Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-17T13:01:00Z No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T16:59:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T16:59:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Introduction: The use of natural products as an alternative therapy has become very promising in the treatment of various diseases in recent years, with this perspective; the agents that occur naturally stand out as a source of bioactive molecules with potential therapeutic application in the medical and dental fields. Objective: The objective of this study was to evaluate the antifungal activity and the ethanol extract mode of action of Schinopsis brasiliensis Engler sheet on the Candida genus. Methods: The plant material was collected in the city of Campina Grande -PB then was held to prepare the extract, for the determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). We conducted the phytochemical screening for the quantification of chemical constituents, then a test was made to verify the possible mechanism of action, whether via mobile or plasma membrane wall. Results: The MIC / MFC values for the ethanolic extract of S. brasiliensis (Braúna) ranged from 31.25 to 250 ug / ml on strains ATCC 60193 C. albicans, C. krusei ATCC 34135, C. tropicalis ATCC 705 C. albicans ATCC 18804, C. albicans and C. tropicalis CBS 562 94. CBS As for the mode of action, antifungal action S. brasiliensis (Braúna) seems to be related to the ionic permeability of the cell membrane. The extract exhibited an increased amount of total polyphenol, total saponins then in its composition, which are directly related to the antifungal activity of the extract. Conclusion: The extract of S. brasiliensis has a strong antifungal activity, acting probably in the ionic permeability of the fungal cell membrane. / Introdução: A Utilização de produtos naturais como alternativa terapêutica tem se tornado bastante promissora no tratamento de várias doenças nos últimos anos, com essa perspectiva, os agentes que ocorrem naturalmente se destacam como uma fonte de moléculas bioativas com potencial aplicação terapêutica nas áreas médicas e odontológicas. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antifúngica e o modo de ação do extrato etanólico da folha de Schinopsis brasiliensis Engler sobre espécies do gênero cândida. Material e Métodos: O material vegetal foi coletado no município de Campina Grande –PB, em seguida foi realizada a preparação do extrato, para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Foi realizado o screening fitoquímico para a quantificação dos constituintes químicos, em seguida foi feito um teste para verificar o possível mecanismo de ação, se por via parede celular ou membrana plasmática. Resultados: Os valores de CIM/ CFM para o extrato etanólico de S. brasiliensis (Braúna) variaram de 31,25 a 250 µg/mL, sobre as cepas C. albicans ATCC 60193, C. krusei ATCC 34135, C. tropicalis ATCC 705, C. albicans ATCC 18804, C. albicans CBS 562 e C. tropicalis CBS 94. Quanto ao modo de ação, a ação antifúngica de S. brasiliensis (Braúna), parece estar relacionada com a permeabilidade iônica da membrana celular. O extrato exibiu uma maior quantidade de polifenóis totais, seguida de saponinas totais em sua composição, que estão diretamente relacionados com a atividade antifúngica do extrato. Conclusão: O extrato de S. brasiliensis apresenta uma forte atividade antifúngica, atuando, provavelmente, na permeabilidade iônica da membrana celular fúngica.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-17T13:13:43Z No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T16:59:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T16:59:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Diego Romário da Silva.pdf: 21577849 bytes, checksum: 97066b0c249c1221456f5c7b625b5a17 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study evaluated the antifungal and antibiofilm potential of the hydroalcoholic extract of the bark of Anadenanthera colubrina vell. Brenan, known as Angico and White Angico. The antifungal activity was initially evaluated by the microdilution technique in broth with minimum inhibitory concentration (MIC) and Minimum Fungicide Concentration (CFM). The potential antibiofilm was tested in mature biofilms formed by Candida species and analyzed by counts of CFU / mL and scanning electron micrograph (SEM). In vitro toxicity was analyzed in Raw 264.7 macrophages and systemic toxicity was evaluated in vivo in the Galleria mellonella model. A strong antifungal potential of the extract against strains of the genus Candida was observed, with the following MIC values: Candida albicans ATCC 5314 and ATCC 90028 (19.5 μg / mL), Candida tropicalis ATCC 750 (5000 μg / mL), Candida Glabrata ATCC 90030 (1250 μg / ml), Candida parapsilosis ATCC 22019 and Candida krusei ATCC 6258 (39 μg / ml). The treatment with the extract reduced the number of CFU / mL and was able to cause structural alteration in the biofilm and cellular destruction, observed in SEM, presenting a promossora antibiofilm activity against Candida. A. colubrina presented moderate toxicity in vitro in RAW 264.7 macrophages culture. In the in vivo assay the extract did not affect the viability of the larvae at doses below 100 mg / kg, presenting low toxicity. Considering its high antifungal potential and its low in vivo toxicity, A. colubrina extract is a strong candidate for the development of a new drug for the treatment of oral candidiasis. / Este estudo avaliou o potencial antifúngico e antibiofilme do extrato hidroalcoolico da casca da Anadenanthera colubrina vell. Brenan, conhecida como angico e angico branco. A atividade antifúngica foi inicialmente avaliada pela técnica da microdiluição em caldo com obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM). O potencial antibiofilme foi testado em biofilmes maduros formados por espécies de Candida e analisados por contagem de UFC/mL e microcopia eletrônica de varredura (MEV). A toxicidade in vitro foi analisada em macrófagos Raw 264.7 e a toxicidade sistêmica foi avaliada in vivo em modelo de Galleria mellonella. Observou-se um forte potencial antifúngico do extrato contra cepas do gênero Candida, obtendo-se os seguintes valores da CIM: Candida albicans ATCC 5314 e ATCC 90028 (19.5 μg/mL), Candida tropicalis ATCC 750 (5000 μg/mL), Candida glabrata ATCC 90030 (1250 μg/mL), Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida krusei ATCC 6258 (39 μg/mL). O tratamento com o extrato reduziu o número de UFC/mL e foi capaz de causar alteração estrutural no biofilme e destruição celular, observadas em MEV, apresentando uma promossora atividade antibiofilme contra Candida. A. colubrina apresentou moderada toxicidade in vitro em cultura de macrófagos RAW 264.7. No ensaio in vivo o extrato não afetou a viabilidade das larvas em doses abaixo de 100 mg/kg, apresentando baixa toxicidade. Considerando seu alto potencial antifúngico e sua baixa toxicidade in vivo, o extrato de A. colubrina é um forte candidato para o desenvolvimento de uma nova droga para o tratamento da candidíase oral.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-04T16:56:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-05T10:40:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-05T10:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-05-06 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Candidiasis is a serious health problem that affects a large number of people arround the world. The treatment of this disease is carried out with antifungals, which do not provide an effective cure, besides having resistance reports and high toxicity. In this context, it is necessary to study new antifungal compounds. In addition, the delivery form of the compounds in the living organism is also target of research, since the controlled release of compounds in biological systems can improve the mode of action of many drugs. Therefore, nanostructured systems, such as nanoparticles of chitosan, have been widely studied as controlled delivery of drugs. Then, this study aimed to evaluate the antifungal potential against Candida albicans of thiosemicarbazide (TSC), thiosemicarbazide-camphene (TSC-C) and chitosan nanoparticles incorporated with thiosemicarbazide (nanoTSC). In in vitro assays, the compounds were effective to inhibit nearly 100% of the fungus in concentrations of 1,37 mM to TSC, 0,02 mM to TSC-C and 0,27 mM to nanoTSC, and the most effective compound was TSC-C. NanoTSC and empty nanoparticles were also evaluated as to cell toxicity, and the concentration able to inhibit the fungus showed no cytotoxic activity. To confirm the values observed in in vitro assays, experiments were conducted using an animal model for vulvovaginal candidiasis. The results showed that TSC-C was more efficient in inhibiting C. albicans compared with TSC and nanoTSC, but was less effective than miconazole. However, histopathological analysis showed that the groups treated with the compounds under study, showed less intensity of damage to the vaginal epithelium and inflammatory infiltrates, compared with the positive control and the group treated with miconazole. Thus, the results suggest that TSC, nanoTSC and TSC-C are promising compounds in the treatment of vulvovaginal candidiasis. / A candidíase constitui um sério problema de saúde, pois é uma doença que atinge uma grande parcela da população mundial. O tratamento dessa doença é realizado com antifúngicos, que, muitas vezes, não garantem uma cura efetiva, além de apresentarem relatos de resistência e alta toxicidade. Nesse âmbito, faz-se necessário o estudo de novos compostos antifúngicos. Aliado a isso, a forma de liberação de fármacos no organismo vivo é também alvo de pesquisas, uma vez que a liberação controlada de fármacos em sistemas biológicos pode melhorar a forma de ação dos mesmos. Para tanto, os sistemas nanoestruturados, como as nanopartículas de quitosana, têm sido amplamente estudados como meios de liberação controlada de princípios ativos. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo a avaliação do potencial antifúngico de tiossemicarbazida (TSC), tiossemicarbazida-canfeno (TSC-C) e de nanopartículas de quitosana incorporadas com tiossemicarbazida (nanoTSC) contra Candida albicans. Nos ensaios in vitro, os compostos foram eficientes em inibir quase 100% do crescimento do fungo em concentrações de 1,37 mM para TSC, 0,02 mM para TSC-C e 0,27 mM para nanoTSC, sendo que o composto mais eficiente foi TSC-C. NanoTSC e nanopartículas vazias também foram avaliadas quanto a toxicidade celular, sendo que não foi observada atividade citotóxica na concentração capaz de inibir o crescimento do fungo. Para avaliar a atuação dos compostos in vivo, foram realizados experimentos utilizando um modelo animal para candidíase vulvovaginal. Os resultados mostraram que TSC-C apresentou maior eficiência no tratamento de candidíase vulvovaginal em comparação com TSC e nanoTSC, porém foi menos eficiente do que miconazol. No entanto, a análise histopatológica mostrou que os grupos tratados com os compostos em estudo, apresentaram menor intensidade de danos ao epitélio vaginal e infiltrados inflamatórios, se comparados com o controle positivo e com o grupo tratado com miconazol. Dessa maneira, os resultados apresentados sugerem que TSC, nanoTSC e TSC-C são compostos promissores para o tratamento da candidíase vulvovaginal.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-09T16:47:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-10T11:12:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T11:12:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is caused mainly by opportunistic fungus Candida albicans and its yeast to hyphae transition is considered the major virulence factor of this pathogen. The increased incidence of VVC has highlighted the importance of developing new therapeutic strategies. The objective of this study was to develop a mucoadhesive nanostructured system comprising miconazole, and farnesol within chitosan for the treatment of VVC. The drug showed the antifungal miconazole expected efficacy with minimal inhibitory concentration (MIC) of 1 μg/mL. The farnesol quorum-sensing molecule was capable of inhibiting hypha-transition yeast at levels greater or equal to 300 μM. When tested together, farnesol has no effect compared to the MIC obtained for miconazole. Nanoparticles of chitosan-containing miconazole and farnesol were prepared by ionic gelation and showed favorable characteristics for use on mucous membranes, such as diameter less than 300 nanometers (nm), polydispersion index (PDI) less than 0.3, positive zeta potential and acid pH. The encapsulation efficiency (EE) of the nanoparticles was on average 81.1% for miconazole, 31.9% farnesol and 32.7% and 70.0% for miconazole and farnesol when co-encapsulated, respectively. The nanoparticles showed instability as the diameter and PDI, but were stable compared to the EE. Regarding toxicity in cultured fibroblasts (Balb/ c 3T3) were considered non-toxic. The nanoparticles showed antifungal activity against C. albicans strain used, with MIC of 2.5 μg/mL and 2 μg/mL for nanoparticles with miconazole and miconazole/ farnesol, respectively. Nanoparticles containing farnesol inhibit yeast-hyphae transition at concentrations greater than or equal to 240 uM. The antifungal activity in vivo was assessed in the murine model for VVC. Although there is no statistically significant difference between treatments in relation to the counting of colony forming units (CFU), the results suggest that chitosan nanoparticles containing miconazole and farnesol were effective for inhibiting fungal proliferation and chitosan nanoparticles containing farnesol were capable of decreasing the pathogenicity of infection demonstrated by the absence of inflammation. / A candidíase vulvovaginal (CVV) é causada principalmente pelo fungo oportunista Candida albicans. A transição de leveduras para hifas é considerada como um dos principais fatores de virulência deste patógeno. O aumento da incidência de CVV tem destacado a importância do desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. O objetivo do presente estudo foi o desenvolvimento de um sistema nanoestruturado muco-adesivo composto por miconazol e farnesol em quitosana para o tratamento de CVV. O fármaco miconazol apresentou eficácia antifúngica com concentração inibitória mínima (CIM) de 1 μg/mL. A molécula quorum sensing farnesol foi capaz de inibir a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 300 μM. Quando avaliados em conjunto, o farnesol não apresentou nenhum efeito em relação à CIM obtida para o miconazol. Nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol foram preparadas por gelificação iônica e apresentaram características favoráveis para utilização em mucosas, como diâmetro menor que 300 nanômetros (nm), índice de polidispersão (PDI) menor que 0.3, potencial zeta positivo e pH ácido. A eficiência de encapsulação (EE) das nanopartículas foram em média 81,1% para miconazol, 31,9% para o farnesol e 32,7% e 70,0% para o miconazol e farnesol quando co-encapsulados, respectivamente. As nanopartículas demonstraram instabilidade quanto ao diâmetro e PDI, porém foram estáveis em relação à EE. Quanto à toxicidade em culturas de fibroblastos (Balb/c 3T3) foram consideradas não tóxicas. As nanopartículas demonstraram ação antifúngica contra a cepa de C. albicans utilizada, apresentando CIM de 2,5 μg/mL e 2 μg/mL para nanopartículas com miconazol e miconazol/farnesol, respectivamente. Nanopartículas contendo farnesol inibiram a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 240 μM. A ação antifúngica in vivo foi avaliada no modelo murino para CVV. Apesar de não existir diferença estatisticamente significativa entre os tratamentos em relação à contagem de unidades formadoras de colônias (UFC), os resultados sugerem que nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol são eficazes, pois inibem a proliferação fúngica e que nanopartículas de quitosana contendo farnesol são capazes de diminuir a patogenicidade da infecção, demonstrada pela ausência de inflamação.

Espécies de Candida com relevância clínica diferem entre si com relação a aspectos como prevalência clínica, virulência e perfil de resistência a antifúngicos. Formulamos a hipótese de que estas diferenças podem ocorrer devidas em parte à capacidade relativa distinta destas espécies de resistirem ao estresse oxidativo que é imposto por fagócitos durante a patogênese da candidíase. Nesse contexto, poucos são os estudos de resposta ao estresse oxidativo (REO) em espécies que não Candida albicans. Assim, esse trabalho teve por objetivo investigar a REO in vitro em isolados de referência e clínicos de 8 espécies de Candida – C. albicans, C. dubliniensis, C. famata, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei, C. parapsilosis e C. tropicalis. Para tal, foi avaliado o grau de resistência a oxidantes, a capacidade de adaptação, a indução de enzimas antioxidantes, os níveis de glutationa total, a capacidade antioxidante total e a indução de dano oxidativo a proteínas e lipídios através de metodologias atuais. C. albicans, C. glabrata e C. krusei apresentaram maior resistência ao estresse oxidativo nas condições testadas, C. parapsilosis e C. tropicalis resistência média e C. dubliniensis, C. famata e C. guilliermondii foram mais sensíveis. Todas as espécies demonstraram capacidade adaptativa e indução de enzimas antioxidantes. Os níveis de glutationa total mostraram redução intracelular frente ao estresse oxidativo. A capacidade antioxidante total foi variável entre espécies. Outros testes (efeito de meio condicionado e de moléculas quorum-sensing – tirosol e farnesol - no crescimento, capacidade de proteção cruzada e oxidante total) foram empregados sem sucesso. Ainda, verificamos em isolados de C. albicans a relação entre capacidade de resistirem a oxidantes e produção de fosfolipase e protease. Os resultados indicaram ausência de correlação entre estes fatores. Espécies com sistema antioxidante mais frágil são também as que ocorrem com menor frequência em infecções sistêmicas ou resistem menos ao efeito dos antifúngicos. É interessante investigar se C. albicans, C. glabrata e C. krusei tiram vantagem efetiva de um sistema antioxidante mais potente para causarem candidíase disseminada ou resistirem a drogas. A caracterização detalhada da REO pode proporcionar a descoberta de novos alvos para a ação de antifúngicos no futuro. / Candida species with clinical relevance differ in therms of clinical prevalence, virulence and profile of resistance to antifungal agents. We hypothesized that these differences may be due in part to the relative ability of these species to resist oxidative stress that is imposed by phagocytes in the pathogenesis of candidiasis. In this context, there are few studies of the oxidative stress response (OSR) in different species than C. albicans. Thus, this study aimed to investigate the in vitro OSR considering isolates of eight Candida species – C. albicans, C. dubliniensis, C. famata, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei, C. parapsilosis and C. tropicalis. To this purpose, we evaluated the resistance degree to oxidants, the adaptability, the induction of antioxidant enzymes, levels of total glutathione, total antioxidant status and induction of oxidative damage to proteins and lipids by current methodologies. C. albicans, C. glabrata and C. krusei showed greater resistance to oxidative stress in the conditions tested; C. parapsilosis and C. tropicalis showed an intermediate resistance and C. dubliniensis, C. famata and C. guilliermondii were more sensitive to oxidative stress. All species showed adaptive capacity and induction of antioxidant enzymes. The levels of total glutathione showed intracellular reduction against oxidative stress. The total antioxidant capacity was variable between species. Other tests (effect of conditioned medium and quorum-sensing molecules - farnesol and tirosol – on growth, ability of cross-protection and total oxidant status) were tested without success. Still, we found in isolates of C. albicans the relationship between ability to resist oxidation and production of phospholipase and protease. The results indicated no correlation between these factors. Species with weaker antioxidant system are also those that occur less frequently in systemic infections or are less resistant to the effect of antifungal agents. It is interesting to investigate if C. albicans, C. glabrata and C. krusei take effective advantage of a more powerful antioxidant system to cause disseminated candidiasis or resist drugs. The detailed characterization of the OSR can provide the discovery of new targets for the action of antifungals in the future.

A candidíase é a mais freqüente infecção fúngica oportunista, causada por leveduras do gênero Candida, de ocorrência comum na cavidade bucal. O aumento da incidência está relacionado, em grande parte, ao surgimento das terapias e patologias imunossupressoras, embora ela possa ocorrer em indivíduos considerados saudáveis. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a microbiota leveduriforme de pacientes com lesão bucal suspeita de candidíase e compará-la com a de indivíduos saudáveis através da quantificação, produção de enzimas fosfolipase, proteinase e determinação da CIM dos antifúngicos: anfotericina B, itraconazol e fluconazol pelo método de microdiluição em caldo. As leveduras foram isoladas a partir de amostras de saliva não estimulada no meio CHROMagar® Candida, que permitiu a observação de colonização mista e uma identificação presuntiva. Posteriormente os isolados foram identificados pela metodologia clássica, através das provas: formação de tubo germinativo em soro humano, estudo da micromorfologia, crescimento a 37°C e 42°C, provas de assimilação e fermentação de carboidratos. Das 100 amostras de saliva dos pacientes com lesão, 70 apresentaram crescimento de leveduras e foram identificadas 63 C. albicans e 16 C. tropicalis. Entre as 50 amostras de salivas do grupo controle, 16 apresentaram crescimento e foram identificadas 14 C. albicans e 3 C. tropicalis. Quanto à capacidade de síntese das exoenzimas observou-se que 100% das C. albicans de ambos os grupos avaliados produziram as enzimas fosfolipase e proteinase em diferentes níveis de atividade. Os isolados de C. tropicalis não apresentaram produção da fosfolipase, com relação à proteinase 43,8% dos isolados de pacientes com lesão bucal foram positivos. Em relação aos testes de sensibilidade, a faixa da CIM para anfotericina B foi de 0,125 ? 4µg/mL para os isolados de C. albicans e de 2 ? 4 µg/mL para os de C. tropicalis, com o itraconazol o intervalo da CIM foi de 0,03 ? 16µg/mL para as duas espécies e para o fluconazol a faixa da CIM foi de 0,125 - ?64µg/mL para os isolados de C. albicans e de 0,25 - ?64µg/mL para os de C. tropicalis. Com base nos resultados obtidos conclui-se que: a análise de saliva é sensível para detecção de leveduras tanto em pacientes com sinais clínicos de candidíase quanto em indivíduos saudáveis portadores da levedura; C. albicans foi à espécie mais isolada em ambos os grupos; todas os isolados de C. albicans foram produtores das enzimas fosfolipase e proteinase; nenhum isolado de C. tropicalis apresentou atividade da enzima fosfolipase. A maioria dos isolados de C. albicans e C. tropicalis foram sensíveis in vitro aos antifúngicos testados / Candidiasis is the most frequent oportunistic fungal infection. It is caused by Candida yeasts, commonly seen in the oral cavity. Newer therapies and immunosupressive pathologies are related to the increase of oral candidiasis incidence, although it may occur in healthy subjects. Therefore, the aim of this work was to evaluate yeasts frequency in the oral cavity from patients with clinical signs of oral candidiasis and compare it with frequency observed in healthy subjects through quantification, phospholipase and proteinase activity tests and antifungal susceptibility (amphotericin B, itraconazole, fluconazole) by broth microdilution test. The yeasts were isolated from unstimulated whole saliva samples in CHROMagar® Candida medium, which allowed association between two or more species observation and presumptive identification. Latter, strains identification were confirmed by classical methodology. Of 100 candidiasis patients samples, yeast growth was observed in 70 samples and 63 C. albicans and 16 C. tropicalis strains were identified. Of 50 healthy subjects samples, yeast growth was observed in 16 samples and 14 C. albicans e 3 C. tropicalis strains were identified. Differential activity of phospholipase and proteinase enzymes was detected in 100% C. albicans strains in both groups. Phospholipase activity was not detected in C. tropicalis strains, and proteinase activity was detected in 43,8% strains from oral candidiasis group. Susceptibility tests showed amphotericin B MIC range from 0,125 ? 4 µg/mL for C. albicans strains and 2 ? 4 µg/mL for C. tropicalis strains; itraconazole MIC range from 0,03 ? 16 µg/mL for both species; fluconazole MIC range from 0,125 - ? 64 µg/mL for C. albicans strains and 0,25 - ? 64 µg/mL for C. tropicalis strains. In conclusion, our study demonstrates that saliva analysis is sensitive to detect yeasts from patients with clinical signs of oral candidiasis and from yeasts carriers; C. albicans was prevalent in both groups; all C. albicans strains showed phospholipase and proteinase activity; None C. tropicalis strains showed phospholipase activity. The majority of C. albicans and C. tropicalis strains were inhibited in vitro by antifungals evaluated

Submitted by Elizete da Silva Dias (elizetedias@ufam.edu.br) on 2017-06-22T15:28:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE - ANDREIA FERREIRA DE SOUZA.pdf: 2861845 bytes, checksum: fa54456b6bc990f480efa541a3b7cdfe (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-06-23T14:30:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE - ANDREIA FERREIRA DE SOUZA.pdf: 2861845 bytes, checksum: fa54456b6bc990f480efa541a3b7cdfe (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-06-23T14:32:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE - ANDREIA FERREIRA DE SOUZA.pdf: 2861845 bytes, checksum: fa54456b6bc990f480efa541a3b7cdfe (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-23T14:32:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) TESE - ANDREIA FERREIRA DE SOUZA.pdf: 2861845 bytes, checksum: fa54456b6bc990f480efa541a3b7cdfe (MD5) Previous issue date: 2016-11-18 / Item withdrawn by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-07-14T13:45:46Z Item was in collections: Doutorado (ID: 91) No. of bitstreams: 4 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf.txt: 65 bytes, checksum: 84fdbdbfeca4f7e4764b2f14d97a84ad (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf.jpg: 2921 bytes, checksum: b6f7c946b94a5bc7f226fe694f68a640 (MD5) / The C. albicans is the most frequently isolated fungus in humans healthy, being considered the main opportunistic pathogenic species, However, in recent decades, it has been observed a significant increase of other non-albicans species, involved both in colonization as in human infectious processes. The clinical manifestation but prevalent, This fungus, the woman is Vulvovaginal candidiasis (VVC). This study had the objective of making the molecular characterisation and polyphasic taxonomy of Candida species isolated from vaginal exsudate and describe their susceptibility profiles antifungals and extracts of Vatairea guianensis. The identification was performed by methods Classics (Microcultive, CHROMagar, Auxonograme), MALDI-TOF, multiplex PCR and molecular. In the analysis of genetic variability was made to AFLP.The colonization of Candida sp. in the vagina was statistically significant in patients aged 35 years or more, which made use of underwear fair and/or synthetic, in use of antibiotic therapy and who had CVV recurrent episodes. Of the 202 samples 37.1% (N = 75) was possible isolating yeasts Candida sp. C. albicans was the most isolated species (64%), followed by C. parapsilosis (20%), C. glabrata (5.3%), C. tropicallis (4%), C. haemolinus (4%) and C. krusei (1.3%) and C. lusitaniae (1.3%). Combinations of methods are required phenotypic and also carrying out additional evidence to the identification of Candida spp. molecular methods available confirm that the use phenotypic methods for clinical diagnosis must be cautious, have low accuracy in determination of Candida species not albicans and the identification of new species. The MALDI-TOF proved as an excellent tool for species identification of Candida sp, as it associates simple technique, procedures partially automated and mainly the speed of the result Microbiology, the limitation of this method is in the absence of a complete database. C. haemulonii, an emerging and rare species, was first identified in isolates of vaginal exudate asymptomatic women in Manaus. The vast majority of isolates of Candida sp., vaginal exudate, presented resistance to antifungals fluconazole, itraconazole, ketoconazole and Nystatin. The extracts of the seeds of V. guianensis presented only fungistatica activity in 04 isolates of Candida sp. vaginal exsudate. Thus, this research contributed to the epidemiological knowledge of species of Candida in vaginal flora of assintomaticas patients, and may guide the diagnosis in pathological conditions and being used in monitoring of emerging infections and drug resistant, because the variation of species according to geographical location should be taken into account between the epidemiological factors of CVV. / A C. albicans é o fungo mais frequentemente isolado em humanos sadios, sendo considerada a principal espécie patogênica oportunista, entretanto, nas últimas décadas, tem sido observado um significativo aumento de outras espécies não-albicans, implicadas tanto na colonização como em processos infecciosos humanos. A manifestação clínica mais prevalente, deste fungo, na mulher é a Candidíase Vulvovaginal (CVV). OBJETIVOː realizar a caracterização molecular e a taxonomia polifásica de espécies de Candida oriundas de isolados de exsudato vaginal e descrever seus perfis de susceptibilidade a antifúngicos e aos extratos de Vatairea guianensis. METODOLOGIAː A identificação foi realizada por métodos clássicos (Microcultivo, CHROMagar, Auxonograma), MALDI-TOF, multiplex PCR e a molecular. A variabilidade fenotipica foi feita por AFLP, e os testes de susceptibilidade em placa de Elisa por microdiluição com os antifungicos e os extratos de Vatairea guianensis. RESULTADOː A colonização de Candida sp. na vagina foi estatisticamente significativa em pacientes com idade igual ou maior que 35 anos, que faziam uso de roupas íntimas justas e/ou sintéticas, em uso de antibioticoterapia e que tinham episodios CVV recorrente. Das 202 amostras 37,1 % (N=75) foi possível isolar leveduras Candida sp. Na analise da variabilidade genética foi feito a AFLP. Candida albicans foi a espécie mais isolada (64 %), seguida por C. parapsilosis (20 %), C. glabrata (5,3 %), C. tropicallis (4 %), C. haemolinus (4%) e C. krusei (1,3 %) e C. lusitaniae (1,3 %). São necessárias combinações entre métodos fenotípicos e também a realização de provas complementares para a identificação de Candida spp. Os métodos moleculares disponíveis confirmam que o uso de métodos fenotípicos para o diagnóstico clínico deve ser cauteloso, pois possuem baixa acurácia na determinação de espécies Candida não albicans e na identificação de novas espécies. CONCLUSÃOː O MALDI-TOF se mostrou como uma excelente ferramenta para a identificação de espécies de Candida sp, pois associa simplicidade da técnica, procedimentos parcialmente automatizados e principalmente a rapidez do resultado microbiológico, a limitação deste método esta na ausência de um completo banco de dados. C. haemulonii, uma espécie emergente e rara, foi pela primeira vez identificada em isolados do exsudato vaginal de mulheres assintomáticas em Manaus. A grande maioria dos isolados de Candida sp., do exsudato vaginal, apresentou resistência aos antifúngicos fluconazol, itraconazol, cetoconazol e a nistatina. Os extratos das sementes de Vaitarea guianensis apresentou apenas atividade fungistatica em 04 isolados de Candida sp. do exsudato vaginal. Assim, esta pesquisa contribuiu para o conhecimento epidemiológico das espécies de Candida na flora vaginal de pacientes assintomaticas, podendo orientar o diagnóstico em condições patológicas e sendo utilizado na monitorização de infecções emergentes e resistentes às drogas, pois a variação das espécies de acordo com a localização geográfica deve ser levada em conta entre os fatores epidemiológicos de CVV.

O gênero Candida abriga várias espécies de importância médica e embora algumas venham adquirindo interesse crescente, Candida albicans continua sendo a mais importante e responsável pelo maior número de infecções. Encontrada na microbiota de seres humanos saudáveis, é responsável pela infecção oral fúngica mais comum, em relação bastante estreita com a estomatite sob prótese (EP). Esta é um processo inflamatório da mucosa oral, comum em portadores de próteses dentárias, parciais ou totais subjacentes a uma prótese, onde também podem estar outros microrganismos, interagindo com diversos fatores, ligados ao hospedeiro e aos próprios microrganismos presentes no biofilme da superfície interna da prótese. A maioria dos casos é assintomática e alguns pacientes relatam dor, prurido ou sensação de ardência. O diagnóstico é clínico, complementado por exames tais como o citológico e o micológico direto. O tratamento é quase sempre empírico, sem a clara certeza se o indivíduo é portador da levedura e se outras espécies, estão envolvidas. Os meios cromogênicos possibilitaram avanço no diagnóstico das candidíases orais. Sua utilização facilita a identificação destas leveduras, com resultados em menor tempo que os dos métodos já padronizados para outras espécies de Candida. O CHROMagar Candida (CC) é a referência, fornecendo resultados em 48 horas após semeadura direta do material coletado. O meio denominado Candida Chromogenic Agar (CCA), foi recentemente lançado em nosso mercado e tendo em vista o seu baixo custo parece ser mais uma ferramenta para o diagnóstico da candidíase, embora não haja, ainda, literatura disponível sobre o seu emprego. O objetivo do presente trabalho, foi comparar esse novo meio ao CHROMagar Candida, quanto à sensibilidade e especificidade no isolamento de espécies do gênero Candida da mucosa oral de portadores de próteses totais superiores, com ou sem sintomas de EP. Participaram do estudo, 61 pacientes, de ambos os gêneros, portadores de próteses totais (45,9%) ou uni maxilares superiores (54,1%). Dentre as 61 amostras coletadas, 45 (73,77%) foram positivas para leveduras em CC, sendo C. Albicans (38 amostras, 24 únicas e e 14 (36,84%) mistas. Destas, 8 de C. Albicans + C. Tropicalis (21,05%); 3 de C. Albicans + C. glabrata (7,89%); 3 de C. albicans + C. tropicalis + C. glabrata (7,89%). Outras espécies presentes foram, 15 C. tropicalis (33,33%). Duas únicas (13,33%), duas mistas, C. tropicalis + C. glabrata (13,33%) e uma C. tropicalis + C. parapsilosis (6,66%). Em CCA, das 45 amostras, 39 foram positivas (86,6%). C. albicans, foi a mais frequente, com 33 isolados (84,6%), sendo, 25 únicas (75,75%) e 8 mistas (24,25%). Assim, C. albicans + C. tropicalis (5 12,82%); C. albicans + C. glabrata (2 5,13%); C. albicans + C. tropicalis + C. glabrata (uma 2,56%). Outras espécies isoladas foram: C. tropicalis (3 7,7%), e C. glabrata, C. krusei e C. parapsilosis (uma de cada 2,56%). Foi possível concluir que o CHROMagar Candida foi mais sensível (100% x 65%) e mais específico para albicans (84,4% x 73,3%); tropicalis (33,3% x 20,0%) e glabrata (17,7 % x 8,8%). Ambos apresentaram a mesma especificidade (2,2%), para krusei e parapsilosis. / The genus Candida includes several species of medical importance and although some will acquire increasing interest, Candida albicans remains the most important and responsible for more infections. Found in the microbiota of healthy humans, is responsible for the most common oral fungal infection in very close relation with denture stomatitis (EP). This is a frequent inflammation of the oral mucosa in complete or partial dentures wearers, where may also be present other microorganisms, interacting with several factors linked to the host and the microorganisms present themselves, in the inner surface of the biofilm of the prostheses. Most cases are asymptomatic and some patients report pain, itching or burning sensation. The diagnosis is clinical, supplemented by tests such as cytological and mycological. Treatment is often empiric, with no clear certainty whether the individual is only a carrier of yeast and if other species are involved. The chromogenic media enabled advances in the diagnosis of oral candidiasis. Its use facilitates the identification of these yeasts, resulting in less time than those of already standardized methods for other species of Candida. The CHROMagar Candida (CC) is the reference, providing results in 48 hours from the material collection. The medium called Chromogenic Candida Agar (CCA) was recently launched in our market and in view of its low cost seems to be one more tool for the diagnosis of candidiasis, although there is a lack of literature available on it. The objective of this study was to compare this new medium to CHROMagar Candida for sensitivity and specificity in the isolation of species of genus Candida from the oral mucosa of patients with upper dentures with or without symptoms of EP. Sixty one patients of both genders were recruited wearing complete dentures (45.9%) or uni upper jaw (54.1%) prostheses. Among the 61 samples, 45 (73.77%) were positive for yeasts in CC, and C. albicans (38 samples, 24 unique and 14 (36.84%) mixed. From these, 8 of C. albicans + C. tropicalis (21.05%), 3 of C. albicans + C. glabrata (7.89%), 3 of C. tropicalis + C. albicans + C. glabrata (7.89%). Other species were present, being 15 C. tropicalis (33.33%). Two unique isolates (13.33%), two mixed: C. tropicalis + C. glabrata (13.33%) and C. tropicalis + C. parapsilosis (6.66%). In CCA, from the 45 samples, 39 were positive (86.6%). C. albicans was the most frequent, with 33 isolates (84.6%), being unique in 25 (75.75%) and eight in mixed cultures (24.25%). Thus, C. albicans + C. tropicalis (5 - 12.82%); C. albicans + C. glabrata (2 - 5.13%), C. tropicalis + C. albicans + C. glabrata (1- 2.56%). Other species isolated were C. tropicalis (3 7.7%) and C. glabrata, C. krusei and C. parapsilosis (one of each - 2.56%). It was possible to conclude that CHROMagar Candida was more sensitive (100% vs. 65%) and more specific for C. albicans (84.4% vs. 73.3%), C. tropicalis (33.3% vs. 20.0%) and C. glabrata (17.7% vs. 8.8%). Both media showed the same specificity (2.2%), for C. krusei and C. parapsilosis.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Maria Soraya Pereira Franco Adriano.pdf: 1150244 bytes, checksum: 7217561aaba879ad40863f564c7cc8df (MD5) Previous issue date: 2012-07-30 / Oral manifestations may represent the first clinical signs of HIV infection, being indicators of immunological compromise and of the disease progression. Thus, to investigate these expressions is crucial for the understanding of the epidemiology of AIDS. In this study, it was examined the prevalence of oral manifestations reported in patients with AIDS in the State of Paraíba and its associated factors, according to the Information System for Notifiable Diseases / SINAN, from 2000 to 2010. A quantitative cross-sectional epidemiological study was developed, using secondary data collected from the junction of SINAN W and Net from DST/AIDS program of Paraíba, in patients over 13 years old, who had a complete record of their case evolution. The sample census considered the inclusion criteria previously reported. Statistical analysis covered descriptive and analytical techniques, adopting a confidence interval of 95% and Pearson s chi-squared and prevalence ratio tests . The project was approved by the Ethics Committee of the State University of Paraiba, under CAAE 0404.0.133.000-10.For a total of 2.944 reported AIDS cases, occurred the record of 1009 oral manifestations for this disease, being 76.3% of Oral Candidiasis or Hairy Leukoplakia, 20% of Herpes Zoster and 3.7% of Kaposi's sarcoma. It was demonstrated a significant association between Oral Candidiasis or Hairy Leukoplakia and the variables years of research, macro-regions, years of education and evolution of cases, and it was found in the Herpes Zoster association between the variables years of research, age group and cases development (p <0.05 ). The largest number of oral manifestations identified for AIDS was established in the state capital, João Pessoa. According to the obtained results, the notification of oral manifestations of the disease under study has occurred in less than a half of the confirmed cases. / As manifestações orais podem representar os primeiros sinais clínicos da infecção por HIV, sendo indicadoras de comprometimento imunológico e do tempo de evolução da doença. Assim, investigar essas expressões é fundamental para o entendimento da epidemiologia da AIDS. Neste trabalho verificou-se a prevalência de manifestações orais notificadas em portadores de Aids no Estado da Paraíba e seus fatores associados, de acordo com o Sistema de Informação de Agravos de Notificação / SINAN, durante o período de 2000 a 2010. Desenvolveu-se um estudo epidemiológico transversal e quantitativo, utilizando dados secundários coletados a partir da junção do SINAN W e Net do programa do DST/AIDS da Paraíba, em pacientes maiores de 13 anos, que apresentavam o registro completo da evolução do caso. A amostragem censitária considerou os critérios de inclusão anteriormente relatados. O tratamento estatístico abrangeu técnicas descritivas e analíticas, adotando-se um intervalo de confiança de 95% e os testes Qui-quadrado de Person e Razão de Prevalência. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Estadual da Paraíba sob CAAE 0404.0.133.000-10. Para um total de 2944 casos notificados de AIDS ocorreu o registro de 1009 manifestações orais para essa doença, sendo 76,3% de Candidose oral ou Leucoplasia Pilosa, 20% de Herpes Zoster e 3,7% de Sarcoma de Kaposi. Demonstrou-se associação significativa entre a Candidose oral ou Leucoplasia Pilosa e as variáveis ano de investigação, macrorregião,grau de escolaridade e evolução dos casos e para o Herpes Zoster encontrou-se associação entre as variáveis ano de investigação, faixa etária e evolução dos casos (p < 0,05). O maior número de manifestações orais identificadas para a Aids ficou estabelecido na capital do Estado, a cidade de João Pessoa. De acordo com os resultados obtidos a notificação de manifestações orais para a doença em questão ocorreu em menos da metade dos casos confirmados da doença.

A candidíase vaginal (CV) é uma doença causada por fungos do gênero Candida spp. que acomete milhares de mulheres no mundo. Estima-se que 75% das mulheres sofrerão CV pelo menos uma vez durante a vida fértil, 40 a 50% terão o segundo episódio e 5 a 8% sofrerão a forma recorrente, caracterizada pela ocorrência de quatro ou mais episódios durante um ano. O tratamento ainda permanece um desafio para as candidíases complicadas. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica que utiliza substâncias fotossensibilizadoras (FS) e uma fonte de luz, que juntas, produzem espécies reativas de oxigênio, tóxicas para micro-organismos e inofensivas para a célula animal hospedeira. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos antifúngicos e anti-inflamatórios da TFD mediada por azul de metileno (AM) e laser de emissao vermelha (LEV) no tratamento da CV em modelo animal. Fêmeas de camundongos BALB/c, com 6 a 10 semanas foram estrogenizadas e, 72h após, receberam via intravaginal 20&mu;L de suspensão contendo 107 UFC/mL de C. albicans ATCC 90028. Cinco dias após, a TFD foi aplicada na vagina das fêmeas, utilizando AM 1000&mu;M e laser (100mW, 660nm, energia de 36J por 6 min ou duas aplicações de 18J por 3min, com intervalo de 24h entre sessões). Após 0, 24 e 96h foram feitas lavagens vaginais para recuperação fúngica, cultivo microbiológico, eutanásia para remoção das vaginas e estudo histológico. Lâminas coradas por hematoxilina e eosina foram utilizadas para contagem da área de células inflamatórias (ACI), utilizando o programa ImageJ. Os resultados mostraram que TFD in vivo reduziu a carga fúngica em aproximadamente 1,6 log UFC/mL e, quando aplicada em duas sessões de 18J por 3min, diminuiu a ACI. A TFD mediada por LEV e AM 1000&mu;M mostra-se como alternativa promissora para o desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para vaginites fúngicas. / Vaginal candidiasis (VC) is a disease caused by fungi of the genus Candida spp. that affects thousands of women worldwide. It is estimated that 75% of women in childbearing age will have VC at least once, 40 to 50% will have a second episode and 5 to 8 % will suffer recurrent form, characterized by the occurrence of four or more episodes during one year. Treatment remains a challenge for complicated candidiasis. Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic modality that uses photosensitizing (FS) substances and a light source, which together produce reactive oxygen species, toxic to microorganisms and harmless to host animal cell. The aim of this study was to evaluate antifungal and anti - inflammatory effects of PDT mediated by methylene blue (MB) and red laser (RL) in the treatment of CV in an animal model. Female BALB/c mice 6 to 10 weeks were estrous and 72h after received intravaginally 20&mu;L of suspension containing 107 CFU/mL of C. albicans ATCC 90028. Five days after, PDT was applied in the vagina of females using MB 1000&mu;M and laser (100mW, 660nm, 36J for 6 min or two applications of 18J for 3 min, with an interval of 24h between sessions). Vaginal washes for fungal recovery and microbiological culture, and euthanasia for removal of vaginas and histological study were made after 0, 24 and 96h. Glass slides stained by hematoxylin and eosin were used for counting the area of inflammatory cells (AIC) using ImageJ software. PDT in vivo reduced the fungal burden in approximately 1.6 log CFU/mL, and, when applied in two sessions with 18J for 3min, decreased the AIC. PDT mediated by RL and MB 1000&mu;M shown as a promising alternative for the development of new therapeutic modalities for yeast vaginitis.