Orientadores: Oswaldo Di Hipolito Junior, Plinio Trabasso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-07T03:11:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alcure_MonicaLeal_D.pdf: 2751232 bytes, checksum: 9ec1e6f0e9b7aa9c25ff089f07e417eb (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: As infecções superficiais e sistêmicas provocadas por Candida são freqüentes causas de morbidade e mortalidade em pacientes submetidos a transplante de células progenitoras hematopoiéticas (TCPH). Entre os fatores de risco destaca-se a colonização prévia a qual parece ser um pré-requisito para o desenvolvimento de infecção. Desta forma, a cavidade oral pode atuar como um reservatório para esses microorganismos. O presente estudo teve como objetivo avaliar, prospectivamente, o fluxo salivar e os efeitos da profilaxia antifúngica com fluconazol (200mg/dia) no número de pacientes colonizados por Candida spp. e no número de unidades formadoras de colônias (UFC) das espécies Candida encontradas na saliva dos pacientes submetidos a TCPH. Objetivou, ainda, realizar testes susceptibilidade antifúngica dos isolados, determinar o cariótipo eletroforético por meio de eletroforese em campo pulsátil (PFGE) nos isolados de Candida albicans e verificar a similaridade entre as cepas colonizadoras e as responsáveis pelos quadros de infecção. Foram incluídos no estudo 35 pacientes, 21 do TCPH Alogênico e 14 do TCPH Autólogo, com mediana de idade de 44 anos (21-71) sendo 22 (63%) do gênero masculino e 13 (37%) do gênero feminino. O fluxo salivar variou de modo estatisticamente significativo nos grupo Alogênico (p=0,0003) e no grupo Autólogo (p=0,009) no decorrer do estudo. Colonização por Candida ocorreu em 57% dos pacientes sendo que durante o transplante, estando o paciente sob profilaxia com fluconazol, houve redução de 60% no número de pacientes colonizados. Nesse período também ocorreu uma redução da média do número de UFC/ml seguida de expressivo aumento nas coletas subseqüentes, alcançando valores maiores que os obtidos na coleta inicial. O número de UFC/ml apresentou uma relação inversamente proporcional com o fluxo salivar (p=0,005). Não foi possível estabelecer relação entre o número de UFC/ml de saliva e a presença de candidose oral. Candida albicans foi a espécie mais freqüentemente encontrada representando 63% de todos os isolados seguida da Candida parapsilosis. Resistência aos antifúngicos foi encontrada em 6 isolados de Candida não albicans sendo 2 Candida parapsilosis, 2 Candida guilliermondii, 1 Candida krusei e 1 Candidq sp. Foram encontrados 9 diferentes perfis de cariótipo eletroforético de Candida albicans. Em 6 pacientes a mesma cepa encontrada na coleta inicial foi identificada ao longo do estudo. Quatro (11,4%) pacientes desenvolveram candidose oral no período pós-enxertia. Em todos os casos somente isolados de Candida albicans foram identificados. Todos esses pacientes foram colonizados inicialmente pela , mesma espécie sendo que em 3 pacientes, a mesma cepa colonizadora foi a responsável pela infecção. A maior ocorrência de candidose oral no período pós-enxertia pode estar relacionada com fatores inerentes ao hospedeiro. A persistência da mesma cepa sugere que a profilaxia com fluconazol durante o transplante não erradica a cepa colonizadora e que a colonização prévia parece ser um pré-requisito para o desenvolvimento de infecção / Abstract: Superficial and systemic Candida infections are usually responsible for morbidity and mortality in hematopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients. Previous colonization is an important risk factor and seems to be a pre-requisite for infection and the oral cavity may be a reservoir for these microorganisms. The aim of this study was to ana1yze, prospectively, the unstimulated salivary flow rate and the fluconazole prophylactic regimen effects (200mg/day) in the number of Candida colonized patients and in the colonyforming unit (CFU) count of the Candida species identified in the saliva of HSCT recipients. The objective was also performed antifungal susceptibility tests in clinical isolates, determine the electrophoretic karyotype by pulsed-field gel electrophoresis (pFGE) in the Candida albicans isolates and verify the similarity between colonization and infection strains. Thirty-five patients were enrolled, 21 Allogeneic and 14 Autologous HSCT recipients. The median age was 44 years old (range 21-71). Twenty-two (63%) were male and 13 (37%) were female. The salivary flow rate varied in the Allogeneic (p=0,0003) and in the Autologous groups (p=0,009). Candida colonization was found in 57% of the patients. There was a 60% reduction of the number of colonized in patients under prophylactic fluconazole regimen. In this same time, there also was a reduction of the median CFU/ml count followed by an important increase of the sequential samples, reaching values higher than the count found in the initial collection. There was a significant inverse relationship between salivary flow and Candida CFU/rnl count (p=0,005). It was not possible to correlate the CFU/rnl count and oral candidosis. Candida albicans was the most frequent specie identified (63%) followed by Candida parapsilosis. Antifungal resistance was found in 6 clinical isolates of non-albicans species of Candida, 2 Candida parapsilosis,2 Candida guilliermondii, 1 Candida krusei and 1 Candida sp. We found 9 pattems of Candida albicans electrophoretic karyotyping. In 6 patients the initial colonization strain was found during the following study. Four patients (11,4%) developed oral candidosis by Candida albicans in the post engraftment period. AlI patients were initially colonized by the same specie. In 3 of these patients the same colonization strain was identified in the infection period. The major occurrence of oral candidosis in the post engraftment period may be related with inherent host factors. The persistence of the same strain suggests that the fluconazole prophylaxis does not eradicate the colonization strain. The previous colonization appears be a pre-requisite for de infection development / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Angelica Zaninelli Schreiber / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T06:09:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_AnaBeatrizAlkmim_M.pdf: 21740555 bytes, checksum: 2da7b7011d8bcd82f7bc1473087a9807 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Infecção é a maior causa de morbidade e mortalidade em pacientes submetidos a transplante de medula óssea, e portadores de ma1ignjdades hematológicas. A fonte do agente infectante é, na maioria das vezes, microbiota endógena ou o ambiente hospitalar. Dentre as infecções adquiridas do ambiente hospitalar, as causadas por fungos filamentosos são especialmente invasivas em pacientes imunocomprometidos. Aspergilose é adquirida por inalação dos esporos e, em alguns casos, foi comprovada a colonização nasal anterior ao desenvolvimento da doença invasiva. Neste trabalho, foram isolados e identificadosfungos filamentosos colonizantes de pacientes portadores de doenças hematológicas, e submetidos a transplante de medula óssea. Concomitantemente foram realizadas, no período de um ano, avaliações da micota ambiental da Unidade de Transplante de Medula óssea. De modo geral os principais gêneros isolados tanto de pacientes, quanto do ambiente foram Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Cladosporium e Paecilomyces e Chaetomium, sendo estatisticamente significativa, a presença de Fusarium spp no outono e Cladosporium spp no inverno. Os microrganismos isolados de espécimes clínicos, puderam ser classificados como potencialmente mais patogênicos do que os isolados do ambiente por crescerem mais abudantemente...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Infection is a major cause of morbidity and mortality in bone marrow transplant recipients and in patients with hematologic malignancies. The source of the infecting organism is almost always endogenous flora or the hospital environment. Of the hospital acquired infections complication, infection with opportunistic molds is especially devastating in imunocompromised patients. Aspergillosis is acquired via inhalation of spores, and in some cases, nasal colonization prior to the development of invasive disease has been demonstrated ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-14T22:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brescansin_EdeilzaGomes_D.pdf: 1646931 bytes, checksum: 9e5e045b99495a199511f36621650953 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: No presente trabalho, buscamos desenvolver formulação lipossomal sistêmica de nistatina (NYS) com o propósito de aplicações futuras na terapêutica de micoses sistêmicas, que tanto afligem indivíduos imunodeprimidos. Na primeira parte do projeto caracterizamos o fármaco através de análises térmicas (TGA e DSC), análises espectroscópicas (IV, UV e fluorescência), teste de solubilidade, avaliação da umidade segundo o método de Karl-Fischer e coeficiente de partição octanol/meio aquoso. Na segunda parte do trabalho procuramos desenvolver e otimizar formulações lipossomais, onde o fármaco apresentasse maior estabilidade química. Foram preparadas formulações lipossomais pelo método do filme lipídico que foram analisadas por HPLC. As preparações passaram por processo de diminuição de tamanho e separação entre fármaco livre e encapsulado. A terceira e última fase do projeto consistiu da caracterização de duas preparações, através de análises do raio hidrodinâmico, determinação da carga de superfície das partículas (potencial zeta), teor de fosfolipídios totais (teor de fosfato), eficiência e avaliação da encapsulação por análises de HPLC, anisotropia e supressão de fluorescência. Ainda na fase de caracterização investigamos a atividade biológica in vitro, destas formulações, pelo teste de susceptibilidade. As preparações foram desafiadas contra leveduras e dermatófitos. Pela seleção e otimização das formulações desenvolvidas concluímos que a melhor formulação foi a que apresenta uma composição de 70 % de Epikuron 200 SH; 20 % de Colesterol; 10 % de Diestearoilfosfatidilglicerol, 1,3 % de 2,6 - bis (1,1-dimetil) - 4 - metil fenol (BHT) e 7 % de NYS. Duas preparações foram caracterizadas L1 (hidratada a 55°C) e L2 (hidratada a 60°C). Os resultados para anisotropia e supressão de fluorescência evidenciam a encapsulação do fármaco nas preparações estudadas, tanto na bicamada lipídica quanto na superfície dos lipossomas. Verificamos também que L2 apresentou menor polidisperdidade de seu raio hidrodinâmico, maior carga de superfície e maior eficiência de encapsulação, evidenciando ser L2 a preparação, físico-quimicamente, mais estável. Todavia, a preparação L1 mostrou, após sonicação, atividade biológica in vitro maior que L2. Estes resultados podem refletir a possível degradação do fármaco, quando aquecido a 60°C. / Abstract: This study was designed to develop liposomal formulations containing Nystatin (NYS), looking forward its future applications in systemic mycosis therapy, which often affect immunodepressed individuals. In the first part of the project, the drug was characterized by means of thermal analyses (TGA and DSC), IR, UV/V and fluorescence spectroscopies, solubility tests, humidity contents evaluation (Karl-Fischer method) and octanol-water partition coefficient. In the second part of the study, liposomal formulations were developed and optimized, in which the drug presented improved chemical stability. Liposomal formulations were prepared by the dry lipid film hydration method and were analyzed by HPLC. The vesicles were submitted to the processes of size reduction and separation of non encapsulated drug. The last part of the project consisted in the characterization of the two formulations by means of analysis of the is hydrodynamic radius; determination of the particles superficial charge (zeta-potential); total phospholipids content (phosphate); degree of NYS with encapsulation by HPLC; degree of anisotropy and fluorescence quenching of NYS. Still during the characterization phase, the in vitro biological activity of the formulations was investigated by means of susceptibility tests. The formulations were challenged against some yeasts and filamentous fungi. Conclusions pointed that the best formulation was the one which presented in its compositions 70% Epikuron 200 SH, 20% Cholesterol, 10 % Distearoylphosphatidylglycerol, 1.3 % 2,6 - bis (1,1-dimethylethyl) - 4 - methylphenol (BHT) and 7 % NYS. Two formulations were characterized: L1 (hydrates at 55°C) and L2 (hydrated at 60°C). Results regarding the degree of anisotropy and fluorescence quenching evidenced by NYS encapsulation at the liposomal lipid bilayers. Moreover, it was observed that L2 presented lower polydispersity in size distribution, higher superficial load and higher encapsulation effectiveness, i.e. L2 presented higher physico-chemical stability. Nevertheless the L1 preparation showed, after sonication, higher biological activity in vitro than L2, which might reflect possible thermal degradation of NYS when heated to 60°C. / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Orientador: Theo Guenter Kieckbusch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-11T12:31:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Turbiani_FrancieleRezendeBarbosa_M.pdf: 2355251 bytes, checksum: 54057feae41bd47bee56d5615dbbfd3d (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Filmes biodegradáveis são produzidos a partir de polímeros naturais, principalmente polissacarídeos e proteínas, e tem potencial aplicação na área médica, farmacêutica e alimentícia. A incorporação de agentes ativos pode ampliar suas funções como embalagens antimicrobianas, por exemplo. Filmes foram confeccionados à base de alginato de sódio usando cloreto de cálcio como agente reticulante e glicerol como plastificante. O uso de benzoato de cálcio foi investigado como agente ativo (íons benzoato) e como auxiliar na reticulação (íons cálcio). Devido ao alto poder gelificante do Ca++, confeccionou-se, inicialmente, um filme de baixa reticulação a partir de soluções filmogênicas contendo até 0,54% de Ca++ (1º estágio). Esse filme sofreu uma reticulação complementar com excesso de Ca++ (2º estágio). Dentre os vários procedimentos avaliados (contato do filme com tecido e/ou esponja umidecidas, pincel ou rolo de pintura e imersão do filme em solução reticuladora), a simples imersão em solução contendo de 3 a 7% de CaCl2 no 2º estágio produziu filmes com alto grau de reticulação. O aumento da concentração de glicerol nessa solução melhora a manuseabilidade e plasticidade dos filmes, porém aumenta a solubilidade em água e o conteúdo de umidade dos mesmos e um adequado compromisso foi obtido usando 5% desse plastificante. Ensaios nos quais o CaCl2 foi substituído, total ou parcialmente, por benzoato de cálcio indicou que o mesmo não pode ser usado na solução do 2º estágio por favorecer a precipitação de cristais sobre o filme. Filmes ativos de 0,06 mm de espessura, pré-reticulados apenas com benzoato de cálcio e 0,7% de glicerol na solução do 1º estágio e imersos por 30 minutos em banho contendo 3% de CaCl2 e 5% de glicerol no 2º estágio, apresentaram baixa solubilidade em água (até 20% da matéria seca). Estes filmes têm baixo grau de intumescimento (< 50% da massa inicial), boa resistência mecânica à tração, mas baixa elasticidade. A permeabilidade ao vapor de água é moderada e os valores encontrados são típicos de biofilmes hidrofílicos. Ensaios de liberação de benzoato utilizando água como sorvedouro, apresentaram bom ajuste as soluções da 2ª Lei de Fick, com valores de difusividade efetiva do benzoato variando de 3 a 5.10-7 cm2/s. Os valores de difusividade diminuiram com o aumento da reticulação e aumentaram com o aumento da concentração de benzoato no filme / Abstract: Biodegradable films are produced from natural polymers, structurized mainly by polysaccharides or proteins, and have potential applications in the medical, pharmaceutical or food area. The incorporation of active agents can extend their application as antimicotic packaging, for instance. Films were manufactured with sodium alginate, using calcium chloride as cross-linking agent and glycerol as plasticizer. The use of calcium benzoate as active agent (benzoate ions) and as crosslinking agent (calcium ions) was investigated. Due to the strong gelling power of Ca++ ions, impeding smooth casting procedures, films with low reticulation are initially manufactured, using less than 0.54% Ca++ in the filmogenic solutions (1st stage). These films are further crosslinked with an excess of Ca++ by immersion in a solution of 3% to 7% of CaCl2 (2nd stage). Increasing the glycerol concentration in this solution improves the handling and plasticity of the films but increase water solubility and moisture content and an adequate compromise was obtained using 5% plasticizer. Tests conducted with partial or total substitution of CaCl2 by calcium benzoate indicated that the later could not be used in the 2nd stage solution since it promoted crystals precipitation on film surface. Active films, 0.06mm thick, pre-reticulated with calcium benzoate only and with 0.7% glycerol in the solution of the 1st stage, immersed for 30 minutes in a 3% CaCl2 and 5% glycerol solution (2nd stage) had around 17% moisture content and low water solubility (up to 20% of total dry mass). These films show low swelling degree (<50% of initial mass), good tension strength but low elongation ability. The water vapor permeability is moderate, typical of highly hydrophilic films. Benzoate liberation tests, using pure water as sink, presented good fit to solutions of Fick¿s 2nd law and effective diffusivities found varied from 4.2 to 6.3 × 10-7 cm2/s. The diffusivity values decreased with the degree of reticulation and increase with benzoate concentration in the film / Mestrado / Engenharia de Processos / Mestre em Engenharia Química

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:33:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleica Soyan Barbosa Alves.pdf: 3821920 bytes, checksum: 34ccc3da66a047e6488478b0c0743aa5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:34:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleica Soyan Barbosa Alves.pdf: 3821920 bytes, checksum: 34ccc3da66a047e6488478b0c0743aa5 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:34:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleica Soyan Barbosa Alves.pdf: 3821920 bytes, checksum: 34ccc3da66a047e6488478b0c0743aa5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-05T15:34:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleica Soyan Barbosa Alves.pdf: 3821920 bytes, checksum: 34ccc3da66a047e6488478b0c0743aa5 (MD5) Previous issue date: 2016-04-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cryptococcosis is a systemic mycosis caused by the inhalation of resected propagules of Cryptococcus fungus. The two main species that cause disease are Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii. In this study the objective was to evaluate the presence of cryptococcosis agents in residences of a rural community of Amazonas and characterize the environmental isolates of C. neoformans and C. gattii for genetic diversity using multilocus sequencing typing (MLST) and antifungal susceptibility using E-test. The total of 103 samples of indoor dust were analyzed, in 12 houses the isolation of Cryptococcus neoformans and / or C. gattii molecular types VNI and VGII were possible. The STs knowed for C. gattii ST46 and ST93 for C. neoformans were found. In addition, new alleles were found, resulting in new STs for the two species. The evaluation of the antifungal susceptibility revealed the presence of two strains of C. gattii with fluconazole resistance. All residents had negative results CrAg, despite the dust of their homes present cryptococcosis agents. / A criptococose é uma micose sistêmica ocasionada pela inalação de propágulos ressecados do fungo Cryptococcus. As duas principais espécies causadoras de doença são Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. Nesse trabalho o objetivo foi avaliar a presença de agentes da criptococose em moradores e moradias de uma comunidade rural do Amazonas e caracterizar os isolados ambientais de C. neoformans e C. gattii quanto à diversidade genética utilizando a técnica de sequenciamento de multilocus (MLST) e a susceptibilidade a cinco antifúngicos utilizando fitas de E-test. Foram analisadas 103 amostras de poeira domiciliar, destas em 12 casas foi possível realizar isolamento de Cryptococcus neoformans e/ou C. gattii dos tipos moleculares VNI e VGII. Foram encontrados os STs já conhecidos ST46 para C. gattii e ST93 para C. neoformans e novos alelos, resultando em novos STs para as duas espécies. A avaliação da susceptibilidade a antifúngicos revelou a presença de dois isolados de C. gattii resistentes a fluconazol. Todos os moradores tiveram resultado de CrAg negativo, apesar de na poeira das suas moradias serem isolados os agentes de criptococose.

Orientador: Renato Roberto Biral / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-17T16:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SilvaNeto_AristidesAlvesda_M.pdf: 1446361 bytes, checksum: e43c4d41a8d9112b373efc124f725ce4 (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: Com o objetivo de indicar ao clínico uma medicação tópica intra-canal, que pudesse ser usada nas biopulpactomias, selecionamos pelo Compendio Médico de 1973, seis associações corticosteróide-antibiótico-antifungicas (A,B,C,D,E e F) usadas em dermatologia ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Odontologia

Objetivo: Evaluar in vitro la actividad fungistática y fungicida del extracto metanólico de Minthostachys Mollis (Muña) sobre cepas de Candida albicans. Materiales y Métodos: Se realizaron extractos metanólicos de las hojas, tallos y raíces de Minthostachys mollis. La actividad fungistática de los extractos frente a cepas de Candida albicans fue evaluado por medio de la técnica de difusión en agar. La concentración mínima inhibitoria (CMI) del extracto se determinó por el método de microdilución y la citotoxicidad usando la línea celular MDCK. Resultados: El extracto de hojas y tallo de Minthostachys mollis mostró mayor actividad fungistático frente a Candida albicans, observandose halos de inhibición de 47.72±6.67mm y 46.58±6.42mm respectivamente, no encontrando diferencia estadísticamente significativa entre ambos extractos. La CMI fue de 46.87mg/ml, 93.75mg/ml y 1500mg/ml para hojas, tallos y raíces respectivamente. Conclusiones: Se demostró que el extracto metanólico de Minthostachys mollis tienen actividad fungistática y fungicida contra cepas de Candida albicans. Ninguno de los extractos resultó ser tóxico sobre líneas celulares. / Objective: to evaluate in vitro the fungistatic and fungicidal activity of the methanolic extract of Minthostachys Mollis (Muña) on strains of Candida albicans. Methods: Three in vitro methanolic extracts of the leaves, stems and roots of Minthostachys mollis were made. The fungistatic activity of the extracts against Candida albicans strains was evaluated by means of the agar diffusion technique. Minimun inhibitory concentration (MIC) was determined by the microdilution method and cytotoxicity using the MDCK cell line. Results: The extracts that obtained the greatest fungistatic activity at 24 hours were those of leaves and stems against Candida albicans, halos of 47.72 ± 6.67mm and 46.58 ± 6.42mm respectively were obtained, finding no statistically significant difference. The MIC for leaves was 46.87mg / ml, for stems was 93.75mg / ml and 1500mg / ml for roots. Conclusions: It was demonstrated that the methanolic extracts of Minthostachys mollis have fungistatic and fungicidal activity against strains of Candida albicans. None of the extracts turned out to be toxic on cell lines at low concentrations. / Tesis

Existe un gran interés por estudiar productos naturales bioactivos que ofrezcan una alternativa sustentable para el control de las enfermedades en cultivos. El propóleos y los aceites esenciales se presentan como candidatos promisorios en tal sentido, ya que poseen compuestos derivados del metabolismo secundario vegetal con actividad biológica. No obstante, las investigaciones al respecto son escasas. En este contexto, el objetivo de esta tesis fue estudiar de forma integral las características de extractos de propóleos y de aceites esenciales de orégano, su actividad antimicrobiana individual y combinada frente a diversos fitopatógenos y su acción fitoinhibitoria sobre propágulos de especies cultivadas. Para esto, el esquema de trabajo comenzó con la bioprospección de distintos extractos de propóleos (EP), así como de aceites esenciales de orégano (AEO). Las muestras presentaron diversas características, destacándose que todas contenían una abundante cantidad de compuestos bioactivos pertenecientes al grupo de los fenoles en los EP, y de los terpenos en los AEO. Luego, se probaron in vitro las propiedades antimicrobianas del EP y del AEO frente a fitopatógenos aislados de propágulos hortícolas y caracterizados morfológica y genotípicamente. Ambos productos mostraron diferencias en su eficacia y forma de actuar frente a Penicillium allii y a Sclerotinia sclerotiorum. El hallazgo más novedoso de estos estudios fue que la combinación de EP con AEO tuvo un efecto antifúngico sinérgico frente a los mencionados patógenos. Por otro lado, también se probó la acción antibacteriana del EP sobre bacterias fitopatógenas. Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, Xanthomonas gardneri, X. vesicatoria y Pseudomonas corrugata resultaron sensibles a dicho producto. En los estudios referidos a las propiedades fitoinhibitorias del EP y del AEO sobre propágulos de lechuga (Lactuca sativa), ajo (Allium sativum) y poroto pallares (Phaseolous lunatus), se evidenció que existen diferencias en su tolerancia a la aplicación de los productos estudiados. Estos ensayos permitieron seleccionar formulaciones a base de EP y/o de AEO sin efectos adversos para dichos disemínulos, lo que fue fundamental para evitar comprometer su calidad fisiológica. Por último, a través de estudios in vivo, se determinó que la combinación de EP con AEO disminuyó la incidencia y la severidad de la mufa del ajo causada por P. allii en bulbillos, y de moho blanco causado por S. sclerotiorum en semillas de poroto pallares. Estos resultados constituyeron el primer reporte respecto de la actividad antifúngica in vivo del EP combinado con AEO frente a las mencionadas enfermedades. El trabajo realizado en esta tesis, además de ser de gran interés respecto de las características y propiedades del EP y del AEO, reporta por primera vez la acción antifúngica sinérgica que se logra al combinarlos. Los resultados obtenidos demostraron el gran potencial que poseen ambos productos para el control de enfermedades en las semillas, lo que permitirá avanzar en el desarrollo de alternativas sustentables para el manejo de fitopatógenos en la horticultura. / In recent years, there has been a growing interest in the use of biofungicides as safe and effective alternatives for crop protection. Propolis and essential oils are potential candidates, due to their biological activity related to the secondary metabolites they content. However, research in this area is scarce. The aim of this thesis was to comprehensively study the characteristics of propolis extracts and oregano essential oils, their individual and combined antimicrobial activity against several phytopathogens, and their phytoinhibitory action on plant crop propagules. Accordingly, a work scheme was followed. It began with the bioprospection of different samples of propolis extracts (PE), as well as of different oregano essential oils (OEO). The samples showed different characteristics, all containing a large number of bioactive compounds from the group of phenols in PE and terpenes in OEO. The antimicrobial properties of PE and OEO were then tested in vitro against phytopathogens isolated from horticultural seeds previously characterized morphologically and genotypically. Both products showed differences in their efficacy and mode of action against Penicillium allii and Sclerotinia sclerotiorum. The most significant finding was that the combination of PE with OEO had a synergistic antifungal effect against the fungi mentioned. On the other hand, the antibacterial activity of PE against several phytopathogenic bacteria was also demonstrated. Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, Xanthomonas gardneri, X. vesicatoria, and Pseudomonas corrugata showed sensitivity to this product. Studies on the phytoinhibitory properties of PE and OEO over lettuce (Lactuca sativa), garlic (Allium sativum), and lima bean (Phaseolous lunatus) propagules showed that there are differences in the tolerance of these structures to the tested products. These assays allowed selecting formulations based on PE and/or OEO without evidencing adverse effects on the seeds, which was crucial to avoid compromising their physiological quality. Finally, through in vivo studies, it was determined that the combination of PE with OEO reduced the incidence and severity of blue mold caused by P. allii in garlic bulbs and of white mold caused by S. sclerotiorum in lima bean seeds. These results led to the first report of in vivo antifungal activity of PE combined with OEO against those diseases. This work provides valuable information on the characteristics and properties of PE and OEO. It also proves the synergistic antifungal action exerted when combining them. The results reported show the significant potential of both products to control seed disease. These findings will allow developing sustainable alternatives for the management of phytopathogens in horticulture.

O objetivo do presente trabalho foi estudar a ação de diversos antifúngicos isolados e associados a anfotericina B contra amostras sequenciais ou não recuperadas de pacientes com cromoblastomicose e submetidas ou não a tratamento. A partir de 18 pacientes foram isoladas 39 cepas, submetidas a testes de diluição em ágar contendo anfotericina B, cetoconazol, itraconazol, terbinafina, 5-fluorocitosina, fluconazol ou griseofulvina. Com base nas CIMs e nas concentrações séricas desses antifúngicos verificou-se que as amostras foram, de modo geral, sensíveis ao cetoconazol, a terbinafina e ao itraconazol. Somente 13 amostras foram sensíveis a anfotericina, 7 a 5-FC, 2 ao fluconazol e nenhuma à griseofulvina.Com relação as CFMs, 2 cepas foram sensíveis a AnB, 11 ao itraconazol, 20 ao cetoconazol e 3 a 5-FC. Seis não responderam a terbinafina e 38 ao fluconazol. As combinações de antifúngicos resultaram em interações principalmente aditivas ou indiferentes. O estudo de isolados seqüenciais evidenciou um ponto de corte para sensibilidade desses agentes ao itraconazol, correspondente a ClMs &#8804;0,06&#181;g/ml desse azol. / The aim of the present work was to study the action of several antifungals isolated and combined with amphotericin B against sequential or non-sequential samples in patients infected with chromoblastomycosis and treated or not treated. Thirty nine strains from 18 patients were isolated and submitted to agar dilution testing containing amphotericin B, cetoconazole, itraconazole, terbinafine, 5-flucytosin, fluconazole or griseofulvin. Based on the CIMs and on the serum levels of these antifungals, the isolates were susceptible to ketoconazole, terbinafine and itraconazole. Only 13 of the isolates were susceptible to amphotericin; seven to 5-FC, two to fluconazole and none to a griseofulvin. Regarding the CFMs two strains were susceptible to AnB, 11 for itraconazole, 20 for ketoconazole and three for 5-FC. Six didn\'t respond to terbinafine and 38 for fluconazole. The combination of antifungals resulted in mainly additive or indifferent interaction. The study of the sequential isolated sample showed a breaking point for the susceptibility of these agents to itraconazole, corresponding CIMs &#8804;0,06&#181;g/ml of this azole.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-30T13:57:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertaca_ValidacaoAtividadeAntifungica.pdf: 2825671 bytes, checksum: 6f18d342d49cb45885df6f1717b7c911 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-02-01T12:05:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertaca_ValidacaoAtividadeAntifungica.pdf: 2825671 bytes, checksum: 6f18d342d49cb45885df6f1717b7c911 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T12:05:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertaca_ValidacaoAtividadeAntifungica.pdf: 2825671 bytes, checksum: 6f18d342d49cb45885df6f1717b7c911 (MD5) Previous issue date: 2014-09-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os nitrocompostos foram empregados na terapêutica a partir da década de 40, quando foram amplamente sintetizados e testados frente a diversas doenças assim como a descoberta de seus efeitos citotóxicos. Deste modo foram estudados diversos grupos, derivados e análogos que pudessem se mostrar mais seguros e eficazes. Alguns estudos mostraram que os nitroestirenos, a exemplo do nitrofenileteno possuem diversas atividades biológicas como: antifúngica, antibacteriana, anti-inflamatória, antinoceptiva, etc. Associado a isto, atualmente, há um crescente interesse em novos agentes antifúngicos. Dentre os fungos do gênero Aspergillus o mais comuns é o Aspergillus fumigatus o qual é transmitido através do ar causando infecções denominadas de aspergiloses. Outros fungos com relevância na clínica são os dermatófitos que causam diversas doenças de pele e seus anexos, sendo o Trichophyton mentagrophytes bastante prevalente. O objetivo deste trabalho foi validar a estrutura química de nitroestirenos sintetizados em nível de bancada e testá-los como antifúngicos em duas espécies de fungos, entre eles um filamentoso oportunista e um dermatófito, assim como testar os efeitos sinérgicos entre os nitroestirenos obtidos com anfotericina B. Os resultados mostraram que espectros de Infravermelho e Ressonância Magnética Nuclear 1H dos análogos nitroestirenos correspondem com a estrutura proposta. O teste in vitro de microdiluição demonstrou atividade antifúngica dos nitroestirenos, pois foi obtida a CIM do composto 4’-metil-1-nitro-2-fenileteno (7B) na concentração de 0,05 mg/mL frente ao A. fumigatus. Já para a espécie T. mentagrophytes o composto com melhor atividade foi 4’-metoxi-1-nitro-2-fenileteno (7C) com a CIM de 0,22 mg/mL. Com relação à análise da combinação entre AB e os nitroestirenos, in vitro, pelo teste do checkerboard se mostrou antagonista para o composto 7A e 7C e indiferente para o composto 7B frente à cepa padrão de A. fumigatus. / Nitro compounds have been used in therapy from the 40s, when they were widely synthesized and tested against various diseases as well as the discovery of their cytotoxic effects. Thus different groups, derivatives and analogs which could prove safer and more effective were studied. Some studies have shown that nitrostyrenes, like the nitrofenileteno possess diverse biological activities such as antifungal, antibacterial, anti-inflammatory, antinoceptive, etc. Additonally, there is currently a growing interest in new antifungal agents. Among the fungi of the genus Aspergillus is the most common Aspergillus fumigatus which is transmitted through the air causing aspergillosis. Dermatophytes are clinically relevant and cause various skin diseases, Trichophyton mentagrophytes being quite prevalent. The objective of this study was to validate the chemical structure of synthesized nitrostyrenes and evaluate its antifungal activity in two species of fungi, including a filamentous dermatophytes and opportunistic as well as evaluation of the synergistic effects among nitrostyrenes and amphotericin B (AB). The results confirm the infrared spectral and nuclear magnetic resonance of 1H nitrostyrenes analogues as correspond with the proposed structure. Test microdilution demonstrated in vitro antifungal activity of nitrostyrenes with MIC values for 4'-methyl-1-nitro-2- phenylethene (7B) of 0,05 mg/ml against A. fumigatus. For T. mentagrophytes the most active compound was 4'-methoxy-1-nitro-2-phenylethene (7C) with MIC of 0,22 mg/mL. Regarding the analysis of the combination of AB and nitrostyrenes in vitro by the checkerboard test showed antagonist compound 7A and 7C. The 7B compound was indifferent against the standard strain of A. Fumigatus.