in both time and frequency domains. In the light of Fourier analysis, we introduce the bases of wavelet theory and some practical insights / Mestrado / Mecanica dos Sólidos e Projeto Mecanico / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientadores: Maricilda Palandi de Mello, Celso Eduardo Benedetti, Fernanda Caroline Soardi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T21:27:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CunhaJunior_JoseLuizRosenberis_M.pdf: 3002580 bytes, checksum: 1980aba7f72fdfd74e758a924771c055 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A expressão do gene SRY (Sex Determining Region in chromosome Y) é responsável por desencadear a determinação testicular durante o desenvolvimento embrionário, a partir das gônadas ainda indiferenciadas. Mutações nesse gene são encontradas em muitos casos de anomalias do desenvolvimento gonadal. O projeto teve por objetivo principal a análise funcional do efeito de uma mutação na região promotora do gene SRY, sendo que essa mutação consiste em uma deleção de 3 pares de base em um dos sítios consenso de ligação do fator de transcrição Sp1 ao promotor do gene. O portador dessa mutação é um indivíduo com disgenesia gonadal pura 46,XY, sendo que outros membros da família apresentavam ambiguidade genital e o pai, também portador da mutação, possuía grave hipospadia ao nascimento. Para tentar esclarecer os efeitos desta mutação nos mecanismos moleculares de regulação da expressão do gene SRY, este trabalho primeiramente analisou a interação da proteína Sp1 com os sítios localizados na região promotora de SRY e o efeito da mutação nesta interação, através de ensaios de EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay). Concluiu-se que os sítios Sp1A e Sp1B se ligam a duas moléculas de Sp1 e que a mutação no Sp1A praticamente abole esta ligação. Possivelmente a ausência dessa ligação impediu a formação de um complexo de transcrição, causando uma diminuição na expressão do gene SRY e levando à ausência de formação dos testículos e reversão sexual completa na paciente. Complementando, foi analisado o efeito dessa mutação na expressão através de ensaio de expressão com gene repórter, no qual o promotor normal se mostrou em média duas vezes mais eficiente na ativação da expressão da luciferase que o promotor mutante. Entretanto, mais experimentos de transfecção, inclusive com outras linhagens celulares, devem ser realizados para confirmação desse resultado. Além disso, foi analisado o efeito de uma nova mutação (localizada na região codificante do gene SRY) na ligação da proteína SRY com o DNA, através de ensaios de EMSA. Concluiu-se que a mutação E89K, associada com disgenesia gonadal pura 46,XY, reduziu em alto nível a atividade de ligação in vitro da proteína SRY mutante ao DNA, o que representa um forte indício de que atividade reduzida da proteína mutante não foi suficiente para desencadear o processo de determinação testicular. Paralelamente, foi feito o rastreamento de mutações no gene SRY e sua região promotora em novos casos de disgenesia gonadal, não tendo sido encontradas, porém, alterações nos pacientes analisados / Abstract: The SRY (Sex Determining Region in chromosome Y) gene expression is responsible for testicular determination during embrionary development. Mutations in SRY are found in many cases of anomalies of gonadal development. This project analyzed the functional effect of a mutation in SRY promoter region; the mutation is a 3-bp deletion in a consensus binding site for Sp1 transcription factor. The patient presented 46,XY pure gonadal dysgenesis, and a family history of relatives with different levels of genital ambiguity. Her father shares the same mutation in the SRY promoter region. In order to investigate the effects of the mutation upon the molecular mechanisms that regulate SRY gene expression, the interaction of the Sp1 transcription factor with normal and mutant binding sites was analyzed by EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay). Each of Sp1A and Sp1B normal sites binds to a single Sp1 molecule, whereas the 3-bp deletion in Sp1A abolishs the binding to this site. Probably, the lack of Sp1 binding to the Sp1A site prevented the formation of a stable transcription complex, reducing the level of SRY expression and leading to the absence of testicles and complete sex reversal in the patient. Parallely, the effect of the mutation was analyzed by a reporter gene assay, indicating that the normal promoter is almost two times more efficient than the mutant promoter in the activation of luciferase gene expression using HeLa cells. However, further transfection experiments with other cell lineages must be performed to confirm this result. In addition, the effect of a new mutation (E89K, located in the SRY gene coding region) was analyzed by testing the ability of the SRY mutant protein to bind its DNA consensus sequence. EMSA assays revealed that the E89K mutation, which is associated with 46,XY pure gonadal dysgenesis, strongtly reduced the SRY protein binding activity in vitro. This result is a strong evidence that the reduced activity of SRY mutant protein was not sufficient to trigger the testicular determination in the patient, leading to the pure gonadal dysgenesis phenotype. Screening of mutations in the SRY gene coding and promoter regions was also performed in six diferent patients with 46,XY gonadal dysgenesis. However, other mutations have not been identified / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Neste trabalho buscamos caracterizar o espectro de uma classe de operadores bloco--Jacobi limitados definidos em $l^2(\\Lambda,\\mathbb{C}^L)$ ($\\Lambda: \\mathbb{Z}_+\\times\\{0,1,\\ldots,L-1\\}$ representa uma faixa de largura $L\\ge 2$ no semi--plano $\\mathbb{Z}_+^2$) e sujeitos a perturbações esparsas (no sentido que as distâncias entre as ``barreiras\'\' crescem geometricamente à medida que estas se afastam da origem) distribuídas aleatoriamente. Tais operadores são construídos a partir da soma de Kronecker de matrizes de Jacobi $J$, cada qual atuando em uma direção do espaço. Demonstramos, por meio da bloco--diagonalização do operador, que %o estudo de suas principais propriedades espectrais dependem da %se limita à caracterização da ``medida de mistura\'\' $\\frac{1}{L}\\sum_{j=0}^{L-1}\\mu_j$, $\\mu_j$ a medida espectral associada à matriz de Jacobi $J^j=J+2\\cos(2\\pi j/L)I $. Para tanto, buscamos primeiramente caracterizar cada uma das medidas $\\mu_j$, explorando e aperfeiçoando algumas técnicas bastante conhecidas no estudo de operadores esparsos unidimensionais. Demonstramos, por exemplo, que a seqüência de ângulos de Prüfer (variáveis que, juntamente com os raios de Prüfer, parametrizam as soluções da equação de autovalores) é uniformemente distribuída no intervalo $[0,\\pi)$, o %que %resultado que nos permite determinar o comportamento assintótico médio das soluções da equação de autovalores. Tal resultado, aliado às técnicas desenvolvidas por Marchetti \\textit{et. al.} em \\cite{MarWre} e a uma adaptação dos critérios de Last e Simon \\cite{LS} para operadores esparsos, nos permitem demonstrar a existência de uma transição aguda (pontual) entre os espectros singular--contínuo e puramente pontual. Empregamos em seguida os resultados de Jitomirskaya e Last presentes em \\cite{JitLast} e obtemos a dimensão Hausdorff exata associada à medida $\\mu_j$, dada por $\\alpha_j=1+\\frac{4(1-p^2)^2}{p^2(4- (\\lambda-2\\cos(2\\pi j/L))^2)}$ ($\\lambda\\in[-2,2]$), recuperando um resultado análogo obtido por Zlato\\v s em \\cite{Zla}. Por fim, adaptamos tais resultados à situação da medida de mistura associada à matriz bloco--Jacobi, obtendo $\\alpha=\\min_{j\\in\\mathcal{I}(\\lambda)}\\alpha_j$, $\\mathcal{I}(\\lambda):\\{m \\in\\{0,1,\\ldots,L-1\\}:\\lambda\\in[-2+2\\cos(2\\pi j/L),2+2\\cos(2\\pi j/L)]\\}$, como sua dimensão Hausdorff exata. Estudamos modelos idênticos com esparsidades sub e super-geométricas, obtendo na primeira situação um espectro puramente pontual (de dimensão Hausdorff nula) e na segunda um espectro puramente singular--contínuo (de dimensão Hausdorff 1). Finalmente, verificamos a existência de transição entre os espectros puramente pontual e singular--contínuo em um modelo com esparsidade super-geométrica cuja dimensão Hausdorff associada à medida espectral é nula. / In this work we attempt to caracterize the spectrum of a class of limited block--Jacobi operators defined in $l^2(\\Lambda,\\mathbb{C}^L)$ ($\\Lambda: \\mathbb{Z}_+\\times\\{0,1,\\ldots,L-1\\}$ represents a strip of width $L\\ge 2$ on the semi--plane $\\mathbb{Z}_+^2$) subject to a sparse perturbation (which means that the distance between the ``barries\'\' grow geometrically with their distance to the origin) randomly distributed. Such operators are defined as Kronecker sums of unidimensional Jacobi matrices $J$, each one acting in different directions of the space. We prove, by means of a block--diagonalization of the operator, that %the study of its most relevant spectral properties depend on %is related to the caracterization of the ``mixture measure\'\' $\\frac{1}{L}\\sum_{j=0}^{L-1}\\mu_j$, $\\mu_j$ the spectral measure of the Jacobi matrix $J^j=J+2\\cos(2\\pi j/L)I$. For this, we must characterize at first each one of the measures $\\mu_j$, exploiting and improving some well known techniques developed in the study of unidimensional sparse operators. We prove, for instance, that the sequence of Prüfer angles (variables which parametrize the solutions of the eigenvalue equation) are uniform distributed on the interval $[0,\\pi)$, a result which gives us condition to determine the average asymptotic behavior of the solutions of the eigenvalue equation. Such result, in association with the techniques developed by Marchetti \\textit{et. al.} in \\cite{MarWre} and with an adaptation of Last--Simon \\cite{LS} criteria for sparse operator, permit us to prove the existence of a sharp transition between singular continuous and pure point spectra. Following on, we use the results from Jitomirskaya--Last of \\cite{JitLast} and obtain the exact Hausdorff dimension of the measure $\\mu_j$, given by $\\alpha_j=1+\\frac{4(1-p^2)^2}{p^2(4-(\\lambda-2\\cos(2\\pi j/L))^2)}$ ($\\lambda\\in[- 2,2]$), recovering an analogous result due to Zlato\\v s in \\cite{Zla}. At last, we adapt these results to the mixture measure of the block--Jacobi matrix, obtaining $\\alpha=\\min_{j\\in\\mathcal{I}(\\lambda)}\\alpha_j$, $\\mathcal{I}(\\lambda):\\{m \\in\\{0,1,\\ldots,L-1\\}:\\lambda\\in[-2+2\\cos(2\\pi j/L),2+2\\cos(2\\pi j/L)]\\}$, as its exact Hausdorff dimension. We study as well identical models with sub and super geometric sparsities conditions, obtaining a pure point spectrum (with null Hausdorff dimension) in the first case, and a purely singular continuous spectrum (such that its Hausdorff dimension is 1) in the second. Finally, we prove the existence of a transition between pure point and singular continuous spectra in a model with sub--geometric sparsity whose Hausdorff dimension related to the spectral measure is null.

A análise funcional tem sido considerada o instrumento básico do analista de comportamento. Entretanto, a literatura denuncia a escassez de pesquisas sobre o processo de desenvolver e usar a análise funcional em clínica dificultando a tarefa dos supervisores de estágio ao ensinar seus alunos a se tornarem terapeutas, justamente por não terem disponíveis os métodos que eles usam e como determinam em que ordem usá-los. Com o objetivo de preencher essa lacuna foi feito um levantamento dos relatos de casos publicados pelos terapeutas analíticocomportamentais para identificar o que fazem quando atendem seus clientes. Parece que o consenso entre eles é que sua atividade básica é a análise funcional, embora haja muitas controvérsias sobre tal termo, que é discutido neste trabalho concluindo-se por sua substituição pelo termo análise de contingências. Com base no levantamento feito, elaborou-se um programa de ensino dessa prática, do qual participaram oito estagiários que foram treinados a elaborar análises de contingências. O programa foi constituído de três módulos: revisão de princípios básicos do Behaviorismo Radical, elaboração de análises por escrito de casos relatados na literatura, de acordo com critérios elaborados por Sturmey (1996) e análise de pelo menos um caso atendido pelo terapeuta estagiário que foi gravado em vídeo e assistido pela supervisora e pelos colegas. Os procedimentos utilizados foram modelagem (reforçamento diferencial logo após a elaboração das análises por escrito e das sessões de atendimento) e modelação (observação das sessões de atendimentos dos colegas e da supervisora, observação do próprio comportamento de atender o cliente pela fita de vídeo e vivência da própria análise do seu comportamento de analista durante as sessões de supervisão). Os resultados demonstraram a eficácia do programa pela diferença significativa das notas dadas às análises por escrito antes e depois do treino. Para avaliar a efetividade do programa, as sessões de quatro dos oito participantes foram novamente observadas e as ações ao vivo durante o processo da análise de contingências puderam ser categorizadas. Foi possível definir treze categorias de falas dos terapeutas e analisar as porcentagens de freqüências delas, descrevendo os comportamentos dos terapeutas quando atendiam seus clientes, culminando numa proposta de sistematização da tarefa do terapeuta analíticocomportamental, que poderá ser usada como um dos critérios orientadores para a formação desse profissional. / Functional analysis has been considered the behavioral analyst\'s basic instrument. However, the literature denounces the shortage of researches on the process of developing and using functional analysis in clinics, which makes the task of professional training supervisors more difficult as they teach their students to become therapists, exactly because the methods which they use are not available, neither how they determine in what order these methods are used. To fulfilling this gap a search in literature was performed to identify by case reports what the analytical-behavioral therapist does when he is in attendance of his clients. It seems that there is a consensus among them considering functional analysis their basic activity, although there are many controversies about such terminology, which is discussed in this paper, leading to its substitution to contingency analysis term. Based on this research, a program for the teaching of this practice was conceived, in which eight trainees were taught to elaborate contingency analysis. The program had three modules: revision of basic principles of Radical Behaviorism, written analysis of cases found in the literature according to Sturmey\'s criteria (1966), and analysis of at least one case treated by the trainee therapist, which was recorded in video and observed by the professional supervisor and other trainees. The teaching used procedures were shaping (differential reinforcement right after written analysis as well as therapeutical sessions), and modelling (observation of therapeutical sessions performed by his peers and his supervisor, observation of his own behavior in session by watching the videotape, and his own experience in analyzing his own behavior as an analyst during supervision sessions). The results show the efficacy of the program by the significant difference of the grades given for the written analysis before and after training. To assess the effectiveness of the program, the sessions of four out of the eight participants were again observed and their actual actions during the process of contingency analysis could be categorized. It was possible to define thirteen therapists\' talk categories, whose frequency percentages demonstrated trainees behavior when attended their clients, what led to a proposal for the systematization of the analytical-behavioral therapist\'s task, which could be used as one of the orientation criteria for professional formation.

No tecido muscular esquelético, a interface entre o sarcolema e a matriz extracelular é constituída por proteínas especializadas responsáveis pela transmissão de força transversal e longitudinal à miofibra. As adaptações do músculo esquelético às forças fisiológicas e patológicas, como a imobilização segmentar e exercícios de reabilitação, podem contribuir para a percepção celular dos sinais mecânicos e, consequentemente, induzir modificações na flexibilidade e na força muscular. Este estudo investigou as respostas teciduais do músculo sóleo de ratas submetido ao estresse longitudinal induzido pela associação do treinamento do tipo alongamento passivo com a livre movimentação pós-imobilização dos membros posteriores direitos. O membro posterior direito das ratas foi imobilizado por 10 dias em flexão plantar, a fim de manter o músculo sóleo em posição de encurtamento. Após a imobilização, os animais passaram por um período de alongamento passivo manual intermitente. Antes da imobilização e durante o período de alongamento e de livre movimentação, foi realizada análise funcional da marcha dos animais. Noventa e seis ratas Wistar adultas foram divididas em 8 grupos: Imobilizado (I); Imobilizado e alongado por 1 dia (IAL(1)); Imobilizado e alongado por 3 dias (IAL(3)); Imobilizado e alongado por 10 dias (IAL(10)); Imobilizado e livre por 1 dia (IL(1)); Imobilizado e livre por 3 dias (IL(3)); Imobilizado e livre por 10 dias (IL(10)); Controle do Imobilizado (C(Imob)). Após os procedimentos experimentais, o músculo sóleo foi removido e congelado, para o processamento de reação de coloração Hematoxilina-Eosina; imunoistoquímica para fibronectina, colágenos tipos I e III; imunofluorescência de laminina, distrofina e macrófagos; western blot de laminina e distrofina. Análises qualitativa e quantitativa em Microscópio de Luz e sistema de análise de imagens foram realizadas. As variáveis foram avaliadas inter- e intra-grupos pelo Modelo de Regressão Linear com Efeitos Mistos. Após a imobilização, os animais apresentaram perda de peso corporal e alterações no tamanho e formato das fibras. Ainda, a hipocinesia modificou as variáveis funcionais da marcha, reduziu a amplitude de movimento (ADM) de dorsiflexão, aumentou a relação fibras com fibronectina intracelular/número total de fibras (rFFI/NTF), a expressão de distrofina, de laminina e dos colágenos tipos I e III. Após três dias de remobilização, as alterações morfológicas estavam exacerbadas: intensa celularidade, núcleos centralizados, corpos de inclusão, necrose. Estes achados foram mais intensos no IAL(3). Os grupos IAL(3) e IL(3) também apresentaram comprometimento funcional, restrição de ADM, aumento da rFFI/NTF e da expressão do colágeno tipo III. Outros achados observados nestes grupos foram aumento da quantidade de macrófagos no tecido e de distrofina. As anormalidades relativas aos parâmetros da marcha e as alterações morfológicas geradas pela imobilização mostraram melhora no grupo IAL(10). A remobilização associada ao alongamento durante dez dias mostrou significativa efetividade na reversão das anormalidades musculoesqueléticas induzidas pelo desuso, especialmente nas variáveis funcionais. / The interface between sarcolemma and extracellular matrix in skeletal muscle tissue is constituted by specialized proteins that are responsible for the transversal and longitudinal forces transmission to the myofiber. Skeletal muscle adaptations to physiological and pathological forces, such as segmental immobilization and rehabilitation exercises, may contribute to cellular perception of mechanical signals and consequently induce alterations related to flexibility and muscular force. This study investigated the tissue responses of the soleus muscle in female rats caused by longitudinal stress induced by the association of passive stretching training with the free movement after immobilization of the right hind limb. The right hind limbs of female rats were immobilized during 10 days in a plantar flexion in order to keep the soleus muscle in a shortened position. After the immobilization, the animals were submitted to intermittent passive manual stretching. The animals gait was functionally analyzed before immobilization and during the period of stretching or free movement. Ninety-six adult female Wistar rats were divided into 8 groups: Immobilized (I); Immobilized and stretched for 1 day (IS(1)); Immobilized and stretched for 3 days (IS(3)); Immobilized and stretched for 10 days (IS(10)); Immobilized and free for 1 day (IF(1)); Immobilized and free for 3 days (IF(3)); Immobilized and free for 10 days (IF(10)); Immobilized control (C(Immob)). After the experimental period, the soleus muscle was removed, frozen and further processed by Hematoxylin-eosin stain; immunohistochemistry reactions for fibronectin, types I and III collagen; imunofluorescence of laminin, dystrophin and macrophages; western blot of dystrophin and laminin. Qualitative and quantitative results were obtained using a Light Microscope and a system of image analysis. The between- and within-group data were analyzed using Mixed-Effects Linear Models. After the immobilization, the animals presented loss of body weight and alterations in size and shape of the fibers. Furthermore, the hypokinesia changed the functional variables of gait, reduced the dorsiflexion range of motion (ROM), increased the intracellular fibronectin/total number of fibers ratio (FIF/TNFr), the expression of dystrophin, of laminin and of the types I and III collagen. After three days of remobilization, the morphological changes were exacerbated: intense cellularity, nuclear centralization, inclusion bodies and necrosis. These findings showed increased in the IS(3). The groups IS(3) and IF(3) also showed functional impairment, ROM restriction, increased FIF/TNFr and immunoreactivity of the type III collagen. Others findings observed in these groups were increase of the amount of macrophages in the tissue and of dystrophin. The abnormalities related to gait parameters and the morphological changes induced by immobilization were improved in the IS(10) group. The remobilization using stretching for ten days showed significant effectiveness and reverted the skeletal muscle abnormalities induced by disuse, especially concerning the functional variables.

Orientadores: Daniela Mariz Silva Vieira, Jorge Tulio Mujica Ascui / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Matemática, Estatística e Computação Científica / Made available in DSpace on 2018-08-19T00:22:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nachtigall_Cicero_D.pdf: 625263 bytes, checksum: 7dc27b9956ffbb6e717aa95776b7b8c8 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Matematica / Doutor em Matemática

O efeito dos hormônios glicocorticóides (GC) de suprimir o crescimento celular é exercido através de cascatas celulares nas quais a transcrição de genes de resposta primária, mediada direta ou indiretamente pelo receptor de GC, regulam a transcrição e a atividade de um conjunto de genes, incluindo fatores importantes para a progressão no ciclo celular. Entretanto, a conexão funcional entre diversos dos genes ativados ou inibidos por GC e a inibição da proliferação de determinados tipos celulares ainda não é completamente conhecida. Nosso laboratório isolou a variante ST1, a partir da linhagem C6 de glioma de rato, utilizando-a como modelo de estudo do mecanismo de ação de GC como agentes anti-tumorais. O tratamento com GC confere, às células ST1, um crescimento totalmente dependente de soro e ancoragem, morfologia em cultura semelhante à de fibroblastos normais e incapacidade de gerar tumor em camundongos da linhagem \"nude\", caracterizando uma completa reversão fenotípica tanto in vitro como in vivo. Como abordagens para o entendimento do mecanismo molecular da ação de GCs, o laboratório vem buscando a clonagem de produtos gênicos diferencialmente expressos através do uso de técnicas que permitam a análise da abundância relativa dos mRNAs, e mais recentemente, empregando-se a análise da abundância relativa das proteínas através da eletroforese bidimensional (2D-PAGE). As seqüências isoladas por estas metodologias são alvos potenciais para uma posterior análise funcional. Os objetivos gerais deste trabalho foram: a) identificar genes que estão diferencialmente expressos durante a reversão fenotípica das células ST1 induzida por GC, através da análise proteômica (2D-PAGE e espectrometria de massas) e b) determinar a função de um dos genes (Ciclina G) identificado anteriormente no laboratório como sendo induzido durante o tratamento das células ST1 com GC. A metodologia empregada se baseou na comparação dos perfis 2D de proteínas nucleares das células ST1 tratadas ou não (controle) com GC por 5 e 24h. Após análise de imagem, 33 polipeptídios foram considerados como diferencialmente representados após 5h de tratamento, 16 dos quais foram também identificados após 24h de tratamento. Seis destes polipeptídios foram identificados através da análise dos seus perfis de digestão tríptica (PMF). Evidências obtidas por ensaios de Western blot sugerem que um destes polipeptídeos, a Anexina 2 (ANX2), possui a sua localização sub-celular modulada pela ação de GC nas células ST1. A análise do papel da Ciclina G na reversão fenotípica tumoral-normal das células ST1 induzida por GC, foi feita através da sua super-expressão nestas células, utilizando um sistema retroviral, e avaliando-se os efeitos desta super-expressão sobre a resposta das células ST1 a GC, através de ensaios de curva de crescimento e citometria de fluxo. Os dados sugerem que a super-expressão da Ciclina G nas células ST1 intensifica e prolonga o efeito de GC nestas células. / The glucocorticoid (GC) growth suppression response is controlled through cellular cascades in which the transcription of primary response genes regulates the expression and activity of a diverse set of genes including important factors for cell cycle progression. However, the functional connection between the GC-regulated transcriptional events and cell cycle arrest of determined cells is poorly understood at the molecular level. In this context, our lab has isolated the ST1 variant of the C6 rat glioma cell line to study the mechanism of action of GC as anti-tumor agents. GC treatment leads ST1 cells to a dramatic tumoral to normal phenotypic reversion, characterized by inhibition of their growth rate in monolayer, loss of their ability to form colonies in semi-solid medium and to induce tumor formation in nude mice, and morphological changes (flattening). As part of the strategy to understand the anti-tumor action of GC, differentially represented proteins, associated with the phenotypic reversion displayed by ST1 cells have been isolated through mRNA-based blind cDNA cloning and, more recently, by two dimensional electrophoresis (2D-PAGE). The sequences isolated by these two methodologies are potential targets for functional analysis. In the present study, we aimed at a) identifying genes which are differentially expressed during the GC-induced phenotypic reversion of ST1 cells, using the proteomic approach (2D-PAGE and mass spectrometry) and b) determining the functional role of a gene (Cyclin G) which had previously being identified as being induced during GC-treatment of the ST1 cells. The analytical methodology used relied on the comparison of sets of 2D nuclear protein profiles of ST1 cells, maintained in the absence (control) and in the presence of GC for 5 and 24h. After image analysis and visual validation, 33 polypeptides were considered as differentially represented 5 h after treatment, 16 of which were also differentially represented after 24 h. Six of those polypeptides were identified by peptide mass fingerprinting (PMF). Evidence obtained by Western blot analysis indicates that one of those polypeptides, Annexin 2 (ANX2), has its sub-cellular location modulated by GC-treatment of ST1 cells. The role of Cyclin G in the tumoral to normal phenotypic reversion induced by GC in ST1 cells was analyzed by over-expression of Cyclin G using a retroviral system and evaluation of the effects of this over-expression over ST1 cells response to GC, by growth curve and flow cytometry assays. The data suggest that Cyclin G over-expression leads to a more intense and prolonged effect of GC on ST1 cells.

Made available in DSpace on 2016-07-27T14:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gina Noleto Bueno.pdf: 1746292 bytes, checksum: d472eee73820a170b345f856f3603ebd (MD5) Previous issue date: 2012-11-23 / This study aimed at the functionally analysis of the verbal behavior of two people diagnosed as schizophrenic, who were institutionalized patients. The participants, both male, aged 51 and 57, presented a detailed report of hospitalization in several psychiatric institutions. To evaluate the antecedent and the consequence of the inappropriate verbal responses of the participants, we applied some methods such as (a) indirect functional evaluation, (b) functional evaluation through direct observation and (c) experimental functional evaluation, using two designs: (1) of multiple elements and (2) of reversionreplication like AB1B2B3AB1B2B3 within follow-up. Associated with the design (1), four main conditions were used: attention condition, demand condition, alone condition and control condition. The attention condition was manipulated in three subconditions: condition of minimum atention, condition of average attention and condition of maximum attention. All the meetings lasted five minutes, were videotaped, and were individually done with each participant over twenty-four sessions. The multiple elements design sections were selected at random, applied, and later replicated in reverse. For the phases B2 and B3, an institution employee was trained in how to specifically interact with the participants. The baseline of the design (2) is comprised of four sessions in phase A and then another set of four sessions were also applied to each phase of the procedures B1, B2 and B3. For intervention phases B2 and B3, an institution professional in which participants were hospitalized was trained. Upon completion of these phases A and the interventions B1, B2 and B3 were repeated. Finally there were two sessions for the follow-up. Each of the 32 sessions with both participants lasted 15 minutes. Thus, participants were exposed to a series of conditions in which antecedent and consequent events were manipulated and their effects on the appropriate speeches (FA) and upon the inappropriate ones (FI and RV) were observed. The results showed that the inappropriate speeches (FI and RV) were controlled by multiple attention conditions: either to get attention (positive reinforcement) and to escape demands (negative reinforcement). The results also demonstrated that the proposed interventions favored the increase of FA, under the DRA effect, and in addition the reduction of FI and RV as an extinction effect. The results also showed the relevance of the procedures adopted such as the functional assessment interviews and the direct observation of the target behaviors. Consequently, they also demonstrated the importance of the training applied. The results that promoted the discussion of reinforcing the values of social attention may have changed by an OM effect, denoting the relevance of studying the antecedent and consequence events, on the inappropriate speeches of people diagnosed as schizophrenic. Therefore, besides having advanced the research, the results corroborate with the literature of the area and its implications. / O presente estudo objetivou analisar funcionalmente o comportamento verbal de duas pessoas diagnosticadas como esquizofrênicas, que se encontravam internadas em uma instituição para tratamento, onde também residiam. Os participantes, ambos do sexo masculino, de 57 e 51 anos de idade, possuíam histórico de internações em várias instituições psiquiátricas. Para avaliar os antecedentes e consequentes das respostas verbais inapropriadas dos participantes, foram empregados procedimentos de (a) avaliação funcional indireta, (b) avaliação funcional por meio de observação direta e (c) avaliação funcional experimental com o uso de dois delineamentos: (1) de múltiplos elementos e (2) de reversão-replicação do tipo AB1B2B3AB1B2B3, seguido por follow-up. Em relação ao delineamento (1), foram aplicadas quatro condições principais: condição de atenção, condição de demanda, condição de sozinho e condição de controle. A condição de atenção foi manipulada em três subcondições: condição de atenção mínima, condição de atenção média e condição de atenção máxima. Todas as sessões tiveram duração de cinco minutos, registradas em vídeo e foram realizadas individualmente com cada participante, totalizando 24 sessões com cada um deles. As sessões do delineamento de múltiplos elementos foram sorteadas, aplicadas e, após, replicadas de modo inverso. A linha de base do delineamento (2) compreendeu-se de quatro sessões na fase A e, em seguida, mais quatro sessões também foram aplicadas para cada uma das fases de intervenções B1, B2 e B3. Para as intervenções das fases B2 e B3, houve o treinamento de um profissional da instituição em que os participantes se encontravam internados. Ao término dessas fases, foram repetidas a fase A e as intervenções B1, B2 e B3. Por fim, duas sessões para a fase de follow-up. Cada uma das 32 sessões, com ambos os participantes, teve duração de 15 minutos. Desse modo, os participantes foram expostos a uma série de condições em que eventos antecedentes e consequentes foram manipulados e seus efeitos sobre as falas apropriadas (FA) e sobre as inapropriadas (FI e RV) foram observados. Os resultados demonstraram que as falas inapropriadas (FI e RV) foram controladas por múltiplas condições de atenção: tanto para obter atenção (reforçamento positivo) quanto para escapar de demandas (reforçamento negativo). Demonstraram, também, que as intervenções propostas favoreceram o aumento das FA, sob o efeito do DRA. E a redução das FI e das RV, como efeito da extinção. Os resultados apontaram, também, para a relevância dos procedimentos adotados, como as entrevistas de avaliação funcional, bem como da observação direta dos comportamentos-alvo. Apontaram, ainda, para a importância do treinamento aplicado. Os resultados favoreceram a discussão de que os valores reforçadores da atenção social podem ter sido alterados por efeito de uma OM, denotando a importância do estudo dos eventos antecedentes e consequentes, sobre as falas inapropriadas de pessoas com o diagnóstico de esquizofrenia. Por conseguinte, além de ter avançado nas pesquisas, os resultados corroboraram com a literatura da área e suas implicações.

Made available in DSpace on 2016-07-27T14:18:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roberta Maia Marcon.pdf: 786825 bytes, checksum: 17ff39c24c5b9b198943e9b875f41af5 (MD5) Previous issue date: 2014-10-17 / This study intention was to experimentally investigate the control by antecedent events, such as control to respond to discriminative stimulus or by motivating operation, and also by consequent events on the verbal response from three people: two males and a female, diagnosed with schizophrenia, aged 26 and 53 years. It was applied functional assessment strategies through direct and indirect observation, as well as by functional analyses or function analyses methodology. The latter implicates in the environmental events manipulation, especially in four conditions: attention, control, escape demand and alone. These conditions were manipulated in the presence of motivating operation, identified based on context variables, and operation in the presence of positive and negative reinforcement (attention conditions and escape demand). Functional analyses data indicated that bizarre vocalizations were issued with high frequency conditions attention and escape demand; showing the control to respond to establishing or reinforcement operation. For the control condition it was possible to decrease the effect from changing the reinforced stimuli effectiveness from the establishing operation. However, bizarre vocalizations were not emitted as the reinforcement stimulus were offered regardless it occurred or not, as reinforcement operation was not used. When alone, the bizarre vocalizations were abolished, evidencing the control to respond to the presence of abolishing operation and without reinforcement operation. Based on this study information, the conclusion is that the control exercised by antecedent events explains the control exercised from consequent events. This is because in different antecedent conditions, the probability of bizarre vocalization changes, justifying the necessity to analyze with same relevance the control from antecedent and consequent events as response to experimental manipulation as in this context. The functional analysis was complementary to the functional assessment from direct observation, which data were not enough to elucidate controlled events to bizarre vocalization. In addition, it was complementary to the functional assessment by direct observation that, although with enough data to indicate manipulations, these are from an experimental strategy. For this reason it was justified the use of functional analysis methodology from empiric studies about the control from the antecedents from behavior, including bizarre vocalizations from people with schizophrenia. / O presente estudo objetivou investigar experimentalmente o controle exercido pelos eventos antecedentes seja o controle do responder pelo estímulo discriminativo ou pela operação motivadora , e também pelos eventos consequentes sobre as respostas verbais de três pessoas: duas do sexo masculino e uma do sexo feminino, com diagnóstico de esquizofrenia e idades entre 26 e 53 anos. Com essa finalidade, empregou-se estratégias de avaliação funcional por observação indireta e por observação direta e a análise funcional ou metodologia de análise funcional. Esta última envolveu a manipulação de eventos ambientais em quatro condições principais: atenção, controle, fuga de demanda e sozinho. Essas condições foram manipuladas na presença de operação motivadora, identificada com base em variáveis de contexto, e na presença de operação de reforçamento positivo e negativo (condições atenção e fuga de demanda). Os dados da análise funcional apontaram que as vocalizações bizarras foram emitidas com alta frequência nas condições atenção e fuga de demanda, sendo evidenciado o controle do responder pela operação estabelecedora e pela operação de reforçamento. Na condição controle foi possível deduzir o efeito de alterar a eficácia do estímulo reforçador pela operação estabelecedora. Contudo, as vocalizações bizarras não foram emitidas haja vista que o estímulo reforçador foi disponibilizado independentemente da ocorrência das mesmas, por estar ausente uma operação de reforçamento. Na condição sozinho as vocalizações bizarras foram suprimidas, sendo evidenciado o controle sobre o responder quando na presença de operação abolidora e ausência de operação de reforçamento. Com base nos dados deste estudo conclui-se que o controle do responder exercido pelos eventos antecedentes melhor elucida o controle exercido pelos eventos consequentes. Isso porque na presença de diferentes condições antecedentes as vocalizações bizarras alteraram sua probabilidade de ocorrência na operação de reforçamento, o que justifica a importância de se analisar, com igual relevância, o controle pelos eventos antecedentes e consequentes sobre o responder em manipulações experimentais no contexto aplicado. Cumpre ressaltar que a análise funcional mostrou-se complementar à avaliação funcional por observação indireta, cujos dados não se mostraram suficientes para elucidar eventos controladores das vocalizações bizarras. Também mostrou-se complementar à avaliação funcional por observação direta que, embora forneça dados suficientes para delinear manipulações, estas se dão por meio de uma estratégia com a estrutura de um experimento. Isso justifica o uso da metodologia de análise funcional em estudos empíricos acerca do controle exercido pelos antecedentes sobre o comportamento, incluindo vocalizações bizarras de pessoas com diagnóstico de esquizofrenia.

Made available in DSpace on 2016-07-27T14:19:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabiana Fleury Curado.pdf: 935686 bytes, checksum: 3b9ed2af882b4e2d66e81f384594a6c8 (MD5) Previous issue date: 2012-04-24 / The present study examined the emotional response of irritation issued by two people referred by psychiatrists. The participants were male and had more than 30 years old, one was diagnosed with Bipolar Disorder. To analyze the variables that are likely controlled or sustain the emotional response of irritation was applied a experimental design of multiple conditions. The experimental design of multiple conditions was performed on three conditions: condition (1) attention, condition (2) alone and condition (3) game. The condition (1) attention was divided on two: (1.1) attention, a signal of disapproval; (1.2) attention, activity questioned. In condition (3) game the participants played a card game in software that controls the gain and loss of points to set up schemes consequences: positive reinforcement and negative punishment. The results of condition (1) attention show that the presentation of aversive stimuli produced reports of irritation and repertoire of emotional response indicatives of irritation in both participants. The results of condition, (3) game indicate that positive emotions was more frequently in the procedures of positive reinforcement and negative emotions in the procedures of punishment. The results presented indicate that emotional irritation was emitted more frequently against presentation of disapproval and inquisitive speeches and situations of loss of points, what contributed to the study of variables that evoke irritation. / O presente trabalho analisou a resposta emocional de irritação emitida por duas pessoas encaminhadas por psiquiatras. Os participantes eram do sexo masculino e com mais de 30 anos, sendo um deles diagnosticado com o Transtorno do Humor Bipolar. Para análise das variáveis que provavelmente controlavam ou mantinham a resposta emocional de irritação aplicou-se um delineamento de múltiplas condições. O delineamento experimental de múltiplas condições foi aplicado em três condições: condição (1) atenção, condição (2) sozinho e (3) jogo. A condição (1) atenção foi manipulada duas subcondições: (1.1) atenção, sinal de reprovação; (1.2) atenção, atividade questionada. Na condição (3) jogo os participantes interagiam com um software que simulava um jogo de cartas e que controlava o ganho e a perda de pontos para configurar dois esquemas de consequências: reforçamento positivo e punição negativa. Os resultados obtidos nas condições de (1) atenção mostram que a apresentação de estímulos aversivos produziu os relatos irritação e repertórios indicativos da resposta emocional de irritação em ambos os participantes. Os resultados da condição (3) jogo indicam que emoções positivas foram emitidas com maior frequência nos procedimentos de reforço positivo e emoções negativas nos procedimentos de punição. Os resultados apresentados indicam que as respostas indicativas da emoção irritação foram emitidas com maior frequência diante da apresentação das falas reprovativas e questionadoras e das situações de perdas de pontuações, o que contribuiu para o estudo das variáveis evocativas de irritação.