Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:32Z : No. of bitstreams: 1 Publico-00400.pdf: 1485085 bytes, checksum: 122509d3ca7728c04b3beb00ceac8a98 (MD5) / Associação Fundo Incentivo a Psicofarmacologia (AFIP) / Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão (CEPID) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: Esta cada vez mais evidente os efeitos da hipóxia intermitente e da fragmentação do sono, que ocorrem na Síndrome da Apnéia Obstrutiva do Sono, na geração de espécies reativas do oxigênio, levando a doenças cardiovasculares. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do tratamento com o aparelho intra-oral em parâmetros de estresse oxidativo em pacientes com Síndrome da Apnéia Obstrutiva do Sono moderada a grave. Métodos: Pacientes com SAOS moderada a grave, ambos os sexos, idade entre 25 e 65 anos, IMC menor que 35 Kg/m2, com boas condições dentárias, participaram deste estudo randomizado, cruzado, duplo-cego com um mês em cada tratamento com Continuous Positive Airway Pressure (CPAP), um aparelho intra-oral (AIO) e um aparelho placebo. Avaliamos a sonolência excessiva diurna subjetiva pela Escala de Sonolência de Epworth (ESE), parâmetros polissonográficos e parâmetros de estresse oxidativo (Thiobarbituric Acid Reactive Substances, Superóxido Dismutase, Catalase, Vitaminas C, E, B6, B12 e Folato, Homocisteína, Ácido Úrico). Resultados: 29 pacientes (24 homens e 5 mulheres) participaram deste estudo, com idade média de 47,3 ± 8,9 anos, IMC de 28,4 ± 3,6 Kg/m2 e escores na Escala de Sonolência de Epworth de 11,4 ± 5,3. Tanto o aparelho intra-oral quanto o CPAP levaram a uma redução no Índice de Apnéias e Hipopnéias, porém o efeito com o CPAP foi melhor (basal: 42,3 ± 4,5; placebo: 48,7 ± 5,6; AIO: 26,7 ± 4,8; CPAP: 3,2 ± 0,4; p < 0,05). O uso do CPAP também levou a uma diminuição no escore da ESE (basal: 11,3 ± 1,0 x CPAP: 9,7 ± 0,8; p < 0,05), embora a adesão ao AIO tenha sido maior que ao CPAP (86,3 ± 3,0 x 72,0 ± 4,2%; p < 0,05). Quanto aos parâmetros de estresse oxidativo, observamos uma queda dos níveis de atividade da enzima catalase em relação aos valores basais com o AIO (basal: 115,8 ± 5,2; placebo: 102,7 ± 4,4; AIO: 95,3 ± 4,6; CPAP: 107,1 ± 3,8 U/mg Hb; p < 0,01). Além disso, houve um aumento dos valores de vitamina C nas fases placebo e CPAP quando comparados ao basal (basal: 54,9 ± 2,5; placebo: 65,9 ± 3,0; AIO: 62,3 ± 2,6; CPAP: 64,3 ± 2,5 umol/L; p < 0,05) e dos valores de vitamina B6 em todas as fases de tratamento comparados aos valores iniciais (basal: 18,9 ± 1,2; placebo: 22,7 ± 1,5; AIO: 22,2 ± 1,3; CPAP: 24,6 ± 0,9 nmol/L; p<0,05). Conclusão: Podemos concluir que, embora o CPAP tenha sido mais eficaz na melhora clínica e nos parâmetros polissonográficos de pacientes com SAOS moderada a grave, a adesão ao tratamento AIO neste grupo de pacientes foi mais eficiente e favoreceu a redução em uma das enzimas que participam da remoção de espécies reativas de oxigênio. / Introduction: Obstructive Sleep Apnea Syndrome (OSAS) is associated with increased cardiovascular morbidity and mortality. The exact nature of the underlying pathophysiology of cardiovascular morbidity in OSAS patients has not been fully elucidated. One of the underlying mechanisms is the formation of Reactive Oxygen Species (ROS), increasing oxidative stress (OS) due to the intermittent hypoxia. Studies with OSAS patients highlighted an increase in markers of OS associated to vascular risk. Authors have demonstrated a decrease of OS after Continuous Positive Airway Pressure (CPAP). OS reduction by means of the Oral Appliance (OA) is yet to be comprehended. Objective: The purpose of this study was to evaluate the effect of an OA compared with CPAP regarding OS parameters in moderate to severe OSAS patients with a randomized, double blind and placebo controlled trial. Methods: Subjects were patients with moderate to severe OSAS, of both genders, BMI under 35, 25-65 years of age, in good dental condition. All patients were submitted to 3 treatments: mandibular repositioning appliance (BRD) in maximal comfortable protrusion, placebo appliance (PA) and CPAP with one month of each treatment and one week washout between them. It was a randomized, cross-over, double blind and placebo controlled trial. Epworth Sleepiness Scale (ESS), polysomnographic and OS parameters (Thiobarbituric Acid Reactive Substances -TBARS, Superoxide Dismutase, Catalase, Vitamins C, E, B6, B12 and Folate, Homocysteine, and Uric Acid) were evaluated at each phase (baseline and after one month of each treatment). Results: 29 patients (24 men and 5 women) took part of the study, with a mean age of 47.3 ± 8.9 years, BMI of 28.4 ± 3.6 Kg/m and scoring on ESS of 11.4 ± 5.3. Both OA and CPAP treatments led to a decrease on the Apnea and Hypopnea Index (AHI). The last, however, demonstrated better efficacy (baseline: 42.3 ± 4.5; PA: 48.7 ± 6.5; OA: 26.7 ± 4.8; CPAP: 3.2 ± 0.4; p < 0.05), besides improving ESS (baseline: 11.3 ± 1.0 versus CPAP: 9.7±0.8; p < 0.05). Notwithstanding, compliance rate during OA period was higher than during CPAP (86.3 ± 3.0% versus 72.0 ± 4.2%; p < 0.05). For the OS parameters, a significant drop in the levels of catalase activity was observed after OA compared to the baseline period (baseline: 115.8 ± 5.2; PA: 102.7 ± 4.4; OA: 95.3 ± 4.6; CPAP: 107.1 ± 3.8 U/mg Hb; p<0.01). Moreover, there was an increase in vitamin C levels after PA and CPAP (baseline: 54.9 ± 2.5; PA: 65.9 ± 3.0; OA: 62.3 ± 2.6; CPAP: 64.3 ± 2.5 umol/L; p<0.05), and in vitamin B6 after all treatment periods compared to initial values in baseline period (baseline: 18.9 ± 1.2; PA: 22.7 ± 1.5; OA: 22.2 ± 1.3; CPAP: 24.6 ± 0.9 nmol/L; p<0.05). Conclusion: Even though CPAP proved to be more effective in attenuating OSAS and its subjective associated complaints, the better compliance to OA in this group of patients supported the reduction of one of the enzymes which participates in ROS removal. / FAPESP: 98/14303 / AFIP: 47.4277/2004-6 / TEDE

O câncer de pulmão permanece a neoplasia mais letal com cerca de 1,59 milhões de mortes por ano em todo o mundo, com eficácia terapêutica limitada e mau prognóstico. Aproximadamente 80 % dos casos são de câncer de pulmão de não pequenas células (CPNPC), desses, cerca de 50 % são os adenocarcinomas (AdC). Atualmente o tratamento padrão-ouro no tratamento de AdC pulmonar é baseado em agentes de platina (cisplatina, carboplatina) normalmente administrados em combinação com outros agentes, entretanto a doença é raramente curável. Vários fatores contribuem para a alta taxa de mortalidade e um dos mais comuns é a quimioresistência. Portanto, existe uma necessidade urgente de terapias mais eficazes em aumentar a sobrevida global dos pacientes com essa patologia. Tendo em vista que o desenvolvimento de novos medicamentos requer muito tempo e investimento financeiro, o uso de drogas existentes como terapia combinada torna-se uma boa abordagem. Estudos anteriores de nosso grupo demonstraram que a agressividade do AdC de pulmão está associada com elevado estresse oxidativo onde o peróxido de hidrogênio (H2O2) tem um papel crucial, uma vez que o tratamento com a enzima antioxidante catalase (CAT) atenuou a agressividade do tumor. Assim, este estudo avaliou a eficácia da terapia combinada com CAT na linhagem celular A549 de AdC humano. Primeiramente, a adição de CAT causou uma inibição dose-dependente da proliferação celular com um efeito máximo na dose de 1000 U/mL. Essa inibição foi relacionada a um efeito citostático, não citotóxico, do consumo de H2O2 intracelular, já que a retirada da CAT restaurou a taxa proliferativa celular a níveis de controle. Após, a avaliação do “status” de ativação do NFB mostrou um aumento de 2,9 vezes no imunoconteúdo citosólico da subunidade p65, sugerindo uma diminuição da ativação do NFB em células tratadas com CAT. A análise do efeito do tratamento de CAT em parâmetros redox mostrou uma redução nos níveis intracelulares de tióis (-SH) e no potencial antioxidante total (TRAP) e um aumento na produção de H2O2 e nos níveis de glutationa (GSH). Entre as drogas testadas (Cisplatina, 5-Fluorouracil, Paclitaxel, Hidroxiuréia e Daunorrubicina), apenas o tratamento com paclitaxel e hidroxiureia mostraram aumento da produção de H2O2 quando comparados com o veículo. No entanto, o co-tratamento com CAT e paclitaxel não alterou a produção de H2O2. Hidroxiuréia e CAT promoveu uma redução na produção de H2O2, quando comparado com a droga sozinha. A cisplatina, por si só não teve efeito na produção de H2O2, mas cisplatina e CAT promoveram um aumento na produção de H2O2. A eficácia da terapia combinada com CAT em potencializar a citotoxicidade dos quimioterápicos, foi analisada pelo ensaio SRB e pelo software CalcuSyn®. Pela análise dos valores de “Combination Index” (CI) observamos que, com a exceção da combinação de CAT e paclitaxel, que gerou antagonismo, as combinações de CAT com cisplatina, 5-fluorouracil e hidroxiuréia exibiram um efeito sinérgico na eliminação de células da linhagem de AdC humano A549. Dessa forma, os dados aqui apresentados sugerem que a terapia combinada de CAT com cisplatina, 5-fluorouracil e hidroxiuréia pode surgir como uma nova estratégia terapêutica para o AdC. / Lung cancer remains the most lethal malignant disease with nearly 1.59 million deaths annually worldwide, limited efficacy of current therapeutics and dismal prognostic. Approximately 80% of the cases are non-small cell lung cancer (NSCLC), of these, roughly 50% are adenocarcinomas (AdC). Currently, the gold standard treatment for AdC is based on platinum agents, usually given in combination with other agents. Despite these therapies, the disease is rarely curable. Several factors contribute to the high mortality rate and one of the most common includes tumor cell chemoresistance to cytotoxic drugs. Therefore, there is an urgent need for more effective therapies that could increase the overall survival of lung AdC patients. With the notion that the development of novel drugs require much time and financial investment, the use of existing drugs as adjuvant treatment becomes a good approach. Previous studies of our group demonstrated that lung AdC aggressiveness is associated with elevated intracellular oxidative stress, in which hydrogen peroxide (H2O2) plays a crucial role, since the exogenous treatment with the antioxidant enzyme catalase (CAT) attenuated tumor aggressiveness. Then, this study evaluated the efficacy of CAT adjuvant treatment in the human AdC cell line A549. Firstly, exogenous addition of CAT caused a dose dependent inhibition on cellular proliferation with a maximal dose effect of 1000 U/mL. Growth inhibition was related to a cytostatic, not cytotoxic, effect of intracellular H2O2 consumption, since CAT washout readily restored cellular proliferative rate similar to control. After that, evaluation of NFB activation status showed a 2.9-fold increase in the cytosolic immunocontent of the NFB subunit p65, suggesting a decreased NFB activation in CAT-treated cells. Analysis of CAT treatment effect in redox parameters showed decreased intracellular thiol levels (-SH) and non-enzymatic antioxidant potential (TRAP) and increases the H2O2 production and glutathione levels (GSH). Among drugs tested (cisplatin, paclitaxel, 5-fluorouracil, daunorubicin, hydroxurea) (GI50), only paclitaxel and hydroxyurea showed increased production of H2O2 when compared with vehicle. However, co-treatement with CAT and paclitaxel had no alteration in the H2O2 production. Hydroxyurea plus CAT had a decreased in H2O2 production when compared with the drug alone. Cisplatin, alone had no effect in H2O2 production, but cisplatin plus CAT, had an increased in H2O2 production. Regarding the effectiveness of adjuvant CAT treatment in potentiate chemotherapeutic drugs cytotoxicities, we used de SRB assay and Calcusyn Software to access this interaction. From analyzes of combination index (CI) values, generated by CalcuSyn, we observed that with the exception of CAT plus paclitaxel, all combinations exhibited a synergistic effect. Taken together, data presented here suggest that adjuvant CAT treatment can act synergistically with chemotherapeutics and modulate tumorassociated signaling pathways providing a new therapeutic strategy for AdC therapy.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:52:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 302794.pdf: 1629810 bytes, checksum: f0c4943e3530bd914f93ffb8f74f1203 (MD5) / As sementes maduras de A. angustifolia perdem rapidamente sua qualidade após a colheita. Conhecer os fatores ligados a esse processo é necessário para promover a disponibilidade de sementes com qualidade por período prolongado após a safra anual e facilitar as ações de restauração de áreas e a conservação da espécie. Desta forma, este estudo foi desenvolvido buscando analisar as alterações fisiológicas associadas à perda da viabilidade e do vigor das sementes de A. angustifolia e relacioná-las às alterações bioquímicas durante o armazenamento. As sementes foram coletadas no município Painel (SC) e submetidas às condições de armazenamento em ambiente sem controle térmico, refrigerador (5 oC) e freezer (-18 oC), por 180 dias, sendo avaliadas quanto à viabilidade, vigor, teor dos principais metabólitos de reserva do megagametófito e metabólitos dos embriões, as mudanças no perfil protéico, atividade enzimática e integridade do DNA. A germinação das sementes após a colheita foi de 90% e manteve-se em 64% na condição de refrigerador por 180 dias, mas ocorreu perda total de viabilidade das sementes armazenadas nas demais condições. Apesar da perda total de viabilidade e elevada taxa de condutividade elétrica, as sementes armazenadas em freezer não manifestaram grandes alterações bioquímicas em relação ao teor de proteínas no embrião, teor de carboidratos solúveis e amido no megagametófito, atividade da enzima superóxido dismutase e peroxidação lipídica. Associando-se as alterações fisiológicas e bioquímicas, constatou-se que, em função da elevada viabilidade das sementes, estabilidade no perfil protéico, poucas alterações nos metabólitos presentes no megagametófito e embrião, atividade da SOD e peroxidação lipídica, o armazenamento das sementes de A. angustifolia em refrigerador é uma alternativa viável pelo período de 180 dias.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:43:03Z : No. of bitstreams: 1 estevao_if_dr_sjrp_parcial.pdf: 122795 bytes, checksum: 747e86122e594e13887a3ebfff701723 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-08-07T12:19:53Z: estevao_if_dr_sjrp_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-07T12:20:55Z : No. of bitstreams: 1 000642193.pdf: 2022251 bytes, checksum: 43e74970fe45b54e28f7ac29e1ec9d71 (MD5) / A beta talassemia heterozigota pode ser decorrente de mutações β 0 ou β + , de acordo com ausência ou redução na produção das cadeias da beta globina, respectivamente. Poucos estudos na literatura correlacionam possíveis efeitos deletérios dessas mutações, quando em heterozigose. A coerança com mutações em genes, não localizados no cluster do gene da β-globina, podem modificar o fenótipo talassêmico. O estresse oxidativo gerado pelo aumento de ERO é um dos mecanismos responsáveis pala aceleração da apoptose celular. Há evidências que o excesso de cadeias alfa, mesmo em pequenas quantidades, seja suficiente para iniciar a geração de ERO e, portanto, estresse oxidativo em beta talassêmicos heterozigotos. Nas formas homozigotas ou com dupla heterozigose os pacientes apresentam anemia grave, transfusão dependente, e a sobrecarga de ferro é uma das mais frequentes e graves complicações nesses indivíduos. Na forma heterozigota a ocorrência de sobrecarga de ferro é rara, porém alterações no perfil do ferro são observadas. O objetivo desse trabalho foi analisar a influência dos níveis de ferritina sérica, das mutações no gene da β-globina, das mutações no gene HFE, da atividade das enzimas de detoxificação GST e CAT e dos polimorfismos das GSTs na expressão fenotípica de indivíduos beta talassêmicos heterozigotos. Foram avaliados 158 portadores de beta talassemia heterozigota diagnosticados previamente por metodologias clássicas. Todos adultos, de origem caucasóide, residentes na região Central do Estado de São Paulo e acompanhados em serviços públicos ou privados da região. O grupo controle foi composto de 24 adultos, caucasóides e residentes na mesma região. A avaliação hematológica foi realizada pelo hemograma, em contadores automatizados de células e quantificação das sub frações de Hb A2 e Hb F por HPLC. O perfil... / Beta thalassemia may occur due to mutations β 0 or β +, according to absence or reduction in the production of beta globin chains, respectively. Few studies have been done correlating possible deleterious effects of these mutations, when in heterozygous. Co-inheritance with mutations in the genes, not located in the cluster of β-globin gene may modify the phenotype of the thalassemic. Stress oxidative generated by the increase of ROS is one of the mechanisms responsible for the acceleration of cell apoptosis. There are evidences that alpha chains in excess, even in small quantities, are sufficient to start ROS generation and thus oxidative stress in heterozygous beta thalassemic. In homozygous form or genetic heterozygous compound present severe anemia, transfusion dependent and iron overload is one of the complications more frequent and severe in these patients. In the heterozygous form the presence of iron overload is rare, but alterations in the profile of iron are observed. The aim of this study was to examine influence of the levels of serum ferritin, the mutations in the β-globin gene, the mutations in the HFE gene, activity of enzymes detoxification, GST and CAT, and polymorphisms of GSTs in the expression phenotypic of individuals heterozygous beta thalassemic. We evaluated 158 patients with beta thalassemia heterozygous previously diagnosed by classic methodologies. They were all adults, Caucasian origin, residents in the Central Region of São Paulo state and accompanied in public or private services of the region. The control group consisted of 24 adults, Caucasians and residents in the same region. Hematologic evaluation was carried out by hemogram, in automated counters of cells and quantification of the subfractions of Hb A2 and Hb F by HPLC; the iron profile was based on the transferrin saturation , calculated on the serum iron and total iron binding capacity... (Complete abstract click electronic access below)

A atividade de catalase em Candida albicans tem sido sugerida como um mecanismo de resistência ao antifúngico anfotericina B. Neste contexto, poucos são os estudos de enzimas como catalase e superóxido dismutase em leveduras do gênero Candida expostas a diferentes situações. Assim, este estudo teve por objetivo investigar o efeito da exposição de Candida a antineoplásicos, íons metálicos e antifúngicos como fluconazol e anfotericina B sobre a atividade dessas enzimas. Os resultados apontaram que o antineoplásico metotrexato aumentou a atividade da catalase em C. albicans, que íons metálicos como cobre, zinco, manganês e ferro produzem um efeito variável na atividade de superóxido dismutase, bem como, um efeito variável de um íon no acúmulo de outro. Também verificamos através de nossos resultados que a indução de resistência ao fluconazol e anfotericina B aumentam a atividade de catalase e superóxido dismutase em C. albicans e C. dubliniensis. Esses resultados sugerem que o antineoplásico metotrexato e a indução de resistência a anfotericina B e fluconazol podem gerar um estresse oxidativo em leveduras do gênero Candida que possivelmente se adaptam a esse estresse aumentando seus mecanismos de defesa antioxidante. Esse efeito pode induzir a uma maior resistência desses organismos ao ataque de células fagocíticas do hospedeiro. / Catalase is an enzyme that has been suggested to be involved in resistance mechanisms to antifungal drug such as amphotericin B. There are few studies focusing on catalase and superoxide dismutase in yeasts, such as Candida, exposed to different situations. Thereby, the aim of the present study was to investigate the effect of exposing Candida to antineoplastic drugs, metallic ions and antifungial drugs, namely fluconazole and amphotericin B, on catalase and superoxide dismutase activities. Results show that methotrexate induced catalase activity in C. albicans and that metallic ions, such as copper, zinc, manganese and iron produced a variable effect on superoxide dismutase activity of C. albicans, as well as a variable effect in the uptake of one ion on another. We also showed that fluconazole and amphotericin B resistance increased catalase and superoxide dismutase activity in C. albicans and C. dubliniensis. These results suggest that methotrexate as well as the induction of fluconazole- and amphotericin B-resistance may induce oxidative stress in yeasts such as Candida, which may adapt by increasing antioxidant defense mechanisms. This effect may induce a major resistance of this yeast to phagocytic cell attack.

Thesis submitted in fulfilment of the requirements for the degree Master of Technology: Biomedical Technology In the Faculty of Health and Wellness sciences at the Cape Peninsula University of Technology / Oxidative stress (OS) plays a major role in the pathogenesis of different conditions including male infertility. OS is caused by high amounts of reactive oxygen species (ROS) that exceed the antioxidant ability of a system. The sperm membrane is rich in polyunsaturated fatty acids and is prone to damage by ROS. Sperm damage decreases motility, concentration and viability. Testicular oxidative stress impairs Leydig cell function and leads to decreased hormonal control as the cells secrete testosterone. Studies have shown the role of antioxidants in the fight against OS. Recently more studies have been focused on the use of natural antioxidants derived from fruits, vegetables, nuts and oils for this purpose. The effects of Buriti oil supplementation have been investigated in the diet and it had been shown that it is rich in carotenoids and vitamin E. This study explored the antioxidant effects of Buriti oil on testicular tissue, epidymal tissue and hormonal function in male Wistar rats. Experiments were conducted for 6 weeks and male adult Wistar rats (10 weeks) were divided into two groups (n=30) for each group. The control group received standard rat chow and water while the experimental group received Buriti oil, rat chow and water daily. Both groups were exposed to natural physiological OS. The plasma, testicular and epididymal tissue samples of both groups were analysed for various parameters. Testicular weight and epididymal weight of rats fed with Buriti oil were significantly increased compared to the control group. Testicular and epididymal MDA levels were decreased in rats fed with Buriti oil compared to the control group. Superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione (GSH) activities were increased in both epididymal and testicular tissue of the Buriti oil fed group than the control group. Data were expressed in mean ± SEM. In conclusion, our findings suggest that Buriti oil supplementation could prevent OS damage in the male reproductive system.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-11Bitstream added on 2014-06-13T20:00:33Z : No. of bitstreams: 1 leite_ghp_dr_botfca.pdf: 2146342 bytes, checksum: 5a9a9b4781f1f8ea2e23ac1a5b0e501f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O trabalho teve por objetivo estudar a eficácia da aplicação foliar de boro e silício associados ou não à maturadores, com diferentes mecanismos de ação, e as alterações fisiológicas e bioquímicas na cana-de-açúcar, suas implicações na produtividade, qualidade tecnológica e rebrota da soqueira, tanto em aplicação de início como de final de safra. Para tanto, a pesquisa foi composta de experimentos conduzidos nos meses de setembro de 2006 e 2007 (momento da aplicação dos tratamentos envolvendo a variedade de cana-de-açúcar de maturação médiatardia SP80-3280) e março de 2007 e 2008 (momento da aplicação dos tratamentos envolvendo a variedade de cana-de-açúcar de maturação precoce RB855453). Os experimentos foram conduzidos nas Fazendas Santa Maria e Bosque, situadas no município de Igaraçu do Tietê, Estado de São Paulo, pertencente ao GRUPO COSAN – Unidade Barra. Os tratamentos consistiram na aplicação de 16 (dezesseis) tratamentos, divididos em 2 (dois) experimentos distintos, representados conforme a seguir: Experimento 1 – aplicação de 3 (três) maturadores com diferentes mecanismos de ação, sendo classificados como inibidores (Glifosate e Sulfometuron metil) e retardante do crescimento vegetal (KNO3) e a testemunha (maturação natural), associados ou não à aplicação foliar de boro e; Experimento 2 – aplicação dos maturadores supracitados e a testemunha (maturação natural), associados ou não à aplicação foliar de silício. O delineamento experimental utilizado nos experimentos foi o em blocos casualizados, com cinco repetições. O estudo da aplicação foliar de boro, associado ou não a compostos químicos com diferentes mecanismos de ação (Glifosate, KNO3 e Sulfometuron metil), no início das safras 2007 e 2008, possibilitou as seguintes conclusões: a) o micronutriente isolado ou associado aos agentes químicos... / The work aimed to study the effectiveness of foliar application of boron and silicon, with and without maturation, with different mechanisms of action, and physiological and biochemical alterations in sugarcane, its implications on productivity, quality and technological regrowth stump, both application early as the end of harvest. For this, the research consisted of experiments conducted during September 2006 and 2007 (when the treatments involving the variety of sugarcane in medium-late maturing SP80-3280) and March 2007 and 2008 (when the treatments involving the variety of sugarcane early ripening RB855453). The experiments were conducted in Santa Maria and Bosque Farms, located in the municipality of Igaraçu Tietê, São Paulo, which belongs to the group COSAN - Barra. The treatments consisted of applying 16 (sixteen) treatments, divided into 2 (two) separate experiments, represented as follows: Experiment 1 - the application of three (3) maturation with different mechanisms of action and is classified as inhibitors (Glyphosate and Sulfomethuron methyl) and plant growth retardant (KNO3) and control (natural ripening), with and without foliar application of boron and Experiment 2 - maturation application above and the control (natural ripening), associated or not with foliar application of silicon. The experimental design used in the experiments was a randomized block with five replications. The study of foliar application of boron, with or without the chemical compounds with different mechanisms of action (Glyphosate, KNO3 and Sulfomethuron methyl) at the beginning of the harvest 2007 and 2008, allowed the following conclusions: a) the micronutrient alone or in combination with agents chemical (Glyphosate, KNO3 and Sulfomethuron methyl) induced significant changes in acid invertase activity and neutral, albeit as different intensities and the mechanism of action of chemical... (Complete abstract click electronic access below)

O câncer de pulmão permanece a neoplasia mais letal com cerca de 1,59 milhões de mortes por ano em todo o mundo, com eficácia terapêutica limitada e mau prognóstico. Aproximadamente 80 % dos casos são de câncer de pulmão de não pequenas células (CPNPC), desses, cerca de 50 % são os adenocarcinomas (AdC). Atualmente o tratamento padrão-ouro no tratamento de AdC pulmonar é baseado em agentes de platina (cisplatina, carboplatina) normalmente administrados em combinação com outros agentes, entretanto a doença é raramente curável. Vários fatores contribuem para a alta taxa de mortalidade e um dos mais comuns é a quimioresistência. Portanto, existe uma necessidade urgente de terapias mais eficazes em aumentar a sobrevida global dos pacientes com essa patologia. Tendo em vista que o desenvolvimento de novos medicamentos requer muito tempo e investimento financeiro, o uso de drogas existentes como terapia combinada torna-se uma boa abordagem. Estudos anteriores de nosso grupo demonstraram que a agressividade do AdC de pulmão está associada com elevado estresse oxidativo onde o peróxido de hidrogênio (H2O2) tem um papel crucial, uma vez que o tratamento com a enzima antioxidante catalase (CAT) atenuou a agressividade do tumor. Assim, este estudo avaliou a eficácia da terapia combinada com CAT na linhagem celular A549 de AdC humano. Primeiramente, a adição de CAT causou uma inibição dose-dependente da proliferação celular com um efeito máximo na dose de 1000 U/mL. Essa inibição foi relacionada a um efeito citostático, não citotóxico, do consumo de H2O2 intracelular, já que a retirada da CAT restaurou a taxa proliferativa celular a níveis de controle. Após, a avaliação do “status” de ativação do NFB mostrou um aumento de 2,9 vezes no imunoconteúdo citosólico da subunidade p65, sugerindo uma diminuição da ativação do NFB em células tratadas com CAT. A análise do efeito do tratamento de CAT em parâmetros redox mostrou uma redução nos níveis intracelulares de tióis (-SH) e no potencial antioxidante total (TRAP) e um aumento na produção de H2O2 e nos níveis de glutationa (GSH). Entre as drogas testadas (Cisplatina, 5-Fluorouracil, Paclitaxel, Hidroxiuréia e Daunorrubicina), apenas o tratamento com paclitaxel e hidroxiureia mostraram aumento da produção de H2O2 quando comparados com o veículo. No entanto, o co-tratamento com CAT e paclitaxel não alterou a produção de H2O2. Hidroxiuréia e CAT promoveu uma redução na produção de H2O2, quando comparado com a droga sozinha. A cisplatina, por si só não teve efeito na produção de H2O2, mas cisplatina e CAT promoveram um aumento na produção de H2O2. A eficácia da terapia combinada com CAT em potencializar a citotoxicidade dos quimioterápicos, foi analisada pelo ensaio SRB e pelo software CalcuSyn®. Pela análise dos valores de “Combination Index” (CI) observamos que, com a exceção da combinação de CAT e paclitaxel, que gerou antagonismo, as combinações de CAT com cisplatina, 5-fluorouracil e hidroxiuréia exibiram um efeito sinérgico na eliminação de células da linhagem de AdC humano A549. Dessa forma, os dados aqui apresentados sugerem que a terapia combinada de CAT com cisplatina, 5-fluorouracil e hidroxiuréia pode surgir como uma nova estratégia terapêutica para o AdC. / Lung cancer remains the most lethal malignant disease with nearly 1.59 million deaths annually worldwide, limited efficacy of current therapeutics and dismal prognostic. Approximately 80% of the cases are non-small cell lung cancer (NSCLC), of these, roughly 50% are adenocarcinomas (AdC). Currently, the gold standard treatment for AdC is based on platinum agents, usually given in combination with other agents. Despite these therapies, the disease is rarely curable. Several factors contribute to the high mortality rate and one of the most common includes tumor cell chemoresistance to cytotoxic drugs. Therefore, there is an urgent need for more effective therapies that could increase the overall survival of lung AdC patients. With the notion that the development of novel drugs require much time and financial investment, the use of existing drugs as adjuvant treatment becomes a good approach. Previous studies of our group demonstrated that lung AdC aggressiveness is associated with elevated intracellular oxidative stress, in which hydrogen peroxide (H2O2) plays a crucial role, since the exogenous treatment with the antioxidant enzyme catalase (CAT) attenuated tumor aggressiveness. Then, this study evaluated the efficacy of CAT adjuvant treatment in the human AdC cell line A549. Firstly, exogenous addition of CAT caused a dose dependent inhibition on cellular proliferation with a maximal dose effect of 1000 U/mL. Growth inhibition was related to a cytostatic, not cytotoxic, effect of intracellular H2O2 consumption, since CAT washout readily restored cellular proliferative rate similar to control. After that, evaluation of NFB activation status showed a 2.9-fold increase in the cytosolic immunocontent of the NFB subunit p65, suggesting a decreased NFB activation in CAT-treated cells. Analysis of CAT treatment effect in redox parameters showed decreased intracellular thiol levels (-SH) and non-enzymatic antioxidant potential (TRAP) and increases the H2O2 production and glutathione levels (GSH). Among drugs tested (cisplatin, paclitaxel, 5-fluorouracil, daunorubicin, hydroxurea) (GI50), only paclitaxel and hydroxyurea showed increased production of H2O2 when compared with vehicle. However, co-treatement with CAT and paclitaxel had no alteration in the H2O2 production. Hydroxyurea plus CAT had a decreased in H2O2 production when compared with the drug alone. Cisplatin, alone had no effect in H2O2 production, but cisplatin plus CAT, had an increased in H2O2 production. Regarding the effectiveness of adjuvant CAT treatment in potentiate chemotherapeutic drugs cytotoxicities, we used de SRB assay and Calcusyn Software to access this interaction. From analyzes of combination index (CI) values, generated by CalcuSyn, we observed that with the exception of CAT plus paclitaxel, all combinations exhibited a synergistic effect. Taken together, data presented here suggest that adjuvant CAT treatment can act synergistically with chemotherapeutics and modulate tumorassociated signaling pathways providing a new therapeutic strategy for AdC therapy.

Estima-se que 1 em 5 pessoas morrerão de câncer e, neste momento 1 em 200 vivem com a patologia. Classicamente, é descrita como uma doença genética, e por muito tempo as abordagens terapêuticas focaram em mutações. Apesar de casos de sucesso, a eficácia terapêutica ainda é insuficiente, estima-se que 2 em 3 pessoas diagnosticadas com câncer morrerão de causas relacionadas à doença. Apesar da imensa variabilidade genética, diferentes mutações convergem para um número limitado de fenótipos. Assim, o estudo do câncer sob uma ótica evolutiva focando em fenótipos agressivos é uma alternativa promissora. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi investigar fenótipos agressivos em tumores sólidos, buscando caracterizar alterações e propor alvos e terapias. Para isto, investigou-se câncer de pulmão e mama sob diferentes aspectos biológicos. O capítulo I estudou metabolismo redox em câncer de pulmão de não-pequenas células (NSCLC). Aqui, demonstramos que o desbalanço redox oxidativo intracelular é um fenótipo agressivo. Posteriormente, sugerimos abordagens antioxidantes como uma boa proposta terapêutica. O capítulo II estudou adenocarcinoma de pulmão sob o contexto da reprogramação metabólica. Neste, sugerimos que o metabolismo glicolítico dependente de transportadores de glicose (GLUT’s) e lactato/piruvato (MCT’s) é um fenótipo agressivo. Por fim, propomos que inibidores para isoformas específicas destes transportadores podem ter impacto clínico nesta malignidade. O capítulo III investigou uma abordagem terapêutica para um fenótipo agressivo bem estabelecido, a resistência à hipóxia. Utilizando modelos in vitro e in vivo de câncer de mama triplo-negativo (TNBC), encontramos que o inibidor epigenético JQ1 é capaz de inibir genes e rotas importantes à sobrevivência da célula cancerosa em hipóxia. Utilizando modelos in vitro e in vivo de câncer de mama triplo-negativo (TNBC), encontramos que o inibidor epigenético JQ1 é capaz de inibir genes e rotas importantes à sobrevivência da célula cancerosa em hipóxia. Deste modo, é proposto esta abordagem epigenética na terapêutica de TNBC. Portanto, foi demonstrado aqui que a investigação de fenótipos agressivos é capaz de contribuir para a oncologia molecular, identificando padrões e apontando alvos. Foi dito no passado que “nada em biologia faz sentido senão à luz da evolução”, e foi sob esta filosofia que o presente trabalho foi desenvolvido e buscou contribuir na busca da cura do câncer. / It is estimated that 1 in 5 people will die of cancer, and now 1 in 200 live with this pathology. Classically, cancer is described as a genetic disease, and for a long time therapeutic approaches focused on mutations. Despite some successes, treatment efficacy is still insufficient, it is estimated that 2 out of 3 people diagnosed with cancer will die from causes related to the disease. Despite the large genetic variability, different mutation converge to a limited number of phenotypes. Thus, the investigation of cancer under an evolutive perspective that focus on aggressive phenotypes is an promising alternative approach. Therefore, this study aimed to investigate aggressive phenotypes in solid tumors, seeking to characterize changes and propose targets and therapies. For this, we investigated lung cancer and breast under different biological aspects. Chapter I studied redox metabolism in non-small cell lung cancer (NSCLC). Here, we show that redox imbalance favouring intracellular oxidative stress is an aggressive phenotype. Later, we suggest antioxidants approaches as a promising therapeutic window. Chapter II studied lung adenocarcinoma in the context of metabolic reprogramming. Herein, we suggest that the glycolytic metabolism dependent on transporters of glucose (GLUT's) and lactate / pyruvate (MCT's) is an aggressive phenotype. Then, we propose that inhibitors for specific isoforms of GLUT’s and MCT’s may have clinical impact in this malignancy. Chapter III investigated a therapeutic approach for cells that are resistant to hypoxia, a well-established aggressive phenotype. Using in vitro and in vivo models of triple negative breast cancer (TNBC), we find that the epigenetic inhibitor JQ1 is able to inhibit important genes and pathways in hypoxic cancer cell survival. Thus, we propose this epigenetic approach in the management of TNBC. Therefore, it was demonstrated here that investigation of aggressive phenotypes can contribute to the molecular oncology, identifying patterns and pointing targets. It was once said that "nothing in biology makes sense except in the light of evolution", this study was conducted under this philosophy to contribute in the search for the cure of cancer.

Estima-se que 1 em 5 pessoas morrerão de câncer e, neste momento 1 em 200 vivem com a patologia. Classicamente, é descrita como uma doença genética, e por muito tempo as abordagens terapêuticas focaram em mutações. Apesar de casos de sucesso, a eficácia terapêutica ainda é insuficiente, estima-se que 2 em 3 pessoas diagnosticadas com câncer morrerão de causas relacionadas à doença. Apesar da imensa variabilidade genética, diferentes mutações convergem para um número limitado de fenótipos. Assim, o estudo do câncer sob uma ótica evolutiva focando em fenótipos agressivos é uma alternativa promissora. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi investigar fenótipos agressivos em tumores sólidos, buscando caracterizar alterações e propor alvos e terapias. Para isto, investigou-se câncer de pulmão e mama sob diferentes aspectos biológicos. O capítulo I estudou metabolismo redox em câncer de pulmão de não-pequenas células (NSCLC). Aqui, demonstramos que o desbalanço redox oxidativo intracelular é um fenótipo agressivo. Posteriormente, sugerimos abordagens antioxidantes como uma boa proposta terapêutica. O capítulo II estudou adenocarcinoma de pulmão sob o contexto da reprogramação metabólica. Neste, sugerimos que o metabolismo glicolítico dependente de transportadores de glicose (GLUT’s) e lactato/piruvato (MCT’s) é um fenótipo agressivo. Por fim, propomos que inibidores para isoformas específicas destes transportadores podem ter impacto clínico nesta malignidade. O capítulo III investigou uma abordagem terapêutica para um fenótipo agressivo bem estabelecido, a resistência à hipóxia. Utilizando modelos in vitro e in vivo de câncer de mama triplo-negativo (TNBC), encontramos que o inibidor epigenético JQ1 é capaz de inibir genes e rotas importantes à sobrevivência da célula cancerosa em hipóxia. Utilizando modelos in vitro e in vivo de câncer de mama triplo-negativo (TNBC), encontramos que o inibidor epigenético JQ1 é capaz de inibir genes e rotas importantes à sobrevivência da célula cancerosa em hipóxia. Deste modo, é proposto esta abordagem epigenética na terapêutica de TNBC. Portanto, foi demonstrado aqui que a investigação de fenótipos agressivos é capaz de contribuir para a oncologia molecular, identificando padrões e apontando alvos. Foi dito no passado que “nada em biologia faz sentido senão à luz da evolução”, e foi sob esta filosofia que o presente trabalho foi desenvolvido e buscou contribuir na busca da cura do câncer. / It is estimated that 1 in 5 people will die of cancer, and now 1 in 200 live with this pathology. Classically, cancer is described as a genetic disease, and for a long time therapeutic approaches focused on mutations. Despite some successes, treatment efficacy is still insufficient, it is estimated that 2 out of 3 people diagnosed with cancer will die from causes related to the disease. Despite the large genetic variability, different mutation converge to a limited number of phenotypes. Thus, the investigation of cancer under an evolutive perspective that focus on aggressive phenotypes is an promising alternative approach. Therefore, this study aimed to investigate aggressive phenotypes in solid tumors, seeking to characterize changes and propose targets and therapies. For this, we investigated lung cancer and breast under different biological aspects. Chapter I studied redox metabolism in non-small cell lung cancer (NSCLC). Here, we show that redox imbalance favouring intracellular oxidative stress is an aggressive phenotype. Later, we suggest antioxidants approaches as a promising therapeutic window. Chapter II studied lung adenocarcinoma in the context of metabolic reprogramming. Herein, we suggest that the glycolytic metabolism dependent on transporters of glucose (GLUT's) and lactate / pyruvate (MCT's) is an aggressive phenotype. Then, we propose that inhibitors for specific isoforms of GLUT’s and MCT’s may have clinical impact in this malignancy. Chapter III investigated a therapeutic approach for cells that are resistant to hypoxia, a well-established aggressive phenotype. Using in vitro and in vivo models of triple negative breast cancer (TNBC), we find that the epigenetic inhibitor JQ1 is able to inhibit important genes and pathways in hypoxic cancer cell survival. Thus, we propose this epigenetic approach in the management of TNBC. Therefore, it was demonstrated here that investigation of aggressive phenotypes can contribute to the molecular oncology, identifying patterns and pointing targets. It was once said that "nothing in biology makes sense except in the light of evolution", this study was conducted under this philosophy to contribute in the search for the cure of cancer.