Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:49:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 282748.pdf: 2126494 bytes, checksum: bab8f4f79e0eef0fde549df05362db87 (MD5) / O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial tripanocida in vitro e in vivo do ácido gálico e derivados (galatos de octila, decila, undecila, dodecila e tetradecila). O efeito tripanocida in vitro foi avaliado contra formas tripomastigotas sanguíneas e amastigotas intracelulares de T. cruzi. Os galatos de octila, dodecila e tetradecila reduziram em 50 a 60% a viabilidade de tripomastigotas sanguíneos (cepaY) na concentração de 50 µM. Entretanto, nenhum deles foi mais ativo do que o quimioprofilático violeta de genciana. Contrariamente, todos os ésteres de galato foram mais ativos in vitro do que o benzonidazol contra formas amastigotas intracelulares das cepas Y e Colombiana, com percentuais de inibição (PI) variando entre 46 a 95% na concentração de 3 µM. Entretanto, os galatos foram mais citotóxicos do que o benzonidazol, sendo que somente o galato de dodecila apresentou índice de seletividade (IS) acima de 50. O uso combinado desse composto com o benzonidazol mostrou um efeito aditivo in vitro contra amastigotas intracelulares. A análise ultraestrutural por MET mostrou que o galato de dodecila induziu alterações morfológicas em epimastigotas e em amastigotas intracelulares, com expressiva perda de conteúdo citoplasmático e número de reservossomos, intumescimento da mitocôndria, mas sem alteração do cinetoplasto. Ensaios de inibição in vitro com a tripanotiona redutase recombinante de T. cruzi (TcTR) mostraram que o ácido gálico inibiu esta enzima (CI50 = 45,6 µM) sem interferir na atividade da glutationa redutase (GR). Contrastando com a potente atividade tripanocida in vitro, nenhum dos compostos suprimiu a parasitemia e preveniu a mortalidade de camundongos em fase aguda e crônica da tripanosomíase. Entretanto, a análise histopatológica mostrou que a maioria dos animais tratados com o ácido gálico ou com o galato de dodecila apresentou tecido cardíaco íntegro sem focos inflamatórios. A análise por RT-qPCR do perfil de citocinas transcritas no coração de camundongos infectados com a cepa Colombiana mostrou menor taxa de IFN-. no grupo tratado com o galato de dodecila, sugerindo uma participação na imunomodulação do processo inflamatório. Conclui-se que os galatos testados apresentaram um potente efeito tripanocida in vitro e, embora não tenham modificado os cursos da infecção experimental aguda e crônica, podem ter uma participação no controle da inflamação tecidual via imunomodulação negativa do IFN. / The aim of this study was to evaluate the potential trypanocidal activity in vitro and in vivo of gallic acid and five esters (octyl, decyl, undecyl, dodecyl and tetradecyl gallate). The in vitro trypanocidal activity of the compounds was evaluated against blood trypomastigotes and intracellular amastigotes of T. cruzi. Incubation of mice infected blood (Y strain) for 48 hours with octyl, dodecyl and tetradecyl gallates at 50 µM revealed a trypanocidal effect higher than 50%, which was, however, lower than the trypanocidal effects exhibited by gentian violet. In contrast, all gallate esters showed a higher in vitro activity than benzonidazole against intracellular amastigotes of both the Y and Colombiana strains, with percentages of inhibition (PI) ranging from 46 to 95% at 3 µM. However, most of the gallic acid derivatives showed significant cytotoxic effects, with the exception of dodecyl gallate which presented a selectivity index (SI) higher than 50. Moreover, the use of dodecyl gallate + benzonidazole showed also an additional in vitro effect against intracellular amastigotes. The ultrastructural analysis by transmission electron microscopy (TEM) showed that the treatment with dodecyl gallate induces drastic morphological changes in both the epimastigotes and intracellular amastigotes. This effect is characterized by a significant loss of cytoplasmic content, reduction of the reservosome numbers, mitochondria swelling and no kinetoplastic change. In vitro assays revealed that gallic acid specifically inhibited the T. cruzi recombinant trypanothione reductase (TcTR) (IC50 = 45.6 µM). In contrast to the powerful trypanocidal activity in vitro, none of the compounds were able to suppress parasitemia or prevent the mice mortality at the acute and chronic phases of trypanosomiasis. However, histopathological analysis showed that the most of the mice treated with gallic acid and dodecyl gallate showed no inflammatory foci in the heart. The RT-qPCR analysis for cytokine profile in the heart tissue of infected mice with the Colombiana strain revealed a lower rate of IFN-. in the group treated with dodecyl gallate, suggesting a possible role of this compound in the immune modulation of the inflammation. We conclude that the gallates tested showed a potent trypanocidal effect in vitro and, although they have not changed the course of acute and chronic experimental infection may be involved in the control of tissue inflammation through negative immune modulation of IFN-

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T09:27:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 276155.pdf: 1327907 bytes, checksum: c871d158d79651580afbc11a1f0e9dbf (MD5) / Estudos moleculares e de biologia demonstram que o táxon Trypanosoma cruzi é composto por diferentes linhagens. Em 2005, foi descrito um surto de doença de Chagas Agudo (DCA) no município de Navegantes em Santa Catarina associado ao consumo de caldo de cana contaminado com o T. cruzi. Análises moleculares identificaram as linhagens TcI em gambás (cepas SC90 e SC91), TcI/TcII em triatomíneos (cepas SC92 e SC93) e TcII em pacientes (cepas SC94-SC102). Neste sentido, o presente trabalho objetivou estudar possíveis mecanismos envolvidos na seleção de populações do grupo TcII em infecções humanas ocasionadas por cepas mistas TcI/TcII de T. cruzi. Para tanto, as cepas SC90, SC92, SC93, SC94, SC95, SC96 e Y foram utilizadas nos ensaios de lise pelo sistema complemento, interação com macrófagos murino e humano na presença e ausência de soro imune e IFN-?, ensaios de Western blot e cinética da proporção das linhagens TcI e TcII em cepas mistas após diferentes passagens em macrófagos humanos por meio de PCR semiquantitativo e PCR quantitativo. Os ensaios de lise pelo sistema complemento não mostraram diferenças de sensibilidade entre as cepas estudadas. Já nos estudos de interação T. cruzi-macrófagos murinos verificou-se um aumento na taxa de infecção e no número médio de amastigotas quando formas tripomastigotas das diferentes cepas foram previamente incubadas com soro chagásico. Além disso, as cepas do grupo TcII apresentaram uma maior taxa de infecção em macrófagos e após 72 horas de interação, apresentaram valores médios do número de amastigotas duas vezes superiores ao observado para cepas TcI. Contudo, não houve diferença significativa no número médio de amastigotas no tempo inicial de infecção entre TcI e TcII. Ensaios de Western blot confirmaram uma maior expressão da gp82 em formas tripomastigotas das cepas TcII. Macrófagos ativados com IFN-? infectados com as cepas Y, SC90 e SC96 foram capazes de controlar a proliferação dos parasitos independente da cepa utilizada, de forma dependente da NOS2. A análise da proporção de TcI e TcII nas cepas mistas SC92, SC93 e na mistura artificial, SC90+SC96, antes e após a conclusão do ciclo biológico em macrófagos murinos revelou uma alteração no perfil molecular dessas cepas, sendo observado um completo desaparecimento do fragmento de DNA de 200 pb (TcI) na cepa mista artificial (SC90+SC96), enquanto nas cepas SC92 e SC93 verificou-se uma diminuição de cerca de 3 vezes na intensidade do fragmento de 200 pb. Quando os ensaios foram realizados com a cepa SC92 (três passagens seriadas em macrófagos humanos), constatou-se um progressivo aumento na proporção de TcII, uma vez que a proporção inicial era de 77,4% para TcI e 22,6% para TcII e após a terceira passagem foi verificado 93,2% para TcII. Em conjunto, estes resultados sugerem que a manutenção de populações de T. cruzi II em infecções humanas ocasionadas por cepas mistas pode estar relacionada com características intrínsecas do parasito, como a capacidade infectiva e o tempo de duplicação intracelular. Embora seja ainda possível que mecanismos efetores dos macrófagos estejam envolvidos com essa seleção.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Saúde Pública / Made available in DSpace on 2012-10-23T15:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 245494.pdf: 2433081 bytes, checksum: d1735088076aa6214f26c28c45113b8d (MD5) / No início de 2005 um fato novo e inesperado ocorreu no Estado de Santa Catarina. Surgiram as primeiras notícias sobre a possibilidade de contaminação da doença de Chagas por uma via pouco usual. Pessoas teriam sido infectadas e algumas mortes ocorridas após a ingesta do caldo-de-cana contaminado pelo protozoário responsável pela doença aguda. Os números de possíveis casos da doença e de vítimas foram aumentando gradualmente, iniciando uma busca incessante do foco inicial da contaminação e, concomitantemente, medidas preventivas para evitar um dano maior foram postas em ação. Em poucos dias o pânico e o medo tomaram conta não só dos catarinenses, mas também dos turistas que por aqui transitaram no fim do verão daquele ano. Turistas e moradores da região buscavam informações e tentavam se assegurar de não terem se contaminado. Através deste estudo objetivamos descrever o episódio tendo como referencial as notícias dos jornais locais impressos na época. Buscamos mostrar como se deu o surgimento do surto na imprensa e como foi esta repercussão em que o medo, real ou não, tomou conta da população e das autoridades na saúde pública. At the beginning of 2005 a new and unexpected fact occurred in the State of Santa Catarina. The first news had emerged informing on the possibility of contamination by Chagas' illness from a very unusual way. Some people would have been contaminated and some resulted in deaths after having ingested broth-of-sugar cane contaminated with the protozoa responsible for the acute form of the disease. The numbers of possible cases of the illness and victims had been gradually increased resulting in incessant search for the source of such contamination and simultaneously, preventive measures were put in action with the intension to reduce harm. In few days the panic and the fear had not only taken over the catarinenses, but also of the tourists who had been transited here at the end of the summer of same year. Tourists and local dwellers sought for information and tried to reassure that they were not contaminated. Through this study we aim to describe the episode at that time having as referential the printed matters' news of local periodicals. We search for evidences to show how the sprouting in the press occurred and how was repercussion in which the fear, real or not, spread all over the population and the public health authorities.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Ruthléa Nascimento (ruthlea@bce.unb.br) on 2008-10-30T14:27:19Z No. of bitstreams: 1 2008_AnaMariaCosta.pdf: 3885912 bytes, checksum: e120b16f41fa85a75f30e9c489b804ab (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-03-02T14:25:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_AnaMariaCosta.pdf: 3885912 bytes, checksum: e120b16f41fa85a75f30e9c489b804ab (MD5) / Made available in DSpace on 2009-03-02T14:25:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_AnaMariaCosta.pdf: 3885912 bytes, checksum: e120b16f41fa85a75f30e9c489b804ab (MD5) / A integração de minicírculos de kDNA do Trypanossoma cruzi no genoma hospedeiro foi correlacionada com alterações na expressão gênica. Com a finalidade de caracterizar as regiões híbridas e ampliar o conhecimento biológico realizou-se os isolamentos e clonagens dos minicírculos integrados no genoma de macrófagos humanos em cultura e de tecidos de coelhos chagásicos. Observou-se instabilidade genética dos segmentos que continham as integrações. As clonagens realizadas em diferentes combinações de vetores e hospedeiras não evitaram os rearranjos. A análise de restrição e o seqüenciamento dos segmentos recuperados mostraram alterações no tamanho e na estrutura do vetor. A técnica de captura desenvolvida no presente estudo permitiu confirmar a instabilidade genética dos minicírculos preferencialmente integrados. A análise de restrição e o seqüenciamento desses fragmentos mostraram que os minicírculos recuperados apresentaram encurtamentos nas regiões variáveis em relação ao padrão descrito na literatura. Verificou-se que o encurtamento ocorreu durante ou após a integração no genoma. As regiões variáveis encurtadas de 50 pb foram recuperadas das linhagens subclonais de macrófago A11, C4, C6 e coração de coelhos chagásicos. Quando comparadas entre si essas regiões apresentaram similaridade na ordem de 90%. Em relação à região variável 80 pb, recuperada do macrófago C6, a similaridade foi em torno de 75%. O resultado sugeriu a existência de classes de minicírculos que se integram preferencialmente no genoma hospedeiro. Foram obtidos clones híbridos estáveis contendo o final da região conservada nas extremidades seguidas pela região variável truncada, fragmento de elemento LINE-1, com ou sem a presença de microssatélite. A origem híbrida foi confirmada por fragmentação do clone que foi utilizado como sonda na hibridação de macrófagos humanos normais e DNA de T. cruzi. O segmento B7, obtido por captura, apresentou o minicírculo de kDNA com 4 regiões variáveis truncadas, intercaladas por regiões conservadas normais seguidas do microssatélite CA e da região humana com similaridade ao clone murino AC131797.3. A análise “in silico” do segmento B7 mostrou a presença de seqüências regulatórias da expressão gênica. Foram identificadas 9 possíveis ORFs, sendo duas compreendo a região híbrida (ORF1 e 2). Verificou-se nas integrações recuperadas de coração de coelhos chagásicos segmentos similares à região humana encontrada no clone B7, indicando a recorrência dos sítios recombinativos. A análise “in silico” do clone B7, G10 e das regiões hospedeiras obtidas dos bancos de dados mostrou a presença de estruturas do tipo não B nos locais próximos ao ponto de recombinação. A presença da estrutura não B no segmento B7 foi confirmada pela alteração na mobilidade eletroforética. Em todos os pontos de entrada do minicírculo no genoma hospedeiro verificou-se a redução da tensão local e aumento da tensão global na região, sugerindo a possibilidade de ocorrência de novos eventos recombinativos envolvendo o segmento. O conjunto das informações indica que a integração é mediada por recombinação homologa mediada por similaridades estruturais presentes no DNA hospedeiro e minicírculo de kDNA. / The integration of Trypanossoma cruzi kDNA minicircle sequences into the host cell’ genomemay result in alterations of genic expression. To achieve the characterization of the hybrid regions and enhancement of the biological knowledge the isolation and cloning of the integrated minicircles was made in vitro in the human macrophages and in the chagasic rabbit tissues. Genetic instability of the segments with the integrations was observed. The cloning made it in different combinations of vectors and hosts did not avoid deletion and rearrange. The capture technique developed in the present study showed kDNA integration events with the genetic instability. The sequencing of the kDNA integrated events and restriction analysis revealed that the minicircle sequences were frequently rearranged; short minicircle variable regions fragments were constantly found in relationship to the standard size describe in literature. Possibily, deletions of integrated sequences took place during or after the kDNA integration into the macrophage genome. Short variable regions (50 pb) was recovered from macrophages cell lines A11, C4, C6 and from chagasic rabbits. Those integrated kDNA minicircles shared 90% sequences similarities. The variable region stretches also revealed 75% similarities among them. These results suggest that classes of minicircles integrate preferentially in the macrophage genome. Somewhat stable hybrid clones were found with the final conserved region followed by a fragment of the variable region linked to the LINE-1 sequence, with or without the presence of microsatellites. The hybrid origin of these sequences was demonstrated by hybridization experiments with segment specific chimera sequence fragments. A capture procedure revealed a B7 fragment showing the kDNA minicircle with 4 truncated variable regions interspersed by CA microsatellite with similarity to the AC131797.3 murine clone. The “in silico” analysis of the B7 fragment showed the presence of genic expression regulatory sequences in the minicircle region. The identification of nine putative ORFs within hybrid regions (ORFs 1 and 2) was recorded. The kDNA integration events detected into the heart DNA from chagasic rabbits showed similar host regions to that of clone B7 clone, indicating that homologous recombination was the mechanism whereby the kDNA integrated into the vertebrate genome. The presence of B structures in the DNA sequences at the integration sites has suggested that bends formed in those sites explains the alterations in the eletrophoretic mobility presented in those clones. At the integration sites in the host genome bents formed by reduced tension forces forming torsion angles, thus indicating the possibility of new integration events, deletions and recombinations at the spot. These findings showing sequences similarities present in the host DNA and kDNA minicircle sequences have suggested that the kDNA integration might be mediated by homologous recombination.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-05-08T17:25:03Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Ana Catarina Torres.pdf: 871745 bytes, checksum: 75567d9479ab942744774d0978923053 (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira(flaviaccf@yahoo.com.br) on 2013-05-30T00:35:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Ana Catarina Torres.pdf: 871745 bytes, checksum: 75567d9479ab942744774d0978923053 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-30T00:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Ana Catarina Torres.pdf: 871745 bytes, checksum: 75567d9479ab942744774d0978923053 (MD5) / O megaesôfago chagásico é uma alteração do trato gastrointestinal, caracterizada pela destruição ou ausência de plexos nervosos intramurais do esôfago. Alterações nutricionais e da saúde pulmonar são descritas como conseqüentes a esse diagnóstico. Objetivo: Descrever o perfil dos pacientes com megaesôfago chagásico no que se refere ao estado nutricional e a dinâmica de deglutição orofaríngea. Método: Participaram desta pesquisa 26 pacientes, todos realizaram avaliação nutricional, exames bioquímicos, avaliação videofluoroscópica da deglutição e responderam a um questionário a respeito dos aspectos alimentares. Resultados: Observou-se prevalência do sexo feminino (73,1%), os graus I e II de classificação do megaesôfago foram os mais encontrados. Não houve associação estatisticamente significante entre grau de megaesôfago e diagnóstico nutricional (48% eutrofia). A ausência de unidades dentárias posteriores esteve presente em mais de 90% na população e o tipo de mastigação anterior foi observado em 40,7% da amostra. Ao exame videofluoroscópico a presença de resíduo oral, faríngeo e em região de transição faringoesofágica foi mais encontrado na consistência semi-líquida, além de um tempo de trânsito oral total aumentado para o sólido. Conclusão: O acompanhamento nutricional dispensado aos pacientes pode ter contribuído para o estado de eutrofia da maioria deles. A presença de resíduo na consistência semi-líquida pode ser causada por uma menor força ejetora. Atitudes adaptativas tanto no que se refere a hábitos alimentares como a forma de alimentar-se são observadas nos indivíduos estudados. O acompanhamento multidisciplinar é muito importante para que os portadores do megaesôfago chagásico. / Salvador

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-17T14:26:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Simone Teves.pdf: 4150601 bytes, checksum: 89bd0ef04e4182d928bde044d1f2019f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-17T14:26:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Simone Teves.pdf: 4150601 bytes, checksum: 89bd0ef04e4182d928bde044d1f2019f (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O estado do Tocantins, endêmico para a doença de Chagas, carece de estudos sobre a fauna triatomínica silvestre presente em seu bioma predominante, o Cerrado, que, ao lado da mata Atlântica, constitui um dos biomas de maior biodiversidade do planeta. No estudo de monitoramento entomológico realizado no município de Paranã –TO, em parceria entre o Laboratório de Transmissores de Leishmanioses IOC – FIOCRUZ e a ENERPEIXE SA foram capturados espécimes de triatomíneos do gênero Triatoma não passíveis de identificação taxonômica específica pela morfologia clássica sugerindo um novo morfotipo. Uma abordagem multidisciplinar, abrangendo caracterização morfológica e molecular foi realizada para verificar se estes espécimes sustentam a hipótese de um novo status específico. Os espécimes de estudo juntamente com T. costalimai foram capturados em afloramentos rochosos nos municípios de Paranã e Aurora do Tocantins – TO, respectivamente. A morfologia foi estudada por morfometria clássica de estruturas de valor taxonômico, abrangendo a genitália externa de fêmeas por microscopia eletrônica de varredura e a morfometria geométrica das asas. A filogenia molecular foi estabelecida com base em sequências de DNA mitocondrial. Para fins de comparação foram utilizados espécimes de Triatoma williami, espécie afim de T. costalimai, e de Triatoma sordida, assim como seqüências Rhodnius stali e Rhodnius prolixus, utilizados como grupo externo, obtidas no Genebank. Triatoma sp. diferenciou-se de T. costalimai e T. williami quanto ao tamanho, coloração geral do corpo e mancha do conexivo. A morfometria clássica mostrou que machos e fêmeas de Triatoma sp. são menores que os de T. costalimai. O estudo da genitália externa de fêmeas mostrou diferenças de Triatoma sp. em relação a T. costalimai e T. williami e possibilitou a descrição de cerdas e espinhos nunca estudados nestes grupos. Pela morfometria geométrica das asas tanto o tamanho quanto a conformação, separou os espécimes de estudo das demais espécies. As relações morfométricas não foram de encontro com as filogenéticas. A variação de tamanho de Triatoma sp. pode ser uma expressão da plasticidade gênica, diante das variações ambientais. Entretanto, as variações morfológicas observadas nas diferentes abordagens estão associadas à composição gênica de cada inseto. Apesar das semelhanças morfológicas, verficou-se a separação de Triatoma sp. e T. costalimai no estudo filogenético. Os resultados são consistentes para inferir que Triatoma sp. trata-se de uma nova espécie. O encontro recente de Triatoma sp. em domicílio no município de Paranã ressalta a importância de mais estudos sobre a biologia desta nova espécie. / O estado do Tocantins, endêmico para a doença de Chagas, carece de estudos sobre a fauna triatomínica silvestre presente em seu bioma predominante, o Cerrado, que, ao lado da mata Atlântica, constitui um dos biomas de maior biodiversidade do planeta. No estudo de monitoramento entomológico realizado no município de Paranã –TO, em parceria entre o Laboratório de Transmissores de Leishmanioses IOC – FIOCRUZ e a ENERPEIXE SA foram capturados espécimes de triatomíneos do gênero Triatoma não passíveis de identificação taxonômica específica pela morfologia clássica sugerindo um novo morfotipo. Uma abordagem multidisciplinar, abrangendo caracterização morfológica e molecular foi realizada para verificar se estes espécimes sustentam a hipótese de um novo status específico. Os espécimes de estudo juntamente com T. costalimai foram capturados em afloramentos rochosos nos municípios de Paranã e Aurora do Tocantins – TO, respectivamente. A morfologia foi estudada por morfometria clássica de estruturas de valor taxonômico, abrangendo a genitália externa de fêmeas por microscopia eletrônica de varredura e a morfometria geométrica das asas. A filogenia molecular foi estabelecida com base em sequências de DNA mitocondrial. Para fins de comparação foram utilizados espécimes de Triatoma williami, espécie afim de T. costalimai, e de Triatoma sordida, assim como seqüências Rhodnius stali e Rhodnius prolixus, utilizados como grupo externo, obtidas no Genebank. Triatoma sp. diferenciou-se de T. costalimai e T. williami quanto ao tamanho, coloração geral do corpo e mancha do conexivo. A morfometria clássica mostrou que machos e fêmeas de Triatoma sp. são menores que os de T. costalimai. O estudo da genitália externa de fêmeas mostrou diferenças de Triatoma sp. em relação a T. costalimai e T. williami e possibilitou a descrição de cerdas e espinhos nunca estudados nestes grupos. Pela morfometria geométrica das asas tanto o tamanho quanto a conformação, separou os espécimes de estudo das demais espécies. As relações morfométricas não foram de encontro com as filogenéticas. A variação de tamanho de Triatoma sp. pode ser uma expressão da plasticidade gênica, diante das variações ambientais. Entretanto, as variações morfológicas observadas nas diferentes abordagens estão associadas à composição gênica de cada inseto. Apesar das semelhanças morfológicas, verficou-se a separação de Triatoma sp. e T. costalimai no estudo filogenético. Os resultados são consistentes para inferir que Triatoma sp. trata-se de uma nova espécie. O encontro recente de Triatoma sp. em domicílio no município de Paranã ressalta a importância de mais estudos sobre a biologia desta nova espécie.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, atinge cerca de 18 milhões de indivíduos, principalmente em países da América Latina. O benznidazol (Rochagan), único fármaco comercialmente disponível no Brasil para o tratamento da infecção, apresenta baixa atividade, principalmente na fase crônica da doença. Neste estudo a atividade tripanocida in vitro de 28 compostos fenólicos sintéticos foi avaliadada contra diferentes formas evolutivas da cepa Y do T. cruzi. Os ensaios foram realizados em triplicata, em microplacas de 96 orifícios, adicionando-se 180 µl da suspensão de epimastigotas de cultura (5x106 parasitas/mL), ou de tripomastigotas sanguíneos (1x106 tripomastigotas/ml), com 20 µl dos compostos em diferentes concentrações. Como controles foram utilizados o benznidazol ou o cristal violeta. As formas epimastigotas foram mantidas por 72h a 27°C e a atividade determinada pela contagem em câmara de Neubauer. Tripomastigotas foram mantidos por 48h a 4°C e a atividade avaliada pela técnica de Brener. O sangue de camundongo, adicionado aos compostos ativos (500 e 250 µM) por 72h a 4°C, foi inoculado em camundongos Swiss para comprovar sua esterilidade. A parasitemia dos animais foi acompanhada semanalmente por 30 dias e o sangue dos camundongos negativos submetidos à hemocultura e sorologia para pesquisa de anticorpos anti-T. cruzi. Foi avaliada também a atividade hemolítica dos compostos pelo método da cianometahemoglobina. A citotoxicidade celular foi ensaiada pelo método do MTT e pela avaliação microscópica da integridade do tapete celular. A atividade contra formas amastigotas intracelulares foi ensaiada em células Vero. Após 24h de infecção as monocamadas foram tratadas com os compostos ativos e com benznidazol em diferentes concentrações por 72h. O porcentual de células infectadas e o número de parasitas por célula foram determinados em 300 células contadas randomicamente, após coloração pelo Giemsa lento. Dos 28 compostos testados, seis galatos (galatos de heptia, de octila, de decila, de undecila, de dodecila e de tetradecila) foram ativos contra epimastigotas (CI50 de 0,47 a 33,9µM). Quatro compostos (galatos de decila, de undecila, de dodecila e de tetradecila) foram também ativos contra tripomastigotas sanguíneos e amastigotas intracelulares CI50 de 23,39 a 74,40 µM e CI50 de 1,80 a 16,30 µM, respectivamente. Efeitos de citotoxicidade celular foram observados acima de 50 µM dos compostos. O composto galato de undecila foi o mais ativo contra todas as formas do parasita e sua capacidade de esterilização do sangue infectado foi semelhante ao do cristal violeta. Estes resultados demonstram que os galatos podem ser compostos promissores para a quimioterapia ou quimioprofilaxia da doença de Chagas.

SOUZA JÚNIOR, Alcidésio Sales de. Avaliação de problemas relacionados a medicamentos e qualidade de vida em pacientes chagásicos usuários de benzonidazol. 2008. 151 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-12-14T15:39:01Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_assousajúnior.pdf: 614300 bytes, checksum: c2c290ba7aa812517d5fcf606255fe08 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-12-17T13:51:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_assousajúnior.pdf: 614300 bytes, checksum: c2c290ba7aa812517d5fcf606255fe08 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-17T13:51:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_assousajúnior.pdf: 614300 bytes, checksum: c2c290ba7aa812517d5fcf606255fe08 (MD5) Previous issue date: 2008 / Drug Related Problems (DRP) are responsible to cause morbidity and mortality in all world, and can affect expected clinical results and quality of life (QoL) of patient. Etiologic treatment for Chagas’ disease (caused by Trypanosoma cruzi) have only a drug, the benznidazole (BNZ). This medicine may produce toxicity (hipersensibility, bone medular aplasy, etc.) and have partial efficacy. The aim was to estimate the effects in the health of patients in use of BNZ, mensured by QoL and DRP. Nineteen patients included in a observational, descriptive and follow-up study in the period from November of 2006 to October of 2007. These patients, after prescription of BNZ and consent, were followed by 6 months by pharmacist and pharmacist students. Dader Method was utilized except intervention procediment. DRP were classified by judges utilizing the Second Granada Consensus (2002). The adverse reaction were classified by Centro de Farmacovigilância do Ceará (CEFACE). The QoL was mensuread by Short-Form Health Survey (SF-36) questionnaire before and after the follow-up. Were realized by descriptive analysis to study the result. Also, Mcnemar and Wilcoxon tests were made for inferential analysis, considering the significance level p<0,05. The majority of patients were men (58%), had until primary school level (57,9%) and they were in a indeterminate form of Chagas disease (74). About 42 from patients used 2 or 3 medicines with BNZ treatment, with an average from 1,3 medicine per patient. Antihypertension and diuretics were the most utilized in BNZ treatment (22%). In relation to adherence, 47,4% from patients were not adhere to BNZ. The use of BNZ was suspended in 36,8% of patients, the major reason was adverse reaction (Correlation Coefficient = 0,415, p-value = 0,047). In three steps of analysis was founded a total of 148 DRP (41,9% related to necessity, 33,1% to effectiveness and 25% to security). DRP were associated to number of medicines (Kendall Coefficient = 0,438, p-value = 0,018). The number of DRP were high after than the start of treatment with BNZ (Wilcoxon test: Z=-3,725, p<0,05). Seventeen patients (10 men and 7 women) showed adverse reaction, to pruritus until parestesia. These majority reactions were classified as probable and soft. Patients with soft adverse reaction have more knowledge level in relation to patients with moderate adverse reaction (Correlation Coefficient = 0,523; p-value = 0,028). It wasn’t detected alterations in QoL after follow-up, but it was showed that DRP affected QoL levels (Wilcoxon test: Z=-3,724, p<0,05). There wasn’t difference between QoL before and after, however DRP affected QoL. / Problemas Relacionados a Medicamentos (PRM) são responsáveis por causar morbidade e mortalidade em todo o mundo, e também, afetar resultados clínicos esperados e a qualidade de vida (QV) de pacientes. O tratamento etiológico da Doença de Chagas (causada pelo Trypanosoma cruzi) conta apenas com o benzonidazol (BNZ). Este medicamento pode produzir toxicidade (hipersensibilidade, aplasia medular, etc.) e tem eficácia parcial. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos provocados na saúde dos pacientes emu so de BNZ, medidos a partir de índices QV e PRM. Dezenove pacientes foram inluídos em um estudo observacional, descritivo e de seguimento que ocorreu de novembro de 2006 a outubro de 2007. Estes pacientes, após prescrição de BNZ e consentimento, foram acompanhados por 6 meses por um farmacêutico e estagiários treinados. O Método Dáder foi utilizado, excetuando-se a etapa de intervenção. Os PRM foram classificados por juízes utilizando-se o Segundo Consenso de Granada (2002). As reações adversas foram classificadas pelo Centro de Farmacovigilância do Ceará (CEFACE). Utilizou-se o questionário Short-Form Health Survey (SF-36) para avaliar a QV dos pacientes antes e após o seguimento. Realizou-se análise descritiva para os dados. Além disso, os testes de Mcnemar e Wilcoxon foram feitas para análise inerencial, considerando o nível de significância de p<0,05. A maioria dos pacientes era homem (58%), possuía escolaridade até o ensino fundamental (57,9%) e encontrava-se na forma indeterminada da doença de Chagas (74%). Cerca de 42% dos pacientes fizeram uso de dois ou três medicamentos durante o tratamento com BNZ, havendo média de consumo de 1,3 medicamento por paciente, sendo os anti-hipertensivos e diuréticos os mais usados durante o tratamento com BNZ (22%). Em relação à adesão ao BNZ, 47,4% não foram aderentes ao BNZ. Suspenderam o tratamento, 36,8%, a maioria devido à presença de RAM (Coeficiente de Correlação = 0,415, p-valor bicaudal = 0,047). Somou-se um total de 148 PRM nas três etapas de avaliação. Destes 41,9% estavam relacionados à necessidade, 33,1% à efetividade e 25% à segurança. Verificou-se que a quantidade de PRM estava associada ao número de medicamentos usados (Coeficientes de Correlação Kendall = 0,438, p-valor bicaudal = 0,018). Comprovou-se que a quantidade de PRM após o término do tratamento (60 dias) foi maior em relação ao início (Teste de Wilcoxon: Z=-3,725, p<0,05). Cerca de 17 pacientes (10 homens e 7 mulheres) afirmaram apresentar alguma RAM, que variou desde prurido a parestesia. A maioria destas foi classificada como provável e leve. Demonstrou-se que os pacientes com RAM leves têm um conhecimento maior em relação àqueles com reações moderadas (Coeficiente de Correlação = 0,523; p-valor bicaudal = 0,028). Não foi detectada alteração da QVRS após o seguimento. Entretanto, mostrou-se que os PRM afetaram a QVRS (Teste de Wilcoxon: Z=-3,724, p<0,05). Não houve diferença entre QVRS antes e depois, no entanto houve piora da QVRS em relação aos PRM.

COSTA, A. C. Infecção chagásica em candidatos a doação de sangue e de órgãos no estado do Ceará. 2017. 90 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by ciências farmacêuticas pgcf (pgcf.ufc@gmail.com) on 2017-08-21T11:57:42Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_accosta.pdf: 2082882 bytes, checksum: 0dd84b1179f874c1a39f2ad49ffc4cb9 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-21T12:35:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_accosta.pdf: 2082882 bytes, checksum: 0dd84b1179f874c1a39f2ad49ffc4cb9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-21T12:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_accosta.pdf: 2082882 bytes, checksum: 0dd84b1179f874c1a39f2ad49ffc4cb9 (MD5) Previous issue date: 2017-07-20 / Introduction: Chagas’ disease still represents a serious public health problem in Latin America, despite all steps of control. Blood transfusion and organ transplantation have acquired enormous relevance in the epidemiology of Chagas’ disease, assuming the role as the main route of transmission in places where screening for Trypanossome cruzi has not been performed yet. The main objective of this study is to know the positivity for T. cruzi in candidates for blood and organ donation in the State of Ceara. Methodology: It is a retrospective descriptive study, during the period 2010-2015, which was carried out analyzing medical records from Transplantation Central of the State of Ceara and data recorded in the computerized system from the Hematology and Hemotherapy Center of the State of Ceara (HEMOCE). For the association of categorical variables and groups, the Fisher’s exact test was used. For establishing a linear relationship among quantitative variables, it has been used the simple linear regression. The project was approved by Research Ethical Committee of the Federal Univesity of Ceara. Results: Concerning potential organ donors, 2,822 potential donors were notified; 1,038 of them were effective donors and 1,784 were excluded for several reasons. The prevalence of T. cruzi infection in potential donors was 1.27% (n.29). From the reactive cases, 79.31%(23) were male aged 41 to 60 years, most them coming from countryside cities of the state (65.5%, n:19). 72.4% (21) presented reactive serology for other infections besides CD, such as Cytomegalovirus, Hepatitis B and C and Toxoplasmosis. It was observed that, among potential organ donors with CD, there was higher probability to find people over 60 years, having the stroke (CVA) as the main cause of death. Regarding the potential blood donors, 608,353 were serologically screened, being that 1,982 (0.3%) were serologically ineligible due to reactivity to CD. The indeterminate results for CD corresponded to 5.99% (n.1380) of the total of blood bags discarded during the period of the study. 763 individuals had previously donated blood, subsequently, they were turned away due CD discovered by serological screening tests. There were 120 ineligible individuals confirmed. From them, majority were male over 30 years old, with high school education, from countryside cities of the state and coming from the capital Fortaleza. Conclusion: Although we have observed a considerable decrease in the prevalence of the disease in blood and organ donors in the state of Ceara, CD still represents a problem in our state, therefore the vector surveillance and the hemovigilance in blood banks must be encouraged continuously to avoid outbreaks and keep the disease under control. In addition, the number of undetermined serological results draws attention, then it is necessary to promote studies which propose new methodologies for the serological tests, increasing their specificity and, consequently, reducing the rate of discard of blood bags to reduce costs for the Unified Health System. / Introdução: A doença de Chagas ainda hoje representa um grave problema de saúde pública na América Latina, apesar de todas as medidas de controle. A transfusão sanguínea e o transplante de órgãos têm adquirido enorme relevância na epidemiologia da doença de Chagas, assumindo papel como a principal via de transmissão nos lugares onde a triagem para T. cruzi ainda não é realizada. O principal objetivo do presente estudo foi conhecer a positividade para T. cruzi em candidatos à doação de sangue e de órgãos no Estado do Ceará. Metodologia: Trata-se um de estudo retrospectivo descritivo, no período de 2010 a 2015, que foi realizado a partir de dados de prontuários da Central de Transplantes do Estado do Ceará e de dados registrados no sistema informatizado do Centro de Hematologia e Hemoterapia do Ceará (HEMOCE). Para a associação de variáveis categóricas e grupos, foi utilizado o teste exato de Fisher. Para estabelecer relação linear entre as variáveis quantitativas utilizou-se a regressão linear simples. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal do Ceará. Resultados: Quanto aos potenciais doadores de órgãos, foram notificados 2.822 potenciais doadores, sendo 1.038 doadores efetivos e 1.784 excluídos por diversos motivos. A prevalência de infecção por T. cruzi nos potencias doadores foi 1,27% (n.29). Dos casos reagentes, 79,31% (23) era do sexo masculino, com idade entre 41-60 anos (51,72%; n:15), com maioria procedente de cidades do interior do estado (65,5%, n:19). 72,4% (21) apresentaram sorologia positiva/inconclusiva para outras infecções além da DC como Citomegalovírus, Hepatites B e C e Toxoplasmose. Observou-se que potenciais doadores de órgãos com DC têm maior probabilidade de terem idade maior que 60 anos e ter como causa do óbito o AVC. Quanto aos potenciais doadores de sangue, 608.353 realizaram a triagem sorológica, destes 1.982 (0,3%) foram sorologicamente inelegíveis devido reatividade para DC. Os resultados indeterminados para DC corresponderam a 5,99% (n. 1380) do total de bolsas descartadas do período do estudo. 763 indivíduos já haviam doado sangue anteriormente e posteriormente se tornaram inaptos na triagem sorológica devido a DC. Foram inelegíveis confirmados 120 indivíduos. Destes, a maioria era do sexo masculino, com idade maior de 30 anos, com ensino médio completo, natural de cidades do interior do estado e procedente de Fortaleza. Conclusão: Embora, tenhamos observado uma diminuição considerável da prevalência da doença em doadores de sangue e de órgãos no estado do Ceará, a DC ainda representa um problema em nosso estado, logo a vigilância vetorial e a vigilância nos bancos de sangue devem trabalham continuamente para evitar surtos e manter a doença controlada. Além disso, chama a atenção a quantidade de resultados sorológicos indeterminados, logo, são necessários estudos que proponham novas metodologias para os testes sorológicos, aumentando a especificidade dos mesmos e, consequentemente, reduzindo o descarte desnecessário de bolsas de sangue, diminuindo assim, os custos para o Sistema Único de Saúde.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La enfermedad de Chagas congénita es causada por el parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi que alcanza al feto atravesando la barrera placentaria. Durante la invasión tisular T. cruzi induce destrucción de la matriz extracelular (MEC) mediante secreción de proteasas como Cruzipaína (Cz) e inducción de la expresión y activación de proteasas propias del tejido como las metaloproteinasas de la matriz (MMPs). La posible participación de estas proteasas en placenta humana durante la transmisión congénita no ha sido estudiada. Se analizó la expresión y actividad de las MMP 2 y 9 durante la infección ex vivo de vellosidades coriónicas placentarias humanas con el parásito. Se determinó la participación de estas MMPs y de Cz en la degradación de moléculas glicosiladas y del colágeno tipo I del tejido conectivo fetal. Adicionalmente se evaluó el efecto de inhibidores para ambos tipos de proteasas tanto sobre los efectos tisulares de la invasión parasitaria como sobre su infectividad. Se obtuvieron tripomastigotes de la cepa Dm28c a partir de células Vero infectadas y placentas de término de madres sanas. Se incubaron trozos de tejido placentario (0,5 cm3) durante 24 horas en presencia y ausencia de 105 y 106 tripomastigotes y en presencia y ausencia de inhibidores para Cz (E-64) y para MMP (doxiciclina). La infección placentaria se comprobó mediante detección del parásito por PCR. Las MMP se analizaron mediante Western Blot, Inmunohistoquímica y Zimografía. Las modificaciones estructurales de colágeno I se determinaron histoquímicamente mediante la tinción de picro rojo sirio y las alteraciones de moléculas glicosiladas mediante tinción de ácido periódico de Schiff. La expresión y activación de las MMPs depende de la cantidad de parásitos usados. La inhibición de la actividad proteolítica de Cz y las MMP previene la destrucción de colágeno tipo I y alteraciones de moléculas glicosiladas inducida por T. cruzi. La inhibición de la actividad de las proteasas no previene la infección ex vivo del parásito. Se concluye que tanto proteasas parasitarias así como propias del tejido a infectar constituyen parte de los mecanismos de infección tisular de T. cruzi / Proyectos Bicentenario Anillo 112 y FONDECYT 11080166