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Prevalência da infecção pelos Polyomavirus JC e BK em pacientes com Doença Renal Crônica e transplantadosPIRES, Elizabete Pereira 30 September 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / O presente estudo teve como objetivo realizar a investigação molecular da infecção pelos Poliomavírus JC e BK em pacientes com Doença Renal Crônica (DRC) terminal, transplantados e em indivíduos sem DRC. Foram testadas 295
amostras de urina, que após a extração de DNA, foram submetidas à
amplificação de um fragmento de 173 pb do gene do antígeno-T de
Polyomavirus por meio da PCR seguida pela análise de RFLP, utilizando a endonuclease de restrição BamHI, na qual foi detectado 17,6% (52/295) de
infecção por Polyomavirus, sendo 3,9% (4/102) nos pacientes com DRC,
30,5% (18/59) nos pacientes transplantados e 22,4% (30/134) nos
assintomáticos. A prevalência da infecção pelo BKV foi de 88,9% (16/18) nos
transplantados e de 10,0% (3/30) nos assintomáticos, não sendo detectada a
infecção pelo BKV em pacientes com DRC. A prevalência de infecção pelo JCV
foi de 3,9% (4/102) nos pacientes com DRC, de 11,1% (2/16) no transplantados
e de 90,0% (27/30) nos assintomáticos. O risco de infecção por BKV foi
determinada ser 72 vezes maior em pacientes transplantados do que em
assintomáticos. A baixa frequência de infecção encontrada entre os pacientes
com DRC pode estar relacionada ao fato de que esses pacientes apresentam
uma elevada taxa de excreção de uréia na urina, assim como, baixo volume e
densidade urinária, podem ser outros dois fatores contribuintes para a ausência
de amplificação por estarem associados à baixa carga viral presente. De
acordo com estes resultados, sugere-se que a investigação da infecção por
Polyomavirus deve ser realizada, rotineiramente, nos pacientes pré e póstransplante,
assim como nos doadores de órgãos, uma vez que a infecção por
BKV tem sido associada com rejeição de enxerto em transplante de rins. / This study aimed to perform molecular studies of infection by Polyomavirus JC
and BK among patients with chronic renal disease (CRD), kidney transplanted
recipients and asymptomatic subjects. We tested a total of 295 urine samples.
After DNA extraction from urine, samples were subjected to PCR to amplify a
fragment of 173 bp of the antigen-T gene of the Polyomavirus followed by RFLP
analysis using the restriction endonuclease BamHI. Infection by Polyomavirus
was detected in 17.6% (52/295) of the subjects, being 3.9% (4/102) in the DRC,
30.5% (18/59) among renal transplanted recipients and 22.4% (30/134) among
asymptomatic subjects. The prevalence of BKV infection was 88.9% (16/18)
among renal transplant recipients and 10.0% (3/30) among asymptomatic, but it
was not detected BKV infection among CRD. The prevalence of JCV infection
was 3.9% (4/102) among chronic renal patients, 11.1% (2/16) among
transplanted and 90.0% (27/30) in the asymptomatic individuals. The risk of
BKV infection was 72 times higher in renal transplanted patients than in
asymptomatic subjects. The low frequency of infection found among patients
with chronic renal disease may be related to the fact that these patients have a
high rate of urea excretion in the urine. Furthermore, the low urine volume and
low presence of cells from urine may be two factors contributing to the absence
of amplification and consequently associated with a low viral load. According to
these results, it is suggested that the investigation of Polyomavirus infection
should be performed routinely in patients before and after transplantation, as
well as in organ donors, since the BKV infection has been associated with graft
rejection in kidney transplant.
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Prevalência da infecção pelos Vírus da hepatite B e C entre indivíduos portadores do HIV-1 e/ou com SIDA/AIDS na cidade de Belém-PACHAVES, Maria Helena Pessoa 31 May 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / A Organização Mundial de Saúde (OMS) calcula que existam mais de 350 milhões de pessoas no mundo infectadas de forma crônica pelo Vírus da hepatite B (VHB) e cerca de 180 milhões de pessoas com o Vírus da hepatite C (VHC), além de, aproximadamente, 40 milhões de pessoas vivendo com o HIV-1. Estima-se que entre dois e quatro milhões são co-infectados pelo VHB e que entre quatro e cinco milhões são co-infectados pelo VHC. A partir dessas informações, o presente estudo teve como objetivo avaliar a soroprevalência da co-infecção pelo VHB e pelo VHC em pessoas portadoras do HIV-1 e/ou com SIDA/AIDS da cidade de Belém, entre os usuários da URE-DIPE. As amostras foram testadas para a presença de marcadores da infecção pelo VHB (HBsAg, HBeAg, anti-HBs, anti-HBc, anti-HBc/IgM e anti-HBe) e VHC (anti-VHC) por meio de ensaios imunoenzimáticos. O grupo estudado foi composto por 170 homens (56,7%) e 130 mulheres (43,3%), sendo que 30% não chegaram a cursar o primeiro grau completo e apresentam renda familiar de até 3 salários mínimos. A co-infecção HIV-1/VHB foi detectada em 91 (30,3%), cinco (1,7%) apresentaram co-infecção HIV-1/VHC, e seis (2%) mostraram-se infectados pelo VHB e VHC. Em sete (2,7%), foi possível mostrar evidência de vacinação prévia ao VHB. Não foi possível mostrar diferença estatística entre os valores de carga viral e de contagem de linfócitos T CD4+ e linfócitos T CD8+ com a presença de anticorpos na duplo (HIV-1/VHC) e na triplo infecção (HIV-1/VHB/VHC), porém foi mostrado significância estatística entre os valores de carga viral e contagem de linfócitos T CD8+ entre os co-infectados HIV-1/VHB. / The World Health Organization (WHO) estimates that 350 million persons are currently infected with Hepatitis B virus, 180 millions carry Hepatitis C virus and that approximately 40 millions are persistently infected with Human immunodeficiency virus 1. It is thought that two to four million of the HIV-1 infected persons are co-infected with HBV and that four to five millions carry also HCV. The present study aimed to estimate the seroprevalence of HBV and HCV co-infections among persons who are HIV-1 infected and/or presenting AIDS, residing in Belem, among those attended in a Reference Unit (URE-DIPE) of the State Health Department. Serum samples were tested for the presence of HBV (HBsAg, HBeAg, anti-HBs, anti-HBc, anti-HBc/IgM and anti-HBe) and HCV (antibodies to HCV) infections using enzyme immuno assays. The population group involved 170 males (56.7%) and 130 females (43.3%), 30% of them without the first grade of education and a familial income of no more than three minimum wages. HIV-1/HBV co-infection was detected in 91 individuals (30.3%), five (1.7%) were HIV-1/HCV co-infected and six (2%) showed evidences for previous infections with the three agents. Vaccination with HBV was detected in seven individuals (2.7%). There was no statistical significance between the association of values of viral load and T CD4+ and CD8+ lymphocyte counts with antibodies to either HIV-1/HCV or HIV-1/HBV/HCV infected individuals. Statistical significance was shown to occur between T CD8+ lymphocyte counts and the presence of HIV-1/HBV co-infection.
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Infecção experimental em hamster dourados (Mesocricetus auratus) e caracterização genética parcial de cinco Phlebovirus (Bunyaviridae) do Complexo Candiru isolados na Amazônia brasileiraNUNES NETO, Joaquim Pinto 07 December 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os flebovírus (família Bunyaviridae; gênero Phlebovirus), possuem importância considerável em saúde publica, pois podem causar uma variedade de síndromes clínicas. Na região amazônica brasileira até o momento já foram isolados 23 flebovírus sendo que quatro se destacam por terem sido isolados de humanos: Virus Alenquer, Virus Candiru, Virus Morumbi e Virus Serra Norte. Estes mais o Virus Itaituba, isolado de Didelphis marsupialis, fazem parte do Complexo Candiru (grupo Candiru) e foram utilizados para estudos de caracterização genética e de infecção experimental em hamsters dourados (Mesocricetus auratus). Os Hamsters mostraram-se suscetíveis a infecção por esses flebovírus, apesar de não terem apresentado sinais de doença. A análise histopatológica demonstrou aspectos lesionais no fígado, nos rins, no baço, nos pulmões e no sistema nervoso central, sendo as lesões mais intensas no fígado comprovadas pela presença dos antígenos virais empregando a técnica de imunohistoquímica. A análise das seqüências nucleotídicas parciais dos segmentos PRNA e MRNA obtidas para os cinco flebovírus estudados mostraram maior similaridade genética entre si do que com outros membros do gênero Phlebovirus. Sendo as mesmas geneticamente mais relacionadas ao Virus Punta Toro. Filogeneticamente, independentemente do segmento genômico analisado, os cinco flebovírus constituem um grupo monofilético, sendo que a análise pelo método de máxima verossimilhança demonstrou diferentes origens evolutivas para os segmentos de RNA o que sugere a ocorrência de rearranjo genético em natureza entre estes cinco flebovírus amazônicos. / The phleboviruses (family Bunyaviridae, genus Phlebovirus) are of considerable public health importance, due to their association with human diseases causing different clinical syndromes. In the Brazilian Amazon region, 23 phlebovirus were presently isolated, four of them have been isolated from humans: Alenquer virus, Candiru virus, Morumbi virus, and Serra Norte virus. These and Itaituba virus, isolated from Didelphis marsupialis belong to the Candiru Complex (Candiru group) and were used for studies on genetic characterization and experimental infection using gold hamsters (Mesocricetus auratus) as animal model. Hamsters showed to be susceptible to infection by these viruses; however signs of disease were not observed. The histophatological analysis demonstrated damages in the liver, kidneys, lung, and central nervous system. More intense lesions were observed in the liver which were characterized by the presence of viral antigens detected by immunohistochemistry assay. The analysis of the partial SRNA and MRNA nucleotide sequences obtained for the five studied phleboviruses showed more similarity among them than with other members of the genus Phlebovirus.More over, is was demonstrated that these phleboviruses were more genetically related to Punta Toro virus. Phylogenetically, regardless of the genome segment analyzed, the five phleboviruses constitute a monophyletic group. In addition the analysis by maximum likelihood method demonstrated different evolutionary origins for the RNA segments, suggesting the occurrence of natural genetic reassortment among the five Amazonian phleboviruses.
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Perfil soroepidemiológico da Rubéola no período pré-vacinal (1989 a 1999) e pós-vacinal (2000 a 2005) de pacientes referenciados ao Instituto Evandro ChagasMORAES, Marluce Matos de 29 October 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / A Rubéola é uma virose exantemática geralmente de evolução benigna, mas quando adquirida durante a gestação, pela teratogenicidade do vírus, pode provocar a Síndrome da Rubéola Congênita caracterizada por malformações fetais e aborto
espontâneo. Com o objetivo de descrever o perfil soroepidemiológico da Rubéola
de pacientes referenciados ao Instituto Evandro Chagas/SVS/MS nos períodos prévacinal(1989 a 1999) e pós-vacinal (2000 a 2005), foi realizado estudo retrospectivo do banco de dados de 34.221 amostras, cujos testes sorológicos foram analisados
através da técnica de pesquisa de IgM e IgG por ELISA com kits do laboratório
DADE BEHRING®. A taxa de infecção encontrada foi de 17,2% no período prévacinal
e de 4,0% no pós-vacinal. Entre a sintomatologia apresentada no período
pré-vacinal, a linfadenopatia teve maior taxa com 38,4% e no pós-vacinal a artralgia
com 11,3%. Nas mulheres em idade fértil, a média da taxa de imunes foi de 78,3%
e 84,4% no período pré e pós-vacinal, respectivamente. A taxa de infecção em
gestantes no período pré-vacinal foi de 9,3% e no pós-vacinal 1,6%. Os recémnascidos
infectados corresponderam a 2,1% no período pré e 1,0% no período pósvacinal
nesses, houve predomínio de catarata e cardiopatia isoladas ou em
associação. Foi concluído que houve diferença significante entre as frequências de
todos os segmentos estudados, em relação aos períodos pré e pós-vacinal,
confirmando a eficácia da vacina na prevenção da Rubéola e da SRC, tal fato realça a necessidade de se ampliar as coberturas vacinais para impedir a circulação do VR no país, cumprindo assim o acordo de eliminação até o ano 2010. / Rubella is a usually benign exanthematic virus infection. However, it can cause
Congenital Rubella Syndrome characterized by fetal malformation and spontaneous
abortion when acquired during pregnancy due to its teratogenicity. A restrospective
study of a database of 34.221 samples was performed in order to describe the
seroepidemiological profile of rubella in patients referred to the Evandro Chagas
Institute/SVS/MS, during the vaccinal period (1989 -1999) and post-vaccinal (2000-
2005). The serological tests were analyzed through research of IgM and IgG by ELISA
with DADE BEHRING® laboratory kits. The infection rates found were 17,2% and
4,0% during the pre- and post-vaccinal periods, respectively. Among the symptoms
observed during the pre-vaccinal period, lymphadenopathy presented the highest
rate (38,4%), whereas during the post-vaccinal period arthralgia was the most
prevalent (11,3%). In women in reproductive age, the mean immunity rate was
78,3% and 84,4% during the pre- and post-vaccinal periods, respectively. The
infection rate in pregnant women was 9,3% during the pre-vaccinal period and
1,6% during the post-vaccinal period. The total of infected newborns in the prevaccinal
period was 2,1%, and 1,0% in the post-vaccinal period. Predominance
of cataract and cardiopathy, isolated or in association, was observed among the
newborns. It was concluded that there was a significant difference between the
frequency of all studied segments regarding the pre- and post-vaccinal periods,
which confirmed the effectiveness of the vaccine in the prevention of Rubella
and Congenital Rubella Syndrome. These data highlight the need to increase the
coverage of vaccination programs in order to reduce the circulation of the rubella virus
in Brazil, thus accomplishing the commitment to eliminate rubella by 2010.
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Participação das citocinas Interleucina-12, Interferon-γ, Interleucina-4 e Interleucina-10 e investigação de polimorfismos nos genes do INF-γ (IFNG+874) e da IL-10 (IL10-1082) na malária causada por Plasmodium vivaxMEDINA, Tiago da Silva 05 October 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / A resposta imune na malária é complexa, e os mecanismos de
ativação e regulação de linfócitos T efetores e de memória ainda são pouco compreendidos. No presente estudo, determinamos a concentração das citocinas Interferon-γ (IFN-γ), Interleucina-10 (IL-10), Interleucina-4 (IL-4) e Interleucina-12
(IL-12) no soro de indivíduos infectados por Plasmodium vivax, investigamos os
polimorfismos no gene do IFN-γ (IFNG+874) e da IL-10 (IL10-1082) e analisamos
a associação destes polimorfismos com a concentração das citocinas e com a
densidade parasitária. A concentração das citocinas foi determinada por ELISA, e
a genotipagem dos polimorfismos IFNG+874 e IL10-1082 foi realizada pelas
técnicas de ASO-PCR e PCR-RFLP, respectivamente. Os indivíduos infectados
apresentaram níveis séricos de IFN-γ e IL-10 aumentados. A produção de IFN-γ foi
maior nos indivíduos primoinfectados, porém não foi associada com a redução da
parasitemia. A produção de IL-10 foi alta e associada com altas parasitemias. As
citocinas IL-4 e IL-12 não foram detectadas. As freqüências dos genótipos
homozigoto mutante AA, heterozigoto AT e selvagem TT do gene do IFN-γ foram
0,51, 0,39 e 0,10, respectivamente. As freqüências dos genótipos homozigoto
mutante AA, heterozigoto AG e selvagem GG para IL10 foram 0,49, 0,43 e 0,08,
respectivamente. Apenas o polimorfismo do IFN-γ foi associado com níveis
reduzidos desta citocina. Na malária causada por P. vivax, houve produção de
citocina que caracteriza o perfil Th1 (IFN-γ), com possível participação da IL-10 na
imunorregulação. / The malaria immune response is complex, and the activation and
regulation mechanisms of the efector and memory T cells remain unclear. In this
study, we determined seric levels of Interferon-γ (IFN-γ), Interleukin 10 (IL-10),
Interleukin-4 (IL-4) and Interleukin-12 (IL-12) in individuals infected by Plasmodium
vivax. We investigated polymorphisms in IFN-γ (IFNG+874) and IL-10 (IL10-1082)
genes and their association with seric levels and parasite density. Concentrations
of IFN-γ, IL-10, IL-4 and IL-12 were detected by ELISA, and IFNG+874 and IL10-
1082 polymorphisms genotyping were investigated by allele-specific
oligonucleotide polymerase chain reaction (ASO-PCR) and PCR-RFLP (restriction
fragment length polymorphism) methods, respectively. We detected increased
levels of IFN-γ and IL-10 in individuals infected by P. vivax. IFN-γ levels were
higher in individuals who were infected for the first time, but there were no
association with parasite elimination. Increased levels of IL-10 were associated
with higher parasite densities. We did not detect IL-4 and IL-12 seric levels. The
frequencies of AA, AT, TT genotypes of IFNG+874 were 0,51, 0,39 e 0,10,
respectively. The frequencies of AA, AG, GG genotypes of IL10-1082 were 0,49,
0,43 e 0,08, respectively. We also showed that IFG+874 polymorphism is
associated with decreased levels of IFN-γ. The results show a Th1-driven immune
response which can be regulated by IL-10 in naturally P.vivax-infected individuals.
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Soroepidemiologia da infecção pelo Vírus da hepatite B (VHB) e pelo Vírus da hepatite C (VHC) em cirurgiões-dentistas da cidade de Belém, ParáCOSTA, Ana Cássia Reis da 16 May 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006 / As hepatites virais representam um importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo. A hepatite B e a hepatite C são as de principal interesse para os profissionais da área de saúde em função do modo de transmissão e da possibilidade de aquisição ocupacional. O presente trabalho teve por principal objetivo verificar a soroprevalência da infecção pelo Vírus da
Hepatite B (VHB) e pelo Vírus da Hepatite C (VHC) em cirurgiões-dentistas e relacioná-la com os fatores de risco. Participaram do estudo 97 cirurgiões-dentistas, sendo 39 do gênero masculino e 58 do gênero feminino, no período de junho a dezembro de 2005, que atuam no município de Belém, Pará, Brasil. Os dados epidemiológicos foram obtidos por meio de inquéritos e os sorológicos por um ensaio imunoenzimático para a pesquisa de antígeno e anticorpo tanto para o VHB quanto para o VHC. O teste de Tendência foi utilizado para a análise estatística dos resultados. A prevalência do VHB foi de 6,2%, enquanto do VHC foi de 3,1% entre a população estudada. Das amostras sororreativas para os marcadores da hepatite B, a prevalência foi de 1,03% (1/97) para o anti-HBc total, 5,16% (5/97) para a presença simultânea do anti-HBc total e anti-HBs e 54,61% (53/97) para o anti-HBs. Quando comparado ao encontrado na população de doadores de sangue no Estado do Pará a prevalência do VHC na população estudada foi significativamente maior, enquanto a do
VHB foi semelhante. Além disso, 37,7% (36/97) relataram terem tido algum tipo de exposição ocupacional, estando o acidente com objetos pérfuro-cortante como o mais relatado (86,1%). A medida adotada após a exposição foi sempre a lavagem com água e sabão e apenas 2,8% (1/36) dos acidentados relataram à realização de testes sorológicos. O conhecimento das normas de biossegurança e a utilização de pelo menos uma barreira de proteção individual foram relatados por todos, sendo o uso de luvas e máscara a resposta mais mencionada (96,9%). Encontravam-se imunizados contra o VHB por meio de vacina 54,61% (53/97) dos cirurgiões-dentistas, enquanto que imunes por infecção natural 5,16% (5/97). O elevado percentual de ocorrência de acidentes
ocupacionais, aliado a baixa soroconversão pós-exposição dentre os cirurgiões-dentistas
participantes demonstra a necessidade de se conhecer a prevalência de infecções de risco
ocupacional em profissionais da área de saúde para que se adotem medidas de prevenção e controle mais eficazes contra os agentes causadores. / Viral hepatitides represent an important problem of public health in Brazil and in the world. Hepatitis B and hepatitis C are the most interesting for health professionals due to the form of transmission and the possibility of occupational acquisition. The present work intended, as its main objective, to verify the seroprevalence of the infection by the Hepatitis B Virus (HBV) and by the Hepatitis C Virus (HCV) in surgeon-dentists, and to relate it to risk factors. 97 surgeon-dentists, 39 males and 58 females, who work in the city of Belém, Pará, Brazil, participated in the study, from June to December of 2005. Epidemiologic data have been obtained by inquiries and the serologic ones by an immunoenzymatic assay for research on antigen and antibody for both the HBV and the HCV. The trend test was used for statistical analysis of the results. The prevalence of the HBV was of 6,2%, and the HCV was of 3,1% among the studied population. Out of the seroreactive samples to the markers of hepatitis B, the prevalence was of 1,03% (1/97) for total
anti-HBc, 5,16% (5/97) for the simultaneous presence of total anti-HBc and anti-HBs, and 54,61% (53/97) for anti-HBs. When compared to the data found in the population of blood donors in the State of Pará, the prevalence of the HCV in the studied population was significantly higher, while the prevalence of the HBV was similar. Moreover, 37,7% (36/97) reported having had some type of occupational exposition, and accidents with cutting and piercing objects was the major cause (86,1%). The procedure after the exposition was always washing the wound with water and soap, and only 2,8% (1/36) of the victims reported the accomplishment of serologic tests. Knowledge of
biosafety norms and the usage of at least one barrier of individual protection were stated by all dentists. The usage of gloves and masks was the most reported reply (96,9%). 54,61% (53/97) of the surgeon-dentists were immunized by HBV vaccination; 5,16% (5/97) were immunized by natural infection. The high percentage of occupational accidents, allied with the low post-exposition seroconversion amongst the surgeon-dentists, demonstrates the need of knowing the
prevalence of infections of occupational risk in health professionals so that more efficient and effective prevention and control measures against the causing agents can be adopted.
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An€álise da resposta de Paracoccidioides brasiliensis a diferentes tipos de agentes estressores e osmoreguladores e express o heteró‚loga e localizaçムo de β-1.3-glicana sintase / Analise response of Paracoccidioides brasiliensis to different types of stress agents and osmoreguladores and expresses Heteralogs and Location of the β-1.3-glucan synthaseTOMAZETT, Patrícia Kott 26 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-26 / Paracoccidioides brasiliensis is a thermo-dimorphic human pathogenic fungus
that lives at 23”C in the mycelium phase (infecting phase) and at 37”C in the yeast
phase (parasite phase). In attempt to survive, the cell wall of fungi can change its
composition and/or structure in response to environmental stress by compensatory
mechanisms. The molecules involved in these mechanisms are possible target for the
development of effective antifungal agents. In P. brasiliensis, the main components of
the cell wall are glucans and chitin polymers. These polymers make a primary barrier
that is responsible for the structural integrity and form of the cell wall. In this work the
behavior of P. brasiliensis was evaluated against stress conditions with the aim of study,
for the first time, the mechanisms used by this fungus in the maintenance of the cell
wall integrity. Our results shown that P. brasiliensis yeast cells are sensitive to cell wall
stressors calcofluor white (CFW), congo red (CR), SDS, KCl, NaCl and sorbitol. There
was an increase in the PbFKS1 transcripts expression and in the content of cell wall β-
1,3-glicana after treatment with all stressor agents. After treatment with SDS and KCl
the PbGFA1 transcripts expression and the cell wall GlcNAc residues also increased.
The transcript expression of PbGEL3 was also evaluated being increased after treatment
with CFW, NaCl and sorbitol. Thus we showed that these molecules are involved in the
maintenance of the cell wall against stress conditions. Apart from these analyses we
obtained the active recombinant protein PbFks1pc. Through the anti-PbFks1pc antibody
we performed immunocitolocalization assays. These experiments revealed the
localization of PbFks1p in regions of apical growth in the mycelium phase and in the
cell surface in yeast phase. / Paracoccidioides brasiliensis Š um fungo patog‰nico e termodim‚rfico que se
apresenta na forma de micŠlio a 23”C (forma infectante) e na forma de levedura a 37”C
(forma parasit€ria). A parede celular de fungos Š capaz de alterar sua composiƒ o e atŠ
mesmo sua estrutura em resposta a condiƒ•es ambientais de estresse atravŠs de
mecanismos compensat‚rios. As prote…nas envolvidas nestes mecanismos s o poss…veis
alvos para o desenvolvimento de agentes antifˆngicos espec…ficos. Em P. brasiliensis,
os principais pol…meros que constituem a parede celular s o glicanas e quitina. Estes
pol…meros formam uma barreira prim€ria que Š respons€vel pela integridade estrutural e
forma da parede celular. Neste trabalho, o comportamento de P. brasiliensis diante de
situaĥes de estresse foi investigado com o intuito de estudar, pela primeira vez, os
mecanismos utilizados por este fungo na manutenƒ o da integridade da parede celular.
Nossos resultados mostram que cŠlulas leveduriformes de P. brasiliensis s o sens…veis
aos agentes estressores da parede celular calcofluor white (CFW), congo red (CR), SDS,
NaCl, KCl e sorbitol. Houve um aumento na express o de transcritos de PbFKS1 e no
conteˆdo do pol…mero de β-1,3-glicana na parede celular ap‚s tratamento com todos os
agentes estressores. Ap‚s tratamento com SDS e KCl a express o de transcritos de
PbGFA1 assim como o conteˆdo de res…duos de GlcNAc na parede celular tambŠm
aumentaram. A express o dos transcritos de PbGEL3 tambŠm foi avaliada estando
aumentada ap‚s tratamento com CFW, NaCl e sorbitol. Desta forma, mostramos que
estas molŠculas est o envolvidas na manutenƒ o da parede celular diante de situaƒ•es
de estresse. AlŠm destas an€lises, a prote…na recombinante PbFks1pc ativa foi obtida.
AtravŠs do anticorpo anti-PbFks1pc realizamos ensaios de imunocitolocalizaƒ o. Estes
experimentos revelaram a presenƒa de PbFks1p em regi•es de crescimento apical no
micŠlio e na superf…cie celular em cŠlulas leveduriformes.
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Identificação e caracterização de moléculas envolvidas na interação de Paracoccidioides brasiliensis com o hospedeiro / Identification and characterization of involved molecules in the interaction of paracoccidioides brasiliensis with the hostDANTAS, Sabrina Fonseca Ingênito Moreira 31 March 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-03-31 / Paracoccidioides brasiliensis causes paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic
mycosis presenting clinical manifestations ranging from mild to severe forms. A P.
brasiliensis cDNA expression library was produced and screened with pooled sera from
PCM patients adsorbed against antigens derived from in vitro-grown P. brasiliensis
yeast cells. Sequencing DNA inserts from clones reactive with PCM patients sera
indicated 35 open reading frames presenting homology to genes involved in metabolic
pathways, transport, among other predicted functions. The complete cDNAs encoding
aromatic L-amino acid decarboxylase (Pbddc), lumazine synthase (Pbls) and a
homologue of the high affinity copper transporter (Pbctr3) were obtained. Recombinant
proteins PbDDC and PbLS were obtained; a peptide was synthesized for PbCTR3. The
proteins and the synthetic peptide were recognized by sera of patients with confirmed
PCM and not by sera of healthy patients. Using the vivo-induced antigen technology
(IVIAT) we identified immunogenic proteins expressed at high levels during infection.
Quantitative real - time RT-PCR demonstrated high transcript levels of Pbddc, Pbls and
Pbctr3 in yeast cells infecting macrophages. Transcripts in yeast cells derived from
spleen and liver of infected mice were also measured by qRT-PCR. Our results suggest
a putative role for the immunogenic proteins in the infectious process of P. brasiliensis. / Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM),
uma micose sistêmica, prevalente nos países da América Latina. Uma biblioteca de
cDNA de expressão de Paracoccidioides brasiliensis foi construída e rastreada com
soros de pacientes acometidos por paracoccidioidomicose (PCM). Foram identificados
35 clones de cDNAs que codificam proteínas relacionadas com metabolismo celular,
transporte, energia, transcrição, endereçamento de proteínas, transdução de sinal e
componentes celulares. Os cDNAs codificantes da L- aminoacido aromatico -
descarboxilase (Pbddc), da lumazina sintase (Pbls) e do transportador de cobre de alta
afinidade foram obtidos. As proteínas recombinantes PbDDC e PbLS e o peptídio
sintético PbCTR3 foram reconhecidos por soros de pacientes com PCM e não reagiram
com soros controle. A técnica de IVIAT (tecnologia de antígenos induzidos in vivo)
propiciou a identificação de proteínas imunogênicas mais expressas durante o processo
infecçioso. RT-PCR em tempo real quantitativa (qRT-PCR) demostrou altos níveis de
transcritos de Pbddc, Pbls e Pbctr3 em células leveduriformes infectando macrófagos.
O transcritos de células leveduriformes de P. brasiliensis recuperadas de fígado e baço
de camundongos foram medidos por qRT-PCR. Estes resultados sugerem o provável
papel das proteínas imunogênicas no processo infeccioso de P. brasiliensis.
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Perfil epidemiológico, letalidade e caracterização molecular de Pseudomonas aeruginosa multirresistentes, produtoras de metalobetalactamases de isolados clínicos em Unidade de Terapia Intensiva na região NorteMATOS, Eliseth Costa Oliveira de January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / A resistência bacteriana é responsável por grandes preocupações quanto ao impacto imediato aos sistemas de saúde. A proposta deste estudo foi determinar as características epidemiológicas, letalidade e aspectos moleculares de Pseudomonas aeruginosa isoladas de pacientes internados na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) em hospital de ensino de Belém/Pará e analisar o desempenho do teste de sensibilidade para P. aeruginosa em sistema automatizado VITEK-2 para esclarecimento da resistência. A população do estudo foi constituída de 54 pacientes com infecção por P. aeruginosa internados na UTI adulto, pediátrica e neonatal no período de janeiro de 2010 a março de 2012. Para investigação epidemiológica foram coletados dados demográficos, co-morbidades, tempo de permanência na UTI, classificação dos episódios de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde (IRAS), uso de procedimentos invasivos, tipo de infecção, terapia utilizada e desfecho do paciente (alta ou óbito), escore de MacCabe Jackson, APACHE II, escore de Charlson. A identificação bacteriana foi realizada a partir dos testes bioquímicos e do sistema Vitek-2. O teste de sensibilidade foi realizado com a aplicação do método de referência microdiluição em caldo, e a detecção da produção de metalo-beta-lactamase pelo método do duplo disco e pela PCR. A genotipagem por amplificação por meio do sistema DiversiLab. A P. aeruginosa foi o segundo patógeno mais freqüente no hospital e esta ocorrência foi maior na UTI adulto. A infecção respiratória foi predominante na UTI adulto, enquanto a infecção de corrente sanguinea prevaleceu nas UTI neonatal e pediátrica. A multirresistência foi mais encontrada na UTI adulto, a média da faixa etária da população foi de 28 anos com tempo de internação em média de 87,1 dias, a maioria das doenças de base eram potencialmente fatais e os principais fatores de risco para aquisição de infecção por PaMR foram o uso de ventilação mecânica e sonda vesical. Podemos afirmar que após os resultados da metanálise foi possível evidenciar que as cepas MR apresentaram taxa de mortalidade maior, com duas vezes mais chances de ocorrer o óbito, sendo a multirresistência um fator de mau prognóstico em pacientes com infecção por PaMR. Foi detectado quatro isolados produtores da variante blaSPM-1 e na genotipagem figurou a presença de similaridade genética maior que 97%, as variações observadas podem ter relação com pressão seletiva existente na UTI adulto, somada a terapia inadequada. Este estudo mostrou a importância de investigação de infecções por patógenos multirresistentes em unidades críticas, contribuindo para o melhor monitoramento e controle destas infecções. / The bacterial resistance is responsible for major concerns about the great problems on health systems. The proposal of this study was to determine the epidemiological, lethality and molecular characteristics of Pseudomonas aeruginosa isolated from patients admitted to the Intensive Care Unit (ICU) in a teaching hospital in city of Belem, Pará, Brazil and analyze the performance of susceptibility testing for P. aeruginosa in automated VITEK -2 to study the antimicrobial resistance. The target people of this study consisted of 54 patients with P. aeruginosa infection at the adult , pediatric and neonatal ICUs from January 2010 to March 2012. For the epidemiological research, demographic data, comorbidities, length of stay were collected. Episodes of Healthcare-associated infections were defined in accordance to Center for Disease Control and Prevention (CDC), use of invasive procedures, previous therapy and patient outcome, Jackson MacCabe score, APACHE II score and Charlson score were documented. The bacterial identification was performed by biochemical tests and VITEK-2 system. The sensitivity test was performed with the application of the method of broth microdilution , and detection of metallo-beta-lactamase by the double disc and PCR method. The test of Genotyping was made by amplification throug DiversiLab system. The P. aeruginosa was the second most common pathogen in the hospital and this occurrence was higher in the adult ICU. The respiratory infection was predominant in the adult ICU, while bloodstream infection was prevalent in pediatric and neonatal ICU. The multidrug resistance was higher in the adult ICU, the average age of patients was 28 years, with an average length of stay of 87.1 days, the diseases were potentially fatal and major risk factors for acquisition of PaMR infection were the use of mechanical ventilation and urinary catheterization. Through the meta-analysis study, we found that infections caused by MR strains showed higher mortality rate, and were twice as likely to death occurs, multidrug resistance a factor of poor prognosis in patients with infection PaMR. Four isolates producers blaSPM-1 variant was detected and genotyping figured the presence of genetic similarity greater than 97%, the changes observed may be related to selective pressure existing in the adult ICU, coupled with inadequate therapy. This study demonstrated the importance of investigations of infections with multidrug-resistant pathogens in critical care units, contributing to these data the possibility of better monitoring and control of these infections.
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Influência dos metabólitos secundários de Piper divaricatum da região amazônica no controle do Fusarium solani f. sp. piperis causador da fusariose em pimenta do reinoMEIRELES, Erisléia das Neves 18 September 2014 (has links)
Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-02-06T17:32:20Z
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Previous issue date: 2014 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A cultura de pimenta do reino (Piper nigrum L.) é uma das principais atividades agrícolas no estado do Pará e sofre sérios danos ocasionados pela fusariose, doença restrita ao Brasil. O presente trabalho avaliou a atividade antifúngica in vitro de óleos essenciais de espécies de Piper ricos em fenilpropanóides frente a Fusarium solani f. sp. piperis, agente causal da fusariose. A inibição do crescimento micelial pelo método de difusão em Agar na concentração de 5 mg.Ml-1 foi considerada: baixa para P. aduncum (20,3%) e P. krukoffii (31,4%); moderada para P. callosum (55,7%) e P. marginatum (70,3%) e alta para P. divaricatum (93,3%). Os componentes majoritários identificados por CG-EM foram: dilapiol (92,0%), safrol (78,0%), metileugenol (75,2%) e eugenol (7,9%), apiol (80,0%), Z-isoosmorizol (44,0%) e E-anetol (22,0%), respectivamente. O óleo de P. divaricatum e seus compostos majoritários apresentaram valores CIM de 0,75 mg.mL-1. A avaliação dos efeitos combinados do eugenol e metileugenol apontou o eugenol como principal responsável pela atividade. / The culture of black pepper (Piper nigrum L.) is one of the main agricultural activities in Pará State and it suffers serious damages caused by fusariosis, disease restrict in Brazil. This paper evaluated the antifungal activity in vitro of essential oils of species of Piper rich in phenylpropanoid before the Fusarium solani f. sp. piperis, which causes the fusariosis. The inhibition of mycelial growth by the method of agar dissemination in concentration of 5 mg.mL-1 was considered: decrease to P. aduncum (20.3%) and P. Krukoffii (31.4%); moderated to P. callosum (55.7%) and P. marginatum (70.3%) and high to P. divaricatum (93.3%). The major components identified by CG-EM were dilapiol (92.0%), safrole (78.0%), methyleugenol (75.2%) and eugenol (7.9%), apiol (80.0%), Z-isoosmorizol (44.0%) and E-anethole (22.0%), respectively. The oil of P. divaricatum and its major compounds present CIM values of 0.75 mg.mL-1. The evaluation of the effects combined of eugenol and methyl eugenol pointed eugenol as the main responsible by the activity.
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