Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2005. / Härtill 5 uppsatser.

Tuberculosis (TB) is a global health problem, which is proving extremely difficult to control in the absence of an effective vaccine. Bacille Calmette-Guérin (BCG), the only vaccine currently licensed against TB, demonstrates variable efficacy in humans and cattle. A greater understanding of what constitutes a protective host immune response is required in order to aid the development of improved vaccines. Tissue-resident memory T cells (T_RM) are a recently-identified subset of T cells, which may represent an important aspect of protective immunity to TB. This thesis aims to characterise the role of lung T_RM in BCG-induced protection against TB. In a mouse model, intravascular staining allowed discrimination between lung-vascular and lung-parenchymal T cells. Experiments demonstrated that BCG vaccination induced a population of antigen-specific lung-parenchymal CD4⁺ T cells, a putative tissue-resident population. This lung-parenchymal population was significantly increased in frequency following mucosal BCG vaccination, compared to systemic BCG vaccination. This correlated with enhanced protection against Mycobacterium tuberculosis (M.tb) infection in the lungs of mice receiving mucosal BCG, compared to those receiving systemic BCG. Mucosal BCG induced lung-parenchymal CD4⁺ T cells with enhanced proliferative capacity and a PD1⁺KLRG1^- cell-surface phenotype, a memory-like phenotype associated with improved protection against M.tb infection. These cells may represent a BCG-induced lung T_RM population responsible for the enhanced protection observed following mucosal BCG. Overall, this thesis highlights the potential of mucosal vaccination to elicit lung T_RM and identifies this as a possible immunological mechanism underlying enhanced protection against M.tb infection. These cells may constitute an important target for future vaccination strategies.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-05-22T16:01:34Z No. of bitstreams: 1 Thaís Silva Peleteiro. Ausência de... 2012..pdf: 1334643 bytes, checksum: 7f6e0513fc52b940cf9cdb87c6d33f1f (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-22T16:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thaís Silva Peleteiro. Ausência de... 2012..pdf: 1334643 bytes, checksum: 7f6e0513fc52b940cf9cdb87c6d33f1f (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Introdução: As doenças respiratórias alérgicas, tais como rinite e asma, afetam elevada proporção da população brasileira. Estima-se que mais de 58 mil pessoas foram afetadas por alguma destas condições no Brasil em 2002-2003. Estudos realizados em humanos e animais sugerem que a exposição ambiental ao Mycobacterium tuberculosis ou imunização com o M. bovis (vacina BCG), podem estar relacionadas à proteção contra doenças alérgicas. Objetivo: Investigar a influência da resposta Th1 a antígenos micobacterianos sobre a modulação da resposta do tipo Th2 ao ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Métodos: O estudo compreendeu duas fases. Para avaliar o efeito da resposta à revacinação com o BCG sobre a modulação de uma resposta do tipo Th2 ao Derp, foi realizado um estudo de intervenção randomizado com coorte prospectiva, e os voluntários que participaram compuseram a Amostra 1. Para avaliar o efeito da resposta à infecção latente com M. tuberculosis sobre a modulação de uma resposta do tipo Th2 ao Derp, foi feito um estudo de caso-controle e os voluntários que participaram compuseram a Amostra 2. A população foi composta por adultos jovens com idade entre 19 a 33 anos. Todos responderam ao questionáro ISAAC, modificado. Foi feita coleta de sangue para quantificação da IgE total, IgE específica ao D. pteronyssinus e citocinas das respostas Th1/Th2/inflamatória. Resultados: Não houve diferenças, quanto à produção de citocinas, IgE total e específica ao Derp, entre os grupos controle e revacinados ou entre os indivíduos infectados e não infectados. Isso foi verificado pela ausência de diferenças na produção de citocinas ou nos níveis de IgE total e específica ao Derp entre os grupos atópicos e não atópicos das duas amostras avaliadas. Conclusões: Não houve influência da resposta Th1 ao M. bovis (BCG) ou da resposta Th1 ao M. tuberculosis sobre a modulação da resposta do tipo Th2 ao ácaro D. pteronyssinus, indicando que o contato com micobactérias não parece afetar a resposta alérgica pré-estabelecida em indivíduos adultos jovens. / ntroduction: Allergic respiratory diseases such as asthma and rhinitis, affecting a high proportion of the Brazilian population. More than 58.000 people have been affected by some of these conditions in Brazil in 2002-2003. Studies in humans and animals suggest that environmental exposure to Mycobacterium tuberculosis or immunization with Mycobacterium bovis (BCG), may be related to protection against allergic diseases. Objective: To investigate the influence of Th1 response to mycobacterial antigens on the modulation of Th2-type response to aeroallergen Dermatophagoides pteronyssinus (Derp). Methods: The study comprised two phases. To evaluate the effect of the response to revaccination with BCG on the modulation of a Th2-type response to Derp, we conducted a randomized intervention study with prospective cohort, and the volunteers composed the Sample 1. To evaluate the effect of latent response to infection with M. tuberculosis on the modulation of a Th2-type response to Derp, a study was made of case-control and the volunteers composed the Sample 2. The population consisted of young adults aged 19 to 33 years. All responded to questionnaire ISAAC modified. Blood sampling was performed for quantification of total IgE, specific IgE to D. pteronyssinus and cytokine responses Th1/Th2/inflamatória. Results: No significant differences in cytokine production or levels of total and specific IgE to Derp between atopic and non-atopic groups of the two samples. Conclusions: There were no differences regarding cytokine production, total and specific IgE to Derp, between the control group and revaccinated or between infected and uninfected individuals indicating that contact with mycobacteria not seem to affect the allergic response in adults young.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-25 / Introdução: a prevalência de doenças alérgicas tem aumentado no mundo, particularmente nas populações urbanas de países em desenvolvimento. Objetivos: determinar a prevalência de asma e doenças alérgicas, identificar fatores de risco a elas associados, avaliar a relação entre asma e helmintíase, assim como a relação entre a cicatriz vacinal do BCG e sensibilização atópica em escolares ribeirinhos de Ilhas da Amazônia. Métodos: estudo transversal em 400 escolares (5 a 8 anos) cujos pais responderam os questionários escritos (padrão e complementar) do International Study of Asma and Allergies in Childhood, entre 2007 e 2009. As crianças também foram avaliadas quanto a: medição da cicatriz vacinal do BCG, coletas de fezes (parasitológico) e sangue para dosagem de IgE total e específica séricas. Foram utilizados testes não paramétricos e os fatores de risco foram identificados por regressão logística (stepwise forward) tendo-se como nível de significância 5%. Resultados: prevalência de asma atual e rinoconjuntivite atual foram significantemente maiores entre as crianças vivendo na ilha de Outeiro do que nas da Ilha do Combú (30,5% X 16,5%; 18% x 6%, respectivamente). Nas duas ilhas, ter relato de asma ou rinite nos pais, ter antecedentes pessoais de rinite e tosse noturna no último ano estiveram associados à maior expressão de asma. A regressão logística identificou os riscos de ter asma: na ilha do Combú foram antecedente familiar de asma, ter gato na atualidade e tosse noturna no último ano. Na do Outeiro foram: antecedente familiar de asma, antecedente pessoal de eczema, ter dois ou mais irmãos mais velhos e tosse noturna no último ano. Conjuntamente para as duas ilhas os riscos foram: tosse noturna no último ano e antecedente familiar de asma. Não houve diferença significante entre parasitados e não por helmintos em relação à expressão da asma, exceto ter diagnóstico médico de asma, mais frequente entre as crianças parasitadas. Níveis séricos de IgE total e de IgE específica a A.lumbricoides foram mais elevados nas crianças parasitadas. Correlação entre os níveis séricos de IgE sérica total e as específicas aos alérgenos mostrou significância para Periplaneta americana e A.lumbricoides entre os parasitados e entre os não parasitados foi com B.germanica e B.tropicalis. Correlação entre o diâmetro médio da pápula induzida pelos aerolérgenos e o nível de IgE sérica específica para D.pteronyssinus e B.tropicalis foi significante entre os não parasitados. Diâmetro médio da cicatriz vacinal do BCG das crianças com asma não diferiu das sem. Não houve correlação significante entre os níveis séricos de IgE total e específica e o diâmetro médio da cicatriz vacinal do BCG. Conclusões: houve variação na prevalência de asma e rinite entre as ilhas, sendo mais elevada na do Outeiro, que possui características de zona urbana. Os fatores de risco de ter asma foram diferentes para as duas ilhas refletindo as características individuais de cada ilha e conjuntamente foi o antecedente familiar de asma, enfatizando a participação da genética como importante fator de risco. Os helmintos não foram associados à expressão da asma nem da sensibilização alérgica. É importante criar medidas preventivas mais apropriadas contra o desenvolvimento de asma para cada uma das ilhas. Mais estudos são necessários para clarificar o papel dos helmintos sobre a asma e doenças alérgicas. / Background: epidemiological studies have focused on possible association between helminth infection and the development of asthma and/or allergies. Objectives: to evaluate the association between helminth infection and asthma and its relation to serum levels of total and specific IgE for A. lumbricoides and aeroallergens, besides evaluating possible relation between BCG scar and allergic sensitization. Methods: cross sectional study in 400 schoolchildren from two Amazon Islands. A standardized written questionnaire (asthma module) from International Study of Asthma, Allergies in Childhood protocol was administered and asthmatic children were those with current wheezing. The following procedures were done: skin prick test (positive test with papule mean diameter > 3mm); blood samples for assessment of serum levels of total and specific IgE for A. lumbricoides and aeroallergens (positive those with levels > 0.36 kU/L); feces samples for helminths examination (positive = infected with at least one helminth); mean diameter of BCG vaccine scar measurement. Analyses were assessed for both islands together and non-parametric tests were applied obtaining 5% of significance level. Results: there was no significant difference between infected and non-infected children with helminths related to asthma expression, save for having physician-diagnosed asthma that was more frequent in helminths infected children. Serum levels of total and specific IgE for A. lumbricoides were higher in infected children. Significant correlations between serum levels of total and specific IgE for aeroallergens to Periplaneta americana and Ascaris lumbricoides among those infected and among those non-infected was for B. germanica e B. tropicalis. Significant correlation between papule mean diameter and serum level of specific IgE for D. pteronyssinus e B. tropicalis among those not infected. Mean diameter of BCG vaccine wasn´t different among children with asthma and those without, as well as there was no correlation between serum levels of total and specific IgE. Conclusions: parasite infections are not associated with either asthma expression or to allergic sensitization, but positive association was verified between physician-diagnosed asthma and helminth infection. More studies are necessary to clarify helminth infection role on asthma and allergic diseases. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Introdução: O controle da dor em recém-nascidos (RN) é necessário, tendo em vista que a exposição contínua e repetitiva à dor poderá trazer consequências ao desenvolvimento da criança. Há evidências consistentes sobre o efeito analgésico e segurança de se administrar a oferta oral de soluções adocicadas em RN submetidos a procedimentos dolorosos agudos. A amamentação e o contato pele a pele são práticas rotineiras, de baixo custo e incentivadas pelo Programa Hospital Amigo da Criança, com evidência de efetividade analgésica que pode ser adotada, como medida alternativa à oferta de soluções adocicadas. Entretanto, é preciso avaliar se seu efeito analgésico e sua segurança superam a solução adocicada na administração de vacinas, antes de recomendar sua adoção. Hipótese: O efeito analgésico combinado da amamentação com o contato pele a pele é superior à oferta oral de glicose 25% na administração da vacina BCG em RN. Objetivo: Avaliar o efeito analgésico da combinação da amamentação com contato pele a pele na administração da vacina BCG em RN a termo. Método: Ensaio clínico randomizado, conduzido em um hospital de ensino da cidade de São Paulo, certificado como Hospital Amigo da Criança. A amostra foi composta por 109 RN a termo, saudáveis, internados na Unidade de Alojamento Conjunto do HU, entre agosto e setembro de 2015. A amostra foi randomizada e os RN alocados nos Grupos Experimental (GE amamentação + contato pele a pele iniciada 5 minutos, antes da administração da vacina de BCG) e Controle (oferta oral de 2 ml de solução glicosada 25% ao RN posicionado verticalmente no colo materno, 2 minutos, antes da administração da vacina de BCG). O desfecho primário analisado foi o escore de dor obtido com a avaliação pela escala Premature Infant Pain Profile- Revised (PIPP-R). O escore de dor foi obtido em seis intervalos de 30 segundos (30, 60, 90, 120, 150 e 180 segundos) pós-administração da vacina. Os desfechos secundários avaliados foram os indicadores fisiológicos frequência cardíaca (FC) e saturação de oxigênio (SatO2), além de alterações na mímica facial - sobrancelhas salientes, olhos espremidos e sulco nasolabial, duração do choro e eventos adversos. Os dados foram obtidos por meio de filmagens do recém-nascido para captar a mímica facial e do display do monitor multiparamétrico com os registros da FC e SatO2. Os dados foram extraídos por meio da análise segundo a segundo das filmagens e foram registrados em formulário impresso próprio e, posteriormente, armazenados em planilha Microsoft Excel. A análise estatística foi processada no programa do pacote estatístico SPSS 20. Para analisar a homogeneidade da amostra, foram utilizados os testes Qui-quadrado ou Exato de Fisher para variáveis qualitativas e o teste t pareado para comparar as médias das variáveis quantitativas. Os dados das variáveis quantitativas das medidas repetidas, como FC e SatO2, foram analisados com o Modelo de Análise Misto, e as medidas repetidas de escores de PIPP-R analisadas pelo modelo ANOVA (Modelo Geral Linear). O projeto de pesquisa foi aprovado pelos Comitês de Ética da Escola de Enfermagem e do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo e registrado no Registro Brasileiro de Ensaios Clínicos. Resultados: A distribuição das variáveis sexo, gemelaridade, tipo de parto, Apgar, peso, idade gestacional, número de procedimentos dolorosos anteriores e tempo desde a última mamada apresentaram distribuições homogêneas entre os grupos experimental e controle. Os escores de dor foram inferiores no GE (p=0,002). Não houve diferenças estatisticamente significantes em relação ao tempo de choro (p=0,745) e ocorrência de eventos adversos (p= 0,618). Conclusão: A combinação da amamentação no contato pele a pele apresentou efeito analgésico superior à oferta oral de glicose 25% com o RN no colo materno, como resposta dolorosa do RN à vacina de BCG e que apresenta segurança para ser indicada, como intervenção analgésica na prática clínica. / Introduction: Pain management in infant newborns is necessary, given the continuous and repeated exposure to pain can have negative consequences for the child\'s development. There is robust evidence of the analgesic effect and safety of administering oral sweetened solutions to newborns undergoing acute painful procedures. Breastfeeding and the skin-to-skin care are routine clinical practices, with low cost, and the Baby-Friendly Hospital Initiative recommends them. There is evidence of both practices regarding their analgesic effectiveness, which can be adopted as an alternative treatment to sweetened solutions. However, it is necessary to assess whether the analgesic effect and safety of these measures outweigh sweetened solutions in the administration of vaccines, before recommending its adoption. Hypothesis: The analgesic effect of combining breastfeeding plus skin-to-skin contact is superior to the taste of 25% glucose in the BCG vaccination in infant newborns. Objective: To evaluate the analgesic effect of combining breastfeeding plus skin-to-skin contact in the BCG vaccination in term infant newborns. Methods: A randomized clinical trial conducted at the University of São Paulo Teaching Hospital certified as a Baby-Friendly Hospital from August to September 2015. This study was performed on 109 healthy term infants who were born during the study, admitted at a rooming-in ward. The sample was randomized and infants were allocated in Experimental Group (GE breastfeeding plus skin-to-skin contact which begun 5 minutes prior to the administration of BCG vaccine) or Control Group (CG taste of 2 mL 25% glucose administered 2 minutes prior the BCG vaccination with the mother holding her baby upright on her lap). The primary outcome analyzed was the pain score assessed by the Premature Infant Pain Profile - Revised (PIPP-R). The pain score was assessed in six intervals of 30 seconds (30th, 60th, 90th, 120th, 150th and 180th) after the BCG vaccine administration. The secondary outcomes were: physiological parameters heart rate (HR) and oxygen saturation (O2Sat), and changes in facial expression brow bulging, eyes squeezed and nasolabial furrow, crying duration and adverse events. Data was obtained from video records of the newborn facial expressions and HR and O2Sat of multiparametric monitor display. Data was extracted from the video records after being analyzed throughout every second. Data was stored in the Microsoft Excel spreadsheet. Statistical analysis was performed by statistical package SPSS 20. To analyze the homogeneity of the sample, chi-square test or Fisher\'s exact was performed for qualitative variables, to compare the means of quantitative variables, paired t-test was used. Quantitative variables of repeated measures, as HR and O2Sat were analyzed with Mixed Model Analysis and repeated measurements of PIPP-R scores were analyzed by ANOVA (General Linear Model). The ethics committee of the School of Nursing and University Hospital, both from the University of São Paulo, approved the research project. The research project is registered at the Brazilian Registry of Clinical Trials. Results: The distribution of gender, twin pregnancy, mode of delivery, Apgar, weight, gestational age, number of previous painful procedures and time since last feeding showed homogeneous distribution between the Experimental and Control groups. Pain scores were lower in the EG (p = 0.002). There were no statistically significant differences in relation to the crying duration (p = 0.745) and adverse events (p = 0.618). Conclusion: The combination of breastfeeding plus skin-to-skin contact showed superior analgesic effect regarding the comparative intervention of oral 25% glucose with infant positioned vertically in mothers lap and it is safe to be prescribed as an analgesic treatment in clinical practice.

Introdução: O controle da dor em recém-nascidos (RN) é necessário, tendo em vista que a exposição contínua e repetitiva à dor poderá trazer consequências ao desenvolvimento da criança. Há evidências consistentes sobre o efeito analgésico e segurança de se administrar a oferta oral de soluções adocicadas em RN submetidos a procedimentos dolorosos agudos. A amamentação e o contato pele a pele são práticas rotineiras, de baixo custo e incentivadas pelo Programa Hospital Amigo da Criança, com evidência de efetividade analgésica que pode ser adotada, como medida alternativa à oferta de soluções adocicadas. Entretanto, é preciso avaliar se seu efeito analgésico e sua segurança superam a solução adocicada na administração de vacinas, antes de recomendar sua adoção. Hipótese: O efeito analgésico combinado da amamentação com o contato pele a pele é superior à oferta oral de glicose 25% na administração da vacina BCG em RN. Objetivo: Avaliar o efeito analgésico da combinação da amamentação com contato pele a pele na administração da vacina BCG em RN a termo. Método: Ensaio clínico randomizado, conduzido em um hospital de ensino da cidade de São Paulo, certificado como Hospital Amigo da Criança. A amostra foi composta por 109 RN a termo, saudáveis, internados na Unidade de Alojamento Conjunto do HU, entre agosto e setembro de 2015. A amostra foi randomizada e os RN alocados nos Grupos Experimental (GE amamentação + contato pele a pele iniciada 5 minutos, antes da administração da vacina de BCG) e Controle (oferta oral de 2 ml de solução glicosada 25% ao RN posicionado verticalmente no colo materno, 2 minutos, antes da administração da vacina de BCG). O desfecho primário analisado foi o escore de dor obtido com a avaliação pela escala Premature Infant Pain Profile- Revised (PIPP-R). O escore de dor foi obtido em seis intervalos de 30 segundos (30, 60, 90, 120, 150 e 180 segundos) pós-administração da vacina. Os desfechos secundários avaliados foram os indicadores fisiológicos frequência cardíaca (FC) e saturação de oxigênio (SatO2), além de alterações na mímica facial - sobrancelhas salientes, olhos espremidos e sulco nasolabial, duração do choro e eventos adversos. Os dados foram obtidos por meio de filmagens do recém-nascido para captar a mímica facial e do display do monitor multiparamétrico com os registros da FC e SatO2. Os dados foram extraídos por meio da análise segundo a segundo das filmagens e foram registrados em formulário impresso próprio e, posteriormente, armazenados em planilha Microsoft Excel. A análise estatística foi processada no programa do pacote estatístico SPSS 20. Para analisar a homogeneidade da amostra, foram utilizados os testes Qui-quadrado ou Exato de Fisher para variáveis qualitativas e o teste t pareado para comparar as médias das variáveis quantitativas. Os dados das variáveis quantitativas das medidas repetidas, como FC e SatO2, foram analisados com o Modelo de Análise Misto, e as medidas repetidas de escores de PIPP-R analisadas pelo modelo ANOVA (Modelo Geral Linear). O projeto de pesquisa foi aprovado pelos Comitês de Ética da Escola de Enfermagem e do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo e registrado no Registro Brasileiro de Ensaios Clínicos. Resultados: A distribuição das variáveis sexo, gemelaridade, tipo de parto, Apgar, peso, idade gestacional, número de procedimentos dolorosos anteriores e tempo desde a última mamada apresentaram distribuições homogêneas entre os grupos experimental e controle. Os escores de dor foram inferiores no GE (p=0,002). Não houve diferenças estatisticamente significantes em relação ao tempo de choro (p=0,745) e ocorrência de eventos adversos (p= 0,618). Conclusão: A combinação da amamentação no contato pele a pele apresentou efeito analgésico superior à oferta oral de glicose 25% com o RN no colo materno, como resposta dolorosa do RN à vacina de BCG e que apresenta segurança para ser indicada, como intervenção analgésica na prática clínica. / Introduction: Pain management in infant newborns is necessary, given the continuous and repeated exposure to pain can have negative consequences for the child\'s development. There is robust evidence of the analgesic effect and safety of administering oral sweetened solutions to newborns undergoing acute painful procedures. Breastfeeding and the skin-to-skin care are routine clinical practices, with low cost, and the Baby-Friendly Hospital Initiative recommends them. There is evidence of both practices regarding their analgesic effectiveness, which can be adopted as an alternative treatment to sweetened solutions. However, it is necessary to assess whether the analgesic effect and safety of these measures outweigh sweetened solutions in the administration of vaccines, before recommending its adoption. Hypothesis: The analgesic effect of combining breastfeeding plus skin-to-skin contact is superior to the taste of 25% glucose in the BCG vaccination in infant newborns. Objective: To evaluate the analgesic effect of combining breastfeeding plus skin-to-skin contact in the BCG vaccination in term infant newborns. Methods: A randomized clinical trial conducted at the University of São Paulo Teaching Hospital certified as a Baby-Friendly Hospital from August to September 2015. This study was performed on 109 healthy term infants who were born during the study, admitted at a rooming-in ward. The sample was randomized and infants were allocated in Experimental Group (GE breastfeeding plus skin-to-skin contact which begun 5 minutes prior to the administration of BCG vaccine) or Control Group (CG taste of 2 mL 25% glucose administered 2 minutes prior the BCG vaccination with the mother holding her baby upright on her lap). The primary outcome analyzed was the pain score assessed by the Premature Infant Pain Profile - Revised (PIPP-R). The pain score was assessed in six intervals of 30 seconds (30th, 60th, 90th, 120th, 150th and 180th) after the BCG vaccine administration. The secondary outcomes were: physiological parameters heart rate (HR) and oxygen saturation (O2Sat), and changes in facial expression brow bulging, eyes squeezed and nasolabial furrow, crying duration and adverse events. Data was obtained from video records of the newborn facial expressions and HR and O2Sat of multiparametric monitor display. Data was extracted from the video records after being analyzed throughout every second. Data was stored in the Microsoft Excel spreadsheet. Statistical analysis was performed by statistical package SPSS 20. To analyze the homogeneity of the sample, chi-square test or Fisher\'s exact was performed for qualitative variables, to compare the means of quantitative variables, paired t-test was used. Quantitative variables of repeated measures, as HR and O2Sat were analyzed with Mixed Model Analysis and repeated measurements of PIPP-R scores were analyzed by ANOVA (General Linear Model). The ethics committee of the School of Nursing and University Hospital, both from the University of São Paulo, approved the research project. The research project is registered at the Brazilian Registry of Clinical Trials. Results: The distribution of gender, twin pregnancy, mode of delivery, Apgar, weight, gestational age, number of previous painful procedures and time since last feeding showed homogeneous distribution between the Experimental and Control groups. Pain scores were lower in the EG (p = 0.002). There were no statistically significant differences in relation to the crying duration (p = 0.745) and adverse events (p = 0.618). Conclusion: The combination of breastfeeding plus skin-to-skin contact showed superior analgesic effect regarding the comparative intervention of oral 25% glucose with infant positioned vertically in mothers lap and it is safe to be prescribed as an analgesic treatment in clinical practice.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-15T14:55:25Z No. of bitstreams: 2 Dissertacao_2009_Joyce_Lobo.pdf: 1055257 bytes, checksum: c6fb4445c47b40e183c76262a465da47 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2014-09-16T02:03:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_2009_Joyce_Lobo.pdf: 1055257 bytes, checksum: c6fb4445c47b40e183c76262a465da47 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-16T02:03:36Z (GMT). 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The animals were divided in two groups: six calves from Curraleiro breed and six calves from Nelore breed. Each group was further divided in: immunized group which received the BCG vaccine and a control which received the adjuvant. The data were submitted to descriptive statistics and then to the Kruskall Wallis and Mann-Whitney tests. It was realized hemogram, total protein, albumin, globulin eletroforesis of serological protein, ELISA for M. bovis IgG and IgM levels. The results were grouped and Curraleiro and Nelore calves were compared, the Curraleiro breed exhibited larger numbers of leucocytes, neutrophils, lymphocytes and monocytes; higher proteins and globulins levels; and higher concentration of alfa-1, beta and gama globins fraction. So, considered the vaccination to BCG, the Curraleiro calves were more levels in produce specifics M. bovis IgM and IgG. Between the immunized groups, Curraleiro group immunized presented better performance than Curraleiro control group, Nelore group immunized and lastly Nelore control group. Concluded that Curraleiro breed compared to Nelore breed exhibited unspecific and specific humoral immune response more productive qualified for bigger numbers of leucocytes and higher concentration of unspecific and specific immunoglobulin. / A raça Curraleiro foi formada em regime de criação extensiva na região do cerrado, com mínimos cuidados sanitários e de alimentação, resultando em animais rústicos, que constituem um importante recurso genético para a pecuária brasileira. Com o objetivo de ampliar os conhecimentos sobre aspectos imunológicos dessa raça, foi realizado o estudo comparativo entre bovinos da raça Curraleiro e Nelore após vacinação com Mycobacterium bovis - BCG. Para tanto se quantificou a produção de anticorpos IgM e IgG específicos para Mycobacterium bovis, por meio do teste de ELISA indireto método in house. Utilizou-se 12 bezerros de propriedades do Estado de Goiás, seis de cada raça com idade aproximada de seis meses. Os bezerros de cada raça foram subdivididos em outros dois grupos, o grupo vacinado recebeu Mycobacterium bovis BCG via intradermica. Inicialmente os dados foram submetidos à estatística descritiva e posteriormente aos testes de Kruskall Wallis e Mann- Whitney. Para o protocolo de avaliação realizaram-se os seguintes exames: hemograma, quantificação de proteína total, albumina, globulina, eletroforese das proteínas séricas, IgG e IgM M. bovis específicas. Agrupando os resultados de todas as colheitas, observou-se que os bezerros da raça Curraleiro quando comparados aos bezerros Nelore, apresentaram maiores contagem total de leucócitos, segmentados, linfócitos e monócitos; concentrações mais elevadas de proteínas e globulinas séricas; das frações alfa-1, beta e gama globulinas. Considerando especificamente a vacinação com Mycobacterium bovis - BCG, os bezerros Curraleiro produziram maiores quantidades de IgM e IgG M. bovis específicas quando comparados aos bezerros Nelore. Entre os grupos vacinados o que apresentou maiores valores foi o grupo Curraleiro vacinado, seguido pelo grupo Curraleiro controle, posteriormente grupo Nelore vacinado e por fim o grupo Nelore controle, com as menores concentrações. Conclui-se que bovinos da raça Curraleiro quando comparados aos da raça Nelore apresentam resposta imunológica inespecífica e específica humoral maiores, caracterizada por maior número de leucócitos e maiores concentrações de imunoglobulinas IgM e IgG M. bovis específicas.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-14T11:53:05Z No. of bitstreams: 1 danilo-parmera.pdf: 3155055 bytes, checksum: ac63cd2b7c2719955b83925c310aabbc (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-14T11:53:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 danilo-parmera.pdf: 3155055 bytes, checksum: ac63cd2b7c2719955b83925c310aabbc (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / As culturas de células vêm sendo utilizadas extensivamente no desenvolvimento e na produção de uma variedade de produtos terapêuticos e profiláticos, tornando-se uma ferramenta indispensável para geneticistas, imunologistas, vacinologistas e a indústria farmacêutica. A adoção de sistemas de ensaios celulares in vitrotem sido aplicada como um método alternativo para a substituição ou diminuição do uso de animais nas fases de desenvolvimento, produção e testes de vacinas, demonstrando resultados promissores. Da mesma forma, sistemas computacionais podem ampliar a utilização desta ferramenta para etapas do desenvolvimento de vacinas candidatas na fase pré-clínica. O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de umprotocolo in vitroutilizando culturas de células humanas - a linhagem de monócitos THP-1, para a seleção de um protótipo vacinal - a cepa Pasteur de Mycobacterium bovisBCG expressando o antígeno Sm14 de Schistossoma mansoni(BCG/sm14). Para isso foram empregadas duas metodologias – citometria de fluxo e imunocitoquímica, para a identificação do perfil da expressão das citocinas IL-10, IL-12 e TNF-α. Foram utilizados como controles a cepa Pasteur do M. bovisBCG e a construção da cepa Pasteur do M. bovisBCG contendo o vetor de expressão pAU5 (BCG/pAU5).Após padronização, a multiplicidade de infecção utilizada para os experimentos foi de 10 bacilos para 1 célula THP-1 (10MOI). A expressão daproteína Sm14 foi detectada em todos os protótipos vacinais. Para assegurar queo protótipo BCG/sm14 era capaz de diferenciar a linhagem de monócitos THP-1 em macrófagos, avaliamos a taxa de crescimento celular e foi possível observarque após a infecção estas células apresentavam o índice de proliferação diminuído em 2 logs em relação à célula não infectada. O protótipo vacinal BCG/sm14não mostrou diferenças quanto a capacidade de infecção, a taxa de persistência intracelular e a estabilidade da construção plasmidial. As duas metodologias empregadas mostraram resultados discrepantes em relação ao percentual de citocinas expressas após a infecção com o protótipo vacinal ou os BCG controles, mostrando um maior percentual de células positivas quando avaliados por citometria de fluxo.Contudo, mesmo com esta diferença observamos que o protótipo vacinal BCG/sm14 não alterou o perfil de expressão de IL-10, IL-12 e TNF-α. O fato do plasmídeo pAU5 ser um vetor de expressão citoplasmática, sugere que a proteína Sm14 não foi capaz de estimular a mudança de citocinas em monócitos humanos. Experimentos futuros devem investigar o papel do BCG/sm14em macrófagos maduros, quanto a indução de citocinas pró e anti-inflamatórias, TLR, bem como na indução da resposta imune adaptativa, como a apresentação antigênica, na tentativa de melhor entender a resposta imune a esta vacina candidata. / Cell cultures has been used extensively in the development of a broad range of therapeutic and prophylactic products, and are an important tool for geneticists, immunologists, vaccinologists and the pharmaceuticsindustry. In vitrocell assay has been applied as an alternative method to replace ordiminish the use of animal model in the developmental, production in vaccine test phases, with promising results. Otherwise, computational methods should amplify theuse of cell cultures tools to test candidate vaccines. The mean goal of this work was to develop an in vitro protocol using human cell line – monocytic cell THP-1, to select a vaccine prototype – strain Pasteur Mycobacterium bovisBCG expressing Schistosoma mansoniSm14-antigen (BCG/sm14). Two methodologies were employed – a flow cytometry and immunocytochemistry, to quantify the expression of IL-10, IL-12 e TNF-α. Pasteur M. bovisBCG and the strain Pasteur do M. bovisBCG containing the expression vector pAU5 (BCG/pAU5) were used as controls. Multiplicityof infection (MOI) was determined and showed a better 10 bacilli to 1 cells ratios, regarding the expression of intracellular cytokines. Sm14 protein expressionwas detected in all vaccine prototype before use. To assure that BCG/sm14was able to differentiate monocytic THP1 cell line in mature macrophage, we evaluated the proliferative ration after BCGs infection and all strain showed the ability toinduce monocytic THP1 cells maturation, diminishing in 2.0 logs the cell proliferation. No differences were seen in the uptake, intracellular persistence and plasmidial stability. Interestingly, we observe discrepant results regarding the amount of positivecells expressing cytokines detected by the two methods used, independent of which BCG was tested. The overall results obtained by the cytometric method was high than immunocytochemistry. However, beside these ambiguous results, no alteration in the IL-10, IL-12 and TNF-alfa profile was observed whenBCG/sm14was compared with BCG. These results point to the plamidial BCG construction pAU5 and its intracellular expression, suggesting no modification in the cytokine profile in human monocytic cell lines. Further experiments should be addressedto identify the role of BCG/sm14 in modulate mature macrophage and, the induction ofadaptive immune response, as antigen presentation, pro- and anti-inflammatory cytokines, TLR expression and activation, to better understating the vaccine prototype immune response.

O aumento da prevalência de doenças alérgicas como a asma, tem sido atribuído à falta de estímulos infecciosos. A atopia, que embasa as manifestações alérgicas, caracteriza-se por uma disfunção imune com predomínio da resposta do tipo Th2. Experimentos em modelos animais com micobactérias e seus produtos têm demonstrado resultados promissores na proteção e reversão de resposta imune do tipo Th2. A imunoterapia para alérgenos inalatórios tem mostrado resultados positivos e o uso do BCG como adjuvante poderia trazer benefícios adicionais. Em estudo randomizado duplo cego foram avaliados 21 indivíduos de ambos os sexos, com idades de 8 a 17 anos sensibilizados ao Dermatophagoides pteronissynus (Dpt) e portadores de asma leve ou moderada persistentes. Os pacientes foram divididos em dois grupos e tratados com imunoterapia específica (ITE) para Dpt. O Grupo A recebeu como adjuvante, no início da ITE, uma aplicação do diluente do BCG e o Grupo B uma dose da vacina BCG. Na avaliação realizada após o período de indução da ITE constatou-se nos dois grupos diminuição significativa dos sintomas, da necessidade de medicação para asma, da hiperreatividade brônquica inespecífica, da reatividade cutânea ao Dpt juntamente com a melhora da função pulmonar. Houve uma redução no índice de estimulação da cultura de células mononucleares do sangue periférico estimuladas com Dpt, acompanhada de uma elevação da IL-10 no sobrenadante e dos níveis da IgG específica para Dpt e da IgE total. Os eosinófilos, a IgE específica para Dpt do sangue e o óxido nítrico no ar exalado não se alteraram. Não houve diferença na comparação dentre os grupos, exceto na proliferação das células mononucleares do sangue periférico estimuladas com PPD, que foi maior no Grupo B. Conclusão: a ITE levou a resultados satisfatórios com melhora clínica e alterações imunológicas já ao final do período de indução. A avaliação do uso do BCG como adjuvante, não mostrou benefícios adicionais. / The increase of allergic diseases, such as asthma, has often been explained by a decline in infectious stimulation. Atopy that is characterized as an immune dysfunction promotes a strong type Th2 immune response and underlines allergic diseases. Experimental animal models researches with mycobacteria and its products had led to promising results in prevention or reversion of type Th2 response. Positive results have been obtained to allergens specific immunotherapy (SIT) and its association with BCG vaccine, as an adjuvant, could promote additional benefits. In a randomized double blind study 21 patients sensitized to mite Dermatophagoides pteronyssinus (Dpt) with mild or moderate persistent asthma, aged 8 to 17 years of both sex were evaluated. Patients were divided in two groups. Group A received at the beginning of SIT one dose of BCG diluent and Group B one dose of BCG vaccine. After the SIT induction period we observed in both groups a significant decrease in asthma symptoms, bronchial hyperreactivity, immediate cutaneous reactivity to Dpt and the necessity of drugs intake. Specific lymphoproliferation against Dpt significantly decreased while IL-10 levels, specific IgG and total IgE increased. Blood eosinophils, specific IgE, others immunoglobulins levels and nitric oxide in exhaled air didn\'t change. There were no differences in all parameters evaluated between the two groups except on specific lymphoproliferation against PPD that was higher in Group B. Conclusions: improvement in symptoms and immunologicals changes where observed at the end of SIT induction period. BCG as adjuvant didn\'t add additional benefits.

O aumento da prevalência de doenças alérgicas como a asma, tem sido atribuído à falta de estímulos infecciosos. A atopia, que embasa as manifestações alérgicas, caracteriza-se por uma disfunção imune com predomínio da resposta do tipo Th2. Experimentos em modelos animais com micobactérias e seus produtos têm demonstrado resultados promissores na proteção e reversão de resposta imune do tipo Th2. A imunoterapia para alérgenos inalatórios tem mostrado resultados positivos e o uso do BCG como adjuvante poderia trazer benefícios adicionais. Em estudo randomizado duplo cego foram avaliados 21 indivíduos de ambos os sexos, com idades de 8 a 17 anos sensibilizados ao Dermatophagoides pteronissynus (Dpt) e portadores de asma leve ou moderada persistentes. Os pacientes foram divididos em dois grupos e tratados com imunoterapia específica (ITE) para Dpt. O Grupo A recebeu como adjuvante, no início da ITE, uma aplicação do diluente do BCG e o Grupo B uma dose da vacina BCG. Na avaliação realizada após o período de indução da ITE constatou-se nos dois grupos diminuição significativa dos sintomas, da necessidade de medicação para asma, da hiperreatividade brônquica inespecífica, da reatividade cutânea ao Dpt juntamente com a melhora da função pulmonar. Houve uma redução no índice de estimulação da cultura de células mononucleares do sangue periférico estimuladas com Dpt, acompanhada de uma elevação da IL-10 no sobrenadante e dos níveis da IgG específica para Dpt e da IgE total. Os eosinófilos, a IgE específica para Dpt do sangue e o óxido nítrico no ar exalado não se alteraram. Não houve diferença na comparação dentre os grupos, exceto na proliferação das células mononucleares do sangue periférico estimuladas com PPD, que foi maior no Grupo B. Conclusão: a ITE levou a resultados satisfatórios com melhora clínica e alterações imunológicas já ao final do período de indução. A avaliação do uso do BCG como adjuvante, não mostrou benefícios adicionais. / The increase of allergic diseases, such as asthma, has often been explained by a decline in infectious stimulation. Atopy that is characterized as an immune dysfunction promotes a strong type Th2 immune response and underlines allergic diseases. Experimental animal models researches with mycobacteria and its products had led to promising results in prevention or reversion of type Th2 response. Positive results have been obtained to allergens specific immunotherapy (SIT) and its association with BCG vaccine, as an adjuvant, could promote additional benefits. In a randomized double blind study 21 patients sensitized to mite Dermatophagoides pteronyssinus (Dpt) with mild or moderate persistent asthma, aged 8 to 17 years of both sex were evaluated. Patients were divided in two groups. Group A received at the beginning of SIT one dose of BCG diluent and Group B one dose of BCG vaccine. After the SIT induction period we observed in both groups a significant decrease in asthma symptoms, bronchial hyperreactivity, immediate cutaneous reactivity to Dpt and the necessity of drugs intake. Specific lymphoproliferation against Dpt significantly decreased while IL-10 levels, specific IgG and total IgE increased. Blood eosinophils, specific IgE, others immunoglobulins levels and nitric oxide in exhaled air didn\'t change. There were no differences in all parameters evaluated between the two groups except on specific lymphoproliferation against PPD that was higher in Group B. Conclusions: improvement in symptoms and immunologicals changes where observed at the end of SIT induction period. BCG as adjuvant didn\'t add additional benefits.