Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-24T18:40:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-24T18:40:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-24T18:40:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-01-05 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Malaria is an infectious and potentially fatal disease that has had a major impact on mankind's historical origins and perpetuates it to the present day. Currently the parasite presents resistance to available drugs, making it urgent to search for and discover new antimalarial molecules. Although it is a major challenge for researchers, the study of medicinal plants is a promising strategy because it provides molecules with pharmacological antimalarial potential, such as 6α-acetoxyglycine (6α-ACG) and diacetylated 4-nerolidylcatechol (4-NCAC2 ), however, first pass metabolism reduces the in vivo antimalarial activity of these drugs. In view of the above, in an attempt to increase the antimalarial activity of the substances, especially in the antimalarial model in vivo, this study aimed to evaluate the synergistic activity in vitro and in vivo of natural products of the Amazonian against Plasmodium spp. For this, the in vitro anti-plasmodial activities, in vitro synergistic and antiplasmodial in vivo were evaluated using 6α-ACG (isolated from Carapa guianensis), its semi-synthetic derivative 6α-hydroxy-deacetylenedunine, the semi-synthetic derivative 4-NCAC2 (isolated Piper peltata) and dilapiol (DIL, isolated from Piper aduncum). The standard strains of P. falciparum K1 were used for the in vitro test, in which the microtest method proposed by Trager & Jensen (1976) was used. The in vitro synergism test culture was preceded by the Trager & Jensen method, however, the proportions of the association of the compounds as well as the classification followed the method described by Odds (2003). In the in vivo tests, strains of P. berghei NK65 were used, using the parasitemia suppression method of Peters (1965). It was possible to observe that DIL does not exert extensive modulatory activity in vitro, but when associated with 6α-ACT or 4-NCAC2 to DIL, the substances have a better IC50. Both the association between 4-NCAC2 and 6α-ACG and 6α-HIDROXI and 6α-ACG were classified as indifferent, that is, they did not present synergistic activity. In this work, as with others, DIL was able to increase inhibition levels of P. berghei parasitemia in association with a limonoid. / A malária é uma doença infeccionsa e potencialmente fatal, causou grande impacto nos primórdios históricos da humanidade e perpetua até os dias atuais. Atualmente o parasita apresenta resistência aos fármacos disponíveis, tornando urgente a busca e descoberta de novas moléculas antimaláricas. Apesar de ser um grande desafio para pesquisadores, o estudo de plantas medicinais é uma estratégia promissora, pois fornece moléculas com potencial farmacológico antimalárico, como por exemplo, as substâncias 6α-acetoxigedunina (6α-ACG) e 4-nerolidilcatecol diacetilado (4-NCAC2), contudo, o metabolismo de primeira passagem reduz a atividade antimalárica in vivo dessas drogas. Diante do exposto, como tentativa de aumentar a atividade antimalárica das substâncias, em especial no modelo antimalárico in vivo, este estudo teve como objetivo avaliar a atividade sinérgica in vitro e in vivo de produtos naturais da Amazônia contra Plasmodium spp. Para isso, foram avaliadas as atividades antiplasmodial in vitro, sinérgica in vitro e antiplasmodial in vivo utilizando 6α-ACG (isolada de Carapa guianensis), seu derivado semi-sintético 6α-hidroxi-deacetilgedunina, o derivado semi-sintético 4-NCAC2 (isolado de Piper peltata) e dilapiol (DIL, isolado de Piper aduncum). Para o teste in vitro foram utilizadas as cepas padronizadas de P. falciparum K1, na qual foi utilizado método do microteste proposto por Trager & Jensen (1976). O cultivo do teste de sinergismo in vitro foi precedido pelo método de Trager & Jensen, porém, as proporções das associações dos compostos, bem como a classificação seguiram o método descrito por Odds (2003). Nos testes in vivo, foram utilizadas as cepas de P. berghei NK65, utilizando o método supressão da parasitemia de Peters (1965). Foi possível observar que o DIL não exerce atividade amplasmodial in vitro, mas quando associado 6α-ACT ou 4-NCAC2 ao DIL, as substâncias apresentam um melhor IC50. Tanto a associação entre 4-NCAC2 e 6α-ACG quanto 6α-HIDROXI e 6α-ACG foram classificadas como indiferente, ou seja, não apresentam atividade sinérgica. Neste trabalho, assim com em outros, DIL foi capaz de aumentar os níveis de inibição da parasitemia por P. berghei em associação com um limonóide.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-11-10T19:40:46Z No. of bitstreams: 1 Publicação Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-11-10T19:45:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Publicação Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-11-10T19:47:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Publicação Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-10T19:49:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Publicação Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Surfactants play an important hole in pharmaceutical, food and oil industries. Synthetic surfactants have been presenting problems related to their toxicity and recalcitrance. This situation increases the interest on natural surfactants produced by microorganisms (biosurfactants). Just a few studies were conducted investigating the production of these substances by fungi isolated from the Amazon region. The aim of this study was investigate the production of biosurfactants by fungi isolated from soil in the Amazon forest. The isolation of micro-organisms of the soil samples was performed by the method of successive dilutions. The identification of the isolates was performed by investigating the micromorphological characteristics (microculture technique). For selection of biosurfactants producers, the strains were submitted submerged bioprocess and the filtrated from the cultures were subjected to investigation by techniques “collapse of the drop” and “emulsification index”. The selected isolate was subjected to optimize the production of the biosurfactant by a factorial design 24 evaluating the influence of the concentration of carbon and nitrogen sources, pH and bioprocess time. Finally, the biosurfactant produced by the selected strain was semi-purified and tested for stability (thermal and ionic). It was isolated 100 fungal strains, 9 of them showed good emulsification index (E24> 40) and Penicillium 8CC2 was screened as the best biosurfactant producer. The investigation of the influence of the bioprocess factors showed that the best condition for obtaining the biosurfactant was by using soybean oil (20 g/L), yeast extract (30 g/L) pH 6.0 and 9 days. The evaluation of thermal (100 ° C for 60 min) and ionic (30% NaCl) stability showed that none of the two factors destabilized emulsified produced. The main contributions that were achieved in the present work was the isolation of biosurfactant producer Penicillium 8CC2 and a preliminary definition of bioprocess parameters. / Os surfactantes são muito demandados pelas indústrias farmacêutica, alimentos e de petróleo. Os surfactantes sintéticos, que são convencionamente utilizados, apresentam problemas relacionados a sua toxicidade e recalcitrância. Isso aumenta o interesse nos surfactantes de origem natural produzidos por micro-organismos (biossurfactantes). Poucos trabalhos foram realizados investigando a produção dessas subtâncias por fungos isolados da Região Amazônica. Diante dessa situação, o presente trabalho investigou a produção de biossurfactantes por fungos isolados de solo da floresta amazônica. Foi realizado o isolamento de micro-organismos de amostras de solo do Bosque do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia pelo método de diluições sucessivas. A identificação dos isolados foi realizada investigando-se as características micromorfológicas das colônias (técnica de microcultivo). Para seleção dos isolados produtores de biossurfactantes, os mesmos foram cultivados em bioprocesso submerso e os filtrados das culturas foram submetidos à investigação pelas técnicas de colapso da gota e índice de emulsificação. O isolado selecionado foi submetido à otimização da produção do biossurfactante por meio de um delineamento fatorial 24 a fim de avaliar a influência da concentração das fontes de carbono e nitrogênio utilizadas, bem como, pH e tempo de tratamento das amostras. Por fim, o biossurfactante produzido pelo isolado selecionado foi semi-purificado e submetido a ensaios de estabilidade térmica e iônica. A partir dos métodos desenvolvidos, foi possível isolar 100 amostras fúngicas, das quais, 9 apresentaram bom índice de emulsificação (E24>40) e Penicillium 8CC2 foi considerado o melhor produtor de biosurfactante. A investigação da influência dos fatores do bioprocesso mostraram que a melhor condição para obtenção de biossurfactante foi utilizando óleo de soja (20 g/L), extrato de levedura (30g/L), pH 6,0 por 9 dias. A avaliação da estabilidade térmica (100°C por 60 min) e iônica (NaCl 30%) demonstrou que nenhum dos dois fatores desestabilizaram o emulsificado produzido. As principais contribuições aqui alcançadas no presente trabalho foram o isolamento da linhagem produtora biossurfactante de Penicillium 8CC2 e a definição preliminar dos parâmetros de bioprocesso

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-06-13T20:35:05Z No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-06-13T20:41:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-06-13T20:41:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-13T20:41:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2015-12-21 / Tafenoquine (TQ) is an 8-aminoquinolone, synthetic analogue of primaquine which is in fase III tests for the treatment of human malaria. It shows better antimalarial activity than primaquine in vitro and is usually well tolerated in patients. There are some methods for TQ quantification in human plasm, but none uses Dispersive-Liquid-Liquid Microextraction (DLLME), an extraction technique that shows as mean advantages: miniaturization, low cost, high efficiency of extraction and pre-concentration and high potential for routine application. The aim of this study was to evaluate the use of DLLME to determine tafenoquine in human plasma. After protein precipitation, TQ was extracted from plasma by DLLME using chloroform and acetonitrile as extraction solvents and dispersants, respectively. The mobile phase consisted of methanol/acetonitrile/sodium acetate (10 mmol L-1, pH 6.7, 25oC)/acetic acid (50:30:20:0.1 v/v/v) and a C18 column (15 x 4.6mm, 5m) was used. The UV detection was performed at 262 nm and 1 mL/min as flow rate. The following factors that influences extraction efficiency were evaluated and optimized: dispersing solvent, solvent extractor, extractor solvent volume, pH and extraction time. During optimization, chloroform and acetonitrile showed higher recovery as an extractor and dispersant solvent, respectively. For evaluation of solvent extractor volume, the best result was obtained by adding 1 mL of a solution containing 30% of solvent extractor. For pH evaluation, greater extraction was observed by adding 100 L of 0.5 mol L- 1 NaOH solution in the sample. Finally, 2 min was the greater recovery extraction time. After optimized conditions, the method recovery was 78,3% and the lower limit of quantification was 50 ng mL-1. This method was considered linear over the range 50-1500 ng mL-1 (r2 = 0,99), with satisfactory accuracy and precision, and also may be useful in routine analyses specially because of the simplicity of this tecnique, rapidity and low use of solvents, presented features by DLLME tecnique / A Tafenoquina (TQ) corresponde a uma 8-aminoquinolina sintética e análoga da primaquina, que está em testes de fase III para o tratamento da malária humana. Apresenta melhor atividade antimalárica em relação ao congênere in vitro e é geralmente bem tolerada nos pacientes. Existem alguns métodos para quantificar a TQ em plasma humano, porém nenhum utiliza a técnica de microextração líquido-líquido dispersiva (DLLME, do inglês Dispersive Liquid- Liquid Microextraction), método que apresenta as seguintes vantagens: miniaturização, baixo custo, alta eficiência de extração e pré-concentração e elevado potencial para aplicação de rotina. O objetivo deste estudo foi avaliar o emprego da microextração líquido-líquido dispersiva para a determinação da tafenoquina em plasma humano. Após a precipitação de proteínas, TQ foi extraída do plasma por DLLME utilizando clorofórmio e acetonitrila como solvente extrator e dispersor, respectivamente. A fase móvel consistiu em metanol/acetonitrila/acetato de sódio (10 mmol L-1, pH 6,7, 25°C)/ácido acético (50:30:20:0,1 v/v/v) em conjunto com uma coluna C18 (15 x 4,6 mm, 5m). O comprimento de onda utilizado foi 262 nm com vazão de 1mL/min. Os seguintes fatores que influenciam a eficiência de extração foram avaliados e otimizados: solvente dispersor, solvente extrator, volume de solvente extrator, pH e tempo de extração. Durante a otimização, clorofórmio e acetonitrila apresentaram maior recuperação como solvente extrator e dispersor, respectivamente. Para volume de solvente extrator, obteve-se melhor resultado adicionando-se 1 mL de uma solução contendo 30% de solvente extrator. Na avaliação do pH, maior extração foi observada adicionando-se 100 L de solução de NaOH 0,5 mol L-1 na amostra. Por fim, o tempo de extração de 2 min foi o que apresentou maior recuperação. Com o método otimizado, a recuperação observada foi 78,3% e o limite inferior de quantificação foi 50 ng mL-1. O método foi linear no intervalo de 50 a 1500 ng mL-1 (r2 = 0,99) com precisão e exatidão satisfatórias e, portanto, pode ser útil em análises de rotina, especialmente pela simplicidade da técnica, rapidez e baixo uso de solvente, características apresentadas pela técnica de DLLME

Submitted by Thais Lopes (th.lopes1598@gmail.com) on 2018-11-05T15:32:25Z No. of bitstreams: 3 Projeto do mestrado- oficial- Angela- 8-2.pdf: 3009718 bytes, checksum: 4c36b53edd59329e99ae4a5a353fe707 (MD5) ficha catalografica- 2.pdf: 5663 bytes, checksum: 4427a31cced13d1e8e4f0e666e047007 (MD5) CAPA -FINAL-OFICIAL-2.pdf: 785430 bytes, checksum: ee2c4bc693305e043627b35c6fd23d60 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Roberto Gomes (mrobertosg@gmail.com) on 2018-11-05T17:57:52Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Projeto do mestrado- oficial- Angela- 8-2.pdf: 3009718 bytes, checksum: 4c36b53edd59329e99ae4a5a353fe707 (MD5) ficha catalografica- 2.pdf: 5663 bytes, checksum: 4427a31cced13d1e8e4f0e666e047007 (MD5) CAPA -FINAL-OFICIAL-2.pdf: 785430 bytes, checksum: ee2c4bc693305e043627b35c6fd23d60 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-11-05T18:36:31Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Projeto do mestrado- oficial- Angela- 8-2.pdf: 3009718 bytes, checksum: 4c36b53edd59329e99ae4a5a353fe707 (MD5) ficha catalografica- 2.pdf: 5663 bytes, checksum: 4427a31cced13d1e8e4f0e666e047007 (MD5) CAPA -FINAL-OFICIAL-2.pdf: 785430 bytes, checksum: ee2c4bc693305e043627b35c6fd23d60 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-05T18:36:31Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Projeto do mestrado- oficial- Angela- 8-2.pdf: 3009718 bytes, checksum: 4c36b53edd59329e99ae4a5a353fe707 (MD5) ficha catalografica- 2.pdf: 5663 bytes, checksum: 4427a31cced13d1e8e4f0e666e047007 (MD5) CAPA -FINAL-OFICIAL-2.pdf: 785430 bytes, checksum: ee2c4bc693305e043627b35c6fd23d60 (MD5) Previous issue date: 2018-08-24 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is considered a neglected disease and a public health problem. Its incidence has increased significantly in Brazil and in all continents. The current treatment is based on Glucantime®, as the first-choice drug, and Pentacarinat® and amphotericin B® as the second-choice drug. These drugs have disadvantages because they are injectable and with a high index of serious side effects, leading researchers to seek new pharmacological alternatives with more effectiveness, low cost and less invasion. Plants are promising sources of bioactive compounds and, through new technologies that allow modifications in the chemical structure of natural molecules, it is possible to synthesize new bioactive derivatives. The present study aimed to evaluate the antileishmanic effects of derivative dillapiol butyl ether (EBD), extracted from the leaves of Piper aduncum. The cytotoxic potential of EBD at serial concentrations of 500 to 15.62 μM in peritoneal macrophages of BALB/c mice for 48 h, and in RAW 264.7 macrophages for 72 h using Alamar Blue® dose-response method was evaluated. The antileishmanial activity of EBD was evidenced by the inhibition of viable forms of L. amazonensis promastigotes incubated at 25 ° C for 24, 48 and 72 hours when tested at 4.5 μM. The potential of EBD was evaluated at the concentration of 4.5 μM against amastigote forms internalized in peritoneal macrophages of mice, which were infected with promastigotes in a ratio of 5:1 and incubated for 24h to 48h. Regarding the selectivity index, this was determined by the effect of EBD on macrophages and promastigotes, according to a mathematical reason. In order to investigate the possible anthelmintic mechanism of EBD in macrophages for 24 and 48 h, a quantification of nitric oxide was performed in peritoneal macrophages and treated at different times. For the determination of reactive oxygen species (ROS), in peritoneal macrophages, a concentration of 4.5 μM was used and incubated together with DCFDA (Dichlorofluorescein Acetate) for 1, 3, 6, and 24 hours. The rate of infection in macrophages was determined by counting 100 infected cells under an optical microscope (1000x). Docking of EBD was carried out using protein of origin of the parasite (Leishmania) available in the database "Protein Data Bank" (PDB). There was no cellular cytotoxicity in peritoneal macrophages and RAW 264.7 with CC50 of 413 μM and 373.5, respectively, when exposed to EBD at the concentration of 500 μM to 15.62 μM for 24, 48 and/or 72 hours. EBD inhibited promastigote forms of L. amazonensis with an efficacy equal to Pentacarinat® for 72 hours with an IC50 of 1.6 μM and 2.2 μM, respectively. The selectivity index (SI) showed that EBD was more specific with a SI of 76.5 μM than Pentacarinat® with 8.7 μM. For the amastigote forms EBD presented an infection rate of 17% and 12%, dilapiol of 24% and 14% and Pentacarinat® of 10% and 9%. Molecular docking analysis of EBD demonstrated a binding energy of -7.8 by the site of action of U53 enzyme better than the parent compound. It is concluded that EBD derivative has antileishmania activity, being a promising dilapiol analogue for future in vivo tests. / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é considerada uma doença negligenciada e um problema de saúde pública. Sua incidência tem aumentado significantemente no Brasil e em todos os continentes. O tratamento atual é a base de Glucantime®, tendo como fármaco de primeira escolha, a Pentacarinat® e anfotericina B® como fármaco de segunda escolha. Esses fármacos apresentam desvantagens por serem injetáveis e possuem elevados efeitos colaterais graves, levando aos pesquisadores buscar novas alternativas farmacológicas mais eficazes, de baixo custo e menos invasivos. As plantas são fontes promissoras de compostos bioativos, e por meio de novas tecnologias que permitam modificações na estrutura química de moléculas naturais pode sintetizar novos derivados bioativos. O presente estudo objetivou avaliar os efeitos antileishmania do derivado éter butil do dilapiol (EBD), extraído das folhas de Piper aduncum. Foi avaliado o potencial citotóxico do EBD nas concentrações seriadas de 500 a 15,62 μM em macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c, por 48h e, em macrófagos RAW 264.7 por 72h, utilizando o método dose-resposta por Alamar Blue®. Para a atividade antileishmania do EBD, a 4,5 μM, evidenciou pela inibição as formas viáveis dos promastigotas de L. amazonensis, incubados a 25 ºC por 24, 48 e 72 horas. O potencial do EBD foi avaliada na concentração de 4,5 μM contra as formas amastigotas interiorizado em macrófagos peritoneais de camundongos, os quais foram infectados com promastigotas numa proporção de 5:1 e incubados por 24h a 48h. Quanto ao índice de seletividade (IS), este foi determinado pelo efeito do EBD sobre os macrófagos e promastigotas, conforme uma razão matemática. Para investigar o possível mecanismo antileshmania do EBD, em macrófagos durante 24 e 48 h, foi realizada uma quantificação de óxido nítrico em macrófagos peritoneais e tratados em tempos diferentes. Para a dosagem das espécies reativas de oxigênio (EROs), em macrófagos peritoneais, utilizou-se uma concentração de 4,5 μM, e foram incubados juntos ao DCFDA (Acetato de Diclorofluoresceína) por 1, 3, 6, e 24 horas. A taxa de infecção em macrófagos determinou-se pela contagem de 100 células infectadas em microscópio óptico (1000x). A docagem do EBD realizou-se utilizando proteína de origem do parasita (Leishmania) disponível no banco de dados “Protein Data Bank” (PDB). Não houve citotoxicidade celular em macrófagos peritoneais e RAW 264.7, com CC50 de 413 μM e 373,5 respectivamente, quando expostos ao EBD na concentração de 500 μM a 15,62 μM por 24, 48 e/ou 72 horas. O EBD, inibiu as formas promastigotas de L. amazonensis com uma eficácia igual a Pentacarinat® por 72 horas, com uma CI50 de 1,6 μM e 2,2 μM respectivamente. O índice de seletividade (IS), demonstrou que o EBD foi mais especifico, apresentando um IS de 76,5 μM do que a Pentacarinat® com 8,7μM. E, às formas amastigotas, o EBD apresentou uma taxa de infecção de 17% e 12%, dilapiol de 24% e 14% e Pentacarinat® de 10% e 9%. A análise por docagem molecular do EBD, demonstrou uma ligação de energia de -7,8 pelo sítio de ação da enzima U53, melhor do que o composto de origem. Conclui-se que o derivado EBD possui atividade antileishmania, sendo um análogo de dilapiol promissor para futuros testes in vivo.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-20T19:34:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Parcial - Edna Márcia Almeida Costa.pdf: 1366552 bytes, checksum: 4b0f77c3f2cf56b93ede533e73f08d04 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-20T19:35:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Parcial - Edna Márcia Almeida Costa.pdf: 1366552 bytes, checksum: 4b0f77c3f2cf56b93ede533e73f08d04 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-20T19:36:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Parcial - Edna Márcia Almeida Costa.pdf: 1366552 bytes, checksum: 4b0f77c3f2cf56b93ede533e73f08d04 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T19:36:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Parcial - Edna Márcia Almeida Costa.pdf: 1366552 bytes, checksum: 4b0f77c3f2cf56b93ede533e73f08d04 (MD5) Previous issue date: 2016-06-16 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The metabolism and the intracellular transport through cell membranes are among the main procedures governing the kinetics of drugs in physiological compartments. The enzyme CYP3A4, which belongs to the cytochrome P450 enzymatic complex, is responsible for the metabolism of the majority of drugs currently used and is crucial in many drug-drug interactions. In addition to it, the transporter P-glycoprotein membrane, ABC Family, is another factor responsible for interference in the kinetics of drugs. The interaction of these proteins with juices of some fruits from other countries, for example grapefruit, may affect the pharmacokinetics of many drugs. However, to the best of our knowledge, no investigation has been made evolving fruits from the Amazon region. For this study, first, we determined the phytochemical constituents such as total polyphenols and flavonoids juices of Amazon fruits açaí, buriti, camu-camu, cubiu, cupuaçu, jenipapo and taperebá. Has been reported, too, the effect of these juices on activity of P-gP and CYP3A4 which employs human recombinant protein and the cell line MES-SA/DX and liver microsomes. The acai juice showed the highest content of total polyphenols (102.56 ± 7.2 μg EAG/mL) and flavonoids (7.16 ± 0.58 μg EQ/mL). Regarding the inhibitory capacity of recombinant P-gP, cupuaçu juice had the highest rate. CYP3A4 was strongly inhibited by acai juice, buriti, camu-camu, cubiu and tapereba, with residual activity of 0%, while the positive control carambola juice had residual activity of 20%. According, the concentrations tested, the juices of Amazon fruits had the ability to interact mainly with CYP3A4 in vitro. However, further studies should be done to confirm these findings and to clarify the mechanisms involved in this phenomenon. / O metabolismo e o transporte intracelular através das membranas celulares estão entre os principais processos que regem a cinética de fármacos em compartimentos fisiológicos. A enzima CYP3A4, pertencente ao complexo enzimático citocromo P450, é responsável pelo metabolismo da maioria dos medicamentos atualmente comercializados e é determinante em muitas interações medicamentosas. Além dela, o transportador de membrana glicoproteína-P, da família ABC, representa outro fator responsável pela interferência na cinética de fármacos. A interação dessas proteínas com sucos de algumas frutas de outros países, como a toranja, pode afetar a farmacocinética de vários medicamentos. No entanto, frutas nativas da região amazônica ainda não foram alvo desse tipo de investigação. Para este estudo, primeiramente, foram determinados os constituintes fitoquímicos, como polifenóis totais e flavonóides dos sucos das frutas amazônicas açaí, buriti, camu-camu, cubiu, cupuaçu, jenipapo e taperebá. Foi avaliado, também, o efeito desses sucos sobre a atividade da P-gP e CYP3A4 utilizando proteínas humanas recombinantes, bem como a linhagem celular MES-SA/DX e microssomas hepáticos. O suco de açaí apresentou o maior teor de polifenóis totais (102,56 ± 7,2 μg EAG/mL) e flavonoides (7,16 ± 0,58 μg EQ/mL). Com relação à capacidade inibitória da PgP recombinante, o suco de cupuaçu teve a maior taxa. A CYP3A4 foi inibida pelo suco de açaí, buriti, camu-camu, cubiu e taperebá, apresentando atividade residual de 0%, enquanto o padrão suco de carambola teve atividade residual de 20%. Sendo assim, nas concentrações testadas, os sucos das frutas amazônicas tiveram a capacidade de interagir, principalmente, com a CYP3A4 in vitro. No entanto, estudos adicionais devem ser realizados para confirmar estes resultados e esclarecer os mecanismos envolvidos nesse fenômeno.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-02T14:04:30Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-02T14:04:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-02T14:05:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-02T14:05:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2016-07-21 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Early detection of resistance to drugs used to treat tuberculosis (TB) from Mycobacterium tuberculosis isolates, represent a challenge to Tuberculosis Control Program (TCP), because most antimicrobial susceptibility testing needs bacillus isolation in growth medium. Molecular methods have greater possibilities for rapid determination of resistance, they aim to detect mutations in M. tuberculosis genes associated with antimicrobial resistance and have promising results for Isoniazid and Rifampin, which are the major drugs of basic therapeutic regimen for TB treatment. This study evaluated the performance of PCR assay in Real Time (qPCR), directly by sputum samples and cultivation of strains isolated from patients with pulmonary tuberculosis multibacillar from Polyclinic Cardoso Fontes. 171 samples were analyzed by qPCR, targeting genes: katG, inhA and rpoB and the results were compared using the Nitrate Reductase Method (MNR). The resistance frequency for the evaluated samples was 9.36 % for Isoniazid , 5.85% for Rifampin and 4.09 % for both drugs. The katG and rpoB genes were associated with resistance to Isoniazid (p = 0.0001, 95% CI 3.61 to 21.01) and to Rifampin (p = 0.0001, 95% CI 6.34 to 51.05), respectively . The inhA gene was not associated with resistance to Isoniazid. There was acceptable agreement between phenotypic assay, MNR, and qPCR (sputum samples) for mutation detection for katG genes (kappa index: 0.4097) and rpoB (kappa index: 0.4985). The selected genes katG and rpoB were associated with resistance to Isoniazid and Rifampacina respectively, although the qPCR has had underperformed the MNR in this study. However, the molecular tests continue as promising targets for achieving faster results. In this context , optimizations in molecular testing should be performed to allow faster and more reliable diagnostics for resistance to anti -TB drugs and thus provide an appropriate treatment for the patient and reduce the transmission of TB. / A detecção precoce de resistência aos medicamentos utilizados no tratamento da tuberculose (TB), a partir de isolados de Mycobacterium tuberculosis, representa um desafio aos Programas de Controle de Tuberculose (PCT), pois a maioria dos testes de sensibilidade aos antimicrobianos necessita do isolamento do bacilo em meio de cultivo. Os métodos moleculares apresentam maiores possibilidades de determinação rápida da resistência, eles visam detectar mutações em genes de M. tuberculosis associados à resistência aos antimicrobianos e possuem resultados promissores para Isoniazida e Rifampicina, que são os principais fármacos do esquema terapêutico básico de tratamento da TB. O presente estudo avaliou o desempenho do ensaio PCR em Tempo Real (qPCR), diretamente de amostras de escarro e de isolados de cultivo de pacientes com TB pulmonar multibacilares, oriundos da Policlínica Cardoso Fontes. Foram analisadas 171 amostras por qPCR, tendo como alvo os genes: katG, inhA e rpoB e os resultados comparados com o Método de Nitrato Redutase (MNR). A frequência de resistência para as amostras avaliadas foi de 9,36% para Isoniazida, 5,85% para Rifampicina e 4,09% para ambos os fármacos. Os genes katG e rpoB foram associados a resistência a Isoniazida (p=0,0001; IC95% 3,61 a 21,01) e a Rifampicina (p=0,0001; IC95% 6,34 a 51,05), respectivamente. O gene inhA não apresentou associação a resistência a Isoniazida. Houve concordância aceitável entre ensaio fenotípico, MNR, e o qPCR (de amostras de escarro) para a detecção da mutação para os genes katG (Índice kappa: 0,4097) e rpoB (Índice kappa: 0,4985). Os genes selecionados katG e rpoB foram associados a resistência a Isoniazida e Rifampacina respectivamente, embora a qPCR tenha tido um desempenho inferior ao MNR neste estudo. Todavia, os testes moleculares continuam como alvos promissores para obtenção de resultados mais rápidos. Neste contexto, otimizações nos testes moleculares devem ser realizadas, para permitir diagnósticos mais rápidos e confiáveis para resistência aos fármacos anti-TB e, desta forma, proporcionar um tratamento adequado ao paciente e reduzir a transmissão da TB.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T15:31:44Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deborah S. Braz.pdf: 1934016 bytes, checksum: 84ae355b6926d3a3d56ca66a631c8834 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T15:32:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deborah S. Braz.pdf: 1934016 bytes, checksum: 84ae355b6926d3a3d56ca66a631c8834 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-17T15:32:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deborah S. Braz.pdf: 1934016 bytes, checksum: 84ae355b6926d3a3d56ca66a631c8834 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-17T15:32:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deborah S. Braz.pdf: 1934016 bytes, checksum: 84ae355b6926d3a3d56ca66a631c8834 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-08-31 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The infections related with health assistance are responsible in resume for the hospitalized patients‘ immunological, physical and mental commitment. In all the ways of nosocomial infections acquisition, the inanimate surfaces are indicated as responsible by the microorganism intersected contaminations presents at these surfaces to these patients. The majority of these agents produce mechanisms responsible by the resistance with a large quantity of antibiotics. The enterobacterias are the most common in hospital infections, with the production of ESβL against the β-lactaminics and carbapenamasis against carbapenemics. With the goal of evaluate the presence of enterobacterias in hostpital surfaces, as well the profile of resistance to antibiotics and possible production of resistance enzyme, this project were realized in hospital inanimate surfaces of two local hospitals: HUGV and ICAM. The evaluated surfaces were infirmary‘s sinks and bed and mattress‘ lateral structure, with isolation and identification of the recovered samples from these surfaces, antibiotics sensibility profile evaluation, phenotypic tests to detect the production of the enzyme and molecular characterization to evaluate the enzymes produced. As results, were recovered 23 isolated of enterobacteria at HUGV and 33 at ICAM, with the prevalence of species of Enterobacter and Klebsiella. The samples showed resistance against first generation penicillin and cephalosporin, over well other classes, and sensibility to carbapenemics. Fourteen samples were classified as producers of ESβL and one sample presented a resistance profile to carbapenemics, confirmed by molecular methods. The most founded enzymes were TEM, SHV and CTX-M-1/2. One isolated of k. pneumoniae were identified as KPC producer. Three samples from HUGV and two samples from ICAM showed 100% of similarity. The results of this project contribute with the local epidemiology, emphasizing the importance of the implementation of better hygiene and sanitization conditions. The premature identification of the β-lactamases/carbapenemases producers not only in clinical infections, but also in colonization state are vital to prevent difficulty and impossibility to treat infections, in consequence of the reduction of antibiotics release in the market. / As infecções relacionadas à assistência à saúde são responsáveis em suma pelo comprometimento imunológico, físico e mental de pacientes hospitalizados. Entre tantas formas de aquisição de infecções nosocomiais, as superfícies inanimadas hospitalares são apontadas como responsáveis por transmissão cruzada de micro-organismos presentes nessas superfícies a pacientes hospitalizados. Muitos desses agentes produzem mecanismos responsáveis pela resistência a uma infinidade de antibióticos. As Enterobactérias são as bactérias mais comuns em infecções hospitalares, com produção de ESβL contra beta-lactâmicos e carbapenemases contra carbapenêmicos. Com o intuito de avaliar a presença de Enterobactérias em superfícies inanimadas hospitalares, bem como seus perfis de sensibilidade aos antimicrobianos, possível produção de enzimas de resistência, este estudo foi realizado em superfícies inanimadas de dois hospitais da cidade de Manaus-AM: HUGV e ICAM. As superfícies avaliadas foram torneiras de enfermarias e estruturas laterais de leitos e colchões, com isolamento e identificação das amostras recuperada dessas superfícies, avaliação do perfil de sensibilidade a antimicrobianos, testes fenotípicos para detecção de produção de enzima, e caracterização molecular para avaliação das enzimas produzidas. Como resultados, foram recuperados 23 isolados de Enterobactérias do HUGV e 33 do ICAM, com prevalência de espécies de Enterobacter e Klebsiella. As amostras apresentaram resistência a penicilinas e cefalosporinas de primeira geração, além de ouras classes, e sensibilidade aos carbapenêmicos. Quatorze amostras foram triadas como produtoras de ESβL e uma amostra apresentou perfil de resistência a carbapenêmicos, confirmado por métodos moleculares. As enzimas mais encontradas foram TEM, SHV e CTX-M-1/2. Um isolado de K. pneumoniae foi identificado como produtor de KPC. Três amostras do HUGV e 2 amostras do ICAM apresentaram similaridade genética de 100% no RAPD. Os achados deste estudo contribuem para a epidemiologia local, ressaltando a importância de implantação de sistemas de controle de micro-organismos no ambiente inanimado e a implementação de melhores condições de higiene e sanitização. A identificação precoce de cepas produtoras de β-lactamases/carbapenemases tanto em infecções clínicas e/ou no estado de colonização é imprescindível para prevenir dificuldades ou impossibilidade de tratar infecções, dado a redução do aparecimento de novos antimicrobianos no mercado.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:31:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:31:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:32:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T12:32:05Z (GMT). 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For the selection of the surfactant, cosurfactant and the cosurfactant / surfactant ratio (C / T), it was necessary to construct pseudoternary phase diagrams by the titration method. In the selection of the diagram and the points for the preparation of the formulations, it was prioritized to obtain oil-in-water (O / W) type systems with the lowest possible surfactant / cosurfactant amounts. Another determining factor was the amount of MX incorporated. Each formulation was prepared by adding powdered MX to the microemulsion (ME). All formulations were characterized as droplet size, polydispersity index (PDI), transmittance, pH, zeta potential, refractive index (IR), conductivity, viscosity and amount of drug incorporated. The oleic acid was the oil phase that presented the highest amount of solubilized MX (211 ± 3.57 mg / mL) and was therefore chosen for the construction of the pseudoternary phase diagrams. After the construction and analysis of the diagrams, the Tween® 20 surfactant together with the 1,2-hexanediol co-surfactant were selected in the 1: 1 C / T ratio. In total, six formulations were prepared containing 2, 5, 8, 9 and 10% MX. The droplet size in these formulations ranged from 25.33 to 151.63 nm. The PDI is 0.256 to 0.398, indicating that the droplet distribution is monodisperse. The transmittance varied between 96.8 and 99.6%, and the refractive index, from 1.403 to 1.4551, evidencing the transparent nature of these formulations. The measured pH was between 5.3 and 5.89, compatible with the pH of the scalp and the stability of the MX. The MEs exhibited Newtonian flow with low viscosity average, between 23.27 and 95.16 cP, characteristic of these systems. The use of a nonionic surfactant resulted in a zeta potential near zero (-1.08 to 0.023). Considering that the MEs were obtained with the use of a predominantly hydrophilic surfactant and water content higher than that of oil, all developed formulations were considered as water in oil (A / O) (conductivity 29.8 to 91.8 μS / Cm). The drug content in the formulations ranged from 96.10 to 101.31%, confirming that the MX added to each formulation was effectively solubilized by the microemulsified system. The amount of drug dosed in the formulations was 20.80 to 100.44 mg / mL, which is equivalent respectively to the nominal value of 2 and 5%, which is the concentration of minoxidil found in the commercial formulations, and higher, To 10%. Thanks to the introduction of MX in oleic acid, the removal of propylene glycol and ethanol was possible. The development of formulations without these adjuvants are of great importance for the adhesion of patients who abandon treatment due to the appearance of adverse reactions to these constituents. / O tratamento tópico usualmente empregado para o combate à queda de cabelos é a aplicação diária de loção de minoxidil (MX) (2 a 5%) diretamente no couro cabeludo. Entretanto, prurido, ressecamento, descamação do couro cabeludo e dermatite de contato são efeitos adversos ocasionados pela presença de propilenoglicol e etanol, constituintes da solução tópica de MX. O objetivo deste estudo foi desenvolver e caracterizar sistemas microemulsionados contendo MX em concentrações iguais e superiores às disponíveis em mercado, livres de etanol e propilenoglicol. A seleção da fase oleosa para compor os sistemas microemulsionados ocorreu mediante a quantificação do minoxidil solubilizado em cada óleo, por espectrofotometria UV-vis. Para a seleção do tensoativo, cotensoativo e da razão cotensoativo/tensoativo (C/T) foi necessária a construção de diagramas de fases pseudoternários, pelo método de titulação. Na seleção do diagrama e dos pontos para o preparo das formulações foi priorizada a obtenção de sistemas do tipo óleo em água (O/A) com quantidades de tensoativo/cotensoativo mais baixas possíveis. Outro fator determinante foi a quantidade de MX incorporada. Cada formulação foi preparada pela adição do MX em pó à microemulsão (ME). Todas as formulações foram caracterizadas quanto tamanho de gotícula, índice de polidispersão (PDI), transmitância, pH, potencial zeta, índice de refração (IR), condutividade, viscosidade e quantidade de fármaco incorporada. O ácido oleico foi a fase oleosa que apresentou a maior quantidade de MX solubilizado (211 ± 3,57 mg/mL) sendo, por este motivo, escolhido para a construção dos diagramas de fases pseudoternários. Após a construção e análise dos diagramas, o tensoativo Tween® 20 juntamente com o cotensoativo 1,2-hexanediol foram selecionados, na razão C/T 1:1. Ao total, seis formulações foram preparadas contendo 2, 5, 8, 9 e 10% de MX. O tamanho de gotícula nestas formulações variou de 25,33 a 151,63 nm. O PDI, de 0,256 a 0,398, indicando que a distribuição de gotículas é monodispersa. A transmitância variou entre 96,8 e 99,6%, e o índice de refração, de 1,403 a 1,4551, evidenciando a natureza transparente destas formulações. O pH medido ficou entre 5,3 e 5,89, compatível com o pH do couro cabeludo e o de estabilidade do MX. As MEs exibiram fluxo newtoniano com média de viscosidade baixa, entre 23,27 a 95,16 cP, característica destes sistemas. O uso de um tensoativo não-iônico resultou em um potencial zeta próximo de zero (-1,08 a 0,023). Considerando que as MEs foram obtidas com o uso de um tensoativo predominantemente hidrofílico e teor de água superior ao de óleo, todas as formulações desenvolvidas foram consideradas do tipo água em óleo (A/O) (condutividade 29,8 a 91,8 μS/cm). O teor de fármaco nas formulações variou de 96,10 a 101,31%, confirmando que o MX acrescido a cada formulação foi efetivamente solubilizado pelo sistema microemulsionado. A quantidade de fármaco doseada nas formulações foi de 20,80 a 100,44 mg/mL, o que equivale, respectivamente, ao valor nominal de 2 e 5%, que é a concentração de minoxidil encontrada nas formulações comerciais, e superiores, 8 a 10%. Graças a veiculação do MX no ácido oleico, a retirada do propilenoglicol e etanol foi possível. O desenvolvimento de formulações sem estes adjuvantes são de suma importância para a adesão de pacientes que abandonam o tratamento em decorrência do surgimento de reações adversas a estes constituintes.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T14:40:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T14:44:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-23T14:44:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-23T14:44:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Quinones are plant-derived secondary metabolites that present diverse pharmacological properties, including antibacterial, antifungal, antiviral, antiinflammatory, antipyretic and anticancer activities. In the present study, we evaluated the cytotoxic effect of a new naftoquinona 6b,7-dihydro-5H-cyclopenta[b]naphtho[2,1-d]furan-5,6(9aH)-dione) (CNFD) in different tumor cell lines. CNFD had cytotoxic activity against different tumor cell lines, especially in MCF-7 human breast adenocarcinoma cells, which showed IC50 values of 3.06 and 0.98 μM for 24 and 48 h incubation, respectively. In wound-healing migration assays, CNFD exhibited inhibition of cell migration. Typical hallmarks of apoptosis, such as cell shrinkage, chromatin condensation, phosphatidylserine exposure, increase of the caspases 9 and 3 activation, increase of internucleosomal DNA fragmentation without affecting the cell membrane permeabilization, increase production of ROS and loss of mitochondrial membrane potential were found. Moreover, gene expression experiments indicated that CNFD increased the expression of the genes CDKN1A, FOS, MAX and RAC1 and lowered the level of mRNA transcripts of several genes, including CCND1, CDK2, SOS1, RHOA, GRB2, EGFR and KRAS. The treatment of CNFD in MCF-7 cells caused the activation of c-jun N-terminal kinase (JNK) and p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and inativation of extracellular signal-regulated protein kinase 1/2 (ERK1/2). In in vivo study using a melanoma murine model, CNFD induced potent anti-tumor activity. Here, we describe for the first time the citotoxity and anti-tumor activity of CNFD and sequential mechanisms of apoptosis in MCF-7 cells were related. Our results suggest that CNFD is potential candidate in the anti-tumor therapy. / As quinonas são metabólitos secundários derivados de plantas que apresentam diversas propriedades farmacológicas, incluindo atividades antibacterianas, antifúngicas, antivirais, antiinflamatórias, antipiréticas e anticancerígenas. No presente estudo, foi avaliado o efeito citotóxico de uma nova naftoquinona 6b, 7-dihidro-5H-ciclopenta [b] nafto [2,1-d] furano-5,6 (9aH) -diona (CNFD) em diferentes linhagens tumorais. CNFD apresentou atividade citotóxica em todas as linhagens tumorais testadas, especialmente em células de adenocarcinoma de mama humano - MCF-7, as quais apresentaram valores de CI50 de 3,06 e 0,98 μM durante 24 e 48 horas de incubação, respectivamente. Em ensaios de migração de cicatrização de feridas, o CNFD exibiu inibição da motilidade celular. Além disso, foi observado características típicas da apoptose, como o encolhimento das células, condensação da cromatina, exposição à fosfatidilserina, aumento da ativação das caspases 9 e 3, aumento da fragmentação do DNA internucleosomal sem afetar a permeabilização da membrana celular, aumento da produção de EROS e a perda do potencial da membrana mitocondrial. As experiências de expressão de genes indicaram que CNFD aumentou a expressão dos genes CDKN1A, FOS, MAX e RAC1 e baixou o nível de transcritos de mRNA de vários genes, incluindo CCND1, CDK2, SOS1, RHOA, GRB2, EGFR e KRAS. O tratamento de CNFD em células MCF-7 causou a ativação da proteína quinase c-jun ativada pelo estresse (JNK) e da proteína quinase ativada por mitógenos p38 e inativação da proteína quinase 1/2 regulada por sinal extracelular (ERK1/2) . Em estudo in vivo utilizando o modelo murino de melanoma, CNFD induziu potente atividade antitumoral. Neste trabalho, descreveu-se pela primeira vez a citotoxicidade e atividade antitumoral de CNFD e os mecanismos sequenciais de apoptose em células MCF-7. Esses resultados sugerem que o CNFD é um candidato potencial para uso na terapia antitumoral.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-28T14:43:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ana Wanda G. B. Marinho.pdf: 1755560 bytes, checksum: e586f62e521625f48e6e5faa6ad2537f (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-28T14:44:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ana Wanda G. B. Marinho.pdf: 1755560 bytes, checksum: e586f62e521625f48e6e5faa6ad2537f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-28T14:44:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ana Wanda G. B. Marinho.pdf: 1755560 bytes, checksum: e586f62e521625f48e6e5faa6ad2537f (MD5) Previous issue date: 2017-06-23 / Introduction: Kidney disease is a common condition that can affect children, adults, and the elderly. Studies show that its prevalence in the world is around 10%. Estimating the Brazilian and Manauara prevalence is important in order to provide data for improvements in the quality of care for the patients and the provision of health services. Objective: To estimate the prevalence of kidney disease in adults in Brazil and in the Metropolitan Region of Manaus. Methods: Two studies were carried out. One study systematically reviewed studies published in Brazil that estimated the prevalence of kidney disease. Another study estimated the prevalence of kidney disease by means of a cross-sectional population-based study in the Metropolitan Region of Manaus. Results: In the systematic review it was observed that the prevalence of renal disease in Brazil varied according to the method used in the definition of the disease. According to population criteria, 1.5-3 out of 100 Brazilians would have the disease and 0.05% would undergo dialysis in Brazil. The cross-sectional study in the Metropolitan Region of Manaus suggests prevalence where two out of 100 Manaus may have kidney disease. Conclusion: The two studies allow estimating that kidney disease occurs throughout Brazil, including in the Metropolitan Region of Manaus. Further studies supported in clinical-laboratory diagnosis, thus standardizing the diagnostic method, may improve this estimate. / Introdução: A doença renal crônica é uma enfermidade comum que pode afetar crianças, adultos e idosos. Estudos mostram que sua prevalência no mundo encontra-se em torno de 10%. Estimar a prevalência brasileira e manauara é importante a fim de fornecer dados para melhoramentos na qualidade do atendimento aos portadores da doença e na prestação de serviços de saúde. Objetivo: Estimar a prevalência da doença renal em adultos no Brasil e na Região Metropolitana de Manaus. Métodos: Foram realizados dois estudos. Um estudo fez a revisão sistemática dos estudos publicados no Brasil que estimavam a prevalência da doença renal. Outro estudo estimou a prevalência da doença renal por meio de um estudo transversal de base populacional na Região Metropolitana de Manaus. Resultados: Na revisão sistemática observou-se que a prevalência de doença renal no Brasil variou conforme o método empregado na definição da doença. De acordo com critérios populacionais, 1,5-3 em cada 100 brasileiros teriam a doença e 0,05% fazem diálise no Brasil. O estudo transversal na Região Metropolitana de Manaus sugere prevalência onde dois em cada 100 manauaras podem ter doença renal. Conclusão: Os dois estudos permitem estimar que a doença renal ocorre em todo o Brasil, inclusive na região metropolitana de Manaus. Novos estudos apoiados em diagnóstico clínico-laboratorial padronizando assim o método diagnóstico poderão melhorar essa estimativa.