No obstante la amplia cantidad de investigaciones dedicadas a la “orientación del mercado”, en las organizaciones empresariales, las referencias de este concepto han sido muy limitadas—específicamente en el contexto de las empresas de rápida internacionalización, como las denominadas Born Globals (BG)— a partir de términos operacionales y de conceptualización. Dicho lo anterior, la presente tesis tiene como objetivo investigar el concepto de orientación al mercado para el tipo específico de las empresas BG. La tesis se enmarca en tres estudios realizados. En primer lugar, realizamos un estudio exploratorio a través de entrevistas de profundidad con cinco empresas españolas provenientes de múltiples sectores y que, además, tenían actividades internacionales. Los datos fueron analizados con la técnica de Casos Cruzados. Los resultados sugieren que la orientación al mercado debería ser desarrollada dentro del concepto propuesto: orientación hacia los mercados internacionales (OMI) en las empresas BG. Este estudio también proporciona los componentes para la medición de la citada orientación, en este tipo de empresas. En segundo lugar, al utilizar las muestras de empresas BG, de países nórdicos y de España, hemos evaluado la dimensionalidad de OMI, con la cantidad óptima de ítems para la escala, (con la excepción del constructo de redes); también analizamos la invariabilidad de los constructos a través de la muestra de múltiples países. Los resultados mostraron el soporte para la conceptualización de OMI como un constructo multidimensional compuesto por la orientación a clientes, la orientación a la competencia, la coordinación interfuncional y, por último, la capacidad de innovación y tecnológica. La invariabilidad de la medida fue evaluada con el análisis factorial confirmatorio multigrupo. Los factores mencionados anteriormente tienen una dimensionalidad y estructura factorial similar entre los países. Finalmente, en el tercer estudio, examinamos cómo el concepto extendido de la orientación al mercado para las empresas BG —que hemos llamado OMI— afecta el rendimiento de la empresa, medido a partir del rendimiento al cliente y el rendimiento financiero, en el contexto de las empresas BG, asimismo si este efecto varía entre los países. Los resultados muestran cómo los componentes de OMI tienen un efecto positivo y significativo en el rendimiento de las empresas BG en ambos contextos (empresas nórdicas y españolas) a través del rendimiento al cliente y financiero. Con base en los resultados de la investigación, la principal contribución teórica de la tesis es la propuesta de cómo la orientación al mercado debe de ser conceptualizada para las empresas BG. Nuestros hallazgos proveen evidencia de la necesidad de incorporar componentes relacionados al ambiente internacional para este tipo de empresas con el concepto propuesto de OMI. Desde una perspectiva para negocios, esta tesis proporciona una herramienta válida y fiable para medir la orientación hacia los mercados internacionales para estas empresas. Por lo tanto, los gerentes de empresas BG podrían adoptar esta escala para una mejor comprensión de la realidad en los mercados internacionales y para desarrollar una estrategia efectiva que permita atraer y retener a los clientes en los diferentes mercados en el extranjero. / Although there is a considerable amount of research on market orientation, research on this concept in the context of born global firms is still lacking a precise definition and full operationalization. This research aims to investigate how the market orientation (MO) concept could be understood for a specific type of firm: the born global firm. The thesis is framed around three studies. First, an exploratory study that was developed by performing qualitative interviews in a sample of five Spanish firms from different sectors which had international activity. The data were analyzed using cross-case analysis. The results suggests that the market orientation concept should be developed into the concept of orientation towards international markets (OIM) for born global firms. It also provides the components for measuring this orientation in this type of firm. Second, using samples of born global firms from the Nordic countries and Spain, we assess the dimensionality of OIM by considering the optimal number of scale items, with the exception of the network construct, and assess the measurement invariance of the construct across the samples. The results support the conceptualization of OIM as a multidimensional construct, using customer orientation, competitor orientation, interfunctional coordination, and innovativeness and technological capability. Measurement invariance was assessed using multi-group confirmatory factor analysis. The factors outlined above have a similar dimensionality and factor structure across countries. Finally the third study, examines how the extended concept of market orientation for born global firms that we have called OIM affects business performance, as measured by customer performance and financial performance, in the context of born global firms, and whether this effect varies between countries. The results show that the OIM components have a positive and significant effect on business performance in born global firms in both contexts (Nordic and Spanish companies) through customer and financial performance. Based on these research findings, the thesis’s main theoretical contribution is the suggestion of how MO should be conceptualized for BG firms. Our findings provide evidence that it is necessary to incorporate components that relate to the international scope of this type of firm, with the concept of OIM. From a business practice perspective, this dissertation suggested that the scale we have developed can provide a reliable and valid analytical tool for assessing the orientation towards international markets of these firms. Thus born global managers may adopt the scale for a better understanding of the reality of foreign markets and to develop effective strategies to attract and retain customers in different markets overseas.

Desde los enfoques de la psicología del ciclo vital (life-span psychology), la migración puede ser considerada como un suceso de vida no normativo que produce cambios evolutivos, valorados como ganancias o pérdidas en el desarrollo de las personas. Esta tesis incorpora la visión evolutiva-ecológica del ciclo vital a los estudios psicológicos que abordan la conceptualización de los modos de respuesta del inmigrante a las situaciones que conforman el proceso migratorio: las investigaciones en psicología positiva, resiliencia, afrontamiento y bienestar. Desde una posición fenomenológica, se pretende comprender el fenómeno complejo de la migración a través de los relatos de vida que cuentan una historia de superación: antes de salir del país de origen, durante el viaje y en el país de destino, incluyendo la condición del retorno. Se postula que a través de la trama de las experiencias vividas se tendrá acceso, por un lado, a las fortalezas, los recursos, las estrategias y las posibilidades desplegadas y, por otro, a las valoraciones sobre la importancia dada a la percepción de los hechos relatados, cuando se elabora un sentido positivo y protector ante la adversidad. El estudio es idiográfico y la muestra está formada por seis inmigrantes de origen latinoamericano residentes en Barcelona. El método utilizado, la obtención y el análisis-discusión de datos, ha seguido la práctica aceptada en psicología del análisis fenomenológico interpretativo, IPA (Smith y Osborn, 2007). Los resultados identifican la temática común contrastada en los estudios psicosociales sobre migración: los problemas financieros y laborales, el malestar y la inquietud ante la situación presente y su futuro, el sufrimiento por la separación de los seres queridos, el trato discriminatorio, etc. Los modos de respuesta ante los acontecimientos y las preocupaciones señaladas dibujan un perfil de superación que resume los esfuerzos cognitivos y emocionales, la movilización de los recursos personales, de base natural y adquiridos, el apoyo social y las perspectivas de futuro concretadas en planes de retorno al país de origen. Con respecto a la significación de la situación adversa, la mayor parte de los entrevistados elaboraron los sucesos negativos incrementando la confianza en sí mismos, sin ignorar la propia vulnerabilidad y valorando la importancia de las relaciones interpersonales, de los vínculos cultivados y de los apoyos recibidos. Los cambios evolutivos destacados como ganancias hacen referencia a la orientación positiva de sus vidas y al mayor autoconocimiento. En cuanto a los esfuerzos realizados para superar las adversidades, las experiencias reales relatadas aportan argumentos a favor de las formas de intervención psicosocial en el ámbito de la inmigración, basadas en el potencial de respuesta positiva de las personas que, por su parte, puede facilitarse y formarse desde el ambiente, cuando se incide en el afrontamiento / Based on the approaches in the lifespan psychology field, the migration can be considered a non-normative life event that produces evolutionary changes, which are valued either as gains or losses in the development of people. This paper incorporates the ecological point of view of the human development into the psychological studies that address the conceptualization of the forms of response of the immigrant to situations that will comprise the migration process: the researches on positive psychology, resilience, coping and well-being. The object of this paper is to understand the complex migration phenomenon, from a phenomenological point of view, through life stories on the overcoming of challenges: before leaving the home country, during the journey and in the destination country, including the condition of the prospect to return to their home country. It is claimed that through the web of experiences, on one hand, one will have access to the strengths, resources, strategies and possibilities implemented and, on the other hand, to the assessment of the importance given to the perception of facts reported, upon the creation of a positive and protector sense of adversity. It is an idiographic study and the sample comprises six Latin-American immigrants living in Barcelona. The method used, which includes the collection and analysis-discussion of the data, followed the practice accepted by the psychology of Interpretative Phenomenological Analysis (IPA) (Smith and Osborn, 2007). The results identify the common themes addressed in psychosocial studies on migration: the financial and labor problems, the uneasiness and concern about immigrants’ current situation and their future, the suffering caused by the separation from their beloved ones, the discriminatory treatment, among other themes. The forms of response in face of the events and stated concerns constitute an overcoming profile that summarizes the cognitive and emotional efforts, the mobilization of personal, natural and acquired resources, the social support and future prospects materialized in plans to return to their home country. Regarding the significance of the adverse situation, most respondents process the negative events, further adding the self-confidence, without ignoring their own vulnerability, and emphasized the importance of interpersonal relationships, the strengthening of bonds and the support received. The evolutionary changes characterized as earnings relate to the positive direction in their lives and a greater selfawareness. Regarding the efforts to overcome adversity, the actual experiences reported indicate arguments in favor of forms of psychosocial intervention on migration, based on the potential of positive responses from people, which, in turn, could have been facilitated and formed from the context, when it privileges the coping, the enhancing resources of resilience and the psychological well-being.

La neurología es una de las especialidades veterinarias que más ha evolucionado en los últimos años. Los avances médicos junto a la demanda de la sociedad para diagnosticar y tratar enfermedades neurológicas en perros han contribuido a una mayor compresión de la fisiopatología de estas enfermedades. Aún así, la etiología de ciertas enfermedades sigue siendo desconocida, lo que limita el diagnóstico y tratamiento en muchos casos. La necesidad de nuevas líneas de investigación es clara. Estudios en medicina humana han demostrado la relación existente entre el sistema hemostático y la respuesta inflamatoria, así como la influencia que ejercen los componentes de dicho sistema en la biología tumoral. Ni la posible relación del sistema hemostático con los tumores cerebrales ni la actividad fibrinolítica intratecal han sido estudiados en la especie canina. Los D-dímeros son productos de degradación de la fibrina entrelazada y su presencia es específica de la activación de la cascada de la coagulación. Estudios en humanos y en animales han demostrado que la actividad fibrinolítica local puede medirse mediante la determinación de la concentración de D-dímeros en diferentes fluidos corporales. Esta tesis doctoral ha confirmado que existe activación de la actividad fibrinolítica intratecal en algunas enfermedades neurológicas de los perros y que ésta es independiente de la actividad fibrinolítica sistémica. El incremento significativo de las concentraciones de D-dímeros en el líquido cefalorraquídeo de perros con meningitis-arteritis que responde a cortisona sugiere que la concentración de D-dímeros puede considerarse un biomarcador para dicha enfermedad. Esta tesis doctoral aborda la relación entre el sistema hemostático y el glioma canino y demuestra que el factor tisular, el iniciador de la vía extrínseca de la cascada de la coagulación, se sintetiza en gliomas caninos. Además, demuestra la activación intratumoral de los sistemas de la coagulación y de la fibrinólisis. En conclusión, los resultados de esta tesis doctoral confirman que el sistema hemostático está involucrado en la fisiopatología de algunas enfermedades del sistema nervioso central canino y establece la necesidad de nuevas líneas de investigación, especialmente en enfermedades inflamatorias y neoplásicas del sistema nervioso central de los perros. / Veterinary neurology is one of the most evolving areas in veterinary medicine. Recent medical advances and the greater demand from society to face neurological disorders in veterinary patients have contributed to a better understanding of the underlying mechanisms of neurological diseases in pets. Despite this, the etiologic origin of some diseases still remains obscure, and diagnostic and therapeutic approaches are limited in some cases, so research is needed to solve these problems. Studies in human beings have demonstrated the relationship between the hemostatic system and the inflammatory response as well as the influence of hemostatic system molecules in cancer biology. Neither the activation of the hemostatic system as part of canine brain tumor pathophysiology, nor the intrathecal fibrinolytic activity in dogs with neurologic disorders had been previously studied. D-dimers are specific cross-linked fibrin degradation products and their presence confirms previous coagulation system activation. Previous studies in human beings and animals demonstrated that local fibrinolytic activity can be measured by means of D-dimer concentrations in different biological fluids. In this direction, this PhD thesis confirmed that intrathecal fibrinolytic activity is activated in some canine neurologic disorders, independently of systemic fibrinolytic activity. A significant rise in cerebrospinal fluid D-dimer concentration occurs in dogs with steroid responsive meningitis-arteritis, suggesting that CSF D-dimer concentrations might be potential diagnostic markers of this disease. This PhD thesis also addressed the relationship between the hemostatic system and canine glioma biology and demonstrated that canine gliomas overexpress tissue factor, the extrinsic pathway activator of the coagulation cascade, and that there is intratumoral activation of the coagulation and fibrinolytic systems. In conclusion, the results of this PhD thesis confirm that the hemostatic system is involved in the pathophysiology of some canine central nervous system diseases and provide a new perspective to perform further research, especially on inflammatory and neoplastic disorders of the canine central nervous system.

Esta tesis pretende dar respuesta a la crisis del euro y a las contradicciones que genera su gestión, partiendo de la premisa de que para asegurar la sostenibilidad de la moneda única es preciso consolidar la reforma federal que, según concluimos en la investigación, ya se ha emprendido. En esta investigación se valora hasta qué punto la eurocrisis impulsa la reforma política, analizando el contexto en que se ha desarrollado la Unión Económica y Monetaria (UEM). Asimismo, se establece una justificación normativa del federalismo, de forma que éste es un marco teórico sustantivo, que nos permite valorar el funcionamiento de las instituciones y las leyes de la Unión Europea en su conjunto, y de la UEM, en particular. El análisis diacrónico de la integración nos permite establecer que existe ya un proceso de federalización en marcha, aunque con algunas lagunas, que también constituyen el núcleo del análisis. Habiendo establecido un diagnóstico sobre las carencias de la UEM, que, lejos de convertirse en una zona monetaria óptima, incluso ha exacerbado las diferencias entre Estados miembros, el federalismo actúa como marco analítico, estableciendo las directrices a seguir en la gobernanza de la zona euro, y desembocando en conclusiones de carácter prospectivo sobre la reforma institucional y legal, para dotar de eficacia y legitimidad al gobierno de la UEM. De forma paralela, es preciso verificar si esta crisis ha sido interpretada adecuadamente por parte de los actores políticos y económicos, preguntándonos hasta qué punto la rigidez de los criterios de convergencia y la ortodoxia monetaria son la solución, y de qué manera los mercados financieros interpretan la unión (o la desunión) política en la zona euro. Una de las conclusiones relevantes es que los actores económicos demandan una respuesta de carácter supranacional, requiriendo la explicitación de un marco de unión política, que, a nuestro juicio, ha de ser federal, superando el intergubernamentalismo, ya que dicha lógica no ha cumplido sus objetivos. Ello ha llevado a afrontar la crisis a través de la reforma institucional de los últimos años. Dicha reforma ha sido bien recibida en los mercados, generando una tensión hacia la supranacionalidad, que iría en la línea adecuada, y en este sentido, destacamos los instrumentos de rescate, y, particularmente, la Unión Bancaria. Sin embargo, estas decisiones generan tensiones en la ciudadanía, debido a los graves problemas de déficit democrático en el ámbito decisorio de la UEM, altamente cuestionado, llegando incluso a concretarse acciones políticas que van más allá de lo establecido en los tratados. La tesis se refuerza con el análisis de las implicaciones que tiene el desarrollo de la gobernanza económica, con variables como el mercado interior, el desarrollo presupuestario y el federalismo fiscal. Habiendo demostrado la necesidad de la reforma de la gobernanza de la zona euro, se incide en que la incapacidad de articular un sistema dotado de legitimidad llevaría a una crisis política en la UEM, poniendo en riesgo la viabilidad de la moneda única. Una variable explicativa fundamental en la tesis es demostrar la naturaleza política de la crisis del euro. / The aim of the thesis is to put forward a proposal to stabilise the euro area in the context of the euro crisis and its contradictions, given the premise that in order to ensure the sustainability of the single currency, federal achievements so far must be consolidated. In this research it is assessed to what extent the euro crisis fosters political reform. It is also an aim of the research to analyse the context and the development of the Economic and Monetary Union (EMU), in order to set a normative theory of federalism, so that it becomes a suitable theoretical framework to assess in full the functioning of the EU laws and institutions as a whole, but, particularly in the EMU. The old frames seem to be worn out and too monolithic to allow for a proper interpretation of the euro area reform. The diachronic analysis of the European integration process allows us to conclude that a process of incremental federalism is well on the way, though there are some loopholes to be sorted out, specially the democratic deficit. These gaps, in fact, are one of the key elements to explain the conclusions of this research. Once it has been possible to set an explanatory variable, and having reached a clear conclusion on the failings of the euro area, the thesis demonstrates that rather than becoming an optimal currency area, the EMU may have, in fact, exacerbated the economic asymmetries between Member States. Federalism is a perfect analytical frame, for it sets out the guidelines to be followed in the realm of the European economic governance. We therefore get to prospective conclusions regarding the institutional reform to be addressed in order to achieve the aim of giving efficiency and legitimacy to the governing system in the euro area. At the same time, we conclude that more analytical coherence is needed to construe how the political and economic actors receive and understand the euro crisis. In this context, it is necessary to assess whether the monetary orthodoxy and the budgetary discipline can offer the right solution to the problem. In this sense, the financial markets react to their perception about the political union (or disunity) in the euro area. One of the most relevant conclusions is that the economic and financial actors ask for a political response. A supranationally integrated system is expected. This requires a frame of political union, i.e. an explicit federal frame. The intergovernmentalist logic lacks the capacity to achieve the goal of financial and political sustainability in the euro area, not to mention the dissociation of decision-making and public opinion. As reflected in certain improvements in market, over the last five years significant progress has been made towards stabilising the euro area. The underlying structural reform and the market response generate a pressure towards supranationalism. The foundations of the EMU are being changed, sometimes going beyond the treaties. This trend is validated when we look at the bailout mechanisms, the ECB intervention, and, particularly, the Banking Union. The thesis is enriched by the analysis of the economic governance, and the political relevance of the single market, the budgetary procedure and the fiscal federalism. The capacity to build up a legitimate system would be an essential step to ensure the viability of the euro. Thus, the euro crisis has a political nature, which takes us to conclude that the loopholes in the institutional building put the euro project at stake, in a context in which democratic legitimacy is of utmost relevance.

El incumplimiento de los tratamientos constituye uno de los problemas más graves de la salud pública actual, por sus consecuencias clínicas y socioeconómicas. Aunque las causas de esta falta de adherencia no siempre están claras debido a la complejidad de los múltiples factores implicados. Por ello, no es de extrañar que el cumplimiento terapéutico haya sido calificado como el talón de Aquiles de la medicina contemporánea, sobre todo de la psiquiatría. Este abandono y sus factores asociados constituyen un ejemplo paradigmático, del fallo del modelo biomédico tradicional, para explicar el proceso de enfermedad, su abordaje, causas y sus consecuencias. El objetivo general de esta tesis es construir una etnografía psiquiátrica, a través de un estudio de casos, en una unidad de agudos de salud mental. El diseño metodológico de la investigación es fenomenológico, interpretativo, etnográfico, de seguimiento cualitativo y longitudinal, tomando como eje principal el estudio del tratamiento psicofarmacológico como relación social de sujetos ingresados, familiares y profesionales que los atienden, a través de narrativas de enfermedad y del modelo explicativo de Kleinman (1980). Tras el análisis de los resultados obtenidos puedo concluir diciendo que, uno de los mayores problemas que se encuentra la psiquiatría es el abandono del tratamiento psicofarmacológico por parte de los sujetos diagnosticados de una enfermedad mental. Este incumplimiento y la falta de adherencia se deben a la escasa o nula conciencia de enfermedad, al dispositivo en el que se encuentran y a las relaciones sociales asociadas con el tratamiento psicofarmacológico. / Failure of treatment is one of the most serious problems of the current public health because of its clinical and socioeconomic consequences. Although, the causes of this lack of compliance are not always clear due to the complexity of the multiple factors involved. Therefore it is not surprising that therapeutic compliance has been described as the Achilles heel of contemporary medicine, especially psychiatry. This therapeutic failure and its associated factors constitute a paradigmatic example of the unfulfilment of the traditional biomedical model to explain the disease process, its approach, its causes and its consequences. The overall objective of this thesis is to build a psychiatric ethnography through a case study in an acute psychiatric unit. The methodological design of the research is phenomenological, interpretive, ethnographic, qualitative and longitudinal, taking as a main study of psychopharmacological treatment as a social relation of the subjects admitted, family and the professionals that take care of them through the narratives of illness and Kleinman's explanatory model (1980). After analyzing the results, I can conclude saying that one of the biggest problems in psychiatry is the failure of psychopharmacological treatment of patients with a mental illness. This non-compliance and non-adherence is related with the limited awareness of the disease, with the device in which they are placed and with the social relationships associated by the psychopharmacological treatment.

El virus de la gripe porcina (VGP) es un patógeno importante en el sector veterinario con un gran potencial zoonótico, y por lo tanto se considera también una amenaza potencial para la salud pública. La vigilancia y el control de este patógeno en cerdos es por lo tanto crucial. Los métodos actuales de control se basan en la profilaxis, en particular, en vacunas que suscitan una respuesta de tipo humoral. La capacidad de escape y la alta variabilidad de VGP hacen que la eficacia de estas vacunas pueda verse comprometida; por tanto, deben ser actualizadas periódicamente. El mismo problema se plantea en la salud humana donde se están desarrollando vacunas diseñadas racionalmente con tal de solventarlo. Estas vacunas están siendo diseñadas para potenciar la respuesta de células T contra el virus de la gripe A (VGA). La respuesta de células T esta relacionada con la protección contra la infección por el VGA, centrándose en las proteínas internas y altamente conservadas del virus. Esto permitiría resolver los problemas anteriormente citados. Los epítopos de células T de VGP conocidos en cerdos son sólo unos pocos y están relacionados con el Complejo Mayor de Histocompatibilidad porcino de clase I (CMHpo-I). La vacunología inversa se utiliza en sanidad humana para identificar los epítopos de células T; sin embargo, en cerdos este concepto se ha sido introducido recientemente y por lo tanto se dispone de pocas herramientas. El objetivo principal de este trabajo era identificar epítopos de células T para diseñar racionalmente vacunas contra VGP. Para este propósito, se abordaron las siguientes estrategias. La vigilancia de VGP es fundamental para un control adecuado. La situación epidemiológica de VGP en España debía ser actualizada y se necesitaban más datos genéticos para permitir el uso de la vacunología inversa. El estudio realizado mostró que la situación epidemiológica de España era similar a la de otros países europeos; las cepas circulantes estaban estrechamente relacionadas y evolucionaron de la misma manera. Sin embargo, también se encontraron exepciones; una cepa evolucionó de forma divergente en España. Se sugiere que el cambio genético pueda ser un evento reciente en la evolución de esas cepas. Los ensayos in vitro para determinar la afinidad de unión de epítopos a CMHpo-I disponibles actualmente son pocos y están basados en moléculas recombinantes. Por lo tanto, en primera instancia se intentó generar una herramienta in vitro basada en la forma nativa del CMHpo-I. Para ello se diseñó y desarrolló casi por completo un ensayo de reconstitución de MHC aplicado a CMHpo-I, para el cual se generaron células C1R que expresaran el alelo SLA-1*es11 de los cerdos singénicos Babraham. Por último se puso a punto el ensayo de desnaturalización. A continuación, se aplicó la vacunología inversa para identificar epítopos de células T. Se predijeron epítopos del VGP in silico mediante NetMHCpan para los alelos CMHpo-I de los cerdos singénicos Babraham (SLA-1*es11 y SLA-2*es22); estos epítopos se probaron mediante ensayos funcionales ex vivo (IFNγ y respuesta de proliferación) usando células de cerdos Babraham inmunizados. Desafortunadamente, este enfoque no dio ningun epítopo positivo. Los epitopos de células T fueron también identificados empíricamente. Las proteínas M1 y NP de un VGA humano fueron seleccionadas como diana, se estudiaron mediante el uso de péptidos solapantes y métodos funcionales (IFNγ y respuestas de proliferación) hasta encontrar epítopos de células T. Los epítopos fueron analizados con células procedentes de cerdos Babraham inmunizados con VGA. Se encontraron dos epítopos CMHpo de clase II solapados, NP405-416 y NP407-420. En otro intento, se utilizó una estrategia más compleja de vacunología inversa. Esta había sido utilizada anteriormente por otros autores y comprende una combinación de métodos: predicción de epitopos in silico mediante NetMHCpan y validación de los resultados utilizando las preferencias de unión del alelo CMHpo determinadas in vitro, analisis in vitro mediante un ensayo de unión y analisis in vivo mediante tetrámeros. Los péptidos fueron identificados en animales infectados y expuestos a dos VGP heterólogos. Esta estrategia demostró ser muy precisa y así se identificó un epítopo inmunodominante (NA171-180). En general, estos datos allanan el camino para el diseño racional de una vacuna contra la SwIV a parte de proporcionar una nueva visión de la respuesta de los cerdos a la infección o inmunización con VGA. / Swine Influenza Virus (SwIV) is an important pathogen in veterinary field with a great zoonotic potential and thus it is considered also a potential threat for public health. Surveillance and control of this pathogen in pigs is therefore crucial. Current methods of control are based on prophylaxis; in particular they are based on vaccines eliciting humoral response. Escaping capacity and high variability of SwIV make that the efficacy of those can be compromised; thus vaccines need to be periodically updated. This problem is shared in human health and thus rationally designed vaccines are being developed. Those are being designed to enhance T cell response against Influenza A Virus (IAV). T cell responses showed to be related with protection against IAV infection, targeting the highly conserved internal protein of the virus. This would solve the problems above cited. T cell epitopes of SwIV in pigs are just few and related to class I Swine Leucocytes Antigens (SLA). Reverse vaccinology is used in human health to identify T cells epitope; however, in pigs this has just recently been introduced and thus just few tools were available. The main aim of this work was to identify T cells epitopes in SwIV to be used in rationally designed vaccines. For this purpose, the following studies were performed. Surveillance of SwIV is fundamental to design a proper control. The epidemiological situation of SwIV in Spain needed to be updated and more genetic data were required to allow the use of reverse vaccinology. The study showed that the epidemiological situation of Spain was similar to other European countries in which circulating strains were closed related and evolving in the same way. However, some exceptions were found; one strain evolved divergently in Spain. Genetic shift has been suggested as a recent event in the evolution of those strains. In vitro assays to determinate binding affinities of epitopes to class I SLA (SLA-I) available were few and based on recombinant molecules. Therefore, in a first instance an in vitro tool based on native forms of SLA-I was attempted. MHC reconstitution assay for SLA-I was designed and almost entirely developed. C1R cells expressing the Babraham pigs allele SLA-1*es11 were generated. Finally, the denaturalization step of the assay was set-up. Reverse vaccinology was then applied to identify T cells epitopes. Epitopes of the virus selected as target were predicted in silico by NetMHCpan on Babraham SLA-I alleles (SLA-1*es11 and SLA-2*es22) and tested by ex vivo functional assays (IFNγ and proliferation responses) using cells from immunised Babraham inbred pigs. Unfortunately, this approach did not give any positive epitope. Additionally, T cells epitopes were empirically identified. Proteins M1 and NP of a human IAV were selected as target and thus dissected by using overlapping peptides and functional methods (IFNγ and proliferation responses) until finding T cells epitopes. The tests were performed using cells from IAV immunised Babraham inbred pigs. Two overlapping SLA-II epitope were found, NP405-416 and NP407-420. In another attempt, a more complex strategy of reverse vaccinology was used. This was previously used by other authors and it is based on a combination of methods: in silico prediction of epitopes by NetMHCpan and validation of results by using in vitro binding preferences of the selected SLA-I allele , an in vitro test binding assay and in vivo test by tetramers. Peptides were identified in animals infected and challenged with two heterologous SwIV. This strategy showed to be highly accurate and thus one immunodominant epitope (NA171-180) was identified. Overall, these data pave the way for rational design of vaccine against SwIV as well as providing new insight into pig responses to infection or immunization with IAV.

El melanoma és el tumor cutani més maligne i la seva incidència ha experimentat un increment exponencial. En els últims anys, noves teràpies han aconseguit impactar positivament en la supervivència dels pacients amb melanoma metastàtic. A destacar, la teràpia dirigida envers aquells tumors portadors de la mutació BRAF V600, així mateix com l’alliberació de frens immunes amb inhibidors de modulació immunes (immune-checkpoints). Aquesta tesis està formada per dos articles centrats en els punt febles d’aquestes teràpies. El primer article defineix el repte de la resistència adquirida a inhibidors de BRAF i teràpies per aquells melanomes amb genotips orfes de tractament. La proposta d’un inhibidor d’ERK al final de la via de la proteïna quinasa activada pel mitogen (MAPK), proporciona activitat in vitro en un ventall de línies cel·lulars ben caracteritzades. El tractament combinat amb inhibidor de BRAF i inhibidor d’ERK aconsegueix arribar més lluny i aporta dades de sinèrgia contra la lluita envers la resistència adquirida. Per altra banda, el segon article es centra en el mecanisme subjacent a la baixa resposta i alta toxicitat associada al tractament amb els inhibidors d’antigen-4 de limfòcit T citotòxic (CTLA4). Fent ús de la seqüenciació de propera generació, hem pogut estudiar amb detall els canvis en la diversitat dels receptors de les cèl·lules T (TCR) i com aquests varien degut a l’exposició al tractament. / Melanoma is the most mortal skin cancer and its incidence has undergone exponential growth during at least the last 50 years. Recently, new therapies have demonstrated a positive impact in the survival of metastatic melanoma patients. Particularly worth highlighting are targeted therapy against those tumors harboring BRAF V600 mutation, or releasing the brakes from the immune system with immune-checkpoints. This thesis is comprised of two articles that focus on weak points of these therapies. The first paper defines the challenge of acquired resistance to BRAF inhibitors and therapies for melanomas treatment-orphan. ERK inhibitor blocks the mitogen-activated protein kinase (MAPK) and offers in vitro activity for a large group of very well defined cell lines. Combining BRAF inhibitor and ERK inhibitor shows synergistic activity when fighting against acquired resistance. The second article is focused on elucidating the mechanism associated with low responses and high toxicity related to treatment with cytotoxic T lymphocyte antigen-4 (CTLA4) blockade. Using next generation sequencing has provided insight into the changes in diversity for T cell receptor (TCR) and how these are affected by treatment.

La aplicación del modelo transteórico del cambio en pacientes con diagnóstico de juego patológico y la adecuada evaluación de los factores motivacionales implicados en la conducta de juego ha recibido poca atención en la literatura científica. Asimismo, la investigación sobre la eficacia de los tratamientos del juego patológico es reciente y relativamente limitada. La evidencia empírica indica que la terapia cognitivo-conductual es el tratamiento más eficaz para el juego patológico. Sin embargo, son pocos estudios los que proporcionan información sobre los predictores de respuesta, siendo difícil establecer qué técnica específica, como la exposición con prevención de respuesta, se asocia a una mayor efectividad terapéutica. Objetivo: a) analizar las propiedades psicométricas (análisis factorial y validez discriminante-convergente) de la escala University of Rhode Island Change Assesment (URICA) (McConnaughy, Prochaska y Velicer, 1983) en el juego patológico, y b), determinar en qué grado la técnica de exposición con prevención de respuesta mejora el rendimiento terapéutico de la terapia cognitivo conductual en el juego patológico. Método: El análisis factorial de la escala URICA se realizó en una muestra de 531 varones con diagnóstico de juego patológico. La relación entre la escala de motivación al cambio y la respuesta al tratamiento se analizó mediante un diseño cuasi-experimental pre-post en una muestra de 191 pacientes que recibían terapia cognitivo-conductual grupal. Además, se comparó dos condiciones terapéuticas (terapia cognitivo-conductual grupal con y sin exposición con prevención de respuesta) en una muestra de 502 varones con diagnóstico de juego patológico. Resultados: Los resultados psicométricos confirman la fiabilidad y validez de la escala URICA en muestra clínica de jugadores patológicos. Además, se halló una asociación de las puntuaciones pre-test de la escala con las tasas de riesgo de recaída y de abandono. El riesgo de recaída es similar en terapia grupal cognitivo-conductual con o sin exposición con prevención de respuesta; sin embargo, la tasa de abandono durante el tratamiento es mayor con la exposición con prevención de respuesta. Conclusiones: Los resultados aportan evidencia empírica sobre la capacidad predictiva de las medidas de motivación al cambio sobre los resultados terapéuticos, y por consiguiente sobre su potencial utilidad con el fin de optimizar las intervenciones. Asimismo, el uso adicional de la exposición con prevención de respuesta en un programa de tratamiento cognitivo-conductual grupal no optimiza los resultados terapéuticos, al menos en términos de abandono. / The use of the transtheoretical model of change in patients with a diagnosis of gambling disorder and the appropriate evaluation of motivational factors implicated in gambling behavior have received little attention in the scientific literature. Furthermore, research into the effectiveness of treatment for pathological gambling is recent and relatively limited. Empirical evidence indicates that cognitive-behavioral therapy is the most effective treatment for pathological gambling. There are, however, few studies that provide information on the predictors of response given difficulties in establishing which specific technique (for example, exposure with response prevention) is associated with improved therapy effectiveness. Objective: a) to analyze the psychometric properties (factorial analysis and discriminant-convergent validity) of the University of Rhode Island Change Asessment (URICA) scale (McConnaughy, Prochaska y Velicer, 1983) in pathological gambling, and b) to determine the extent to which the exposure with response prevention technique improves performance in a cognitive-behavioral therapy for the gambling disorder. Method: Factorial analysis of the URICA scale was conducted with a sample of 531 males diagnosed of pathological gambling. The relationship between the scales motivation to change and treatment response was analyzed via a pre-post cuasi-experimental design in a sample of 191 patients receiving cognitive-behavioral group therapy. In addition, two therapeutic conditions were compared (cognitive-behavioral group therapy with or without exposure and response prevention) in a sample of 502 males with a diagnosis of pathological gambling. Results: The psychometric results confirmed the reliability and validity of the URICA scale in a clinical sample of pathological gamblers. Furthermore, an association was found between the pre-test scores of the scale evaluating rates of risk of relapse and that of drop out. The risk of relapse in the cognitive-behavioral group therapy with exposure and response prevention was similar to that without exposure and relapse prevention; yet, the dropout rates during treatment were elevated when there was exposure with response prevention. Conclusions: The results provide further empirical evidence in the predictive capacity of tools to enhance motivation for change on therapy outcome, and thus their potential use in the aim to optimize interventions. The additional use of exposure with response prevention in a program of cognitive-behavioral group therapy does not improve treatment results, at least in terms of dropout rates.

Introducció. La bacterièmia és una de les manifestacions més greus de les infeccions, s'ha associat a un increment de la morbiditat, de la mortalitat i del consum de recursos. Aquest problema és superior quan la bacterièmia és d'origen hospitalari. L'excés de cost associat a les bacterièmies s'utilitza com a mesura de l'impacte d'aquestes infeccions. Hi ha molta variabilitat en l’estimació dels costos incrementals associats a les bacterièmies hospitalàries, s’ha descrit un excés de cost entre 5.875$ i 86.500$ Quan una bacterièmia és causada per un microorganisme resistent als antibiòtics, s’incrementa la gravetat, el risc pel pacient i els costos. Els Centers for Disease Control and Prevention (CDC) estimen que la resistència antimicrobiana té un excés de costos de 20 bilions de dòlars, als Estats Units. A causa de la complexitat per valorar les activitats que es realitzen als malalts, els treballs que analitzen els costos de les bacterièmies sovint es basen en estimacions secundàries i no en costos reals. D’altra banda, la possibilitat de desenvolupar una bacterièmia nosocomial està lligada al temps d'exposició; alhora, aquesta infecció incrementa els dies d'estada, essent l'estada hospitalària una variable confusora. Això pot provocar en les anàlisis d'impacte econòmic un biaix conegut com survivor-treatment selection bias. Pocs estudis han avaluat el cost incremental tenint en compte tots aquest factors. Objectius. L’objectiu principal és avaluar el cost incremental associat a l’adquisició de bacterièmies nosocomials. Es concreta en: 1er. Avaluar l’ajust amb propensity score matching (PSM) en la disminució dels biaixos associats al càlcul del cost incremental. I 2on calcular el cost incremental de les bacterièmies nosocomials, diferenciant segons la sensibilitat als antimicrobians 2.a. dels microorganismes causants i 2.b. desglossant el focus que origina la bacterièmia. Mètodes Es van analitzar els episodis d’hospitalització de l’Hospital del Mar, de Barcelona dels anys 2005 a 2007 en el primer objectiu i fins al 2012, en el segon. Es comparen els costos dels malalts que presenten algun episodi de bacterièmia amb la resta d’altes d’hospitalització atesos en el mateix període i agrupats en els mateixos APR-DRG. En el segon objectiu es van seleccionen les bacterièmies causades pels microorganismes més freqüents i que molt sovint desenvolupen multiresistència en bacterièmies, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae i Pseudomonas aeruginosa. Es va calcular un propensity score (PS) de cada malalt i posteriorment aquest PS s’utilitzà en els models economètrics per ajustar el cost incremental dels malalts que han desenvolupat una bacterièmia i les diferències en funció que el microorganisme fos sensible o multiresistent i també del focus origen. Resultats Objectiu 1, en l’ajust amb PSM el cost incremental mitjà per al total de pacients va ser de 11.916 €, el cost inferior correspon als Gram negatiu amb 6.933€ i el superior als fongs, 32.886€. Objectiu 2.a. El cost incremental més elevat va correspondre a les bacterièmies causades per Pseudomonas aeruginosa multiresistent, mitjana de 44.709€. Les bacterièmies nosocomials per E coli multiresistent presenten un cost incremental mitjà de 8.872€ i si és multisensible de 10.481€. Objectiu 2.b. Les bacterièmies causades per una infecció urinària, per microorganisme multisensible, van presentar un cost incremental mitjà de 6.786€ i de 13.299€ quan era multiresistent. El cost mitjà incremental més elevat va correspondre a les bacterièmies primàries, tant si el microorganisme era sensible (26.082€) com si era multiresistent (29.186€), seguit del focus respiratori quan la infecció va ser produïda per un microorganisme multiresistent (25.292€). Conclusions. Amb l’eliminació dels biaixos mitjançant un bon sistema d’ajust es confirma que la bacterièmia ocasiona un increment considerable en el cost de l’assistència. Aquest increment varia en funció del tipus de microorganisme, la sensibilitat als antimicrobians i el focus que la origina. / Introduction. Bacteremia is a severe infection with high levels of mortality rates, morbidity and resources consumption. The burden is even greater for hospital bacteremia (HB). The incremental cost associated with bacteremia is used as a measure of the impact of these infections. Studies of the incremental costs of hospital infections showed different and variable results: excess cost of infections has been estimated between $ 5,875 and $ 86,500. Bacteremia caused by multidrug-resistant microorganisms have worse prognosis than those caused by antimicrobial-susceptible microorganisms. Centers for Disease Control and Prevention (CDC) estimated that antimicrobial resistance causes excess costs of $ 20 billion per year in United States. Due to the complexity of identifying the multitude of activities performed in a hospital, currently few hospitals have developed detailed per patient cost accounting. Consequently, most of studies that analyze cost of bacteremia are based on secondary estimates rather than real costs. Moreover, the possibility of developing a hospital bacteremia is linked to the exposure time; in addition, this infection increases the length of stay. For this reason, hospital stay can be considered a confounding variable and it can cause a bias in the analysis of economic impact known as survivor-treatment selection bias. Few studies have assessed the incremental cost taking into account all these factors. Aim. The main objective was to evaluate the incremental cost associated with hospital acquired bacteremia. It focuses on: 1.- Assess an adjustment model with Propensity score matching (PSM) for the reduction of biases associated with the calculation of the incremental cost, 2.- to calculate the incremental cost of hospital bacteremia classified by antibiotic sensitivity, 2.a.- caused by the most common organisms, 2.b.- according the causative focus. Methods. Patients admitted to the Hospital del Mar in Barcelona from 2005 to 2007 were analyzed for the first objective, and those from 2005 to 2012 for the second. The costs of patients who experienced an episode of HB were compared with patients grouped into the same APR-DRG but without HB. For the second objective, cases of hospital bacteremia caused by Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae or Pseudomonas aeruginosa were selected and analyzed because of their high prevalence and their multidrug resistance. For each admission, the probability of developing bacteremia (propensity score) was estimated. Subsequently, propensity score was included in an econometric model to adjust the incremental cost of patients who developed bacteremia, as well as to differentiate it for the infections that caused the bacteremia and whether it was classified by the antibiotic sensitivity of the causative organism. Results. Objective 1: adjusting with PSM the mean incremental cost was €11,916. Gram positive microorganism had the lowest mean incremental cost, €6,933 and the highest was fungi, €32,886. Objective 2a: Multidrug-resistant P. aeruginosa bacteremia had the highest mean incremental cost, €44,709. Antimicrobial-susceptible E. coli, €10,481, and multidrug-susceptible, €10.481, were the nosocomial bacteremia with the lowest mean incremental cost. Objective 2b: The mean incremental cost was €6,786 for antimicrobial-susceptible UTI and €13,299 for multidrug-resistant UTI bacteremia. The highest incremental costs were found for primary or unknown sources of bacteremia: €26,082 for antimicrobial-susceptible bacteremia, €29,186 for multidrug-resistant bacteremia and €25,292 when the source of bacteremia was a respiratory infection with a multidrug-resistant microorganism. Conclusions. Controlling for possible biases in a structured adjustment model confirms that bacteremia causes a substantial increase of the cost of care. This increase varies according to the type of microorganism sensitivity to antibiotics and to the causes of the focus.

Las tortugas terrestres mediterráneas, tortuga mediterránea (Testudo hermanni) y tortuga mora (Testudo graeca), presentan problemáticas similares de conservación en España, si bien, la primera está más amenazada. Los programas de conservación, tanto in-situ como ex-situ, deben incluir una adecuada gestión sanitaria. Uno de los aspectos básicos es el establecimiento de los parámetros sanguíneos de referencia para la adecuada interpretación y evaluación del estado sanitario de cada especie. En el primer estudio, realizado en tortuga mediterránea occidental (T. h. hermanni), se valoró el efecto de dos anticoagulantes, heparina de litio y EDTA tripotásico, sobre los parámetros hematológicos. La heparina de litio fue el anticoagulante de elección para las muestras sanguíneas en estos quelonios. Los procesos infecciosos pueden comprometer la viabilidad de las poblaciones de tortugas y son un importante factor a tener en cuenta para la gestión de los centros de cría en cautividad y para la liberación de animales. En el segundo estudio se describe un brote de rinitis crónica asociada a un herpesvirus en una población cautiva de tortuga mora. Los signos clínicos más relevantes fueron rinitis seromucosa bilateral, estomatitis y glositis. Se realizó un estudio hematológico y bioquímico sanguíneo y se comparó con los datos obtenidos en animales sanos de tres poblaciones diferentes. Los animales enfermos mostraron heteropenia, linfocitosis, incremento en la actividad de la AST y aumento de la concentración de α-globulina. Algunos de ellos tenían anemia normocítica y normocrómica. Las lesiones se circunscribían al aparato respiratorio y a la cavidad oral, con marcada hiperplasia epitelial y presencia de infiltrado mixto inflamatorio en el epitelio de la mucosa oral, nasal y traqueal. La microscopía electrónica evidenció la presencia de partículas virales intracitoplasmáticas e intranucleares que, por su tamaño, forma y patrón de distribución, se correspondían con un herpesvirus. La cría en cautividad de especies en peligro de extinción supone unos riesgos sanitarios que las poblaciones salvajes no tienen. En el tercer estudio se describe un episodio de micobacteriosis sistémica atípica en tortuga mediterránea occidental en una población cautiva. Los síntomas aparecieron al final del período de hibernación, en forma de anorexia, embotamiento y letargia, junto a lesiones inflamatorias y edematosas en las extremidades y cola. Los animales afectados fueron eutanasiados. La mayoría de tortugas presentaron una marcada leucocitosis y anemia. Se observó un incremento de AST, ALT, LDH y FA, disminución de los ácidos biliares e hiperproteinemia, con aumento de la fracción globulina y disminución de la fracción albúmina y del cociente A/G en dos animales. En los aspirados articulares se observaron numerosas células mononucleares con abundantes estructuras bacilares fagocitadas. Mediante una tinción de Ziehl-Neelsen se evidenció la presencia de estructuras bacterianas ácido-alcohol resistente. Las lesiones se localizaron en ovario, páncreas, pulmón, bazo, corazón, musculatura caudal, riñón e hígado. El cultivo e identificación para micobacterias fue positivo, así como la secuenciación molecular, mediante la que se identificó Mycobacterium nonchromogenicum. Los aspectos sanitarios en los reptiles están insuficientemente estudiados y valorados para la cría en cautividad y la conservación de las especies amenazadas. En este estudio se comprueba como la heparina de litio es el anticoagulante de elección para la toma de muestras sanguíneas en tortugas terrestres mediterráneas y como las infecciones por herpesvirus y micobacterias pueden comprometer la conservación ex-situ de estas especies. / Mediterranean tortoises, Hermann’s tortoise (Testudo hermanni) and spur-thighed tortoise (Testudo graeca) have similar conservation issues in Spain, although the first has disappeared from most of its original habitat and is more threatened. Both in-situ and ex-situ conservation programs should include adequate health management. One of the main aspects is the establishment of reference values for blood parameters for the proper interpretation and evaluation of the health status of each species. In the first study, conducted in the western Mediterranean tortoise (T. h. hermanni), the effect of two types of anticoagulants, heparin lithium and EDTA tripotassium, on hematological parameters was evaluated. Heparin lithium is considered as the anticoagulant of choice for blood samples of these chelonians. Infectious diseases can compromise the viability of tortoise populations and are important factors to consider in the management of captive populations and for the release of animals, to reinforce wild populations. In the second study, an outbreak of chronic rhinitis associated with a herpesvirus in a captive population of spur-thighed tortoise is described. The most relevant clinical findings were bilateral effusion rhinitis, accompanied by stomatitis and glossitis. An hematological and serum biochemical study was performed and compared with data from healthy animals from three different populations. Diseased animals showed heteropenia, lymphocytosis, increased AST activity and higher α-globulin concentration. Some tortoises showed normocytic and normochromic anemia. The lesions were confined to the respiratory tract and the oral cavity, with marked epithelial hyperplasia and presence of mixed inflammatory infiltrate in the epithelium of the oral, nasal and tracheal mucosa. Electron microscopy revealed the presence of intracytoplasmic and intranuclear viral particles whose size, shape and distribution pattern corresponded to a herpesvirus. Captive breeding of endangered species are more subjected to health risks that wild populations. In the third study, an episode of systemic atypical mycobacteriosis in a captive population of Western Hermann’s tortoise is described. The symptoms appeared at the end of the period of hibernation, in the form of anorexia, dullness and lethargy, with inflammatory and edematous lesions on the limbs and tail. Blood samples, joint taps and skin biopsies were performed. Lately, euthanasia of affected animals was performed. Most tortoises showed marked leukocytosis, with heteropenia, monocytosis and a large number of mononuclear cells, and five animals had anemia. An increase in the values of AST, ALT, LDH and FA, a decrease in bile acids and hyperproteinemia with increased globulin and decreased albumin and A/G ratio were observed. In joint taps, mononuclear cells with phagocytosed bacillary structures were obseved. Ziehl-Neelsen stain revealed the presence of acid-fast bacteria. Lesions were observed in ovaries, pancreas, lungs, spleen, heart, muscle, kidney and liver. Culture and identification were positive for mycobacteria and molecular sequencing lead to the identification of Mycobacterium nonchromogenicum. Health aspects in reptiles are insufficiently studied and assessed for captive breeding and conservation of threatened species. In this study, it was found that lithium heparin is the anticoagulant of choice for blood sampling in Mediterranean tortoises and infections such as those cause by herpesvirus and mycobacteria may compromise the ex-situ conservation of these species.