Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-22T18:04:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Josélia Cavalcante.pdf: 2066179 bytes, checksum: aa97fce25428f2255e1903f2a469b456 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-22T18:04:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Josélia Cavalcante.pdf: 2066179 bytes, checksum: aa97fce25428f2255e1903f2a469b456 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-22T18:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Josélia Cavalcante.pdf: 2066179 bytes, checksum: aa97fce25428f2255e1903f2a469b456 (MD5) Previous issue date: 2016-05-09 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Cancer is a disease characterized by the uncontrolled growth and spread of abnormal cells. Among the main neoplasms, melanoma is the leading disease related to the skin by having high aggressiveness and resistance to conventional chemotherapy in advanced stages of the disease, accounting for 80% of deaths from skin cancer. In search of new therapeutic alternatives, has investigated the use of cell culture models that mimetizem the Tumor Microenvironment in vivo allowing more reliable analysis of in vitro activity of promising drugs for cancer treatment. One of the alternatives is the three-dimensional model of dermal skin structure, also called dermal equivalent. The 1 h-ciclopenta [b] nafto [2.3-d] furan-5.10 (3aH, 10bH)-Dione (IVS320), a furan naphthoquinone synthesized from 2-hydroxy-1.4-naphthoquinone (Lausona), presented excellent results of cytotoxicity against the strains of melanoma justifying the selection of this substance for this research project and the need for the development of other analysis showing their potential. Thus, the present study aimed to standardize the cell culture model in dermal equivalent, as well as assess the anticancer activity of IVS320 in human melanoma line SK-Mel-28. The model of study provided a comparison of the cytotoxic activity is genotoxic activity of Metalloproteinases and of IVS320 in SK-Mel-28 cultivated dermal equivalent culture in monolayer and the ability to inhibit cell migration and cell death mechanism. IVS320 performed for SK-cytotoxic Mel-28 in both cell culture models by the method of the MTT, however its activity was decreased when tested in the dermal equivalent model. CI50 average of IVS320 in SK-Mel-28 grown in monolayer was 0.5 μM in three days of treatment. Assessing the cytotoxicity in dermal equivalent model, introduced IVS320 increase in value from the CI50 concentration and time dependent, 8.05, 5.22 and 2.7 μM in 24, 48 and 72 hours of treatment respectively. The Comet test showed themselves simple tape breaks in three concentrations tested and double tape breaks only in the highest concentration in cells grown in monolayer. In the dermal equivalent model only damage were detected in neutral pH Comet in the two largest concentrations. By zymography assay was possible to assess the activity of Metalloproteinases-2 and-9. The results obtained showed the inhibitory effect of IVS320 enzyme activity in three concentrations tested in both cell culture models in treatment time of 18 hours. Additionally, cell motility test, it was observed that IVS320 also proved effective as the inhibition of this activity in all the three days of treatment (6, 12 and 24 hours) when tested in highest concentration. On differential staining LA/BE, noted an increase in the number of apoptotic cells of concentration dependent manner, however, the number of necrotic cells not varied. The results of this survey provide information about IVS320 and help in studies on alternative means in experimental Pharmacology through use of cell culture models dermal equivalent, and highlights the importance of new experimental models. / Câncer é uma doença caracterizada pelo crescimento descontrolado e disseminação de células anormais. Dentre as principais neoplasias,o melanoma é a principal doença relacionada à pelepor possuir alta agressividadee resistência a quimioterapia convencional em estágios mais avançados da doença, sendo responsável por 80% das mortes por cânceres de pele. Em busca de novas alternativas terapêuticas, tem se investigado a utilização de modelos de cultura celular que mimetizem o microambiente tumoral in vivo possibilitando analisar de forma mais fidedigna in vitro a atividade de drogas promissoras para o tratamento do câncer. Uma das alternativas é o modelo tridimensional de estrutura dérmica da pele, também denominado de equivalente dérmico. A 1H-ciclopenta[b]nafto[2,3-d]furano-5,10(3aH,10bH)-diona (IVS320), uma furano naftoquinona sintetizada a partir de 2-hidroxi-1,4-naftoquinona (Lausona), apresentou excelentes resultados de citotoxicidade frente às linhagens de melanoma justificando a seleção desta substância para este projeto de pesquisa e a necessidade do desenvolvimento de outras análises que comprovem realmente seu potencial. Sendo assim, o presente estudo objetivoupadronizar o modelo de cultura celular em equivalente dérmico, bem como avaliar a atividade anticâncer de IVS320 em linhagem de melanoma humano SK-Mel-28. O modelo de estudo proporcionou a comparação da atividade citotóxica, genotóxica e atividade inibitória de metaloproteinases de IVS320 em SK-Mel-28 cultivada em equivalente dérmico e cultura em monocamada,a capacidade de inibir a migração da célula e mecanismo de morte celular. IVS320 apresentou-se citotóxica para SK-Mel-28 nos dois modelos de cultura celular pelo método do MTT, no entanto sua atividade foi diminuída quando testada no modelo de equivalente dérmico. A média da CI50 de IVS320 em SK-Mel-28 cultivada em monocamada foi 0,5μM nos três tempos de tratamento. Avaliando a citotoxicidade no modelo de equivalente dérmico, IVS320 apresentou aumento no valor da CI50 de forma concentração e tempo dependente, 8,05, 5,22 e 2,7μM em 24, 48 e 72 horas de tratamento respectivamente. No teste do cometa evidenciaram-se quebras de fitas simples nas três concentrações testadas e quebras de fitas duplas somente na maior concentração em células cultivadas em monocamada. Já no modelo de equivalente dérmico foram detectados danos somente no cometa pH neutro nas duas maiores concentrações. Através do ensaio da zimografia foi possível avaliar a atividade de metaloproteinases -2 e -9. Nos resultados obtidos, observou-se o efeito inibitório da atividade enzimáticade IVS320 nas três concentrações testadas nos dois modelos de cultura celular no tempo de tratamento de 18 horas. Adicionalmente, no ensaio de motilidade celular, foi observado que IVS320 também se mostrou eficaz quanto à inibição dessa atividade nos três tempos de tratamento (6, 12 e 24 horas) quando testada na maior concentração (1,0μM). Na coloração diferencial LA/BE, foi observado um aumento no número de células apoptóticas de forma concentração dependente, entretanto, o número de células em necrose não variou. Os resultados desta pesquisa contribuem com informações acerca da IVS320 e auxiliam nos estudos sobre meios alternativos na farmacologia experimental por meio da utilização dos modelos de cultura celular em equivalente dérmico e evidencia a importância de novos modelos experimentais.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-02-20T13:19:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcelia Lopes.pdf: 2296859 bytes, checksum: 00c562c12e76526ea92b1cabd30b81a9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-02-20T13:19:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcelia Lopes.pdf: 2296859 bytes, checksum: 00c562c12e76526ea92b1cabd30b81a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-20T13:19:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcelia Lopes.pdf: 2296859 bytes, checksum: 00c562c12e76526ea92b1cabd30b81a9 (MD5) Previous issue date: 2017-12-19 / The culture of patient safety indicates the commitment of healthcare organizations to the safety. Individual factors such as satisfaction and professional burnout are related to the safety culture and may impact the care provided at the hospital. Objective: to assess culture of patient safety and burnout at the work among a university hospital's professionals. Method: This is a cross-sectional study with random sampling and calculation of the sample size in 300 employees. The data were collected in electronic devices containing the tools Safety Attitudes Questionnaire, Maslach Burnout Inventory Human Service Survey and sociodemographic variables. Data were analyzed using the Stata 14.2 software to calculate frequencies, associated factors and reliability by Cronbach's alpha. Results: 323 were invited to reach 300 respondents (response rate = 92.9%); 67.3% were women, mean age 42 years ± 10.85, 41.3% of the nursing area and 84.0% with direct contact with patients. The mean positivity in the safety culture was 62.7% (α=0.920). The domain with the best perception of safety culture was job satisfaction (81.4%), while working conditions showed the least positivity (46.5%). Professionals who work in direct contact with patients (β=7.03, p=0.021), workers with three or more employment contracts (β=5.80, p=0.026) and with a workday exceeding 60 hours weekly (β=6.57; p=0.014) presented greater perception of safety culture. The prevalence of burnout among professionals was 8.7% (95% confidence interval [CI]: 5.2-12.3%, α = 0.908), 26.3% presented severe burnout in professional accomplishment, 23% in emotional exhaustion and 19.7% in depersonalization. Burnout was less frequent among employees aged 36-50 years (PR=0.43, 95% CI: 0.19-0.98), with partner (PR=0.36, 95% CI: 0.18-75), economic class B2 (mean middle class, PR=0.28, 95% CI: 0.11-0.75) and C/D/E (lower middle class/poor/extremely poor, PR=0.11, 95% CI: 0.01-0.80) and nurses (PR=0.35, 95% CI: 0.14-0.91). Singles presented more burnout (PR=2.34, 95% CI: 1.10-4.98) when compared to married. Conclusion: The safety culture showed weaknesses, especially in relation to working conditions. Approximately 1 in 10 employees presented burnout, which was higher in singles, younger and richer. / A cultura de segurança do paciente indica o compromisso das organizações de saúde com a segurança assistencial. Fatores individuais como satisfação e esgotamento profissional se relacionam com a cultura de segurança e podem impactar na assistência prestada no hospital. Objetivo: avaliar a cultura de segurança do paciente e o esgotamento no trabalho entre profissionais de um hospital universitário. Método: Trata-se de um estudo transversal com amostragem aleatória e cálculo do tamanho amostral em 300 funcionários. Os dados foram coletados em dispositivos eletrônicos contendo os instrumentos Safety Attitudes Questionnaire, Maslach Burnout Inventory Human Service Survey e de variáveis sociodemográficas. Os dados foram analisados por meio do software Stata 14.2 para cálculo de frequência, fatores associados e confiabilidade pelo alfa de Cronbach. Resultados: Foram convidados 323 para alcançar 300 entrevistados (taxa de resposta = 92,9%); 67,3% eram mulheres, média de idade de 42 anos ±10,85, 41,3% da área de enfermagem e 84,0% com contato direto com pacientes. A média de positividade na cultura de segurança foi 62,7% (α=0,920). O domínio com melhor percepção de cultura de segurança foi satisfação no trabalho (81,4%), enquanto condições de trabalho apresentou a menor positividade (46,5%). Profissionais que trabalham em contato direto com pacientes (β=7,03; p=0,021), trabalhadores com três ou mais vínculos empregatícios (β=5,80; p=0,026) e com jornada superior a 60 horas semanais (β=6,57; p=0,014) apresentaram maior percepção de cultura de segurança. A prevalência de esgotamento entre os profissionais foi 8,7% (intervalo de confiança de [IC] 95%: 5,2-12,3%; α=0,908), 26,3% apresentou esgotamento grave em realização profissional, 23% em exaustão emocional e 19,7% em despersonalização. O esgotamento foi menos frequente entre os funcionários com idade entre 36-50 anos (RP=0,43; IC 95%: 0,19-0,98), com companheiro (RP=0,36; IC 95%: 0,18-0,75), classe econômica B2 (média classe média; RP=0,28; IC 95%: 0,11-0,75) e C/D/E (classe média baixa/pobres/extremamente pobres; RP=0,11; IC 95%: 0,01-0,80) e enfermeiros (RP=0,35; IC 95%: 0,14-0,91). Solteiros apresentaram mais esgotamento (RP=2,34; IC 95%: 1,10-4,98) quando comparados aos casados. Conclusão: A cultura de segurança apresentou fragilidades, em especial em relação às condições de trabalho Aproximadamente 1 em cada 10 funcionários apresentaram esgotamento, e foi maior em solteiros, mais jovens e nos mais ricos.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:09:43Z No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:10:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T19:10:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-01-20 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The absence of new drugs and the emerging parasites resistance to conventional antimalarials stimulate the search for new substances for the treatment of malaria. In order to obtain new antimalarial substances, the research group Laboratory of Active Principles of the Amazon (LAPAAM) study several medicinal plants of the Amazon, demonstrating previously that extracts of Andropogon leucostachyus Kunth have good antimalarial activity in vitro and in vivo in rodent model, however, the active substances were not determined Responsible for such activity. Thus, the present work aimed to isolate, purify, identify and / or elucidate the structures of substances present in A. leucostachyus Kunth and to evaluate them in in vitro assays against K1 Plasmodium falciparum chloroquine-resistant to determine their respective activities Antimalarial drugs. For this, extracts were prepared with hexane and ethyl acetate, which were submitted to chromatographic techniques for substance isolation and antimalarial evaluation. The determination of the chemical structures was possible by spectroscopic techniques of nuclear magnetic resonance (NMR) 1D and 2D and high resolution mass spectrometry (HRMS). From the hexane extracts of shoot and root were isolated two steroids in mixture, stigmasterol and sitosterol, and from ethyl acetate extract was isolated a phenylpropanoid, (E)-3-(2,3,6-trimethoxyphenyl) acrylic acid. The mixture of stigmasterol and sitosterol was inactive in the antimalarial assay, while (E)-3-(2,3,6- trimethoxyphenyl) acrylic acid was active in the initial screening, inhibiting parasite growth by 82,5% in the concentration of 50 μg/mL, however inactive at inhibitory concentration (IC50), with a value of 13,5μg/mL or 57 μmol. / A ausência de novos fármacos e a emergente resistência dos parasitos aos antimaláricos convencionais estimula a busca de novas substâncias para o tratamento da malária. Com o intuito de se obter novas substâncias antimaláricas, o grupo de pesquisa Laboratório de Princípios Ativos da Amazônia (LAPAAM) estuda diversas plantas medicinais da Amazônia, demonstrando previamente que extratos de Andropogon leucostachyus Kunth apresentam boa atividade antimalárica in vitro e in vivo em modelo roedor, contudo, não foram determinadas as substâncias ativas responsáveis por tal atividade. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo isolar, purificar, identificar e/ou elucidar as estruturas de substâncias presentes em A. leucostachyus Kunth e avaliá-las em ensaios in vitro contra cepas K1 de Plasmodium falciparum cloroquina-resistente para determinação de suas respectivas atividades antimaláricas. Para tanto foram preparados extratos com hexano e acetato de etila, os quais foram submetidos a técnicas cromatográficas para isolamento de substâncias e avaliação antimalárica. A determinação das estruturas químicas foi possível por meio de técnicas espectroscópicas de ressonância magnética nuclear (RMN) 1D e 2D e espectrometria de massas de alta resolução (EMAR). A partir dos extratos hexânicos de parte aérea e de raiz foram isolados dois esteroides em mistura, estigmasterol e sitosterol, e do extrato acetato de etila foi isolado um fenilpropanóide, o ácido (E)-3-(2,3,6-trimetoxifenil) acrílico. A mistura de estigmasterol e sitosterol mostrou-se inativo no ensaio antimalárico, enquanto o ácido (E)-3-(2,3,6-trimetoxifenil) acrílico apresentou-se ativo na triagem inicial, inibindo o crescimento do parasita em 82,5% na concentração de 50 μg/mL, porém inativo na concentração inibitória do parasito (CI50), com valor de 13,5 μg/mL ou 57 μmol.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-16T15:53:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Patrícia Mota Silva.pdf: 979608 bytes, checksum: ce07874ce0155d48be4cc47700cab638 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-16T15:53:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Patrícia Mota Silva.pdf: 979608 bytes, checksum: ce07874ce0155d48be4cc47700cab638 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-16T15:53:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Patrícia Mota Silva.pdf: 979608 bytes, checksum: ce07874ce0155d48be4cc47700cab638 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Microbial lipases have a great potential for industrial applications, including cosmetic industry. Forward the great diversity of the Amazon forest micro-organisms, it can be said that few bioprospecting work of producing lipases fungi were performed. This study aimed to investigate lipase production by fungi isolated from soil samples of the Amazon rainforest. Samples were collected in Reserva Florestal Adolpho Ducke. The fungi were isolated, purified and identified (macro and micromorphologically). Lipase producing fungi were selected by the ability of those in hydrolyzing pNPP (p-nitrophenylpalmitate). Univariate experiments were conducted in order to investigate the influence of bioprocess variables in the production of lipase-selected isolated Fusarium INPA 4. It was also investigated the optimum temperature and pH of Fusarium lipases INPA 4:01 preliminary analysis as the cytotoxicity of broth cultivation of the fungus. The results revealed that: 100 isolates were obtained and the three most common genera of fungi were Aspergillus (41%), Penicillium (34%) and Trichoderma (13%). The isolated highlighted on lipase production were INPA83 Penicillium, Fusarium INPA 4, Paecilomyces Aspergillus INPA INPA 53 and 59. The levels of the most appropriate factors for production of the Fusarium lipases INPA 4 were 15 g / L Soy oil 1 g / L (NH4) 2SO4, pH 5, the relationship between the culture medium and glassware 1/5, initial inoculum of 105 cell / ml, orbital stirring of 100 rpm and a time of 72 h.Na determination of pH and temperature optimum the lipase of Fusarium INPA 4 was more active in the pH range of 7.0-9.0 and temperature range of -20oC to 30oC. The cultivation broth of Fusarium INPA 4 showed no cytotoxicity from the third dilution having a viability above 100%. The Fusarium INPA 4 showed a good lipase producer, may be a source of this enzyme for future industrial applications, but for this, it is necessary an additional study for the best biotech enzyme potential and his producer are exploited. / Lipases microbianas têm um grande potencial para aplicações industriais, inclusive para indústria de cosméticos. Frente a grande diversidade de micro-organismos da floresta amazônica, pode-se afirmar que poucos trabalhos de bioprospecção de fungos produtores de lipases foram realizados. Este trabalho teve como objetivo investigar a produção de lipases por fungos isolados de amostras de solo da floresta amazônica. Foram coletadas amostras na Reserva Florestal Adolpho Ducke. Os fungos foram isolados, purificados e identificados (macro e micromorfologicamente). Foram selecionados fungos produtores de lipase pela capacidade desses em hidrolisar o pNPP (p-nitrofenilpalmitato). Foram realizados experimentos univariados com a finalidade de investigar a influência das variáveis de bioprocesso na produçao de lipases pelo isolado selecionado Fusarium INPA 4. Foi investigada também a temperatura e pH ótimos das lipases de Fusarium INPA 4 e uma análise preliminar quanto a citotoxicidade do caldo de cultivo deste fungo. Como resultados observou-se que: foram obtidos 100 isolados e os três generos fúngicos mais frequentes foram Aspergillus (41%), Penicillium (34%) e Trichoderma (13%). Os isolados destacados na produção de lipases foram: Penicillium INPA83, Fusarium INPA 4, Paecilomyces INPA 53 e Aspergillus INPA 59. Os níveis dos fatores mais adequados para produção das lipases pelo Fusarium INPA 4 foram 15 g/L de óleo de soja, 1 g/L de (NH4)2SO4, pH 5, relação entre meio de cultura e vidraria de 1/5, inóculum inicial de 105 cell/mL, agitação orbital de 100 rpm e o tempo de 72 h.Na determinação do pH e temperatura ótimos, a lipase do Fusarium INPA 4 foi mais ativa na faixa de pH entre 7,0-9,0 e na faixa de temperatura de 20oC a 30oC. O caldo de cultivo do Fusarium INPA 4 não apresentou citotoxicidade a partir da terceira diluição, tendo uma viabilidade acima de 100%. O Fusarium INPA 4 se mostrou um bom produtor de lipase, podendo ser uma fonte dessa enzima para futuras aplicações industriais, mas para isso, torna-se necessário um estudo complementar para que o melhor potencial biotecnológico da enzima e seu produtor sejam explorados.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-09-14T12:25:10Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DissertaçãoParcial_Leilane Sousa (Pré-Textuais, Rev. Lit e Objetivos).pdf: 1252437 bytes, checksum: d055c176d626e63f0a9ad128366526d6 (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-09-14T12:25:25Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DissertaçãoParcial_Leilane Sousa (Pré-Textuais, Rev. Lit e Objetivos).pdf: 1252437 bytes, checksum: d055c176d626e63f0a9ad128366526d6 (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-14T12:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DissertaçãoParcial_Leilane Sousa (Pré-Textuais, Rev. Lit e Objetivos).pdf: 1252437 bytes, checksum: d055c176d626e63f0a9ad128366526d6 (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Alternative methods are being developed to reduce, refine, and replace (3Rs) animals used in experiments and have been applied to test the safety of cosmetics and medicines. It is important to consider the difficulties that Brazil faces with customs and perishability issues that hinder and even prevent the use of commercially available reconstructed human skin models. The aim of this work was to develop a reconstructed human skin model (PHR-UFAM) and test its applicability for cytotoxicity and genotoxicity assays. For this, skins were generated using permanent human keratinocytes and fibroblasts (embedded in collagen) cells. The quality control was performed by morphological and immunohistochemical analyses, viability by MTT test with negative control, and barrier function test. The applicability for genotoxicity assays was evaluated by micronucleus test, neutral and alkaline comet, and modified comet for detection of DNA methylation sites with positive controls of each test defined by OECD and literature. The best condition tested allowed the development of a reconstructed human skin (PHR-UFAM) with epidermis presenting expression of immunohistochemical markers: epithelial (cytokeratins) and dermal (vimentin). The model followed quality parameters (histology, viability, and barrier function) and presented morphological similarity with models recognized and validated by OECD. The applicability of skin model for genotoxicity assays demonstrated the effectiveness of the positive controls: Mitomycin C that was able to increase significantly the micronucleus frequency when tested at concentrations of 1,5 e 3 μg/mL (3.03% and 3.51%, respectively); Ethylmethanesulfonate caused damage to the DNA when tested at concentrations of 5 e 10 μM by comet assay in both alkaline (damage index values of 59.3 and 103.7, respectively) and neutral (damage index of 40.7 and 125, respectively) versions; and 5-azacytidine in the modified comet assay for methylation detection, tested at concentrations of 0.5, 1 e 1.5 μM showed reduced damage indexes (107.5, 83.1, and 89.3, respectively). The results were similar to skin models validated by OECD and literature. Thus, with this work it was possible to develop a reconstructed human skin model composed entirely of permanent cells. However, further validation studies are required to prove its effectiveness for cytotoxicity and genotoxicity tests of substances with therapeutic or cosmetic potential. / O desenvolvimento de métodos alternativos in vitro baseia-se no refinamento, redução e substituição ao uso de animais em experimentação e têm sido desenvolvidos para testar a segurança de cosméticos e medicamentos. É importante considerar as dificuldades que o Brasil enfrenta com questões alfandegárias e de perecibilidade que dificultam e até mesmo impedem a utilização de modelos de pele humana reconstruída disponíveis comercialmente. Este trabalho teve como objetivo desenvolver um modelo de pele humana reconstruída (PHR-UFAM) in vitro utilizando células de cultura permanente e testar suas aplicabilidades para ensaios de citotoxicidade e genotoxicidade. Para isso, as peles foram geradas utilizando queratinócitos e fibroblastos (embebidos em colágeno) humanos permanentes. O controle de qualidade das peles foi feito por análise morfológica e imunohistoquímica, a viabilidade pelo teste do MTT com o controle negativo e teste de função barreira. A aplicabilidade para ensaios de genotocixidade foi avaliada pelo teste do micronúcleo, cometa em pH alcalino e neutro e cometa modificado para detecção de sítios de metilação no DNA com os controles positivos de cada teste definidos pela OECD e pela literatura. A melhor condição testada permitiu o desenvolvimento de uma pele humana reconstruída (PHR-UFAM) com uma camada epidérmica apresentando expressão de marcadores imunohistoquímicos epiteliais (citoqueratinas) e dérmico (vimentina). O modelo atendeu aos parâmetros de qualidade (histologia, viabilidade e função barreira) e apresentou semelhança morfológica com os modelos reconhecidos e validados pela OECD. A aplicabilidade para ensaios de genotoxicidade evidenciou efetividade dos controles positivos: Mitomicina C, que foi capaz de aumentar significativamente a frequência de micronúcleos em 3,03% e 3,51% nas concentrações de 1,5 e 3 μg/mL; Etilmetanossulfonato, que causou dano ao DNA no modelo de pele quando testado nas concentrações de 5 e 10 μM, avaliado pelo ensaio do cometa tanto na versão alcalina (índices de dano iguais a 59,3 e 103,7, respectivamente) quanto na neutra (índices de dano iguais a 40,7 e 125, respectivamente); e 5-azacitidina no ensaio do cometa modificado para detecção de metilação no DNA testada nas concentrações 0,5, 1 e 1,5 μM, que apresentou índices de dano reduzidos iguais a 107,5, 83,1 e 89,3, respectivamente, no modelo de pele PHR-UFAM. Os resultados foram comparados com o controle não tratado. Diante do exposto, com este trabalho foi possível desenvolver um modelo de pele humana reconstruída composta totalmente de células permanentes semelhante aos modelos validados e reconhecidos na literatura. Contudo, é necessária a realização de estudos de validação complementares que comprovem sua efetividade para ensaios de citotoxicidade e genotoxicidade de substâncias com potencial terapêutico ou cosmético.

Submitted by Napoleana Barros Martins (napoleana_martins@hotmail.com) on 2016-08-08T13:34:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:40:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lately there has been a great interest in natural dyes due to problems of toxicity and biodegradability associated with the use of synthetic colorings. Colorants from fungal metabolites are still underexplored despite having a very attractive biotechnological potential. In this context, the aim of this study was to investigate the production of dyes and biological activity of sclerotiorin. Then in sequence, bioprocesses in a submerged solid media were realized in order to investigate the influence of the bioprocess factors in the production of colorants. The colorants produced were subjected to isolation methods (column chromatography, thin-layer chromatography), and identification of the chemical structure (nuclear magnetic resonance). The sclerotiorin dye was purchased commercially and it was evaluated their cytotoxic and antifungal activity. In relation to the bioprocesses, factors: sucrose, peptone, bioprocess time and orbital shaking had influence in the submerged bioprocesses, while only the time factor was shown to have influence on the bioprocess in a solid medium. It was not possible to isolate and identify colorants with strain P. sclerotiorum 2AV2, however the oleic acid was obtained as a major component in a colored fraction (PS 4.2). Finally, when performed sclerotiorin in bioassays, this compound demonstrated antitumor activity against the SKMEL-19, SKMEL-28, and MESA-DX cells. In addition, it can demonstrate the antifungal activity of sclerotiorin against the pathogenic fungus Cryptococcus neoformans. The biotechnological potential of the pigments produced by fungi is great and motivates further research that may result in new biotechnological products. / Ultimamente tem havido um grande interesse por colorantes naturais devido a problemas de toxicidade e biodegradabilidade associados ao uso de colorantes sintéticos. Os colorantes provenientes de metabólitos fúngicos ainda são pouco explorados apesar de apresentarem um potencial biotecnológico muito atraente. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a produção de colorantes e atividade biológica de esclerotiorina. Em seguida, bioprocessos em meio submerso e sólido foram realizados com a finalidade de investigar a influência dos fatores de bioprocesso na produção dos colorantes. Os colorantes produzidos foram submetidos a metodologias de isolamento (cromatografia em coluna, cromatografia de camada delgada) e identificação da sua estrutura química (ressonância magnética nuclear). O colorante esclerotiorina foi adquirido comercialmente e avaliou-se a sua atividade citotóxica e antifúngica. Quanto aos bioprocessos, os fatores: sacarose, peptona, tempo de bioprocesso e agitação orbital tiveram influência nos bioprocessos submersos, enquanto que apenas o fator tempo demonstrou ter influência nos bioprocessos em meio sólido. Não foi possível isolar e nem identificar colorantes com a cepa P. sclerotiorum 2AV2, no entanto foi obtido o ácido oleico como componente majoritário em uma fração colorida (PS 4.2). Por fim, quando avaliada a esclerotiorina em bioensaios, essa demonstrou atividade antitumoral frente às linhagens SKMEL-19, SKMEL-28 e MESA-DX. Em acréscimo, pode-se demonstrar a atividade antifúngica da esclerotiorina frente ao fungo patogênico Cryptococcus neoformans. O potencial biotecnológico dos pigmentos produzidos por fungos é grande e motiva novas pesquisas que possam resultar em novos produtos biotecnológicos.

Submitted by Gabriele Rodrigues (gabriele_r.valentim@hotmail.com) on 2016-09-02T14:02:34Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lílian Macedo Bastos.docm: 19811 bytes, checksum: 6a98ec84945cb73880c6232ba826979c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-12T18:32:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lílian Macedo Bastos.docm: 19811 bytes, checksum: 6a98ec84945cb73880c6232ba826979c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-12T18:40:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lílian Macedo Bastos.docm: 19811 bytes, checksum: 6a98ec84945cb73880c6232ba826979c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-12T18:40:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lílian Macedo Bastos.docm: 19811 bytes, checksum: 6a98ec84945cb73880c6232ba826979c (MD5) Previous issue date: 2011-07-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Eugenia punicifolia is a species commonly known as pedra-ume-caá, widely used in the Amazon region, especially against glucose disorders, so it is essential the characterization for the establishment of parameters which are used for identification and determination of physico-chemical properties of raw material plant, as well as the development of an extractive solution with defined chemical and technological parameters. The objective of this study was to evaluate the technological feasibility of produce solid dosage form, containing high levels of spray dried extract product (PSA), prepared from an aqueous solution of Eugenia punicifolia. For this, the raw plant, consisting of leaves, was characterized using techniques described in the Brazilian Pharmacopoeia and official codes. The extractive solution was obtained by the method of infusion with a ratio of drug:solvent 7.5% w/V, it was characterized by dry residue. The extractive solution was dried using spray drying technique, without and with pharmaceutical adjuvants in order to improve operational efficiency and technological characteristics of the products obtained. The tablets were produced with granules of PSA (GPSA) obtained by dry granulations with three different concentrations 30%, 50% and 70% of PSA and co-processed adjuvants (GRADJ) produced by wet granulation with filler/binder and disintegrant. The formulations were composed of GPSA (71.4%), GRADJ (28.1%) and lubricant (0.5%). Tablets were produced on instrumented rotary compressing machine. The formulations showed viability of production of tablets, considering its mechanical properties adequate, uniformity of content and rapid dissolution. / A Eugenia punicifolia é uma espécie popularmente conhecida como pedra-ume-caá, amplamente utilizada na região amazônica, principalmente contra distúrbios glicêmicos, sendo imprescindível a sua caracterização visando o estabelecimento de parâmetros que sirvam para identificação e determinação das propriedades físico-químicas das matérias-primas vegetais, assim como o desenvolvimento de uma solução extrativa com parâmetros tecnológicos e químicos definidos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade tecnológica de obtenção de forma farmacêutica sólida, contendo altos teores de produto seco por aspersão (PSA), obtido a partir de solução extrativa aquosa de Eugenia punicifolia. Para isso, a matéria-prima vegetal, constituída por folhas, foi caracterizada utilizando técnicas descritas na Farmacopeia Brasileira e nos códigos oficiais. A solução extrativa foi obtida por meio do método de infusão com uma relação droga:solvente de 7,5 % m/V e foi caracterizada através do resíduo seco. A solução extrativa foi seca através de técnica de secagem por aspersão, com e sem adjuvantes farmacêuticos, a fim de melhorar as características tecnológicas e o rendimento operacional dos produtos obtidos. Os comprimidos foram obtidos por granulação a partir de granulados de PSA (GPSA), produzidos por via seca contendo três concentrações diferentes de PSA (30, 50 e 70 %), e adjuvantes co-processados (GRADJ), produzidos por granulação via úmida com material de carga e enchimento e desintegrantes. As formulações foram constituídas de GPSA (71,4%), GRADJ (28,1%) e lubrificante (0,5%). Os comprimidos foram produzidos em máquina de comprimir rotativa instrumentalizada. As formulações mostraram viabilidade de produção de comprimidos em face às suas propriedades mecânicas, uniformidade de conteúdo e a rápida cedência.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T13:14:42Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thiago de Jesus Bacha.pdf: 1178554 bytes, checksum: ae11b9a0a5f0b7efe2f4c961a7ca8718 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T13:14:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thiago de Jesus Bacha.pdf: 1178554 bytes, checksum: ae11b9a0a5f0b7efe2f4c961a7ca8718 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T13:15:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thiago de Jesus Bacha.pdf: 1178554 bytes, checksum: ae11b9a0a5f0b7efe2f4c961a7ca8718 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-03T13:15:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thiago de Jesus Bacha.pdf: 1178554 bytes, checksum: ae11b9a0a5f0b7efe2f4c961a7ca8718 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Training and proper nutrition are important things to achieving high levels of military physical performance, but when physical activity is practiced in excess, leads to disruption of muscle fibers, releasing intracellular components to the bloodstream. Those components are used as surrogate markers of smooth skeletal muscle injury. There are several factors that may influence muscle damage and physical performance of any athlete and it is understood that some polymorphisms may also be involved in the improvement or less physical wear. The aim of this study was to evaluate the biochemical and molecular profile of military of Brazilian Army, participants of Operations Course in the Jungle - OCJ. 233 military men and OCJ students were assessed in 2013. Each course lasted three months, during this time 12 blood samples were taken from each military. Were measured levels CK-MM, CK-MB and correlated with polymorphisms of ACTN3 (C1747T), GDF8 (C2T), MLC (C49T), AMPD1 (C34T), FKRP (A19G) MYH9 (A22G), GSTP1 (A341G), GSTP1-1 (C16T). The SNP MLCK was not found in the studied population. SNPs in ACTN3, GDF8, GSTP1 were frequent and when correlated with creatine kinase, fractions and MM-MB, statistically significant (p <0.001). All military carriers of R577X SNP had elevated CK levels, suggesting that carriers of this polymorphism have better physical performance and CK degradation faster, unlike the holders of the SNPs FKRP-A19G and MYH9-A22G, who developed lower physical performance. In this study was demonstrated that the genotypes for ACTN3, GSTM1 and GSTP1/1 corroborate literature data, with high frequencies. Holders of the SNP GDF8-C2T showed levels of CK-MM and CK-MB within baseline limits after high intensity exercise, while carrying the SNP ACTN3-R577X demonstrated high levels. During this study a single case of rhabdomyolysis occurred in a military, but due to cocaine use, with serum levels of creatine kinase MM fraction 99,500 U/L and MB fraction 6,500 U/L. Sodium levels were observed at 1.730 mmol/L, potassium 42.1 mmol/L, phosphorus 48.3 mg/dl, chloro 1.243 mmol/L, magnesium and 36.1 mg/dl; renal disorders, such as urea 302.6 mg/dl and creatinine 11.1 mg/dl. Quality tests, troponin and myoglobin, showed positive results. It is concluded that genetic polymorphisms may influence the increase or decrease in muscle damage and physical performance of military personnel exposed to strenuous physical training. / O treinamento e a nutrição adequada são fundamentais no alcance de altos níveis de desempenho físico militar, porém quando a atividade física é praticada em excesso, leva ao rompimento das fibras musculares, liberando componentes intracelulares para corrente sanguínea. Tais componentes são utilizados como marcadores indiretos de lesão da musculatura esquelética lisa. Diversos são os fatores que podem influenciar no dano muscular e no desempenho físico de qualquer atleta e entende-se que alguns polimorfismos também podem estar envolvidos na melhora ou no menor desgaste físico. O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações bioquímicas e perfil molecular de militares do Exército Brasileiro, participantes do Curso de Operações na Selva - COS. Foram avaliados 233 militares do sexo masculino e alunos do COS no ano de 2013. Cada curso teve duração de três meses, onde foram realizadas, no decorrer do curso, doze coletas de sangue venoso de cada militar. Foram realizadas dosagens de CK-MM, CK-MB e correlacionadas com polimorfismos dos genes ACTN3 (C1747T), GDF8 (C2T), MLC (C49T), AMPD1 (C34T), FKRP (A19G), MYH9 (A22G), GSTP1 (A341G), GSTP1-1 (C16T). O SNP MLCK não foi encontrado na população estudada. Os SNPs nos genes ACTN3, GDF8, GSTP1 foram frequentes e quando correlacionados com a creatino quinase, frações-MM e MB, apresentaram significância estatística (p<0,001). Todos os militares portadores do SNP R577X tiveram níveis de CK elevados, sugerindo que os portadores deste polimorfismo possuem melhor desempenho físico e degradação de CK mais rápida, diferente dos portadores dos SNPs FKRP-A19G e MYH9-A22G, que desenvolveram desempenho físico inferior. Foi demonstrado neste estudo que os genótipos para ACTN3, GSTP1 e GSTP1/1 corroboram com dados da literatura, apresentando frequências elevadas. Os portadores do SNP GDF8-C2T apresentaram níveis de CK-MM e CK-MB dentro de limites basais após exercícios físicos de alta intensidade, enquanto portadores do SNP ACTN3-R577X demonstraram níveis elevados. Durante este estudo um único caso de rabdomiólise ocorreu em um militar, mas por consumo de cocaína, com níveis séricos de creatina quinase fração MM 99.500 U/L e fração MB 6.500 U/L. Foram observados níveis de sódio 1.730 mmol/L, potássio 42.1 mmol/L, fósforo 48.3 mg/dl, cloro 1.243 mmol/L e magnésio 36.1 mg/dl; alterações renais, como uréia 302.6 mg/dl e creatinina 11.1 mg/dl. Exames qualitativos, troponina e mioglobina, apresentaram resultados positivos. Conclui-se que os polimorfismos genéticos podem influenciar no aumento ou diminuição de danos musculares e no desempenho físico de militares expostos a treinamentos físicos extenuantes.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:03:50Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:04:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-29T13:04:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T13:04:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia de Jesus A. Silva.pdf: 2397176 bytes, checksum: 10d2601e2d4c7bb5bd425131e63a0ebc (MD5) Previous issue date: 2016-04-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Inflammation is a physiological process that begins in response to infection or tissue damage. It is a mechanism focusing on tissue repair after injury and consists of a cascade of cellular and microvascular events that aims to remove damaged tissue and generation of new ones. In this cascade is observed an increasing in microvascular permeability, followed by adhesion and cell infiltration at the site of injury, apoptosis, and growth of new tissue and blood vessels. The nitrostyrene is a group of compounds consisting of an aromatic ring linked to a chain of the nitro group (NO2). It has been studied by having various biological activities such as anti-apoptotic, anti-platelet or anti-microbial, although few studies have been made for the anti-inflammatory activity of these compounds. The aim of this study was to evaluate anti-inflammatory activity of four new compounds from the class of nitrostyrene (NPA, 7B, 7D and 7E) in in vitro/in vivo assays. Initially, the compounds were submitted to in vitro testing in a murine macrophages model activated by lipopolysaccharide (LPS) and MRC5 human lung fibroblast in order to assess the cytotoxic potential of such compounds. Shortly thereafter, they were evaluated for inhibition of nitric oxide (NO·), for dosage of the cytokine TNF-α and evaluation of the expression of proteins involved in the inflammatory process. To evaluate the acute inflammatory process in vivo was performed edema induction by carrageenan tests on zebrafish model of LPS-induced pleurisy in mice. The four new compounds tested showed cytotoxic activity on J774A.1 and MRC5 cell when tested in the concentrations (3.12-25 μg/ml). For THP-1 cytotoxic activity was starting concentration of 10 μg/ml. All compounds inhibited nitric oxide production by macrophages activated by LPS but only the NPA showed a possibly significant concentration-response at the concentrations of 10 and 20 μg/ml. This same compound also reduced TNF-α, NF-B and ERK 1/2 levels in THP-1 cells. The NPA possibly also inhibited the carrageenan-induced edema in Zebrafish fish and leukocyte migration into the pleural cavity of mice by inhibiting the intracellular signaling pathways NF-B and ERK 1/2 in in vivo assays. In conclusion, compounds tested in this study not only presented significant cytotoxic activity, as also showed an excellent in vitro/in vivo anti-inflammatory potential, most likely by acting in the inhibition of NF-B and ERK 1/2 pathways. Data were important to explore the biological activity of these novel compounds and their possible application in the treatment of inflammatory diseases. / A inflamação é um processo fisiológico que se inicia em resposta a uma infecção ou dano aos tecidos. É um mecanismo direcionado ao reparo tecidual após a lesão e consiste em uma cascata de eventos celulares e microvasculares que tem como objetivo a remoção de tecidos danificados e a geração de outros novos. Nessa cascata é observado o aumento da permeabilidade microvascular, seguido pela adesão e infiltração de células no local da lesão, apoptose celular e crescimento de novos tecidos e vasos sanguíneos. Os nitroestirenos são um grupo de compostos constituído por anel aromático ligado a uma cadeia do grupo nitro (NO2). Eles têm sido estudados por apresentar diversas atividades biológicas tais como anti-apoptótica, antiplaquetária e antimicrobiana, entretanto poucas pesquisas têm sido realizadas quanto à atividade anti-inflamatória desses compostos. O objetivo deste estudo foi avaliar atividade anti-inflamatória de quatro novos compostos da classe dos nitroestirenos (NPA, 7B, 7D e 7E) em ensaios in vitro/in vivo. Inicialmente, os compostos foram submetidos a ensaio in vitro em modelo de macrófagos murino ativados por lipopolissacarídeo (LPS) e fibroblastos de pulmão humano MRC5, a fim de avaliar a capacidade citotóxica desses compostos. Logo em seguida, foram avaliados quanto à inibição de óxido nítrico (NO·), dosagem da citocina TNF-α e avaliação da expressão de proteínas envolvidas com o processo inflamatório. Para avaliar o processo anti-inflamatório agudo in vivo foi realizado ensaios de indução do edema por carragenina em peixe Zebrafish e o modelo de pleurisia induzido por LPS em camundongos. Os quatro novos compostos testados apresentaram atividade citotóxica em célula J774A.1 e MRC5 quando testados nas concentrações (3.12-25 μg/mL). Para THP-1 a atividade citotóxica foi apartir da concentração 10 μg/mL. Todos os compostos inibiram a produção de óxido nítrico em macrófago ativado por LPS, entretanto somente NPA apresentou uma possível concentração-resposta significativa nas concentrações de 10 e 20 μg/mL. Este mesmo composto também reduziu os níveis de TNF-α, NF-B e ERK 1/2 em células THP-1. O NPA também possivelmente inibiu o edema induzido por carragenina em peixe Zebrafish e a migração de leucócitos na cavidade pleural de camundongos através da inibição das vias de sinalização intracelular NF-B e ERK 1/2 em ensaios in vivo. Em conclusão, compostos testados neste estudo nao somente apresentaram atividade citotóxica significativa, como também demonstraram um excelente potencial anti-inflamatório in vitro e in vivo, provavelmente por atuação de inibição das vias NF-B e ERK 1/2. Os dados obtidos foram importantes para exploração da atividade biológica destes novos compostos e sua possível aplicação na terapêutica de doenças inflamatórias.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:22:50Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Patrícia S. P. Costa.pdf: 3456969 bytes, checksum: 55c9b06d0effdf0b92091a5a105f06ec (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:23:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Patrícia S. P. Costa.pdf: 3456969 bytes, checksum: 55c9b06d0effdf0b92091a5a105f06ec (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-12-05T15:23:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Patrícia S. P. Costa.pdf: 3456969 bytes, checksum: 55c9b06d0effdf0b92091a5a105f06ec (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-05T15:23:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Patrícia S. P. Costa.pdf: 3456969 bytes, checksum: 55c9b06d0effdf0b92091a5a105f06ec (MD5) Previous issue date: 2013-08-15 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Malaria remains a serious public health problem in Brazil. The protozoa of the genus Plasmodium, the causative agent of this disease, has developed resistance to antimalarial drugs, which makes research programs, to identify new drugs that can replace the current, extremely important and urgent. The search for new drugs from plants is now a real hope for patients with serious diseases, such as malaria, as well as to improve the quality of public health. The ethnobotany research, directed the study of medicinal plants, can be the starting point for the development of new drugs from plant resources, which is the method of selecting plants that most likely favors the discovery of new bioactive substances. The present study aimed to conduct a study ethnobotany, medicinal plants used to treat malaria in riverine village Céu do Mapiá and perform phytochemical screening of the species Abuta sandwithiana. The community studied belongs to the municipality of Pauini and is located within the National Forest Purus. The informants in the study were selected through the snowball technique, semi-structured interviews were conducted, participant observation, guided tours, collecting botanical material of plants cited by respondents and taxonomic identification of these species. The species Abuta sandwithiana was selected to perform the phytochemical screening, because besides this display a high degree of importance to the people studied, no previous records of studies of this nature with the plant were found. Phytochemical screening was performed hydroalcoholic and aqueous species extract, performing tests for the major classes of active chemical compounds. Were held 40 interviews, describing 52 species in 30 plant families, including 21 species used specifically for the treatment of malaria and 36 used for the treatment of diseases associated with malaria, some of which are used for two purposes. The screening results were positive for alkaloids, organic acids, phenols, anthocyanin glycosides, saponins, sterols, triterpenes, gums, mucilages and aminogroups. These results indicate the therapeutic potential of the studied species and justify the continuation of studies with the plant. The ethnobotanical survey conducted in this study can serve as a basis for the selection of other species, in addition that has been studied, for future phytochemical investigation, because they have strong indications of therapeutic action, according to the traditional knowledge and secondly by having further few or no studies to prove this. / A malária ainda é um grave problema de saúde pública no Brasil. O protozoário do gênero Plasmodium, causador desta doença, vem desenvolvendo resistência às drogas antimaláricas, o que torna programas de investigação, para identificar novos medicamentos que possam substituir os atuais, extremamente importantes e urgentes. A busca de novos medicamentos a partir de vegetais é atualmente uma esperança concreta para pacientes com doenças graves, como é o caso da malária, assim como para a melhoria na qualidade da saúde pública. A pesquisa etnobotânica, direcionada ao estudo das plantas medicinais, pode ser o ponto de partida para o desenvolvimento de novos medicamentos a partir dos recursos vegetais, sendo este o método de seleção de plantas que favorece com maior probabilidade a descoberta de novas substâncias bioativas. O presente trabalho teve como objetivo realizar um estudo etnobotânico, das plantas medicinais utilizadas para o tratamento da malária, na Vila Céu do Mapiá e realizar a triagem fitoquímica da espécie Abuta sandwithiana. A comunidade estudada pertence ao município de Pauini e fica localizada dentro da Floresta Nacional do Purus. Os entrevistados foram selecionados através da técnica bola de neve, foram realizadas entrevistas semiestruturadas, observação participativa, turnês guiadas, coleta de material botânico das plantas citadas pelos entrevistados e a identificação taxonômica destas espécies. A espécie Abuta sandwithiana foi selecionada para a realização da triagem fitoquímica, pois além de apresentar um alto grau de importância para a população estudada, não foram encontrados registros prévios de estudos desta natureza com a planta. A triagem fitoquímica foi realizada do extrato hidroalcoólico e aquoso da espécie, realizando testes para as principais classes de compostos químicos ativos. Foram realizadas 40 entrevistas, repertoriando 52 espécies distribuídas em 30 famílias botânicas, sendo 21 espécies utilizadas especificamente para o tratamento da malária e 36 utilizadas para o tratamento de males associados à malária, sendo que algumas delas são utilizadas para as duas finalidades. Da triagem fitoquímica foram positivos os resultados para alcaloides, ácidos orgânicos, fenóis, heterosídeos antociânicos, saponinas, esteróis, triterpenos, gomas, mucilagens e aminogrupos. Estes resultados indicam o potencial terapêutico da espécie estudada e justificam a continuidade dos estudos com a planta. O levantamento etnobotânico, realizado neste trabalho, pode servir de base para a seleção de outras espécies para futura investigação fitoquímica, por possuírem fortes indicativos de ação terapêutica, de acordo com o conhecimento tradicional e por outro lado por ainda possuírem poucos ou nenhum estudo para tal comprovação