Submitted by Maria Anália Conceição (marianaliaconceicao@gmail.com) on 2016-06-23T12:33:13Z No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-04.pdf: 2427133 bytes, checksum: bd93608d3c698a26cf602adb4102dc4a (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Anália Conceição (marianaliaconceicao@gmail.com) on 2016-06-23T12:34:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-04.pdf: 2427133 bytes, checksum: bd93608d3c698a26cf602adb4102dc4a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-23T12:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Publico-NOVO-04.pdf: 2427133 bytes, checksum: bd93608d3c698a26cf602adb4102dc4a (MD5) Previous issue date: 2014 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: O processo de cicatrização envolve fenômenos bioquímicos e fisiológicos e qualquer desequilíbrio pode acarretar em alterações da cicatriz. Objetivo: Avaliar a Terapia Laser de Baixa Intensidade pré-incisional na cicatrização em pele de ratos. Métodos: Foram utilizados 90 ratos, distribuídos em três grupos: Grupo Simulação (GS); Grupo Laser Vermelho (GLV) e Grupo Laser Infravermelho (GLIV). Os grupos foram subdivididos em três subgrupos, correspondentes ao 3º, 7º e 14º dias de avaliação. Foi realizada uma ferida incisional no dorso do animal, contendo 3cm. O GS não recebeu tratamento, GLV e GLIV foi utilizada uma energia de 60J por ponto, totalizando três pontos de aplicação, com tempo 600s. As amostras foram coletas do terço médio da cicatriz e logo após foram coradas por hematoxilina-eosina para identificação de vasos, azul de toluidina para mastócitos e picro sirus para colágeno total. Resultados: Não houve diferença significante com relação à quantidade de vasos e mastócitos entre os grupos e períodos avaliados. Houve diferença significante na avaliação de picro sirus, onde o grupo GS 14º apresentou uma concentração maior de colágeno total quando comparado a GS3º e GS7º. Já os grupos GLV e GLIV 14º apresentaram uma diminuição do colágeno total quando comparado ao GS14º. Conclusão: A Terapia Laser de Baixa Intensidade pré-incisional diminui a quantidade de colágeno total. / Introduction: The healing process involves biochemical and physiological phenomena, any imbalance can results in changes in the scar. Objective: To evaluate the Low Level Laser Therapy in preoperative period of healing in the skin of rats. Methods: Were used 90 rats distributed in three groups: Simulation Group (SG); Red Laser Group (RLG) and Infrared Laser Group (ILG), the groups were subdivided into three subgroups, corresponding to 3rd, 7th and 14th days of evaluation. The SG has not received treatment, RLG and ILG 60J energy per point, time 600s. Samples were stained by hematoxylin-eosin for identification of vessels, toluidine blue to mast cells and picro sirus to total collagen. It was applied the two-factor Anova test and Tukey test for comparison of the groups and periods. Being pinned p ≤ 0.05 the level of rejection of the null hypothesis. Results: There was no significant difference regarding the amount of vessels and mast cells between the groups and evaluation periods. There was a significant difference in the evaluation of picro sirus, SG 14th showed a higher concentration of total collagen when compared to SG 3rd and SG 7th. RLG 14th and ILG 14th showed overall decrease in total collagen when compared to SG 14th. Conclusion: Low Level Laser Therapy in preoperative period of healing in rat skin decreases the amount of total collagen.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / INTRODUÇÃO: Pesquisas in vitro evidenciam que a diferença de potencial bioelétrico de uma corrente elétrica pode influenciar a proliferação de fibroblastos e a síntese de fibras colágenas de uma incisão. OBJETIVO: Investigar o efeito da corrente elétrica pré-operatória na cicatrização, em pele de ratos. MÉTODOS: Quarenta ratos foram distribuídos em: Grupo Controle, 20 ratos foram anestesiados e submetidos a uma incisão no dorso, sem a aplicação da corrente. O Grupo Estimulado, 20 ratos foram estimulados eletricamente (corrente elétrica pulsada retangular, com frequência de 7,7Hz e intensidade de 8mA) no dorso durante 30 minutos, no pré-operatório, cuja incisão foi realizada dois minutos após o término da estimulação. O eletrodo com polaridade positiva foi colocado no dorso do rato, e o eletrodo negativo na parede abdominal. Nos 7º e 14º dias foram coletadas a pele do rato e o tecido cicatricial, sendo os animais submetidos à eutanásia. Foi realizada histomorfometria para infiltrado inflamatório, vasos neoformados, fibroblastos, para colágeno tipos I e III. RESULTADOS: O Grupo Estimulado, no 7º dia, apresentou maior quantidade de vasos sanguíneos e fibroblastos, assim como diferença estatística com menor densidade do colágeno tipo III, mas não revelou diferença estatística, quanto aos mastócitos e às fibras de colágeno tipo I. CONCLUSÃO: A estimulação elétrica com polaridade positiva, no pré-operatório, aumentou a quantidade de fibroblastos e de vasos sanguíneos e diminuiu a densidade do colágeno tipo III na cicatriz no 7º dia pós-operatório. / BACKGRAUND: In vitro studies have demonstrated that electrical current may affect the proliferation of fibroblast, and synthesis of collagen fibers. OBJECTIVE: To evaluate the effects of preoperative electrical stimulation on cutaneous wound healing in rats. METHODS: Forty rats were divided into two groups of 20 animals each. In the control group, an incision was made on back of the animals. In the stimulation group, a preoperative electrical stimulation was applied using a rectangular pulse current at a frequency of 7.7Hz, and intensity of 8mA, for 30 minutes, with the positive electrode placed on the back of the animal, and the negative electrode placed on the abdominal wall. Following, an incision was made on their back. Biopsy on the postoperative days 7 and 14, and histological analysis was performed. RESULTS: The stimulated group, at day 7, showed a greater number of newly formed vessels and fibroblasts, and a statistical difference with lower density of collagen type III, bud no statistical difference were observed for mast cells and fibers of collagen type I. CONCLUSION: Preoperative electrical stimulation with positive polarity increased the amount of fibroblasts and blood vessels and decreased the density of collagen type III in the scar at the postoperative day 7. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-29 / O processo de cicatrização é um fenômeno complexo cujos mecanismos não são totalmente entendidos. Não existem trabalhos que mostram a participação de linfócitos B no reparo tecidual. Entretanto, Almeida et al. (Inter Immunol, 2001) demonstraram que células B-1 proliferam em cultura de células peritoneais aderentes e migram para foco inflamatório não específico diferenciando-se em células semelhantes a fagócitos. Células B-1 diferem de células B convencionais quanto sua localização anatômica, ontogenia, expressão de marcadores de superfície, produção de anticorpos e propriedades de crescimento. Células B-1 estão presentes nas cavidades peritoneais e pleurais, são raras no baço e ausentes nos linfonodos de camundongos adultos. Trabalhos mostraram que células B-1 secretam grandes quantidades de IL-10 e esta citocina tem importante função no processo de cicatrização. Objetivo: Investigar a participação de células B-1 no processo cicatricial do camundongo. Métodos: A migração de células B-1 para o foco da lesão foi avaliada utilizando a técnica de imunofluorescência. A análise por citometria de fluxo foi utilizada para a quantificação de células B-1a e B-1b nas cavidades peritoneais de camundongos BALB/c, BALB/Xid e BALB/Xid transferidos com células B-1. Incisão dorsal foi realizada nos mesmos grupos de animais para comparar o tempo de cicatrização entre os diferentes grupos. A influência de células B-1 na infiltração de neutrófilos e processo de angiogênese foram avaliados pela técnica de imunoistoquímica. Além disso, foi realizada a cinética de inflamação na pata dos camundongos para avaliar o papel de células B-1 na fase inflamatória do reparo tecidual. As mesmas técnicas de incisão dorsal e cinética da inflamação foram realizadas em camundongos Knock-out para IL-10 e Knock-out para IL-10 transferidos com células B-1 para analisar a participação de IL-10 secretada por células B-1 nestes processos. Finalmente, por citometria de fluxo foi avaliada a secreção de fatores de crescimento por células B-1. Resultados: Células B-1 migram para o foco inflamatório do processo de cicatrização, participam deste processo e influenciam a fase inflamatória do reparo tecidual. Além disso, células B- 1 influenciam a infiltração neutrofílica e processo de angiogênese. Ainda, foi mostrado que células B-1 modulam a fase inflamatória do reparo tecidual via IL-10, além de serem células secretoras de FGF, TGF-β e MCP-1. Conclusão: Estes dados comprovam que células B-1 participam da resposta inflamatória e do processo de cicatrização, provavelmente por influenciar na cinética da fase inflamatória via IL-10. / Wound healing is a complex phenomenon whose mechanisms are not fully understood. There are no reports concerning the participation of B lymphocytes in tissue repair. However, Almeida et al (Inter Immunol, 2001) demonstrated that B-1 cells proliferate in stationary culture of adherent peritoneal cells. Further, that B-1 cells migrate to non-specific inflammatory focus and differentiate into a mononuclear phagocyte. B-1 cells differ from conventional B cell by its anatomical location, ontogeny, surface markers expression, production of antibodies and growth properties. B-1 cells are present in the peritoneal and pleural cavities and rare in the spleen and absent in the lymph nodes of adult mice. It has been reported that these cells secret large amounts of IL-10 and this cytokine play a role in the wound healing process. Aim: Investigate the participation of B-1 cells in the wound healing process in mice. Methods: That B-1 cells migrate to the wound was evaluated using immunofluorescence technique. The fluorescence activated cell sorter was used to detect B-1b cells in pleural and peritoneal cavities from BALB/c, BALB/Xid and BALB/Xid adoptively transferred with B-1 cells. The dorsal lesions were made to compare the time of the wound healing process in differs groups. The influence of B-1 cells in the neutrophilic infiltration and the angiogenic process was evaluated by imunohistochemical techniques. Moreover, the kinetics of the inflammation in mice footpads was made to evaluate the role of B-1 cells in the inflammatory phase of tissue repair. The same technique of the dorsal lesion and dorsal lesion footpad were made in IL-10 Knock-out and IL-10 Knock-out adoptively transferred with B-1 cells in order to investigate the participation of IL-10 secreted by B-1 cells in this process. Finally, using fluorescence activated cell sorter secretion of growth factors by B-1 cells was analyzed. Results: B-1 cells migrate to the inflammatory site of the wound healing process. B-1b cells participate in wound healing process and influence the inflammatory phase of this process. Moreover, B-1b cells influence neutrophilic infiltration and the angiogenic process. In addition, B-1 cells modulate the inflammatory phase of tissue repair secreting IL-10, FGF, TGF-β and MCP-1. Conclusion: These data indicate that B-1 cells participate of the inflammatory phase of the wound healing process. Besides, IL-10 secreted by B-1 cells participates of the inflammatory response and confirm that B-1 cells play a role in the wound healing process. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento / Made available in DSpace on 2013-03-04T20:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Indivíduos acometidos por queimaduras graves e/ou extensas ou por grandes feridas, ou seja, que apresentam perda significativa de tecido epitelial, são considerados pacientes gravemente enfermos uma vez que a falta massiva da pele resulta em perdas hídricas e deixa o organismo mais susceptível à infecções. Quando estes pacientes sobrevivem, após tratamento intensivo e prolongado, se deparam com cicatrizes desfigurantes, não funcionais e contraturas graves da pele. No presente trabalho foi realizada uma análise comparativa do processo de cicatrização entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® em pele de camundongo Mus musculus, através de ensaios in vivo. Os animais foram separados em três grupos e posteriormente levados à cirurgia para a retirada de 1cm2 da pele do dorso. No grupo1 (G1), no local da excisão não era colocado matriz de regeneração dérmica, ficando o ferimento exposto para cicatrização por segunda intenção; no grupo 2 (G2), no local da excisão colocava-se, matriz de regeneração dérmica Integra® e no grupo 3 (G3), colocava-se matriz de regeneração dérmica Pelnac®. Eram realizadas biópsias com 3, 6 e 9 dias de pós-operatório, onde o material retirado era processado para emblocamento em parafina e posteriormente cortado e corado com hematoxilina-eosina e tricrômico de Masson . O estudo dos cortes histológicos corados com hematoxilina-eosina tinham como objetivo a análise do processo inflamatório, análise da celularidade e neoformação vascular. Com a coloração tricrômico de Masson pretendia-se fazer uma análise da presença de colágeno e fibrose. O estudo do processo inflamatório revelou uma discreta diferença entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® no sexto dia de pós-operatório, onde, neste momento, a matriz Pelnac® mostrou-se mais efetiva em conter a inflamação. A celularidade mostrou-se praticamente igual em todos os grupos e em todos os dias estudados, com discreto aumento no terceiro dia na matriz Integra®. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo estranho. Isso nos sugere que ambas os substitutos não tiveram comportamento imunológico totalmente inerte, como esperado. A presença de neovasos ocorreu de forma efetiva em todos os grupos, porém não de forma acelerada. Não houve necrose tecidual em nenhum dos grupos estudados. A análise pela coloração tricrômico de Masson foi realizada somente de forma qualitativa devido a presença muito discreta de fibrose em nosso grupo experimental. Não observamos alterações cicatriciais severas, sendo que a mesma ocorreu de maneira uniforme em todos os grupos analisados, sem a presença de cicatrizes hipertróficas ou retrações teciduais. O resultado estético e funcional final foi viável, inclusive com presença de pilificação. Conclusão: A formação de neovasos foi semelhante em todos os grupos estudados, sugerindo uma não interferência das matrizes na neoformação vascular neste modelo experimental. A densidade de células inflamatórias por área apresentou-se um pouco maior na matriz de regeneração dérmica Integra no terceiro dia de pós-operatório, sugerindo que esta matriz possa apresentar um comportamento mais pró-inflamatório. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo-estranho. Este resultado nos mostra que os dois substitutos dérmicos estudados não apresentaram um comportamento totalmente inerte, como é o desejado. Há portanto, necessidade de melhorias em ambos os produtos, neste sentido. Com a matriz de regeneração dérmica Pelnac® houve menos processo inflamatório no sexto dia de pós-operatório. No entanto, a cicatrização da pele nos animais sem matriz de regeneração dérmica e com e com matriz de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® se deu de forma semelhante, onde todas apresentaram uma cicatriz normal, com ausência de fibrose ou cicatrização hipertrófica. Deste modo, as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® não apresentaram interferência no resultado final da cicatrização em relação às feridas sem matriz neste modelo experimental. Para estudos de cicatrizes hipertróficas ou retração de feridas, portanto, há necessidade de um aperfeiçoamento do mesmo / Three animal groups were taken to surgery consisting of removal of 1cm2 skin in the back. Group 1 (G1) animals were not treated with skin substitutes, leaving the exposed wound to heal second intention; Group 2 (G2) animals were treated, at the site of excision, with skin substitute Integra® and Group 3 (G3) animals were treated with skin substitute Pelnac®. Biopses were performed at the 3rd, 6th and 9th days after surgery. The material was then processed for histological procedures and stained with hematoxilin-eosin (HE) and Masson trichrome. HE staning was used to evaluate the linear inflammatory process, cellularity and neovascularization. On the other hand, Masson trichrome was used to analyze the presence of collagen and fibrosis. The study of inflammatory process revealed a slight difference between at the 6th day after surgery, being Pelnac® more effective in containing inflammation. The cellularity was similar in all analyzed groups in all the period studied, with a slight increase on the third day in dermal template Integra®. Both skin substitutes contained giant cells of foreign body. This suggests that both skin substitutes were not totally immunologically inert, as expected. Neovascularization were observed in all groups. Necrosis was not observed in any group. Masson staining reveled very discreet fibrosis in our experimental group. We did not observe cicatricicial changes, that was uniform in all groups, without presence of hypertrophic scars or tissue retraction. The final functional and cosmetic result was acceptable, even the presence of hairiness. Conclusion: The formation of new vessels was similar in all groups studied, suggesting a non interference matrices of neovascularization in this experimental model. The density of on inflammatory cells per area showed a little increase in dermal template Integra 3rd day after surgery, suggesting that this skin substitute display a pro-inflammatory action. Both matrices showed giant cells of foreign body. This result shows that both skin substitutes studied did not have a totally inert behavior, as is desired. Improvements in both products are needed. With Pelnac® there was less inflammatory process in the 6th pós- operative day. However, skin healing was similar in all animal groups including those animals maintained without skin substitutes, with normal scarring, no fibrosis and nor hypertrophic scarring. Thus, the skin substitutes Integra® and Pelnac® did not significantly affected the healing wounds. Improvement in the animal model is need for studies of wound contraction or hypertrophic scars

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T22:40:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321487.pdf: 2356400 bytes, checksum: f29ebf73231d980329cf31f17a60d481 (MD5) Previous issue date: 2013 / A quitosana (QTS), um biopolímero obtido a partir de desacetilação parcial da quitina, tem atraído a atenção da comunidade científica devido a sua combinação única de propriedades tais como atividade antimicrobiana e cicatrizante, capacidade de formar complexos com metais e baixa toxicidade. O seu efeito antibacteriano está associado com a carga positiva dos grupos amínicos, que se podem ligar à superfície das células bacterianas e interferir com as funções normais da membrana, inibindo o seu crescimento. A quitosana possui muitas propriedades que são vantajosas para cura de feridas como a biocompatibilidade, biodegradabilidade, atividade hemostática, aceleração de cura e propriedades anti-infecção. Estes efeitos, no entanto, são ainda maiores quando a quitosana encontra-se na forma de nanopartículas (Nano). O objetivo deste trabalho foi produzir nanopartículas de quitosana incorporadas com zinco para a avaliação da atividade cicatrizante e antimicrobiana. Para a formação das nanopartículas, foi utilizado o método de gelificação iônica, que consiste em adicionar, a temperatura ambiente, uma fase alcalina contendo tripolifosfato (TPP) em uma fase ácida com quitosana. As Nano+Zn foram obtidas através da adição de nitrato de zinco em suspensão com nanopartículas. As partículas foram analisadas através do tamanho, potencial zeta, microscopia eletrônica de transmissão (MET), espectroscopia de absorção atômica em chama (FAAS), espectroscopia de energia dispersiva de raios-X (EDX), espectroscopia na região do infravermelho (FTIR) e análise termogravimétrica (TGA). A atividade antimicrobiana foi avaliada através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus e a cicatrização de feridas foi estudada em camundongos. Através de um planejamento fatorial 23 observou-se que as melhores condições experimentais para a produção de nanopartículas foram ácido acético 0,1 M, pH 4,4 e razão de QTS:TPP de 3:0,8. Com essas condições, foram obtidas partículas com diâmetro médio de 76,2 nm e potencial zeta de 32,6 mV. As melhores condições para promover a adsorção de zinco às nanopartículas foram temperatura ambiente, 8 h de agitação e concentração da solução de Zn+2 de 40 mg gnano-1. O teste de FAAS revelou que as nanopartículas incorporaram 84,4% de Zn+2 ou 33,8 mg gnano-1. Os resultados de EDX, FTIR e TGA comprovaram a formação das nanopartículas e adsorção dos íons metálicos. A atividade antimicrobiana das Nano foi maior em relação a S. aureus, já que, tanto a CIM quanto a CBM foram de 5 mg mL-1 para as Nano e 8,66 mg mL-1 para as Nano+Zn. No 12° dia de tratamento, a reepitelização das feridas dos camundongos tratados com Nano e Nano+Zn não diferiram significativamente entre si, as reduções foram de 90,5 e 96,1%, respectivamente. Este trabalho permite concluir que foi possível produzir nanopartículas de quitosana pelo método de gelificação iônica, com tamanho e potencial zeta desejados, sendo que, o gel composto por essas partículas apresentou importante ação cicatrizante <br>

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:27:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 319296.pdf: 1286560 bytes, checksum: 1ee2cf667d3282b0a669e707ee433cc4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Introdução: O cólon é a região do trato gastrointestinal mais vulnerável à deiscência anastomótica, complicação que apresenta risco potencialmente letal. A hipotermia perioperatória está associada a efeitos prejudiciais ao paciente, aumentando as taxas de complicações operatórias, anestésicas e pós-operatórias. A hipotermia prejudica a função imune e também reduz a pressão parcial de oxigênio tecidual no sítio cirúrgico. Objetivo: Avaliar a hipótese de que a hipotermia perioperatória induzida (32 ± 1º C) em ratos influi na cicatrização das anastomoses de cólon. Método: Ratos Wistar machos (n= 48) foram aleatoriamente divididos em 2 grupos e posteriormente em oito subgrupos com seis animais, que foram submetidos à laparotomia, secção do sigmoide e anastomose imediata. Quatro subgrupos experimentais (grupo I) foram operados sob normotermia (36 ± 1º C) e os outros quatro (grupo II) sob hipotermia (32 ± 1º C), as reoperações dos animais foram realizadas nos dias 3, 7 e 14 de pós-operatório e dois grupos SHAM com 3 dias. Foram avaliados pressão de ruptura da anastomose, teor de hidroxiprolina tecidual, análise histológica de parâmetros inflamatórios e cicatriciais (infiltrado celular inflamatório, edema, fibrina, deposição de colágeno e células apoptóticas). A partir dos tecidos cicatriciais, foram avaliadas as atividades das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) e os níveis dos marcadores não enzimáticos de estresse oxidativo como a glutationa reduzida (GSH) e a peroxidação lipídica (TBARS); e a quantificação relativa da expressão gênica (DNAc) de citocinas: interleucina 1 (IL-1), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 10 (IL-10) e fatores de crescimento: fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e fator de crescimento insulina-like (IGF-1), por reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa (PCR-RT) em tempo real. As médias foram comparadas entre grupos correspondentes de cada tempo em dias da coleta de amostras e da morte indolor assistida (MIA). Resultados: Os grupos hipotérmicos apresentaram pressão de ruptura da anastomose menor nos dias 7 e 14 de pós-operatório, teor de hidroxiprolina reduzido no dia 14, redução do infiltrado inflamatório e de edema no dia 3 e deposição de colágeno inferior no dia 14. Os grupos hipotérmicos apresentaram redução estatisticamente significativa da atividade da enzima SOD no dia 7 de pós-operatório, da CAT nos dias 7 e 14 de pós-operatório e nos níveis de GSH no dia 7 de pós-operatório. O nível de peroxidação lipídica esteve aumentado no grupo hipotérmico no dia 7 de pós-operatório e reduzido no dia 14, em comparação aos grupos normotérmicos. A expressão gênica de citocinas nos animais hipotérmicos foi reduzida em IL-1 no dia 3, IL-6 nos dias 7 e 14 e IL-10 nos dias 7 e 14 e no fator de crescimento IGF-1 no dia 7. Conclusão: A hipotermia perioperatória apresentou efeitos prejudiciais à cicatrização das anastomoses de cólon em ratos. Descritores: Anastomose Cirúrgica. Hipotermia. Cicatrização. Cólon. Hidroxiprolina <br> / Abstract: Introduction: The colon is the region of the gastrointestinal tract more vulnerable to anastomotic dehiscence, a complication that presents potentially lethal risk. Perioperative hypothermia is associated with detrimental effects to the patient, increasing the rates of operative, anesthetic and postoperative complications. Hypothermia impairs immune function and also reduces the partial pressure of oxygen tissue at the surgical site. Objective: We evaluated the hypothesis that induced perioperative hypothermia (32 ± 1 º C) in rats causes adverse effects on healing of colonic anastomosis. Materials and methods: Male Wistar rats (n= 48) were randomly divided into 2 groups and then into eight groups with six animals that underwent laparotomy, sigmoid section and immediate anastomosis. Four experimental subgroups (group I) were operated under normothermia (36 ± 1º C) and four (group II) under hypothermia (32 ± 1º C), the reoperations were performed on days 3, 7 and 14 after the first surgery and two groups SHAM on 3 days. We evaluated anastomotic bursting pressure, tissue hydroxyproline content, histological analysis of inflammatory parameters and healing (inflammatory cell infiltrate, edema, fibrin, collagen deposition and apoptotic cells). From the scar tissue, we evaluated the activities of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) and levels of non-enzymatic markers of oxidative stress such as reduced glutathione (GSH) and lipid peroxidation (TBARS) and quantification relative gene expression (cDNA) of inflammatory cytokines [interleukin 1 (IL-1), interleukin 6 (IL-6) and interleukin 10 (IL-10)] and growth factors [vascular endothelial growth factor (VEGF) and insulin-like growth factor (IGF1)] by polymerase chain reaction reverse transcription (RT-PCR) in real time. Means were compared between groups corresponding to each time days of sampling and underwent to assisted painless death. Results: Both hypothermic groups showed anastomotic burst pressure lower on days 7 and 14 after surgery, reduced hydroxyproline content on day 14, reduction of inflammatory infiltrates and edema at day 3 and less collagen deposition on day 14. The hypothermic groups showed statistically significant reduction in activity of SOD on day 7 postoperatively, the CAT on days 7 and 14 postoperatively and levels of GSH on day 7 postoperatively. The level of lipid peroxidation was increased in the hypothermia group at day 7 postoperatively and decreased on day 14, compared with normothermic groups. Cytokine gene expression in animals hypothermic was reduced by IL-1 on days 3, IL-6 on days 7 and 14 and IL-10 on days 7 and 14 and in the growth factor IGF-1 on day 7. Conclusion: Perioperative hypothermia had detrimental effects on healing of colonic anastomosis in rats.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-06T00:01:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318942.pdf: 3650513 bytes, checksum: 7bafe8f49c8839ac42bec2843d368d31 (MD5) Previous issue date: 2013 / Estudos nos últimos anos tem demonstrado que a terapia com laser de baixa potência (LBP) modula vários processos bioquímicos, principalmente aqueles relacionados ao aumento da respiração mitocondrial e síntese de ATP, com consequente redução de lesões musculares e dérmicas, bem como acelerando o processo de cicatrização. O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a influência da terapia com LBP sobre o processo de cicatrização de feridas dérmicas e também em um modelo de lesão muscular traumática. Além disso, foram avaliados os efeitos da irradiação com LBP sobre atividade da cadeia respiratória em mitocôndrias isoladas de músculo esquelético e em parâmetros relacionados com a respiração celular em células musculares da linhagem L6. Primeiramente nossos resultados demonstram que o LBP Hélio Neônio (HeNe) e Arsêneto de Gálio (AsGa) com comprimentos de onda de 632 e 904 nm, respectivamente, e doses de 1 e 3 J/cm2 induziram um maior fechamento da ferida estimulou a produção de colágeno, aumentando o conteúdo de hidroxiprolina e diminuiu os danos oxidativos a lipídeos e proteínas e as atividades das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) em um modelo de lesão epidérmica, quando comparado com o grupo lesão sem laser. No segundo experimento, demonstramos que o laser AsGa com doses de 3 J/cm2 com início de irradiação 2 horas após a lesão muscular traumática induziu uma diminuição em todos os parâmetros de estresse oxidativo analisados, tais como os conteúdos de oxidação de lipídeos e proteínas, atividades das enzimas antioxidantes glutationa peroxidase (GPX), SOD e CAT e na concentração de nitritos no plasma e no músculo induziu uma diminuição na expressão gênica de IL-6, VEGF e BDNF como também um aumento na IL-10 no tecido muscular traumatizado e irradiado até 5 dias após a lesão. Os resultados relacionados a parâmetros comportamentais de déficit motor (campo aberto) também comprovaram que os animais com lesão muscular e tratados com a dose de 3 J/cm2 tiveram um aumento na distância percorrida e no número de levantamentos comparados com o grupo lesão muscular, demonstrando uma melhora no déficit motor induzido pela lesão muscular. Os resultados com mitocôndrias musculares saudáveis demonstraram que a irradiação com LBP HeNe com doses de 30 e 60 J/cm2 induziu um aumento significativo nas atividades do complexo I e IV 5 minutos após a irradiação. Além disso, o LBP com doses de 10, 30 e 60 J/cm2 também aumentou a atividade do complexo IV 1 hora após a irradiação. Estudos in vitro com células saudáveis L6 demonstraram que a irradiação com LBP HeNe e dose de 10 J/cm2 teve uma contribuição maior da ATP sintase ao consumo de oxigênio basal e uma concentração maior de FCCP foi usada para induzir a capacidade máxima respiratória. Neste contexto, o presente estudo evidencia que o LBP pode induzir um aumento na velocidade de cicatrização de feridas e acelerar o processo inflamatório agudo da lesão muscular traumática, provavelmente devido a sua capacidade de aumentar o estado energético da mitocôndria e diminuir parâmetros de inflamação e de estresse oxidativo. / Abstract: Many studies performed in the past 40 years have proposed that lowpower laser (LPB) therapy reduces dermal and muscle injuries and accelerates the healing process, by modulating several biochemical processes, including those associated with increased mitochondrial respiration and ATP synthesis. The present study aimed to evaluate the influence of LPB therapy on dermal wound healing and on the recovering from muscle injury. In addition, the effects of LPB irradiation on mitochondrial respiratory chain activity and oxygen consumption in skeletal muscle and muscle L6 cell line, were also evaluated. Irradiation with LPB Helium Neon (HeNe) and Galeo arsenide (GaAs) at wavelengths of 632 and 904 nm, and doses of 1 and 3 J/cm2, respectively, accelerated the wound repair, stimulated the collagen production, by increasing the hydroxyproline content and also by decreasing the concentration of oxidized lipids and proteins. The activities of the antioxidants enzymes, including superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were also decreased after the LPB treatment. The second set of experiments demonstrated that the application of the AsGa laser with 3 J/cm2, 2 hours after the traumatic-induced muscle lesion decreased the oxidative stress parameters, including the activity of antioxidant enzymes, oxidative damage markers and nitrite levels in plasma and muscle tissue. In addition, the irradiation decreased the gene expression of IL-6, VEGF e BDNF, and increased the IL-10 content on injured muscle after 5 days of irradiation. Rat spontaneous locomotor activity, measured in the open field arena, was reduced in traumareceiving animals. The LPB irradiation (3 J/cm2) reverted this effect by increasing the distance traveled and the number of withdrawals of the animals. The third group of experiments showed that healthy muscle mitochondria irradiated with LPB HeNe, with doses of 30 and 60 J/cm2, induced a significant increment in the activity of complexes I and IV 5 minutes after the irradiation. Additionally, LPB, with doses of 10, 30 60 J/cm2, also increased complex IV activity one hour after irradiation. In agreement, studies performed in irradiated (LPB HeNe) healthy L6 cells, with dose and 10 J/cm2, provoked increased of ATP synthaselinked oxygen consumption and required higher concentration of FCCP for inducing the maximal mitochondrial respiratory capacity. In this context, the present study demonstrates that LPB induces wound healing process and accelerates the inflammatory phase during acute traumatic muscle injury, probably by increasing the energy state of mitochondria.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-12-13T03:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341436.pdf: 4046203 bytes, checksum: fd2def57c8033759769226c7235109fa (MD5) Previous issue date: 2016 / Lesões de espessura total na pele, como queimaduras extensas e úlceras crônicas, resultam em numerosos problemas fisiológicos, funcionais e psicológicos para os pacientes. Apesar de existirem diversos tratamentos para essas lesões, nenhum deles resulta em uma pele totalmente íntegra e funcional. Por isso, buscou-se com este trabalho um melhor método de reparo cutâneo, associando células-tronco mesenquimais dermais (dCTMs) com matrizes de celulose bacteriana (MCBs). Trabalhos têm mostrado que CTMs melhoram o reparo de tecidos lesados, por meio de sua diferenciação nos fenótipos afetados ou da liberação de fatores parácrinos. As MCBs, por sua vez, são polímeros naturais produzidos por bactérias. Essas membranas são atrativas para o reparo tecidual, por apresentarem características como biocompatibilidade, alta capacidade de retenção de água, e boa permeabilidade. Neste trabalho as MCBs produzidas foram caracterizadas fisicamente em seu estado úmido e liofilizado. As MCBs hidratadas apresentaram uma alta capacidade de retenção de água, fibras nanométricas e porosidade superficial de cerca de 30%. Quando submetidas ao processo de liofilização as MCBs não mantiveram sua conformação tridimensional, apresentando porosidade quase nula, fibras achatadas e baixa taxa de reabsorção de água, não sendo capazes de retornar ao seu estado original. Desse modo, a associação de dCTMs foi analisada apenas com as MCBs hidratadas. As dCTMs foram obtidas a partir de fragmentos de pele, de pacientes saudáveis, que se submeteram a cirurgias de lifting facial, e foram cultivadas sobre as MCBs em condições de cultivo padrão. Os experimentos demonstraram que as dCTMs permaneceram viáveis por 21 dias sobre as MCBs, análises com microscopia de varredura e confocal indicaram que as dCTMs se aderem progressivamente sobre as MCBs, são capazes de se proliferar, não migram para o interior das membranas e mantém sua morfologia típica. Nessas condições as dCTMs também mantiveram suas características imunofenotípicas de CTMs como visto por citometria de fluxo. Esses resultados mostram que as MCBs são biocompatíveis às dCTMs. Considerando estas análises, o potencial terapêutico dessa associação foi avaliado in vivo em lesões cutâneas de camundongos. Foram avaliados os seguintes parâmetros: taxa de fechamento das lesões, infiltrado inflamatório, angiogênese, espessura e homogeneidade da epiderme e comprimento das cicatrizes. Os resultados revelaram que, quando comparado com o grupo controle, o grupo tratado com dCTM+MCB apresentou um aumento significativo na angiogênese e no infiltrado de neutrófilos. Além disso, o tratamento influenciou a espessura do tecido de granulação, levou a formação de uma epiderme mais fina e homogênea, e aparentemente diminuiu as cicatrizes. Em conjunto, os resultados sugerem que a associação esteja acelerando a maturação das lesões cutâneas, e favorecendo o processo de reparo cutâneo.<br> / Abstract : Full-thickness skin injuries, such as extensive burns and chronic ulcers result in numerous physiological functional and psychological problems for the patients. Even though there are various current treatments for these lesions, none of them lead to a fully reconstituted and functional skin. For this reason, this work search for a better method to improve skin repair, associating dermal mesenchymal stem cells (dMSCs) with bacterial cellulose membranes (BCMs). Studies have shown that MSCs improve tissue repair through differentiation in affected phenotypes or by releasing paracrine factors. The BCMs, in turn, are natural polymers produced by bacteria. These membranes are attractive for tissue repair by presenting biocompatibility, high capacity of water retention, and good permeability. In the present work, the produced BCMs were physically characterized in their wet and freeze-dried states. The wet BCMs showed a high capacity for water retention, nanometric fibers and a surface porosity of about 30%. When subjected to the freeze drying process, BCMs did not keep their three-dimensional conformation, presented almost no porosity, flattened fibers and low water absorption rate, not being able to return to its original state. Thus, dMSCs association was analyzed only with wet BCMs. The dMSCs were obtained from fragments of skin of healthy patients who had undergone facelift surgery. The cells were then cultured on BCMs in standard culture conditions. The experiments showed that dMSCs remained viable for 21 days on BCMs. Scanning electron and confocal microscope analyses revealed that dMSCs progressively adhered on BCMs, were able to proliferate, do not migrate to the interior of the matrices and maintained their typical morphology. In this condition, cells maintained the MSCs immunophenotypic characteristics as assessed by flow cytometry. These results show that the MCBs are biocompatible with the dMSCs. Therefore, the therapeutic potential of the dMSCs associated with BCMs was evaluated in vivo, in mice cutaneous lesions. The following parameters were evaluated: closing rate of lesions, inflammatory infiltration, neovascularization, thickness and homogeneity of the epidermis and length of scars. The results revealed that, when compared to the control group, the treated group (MSC+BCM) showed a significant increase in neovascularization and neutrophil infiltration. Besides, the treatment also influenced the thickness of granulation tissue, and allowed the formation of a thin and uniform epidermis. The lenght of scras int he treated gruoup were relatively smaller. Together, the results suggest that the MSC+BCM treatment is accelerating the maturation of skin lesions, and promoting the skin repair process.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-21T10:57:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 235291.pdf: 2046529 bytes, checksum: 162372f5bf35ff93e02a37a6c6cfa796 (MD5) / Introdução: A limpeza de feridas é um assunto controverso na literatura. A maioria dos autores concorda que o polivinil pirrolidona iodo (PVP-I) reduz a infecção das feridas e também causa retardo na cicatrização. Não se conseguiu levantar estudo histológico experimental comparativo entre a clorexidina, o PVP-I e a solução salina isotônica que mostrasse as reações teciduais que o seu uso ocasiona. Objetivo: Avaliar a cicatrização após a utilização de PVP-I, clorexidina ou solução salina isotônica na limpeza de feridas infectadas, no 7° dia pós-operatório, em ratos Wistar. Métodos: Utilizou-se 32 ratos distribuídos em 4 grupos. Todos os animais tiveram as feridas operatórias produzidas em sua região dorsal, infectadas com um inóculo bacteriano padrão, e suturadas. Grupo controle (A): feridas operatórias suturadas sem a limpeza com qualquer substância. Grupo solução salina (B): feridas operatórias lavadas com solução salina. Grupo clorexidina (C): feridas operatórias lavadas com clorexidina. Grupo PVP-I (D): feridas operatórias lavadas com PVP-I. Após 7 dias foi realizada a avaliação histopatológica da pele. Resultados: O grupo C apresentou um menor número de complicações macroscópicas e de abscessos no pós-operatório. O grupo D apresentou maior epitelização das feridas. Em todos os cortes histológicos observou-se a presença de edema, proliferação e congestão vascular. Os grupos A e D mostraram a presença de um infiltrado neutrofílico discreto, macrofágico e linfocítico moderados. O grupo B, um infiltrado neutrofílico, macrofágico e linfocítico severos. O grupo C, um infiltrado de neutrófilos, macrófagos e linfócitos em moderada quantidade. Conclusão: O grupo C apresentou menos complicações macroscópicas e abscessos, com melhor proteção contra infecção. O grupo D foi o que apresentou maior epitelização, e o infiltrado inflamatório semelhante com o grupo que não recebeu nenhum tratamento, interferindo menos no processo inflamatório.

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:06Z : No. of bitstreams: 1 000855344.pdf: 2800080 bytes, checksum: 79f362b62618513eb3e196fe52ffff6b (MD5) / A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente nas quais existe dificuldade da aplicação do fechamento primário, ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com a presença de um tecido de granulação exuberante. O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Para isso, foram utilizados 42 coelhos divididos em quatro grupos de tratamento, grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas dos enxertos. Na avaliação macroscópica foi possível notar que os pacientes dos grupos onde a membrana amniótica foi utilizada com o intuito de estimular a reepitelização (GM e GML) apresentaram acentuada reação inflamatória, falha de integração do enxerto e consequente necrose do mesmo. Já os pacientes do grupo GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto nos pacientes do grupo GL. O oposto foi observado nos pacientes dos grupos GM e GML, onde aparentemente a presença da membrana amniótica induziu resposta inflamatória bastante consistente na região adjacente à membrana e ao enxerto, resultando em rejeição da membrana. Por último, a formação de colágeno não se correlaciona com outros fatores como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Desta forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser... / Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for the graft survival it is necessary that the healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential stimulating healing in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination was possible to note that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. In LG patients apparently had the best aspect of the graft in the last valuation date. On the microscopic examination, there was intense integration of the graft to the dermis, high reepithelialization level and scarce inflammatory cells in the graft site of LG group patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where apparently the presence of amniotic membrane seems to have induced very consistent inflammatory response in the region adjacent to the membrane and the graft, evincing that there was a rejection of the membrane. Finally, the collagen formation does not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, the canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides to avoid graft nutrition