Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-02-11T15:19:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-02-11T17:49:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-11T17:49:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) Previous issue date: 2011 / No Brasil, o controle da leishmaniose visceral (LV) tem sido baseado num “tripé” de ações que preconiza o tratamento de casos humanos, o combate ao vetor e a eliminação de cães soropositivos, que infelizmente não tem alcançado bons resultados na redução dos casos de LV humana e canina. Assim, a imunoprofilaxia surge como uma das alternativas mais importantes para o controle da LV. Considerando que até o momento ainda não existem vacinas que sejam comprovadamente protetoras, nosso grupo de pesquisa tem empregado esforços no desenvolvimento de protótipos vacinais contra leishmaniose visceral canina (LVC). Um destes protótipos é a vacina LBSapSal, composta por antígenos de Leishmania braziliensis associada ao extrato de glândula salivar de Lutzomyia longipalpis (SGE) e ao adjuvante saponina. Estudos prévios em cães vacinados com a vacina LBSapSal revelaram a indução de forte imunogenicidade, marcada pelo aumento de linfócitos T CD8+ circulantes, dos níveis de óxido nítrico séricos e por uma produção balanceada de isotipos de IgG (IgG1/IgG2) indicando uma resposta imune mista do tipo 1 e tipo 2. Tais resultados indicam que a vacina LBSapSal induz uma resposta imune protetora anti-LVC. Desta forma o presente trabalho tem como objetivo central avaliar a capacidade imunoprofilática da vacina LBSapSal através de estudos de proteção após o desafio experimental com promastigotas de Leishmania chagasi. Foram utilizados 20 cães, com idade de 210 dias, sem raça definida que foram subdivididos em quatro grupos experimentais com cinco animais cada um, entre os quais: (i), grupo CID, (ii) grupo Sal, (iii) grupo LBSal e (iv) grupo LBSapSal. Foram ministradas três aplicações vacinais subcutâneas em intervalos de 30 dias. Após 3 meses do último inóculo, os cães foram desafiados com 1x107 promastigotas de L. chagasi associadas ao conteúdo de cinco ácinos de glândula salivar de L. longipalpis por via intradérmica. Estes animais foram acompanhados por um período de 885 dias após o desafio, onde foi coletado material biológico para a realização de análise parasitológica da proteção vacinal. Coletas de tecidos de pele e baço foram realizadas para uma investigação da presença do parasito e da carga parasitária nestes órgãos. Nesta investigação foi realizado o isolamento do parasito pela técnica de esplenocultura utilizando o meio NNN/LIT e avaliação do parasitismo por meio de imunohistoquímica anti-Leishmania, análise de imprints de tecidos por microscopia óptica (Giemsa) e reação de PCR em Tempo Real (qPCR) nos tecidos. Dentre as metodologias parasitológicas, a qPCR apresentou alta sensibilidade para detectar L. chagasi na pele e no baço de cães que apresentam baixa carga parasitária. Os resultados de qPCR nos permitiu observar o aumento dos níveis de eficácia vacinal experimental, em relação ao grupo controle (CID) ao se incorporar antígeno de saliva (Sal) e saliva mais antígeno de Leishmania (LBSal). Adicionalmente, aumento dos níveis de proteção e eficácia foram obtidos pela incorporação do adjuvante saponina aos antígenos de saliva de flebotomíneo e de Leishmania (LBSapSal). Neste sentido, os resultados mostraram que a vacina LBSapSal conferiu 80% de proteção na pele, enquanto que todos os cães apresentaram parasitismo no baço. Nossos dados nos permite supor o potencial que a vacina LBSapSal tem em proteger a pele contra a infecção por L. chagasi Desta forma, nos animais imunizados com LBSapSal, a redução da frequência do parasitismo cutâneo poderia implicar na redução da transmissão de Leishmania para o inseto vetor, podendo contribuir no controle deste parasito. __________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Brazil, control of visceral leishmaniasis (VL) has been based on a "tripod" of action that addresses the treatment of human cases, the vector control and elimination of seropositive dogs, which unfortunately hasn´t achieved good results in reducing cases of human and canine VL. Thus, immunoprophylaxis appears as one of the most important alternative for the control of VL. Considering that so far there are still no proven vaccines that are protective, our research group has used efforts in developing prototypes vaccine against canine visceral leishmaniasis (CVL). One of these prototypes is LBSapSal vaccine consisting of antigens of Leishmania braziliensis associated with salivary gland extract of Lutzomyia longipalpis (SGE) and the saponin adjuvant. Previous studies in dogs vaccinated with LBSapSal revealed the induction of strong immunogenicity, marked by increased levels of CD8 + T circulating cells, of serum nitric oxide and a balanced production of IgG isotypes (IgG1/IgG2), indicating a mixed immune response type 1 and type 2. These results indicate that the vaccine LBSapSal induces an immune response anti-LVC. Thus the present work is mainly aimed to assess the immunoprophylactic ability of the vaccine LBSapSal through studies of protection after experimental challenge with promastigotes of Leishmania chagasi. We used 20 mongrel dogs, aged 210 days, that were divided into four groups with five animals each, including: (i), group CID, (ii) Sal group, (iii) group LBSal and (iv) group LBSapSal. Three vaccine subcutaneous applications were given at intervals of 30 days. After three months of last inoculum, the animals were challenged, intradermally, with 1x107 promastigotes of L. chagasi associated with five lobes of the salivary gland of L. longipalpis. These animals were followed for a period of 885 days after the challenge, wich was collected biological material to perform parasitological analyses of vaccine protection. Samples of skin and spleen were performed to investigate the presence of a parasite and the parasite burden in this organs. In this investigation we performed the isolation of the parasite in spleen samples using NNN/LIT medium, and to evaluate the parasitism by immunohistochemical anti-Leishmania, analysis of tissues imprints by optical microscopy (Giemsa) and by PCR Real-Time (qPCR). Among the parasitological methods, the qPCR presented high sensitivity to detect L. chagasi in the skin and spleen of dogs presenting low parasite burden. The results allowed us to observe the increased levels in the experimental vaccine efficacy in comparission to the control group (CID) by incorporating saliva (Sal) and saliva more Leishmania antigen (LBSal). Additionally, increased levels of protection and efficacy were obtained by incorporation of saponin adjuvant to Leishmania an sand fly saliva antigens (LBSapSal). In this sense, the results shoed that the LBSapSal vaccine elicited 80% of protection in the skin, whereas all dogs presented parasitism in the spleen. Our data allows us hypothesize the potencial that LBSapSal vaccine has in protect the skin againts L. chagasi. Thus, in the animals immunized with LBSapSal the reduction of the frequency of parasitism in the skin could result in the reduction of Leishmania transmission to the insect vector, which may contribute to control this parasite.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-02. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:18Z : No. of bitstreams: 1 000848480.pdf: 612627 bytes, checksum: 36cf043f291e693b992eabd762503b7b (MD5) / A erliquiose é uma hemoparasitose que acomete cerca de 20 a 30% dos cães atendidos nas clínicas veterinárias do Brasil, podendo levá-los ao óbito. Predomina nas regiões mais quentes do planeta devido ao fato de seu hospedeiro intermediário, um artrópode, prevalecer nos locais de altas temperaturas. Em função da gravidade da enfermidade para os animais e ao potencial zoonótico da doença, estudos envolvendo as possíveis alterações renais são essenciais para o diagnóstico e prognóstico da doença. Neste ensaio, objetivou-se avaliar as proteínas séricas e urinárias de cães com erliquiose na fase subclínica, por meio da técnica de eletroforese em gel de poliagrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Os animais foram devidamente distribuídos em grupo controle (GC), 18 cães saudáveis e grupo doente (GD), integrado por 17 cães acometidos por erliquiose subclínica, sendo que o diagnóstico da infecção foi confirmado ou excluído levando-se em conta a associação de exames clínicos, sorológicos e PCR. Os resultados mostraram que os cães na fase subclínica da erliquiose apresentaram alterações laboratoriais como, trombocitopenia, hiperglobulinemia com hipoalbuminemia compensatória e aumento de proteínas totais, além de anemia. A partir do traçado eletroforético sérico, concluiu-se que os cães infectados na fase subclínica apresentaram elevação na concentração de transferrina, IgG de cadeia pesada, haptoglobina, alfa 1-glicoproteína ácida e proteína de peso molecular 23 kDa. A análise do traçado eletroforético urinário dos animais experimentais, associada com o resultado da UPC, o qual revela proteinúria limítrofe nos indivíduos doentes, demonstraram que existem lesões renais, tanto em nível glomerular quanto tubular, em cães com erliquiose na fase subclínica, entretanto, mais estudos se fazem necessários para esclarecer e detalhar melhor as referidas lesões / Ehrlichiosis is a hemoparasitosis that affects around 20 to 30% of dogs treated at veterinary clinics in Brazil, which may lead the animal to death. It predominate in the warmer regions of planet because of its intermediate host, an arthropod, that lives in high temperature regions. Due to the severity of the disease to animals and its zoonotic potencial, studies involving the possibles renal disorders are essential for the diagnosis and patient's prognosis. In this trial aimed to evaluate serum and urinary proteins of dogs with ehrliquiosis in the subclinical stage, by electrophoresis in poliacrilamida gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). The animals were divided into control group (CG), 18 health dogs and sick group (SG), the last one with 17 dogs with diagnosis of erlichiosis subclinical, and the diagnosis of infection was conformed or excluded by association of clinical exams, serological tests and PCR. The results showed that dogs on the subclinical stage of ehrlichiosis had laboratory changes as thrombocytopenia, hyperglobulinemia associated with compensatory hypoalbuminemia and increased total protein, and anemia. From the serum electrophoresis, it was concluded that the infected dogs in subclinical phase had increased concentration of transferrin, the heavy chain of IgG, haptoglobin, alpha 1-acid glycoprotein and protein molecular weight 23 kDa. The analysis of urinary electrophoretic trace of the experimental animals, the result associated with the UPC, which shows borderline proteinuria in diseased dogs, showed that there renal lesions, both as tubular glomerular level, in dogs with erliquiosis in the subclinical stage, however, more studies are needed to clarify and better detail these injuries

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-02. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:16Z : No. of bitstreams: 1 000848474.pdf: 572372 bytes, checksum: 3047ed378c8d8d3cc0c615fe38af8715 (MD5) / A erliquiose canina é uma das hemoparasitoses mais frequentes entre os cães domésticos e apresenta alta prevalência nas regiões de clima tropical. Apesar das inúmeras investigações e avanços na compreensão da patogênese e diagnóstico da referida doença, pouco se sabe a respeito das alterações glomérulo-tubulares de cães acometidos por erliquiose. No presente estudo objetivou-se associar o perfil eletroforético das proteínas sanguíneas e urinárias com as possíveis alterações glomérulo-tubulares encontradas em cães com erliquiose na fase aguda. O Grupo Controle (GC) foi integrado por 18 cães saudáveis e o Grupo Doente (GD), por 24 animais. Ambos de qualquer gênero, raça e idade. O protocolo experimental incluiu avaliação das condições clínicas de cães sadios e daqueles acometidos pela doença, neste último caso com base nos sinais clínicos e presença de mórula em esfregaços sanguíneos de ponta de orelha. Dos animais controle e daqueles enfermos, foram obtidas amostras de sangue periférico e urina para análises eletroforéticas das proteínas pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Foram selecionadas 11 frações proteicas no traçado densitométrico dos soros sanguíneos, cujos pesos moleculares variaram entre 23 e 139 kDa (kilodáltons). Os resultados mostraram que algumas proteínas séricas de fase aguda se alteram nos cães com erliquiose na fase aguda. Observou-se diferença significativa entre os grupos estudados na concentração sérica de transferrina, haptoglobina, IgG (cadeia leve) e albumina, sendo que somente esta última apresentou níveis inferiores no Grupo Doente. A análise eletroforética da urina exibiu um número superior de frações proteicas excretadas pelos cães com erliquiose na fase aguda (295), quando comparados àqueles encontrados nos cães do GC (174). Foram encontradas proteínas de alto (>60 kDa) e baixo... / Canine ehrlichiosis is one of the most frequent haemoparasitosis between domestic dogs and has high prevalence in tropical regions. Despite the innumerous investigations and progresses in the pathogenesis comprehension and diagnosis of the disease, little is known on the glomerulo-tubular alterations of dogs stricken by ehrlichiosis. The aim of this study was to associate the electrophoretic profile of blood and urinary proteins with the possible glomerulo-tubular alterations found in dogs with acute-phase ehrlichiosis. The Control Group (CG) was formed by 18 healthy dogs and the Sick Group (SG), by 24 animals, both groups with unspecified genders, races and ages. The experimental protocol included assessment of the dogs' clinical conditions, and regarding the sick ones, based on the clinical signs and the presence of morula in the ear-tip blood smears. From the animals of both groups, peripheral blood and urine samples were obtained for protein electrophoretical analysis through the polyacrylamide gel with dodecyl sodium sulfate (SDS-PAGE) electrophoresis technique. Eleven protein fractions were selected in the blood sera densitometry trace, with molecular weights ranging from 23 to 123 kDa (kilodaltons). The results showed that some acute-phase proteins change in dogs with acute-phase ehrlichiosis. Significant difference between the studied groups was observed in serum concentrations of transferrin, haptoglobin, IgG (light chain) and albumin, the latter with lower levels in the Sick Group. The electophoretical analysis of urine showed a larger number of protein fractions excreted by dogs with acute-phase ehrlichiosis (295), when in comparison with the ones in the CG (174). High (>60 kDa) and low (<60 kDa) molecular weight proteins were found in the sick dogs' urine, suggesting that the disease in its acute phase causes lesions in both glomeruli and tubules, respectively

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:25:57Z : No. of bitstreams: 1 chiurciu_jlv_dr_botfmvz.pdf: 349241 bytes, checksum: bd5d442bec2c4a00b188c9600c29d72f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o trabalho, teve-se por objetivo analisar individual e comparativamente o desempenho de dois viscoelásticos, hialuronato de sódio 3% associado ao sulfato de condroitina 4% e hidroxipropilmetilcelulose 2%, frente à facoemulsificação em cães portadores de catarata madura, por meio da avaliação das alterações clínicas e variações das células endoteliais, espessura corneana e pressão intra-ocular (PIO). Foram utilizados 20 cães distribuídos em dois grupos, cada qual utilizando um dos viscoelásticos. A técnica cirúrgica adotada a foi facoemulsificação bimanual. As avaliações clínicas e tonométricas foram efetuadas antes e após o ato cirúrgico , em 1, 7, 14, 21, 28 e 60 dias de pós-operatório e a microscopia especular, antes e após 7, 28 e 60 dias. Foi efetuada a correlação entre tempo de ultra-som utilizado e as variáveis estudadas, bem como das variáveis entre sí. Utilizando-se hidroxipropilmetilcelulose 2%, ocorreu opacidade corneana, formação de fibrina e hiperemia conjuntival mais freqüentemente e de maior intensidade no período inicial. Não houve diferença estatística entre os grupos na variação da PIO, com exceção da medida feita aos 14 dias, quando foi significativamente maior com o uso de hialuronato de sódio 3% e sulfato de condroitina 4%. Não houve diferença estatística entre os grupos nos parâmetros relacionados ao endotélio. Correlação de concordância significativa foi observada somente entre densidade e área celular endotelial. O uso de hialuronato de sódio 3% e sulfato de condroitina 4% é vantajoso nos casos de densidade celular endotelial próxima ao limite inferior de normalidade. / The study aimed to assess the clinical changes and variations of the endothelial cells, corneal thickness and intra-ocular pressure (IOP) front to the facoemulsificação on dogs carriers of cataract, using viscoelastic substances the base of sodium hyaluronate 3% and sodium chondroitin sulfate 4% and comparing it with hidroxipropilmetilcelulose 2%. Twenty dogs were used distributed in two equal groups, each using one of viscoelástic materials. The surgical technique used was phaco bimanual. The clinical and tonometric evaluations were made before and after 1, 7, 14, 21, 28 and 60 days of surgery and specular microscopy before and after 7, 28 and 60 days. Correlation between time of used ultrasound and the studied variable, as well as of the variables among itself was effected. Hidroxipropilmetilcelulose 2% developed more incidence frequent and of bigger intensity in the corneal opacity, formation of fibrin and conjunctival hyperemia in the initial period. There was no statistical difference between the groups in the variation in IOP, except to 14 day, which was significantly higher with the use of sodium hyaluronate 3% and chondroitin sulfate 4%. There was no statistical difference between the groups in the parameters related to the endothelium, with slight decrease in endothelial cell density and increase of cell area with the use of hydroxypropyl 2%. Significant correlation was only observed between density and endothelial cellular area. The use of sodium hyaluronate 3% and chondroitin sulfate 4% is advantageous in cases of endothelial cell density near to the lower limit of normality.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-01Bitstream added on 2014-06-13T18:41:54Z : No. of bitstreams: 1 munhoz_td_dr_jabo.pdf: 1806915 bytes, checksum: 10b016880b9017b3102afefa3e695dde (MD5) / O linfoma é a neoplasia hematopoiética mais comum nos cães e uma das mais frequentes, dentre todas as neoplasias, nesta espécie. Apresenta-se em diversas localizações anatômicas e pode apresentar classificações histológicas e imunofenotipos distintos. Dependendo da resposta imune do paciente frente à instalação de um tumor, algumas informações sobre o prognóstico podem ser obtidas. Atualmente, as células T reguladoras (Tregs) vêm sendo estudadas em algumas neoplasias caninas, por seu comprovado potencial imunossupressor, principalmente por inibir a resposta antitumoral. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos quantificar, por citometria de fluxo, as células Tregs em sangue periférico de cães com linfoma multicêntrico de imunofenótipos B e T, respectivamente 14 e 8 cães, no momento do diagnóstico e após o primeiro ciclo de quimioterapia antineoplásica com o protocolo Madison-Wisconsin (MW) de 19 semanas adaptado, e comparar com cães saudáveis (n=10), buscando quantificá-las em cães com linfoma de diferentes imunofenótipos antes e após a 5ª semana do protocolo MW. Os resultados mostraram que cães com linfoma apresentaram uma porcentagem significativamente maior de Tregs (18,84±2,56) quando comparada aos cães sem neoplasia (4,70±0,50) (p<0,01). Além disso, após a 5ª semana de tratamento houve uma significante redução da população de Tregs (7,54±1,08), atingindo valores semelhantes a dos cães controle (4,70±0,50) (p>0,05). Não houve diferença nas Tregs em relação aos imunofenotipos B (17,45±2,77) e T (21,27±5,27) (p>0,05). Concluiu-se que o linfoma em cães leva a um aumento de células Tregs e que o tratamento com o protocolo quimioterápico MW reduz significativamente as células Tregs em sangue periférico, atingindo valores próximos aos dos cães saudáveis / Lymphoma is the most common hematopoietic malignancy in dogs and one of the most frequent among all neoplastic diseases in this species. It can occur in several anatomical locations with distinct histological and immunophenotypes. Depending on the host immune response towards the tumor, prognosis information could be collected. Because its well established immunosuppressant, antitumor activity, the function of regulatory T cells (Tregs) in canine neoplasias has been investigated. In this study, we sought to quantify, using flow cytometry, the Tregs subpopulation in peripheral blood of healthy dogs (10) and in those diagnosed with type-B (14) and type-T (8) multicentric lymphoma before (at diagnosis) and after the first cycle (5-week) of 19-week Madison- Wisconsin (MW) protocol of chemotherapy. Our results indicated that dogs with lymphoma showed higher percentage of Tregs (18,84±2,56) when compared to healthy dogs (4,70±0,50) (p<0,01). In addition, 5-week chemotherapy treatment reduced the Tregs subpopulation (7,54±1,08) to levels similar to control (4,70±0,50) (p>0,05). There was no difference in Tregs percentage between B-type (17,45±2,77) and T-type (21,27±5,27) lymphoma (p>0,05). With this, we conclude that canine lymphoma increases Tregs in the peripheral blood and the MW protocol of chemotherapy reduces this cell subpopulation to control values

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-13Bitstream added on 2014-06-13T20:22:03Z : No. of bitstreams: 1 colodel_mm_dr_botfmvz.pdf: 2872859 bytes, checksum: e38e46863de7b5075ae5aa7ad99cbf0f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Dos tumores diagnosticados nas cadelas as neoplasias mamárias apresentam a maior incidência. Essas neoplasias podem ser influenciadas por fatores internos e externos como os contaminantes ambientais. Apesar das evidências da toxicidade dos piretróides, seu potencial cancerígeno ainda não foi suficientemente esclarecido, havendo a necessidade de investigação de sua participação no câncer de mama. Este estudo teve por objetivo investigar possíveis relações entre resíduos de piretróides e carcinoma de mama espontâneo de cadelas correlacionando-os com o grau de agressividade da neoplasia. Foram selecionadas 50 cadelas divididas em cinco grupos com 10 animais cada. O Grupo Controle foi formado por cadelas que apresentavam diagnóstico negativo para neoplasia em mama; os grupos Luminal A, Luminal B, Superexpressão de HER-2 e Basal foram formados por cadelas que apresentaram carcinoma em mama classificado pela imunoistoquimica como Luminal A, Luminal B, Superexpressão de HER-2 e Basal, respectivamente. O grau de agressividade dos carcinomas foi avaliado por imunoistoquímica mediante a expressão de HER-2, p63 e receptor de Estrógeno. A determinação da concentração de resíduos piretróides aletrina, cipermetrina, deltametrina e tetrametrina da mama e do tecido adiposo adjacente à mama foi realizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A intensidade de dano no DNA foi avaliada pelo Teste do Cometa. Das 50 cadelas, seis apresentaram resíduos de um ou mais piretróides nas amostras das mamas avaliadas e 10 apresentaram resíduos desse inseticida nas amostras de tecido adiposo. O piretróide mais frequente foi a deltametrina. A distribuição de cada resíduo investigado entre os grupos avaliados e entre as amostras de mama e de tecido adiposo em um mesmo animal foi heterogênea. Não há evidência estatística de que os piretróides estejam envolvidos na... / From all tumors that are diagnosed in female dog, the mammary neoplasia is the one that has the highest incidence. This sort of neoplasia may be influenced by both internal and external factors. Good examples of external factors are the environment contaminants. In spite of knowing the evidences of pyrethroid toxicity, it is not sufficiently clarified yet its cancer potential, thus leaving room for further investigation regarding its participation in the mammary tumor formation. This study aims at investigating not only the possible relationships between pyrethroid residue and spontaneous mammary carcinoma in female dog, but also correlating the degree of aggressiveness of such neoplasia. 50 female dog were selected and divided into five groups containing 10 animals each. Control group contained female dog that presented negative results for mammary neoplasia; female dog that presented mammary carcinoma and were immunohistochemically diagnosed as Luminal A, Luminal B, HER-2 Super-expression and Basal, were divided into groups bearing their respective tumor name. Carcinoma aggressiveness degree was immunohistochemically assessed concerning its expression of HER-2, p63 and Estrogen receptor. In order to define pyrethroid residue concentration for alethrin, cypermethrin, deltamethrin, and tetramethrin on mammary and mammary adjacent adipose tissue it was performed High-Performance Liquid Chromatography. The intensity of DNA damage was assessed via Comet Assay. From the 50 female dog, six have presented residue of one or more pyrethroids in mammary samples, and 10 presented residue of this insecticide in adipose tissue samples. The most frequently found pyrethroid residue was deltamethrin. Residue distribution among groups, and both mammary and adipose tissue of the same individual presented heterogeneous results. There is no statistical evidence showing that pyrethroids may be involved in ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T18:41:58Z : No. of bitstreams: 1 gaspar_lfj_dr_botfmvz.pdf: 2365977 bytes, checksum: 745905b3d242d2ab01567430ee694f49 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No presente trabalho foram avaliadas 152 massas neoplásicas de tumor venéreo transmissível procedentes do Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP e do Biotério central da UNESP (campus Botucatu), no período de março de 2002 a setembro de 2004. As preparações citológicas foram coradas pelo método de Giemsa e, segundo critérios estabelecidos, foram divididos em três tipos citomorfológicos: linfocitóide, misto e plasmocitóide. Posteriormente, foram reagrupadas de acordo com comportamento biológico em primárias e não primárias. O objetivo foi identificar e comparar anormalidades nucleares (binucleação, multinucleação, brotamento, lobulação e micronucleação), avaliar parâmetros citomorfométricos através da técnica da CEC (concentração eletrolítica critica), determinar a taxa de proliferação mediante a imunomarcação com o Ki-67 (MIB-1) e com a quantificação das AgNORs, observar a expressão da glicoproteína-p, avaliar a resposta clínica à quimioterapia, bem como, relacionar esta resposta com a expressão de glicoproteína-p. Foi observada maior freqüência das lobulações nucleares no tipo plasmocitóide. A área do nucléolo e a relação nucléolo/núcleo foram maiores nas massas primárias. O Ki-67 (MBI-1) apresentou maior taxa de marcação (positividade) no tipo plasmocitóide e nas neoplasias não primárias. A média de pontos das AgNORs foi maior no tipo linfocitóide em relação aos outros dois tipos. O tipo plasmocitóide e o grupo das neoplasias não primárias tiveram um percentual de marcação da glicoproteína-p maior em relação aos outros grupos. Os tumores do grupo plasmocitóide tiveram um maior percentual de resposta parcial à terapia do que os outros grupos, enquanto os tipos linfocitóde tiveram um maior percentual de resposta completa. Os casos com resposta clínica parcial à quimioterapia apresentaram um... . / In this study were evaluated 137 neoplastic masses of transmissible venereal tumor from clinical attendance at the Veterinary Hospital and Central biotery of UNESP (Botucatu campus), between March 2002 and September 2004. The cytological samples were stained by the Giemsa method and, by preestablished criteria, divided into three cytomorphological patterns: lymphocyte-like, plasma cell-like and mixed. Then, They were regrouped by biological behavior as primary or non-primary (metastatic or recurrent). The aim of the present work was to identify and compare nuclear abnormalities occurrence (binucleation, multinucleation, nuclear buds, nuclear lobulation and micronucleation), to evaluate cytomorphometric parameters by the critical electrolyte concentration (CEC) technique, to determinate proliferation ratio by immunoreaction with Ki-67 (MIB-1) antibody and AgNOR quantification. Additionally, the immunolabelling with p-glycoprotein antibody, and the clinical response to chemotherapy, were evaluated and correlated. The results showed a higher frequency of nuclear lobulation in the plasma-cell-like pattern. The nucleolus area and nucleolus: nucleus ratio were greater in primary masses. The proliferative index measured by Ki-67 immunocytochemistry was most elevated in the plasma-cell-like and not primary tumors. The AgNOR point average was highest in lymphocyte-like patterns. The expression of p-glycoprotein was highest in plasma-cell-like and non-primary masses than in the others. Similarly, the plasma-cell-like group showed a larger partial response to chemotherapy than the other two patterns, although the lymphocyte-like group presented the largest percentage of complete response. The association between p-glycoprotein expression and clinical response revealed that with the partial response had greater p-glycoprotein expressions than the total response... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-10-14Bitstream added on 2014-06-13T20:01:50Z : No. of bitstreams: 1 kitamura_ea_dr_botfmvz.pdf: 1163240 bytes, checksum: 063c9a70fba787cbee7cf61f87e5e0f9 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A doença hepática é frequentemente incluída como diagnóstico diferencial dos casos atendidos na clínica médica de pequenos animais. Os cães com suspeita de doença hepática podem apresentar sinais clínicos específicos e/ou inespecíficos e possuir característica de doença aguda ou crônica. Os exames laboratoriais auxiliam na identificação de lesão dos hepatócitos, colestase ou perda da função hepática, o perfil hepático pode ser avaliado por meio de diversos testes, inclusive avaliando o metabolismo de lipídeos e lipoproteínas, pois uma das funções do fígado é o metabolismo de lipídeos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar os perfis hematológico, hepático, lipídico e lipoprotéico de cães com doença hepática e também comparar diferentes técnicas de análise. Foram utilizados 34 cães, adultos, machos e fêmeas, divididos em dois grupos, sendo: Grupo I (controle) e Grupo II (hepatopatia), e submetidos a jejum alimentar superior a 12 horas para a realização dos exames do perfil lipídico e lipoprotéico. Na avaliação hematológica do Grupo II (hepatopatia) observou-se anemia e discreta trombocitopenia e neutrofilia; o perfil hepático demonstrou presença de lesão ativa em hepatócitos, associado a colestase e ausência de insuficiência hepática; o perfil lipídico revelou colesterol sérico normal e aumento do valor de triglicerídeos e no perfil lipoprotéico observou-se diminuição de HDL e aumento de Lp(a), VLDL e LDL. A avaliação do perfil lipoprotéico é mais sensível, que o perfil lipídico na detecção de alterações no metabolismo de lipídeos e também é mais precoce que a albumina na detecção da disfunção hepática em cães. Para a química seca com sangue total fresco, existe a necessidade de valores de referência específicos, e não possui a sensibilidade adequada na mensuração do nível sérico... / Liver disease is frequently included as a differential diagnosis of clinical cases attended at small animals clinics. Dogs presenting a suspected case of liver disease can show specific and/or unspecific clinical signs and reveal characteristics of acute or chronic disease. The laboratory profile is useful in the identification of hepatocelular lesions, colestasis or loss of the hepatic function; the hepatic profile can be composed by several tests, including the evaluation of the metabolism of lipids and lipoproteins, since one of the liver functions is the metabolism of lipids. The objective of the present work was to evaluate the lipids and lipoproteins profile of dogs with liver disease and also to compare different techniques of analysis. Thirty-four adult dogs, males and females were divided in two groups: Group I (control) and Group II (liver disease), and were submitted to a 12 hours fasting period previously to the lipid and lipoprotein profiles. In the Group II (liver disease) hematological evaluation revealed anemia, mild thrombocytopenia and neutrophilia; the hepatic profile demonstrated lesion in hepatocytes, associated with colestasis and absence of hepatic insufficiency; the profile lipid revealed cholesterol normal and increase of the triglycerides value and in the profile lipoprotein, it was observed decrease of HDL and increase of Lp(a), VLDL and LDL. The evaluation of the lipoprotein profile is more sensitive, that the lipid profile in the detection of alterations in the lipids metabolism and it is also more precocious than the albumin in the detection of the hepatic dysfunction in dogs. For the chemistry dry with fresh total blood, the need of specific reference values exists, and it doesn't possess the appropriate sensibility in the measurable of the level serum triglycerides. The lipoproteins electrophoresis in agarose gel is more sensitive than the serum biochemistry.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-05Bitstream added on 2014-06-13T19:23:19Z : No. of bitstreams: 1 000749254.pdf: 1885169 bytes, checksum: 24b6601284053d8b99b0722497bb3702 (MD5) / A avaliação da medula óssea e das células do sangue em cães com leishmaniose visceral (LV) pode proporcionar valiosas informações, tanto quantitativas quanto qualitativas, relativas à hematopoiese. Os objetivos deste estudo foram avaliar a medula óssea de cães com LV, por meio de exame citológico, histopatológico e imuno-histoquímico (IHC), avaliando-se a carga parasitária, a quantidade de linfócitos e macrófagos, além de células expressando MHC de classe II, IFN-, IL-10, TNF-α e TGF-β, bem como sua repercussão nas células do sangue. Para tanto, foram utilizados 60 cães, sendo 54 infectados e seis animais não infectados. Os cães infectados apresentaram anemia normocítica normocrômica, porém sem alterações na linhagem eritroide da medula óssea, além de displasia granulocítica, megacariocítica e granulomas na medula óssea. A linfocitose observada na medula óssea se refletiu no sangue. No exame citológico, observou-se grande infiltração de macrófagos, linfócitos e plasmócitos nos animais infectados. Quanto à IHC, os cães infectados apresentaram grande quantidade de células imunomarcadas para TNF-α, IL-10, IFN-,TGF-β e macrófagos / The evaluation of the bone marrow and blood cells in dogs with visceral leishmaniasis (VL) can provide valuable information, both quantitative and qualitative, on the hematopoiesis. The objectives of this study were to evaluate the bone marrow of dogs with VL through cytological, histopathological and immunohistochemical (IHC) examination, evaluating the parasitic load, the amount of lymphocytes and macrophages and by cells expressing MHC class II, IFN-, IL-10, TNF-α and TGF-β, as well as its effect on blood cells. To this end, 60 dogs, 54 infected and six uninfected animals were used. Infected dogs showed normochromic normocytic anemia, but without any changes in the erythroid lineage bone marrow, and dysplasia granulocytic, megakaryocytic and granulomas in the bone marrow. The lymphocytosis in the bone marrow was reflected in the blood. On cytological examination, there was extensive infiltration of macrophages, lymphocytes and plasma cells in infected animals. As for IHC, infected dogs showed large amount of immunostained cells to TGF-β, TNF-α, IL-10, IFN- and macrophages

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-08Bitstream added on 2014-06-13T20:05:18Z : No. of bitstreams: 1 moreira_prr_dr_jabo.pdf: 7658386 bytes, checksum: 88b2f8c6da6bd4b4dede297970617c96 (MD5) / Na Leishmaniose Visceral Canina (LVC) a resposta imune órgãoespecífica pode variar de acordo com o órgão afetado, favorecendo ou não a multiplicação do parasito Leishmania (L.) chagasi. O objetivo deste estudo foi analisar, por meio, da técnica de imuno-histoquímica, o fígado e o baço de cães com Leishmaniose Visceral (LV), considerando a carga parasitária, a densidade de células Natural Killer (NK), de macrófagos e de linfócitos, bem como, células em apoptose, de células expressando moléculas de MHC-II e as citocinas TGF-b e TNF- a. Estes resultados foram comparados com os diferentes estágios da doença. Utilizou-se 71 cães naturalmente infectados de área endêmica para LV, classificados nos grupos sintomático (S), assintomático (A) e oligossintomático (O). Um grupo controle foi composto por 10 cães de área não endêmica para LVC. As células positivas para os anticorpos CD56, caspase 3 clivada, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 e para a carga parasitária (soro hiperimune de cão positivo para LVC) foram submetidas a testes não paramétricos para a comparação entre os grupos. O baço foi o órgão que apresentou a maior carga parasitária. A apoptose de linfócitos foi maior nos cães sintomáticos quando comparados ao grupo controle. A intensidade de inflamação foi elevada nos cães com doença avançada (grupo S), caracterizada pela formação de granulomas difusos contendo parasitos. O fígado mostrou menor carga parasitária, um perfil celular dos granulomas rico em linfócitos. A densidade de células NK foi baixa no fígado e baço, bem como a imunodetecção das citocinas TGF- e TNF- . A expressão de MHC-II foi maior no baço de cães do grupo S. Portanto, pode-se sugerir que existe um padrão de resposta diferenciado no baço e fígado, porém outra metodologia deveria ser utilizada para quantificar de forma mais precisa as citocinas TGF- e TNF- nestes órgãos / In Canine Visceral Leishmaniasis (LVC), the immune response to organ-specific can vary with the affected organ, thus favoring or hindering the multiplication of the parasiteLeishmania (L.) chagasi. . The aim of this study was to analyze by immunohistochemistry, the liver and spleen of dogs with visceral leishmaniasis (VL), considering the parasitic load, the density of Natural Killer cells (NK), macrophages and lymphocytes, as well apoptosis cells, cells expressing molecules of MHC-II and the cytokines TGF- and TNF- . These results were compared with different stages of disease. We used 71 naturally infected dogs from an endemic area for VL, classifieds in the symptomatic (S), asymptomatic (A) and oligosymptomatic (O) groups. A control group consisted of 10 dogs from nonendemic area for LVC.The positive cells for CD56 antibody, cleaved caspase 3, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 and parasite load (serum hyperimmune dog seropositive for VL) were subjected to nonparametric tests for comparison between groups. The spleen was the organ with the highest parasite load. The apoptosis of lymphocytes was higher in symptomatic dogs when compared to the control group. The intensity of inflammation was higher in dogs with advanced disease (group S), characterized by the formation of granulomas containing diffuse parasites. The liver showed lowest parasite load, a profile of cell granulomas rich in lymphocytes The density of NK cells was low in the liver and spleen and few cells were positive for cytokines TGF- and TNF- . Expression of MHC-II was higher in the spleen of dogs in Group S. Therefore, one may suggest that there is a differential pattern of response in the spleen and liver, but other methods should be used to quantify more accurately the cytokines TGF- and TNF- in these organs