O Rhipicephalus microplus é um parasita obrigatório hematófago, monoxeno, que gera grande impacto econômico a partir da ação espoliativa sobre o seu hospedeiro preferencial. A glicogênio sintase quinase 3 (GSK-3), uma proteína altamente conservada e ubiquamente expressa entre diversas espécies, foi identificada no carrapato bovino sob a isoforma GSK-3β. Envolvida na modulação da atividade da proteína glicogênio sintase, como um agente regulador da síntese de glicogênio, essa proteína atua no metabolismo energético do R. microplus. A GSK-3 também está envolvida na via de sinalização Wnt, e por isso, já foi descrita como uma quinase essencial para a formação do embrião, estando diretamente envolvida no processo reprodutivo deste carrapato. Neste contexto, a GSK-3β é uma candidata para o desenvolvimento de novas alternativas de controle do carrapato bovino. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi estudar a participação da proteína GSK-3β na fisiologia do R. microplus a partir da inibição de sua atividade. Ensaios in vitro e in vivo foram realizados para testar a inibição química e imunológica da atividade dessa proteína. Anticorpos contra peptídeos sintéticos baseados na sequência da GSK-3β (anti- SRm0218 e anti-SRm86100) usados neste trabalho não foram capazes de inibir a atividade dessa proteína, no entanto, a inibição da GSK-3β foi alcançada quando células embrionárias de R. microplus foram submetidas à inibição química, por meio de um inibidor específico. Este resultado sustenta o potencial dessa proteína como alvo para o desenvolvimento de uma alternativa de controle do carrapato bovino, pois a sua inibição possivelmente atuaria negativamente na capacidade reprodutiva do carrapato R. microplus. / Rhipicephalus microplus is a monogenetic, hematophagous ectoparasite that has a large economic impact due to associated losses in the cattle industry. Glycogen synthase kinase 3 (GSK-3) is a highly conserved and ubiquitously expressed protein in several species. It has been identified as GSK-3β isoform in the cattle tick, and is involved in the modulation of glycogen synthase activity, as a regulator of glycogen synthesis with a role in energy metabolism of R. microplus. GSK-3β is also involved in the Wnt signaling pathway. It is a fundamental kinase for embryo development, and is directly linked with R. microplus reproductive process. Thus, the aim of this study was to investigate the role of GSK-3β in R. microplus physiology by inhibiting its activity. In vitro and in vivo assays were carried out to test its immunological and chemical inhibition. Rabbit antibodies against synthetic peptides based on GSK-3β sequence (anti-SRm0218 and anti-SRm86100) used in this work were not capable to inhibit GSK- 3β activity, but GSK-3β inhibition was reached when R. microplus embryo cells were cultivated with a specific inhibitor. This result supports the potential of this protein as a target to develop a new cattle tick control method, because its inhibition probably acts detrimentally in the reproductive capacity of the tick.

O Rhipicephalus microplus é um parasita obrigatório hematófago, monoxeno, que gera grande impacto econômico a partir da ação espoliativa sobre o seu hospedeiro preferencial. A glicogênio sintase quinase 3 (GSK-3), uma proteína altamente conservada e ubiquamente expressa entre diversas espécies, foi identificada no carrapato bovino sob a isoforma GSK-3β. Envolvida na modulação da atividade da proteína glicogênio sintase, como um agente regulador da síntese de glicogênio, essa proteína atua no metabolismo energético do R. microplus. A GSK-3 também está envolvida na via de sinalização Wnt, e por isso, já foi descrita como uma quinase essencial para a formação do embrião, estando diretamente envolvida no processo reprodutivo deste carrapato. Neste contexto, a GSK-3β é uma candidata para o desenvolvimento de novas alternativas de controle do carrapato bovino. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi estudar a participação da proteína GSK-3β na fisiologia do R. microplus a partir da inibição de sua atividade. Ensaios in vitro e in vivo foram realizados para testar a inibição química e imunológica da atividade dessa proteína. Anticorpos contra peptídeos sintéticos baseados na sequência da GSK-3β (anti- SRm0218 e anti-SRm86100) usados neste trabalho não foram capazes de inibir a atividade dessa proteína, no entanto, a inibição da GSK-3β foi alcançada quando células embrionárias de R. microplus foram submetidas à inibição química, por meio de um inibidor específico. Este resultado sustenta o potencial dessa proteína como alvo para o desenvolvimento de uma alternativa de controle do carrapato bovino, pois a sua inibição possivelmente atuaria negativamente na capacidade reprodutiva do carrapato R. microplus. / Rhipicephalus microplus is a monogenetic, hematophagous ectoparasite that has a large economic impact due to associated losses in the cattle industry. Glycogen synthase kinase 3 (GSK-3) is a highly conserved and ubiquitously expressed protein in several species. It has been identified as GSK-3β isoform in the cattle tick, and is involved in the modulation of glycogen synthase activity, as a regulator of glycogen synthesis with a role in energy metabolism of R. microplus. GSK-3β is also involved in the Wnt signaling pathway. It is a fundamental kinase for embryo development, and is directly linked with R. microplus reproductive process. Thus, the aim of this study was to investigate the role of GSK-3β in R. microplus physiology by inhibiting its activity. In vitro and in vivo assays were carried out to test its immunological and chemical inhibition. Rabbit antibodies against synthetic peptides based on GSK-3β sequence (anti-SRm0218 and anti-SRm86100) used in this work were not capable to inhibit GSK- 3β activity, but GSK-3β inhibition was reached when R. microplus embryo cells were cultivated with a specific inhibitor. This result supports the potential of this protein as a target to develop a new cattle tick control method, because its inhibition probably acts detrimentally in the reproductive capacity of the tick.

O carrapato do boi Rhipicephalus microplus é um ectoparasita de bovinos de grande importância sanitária e econômica, que produz grandes prejuízos na bovinocultura do Brasil. O uso de ivermectina como meio de controle químico, ao longo dos anos, levou à seleção de linhagens de R. microplus resistentes a ivermectina. A consequência desse processo é a perda da eficácia do acaricida. Este trabalho teve por objetivo determinar as bases moleculares da resistência a ivermectina. Para o estudo dos mecanismos envolvidos na resistência a ivermectina de R. microplus foram utilizadas duas cepas de referência: a cepa Mozo, suscetível a ivermectina, e a cepa Juarez, resistente, e duas abordagens experimentais complementares: ensaios enzimáticos com sinergistas e estudos de expressão gênica por meio de sequenciamento massivo em paralelo do RNA ou RNA-Seq. Os resultados deste trabalho permitem afirmar que o mecanismo de desintoxicação metabólica de maior importância é mediado por transportadores ABC, seguido de esterases, glutation-S-transferases e citocromo-oxidases. As diferenças de expressão gênica observadas entre as cepas, e dentro das cepas a diferentes concentrações de ivermectina, confirmam os resultados e permitem concluir que R. microplus apresenta uma resposta poligênica à ivermectina / The cattle tick Rhipicephalus microplus is one of the most important ectoparasites with great sanitary and economic importance for cattle rearing in Brazil. Ivermectin is a drug used in the chemical control of R. microplus. The utilization of ivermectin in the last 30 years has led to the selction of resistant populations of R. microplus, and thus, the loss of efficacy in the cattle tick control. To study the molecular basis of ivermectin resistance in R. microplus, two strains of ticks were used: the susceptible strain Mozo, and the resistant strain Juarez. Two complementary approaches were carried out: enzimatic assays using sinergists and gene expression studies using massive parallel sequencing of RNA or RNA-Seq. The results of this work indicate the involvement of various mechanisms of metabolic resistance. Detoxification mechanisms mediated by ABC transporters are probably the most important. Esterases, gluthathion-S-transferases and citochrome-oxidases play a less important role in detoxification. Differences in gene expression were observed between strains and among samples of the same strain exposed to different concentrations of ivermectin, confirming the result with the assays. Hence, the response of R. microplus to ivermectin is, probably, complex and poligenic

O Rhipicephalus microplus é um parasita obrigatório hematófago, monoxeno, que gera grande impacto econômico a partir da ação espoliativa sobre o seu hospedeiro preferencial. A glicogênio sintase quinase 3 (GSK-3), uma proteína altamente conservada e ubiquamente expressa entre diversas espécies, foi identificada no carrapato bovino sob a isoforma GSK-3β. Envolvida na modulação da atividade da proteína glicogênio sintase, como um agente regulador da síntese de glicogênio, essa proteína atua no metabolismo energético do R. microplus. A GSK-3 também está envolvida na via de sinalização Wnt, e por isso, já foi descrita como uma quinase essencial para a formação do embrião, estando diretamente envolvida no processo reprodutivo deste carrapato. Neste contexto, a GSK-3β é uma candidata para o desenvolvimento de novas alternativas de controle do carrapato bovino. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi estudar a participação da proteína GSK-3β na fisiologia do R. microplus a partir da inibição de sua atividade. Ensaios in vitro e in vivo foram realizados para testar a inibição química e imunológica da atividade dessa proteína. Anticorpos contra peptídeos sintéticos baseados na sequência da GSK-3β (anti- SRm0218 e anti-SRm86100) usados neste trabalho não foram capazes de inibir a atividade dessa proteína, no entanto, a inibição da GSK-3β foi alcançada quando células embrionárias de R. microplus foram submetidas à inibição química, por meio de um inibidor específico. Este resultado sustenta o potencial dessa proteína como alvo para o desenvolvimento de uma alternativa de controle do carrapato bovino, pois a sua inibição possivelmente atuaria negativamente na capacidade reprodutiva do carrapato R. microplus. / Rhipicephalus microplus is a monogenetic, hematophagous ectoparasite that has a large economic impact due to associated losses in the cattle industry. Glycogen synthase kinase 3 (GSK-3) is a highly conserved and ubiquitously expressed protein in several species. It has been identified as GSK-3β isoform in the cattle tick, and is involved in the modulation of glycogen synthase activity, as a regulator of glycogen synthesis with a role in energy metabolism of R. microplus. GSK-3β is also involved in the Wnt signaling pathway. It is a fundamental kinase for embryo development, and is directly linked with R. microplus reproductive process. Thus, the aim of this study was to investigate the role of GSK-3β in R. microplus physiology by inhibiting its activity. In vitro and in vivo assays were carried out to test its immunological and chemical inhibition. Rabbit antibodies against synthetic peptides based on GSK-3β sequence (anti-SRm0218 and anti-SRm86100) used in this work were not capable to inhibit GSK- 3β activity, but GSK-3β inhibition was reached when R. microplus embryo cells were cultivated with a specific inhibitor. This result supports the potential of this protein as a target to develop a new cattle tick control method, because its inhibition probably acts detrimentally in the reproductive capacity of the tick.

Made available in DSpace on 2016-08-19T12:56:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Ildenice.pdf: 920741 bytes, checksum: cb605055b3e79b9a2a27421635da66c0 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / The oil constituent of Cinnamomum zeylanicum were identified by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The essential oil activity were also evaluated against larvae and engorged females Rhipicephalus microplus(cattle tick). The leaves oil showed a yeld of 1.03% and its main constituints were benzyl benzoate (65.39%), linalool (5.37%), E-cinnamaldeyde (3.97%), α-Pinene (3.95%), β-phellandrene (3.42%), Eugenol (3.36%) e Benzaldeyde (2.68%), corresponding approximately to 88% of the oil. Test package larvae and immersion test of engorged were performed. Similar tests were also performed for the standard benzyl benzoate, the main component of the essential oil. Lethal concentrations of the larvae test were 1.005 mg.mLˉ¹ and 3.368 mg.mLˉ¹ for the essential oil and the standard benzyl benzoate respectively, thus demonstrating that the oil had a better larvicidal activity against the R. microplus. As for the adult immersion test, it was observed that both the essential oil and the standard benzyl benzoate did not cause mortality in direct engorged female R. microplus, but interfered with the process of reproduction of ticks, causing a decrease in egg production and decreased hatchability and mortality of larvae, so thus presenting partial control over the cattle tick. / Os constituintes do óleo de Cinnamomum zeylanicum foram identificados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Também foi avaliada a atividade deste óleo essencial contra larvas e fêmeas de Rhipicephalus microplus (carrapato bovino). O óleo das folhas mostrou um rendimento de 1,03% e seus principais constituintes foram Benzoato de Benzila (65,39%), Linalol (5,37%), E-Cinamaldeido (3,97%), α-Pineno (3,95%), β-Felandreno (3,42%), Eugenol (3,36%) e Benzaldeido (2,68%), correspondendo aproximadamente a 88% do óleo. Teste de pacote de larvas e teste de imersão de fêmeas ingurgitadas foram realizados. Testes semelhantes também foram feitos para o padrão Benzoato de Benzila, componente principal do óleo essencial. As concentrações letais do teste de larvas foram de 1,005 mg.mLˉ¹ e 3,368 mg.mLˉ¹ para o óleo essencial e para o padrão Benzoato de Benzila, respectivamente, demonstrando assim que o óleo teve uma melhor atividade larvicida contra o R. microplus. Já para o teste de imersão de adultos, foi observado que, tanto o óleo essencial como o padrão Benzoato de Benzila não ocasionaram mortalidade direta nas fêmeas ingurgitadas de R. microplus, mas interferiram no processo de reprodução dos carrapatos, ocasionando diminuição na produção de ovos e diminuição na eclodibilidade e mortalidade das larvas, portanto, apresentando assim, um controle parcial sobre o carrapato bovino.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-09-08T13:37:00Z No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T13:37:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) Previous issue date: 2011-08-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The formulations of entomopathogenic fungi to control ticks has been widely studied. The present study evaluated the efficacy of Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) and Beauveria bassiana oily formulations on different Rhipicephalus microplus stages. The efficacy of conidial aqueous suspensions was compared to the efficacy of conidia formulated in 10, 15 or 20% mineral oil. Twelve groups were studied: one control aqueous, three control groups oil-based at 10%, 15% or 20%, two fungal aqueous suspensions of M. anisopliae s.l. or B. bassiana and M. anisopliae s.l. or B. bassiana oil-based formulations at 10%, 15% or 20%. To prepare aqueous suspensions and oily formulations, fungal isolates were cultivated on grains rice in polypropylene bags. The conidial suspensions and formulations had concentration of 108 conidia/mL. Bioassays were repeated twice. After treatment, the biological parameters of engorged females were evaluated; the following parameters were evaluated in the bioassays with eggs: period of incubation, period of hatch and hatching percentage; in bioassays with larva mortality was evaluated. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations were more effective than aqueous suspensions to R. microplus eggs, larvae and engorged females. Metarhizium anisopliae s.l. oil-based formulations caused significant effects in all biological parameters of engorged females while B. bassiana oil-based formulations modified significantly the nutritional index only. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana formulated in mineral oil caused a control percentage up to 93.69% and 21.67%, respectively, while M. anisopliae s.l. and B. bassiana aqueous suspension caused a control percentage of 18.70% and 1.72%, respectively. Eggs treated with M. anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations had reduced percentage of hatch up to 102.5 and 3.65 times, respectively. In the bioassay with larvae, M. anisopliae s.l. oil-based formulations caused approximately 100% mortality five days after treatment, while larva treated with B. bassiana oil-based formulations reached 100% mortality only at day 20 after treatment. Larva from oil-based control groups had mortality at day 15 after treatment, indicating possible toxic effect off the oil for this R. microplus stage. The results showed that M. anisopliae s.l., Ma 959 isolate, was more virulent to R. microplus engorged females, eggs and larvae than B. bassiana, Bb 986 isolate. The fungal mineral oily formulations tested were more effective than the aqueous suspension. Oil-based formulations at 10%, 15% or 20% enhances the activity of M. anisopliae s.l., Ma 959, and B. bassiana, Bb 986, to R. microplus tick and can be used as an adjuvant for oily formulations / A utiliza??o de formula??es de fungos entomopatog?nicos no controle de carrapatos tem sido amplamente estudada. O presente estudo avaliou a efic?cia de formula??es do isolado Ma 959 de Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) e Bb 986 de Beauveria bassiana contendo 10%, 15% e 20% de ?leo mineral sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus, al?m de comparar a efici?ncia entre formula??es oleosas e suspens?es aquosas dos mesmos isolados f?ngicos sobre as fases do desenvolvimento do carrapato R. microplus. Foram formados doze grupos: controle aquoso e controles com 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral, suspens?o aquosa de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana e formula??es de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana contendo 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral. Para o preparo das suspens?es aquosas e formula??es oleosas, os isolados f?ngicos foram cultivados em gr?os de arroz acondicionado em sacos de polipropileno. As suspens?es e formula??es conidiais utilizadas possu?am concentra??o de 108 con?dios/mL. Os bioensaios foram repetidos duas vezes. Os par?metros biol?gicos das f?meas ingurgitadas foram avaliados; em rela??o aos ovos foram avaliados os per?odos de incuba??o e eclos?o e o percentual de eclos?o, e para larvas foi avaliado o percentual de mortalidade. As formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e de B. bassiana foram mais eficazes sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de R. microplus do que as suspens?es aquosas. O isolado de M. anisopliae s.l. formulado em ?leo mineral causou altera??es significativas em todos os par?metros de f?meas ingurgitadas, entretanto, as formula??es oleosas do isolado de B. bassiana alteraram significativamente somente o ?ndice nutricional. Os isolados f?ngicos de M. anisopliae s.l. e B. bassiana formulados em ?leo mineral apresentaram percentual de controle de at? 93,69% e 21.67%, respectivamente, enquanto que o percentual de controle das suspens?es aquosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana foi de 18,70% e 1,72%, respectivamente. No tratamento de ovos, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana causaram redu??o no percentual de eclos?o de at? 102,5 e 3,64 vezes, respectivamente. No bioensaio com larvas, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. causaram um percentual de mortalidade pr?ximo a 100% no quinto dia ap?s o tratamento, enquanto que as formula??es de B. bassiana atingiram este percentual somente no 20? dia ap?s o tratamento. Os grupos controle contendo ?leo mineral causaram mortalidade de larvas a partir do 15? dia ap?s o tratamento, indicando um poss?vel efeito t?xico do ?leo sobre este est?gio de R. microplus. Os resultados demonstram que o isolado Ma 959 de M. anisopliae s.l. foi mais virulento para f?meas ingurgitadas, ovos e larvas de R. microplus do que o isolado Bb 986 de B. bassiana. As formula??es oleosas dos fungos testados foram mais eficazes do que as suspens?es aquosas. O ?leo mineral utilizado nas concentra??es de 10%, 15% e 20% potencializa a a??o dos isolados Ma 959 de M. anisopliae s.l. e Bb 986 de B. bassiana contra o carrapato R. microplus, podendo ser utilizado como adjuvante em formula??es oleosas.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-08-28T18:22:19Z No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T18:22:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) Previous issue date: 2016-10-03 / CAPES / CNPq / The tick Rhipicephalus microplus has been considered the most important parasite in cattles. It causes economic lost in dairy and beef cattle. As the fungus Metarhizium spp, a promising biocontrol agent, with remarkable virulence and efficacy against this arthropod. Environmental conditions can directly influence entomopathogenic fungal activity when it is released on the field. Therefore, adjuvants should be used to enhance fungal pathogenicity, stability and viability under unfavorable environmental conditions. Accordingly, several oily vehicles have been studied as adjuvant components. The present study aimed at investigate under semi-natural conditions, the permanence of fungi in the soil, the pathogenicity and the efficacy of two isolates of Metarhizium anisopliae sensu latu (ARSEF 3641 and CG 148) formulated in oil (soy and mineral), on engorged females of R. microplus engorged. The fungus was mass produced on rice cultivation and the semi-natural environment was framed from pots with Brachiaria brizantha cv. Marandu. The experiment was compound of seven groups: Control OLV (treated with vegetable oil and 0,1% of tween 80), Control OLM (treated with mineral oil and 0,1% of Tween 80), Treated 3641 OLV (treated with isolated ARSEF 3641 + vegetable oil); Treated 3641 OLM (treated with ARSEF 3641 isolated + mineral oil); Treated CG 148 OLV (treated with CG148 isolated + vegetable oil); Treated CG 148 OLM (treated with CG 148 isolated + mineral oil). Each group contained ten pots. The soil of each pot was sprayed with 80 ml of formulation at 108 conidia/ml in accordance with the proposed group. Afterwards, 5 engorged females were put on each pot. All pots were daily inspected for evaluating the percent mortality of famales. The efficacy of formulations tested was obtained by comparison of the number of live larvae collected at the apex of forage leaves of the control groups with the number of larvae from the treated groups. The collection of larvae was held on the 7th, 14th and 21st after the hatch. To evaluate the presence of Metarhizium spp. in the soil, a methodology was established to quantify the colonies number found in samples collected from each pot before the spraying and at 3th, 7th, 21th and 60th day after treatment. For the standardization of the methodology set out in the quantification of colonies in the soil, data from three evaluators were confronted by Kaapa test, the statistical analysis of data were submitted to the distribution of normality by the Shapiro-Wilk test. Data were analyzed as nonparametric and we used the Kruskal-Wallis test for analysis of variance followed by the Student-Newman-Keuls to compare the mean. The tested oil fungal formulations showed daily efficacy ranging between 85,08 and 96,13% compared to their respective controls. The group trated with isolated ARSEF 3641 formulated both in mineral oil and vegetable oil showed the better efficacy when compared to the respective control groups. Also, during tick females? laying period, it was possible to observe Metarhizium spp. externalization on R. microplus engorged females cuticle in all groups that were exposed to fungal formulations, confirming the ability of these fungal isolates on develop all growth stages over this arthropod in semi-natural conditions. Both fungal isolates formulated in vegetable or mineral oil showed to be able to remain active in semi-natural environment as they were pathogenic and effective against engorged females, and able to reduce significantly future generations of the tick. / O carrapato Rhipicephalus microplus ? considerado um dos principais agentes de parasitismo em bovinos por representar significativas perdas econ?micas na pecu?ria de leite e corte. Sendo o fungo Metarhizium spp, um promissor agente biocontrolador para este artr?pode, por apresentar grande virul?ncia e efic?cia contra este ectoparasita. Agentes microbianos quando lan?ados a campo, podem sofrer grande influ?ncia pelas intemp?ries ambientais, devendo estes receberem componentes que favore?am a sua patogenicidade, perman?ncia e viabilidade no ambiente, a fim de atingirem resultados satisfat?rios. Visto isto, diferentes ve?culos oleosos v?m sendo alvos de estudos como componentes adjuvantes. O objetivo deste trabalho foi investigar, sob condi??es seminaturais, a perman?ncia no solo, a virul?ncia e a efic?cia de dois isolados do fungo Metarhizium anisopliae s.l. (ARSEF 3641 e CG 148) formulados em ?leo (soja e mineral) sobre f?meas de R. microplus, assim como a taxa e recupera??o de larvas. O fungo foi produzido em massa a partir do cultivo dos isolados em arroz e para a forma??o do ambiente seminatural, sementes de Brachiaria brizantha, cultivar Marandu, foram plantadas em vasos de polipropileno. O experimento foi composto por sete grupos: Controle CTR (grupo sem tratamento); Controle OLV (tratado com ?leo vegetal e Tween 80 a 0,1%), Controle OLM (tratado com ?leo mineral e Tween 80 a 0,1%), Tratado 3641 OLV (tratado com o isolado ARSEF 3641 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado 3641 OLM (tratado com o isolado f?ngico ARSEF 3641 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLV (tratado com o isolado 148 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLM (tratado com o isolado CG 148 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%). Cada grupo conteve dez vasos. Foram pulverizados sobre a superf?cie do solo de cada vaso, 80ml da formula??o a 108 con?dios/ml de acordo com o grupo proposto para cada formula??o e posteriormente 5 f?meas ingurgitadas de peso m?dio e homog?neo foram adicionadas em cada vaso. Os mesmos foram vistoriados diariamente para a avalia??o da mortalidade das f?meas. O percentual de efic?cia das formula??es dos isolados testados foi obtido a partir da compara??o entre o n?mero de larvas vivas coletadas no ?pice das folhas da forrageira dos grupos controles e dos grupos tratados. A coleta de larvas foi realizada no 7?, 14? e 21? ap?s a eclos?o das mesmas. Para a avalia??o da presen?a de Metarhizium spp. no solo, foi estabelecido e validada uma metodologia para a quantifica??o do n?mero de col?nias encontradas em amostras coletadas de cada vaso antes da pulveriza??o e no 3?, 7?, 21? e 60? dia ap?s o tratamento. A valida??o do m?todo se fez pelo confronto da avalia??o de tr?s observadores utilizando o teste Kaapa. Para a an?lise estat?stica dos demais dados, os mesmos foram submetidos ? distribui??o da normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk sendo classificados como n?o param?tricos e foi utilizado o teste de Kruskal Wallis para an?lise de vari?ncia, seguido do Student-Newman-Keuls para compara??o entre as ordena??es m?dias. Os grupos tratados com as formula??es f?ngicas oleosas apresentaram efic?cia m?dia no controle de R. microplus variando entre 85,08 e 96,13% em rela??o aos seus respectivos grupos controles durante o per?odo de avalia??o do n?mero de larvas infestantes. O isolado ARSEF 3641 formulado tanto em ?leo vegetal quanto em ?leo mineral apresentou os melhores percentuais de efic?cia. Durante o per?odo de postura das f?meas, foi poss?vel encontrar a exterioriza??o de Metarhizium sp. nas mesmas em todos os grupos tratados com as formula??es f?ngicas, confirmando a capacidade dos isolados f?ngicos em se manterem e realizarem todas as fases de desenvolvimento sobre o artr?pode em condi??es seminaturais. Ambos os isolados testados, nas duas condi??es de formula??es propostas, mostraram-se aptos a permanecerem ativos no ambiente seminatural, virulentos e eficazes contra f?meas de R. microplus, sendo capazes de reduzir significativamente gera??es futuras do carrapato.

Rhiphicephalus microplus is one of the main ectoparasites of cattle in regions of tropical and subtropical climate. The economic losses caused by this parasite are related to treatment costs, decreased productivity and disease transmission. Currently the use of chemical products is still the most common form of control of the cattle tick, however, its use in an inadequate and suppressive way, has been causing the development of resistance to different classes of commercially available acaricides. Thus, the control of this parasite has been characterized by presenting a great challenge for technicians and producers. An alternative to tick control is the association of two different pharmacological bases, and currently this form of presentation is widely found commercially. The objective of this work is to describe the evaluation of the effectiveness of organophosphates and synthetic pyrethroids based on different combinations of R. microplus in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. For this, 54 samples of cattle farms were collected, located in different municipalities of the state of Rio Grande do Sul. The evaluation of the in vitro efficacy of the acaricides tested was performed through the adult immersion test (AIT). In order to carry out the tests, four commercially available products were chosen: Ectoparasiticide A - 15% cypermethrin + 25% chlorpyrifos + 1% citronellal - (Colosso®, Ouro Fino Animal Health), Ectoparasiticide B - 15% cypermethrin + 30% chlorpyrifos + 15% fenthion - (Colosso FC30®, Ouro Fino Animal Health), Ectoparasiticide C - 50% chlorpyriphos + 6% cypermethrin high-cis - (Flytion®, Clarion Biosciences Ltda.) and Ectoparasiticide D - 16% ethion + 8.5% chlorpyriphos + 5% alpha-cypermethrin - (Potenty®, MSD Animal Health). The cypermethrin/ chlorpyrifos/ fenthion combination showed the best results, with an average efficiency greater than 95%, being effective in 94.44% (51/54) of the tested farms. The product containing the cypermethrin / chlorpyrifos / citronellal combination had a lower mean efficacy (62.11%), being effective in only 29.62% (16/54) of the properties tested. R. microplus presents different degrees of resistance to the association of organophosphates and synthetic pyrethroids, and multiple resistance was observed in most of the populations studied. Only the cypermethrin/ chlorpyrifos/ fenthion combination showed acceptable mean levels of efficacy in the tick populations studied. In this way, it is essential to establish a frequent monitoring of the effectiveness of the carrapaticides used, in order to prolong their useful life, contributing to their rational use for tick control in cattle. / Rhiphicephalus microplus é um dos principais ectoparasitas de bovinos em regiões de clima tropical e subtropical. As perdas econômicas que este parasita causa, estão relacionadas aos custos com tratamento, diminuição da produtividade e transmissão de doenças. Atualmente o uso de produtos químicos ainda é a forma mais comum de controle do carrapato bovino, no entanto, seu uso de maneira inadequada e supressiva, vem causando o desenvolvimento de resistência às diferentes classes de acaricidas disponíveis comercialmente. Assim, o controle deste parasita tem se caraterizado por apresentar um grande desafio para técnicos e produtores. Uma alternativa ao controle do carrapato é a associação de duas bases farmacológicas diferentes, sendo que atualmente esta forma de apresentação é amplamente encontrada a nível comercial. O objetivo deste trabalho é descrever a avaliação da eficácia de associações carrapaticidas, a base de organofosforados e piretroides sintéticos, em diferentes populações de R. microplus no estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Para isto, foram coletadas amostras de carrapatos de 54 propriedades, localizadas em diferentes municípios do estado do Rio Grande do Sul. A avaliação da eficácia in vitro dos acaricidas testados foi realizada através do teste de imersão de teleóginas (bicarrapaticidograma). Para a realização dos testes, foram escolhidos quatro produtos comercialmente disponíveis, sendo eles denominados: Produto A - 15% cipermetrina + 25% cloripirifós + 1% citronelol - (Colosso®, Ouro Fino Saúde Animal), Produto B - 15% cipermetrina + 30% cloripirifós + 15% fenthion - (Colosso FC30®, Ouro Fino Saúde Animal), Produto C - 50% cloripirifós + 6% cipermetrina high-cis - (Flytion®, Clarion Biosciences Ltda.), Produto D - 16% ethion + 8.5% cloripirifós + 5% alfa-cipermetrina - (Potenty®, MSD Saúde Animal). A associação de cipermetrina/clorpirifós/fenthion, apresentou os melhores resultados, com eficácia média superior a 95%, sendo eficaz em 94,44% (51/54) das propriedades testadas. O produto contendo a associação de cipermetrina/clorpirifós/citronelal, apresentou menor eficácia média (62,11%), sendo eficaz em apenas 29,62% (16/54) das propriedades testadas. R. microplus, apresenta diferentes graus de resistência à associação de organofosforados e piretroides sintéticos, sendo observado resistência múltipla em boa parte das populações estudadas. Apenas a combinação de cipermetrina/clorpirifos/fenthion apresentou níveis médios aceitáveis de eficácia nas populações de carrapato estudadas. Desta maneira, é fundamental estabelecer um monitoramento frequente da eficácia dos carrapaticidas utilizados, a fim de prolongar sua vida útil, contribuindo para o seu uso racional para o controle do carrapato em bovinos.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-02-16T18:15:18Z No. of bitstreams: 1 valeriademello.pdf: 1398962 bytes, checksum: 8f98bff81bd61634bb2f3b2081f6a2db (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-02-26T12:40:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 valeriademello.pdf: 1398962 bytes, checksum: 8f98bff81bd61634bb2f3b2081f6a2db (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-26T12:40:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 valeriademello.pdf: 1398962 bytes, checksum: 8f98bff81bd61634bb2f3b2081f6a2db (MD5) Previous issue date: 2014-07-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O carrapato dos bovinos, Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini 1887) é responsável por sérios prejuízos à pecuária brasileira, considerando-se os custos do controle, perda de receita devido a menor produção de leite e carne, danos ao couro, além da transmissão de doenças. A utilização de plantas medicinais é considerada uma alternativa a resistência recorrente aos produtos químicos. Diante da necessidade de alternativas eficazes e com menores impactos ambientais o objetivo desse estudo foi desenvolver formulações de contato contendo os óleos essenciais das plantas Citronela-de-Java (Cymbopogon winterianus), Cravo-da-índia (Syzygium aromaticum) e Alecrim-da-horta (Rosmarinus officinalis) e avaliar in vitro os efeitos acaricidas em diferentes etapas do ciclo do carrapato. Para tanto foram utilizadas concentrações que variaram de 0,5 – 15,0% dos óleos essenciais incorporados nas formulações. Os carrapatos provenientes de diferentes regiões geográficas foram tratados com as formulações e avaliados os efeitos das mesmas sobre o índice de produção de ovos, a eclosão larval e a eficácia carrapaticida. Os resultados obtidos foram comparados com produtos acaricidas comerciais. Após o 20º dia do tratamento as formulações contendo o óleo essencial de citronela tiveram eficácia acaricida entre 2,09 – 55,51%, com o óleo essencial de cravo-da-índia, 92,47 - 100% e 26,44 - 40,78% com o óleo essencial de alecrim. Na associação dos óleos essenciais obteve-se eficiência de 84,68 – 90,73% para a associação do cravo-da-índia com o óleo essencial de citronela e 30,54 – 64,25% na associação de citronela com o alecrim. Os resultados demonstraram a atividade carrapaticida das formulações testadas, quando comparadas com os produtos químicos utilizados pelos produtores. Estudos in vivo necessitam ser realizados para validar a eficiência das formulações em condições de campo, visando a utilização desses produtos como uma alternativa para o controle do carrapato bovino. / The cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini 1887) is responsible for serious losses to Brazilian cattle, considering the costs of control, loss of revenue due to lower production of milk and meat, leather damage, beyond the transmission of diseases. The use of medicinal plants is considered an alternative to the applicant chemical resistance. Facing the necessity to effective alternatives with lower environmental impacts, the objective of this study was to develop contacts´ formulations containing essential oils of Citronella (Cymbopogon winterianus), Clove (Syzygium aromaticum) and Rosemary (Rosmarinus officinalis) plants and evaluate in vitro acaricidal effects on different stages of the cycle of the tick. For this purpose, concentrations were used ranging from 0.5 - 15.0% of essential oils incorporated into the formulations. Ticks from different geographic regions were treated with the formulations and their effects on the rate of egg production, larval hatching and its efficiency on ticks were evaluated. The results were compared with chemistry acaricidal products. After the 20th day of treatment formulations containing the citronella´s essential oil had acaricidal efficacy between 2.09 to 55.51 %, with the clove´s essential clove, 92.47 to 100% and 26.44 to 40,78 % with rosemary´s essential oil. The association of clove essential oil with citronella essential oil obtained efficiency from 84.68 to 90.73% and for the association of citronella oil with rosemary oil, was 30.54 to 64.25%. The results showed the acaricidal activity of the tested formulations when compared to the chemicals acaricidal products. In vivo studies need to be conducted to validate the efficiency of the formulations under field conditions in order to use these products as an alternative for the control of cattle tick.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-12T14:45:10Z No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-13T12:56:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T12:56:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) Previous issue date: 2011-01-24 / Dentre as várias espécies de ixodídeos existentes na região neotropical, Rhipicephalus (Boophilus) microplus e Amblyomma cajennense são duas das que despertam maior interesse econômico e em saúde pública, ocasionando perdas na produção animal e atuando como vetores de agentes patogênicos. A utilização de carrapaticidas químicos sintéticos é o método predominante no controle destes artrópodes, entretanto, o uso indiscriminado tem resultado em sérios problemas, como a pressão de seleção de carrapatos resistentes, risco de intoxicação de animais e do homem. Uma alternativa a estes métodos tem sido o uso de substâncias de origem vegetal de pouca ou nenhuma toxidez para animais e humanos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade carrapaticida do timol em diferentes concentrações sobre larvas e ninfas de A. cajennense e fêmeas ingurgitadas e ovos de R. microplus. O estudo foi desenvolvido no Laboratório Avançado de Zoologia da Universidade Federal de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil. No primeiro estudo (subdividido em dois experimentos) foi avaliada a influência de diferentes concentrações de timol (1,0%, 1,5%, e 2,0%) sobre os parâmetros biológicos da fase não parasitária de fêmeas ingurgitadas de R. microplus e também sua atividade sobre ovos deste carrapato. Os seguintes parâmetros biológicos foram observados: peso inicial (mg); peso de massa de ovos (mg); período de pré-postura (dias), período de postura (dias), período de sobrevivência (dias); percentual de eclosão de larvas; índice de produção de ovos (IPO), índice nutricional (IN) e eficácia do tratamento. No primeiro experimento os parâmetros peso da fêmea antes da postura e período de pré-postura não apresentaram diferenças significativas (p>0.05) entre os grupos. As diferentes concentrações de timol causaram alterações nos parâmetros peso da massa de ovos, período de postura, período de sobrevivência, percentual de eclosão de larvas, IPO, e IN, sendo constatadas diferenças altamente significativas entre os grupos tratados e o controle (p<0.01). A eficácia de controle foi superior a 95% em todos os tratamentos, chegando a 99% na concentração de 2,0%. O percentual de eclosão de larvas não foi afetado em nenhum dos tratamentos (p>0.05). No segundo estudo foi avaliado o potencial carrapaticida do timol sobre larvas não ingurgitadas e ingurgitadas e ninfas ingurgitadas de A. cajennense. Os valores referentes à mortalidade de larvas não ingurgitadas foram de 18,2%, 51,8%, 97,6%, 93,5%, 94,5%, e para ninfas ingurgitadas foi de 26,0%, 92,2%; 100,0%, 100,0%, 100,0% nas concentrações de 0,25%; 0,5%; 1,0%; 1,5% e 2,0%, respectivamente. No teste com larvas ingurgitadas a mortalidade foi de 100,0% em todos os tratamentos. Os resultados encontrados no estudo demonstram que o timol possui ação carrapaticida, interferindo na maioria dos parâmetros analisados para R. microplus, apresentando também atividade acaricida sobre imaturos de A. cajennense, sendo larvas e ninfas ingurgitadas mais susceptíveis do que larvas não ingurgitadas. / Among the various species of Ixodidae existing in the Neotropics, Rhipicephalus (Boophilus) microplus and Amblyomma cajennense are two of the ones that arouse more economic and public health interest, causing losses in animal production and acting as pathogens vectors. The use of synthetic chemical acaricide is the predominant method in controlling these arthropods; however, the indiscriminate use has resulted in serious problems such as the pressure on the selection for resistant ticks and the risk of animal and man toxicity. An alternative to this method has been the use of plant origin substances with little or no toxicity to animals and humans. The fore, this study aimed to evaluate the acaricide activity of thymol in different concentrations on larvae and nymphs of A. cajennense and engorged females and eggs of R. microplus. The study was conducted in the Advanced Laboratory of Zoology at the Federal University of Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil. In the first study (divided into two experiments) it was evaluated the influence of different concentrations of thymol (1.0%, 1.5% and 2.0%) on the biological parameters of the non-parasitic phase of R. microplus engorged females and also its activity on the eggs of this tick. The following biological parameters were observed: initial weight (mg), eggs weight mass (mg), pre-oviposition (days), oviposition period (days), survival period (days), percentage of hatching; egg production index (IPO), nutritional index (NI) and treatment efficacy. In the first experiment, the parameters weight of the female before oviposition and pre-oviposition presented no significant differences (p> 0.05) between groups. The different concentrations of Thymol caused changes in the parameters eggs weight mass, oviposition period, survival period, percentage of hatching, IPO, and IN, having found highly significant differences between the treated and control groups (p <0.01) . Control efficacy was greater than 95% in all treatments, reaching 99% at 2.0%. The percentage of hatching was not affected in any treatment (p> 0.05). In the second study it was evaluated the acaricide potential of Thymol on not engorged and engorged larvae and engorged nymphs of A. cajennense. The values concerning the mortality of not engorged larvae were 18.2%, 51.8%, 97.6%, 93.5%, 94.5%, and for engorged nymphs they were 26.0%, 92.2 % 100.0% 100.0% 100.0% at concentrations of 0.25%, 0.5%, 1.0%, 1.5% and 2.0% respectively. In tests with engorged larvae the mortality was 100.0% in all treatments. The results found in this study demonstrate that Thymol has an acaricide action, interfering in the majority of the analyzed parameters for R. microplus, also showing acaricidal activity on immature A. cajennense, being larvae and engorged nymphs more susceptible than not engorged ones.