Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-05T13:19:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-05T13:19:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T13:19:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-06-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Investing in the development of new preventive therapies against the progression of chronic diseases is essential, since these diseases share common aetiologies such as inflammation and oxidative stress. Flavonoids such as naringenin have been the subject of several studies in the prevention, control and treatment of chronic diseases. The objective of this work was to synthesize a new chemical entity and, from this, to explore its chemical and physicochemical characteristics and its biological activities. ACD41 was synthesized from the condensation reaction between naringenin and aminoguanidine. Its chemical structure was elucidated using ESI-MS, MS-MS, NMR and FTIR techniques, and physicochemical aspects studied using TG, DSC, DTA and XRD. The biological activities explored included the trials related to oxidative stress, glycation and inflammation. ACD41 was presented as a crystalline solid, with 81% yield, 328.33 g / mol molecular mass, retention time of 12.1 minutes in HPLC analysis and with lower thermal resistance compared to naringenin. ACD41 showed low cytotoxicity with IC50 greater than 1000 μg / mL in human macrophages (THP-1) and 767.4 ± 18.71 μg / mL in human fibroblasts (MRC-5). It presented sequestering activity against the radicals ABTS+ • (IC 50 = 5.26 ± 0.10 μg / mL) and DPPH• (IC 50 = 8.33 ± 0.49 μg / mL). It reversed ROS levels and preserved mitochondrial membrane integrity in THP1. In the in vitro glycation assays, ACD41 inhibited the formation of AGEs by oxidative (IC 50 = 2.58 ± 1.67 μg / mL) and non-oxidative (IC 50 = 72.23 ± 2.28 μg / mL). In LPS-activated macrophages, it inhibited the production of TNF-α at concentrations of 5 and 10 μg / mL. ACD41 inhibited the production of hydroperoxide by 87.95% by LOX and in the in silico studies it interacted with the COX-2 enzyme, presenting a binding energy equal to -10.3 kcal / mol. The present study describes for the first time the molecule (2E) -2- [5,7-dihydroxy-2- (4-hydroxyphenyl) -2,3-dihydro-4H-chromen-4-ylidene] hydrazine carboxymidinedide And demonstrates the antioxidant, anti-inflammatory and anti-inflammatory potential of this new chemical entity, which may be promising in the development of new therapies for chronic diseases. / Investir no desenvolvimento de novas terapias preventivas contra a progressão de doenças crônicas é essencial, visto que essas enfermidades compartilham etiologias comuns como a inflamação e estresse oxidativo. Flavonoides como a naringenina tem sido objeto de vários estudos na prevenção, controle e tratamento de doenças crônicas. O objetivo deste trabalho foi sintetizar uma nova entidade química e, a partir desta, explorar suas características químicas e físico-químicas e suas atividades biológicas. A ACD41 foi sintetizada a partir da reação de condensação entre a naringenina e aminoguanidina. Sua estrutura química foi elucidada por meio das técnicas de ESI-MS, MS-MS, RMN e FTIR e aspectos físico-químicos estudados utilizando TG, DSC, DTA e DRX. As atividades biológicas exploradas contemplaram os ensaios relacionados ao estresse oxidativo, glicação e inflamação. A ACD41 apresentou-se como um sólido cristalino, com rendimento de 81%, massa molecular de 328,33 g/mol, tempo de retenção de 12,1 minutos na analise por CLAE e com menor resistência térmica comparada à naringenina. A ACD41 apresentou baixa citotoxicidade com CI50 superior a 1000 μg/mL em macrófagos humanos (THP-1) e 767,4 ± 18,71 μg/mL em fibroblastos humanos (MRC-5). Apresentou atividade sequestrante contra os radicais ABTS+ (CI50 = 5,26 ± 0,10 μg/mL) e DPPH (CI50 = 8,33 ± 0,49 μg/mL). Reverteu os níveis de ROS e preservou a integridade da membrana mitocondrial em THP-1. Nos ensaios de glicação in vitro, a ACD41 inibiu a formação de AGEs pelas vias oxidativa (CI50 = 2,58 ± 1,67 μg/mL) e não oxidativa (CI50 = 72,23 ± 2,28 μg/mL). Em macrófagos ativados por LPS, inibiu a produção de TNF-α nas concentrações de 5 e 10 μg/mL. A ACD41 inibiu em 87,95% a produção de hidroperóxido pela LOX e nos estudos in silico interagiu com a enzima COX-2, apresentando uma energia de ligação igual a -10.3 kcal/mol. O presente estudo, pela primeira vez, descreve a molécula (2E)-2-[5,7-diidroxi-2-(4-hidroxifenil)-2,3-dihidro-4H-cromen-4-ilideno]hidrazina carboximi- damida e demonstra o potencial antioxidante, antiglicante e anti-inflamatório desta nova entidade química, a qual pode ser promissora no desenvolvimento de novas terapias para doenças crônicas.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-20T13:50:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Pabllo Barbosa.pdf: 1956144 bytes, checksum: 36d500813f960974475f746372d2bc64 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-20T13:50:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Pabllo Barbosa.pdf: 1956144 bytes, checksum: 36d500813f960974475f746372d2bc64 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-20T13:50:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Pabllo Barbosa.pdf: 1956144 bytes, checksum: 36d500813f960974475f746372d2bc64 (MD5) Previous issue date: 2017-09-26 / Oral administration and absorption of drugs depend essentially on the aqueous solubility and intestinal permeability of the molecule, which are key parameters for bioavailability and therapeutic efficacy. The excipients exert well-established roles in the composition of the medicaments, which may increase the stability, solubility, absorption and efficacy of the drug. Consequently, the inappropriate use of an excipient may impact the biopharmaceutical stage, especially in its solubilization and permeation, which will reflect in the pharmacokinetic stage. The Biopharmaceutical Classification System (BCS), based on the properties of solubility and permeability, is a tool that emerged in the 1990s to help predict the bioavailability of the drugs. BCS classifies the drug into four categories, where Class I drugs have high solubility and permeability, while Class IV drugs have low solubility and permeability. Furosemide is classified, according to BCS, as a Class IV drug and, therefore, is a substance of difficult solubilization and permeation. In vitro dissolution studies allow the dissolution profile of the drug to be evaluated by simulation of physiological conditions of the gastrointestinal tract (GIT) to determine its release or release rate kinetics, which are fundamental for the evaluation of pharmaceutical equivalence between different manufacturers of the same product. And in order to estimate whether there is truthfulness in the use of standard excipients for drug formulation, as well as whether or not the size of the capsule influences the dissolution of the drug, furosemide capsules number 2 and 4 were manipulated using the excipients recommended by the literature, and later compared to formulations of pharmacies. In this sense, the present study evaluated, by means of in vitro pharmacopoeial tests that determine the drug's drug availability, if the manipulation pharmacies of Manaus used the excipients proposed by the technical and scientific literature that guarantee the dissolution of manipulated furosemide in capsules, as well as the quality parameters for oral solid dosage forms. Not all pharmacies have met the minimum quality requirements recommended by pharmacopoeias. To assess drug release, dissolution profiles of furosemide were plotted in phosphate buffer pH 5.8. The results obtained indicated significant differences in the rate and amount of furosemide released, and only 1 pharmacy was approved in the dissolution test in the second stage, and capsule number 2 is the most indicated. Thus, it was found that for the biopharmaceutical factors of furosemide to be improved, it is necessary to add suitable excipients, and that they exert substantial influence on the rate of drug release. The inappropriate use of its excipients affect the solubility and permeability and, therefore, its bioavailability, impairing the clinical response and treatment of the patient. / Administração e absorção oral de fármacos dependem essencialmente da solubilidade aquosa e da permeabilidade intestinal da molécula, que são parâmetros fundamentais para a biodisponibilidade e eficácia terapêutica. Os excipientes exercem funções bem estabelecidas na composição dos medicamentos, podendo aumentar a estabilidade, solubilidade, absorção e eficácia do fármaco. Consequentemente, o uso inadequado de um excipiente pode impactar na etapa biofarmacêutica, sobretudo na sua solubilização e permeação, o que irá refletir na etapa farmacocinética. O Sistema de Classificação Biofarmacêutica (BCS), baseado nas propriedades de solubilidade e permeabilidade, é uma ferramenta que surgiu na década de 1990 para auxiliar na previsão da biodisponibilidade dos fármacos. O BCS classifica o fármaco em quatro categorias, em que os fármacos de Classe I possuem alta solubilidade e permeabilidade, ao passo que os fármacos de Classe IV possuem baixa solubilidade e permeabilidade. A furosemida é classificada, de acordo com o BCS, como fármaco de Classe IV e, desta forma, é uma substância de difícil solubilização e permeação. Os estudos de dissolução in vitro, permitem avaliar o perfil de dissolução do fármaco, mediante simulação de condições fisiológicas do trato gastrintestinal (TGI), para determinar a sua cinética de liberação ou liodisponibilidade, fundamentais para a avaliação da equivalência farmacêutica entre diferentes fabricantes do mesmo medicamento. E com intuito de estimar se há veracidade no uso de excipientes padronizados para formulação do fármaco, bem como se o tamanho da cápsula influencia ou não na dissolução do fármaco, foram manipuladas cápsulas de furosemida número 2 e 4 utilizando os excipientes recomendados pelas literaturas, e posteriormente comparadas com as formulações das farmácias. Neste sentido, o presente trabalho avaliou, por meio de testes farmacopeicos in vitro que determinam a liodisponibilidade do fármaco, se as farmácias de manipulação de Manaus utilizaram os excipientes propostos pelas literaturas técnicas e científicas que garantam a dissolução da furosemida manipulada em cápsulas, bem como os parâmetros de qualidade para as formas farmacêuticas sólidas orais. Nem todas as farmácias cumpriram com os requisitos mínimos de qualidade preconizados pelas farmacopeias. Para avaliar a liberação do fármaco, foram traçados perfis de dissolução da furosemida em tampão fosfato pH 5,8. Os resultados obtidos indicaram diferenças significativas na velocidade e quantidade de furosemida liberada, e apenas 1 farmácia foi aprovada no teste de dissolução, no segundo estágio, e que a cápsula número 2 é a mais indicada. Sendo assim, foi constatado que para os fatores biofarmacêuticos da furosemida sejam melhorados, se faz necessária à adição de excipientes adequados, e que eles exercem influência substancial na velocidade de liberação do fármaco. O uso inapropriado dos seus excipientes afetam a solubilidade e permeabilidade e, por conseguinte, sua biodisponibilidade, prejudicando a resposta clínica e tratamento do paciente.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-09T17:42:46Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:16:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:17:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T19:17:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Cláudia Maria de Melo Silva.pdf: 2215806 bytes, checksum: c9afeecd5c357af061e1b38a8a31df56 (MD5) Previous issue date: 2014-04-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Tuberculosis (TB) is a chronic infection caused by Mycobacterium tuberculosis complex and remains a major worldwide public health problem, leading to almost 1.45 million deaths annually. The state of Amazonas has a high rate incidence of TB, about 68.3/100,000 inhabitants in 2012. Only 5 to 10% of infected individuals develop active TB. It has been suggested that host factors determine the immune response to pathogen. Thus, many immunogenetic researches have demonstrated TB associated genes, but in the north region, research in this field is still rare. This fact motivated the investigation of polymorphisms for IFNG, IL12B, CD80 and CD86 genes, which codify proteins for cellular immune response. Furthermore, IFN- concentration and its relation with genotypes found have been verified. A total of 177 patients and 224 controls (159 contacts and 65 non-contacts) were included in this study and DNA sequencing was performed for genes IFNG (SNP +874A/T and microsatellite +875), IL12B (SNPs +1030C/T, +1188A/C and +1254T/G), CD80 (SNPs -454 C/A, -387 T/C, -232 G/A, -79 C/G, -7T/C, +5C/A and an indel polymorphism -557_-561insCATGA) and CD86 (SNPs +1057G/A and +1079G/A). The IFN-y concentration was determined by enzyme-linked immunoassay. At IFNG, the presence of the allele +874A and the allele with 15 CA repeats were associated with susceptibility to pulmonary TB, while the allele +874T and the allele with 12 CA repeats were associated with protection from pulmonary TB. In addition, an association between genotype CC (SNP +1188A/C at IL12B) and increased risk of pulmonary TB was found. Furthermore, a significant difference between IFN- concentration and genotypes of SNP +1188A/C at IL12B and microsatellite at IFNG was observed, with decrease of IFN-at genotype CC and 15 CA repeats respectively. These outcomes lead to a better understanding of the immune response regulation for TB and help to determine the genetic profile of the Amazon population. Future researches are still needed for a better understanding of the role of other genes involved in the immune response to M. tuberculosis and their influence at the production of citokines like IFN-. / A Tuberculose (TB) é uma infecção crônica causada pelo complexo Mycobacterium tuberculosis sendo um importante problema de saúde pública mundial, levando a aproximadamente 1,45 milhões de mortes a cada ano. O estado do Amazonas possui uma alta incidência desta doença, atingindo 68,3 casos por 100 mil habitantes em 2012. Dos indivíduos infectados pelo bacilo, cerca de 5 a 10% desenvolvem a Tuberculose ativa, sugerindo que há fatores associados ao hospedeiro que determinam o destino da resposta imune ao patógeno. Neste contexto, diversos estudos em imunogenética têm demonstrado genes associados à TB, mas na região norte ainda são raras as pesquisas nesta área, fato que motivou a investigação da frequência dos polimorfismos nos genes IFNG, IL12B, CD80 e CD86, que codificam para proteínas fundamentais na resposta imune celular. Além disso, foi verificado se a concentração de IFN- está relacionada com o genótipo encontrado. Foram incluídas amostras de 177 pacientes e 224 controles (159 contatos e 65 não contatos) e realizado sequenciamento de DNA para os genes IFNG (SNP +874A/T e microssatélite +875), IL12B (SNPs +1030C/T, +1188A/C e +1254T/G), CD80 (SNPs -454 C/A, -387 T/C, -232 G/A, -79 C/G, -7T/C e +5C/A e um polimorfismo indel -557_-561insCATGA) e CD86 (SNPs +1057G/A e +1079G/A). A determinação das concentrações de IFN-foi realizada através de ensaio imunoenzimático. Foi verificada uma associação do gene IFNG, entre a presença do alelo +874A e 15 repetições CA, como fator de risco para TB pulmonar assim como a presença do alelo +874T e 12 repetições CA como fatores de proteção contra TB pulmonar. Também foi encontrada uma associação do genótipo CC, do SNP +1188A/C no gene IL12B, como fator de risco ao desenvolvimento da TB pulmonar. Houve diferença significativa na concentração de IFN-entre os genótipos do SNP +1188A/C no gene IL12B e o microssatélite no gene IFNG, com menor produção no genótipo CC e 15 repetições CA respectivamente. Estes resultados contribuem para o melhor entendimento da regulação na resposta imune à TB e auxilia na determinação do perfil genético da população da região Amazônica. Estudos futuros são necessários para uma melhor compreensão do papel de outros genes envolvidos na resposta imunológica a M. tuberculosis e influência nos níveis de produção de citocinas como IFN-.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-09T18:22:03Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fernanda Torlania Alves Gomes.pdf: 2631196 bytes, checksum: 54e703f505ae72013581a2180b57e832 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:42:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fernanda Torlania Alves Gomes.pdf: 2631196 bytes, checksum: 54e703f505ae72013581a2180b57e832 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T19:43:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fernanda Torlania Alves Gomes.pdf: 2631196 bytes, checksum: 54e703f505ae72013581a2180b57e832 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T19:43:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fernanda Torlania Alves Gomes.pdf: 2631196 bytes, checksum: 54e703f505ae72013581a2180b57e832 (MD5) Previous issue date: 2014-04-14 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / There is a growing demand of using plants from the Amazon to the development of drugs and cosmetics. The Eperua genus belongs to the family Fabaceae and consists of 14 species distributed from Central Amazonia. The oil-resin extracted from the trunk of Eperua has been used in popular medicine similarly to the copaiba oil as healing, antibacterial and antifungal. Very few studies have been conducted in order to test the biological activities of the oil-resin of these species. This study aimed to investigate the effects of the acid fraction of E.oleifera oil-resin on cell proliferation, collagen production in human fibroblasts, inhibition of metalloproteinases and cytotoxicity against malignant cell lines. It was evaluated the effects of the oil-resin on the morphology, proliferation and collagen production in fibroblast cells MRC-5 and FPH. There was a reduction of cell proliferation of fibroblast cells treated with the oil-resin at a concentration of 5 µg/mL. The induction of collagen production in fibroblasts was significant in the treatments performed above 2.5 µg/mL relative to untreated cells. Additionally, the cytotoxicity of the oil was evaluated on three lines and six neoplastic and three non-neoplastic cell line. The results showed significant cytotoxicity against all lines, with IC50 values between (13 - 50 µg/mL). The evaluation of the hemolytic potential of the oil-resin showed high toxicity in erythrocytes of Swiss mice Mus musculus, with IC50 = 38.29 µg/mL. According to the comet assay, the acid fraction of E. oleifera oil-resin induced genotoxicity in MRC-5 cells with DNA damage index between (40 - 60 %) when compared to the negative controls (0-20%). Inhibitory action of the oil-resin was observed in the concentration-dependent manner on collagenase activity, with IC50 = 46.64 µg/mL. The zymography assay testing the activity of MMP - 2 and MMP – 9 from HaCaT cells, showed little significant enzymatic inhibition, because of its not viable treatment in high concentrations. Results showed that the acid fraction of E. oleifera oil-resin showed cytotoxic, genotoxic and hemolytic effects, and collagenase inhibition. Taken together, our data suggests that E. oleifera could be considered as a source of new therapeutic drug, by isolating the active compounds and possibly decreasing the undesirable toxic side effects. / É crescente a demanda do uso de plantas da Amazônia para o desenvolvimento de fármacos e cosméticos. O gênero Eperua, pertencente à família Fabaceae, é constituído por 14 espécies distribuídas pela Amazônia Central. O óleo-resina extraído do tronco das árvores deste gênero tem sido utilizado na medicina popular de modo similar ao da copaíba, como cicatrizante, antifúngico e bactericida. Pouquíssimos estudos foram realizados com o propósito de testar as atividades biológicas do óleo-resina destas espécies. O presente trabalho objetivou investigar os efeitos da fração ácida do óleo-resina de Eperua oleifera na proliferação celular e produção de colágeno em fibroblastos humanos, inibição de metaloproteinases e citotoxicidade contra linhagens celulares tumorais e não tumorais. Foram avaliados os efeitos do óleo na morfologia, proliferação e produção de colágeno em fibroblastos das linhagens FPH e MRC-5. Foi avaliada a citotoxicidade da fração ácida do óleo-resina sobre seis linhagens neoplásicas e três linhagens não neoplásicas. Houve significativa citotoxicidade do óleo contra todas as linhagens avaliadas, com valores de CI50 entre (13 - 50 µg/mL). A indução da produção de colágeno em fibroblastos foi significativa nos tratamentos realizados a partir de 2,5 µg/mL. Houve redução da proliferação celular nos tratamentos com o óleoresina na concentração de 5 µg/mL. A avaliação do potencial hemolítico do óleo indicou toxicidade em eritrócitos de camundongos suiços Mus musculus, com valor de CI50 = 38,29 µg/mL. O teste do cometa indicou que o óleo induziu genotoxicidade nas células MRC-5 com índice de dano no DNA entre (40 – 60%) nas concentrações de 7,5 - 30 µg/mL. Foi observada ação inibitória do óleo-resina na atividade de colagenases de forma concentraçãodependente, com CI50 = 46,64 µg/mL. Ensaios zimográficos da atividade de MMP-2 e MMP-9 de células HaCaT não indicaram importante inibição enzimática quando avaliadas em baixas concentrações do óleo-resina. Os resultados obtidos evidenciaram que a fração ácida do óleoresina de E. oleifera apresentou efeito citotóxico, genotóxico, hemolítico, e inibidor de colagenases. Face ao exposto, nossos dados sugerem que E. oleifera pode vir a ser considerada uma fonte de novos agentes quimioterapêuticos, por meio do isolamento dos compostos ativos e, possível diminuição dos efeitos tóxicos indesejáveis.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-09T19:19:03Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T20:34:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T20:42:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T20:42:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) Previous issue date: 2012-01-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In the northern Brazil, especially in the states of Amazonas and Pará, there is a high incidence of gastric cancer which available treatments are ineffective in most cases. The biflorin, a prenylated ortanaftoquinona obtained from the roots of Capraria biflora L., showed, in previous studies, an inhibition of the tumor growth in vivo and in vitro in several cell lines, without inducing mutagenicity. The ACP02, main cell line used in this work, was established from a primary diffuse gastric adenocarcinoma, removed from the stomach cardia region of a 66-year-old pacient born in Pará. Among the main karyotypes and genetic changes of this lineage are the trisomy of chromosome 8, with amplification of the MYC oncogene, and the deletion of the chromosome 17’s short arm, where the tumor suppressor gene TP53 is located. These characteristics observed in the established line correspond to those observed in the original tumor, what indicates that this line is a good alternative to the study of the human gastric cancer pathophysiology and the drug screening. Considering biflorin’s promising potencial and the necessity to regionalize the study of new anticancer drugs to answer genotype particularities of each group of patients, we evaluated the activity of biflorin on ACP02 through the morphological cell analysis, the cell viability assays, the clonogenic assay, scratch assay, the cell differentiation test by NBT, the evaluation of the MYC status and telomere length by FISH, in 0, 1.0, 2.5 and 5.0 M concentrations, after 24 and 72 hours of treatment. The morphological changes indicate cell death by necrosis, and suggest the occurrence of the differentiation process, due to change in the format of the attached cell. The biflorin showed a cytotoxic activity (IC50 1.92 M) and cytostatic, anticlonogenic and antimotility activities, statistically significant (p<0,05) since 1 M. There was a significant reduction in MYC amplification rate in cells treated with 2.5 e 5 M of the drug (p<0,05), which can explain the occurrence of cellular differentiation process, in view of the physiological role of this gene. This differentiation was confirmed by the results obtained during the NBT test, in which the cells showed the ability to metabolize salt from a treatment of 1.0 M. The telomere length was reduced in cells treated with 5.0 M of biflorina (p<0,05). These results showed that biflorin acts on important targets of anticancer therapy, when used on the gastric line ACP02, at concentrations around 2.5 M, which makes it a promising substance for the treatment of this tumor type. / No norte do Brasil, sobretudo nos Estados do Amazonas e Pará, há alta incidência de câncer gástrico, cujos tratamentos disponíveis são ineficazes, na maioria dos casos. A biflorina, uma ortonaftoquinona prenilada obtida das raízes de Capraria biflora L., demonstrou, em trabalhos prévios, inibir o crescimento tumoral in vivo e in vitro de várias linhagens celulares, sem induzir mutagenicidade. A ACP02, principal linhagem celular utilizada nesse trabalho, foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma gástrico difuso primário, retirado da região cárdia estomacal de um paciente de 66 anos oriundo do Pará. Entre as principais alterações cariotípicas e genéticas dessa linhagem estão a trissomia do cromossomo 8, com amplificação do oncogene MYC, e a deleção do braço curto do cromossomo 17, onde estaria localizado o gene supressor de tumor TP53. Essas características observadas na linhagem estabelecida correspondem àquelas observadas no tumor que a deu origem, evidenciando que tal linhagem é uma boa alternativa para o estudo da fisiopatologia do câncer gástrico humano e triagem de drogas. Tendo em vista o potencial promissor da biflorina e a necessidade de regionalizar o estudo de novas drogas anticâncer para atender as particularidades genotípicas de cada grupo de pacientes, avaliamos a atividade da biflorina sobre ACP02 através da análise morfológica das células, dos ensaios de viabilidade celular, do ensaio clonogênico, do teste de motilidade, do teste de diferenciação celular pelo NBT e da avaliação do status de MYC e comprimento dos telômeros por FISH, nas concentrações de 0, 1,0, 2,5 e 5 M, após 24 e 72h de tratamento. As alterações morfológicas indicaram morte celular por necrose, além de sugerirem a ocorrência de processo de diferenciação, devido à alteração no formato da célula aderida. A biflorina apresentou atividade citotóxica (CI50 1,92 M) e atividades citostática, anticlonogênica e inibidora da motilidade in vitro, estatisticamente significativas (p<0,05) desde a concentração de 1 M. Houve redução significativa da taxa de amplificação de MYC, nas células tratadas com 2,5 e 5,0 M da droga (p<0,05), o que pode justificar a ocorrência de processo de diferenciação celular, tendo em vista o papel fisiológico desse gene. Essa diferenciação foi confirmada pelos resultados obtidos durante o teste do NBT, no qual as células apresentaram capacidade de metabolizar o sal a partir do tratamento de 1,0 M. O comprimento do telômero foi reduzido nas células tratadas com 5,0 M de biflorina (p<0,05). Esses resultados demonstram que a biflorina atua sobre importantes alvos da terapia anticâncer, quando utilizada sobre a linhagem gástrica ACP02 em concentrações em torno de 2,5 M, o que a torna uma substância promissora para o tratamento desse tipo de tumor.

Submitted by Sáboia Nágila (nagila.saboia01@gmail.com) on 2016-07-29T14:48:25Z No. of bitstreams: 1 Dissertação-Michele Alves Sanches.pdf: 930400 bytes, checksum: 3b455ac91457a2d15e86539fbdc9d3e3 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:29:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação-Michele Alves Sanches.pdf: 930400 bytes, checksum: 3b455ac91457a2d15e86539fbdc9d3e3 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:32:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação-Michele Alves Sanches.pdf: 930400 bytes, checksum: 3b455ac91457a2d15e86539fbdc9d3e3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T13:32:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação-Michele Alves Sanches.pdf: 930400 bytes, checksum: 3b455ac91457a2d15e86539fbdc9d3e3 (MD5) Previous issue date: 2016-03-15 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O homem tem a necessidade de misturar a água com substâncias insolúveis em suas atividades diárias e industriais. Os surfactantes, derivados de petróleo, têm sido utilizados com essa finalidade, no entanto, esses apresentam problemas quanto a sua toxicidade e biodegradabilidade. Os biossurfactantes de origem microbiana são uma alternativa para essa situação, porém, o seu custo de produção é alto, e em parte, devido aos substratos que são utilizados nos bioprocessos. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a utilização de resíduos como substrato para produção de biossurfactantes por fungos filamentosos isolados de amostras de solo da região Amazônica. Foram realizados bioprocessos com cinco isolados fúngicos sabidamente produtores de biossurfactantes, com a finalidade de investigar qual deles produziria em menor tempo. Em seguida, foi avaliada a possibilidade de utilização de resíduos (cascas de tucumã, pupunha, banana, cupuaçu e também o óleo pós-fritura) como subtrato para o bioprocesso com o isolado selecionado. Os fatores que influenciam na produção do biossurfactante foram avaliados por planejamento fatorial. O fungo Fusarium oxysporum 87-2LIVI produziu altos níveis de biossurfactantes em três dias de bioprocesso. E também se destacou devido a alta produção de biossurfactante utilizando a casca de pupunha como substrato. O pH e extrato de levedura foram os fatores mais importantes relacionados a produção de biossurfactante por esse isolado. Desta forma, o presente trabalho demonstrou que isolados da espécie F. oxysporum, isolados de solo Amazônico, são potenciais produtores de surfactantes e que resíduos Amazônicos, em especial casca de pupunha, possui potencial para ser utilizado como substrato. / Human being has the need to mix water with insoluble substances in their daily and industrial activities. Surfactants derived from petroleum have been used for this purpose, however, they have problems such as their toxicity and biodegradability. Biosurfactants from microbial origin are an alternative to this, on the other hand, its production cost is high due to the substrates that are used in the bioprocesses. In this context, the aim of this study was to investigate the use of wastes as a substrate for the production of biosurfactants by filamentous fungi isolated from soil samples in Amazon region. Bioprocess were conducted with five known fungi isolates producers of biosurfactants in order to investigate which of them would produce in a shorter time. Then, we evaluated the possibility using wastes of peel from tucumã, peach palm, banana, cupuacu and also the post-fry oil as substrate for the bioprocess with the selected isolated. Factors that influence the production of biosurfactant were evaluated by factorial design. As a result, the fungus Fusarium oxysporum 87-2LIVI produced high levels of biosurfactants in three days of bioprocess. Moreover, this specie also showed highlight due to high biosurfactant production using peach palm peel as substract. The pH and yeast extract were the most important factors related to production of biosurfactant by this isolated. Thus, the present study showed isolated of F. oxysporum specie from Amazonian soil is potential producer of surfactants and also Amazon waste, particularly, peel of peach palm has the potential to be used as a bioprocess substrate for production of biosurfactant.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-02T14:38:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Reginaldo S Santos.pdf: 2292321 bytes, checksum: 21c823de4cc5ecfca659af9a8674fccb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-02T14:39:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Reginaldo S Santos.pdf: 2292321 bytes, checksum: 21c823de4cc5ecfca659af9a8674fccb (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-02T14:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Reginaldo S Santos.pdf: 2292321 bytes, checksum: 21c823de4cc5ecfca659af9a8674fccb (MD5) Previous issue date: 2017-12-20 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Introduction: The cytomegalovirus (CMV) or herpesvirus - 5 (HHV – 5) is a human herpesvirus, being a common infection around the world, mainly in poor regions without sanitation and proper hygiene conditions. It’s an enveloped virus and also has the biggest genome between viruses that infect animal species. Objective: To estimate the prevalence of the infection by cytomegalovirus in Brazil and in the Metropolitan Region of Manaus. Methods: Two studies were made. A study conducted the systematic review of studies published in Brazil that estimated the prevalence of infection by cytomegalovirus. The other study estimated the prevalence of infection by cytomegalovirus through serological analysis of anti-CMV immunoglobulins IgG and IgM of the blood collected from individuals living in the Metropolitan Region of Manaus. Results: It was observed on the systematic review that the prevalence of infection by cytomegalovirus in Brazil was 56%, (CI 95% 27-85%). The data showed a high level of heterogeneity (I² = 99.98%). The study of seroprevalence in the Metropolitan Region of Manaus identified a prevalence of 89.5% of seroprevalence to IgG and 1.9% to IgM. Conclusion: The difference founded in the prevalence of the two studies suggests a difference in the populations studied. The infection by cytomegalovirus tends to be more common in Metropolitan Region of Manaus than in other brazilian contexts. / Introdução: O citomegalovírus (CMV) ou herpesvírus – 5 (HHV-5) é um herpesvírus humano, e é uma infecção comum em todo o mundo, principalmente em regiões pobres sem saneamento e com condições inadequadas de higiene. Ele é um vírus envelopado e tem o maior genoma entre os vírus que infectam espécies animais. Objetivo: Estimar a prevalência da infecção por citomegalovírus no Brasil e na Região Metropolitana de Manaus. Métodos: Foram realizados dois estudos. Um estudo fez a revisão sistemática dos estudos publicados no Brasil que estimavam a prevalência da infecção por citomegalovírus. Outro estudo estimou a prevalência da infecção por citomegalovírus por meio de análise sorológica das imunoglobulinas IgG e IgM anti-CMV do sangue coletado de indivíduos residentes na Região Metropolitana de Manaus. Resultados: Na revisão sistemática observou-se que a prevalência da infecção por citomegalovírus no Brasil foi 56% (IC 95% = 27-85%). O dado apresentou elevada heterogeneidade (I2 = 99,98%). O estudo de soroprevalência na Região Metropolitana de Manaus identificou uma prevalência de 89,5% de soropositividade para IgG e 1,9% para IgM. Conclusão: A diferença encontrada na prevalência dos dois estudos sugere diferença nas populações estudadas. A infecção pelo citomegalovírus tende a ser mais comum na Região Metropolitana de Manaus do que em outros contextos brasileiros.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T18:34:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Jakeline VERSÃO Final .pdf: 3132042 bytes, checksum: 7e59d79ba4910a95abaeddc32c167c64 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T18:34:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Jakeline VERSÃO Final .pdf: 3132042 bytes, checksum: 7e59d79ba4910a95abaeddc32c167c64 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T18:34:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação Jakeline VERSÃO Final .pdf: 3132042 bytes, checksum: 7e59d79ba4910a95abaeddc32c167c64 (MD5) Previous issue date: 2017-01-23 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The emergence of Plasmodium strains resistant to antimalarials commonly used has motivated the search for new antimalarial drugs. Natural products isolated from Amazonian plants and their semi-synthetic derivatives have been shown to be promising sources of antimalarial compounds. Several plants of the genus Xylopia (family Annonaceae) are used by folk medicine for the treatment of malaria and its symptoms. The genus presents a great variety of chemical compounds with important pharmacological properties, emphasizing alkaloids, terpenes and acetogenins. The present work has the objective of discovering new antimalarials through analysis of the chemical composition and evaluation of the antimalarial activity of Xylopia amazonica RE Fries, starting from previous studies carried out by the Laboratory of Active Principles of the Amazon (LAPAAM) Antimalarial activity in crude extracts. For the accomplishment of the work, fine branches and leaves of X. amazonica were collected in the Adolpho Ducke Forest Reserve. The thin branches and leaves were taken to LAPAAM / INPA, where they were weighed, dried and ground in a knife mill. Afterwards, extractions were carried out by means of maceration using ultrasound and solvents in order of increasing polarity, in addition to acid-base extraction to obtain extracts rich in alkaloids. The extracts obtained from in vitro antimalarial tests performed at the Malaria and Dengue Laboratory of the National Research Institute of the Amazon were submitted. Finally, chromatographic techniques were applied to the extracts considered active for the isolation and / or purification of fractions and / or substances and spectroscopic techniques for the identification or structural elucidation of the active substances. Using high performance liquid chromatography (HPLC) two active substances (nornantenin and anonaine) were isolated against chloroquine resistant P. falciparum K1 strains with IC50 of 5.23 g / mL and 4.8 g / mL, respectively. / O surgimento de cepas de Plasmodium resistentes aos antimaláricos habitualmente utilizados tem motivado a busca por novas drogas antimaláricas. Os produtos naturais isolados de plantas amazônicas e seus derivados semissintéticos têm se mostrado fontes promissoras de compostos antimaláricos. Diversas plantas do gênero Xylopia (família Annonaceae) são utilizadas pela medicina popular para o tratamento de malária e seus sintomas. O gênero apresenta uma grande variedade de compostos químicos com importantes propriedades farmacológicas, destacando-se os alcaloides, terpenos e as acetogeninas. O presente trabalho tem como objetivo a descoberta de novos antimaláricos através de análise da composição química e avaliação da atividade antimalárica de Xylopia amazonica R.E Fries, tendo como ponto de partida estudos prévios realizados pelo grupo de pesquisa Laboratório de Princípios Ativos da Amazônia (LAPAAM) no Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA) evidenciando atividade antimalárica em extratos brutos. Para a realização do trabalho foram coletados galhos finos e folhas de X. amazonica na Reserva Florestal Adolpho Ducke. Os materiais vegetais foram levados ao LAPAAM/INPA, aonde foram pesados, secos e moídos. Foram realizadas extrações por meio de maceração com uso de ultrassom e solventes em ordem de polaridade crescente, além de extração ácido-base para a obtenção de extratos ricos em alcaloides. Submeteram-se os extratos obtidos a testes antimaláricos in vitro realizados no Laboratório de Malária e Dengue do INPA. Por fim, aplicaram-se técnicas cromatográficas aos extratos considerados ativos para o isolamento e/ou purificação de frações e/ou substâncias e técnicas espectroscópicas para a identificação ou elucidação estrutural das substâncias ativas. Utilizando Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) isolaram-se duas substâncias (nornantenina e anonaina) ativas contra cepas K1 de P. falciparum resistentes a cloroquina com CI50 de 5.23 μg/mL e 4.8 μg/mL, respectivamente.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:24:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-03T19:25:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T19:25:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2016-08-31 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The species Plasmodium falciparum and P. vivax are important etiological agents that cause human malaria and represent one of the greatest challenges for public health in the world. These parasites present resistance to the antimalarials presently available for treatment. The main classes of antimalarials used in the world, namely the quinolone alkaloids and derivatives of artemisinin, owe their origins to the natural products quinine and artemisinin, isolated from antimalarial plants. Natural products isolated from antimalarial plants from the Amazon are promising sources of antimalarial substances. This work aimed to evaluate the in vitro susceptibility of field isolates of P. falciparum and P. vivax to extracts and substances isolated from antimalarial plants from the Brazilian Amazon. These Plasmodium field isolates represent the genotypes and phenotypes of the parasites that presently circulate in this region. The isolated compounds ellipticine (1, alkaloid indólico), O,O-diacetyl-4-nerolidylcatechol (2, terpene-phenylpropanoid), neosergeolide (3, quassinoid), 6α-acetoxygedunina (4) e 6α- hidroxydeacetilgedunina (5, limonoids) and the crude extracts of the aerial parts of Andropogon leucostachyus (methanol) and the branch ethanol and leaf chloroform extracts of Xylopia amazônica. These samples had previously been characterized in vitro against standardized strains of P. falciparum and were re-evaluated in the present study against the standardized K1 and 3D7 strains for comparative purposes. Thirty-two P. vivax field isolates and 2 previously stabilized P. falciparum field isolates (MRV and AL) were used. The effects of the isolated substances, extracts and commercial antimalarial standards were determined by applying the microtest and the DELI (Double-site enzyme-linked immunodetection) test. The median inhibitory concentration (IC50) was determined against P. falciparum strains MRV and AL for 1, 2, 3, 4 and 5 (IC50 0.48-0.77; 4.2-4.6; 0.004-0.01; 7.0-6.2 and 6.1-5.7 μM, respectively) and A. leucostachyus and X. amazônica ethanol and chloroform extracts IC50 7.0-7.2, 9.8-9.5 and 7.8-7.4 μg/mL, respectively). Of 32 P. vivax field isolates, 24 exhibited curves from which IC50 were interpretable. Twelve of these P. vivax isolates were evaluated using the microtest and exhibited sensitivity to 1, 2, 3, 4 and 5 (IC50 2.19; 4.01; 0.13; 5.32 and 5.76 μM, respectively) and A. leucostachyus and X. amazônica ethanol and chloroform extracts (IC50 14.0, 15.7 and 13.6 μg/mL, respectively). The 12 P. vivax field isolates evaluated using the DELI-test also exhibited sensitivity to 1, 2 and 3 (IC50 4.7; 9.0; and 0.01 μM, respectively). The field isolates exhibited good susceptibility to the natural products tested in some cases. Substance 3 was the most active against P. falciparum (IC50 0,004-0,01 μM) and P. vivax (IC50 0,01-0,13 μM). The P. vivax field isolates were only a little less sensitive than the standardized strains of P. falciparum used in previous studies of these same substances and extracts. These results show that P. vivax and P. falciparum field isolates exhibit different sensitivity profiles with respect to the natural products evaluated as well as to commerciallyavailable antimalarials. Despite the larger IC50 values exhibited against P. vivax versus P. falciparum field isolates, the natural products investigated exhibited good antiplasmodial activity against P. vivax. / As espécies de Plasmodium falciparum e P. vivax são entes etiológicos importantes, causadores da malária humana e representam um dos maiores desafios para a saúde pública no mundo. Estes parasitas têm apresentado resistências aos antimaláricos atualmente disponíveis para tratamento. As principais classes de antimaláricos utilizados no mundo, os alcaloides quinolínicos e os derivados da artemisinina, devem suas origens às substâncias quinina e artemisinina, substâncias naturais isoladas de plantas antimaláricas. Os produtos naturais isolados de plantas da Amazônia são fontes promissoras de substâncias antimaláricas. Este trabalho objetivou a avaliação da susceptibilidade in vitro de isolados de campo de P. falciparum e P. vivax a extratos e substâncias isoladas de plantas antimaláricas da Amazônia brasileira. Estes isolados de campo de P. falciparum representam o genótipo e fenótipo dos parasitas que circulam nessa região atualmente. Foram estudadas as substâncias isoladas elipticina (1, alcaloide indólico), O,O-diacetil-4-nerolidilcatecol (2, terpeno-fenilpropanoide), neosergeolida (3, quassinoide), 6α-acetoxigedunina (4) e 6α-hidroxi-desacetilgedunina (5 limonoides) e, os extratos brutos a partir de parte aérea de Andropogon leucostachyus (metanólico) e dos galhos e folhas de Xylopia amazônica (etanólico e clorofórmico, respectivamente). Esses produtos naturais já haviam sido caracterizados in vitro contra as cepas padronizadas de P. falciparum, e foram reavaliados no presente estudo contra cepas padronizadas K1 e 3D7 para fins de comparação. Foram utilizadas 32 isolados de campo de P. vivax e 2 isolados de campo de P. falciparum, esses últimos previamente estabilizados (MRV e AL). A determinação do efeito das substâncias isoladas, extratos e padrões de antimaláricos comerciais foi realizada aplicando-se o microteste e o DELIteste (Double-site enzyme-linked immunodetection). A concentração inibitória 50% (CI50) foi determinada contra as cepas MRV e AL de P. falciparum para 1, 2, 3, 4 e 5 (CI50 0,48-0,77; 4,2-4,6; 0,004-0,01; 7,0-6,2 e 6,1-5,7 μM, respectivamente) e os extratos de A. leucostachyus, X. amazônica (etanol e clorofórmio), (CI50 7,0-7,2; 9,8-9,5 e 7,8-7,4 μg/mL, respectivamente). Dos 32 isolados de P. vivax, 24 isolados apresentaram curvas interpretáveis da CI50, 12 desses isolados de P. vivax testados pelo microteste exibiram sensitividade a 1, 2, 3, 4 e 5 (CI50 2,19; 4,01; 0,13; 5,76 e 5,32 μM, respectivamente) e os extratos de A. leucostachyus, X. amazônica (etanol e clorofórmio), (CI50 14,0; 15,7 e 13,6 μg/mL, respectivamente). Os 12 isolados de P. vivax testados pelo DELI-teste exibiram sensitividade a 1, 2 e 3 (CI50 4,7; 9,0; e 0,01 μM, respectivamente). Os isolados de campo apresentaram boa susceptibilidade aos produtos naturais testados em alguns casos, sendo 3 a substância mais ativa contra P. falciparum (CI50 0,004-0,01 μM) e P. vivax (CI50 0,01-0,13 μM). Os isolados de P. vivax foram pouco menos sensíveis que as cepas padronizadas de P. falciparum previamente estudadas frente às mesmas substâncias e extratos. Estes resultados mostram que os isolados de campo de P. vivax e P. falciparum apresentam perfis de sensibilidade diferentes aos produtos naturais e também aos antimaláricos comerciais. Embora os valores de CI50 dos produtos naturais sejam maiores que aqueles encontrados para o P. falciparum, estas substâncias apresentaram boa atividade frente o P. vivax.

Submitted by Gabriele Rodrigues (gabriele_r.valentim@hotmail.com) on 2016-09-02T14:38:10Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Nayana Yared Batista.pdf: 1996753 bytes, checksum: ddbc60f29af98e22319bafb8b3f957a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-13T12:24:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Nayana Yared Batista.pdf: 1996753 bytes, checksum: ddbc60f29af98e22319bafb8b3f957a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-13T12:29:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Nayana Yared Batista.pdf: 1996753 bytes, checksum: ddbc60f29af98e22319bafb8b3f957a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T12:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Nayana Yared Batista.pdf: 1996753 bytes, checksum: ddbc60f29af98e22319bafb8b3f957a0 (MD5) Previous issue date: 2014-08-15 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The use of natural products for the treatment of diseases is increasing among people and, over the years, it has been shown that certain plants may present dangerous substances, particularly when associated with other drugs. Therapeutic failure or intoxication of these associations are likely to occur and currently caught great interest from the scientific community due to serious problems related to this process. The majority of the interactions are based on interference in the metabolism step through induction or inhibition of key enzymes. In this study, two species, Paullinia cupana (guarana) and Eugenia punicifolia (pedra-ume-caá) were selected, for the evaluation of its effects on the pharmacokinetics of markers of enzyme activity of cytochrome P450 in rats since they are widely used by the Amazonian population and with great biotechnological potential. To ensure the quality of Raw Material Plant (RMP), quality control tests previously described by the Brazilian Pharmacopoeia were performed, such as water and extractives content, presence of impurities, among others. In relation to in-vivo experiments, animals were pretreated with the extract of guarana seeds (14 days) or extract of pedra-ume-caá (single dose), and immediately after treatment, received theophylline and midazolam, respectively. Blood samples were collected at pre-determined times through a cannula inserted into the left carotid artery. Theophylline and midazolam plasma levels were quantified using previously validated methods employing HPLC-DAD technique, for determination of pharmacokinetic parameters such as plasma half-life, clearance, area under the curve, among others. Analysis of variance was applied to check for differences between groups by analysis of pharmacokinetic parameters obtained and the level of significance was set at 5% (p <0.05). The results for these species as quality control are in accordance with the parameters described in the Brazilian Pharmacopoeia, ensuring the quality of the constituents present in the extracts and safety in handling them. In pharmacokinetic analysis, a single dose of the extract E. punicifolia showed significant change in the kinetics of midazolam, indicating a probable enzyme inhibition, and may interfere in the pharmacological response of drugs metabolized by CYP3A. The subchronic treatment with the solution of P. cupana showed a significant change in the kinetics of theophylline, indicating a probable enzyme induction, and may interfere with the pharmacological response of drugs metabolized by CYP1A2. Thus, this study demonstrated changes in the pharmacokinetics of drugs in rats caused by the use of natural products and, therefore, additional studies should be conducted to elucidate the phenomenon observed. / O uso de produtos naturais no tratamento de doenças é cada vez mais frequente pela população e, ao longo dos anos, tem sido mostrado que determinadas plantas podem apresentar substâncias potencialmente tóxicas, principalmente quando associadas com outros fármacos. Falhas terapêuticas ou surgimento de intoxicações decorrentes dessas associações são possíveis de ocorrer e despertam, atualmente, grande interesse na comunidade científica devido aos sérios problemas relacionados a este processo. A grande maioria das interações é baseada em interferências na etapa de metabolismo através da indução ou inibição de enzimas-chave na farmacocinética. Neste projeto, foram selecionadas duas espécies vegetais, Paullinia cupana (guaraná) e Eugenia punicifolia (pedra-ume-caá), largamente utilizadas pela população Amazônica e com grande potencial biotecnológico, para avaliação de seus efeitos na farmacocinética de marcadores da atividade enzimática do citocromo P450 em ratos. Para assegurar a qualidade da Matéria Prima Vegetal (MPV), foram realizados ensaios de controle de qualidade, previamente descrito pela Farmacopéia Brasileira, como teor de umidade e extrativos, presença de impurezas, entre outras. Com relação à experimentação in vivo, os animais foram pré-tratados com o extrato das sementes de guaraná (14 dias) ou extrato das folhas de pedra-ume-caá (dose única) e, logo após o tratamento, receberam teofilina e midazolam, respectivamente. As amostras sanguíneas foram coletadas em tempos pré-determinados através de uma cânula introduzida na artéria carótida esquerda. Os níveis de teofilina e midazolam no plasma foram quantificados através de métodos previamente validados empregando a técnica de HPLC-DAD, a partir dos quais foram determinados os parâmetros farmacocinéticos, tais como, meia vida plasmática, clearence, área sob a curva, entre outros. A análise de variância foi aplicada para verificação de diferenças entre os grupos, obtidas a partir dos parâmetros farmacocinéticos, com nível de significância fixado em 5% (p < 0,05). Os resultados encontrados para essas espécies quanto a controle de qualidade estão em acordo com os parâmetros descritos na Farmacopéia Brasileira, garantindo assim a qualidade dos constituintes presentes nos extratos e segurança na manipulação dos mesmos. Na análise farmacocinética, a administração única do extrato E. punicifolia apresentou significativa alteração na cinética do midazolam, indicando uma provável inibição enzimática, podendo interferir na resposta farmacológica de medicamentos metabolizados pela CYP3A. A administração subcrônica da solução aquosa de P. cupana provocou significativa alteração na cinética da teofilina, indicando uma provável indução enzimática, podendo interferir na resposta farmacológica de medicamentos metabolizados pela CYP1A. Assim, este estudo verificou alterações na cinética de fármacos em ratos causadas pelo uso de produtos de origem vegetal e, portanto, estudos adicionais devem sem realizados para a elucidação dos fenômenos observados.