Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-10-09T11:45:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9861287 bytes, checksum: d1920707baa642d6539a70010fd3dadd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T11:45:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9861287 bytes, checksum: d1920707baa642d6539a70010fd3dadd (MD5) Previous issue date: 1997-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Três meios de cultivo foram testados com o objetivo de avaliar o mais indicado para o desenvolvimento e crescimento das variedades Baraka, Bintje e Contenda. Utilizaram-se o meio MS suplementado com sacarose 3% e vitaminas, o meio MS com sacarose 3%, vitaminas e ácido giberélico 1,4 umol/ L e o meio MS modificado. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com seis repetições e cinco plantas por parcela. Plãntulas no meio MS + GAs apresentaram a maior média de número de folhas definitivas e também maior média de comprimento de parte aérea para todas as variedades. Para determinar a concentração ideal de picloram à indução de calejamento, um experimento foi realizado, testando-se as seguintes concentrações: 0,0; 0,0165; 0,165; e 1,65 pmol/L por 32 dias. O melhor resultado foi obtido com 1,65 pmol/ L. Calos foram induzidos, usando-se folha e caule como explantes das variedades comerciais Baraka, Bintje, Contenda, Baronesa e Achat em meio MS suplementado tanto com picloram 1,65 “mol/L quanto com 2,4-D 11,5 umol/L. Após 70 e 90 dias de calejamento, os DNAs das 40 amostras de calos foram analisados num estudo comparativo entre as duas fontes de explantes das cinco variedades e de ambos os reguladores de crescimento. Para isso, 20 “primers” de sequência arbitrária foram testados. Para a variedade Baraka, caule como explante, picloram e 90 dias de calejamento foram os tratamentos que induziram a maior variação somaclonal. Para Bintje, os tratamentos foram folha, picloram e 70 dias. Dos 20 “primers” testados, 14 apresentaram polimorfismo para a variedade Contenda quando submetida ao tratamento que utilizou caule como explante, picloram e 70 dias de calejamento. Dentre os genótipos analisados, a variedade Baronesa apresentou o maior número de fragmentos polimórficos para todos os tratamentos. A variedade Achat mostrou-se mais suscetível a variação somaclonal quando submetida aos tratamentos que utilizaram 2,4-D, 90 dias de calejamento e tanto caule e folha como explante. O maior tempo de cultivo não teve grande influência na variação somaclonal da maioria das variedades, exceto “Baraka” e “Achat'. O fator genótipo foi o mais importante, pois cada variedade teve desempenho distinto do das outras, no que concerne à taxa de variação somaclonal. / No sumario consta o abstract, mas a pagina não esta na tese.

LIMA, Ticiana de Brito. Cultivo da alga marinha vermelha Solieria filiformis (Kützing) P.W. Gabrielson: textura de géis aquosos e lácteos. 2012. 71 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-13T13:40:06Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_tblima.pdf: 3568499 bytes, checksum: d48f3a061d05e6c3a9b0df95c1bf6115 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-14T22:56:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_tblima.pdf: 3568499 bytes, checksum: d48f3a061d05e6c3a9b0df95c1bf6115 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T22:56:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_tblima.pdf: 3568499 bytes, checksum: d48f3a061d05e6c3a9b0df95c1bf6115 (MD5) Previous issue date: 2012 / The red seaweed Solieria filiformis, abundant in Ceará, biossintetiza, among other polysaccharides, phycoloide called carrageenan of great commercial importance due to its properties thickeners, stabilizers and gelling agents. In Brazil, exotic species of marine algae are being grown on a commercial scale in order to meet the demand of industrial phycoloide. The aim of this study was to analyze the texture of aqueous gels made with milk and carrageenan extracted from seaweed S. filiformis, cultivated in Ceará through sporulation natural technique, in order to establish a comparison between these gels and those prepared with commercial carrageenans (iota and kappa carrageenan). The algae were grown through sporulation natural, where monthly PVC structures (25 mm) in size 25 x 44 cm, each containing a single nylon cord (10 mm) of 23 m length were kept at depths of 1 and 2 m over a period of nine months. For extraction of carrageenan were collected at both depths seaweed samples S. filiformis backstage with higher and lower biomass, some for the rainy season (January and April) and dry (October and November). Initially, the algae were dried, crushed in electric grinder and subjected to aqueous extraction (1.5% m / v), stirring every 20 minutes in a water bath at 90 °C for 4 h. The homogenates were filtered through nylon cloth, the waste discarded. The filtrates were subjected to filtration on a vacuum funnel sintered plate, and carrageenans obtained were frozen, lyophilized and weighed. The highest yields were obtained from carrageenan seaweed collected from the scenes that have accumulated during the dry spores (35.6% - November 2M to 45.3% - October 1M), while the algae that accumulated during the rainy season had the lowest incomes (29 6% - April 1M to 33.8% - April 2M). In contrast, levels of total sugars ranged between 37.6 and 50.5% and the content of carrageenan sulfate ranged from 21.6 to 33.3% according to the levels already checked to carrageenans of the iota type. The texture of aqueous gels in the presence of CaCl2 and 0.1% milk prepared with carrageenan S. filiformis and commercial concentrations of 0.5 and 1.5%, were analyzed for firmness, adhesiveness, cohesiveness, springiness, gumminess and chewiness. All samples with carrageenan derived from S. filiformis backstage obtained values of firmness, gumminess and chewiness than those found for ι-carrageenan commercial. Backstage November had the highest values in the parameter of firmness for aqueous gels and compared to ι-carrageenan commercial dairy. Adhesiveness, elasticity and cohesiveness showed values close to those found for ι-carrageenan commercial. The results for firmness and chewiness of κ-carrageenan were superior when compared to commercial car ι-carrageenan and S. filiformis. The gels formulated with milk obtained results strongly higher than those formulated with a solution of calcium chloride 0.1% due to interactions between the proteins and the milk carrageenan. With the data obtained it can be concluded that the use of carrageenan S. filiformis derived by sporulation natural cultivation is capable of forming gels when compared to stronger ι-carrageenan commercial could generate savings through the use of lower concentrations of the carrageenan commercial, to obtain the desired firmness of a product. / A alga marinha vermelha Solieria filiformis, abundante no litoral cearense, biossintetiza, dentre outros polissacarídeos, um ficocolóide denominado carragenana de grande importância comercial devido às suas propriedades espessantes, estabilizantes e gelificantes. No Brasil, espécies exóticas de algas marinhas vêm sendo cultivadas em escala comercial com o objetivo de suprir a demanda industrial desse ficocolóide. O objetivo desse trabalho foi analisar a textura de géis aquosos e lácteos elaborados com ι-carragenana extraída da alga S. filiformis, cultivada no litoral cearense através da técnica de esporulação natural, com a finalidade de estabelecer um comparativo entre esses géis e aqueles elaborados com carragenanas comerciais (ι e κ carragenanas). As algas foram cultivadas através de esporulação natural, onde mensalmente estruturas de PVC (25 mm) de tamanho 25 x 44 cm, contendo cada uma única corda de nylon (10 mm) de 23 m de comprimento foram mantidas em profundidades de 1 e 2 m durante um período de nove meses. Para extração da ι-carragenana foram coletadas em ambas profundidades amostras da alga S. filiformis dos bastidores que apresentaram maior e menor biomassa, determinadas para a estação chuvosa (Janeiro- 26,2 Kg e Abril- 46,5 Kg) e seca (Outubro- 53,0 Kg e Novembro- 31,7 Kg). Inicialmente, as algas foram secas, trituradas em moinho elétrico e submetidas à extração aquosa (1,5% m⁄v), sob agitação a cada 20 minutos, em banho-maria a 90 ºC durante 4 h. Os homogenatos foram filtrados em tecido de nylon, os resíduos descartados. Os filtrados foram submetidos a uma filtração à vácuo em funil de placa sinterizada, e as carragenanas obtidas foram congeladas, liofilizadas e pesadas. Os maiores rendimentos de ι-carragenana obtidos foram das algas coletadas dos bastidores que acumularam esporos no período seco (35,6%- Novembro 2M a 45,3%- Outubro 1M), enquanto as algas que acumularam no período chuvoso apresentaram os menores rendimentos (29,6%- Abril 1M a 33,8%- Abril 2M). Já os teores de açúcares totais variaram entre 37,6 e 50,5% e os teores de sulfato das carragenanas variaram de 21,6 a 33,3%, de acordo com os teores já verificados para carragenanas do tipo ι. A textura dos géis aquosos na presença de CaCl2 0,1% e lácteos preparados com as ι- caragenanas de S. filiformis e caragenanas comerciais nas concentrações de 0,5 e 1,5%, foram analisados quanto a firmeza, adesividade, coesividade, elasticidade, gomosidade e mastigabilidade. Todas as amostras com ι-carragenanas de S. filiformis dos bastidores obtiveram valores de firmeza, gomosidade e mastigabilidade superiores aos encontrados para ι-carragenana comercial. Os bastidores de novembro das amostras com ι-carragenanas de S. filiformis obtiveram os maiores valores no parâmetro de firmeza para os géis aquosos e lácteos quando comparados aos géis comerciais. Adesividade, elasticidade e coesividade mostraram valores próximos aos encontrados para ι-carragenana comercial. Os resultados obtidos para firmeza e mastigabilidade da κ-carragenana foram superiores quando comparados a ι-carragenana de S. filiformis e ι-carragenana comercial. Os géis formulados com leite reconstituído obtiveram resultados de firmeza superiores aos formulados com solução de cloreto de cálcio 0,1%, devido às interações entre as proteínas do leite e a ι-carragenana. Com os dados obtidos pode-se concluir que a utilização da ι-carragenana de S. filiformis oriunda de cultivo por esporulação natural é capaz de formar géis mais firmes quando comparada a ι- carragenana comercial, podendo gerar economia através da utilização de concentrações de carragenana inferiores a comercial, para se obter a firmeza desejada para um produto.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-04-27T08:33:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-27T08:33:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3736622 bytes, checksum: 39fd593857e319e4d9577fd3428a7f25 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A aquisição de competência embriogênica por células somáticas é um processo intrigante e necessita da junção de dados genético-moleculares e citológicos para melhor compreensão dos mecanismos e mudanças celulares envolvidas. À vista disso, os objetivos desse trabalho foram isolar e caracterizar o padrão de expressão dos genes SERK e BBM por hibridização in situ durante o processo de embriogênese somática em Passiflora cincinnata, avaliar a responsividade morfogênica in vitro de P. setacea e P. cincinnata submetidas a condições de indução de embriogênese somática, bem como, acompanhar a mobilização de reservas e a expressão dos genes supracitados durante a embriogênese somática. Para tal, a partir de calos embriogênicos de P. cincinnata, com 20 dias em meio de indução (MI), extraiu-se o RNA total e obteve-se o cDNA, o qual serviu como molde para amplificação da sequência codante utilizando-se primers degenerados para SERK e BBM. A responsividade de embriões zigóticos maduros de P. setacea e P. cincinnata foi avaliada mediante o cultivo em meio de indução alternativo constituído por sais MS suplementado com 31,06 μM de Picloram + 2,22 μM de BA + 2,27 μM de TDZ (MIP) + 500 mg L -1 de Extrato de Malte (EM) + 13,77 μM de Espermidina (Spd). Após 30 dias as culturas foram transferidas ao meio de maturação (MM) composto de meio MS acrescido de 1,0% de carvão ativado e ausência de reguladores de crescimento. Amostras com 0, 10, 20 e 30 dias foram coletadas para microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura, testes histoquímicos e hibridização in situ, todas seguindo protocolos específicos. Para visualização da expressão dos genes SERK e BBM foi gerada uma sonda de RNA a partir de um clone sequenciado de P. cincinnata. Para P. setacea utilizou-se uma sonda heteróloga sense e antisense de P. cincinnata. O relacionamento filogenético das sequências isoladas de P. cincinnata comparadas às de outras espécies apontou que as funções das proteínas podem ser conservadas na espécie. Em SERK, o Pc contig1 agrupou-se com membros de SERK1 e SERK2, enquanto o Pc contig2 agrupou-se com membros de SERK3/BAK1. Por sua vez, o Pc contig1 de BBM, agrupou-se com membros de BBM1 e BBM2. A expressão do gene SERK foi constatada em embriões zigóticos e gradualmente diminuída até os 20 dias em MI. Aos 30 dias em MI, embriões somáticos globulares foram intensamente marcados, assim como em embriões com 5 e 40 dias em MM. Transcritos do BBM foram observados em embriões zigóticos, no entanto, a expressão foi cessada no decorrer do desenvolvimento dos embriões somáticos. A expressão foi retomada em embriões somáticos cotiledonares após 40 dias em MM, assemelhando-se ao observado no embrião zigótico. Observou-se que em P. setacea, durante o processo embriogênico, houve formação de protuberâncias que deram origem a zonas pró-embriogênicas, as quais se desenvolveram em embriões somáticos. Já em P. cincinnata houve proliferação das células do meristema fundamental e formação de meristemoides, caracterizando regiões organogênicas. Quando transferidos ao meio de maturação não houve regeneração de plantas a partir de embriões somáticos em P. setacea. Em P. cincinnata houve intumescimento das regiões calejadas e, em alguns casos, formação de primórdios foliares. Quanto à expressão gênica, em P. setacea foi constatada expressão de BBM e SERK em todas as fases analisadas, especialmente em protuberâncias e embriões somáticos formados. P. cincinnata, por sua vez, também apresentou transcritos dos genes BBM e SERK em todas as fases analisadas, sendo intensificado o sinal de hibridização na periferia dos explantes e regiões meristemáticas após 20 dias em MI. P. setacea apresentou corpos proteicos com decréscimo gradativo até os 30 dias em meio de indução. Houve presença de carboidratos e amido no explante e seu decréscimo após 10 dias, e verificou-se a síntese de novo de amido aos 30 dias de indução, quando há formação de embriões somáticos. Não foi verificada a presença de corpos lipídicos durante o processo embriogênico. Já em P. cincinnata, constatou-se corpos proteicos e amido de forma moderada em todas as etapas de desenvolvimento e a presença de carboidratos totais e corpos lipídicos foi averiguada nas fases iniciais de indução. Após 20 dias, houve mobilização dessas substâncias de reserva concomitantemente com a formação e desenvolvimento de meristemoides. Deste modo, sugere-se que a expressão desses genes está associada aos processos de aquisição de competência embriogênica e podem servir como marcadores moleculares desse processo. Os resultados do isolamento e expressão dos genes SERK e BBM em P. cincinnata são inéditos e contribuem para o melhor entendimento dos processos que envolvem a embriogênese somática na espécie. Nosso trabalho apresenta dados inéditos da indução de embriões somáticos em P. setacea e como as espécies estudadas apresentam respostas morfogênicas divergentes quando submetidas ao mesmo meio de indução. E ainda, relatamos à expressão dos genes BBM e SERK e a mobilização de compostos de reserva no decorrer dos eventos morfogênicos in vitro em P. setacea e P. cincinnata. / The acquisition of embryogenic competence in somatic cells is intriguing process and requires both molecular-genetic and cytological knowledge to better understand the mechanisms and cellular changes involved. Based on this, the aim of this study was to isolate and characterize the expression of SERK and BBM genes in somatic embryos of Passiflora cincinnata, as well as to evaluate the morphogenic in vitro response of Passiflora setacea and P. cincinnata somatic embryogenesis inducted and monitoring the reserve mobilization and expression of the these genes during embryogenesis. For this, RNA was extracted and cDNA was obtained from embryogenic calli of P. cincinnata after 20 days in induction medium (IM), which was used as template for the coding sequence amplification with degenerate primers of SERK and BBM. Mature zygotic embryos of P. setacea and P. cincinnata were inoculated on MS medium supplemented with 31.06 μM of picloram + 2.22 μM of benzyladenine + 2.27 μM of thidizuron + 500mg L -1 of malt extract + 13.77 μM of spermidine. After 30 days, the cultures were transferred to the maturation medium (MM), composed of MS medium supplemented with 1 % of activated charcoal without growth regulators. Samples with 0, 10, 20 and 30 days were collected for light microscopy, scanning electron microscopy, histochemical analyzes and in situ hybridization, following specific protocols. A RNA probe from P. cincinnata cDNA was generated to figure out the expression of SERK and BBM genes, whereas to P. setacea a heterologous sense and antisense probe of P. cincinnata was used. The phylogenetic relationship of P. cincinnata isolated sequences compared with other species suggests that the functions of the proteins are preserved. In SERK, the Pc contig1 grouped up with SERK1 and SERK2 members, while the Pc contig2 grouped with SERK3/BAK1 members. On the other hand, the BBM Pc contig1 was grouped with BBM1 and BBM2 members. The expression of SERK gene was found in zygotic embryos and gradually decreased until 20 days in the IM. After 30 days in the IM, globular somatic embryos were intensely marked with the hybridization signal, as well as embryos with 5 and 40 days in the MM. BBM transcripts were observed in zygotic embryos, but the expression was stopped during the somatic embryos development. The expression was resumed in somatic globular embryos after 40 days in the MM, similar to that observed in zygotic embryos. In the second chapter, in P. setacea embryogenesis process, it was observed the formation of lumps that originate pro-embryogenic zones, which developed into somatic embryos. In P. cincinnata a proliferation of the ground meristem cells and meristemoids formation occurred, emphasizing organogenic regions. When transferred to MM, there was no plant regeneration from somatic embryos of P. setacea. In P. cincinnata, swelling of callus regions and, in some cases, formation of leaf primordia was observed. Regarding the gene expression, in P. setacea there was BBM and SERK expression in all stages, especially in lumps and somatic embryos. Also P. cincinnata showed transcripts of BBM and SERK genes in all stages, with intensification of the hybridization signal at the explants edges and meristematic regions after 20 days in the IM. Protein bodies were found in P. setacea, decreasing gradually until 30 days in the IM. Carbohydrate and starch levels decreased after 10 days, but there was de novo synthesis of starch at 30 days of induction, coupled with the somatic embryos formation. No lipid bodies during the embryogenic process were verified. In P. cincinnata protein bodies and starch were moderately present in all development stages whereas carbohydrates and lipid bodies were present only at the early stages of induction. After 20 days, these reserve substances were mobilized, along with the meristemoids formation and development. Therefore, it is suggested that the expression of these genes is associated with embryogenic competence acquisition process and can be a molecular marker of this process. These results of isolation and expression of SERK and BBM genes in P. cincinnata are original and contribute to a better understanding of the processes involving somatic embryogenesis in this species. This work brings a new approach for somatic embryogenesis induction in P. setacea and highlights how these two species show different responses when submitted to the IM. In addition, the expression of the genes BBM and SERK as well as the mobilization of reserve compounds during in vitro morphogenic events in P. setacea and P. cincinnata were related.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-06-13T20:54:03Z : No. of bitstreams: 1 lopes_jr_me_sjrp.pdf: 325435 bytes, checksum: 90136719a8eb0c15c4ae524dada45238 (MD5) / Câncer de mama representa a mais comum das neoplasias no sexo feminino, respondendo por 22% dos novos casos de câncer a cada ano. As neoplasias mamárias são ainda mais freqüentes na espécie canina, representando aproximadamente 52% de todas as neoplasias nas cadelas. A identificação de agentes terapêuticos que possam ser utilizados no tratamento alternativo para este tipo tumoral têm se revelado extremamente útil. A melatonina, um hormônio natural, parece exercer efeito oncostático em diferentes tipos de neoplasias. Considera-se como provável mecanismo de ação, sua interação com receptores estrogênicos e com os receptores MT1 e MT2 das células epiteliais, inibindo a proliferação das células neoplásicas. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial valor terapêutico da melatonina em linhagens de câncer de mama e em tumores mamários caninos estrógeno-positivo e estrógeno-negativo, além de relacionar sua ação com a expressão dos receptores MT1 e MT2. A identificação de tumores mamários estrógeno-positivo e negativo foi realizada por meio de imuno-histoquímica e a expressão dos genes MT1 e MT2 nas amostras foi analisada por PCR em tempo real. As células cultivadas, provenientes dos tumores e das linhagens MCF-7 e MDA-MB-231 foram tratadas com melatonina e a viabilidade celular foi analisada pelo ensaio MTT. Observou-se 40% de redução na viabilidade celular nos tumores RE+ e RE- quando tratados, respectivamente, com 1mM e 10mM de melatonina (p<0,05). Além disso, os tumores RE+ apresentaram alta expressão dos receptores de melatonina MT1 e MT2 quando comparados aos tumores RE-. Com relação às linhagens, a linhagem MCF-7 (RE+) reduziu em 63% a viabilidade celular quando tratada com 10mM de melatonina (p<0,05) e para a linhagem MDA-MB-23 (RE-), esta mesma... / Breast cancer is the most common cancer in women, accounting for 22% of new cancer cases each year. The mammary neoplasias are also common in canine species, representing about 52% of all cancers in female dogs. The identification of therapeutic agents that can be used as an alternative treatment for this tumor type has proven to be extremely useful. Melatonin, a natural hormone, can exercise oncostatic effects in several types of neoplasias. It is considered as a probable mechanism of action, their interaction with estrogenic receptors and with MT1 and MT2 receptors of the epithelial cells by inhibiting the proliferation of neoplastic cells. In this context, the objective of this study was to evaluate the potential therapeutic value of melatonin in breast cancer cell lines and canine mammary tumors estrogen-positive and estrogen-negative, also establishing relationship of its action to the MT1 and MT2 receptor. Identification of canine mammary tumors ER+ and negative was performed by immunohistochemistry and gene expression MT1 and MT2 in the samples was analyzed by real-time PCR. Cells cultured from the tumors and cell lines MCF-7 and MDA-MB-231 were treated with melatonin and cell viability was analyzed by MTT assay. We observed 40% reduction in cell viability in ER+ tumors and ER- when treated, respectively, with 1mM and 10mM melatonin (p <0.05). Furthermore, the ER+ tumors showed high expression of melatonin receptors MT1 and MT2 when compared to ER- tumors. Regarding cell lines, the cell line MCF-7 (ER+) showed 63% reduction in cell viability when treated with 10mM of melatonin (p <0.05) for the cell line MDA-MB-23 (ER-), this same concentration reduced 50% cell viability (p <0.05). The results suggest that melatonin decreases the viability of neoplastic cells, being more effective for RE-positive tumors... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-21Bitstream added on 2014-06-13T19:46:24Z : No. of bitstreams: 1 palu_eg_dr_ilha.pdf: 415663 bytes, checksum: c997c1abd6761572ffe769e2c15fcb03 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A figueira (Ficus carica L.), pertencente à família Moracea, é uma frutífera de grande expansão mundial, constitui-se numa das mais importantes frutíferas cultivadas, elevando o Brasil à condição de décimo produtor e exportador de figos do mundo. Porém, a ficicultura tem alguns problemas fitossanitários como insetos pragas e doenças como nematóides e viroses, patógenos esses que se encontram presentes em grande parte dos plantios comerciais e, juntamente com a propagação exclusivamente vegetativa, pelo método da estaquia, contribuem para disseminação dos mesmos, reduzindo a qualidade final das mudas, as quais contribuem de modo marcante para a redução da produção por área, bem como da área plantada. A utilização de mudas de alta qualidade é um dos requisitos mais importantes para implantação de pomares com maior longevidade e elevada produtividade. Assim, a propagação in vitro pode auxiliar na produção eficiente de mudas de figueira com alta qualidade fitossanitária e genética. Entretanto, para a cultura da figueira, são escassos os trabalhos realizados in vitro, conhecendo-se pouco sobre o comportamento da planta, e principalmente como é realizado o estabelecimento desta, de forma que a maioria dos trabalhos já realizados por outros autores utilizam plantas já estabelecidas in vitro, tornandose necessários outros ensaios, buscando a otimização de um protocolo para micropropagação da figueira. Objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo de propagação in vitro por meio de gemas apicais, envolvendo as etapas de desinfestação, multiplicação e enraizamento in vitro da figueira (Ficus carica L.) / The fig (Ficus carica L.) belonging to the Moraceae family, is a fruit of great global expansion, it constitutes one of the most important fruit crops, bringing Brazil to the position of the tenth largest producer and exporter of figs in the world. However, ficicultura presents some problems as plant diseases and insect pests as nematodes and viruses, these pathogens that are present in most commercial crops, and together with exclusively vegetative propagation by the method of cutting, contributing to the spread of these, reducing the final quality of seedlings, which contribute markedly to the reduction of production per hectare and area planted. The use of high quality seedlings is one of the most important requirements for implementation of orchards with greater longevity and high productivity. Thus, in vitro propagation can assist in efficient production of fig seedlings with high quality and plant genetics. However, for the cultivation of the fig tree, there are few studies performed in vitro, knowing little about the plant behavior, and especially how this is done setting so that most of the work already done by other authors using already established plants in vitro, making it required further testing, trying to optimize a protocol for micropropagation of fig. This study aimed to establish a protocol for in vitro propagation through apical buds, involving the steps of disinfection, in vitro multiplication and rooting of fig (Ficus carica L.)

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Letras, Departamento de Linguística, Português e Línguas Clássicas, Programa de Pós-Graduação em Linguística, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-12-04T16:01:14Z No. of bitstreams: 1 2017_RobertaRochaRibeiro.pdf: 5557871 bytes, checksum: b533404a75cd196e7ed57ec175194046 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-02-07T20:38:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RobertaRochaRibeiro.pdf: 5557871 bytes, checksum: b533404a75cd196e7ed57ec175194046 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-07T20:38:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RobertaRochaRibeiro.pdf: 5557871 bytes, checksum: b533404a75cd196e7ed57ec175194046 (MD5) Previous issue date: 2018-01-07 / Reestruturação e Expansão das Universidades Federais ( Reuni ) - CAPES / A presente tese tem como objetivo analisar a transitividade em discursos sobre o parto de mulheres quilombolas/kalunga da comunidade Vão de Almas-GO. O escopo teórico central deste trabalho é a Linguística Centrada no Uso (GIVÓN, 2001; TRAUGOTT, 1997; HEINE,1991; FURTADO DA CUNHA, BISPO e SILVA, 2013), considerando os princípios da língua em uso, da interação social e dos espectros gramaticais e cognitivistas. A transitividade é analisada à luz desses princípios e a partir dos parâmetros sintático-semânticos propostos por Hopper & Thompson (1980) e da semântica dos verbos de Givón (2001). Nessa abordagem, a transitividade é vista como fenômeno organizacional da oração, ultrapassando seus limites e alcançando o discurso. Além dessa concepção, em consonância com a Linguística Centrada no Uso, analisamos o fenômeno também considerando voz verbal, valência, relações gramaticais, iconicidade diagramática, papéis semânticos, papéis pragmáticos, metáfora e metonímia. No entanto, nosso objetivo é também analisar a transitividade no âmbito do enunciado discursivo, do ecossistema das línguas e dos letramentos, construindo, assim, diálogos teóricos e analíticos inovadores. Para tanto, articulamos as concepções de estruturas ideológicas do discurso (VAN DIJK, 2000, 2010), de letramentos como práticas sociais (STREET, 2014) e de ecossistema das línguas (COUTO, 2007) com a Linguística Centrada no Uso. Analiticamente, tais interfaces propiciaram o desenvolvimento do Protocolo-Mãe, que é constituído de camadas analíticas as quais propiciam o estudo dos eventos transitivos, no âmbito dos enunciados discursivos, desde a concepção de gradiência da transitividade de Hopper & Thompson (1980) e suas camadas mais gramaticais supracitadas, passando pelo discurso, ecossistema da língua e letramentos. Para que tais análises e interfaces teóricas ocorressem, nosso processo metodológico de geração de dados foi calcado na postura ecoetnográfica, pesquisa qualitativa e movimentos de pesquisa-ação, tendo como instrumentos entrevistas semiestruturadas e questionário estruturado. Por fim, cumpre destacar que esta tese, em seu processo de produção, contribuiu socialmente com a comunidade kalunga Vão de Almas-GO por meio das oficinas de Letramentos na escola da comunidade, em parceria com as/os docentes kalunga. / The present thesis aims to analyze the transitivity in discourses about the parturition of quilombolas/kalunga women from the Vão de Almas-GO community. The central theoretical scope of this work is the Usage-Based Linguistics (GIVON, 2001; TRAUGOTT, 1997; HEINE, 1991; FURTADO DA CUNHA, BISPO and SILVA, 2013), considering the principles of language in use, social interaction and grammatical and cognitive scope. Transitivity is analyzed based on these principles and from the syntactic-semantic parameters proposed by Hopper & Thompson (1980) and the semantics of verbs by Givón (2001). In this approach, transitivity is seen as an organizational phenomenon of the sentence, surpassing its limits and reaching the discourse. In addition to this conception, in accordance with Usage-Based Linguistics, we analyze the phenomenon also considering voice, valence, grammatical relations, diagrammatic iconicity, semantic roles, pragmatic roles, metaphor and metonymy. However, our goal is also to analyze transitivity within the discursive utterance, the language ecosystem and literacy, therefore building innovative theoretical and analytical dialogues. To that end, we articulate the conceptions of ideological discourse structures (VAN DIJK, 2000, 2010), of literacies such as social practices (STREET, 2014) and language ecosystem (COUTO, 2007) with Usage-Based Linguistics. Analytically, those interfaces propitiated the development of the Mother-Protocol, which is composed of analytical layers which allow the study of transitive events within the framework of discursive utterances, from Hopper and Thompson's (1980) perspective of gradience of transitivity and its more grammatical layers, through the discourse, language ecosystem and literacies. For such theoretical analyzes and interfaces to occur, our methodological process of data generation is based on the eco-ethnographic posture, qualitative research and action-research, with semi-structured interviews and a structured questionnaire. Finally, it should be pointed out that this thesis, in its production process, contributed socially with the Kalunga community of Vão de Almas-GO through the Literacy workshops in the community school, in partnership with the kalunga teachers.

Orientador: Flávia Cristina Rodrigues Lisoni / Coorientador: Sonia Maria Oliani / Banca: Cristiane Damas Gil / Banca: Edson Guilherme Vieira / Resumo: INTRODUÇÃO: O câncer de colo de útero, também chamado de câncer cervical, é o segundo tipo de câncer mais frequente em mulheres mundialmente, sendo a quarta causa de morte por câncer em países em desenvolvimento. A carcinogênese de colo de útero está relacionada com alterações genéticas, infecção pelo Papilomavirus Humano (HPV), angiogênese e processos inflamatórios. A anexina-A1 (ANXA1), proteína de 37 kDa, que é expressa pelas células tumorais atua como moduladora do processo inflamatório. Os dados disponíveis sugerem que essa família de proteínas pode ter, além de seu importante papel no processo inflamatório, um envolvimento significativo no câncer, por meio de cascatas de sinalização que incluem genes relacionados com o ciclo celular, a diferenciação e a apoptose. OBJETIVOS: Em função da importância do efeito anti-inflamatório do peptídeo Ac2-26 nas células carcinogênicas, o presente trabalho teve como objetivo geral investigar a influência desse anti-inflamatório nas células SiHa. MATERIAIS E MÉTODOS: Utilizamos a linhagem celular SiHa (derivada das células de carcinoma epidermóide de cérvice), tratada com o peptídeo Ac2-26 na concentração de 10μg/mL por 2, 4, 24, 48 e 72 horas. Avaliamos morfologia; proliferação e migração celular; apoptose, necrose e apoptose tardia; citocinas pró inflamatórias; expressão protéica e dos genes COX-2, EP3, EP4, MMP2, MMP9, TIMP1 e TIMP2; nas amostras controle e tratadas com o peptídeo Ac2-26, pelas técnicas de microscopia de luz, Citometria de fluxo, Magipix, Western Blotting e PCR quantitativo em tempo real. RESULTADOS: Nas células de carcinoma de colo uterino observamos que não houve alteração na morfologia celular após o tratamento com peptídeo Ac2-26, entretanto houve a redução da proliferação e migração celular. No ensaio de citômetro de fluxo não houve indução de apoptose, apoptose... / Abstract: INTRODUCTION: Cervical cancer is the second most common cancer in women worldwide and is the fourth leading cause of cancer deaths in developing countries. The cervical carcinogenesis is related to genetic alterations, infection by the Human Papillomavirus (HPV), angiogenesis and inflammation. Annexin-A1 (ANXA1), 37 kDa protein, which is expressed by tumor cells acts as a modulator of the inflammatory process. Evidence suggests that this protein family may have, in addition to its important role in the inflammatory process, significant involvement in cancer, through signaling cascades that include genes related to cell cycle, differentiation and apoptosis. OBJECTIVES: Because of the importance of the anti-inflammatory effect of Ac2-26 peptide in carcinogenic cells, this study aimed to investigate the influence of anti-inflammatory in SiHa cells. MATERIALS AND METHODS: SiHa cell line (derived from squamous cell carcinoma of cervix), treated with Ac2-26 peptide at a concentration of 10μg/mL for 2, 4, 24, 48 and 72 hours. We evaluate morphology; cell proliferation and migration; apoptosis, late apoptosis and necrosis; pro-inflammatory cytokines; protein expression and COX-2 genes, EP3, EP4, MMP2, MMP9, TIMP1 and TIMP2; control and the samples treated with the peptide Ac2-26, by light microscopy techniques, flow cytometry, magipix, Western blotting and quantitative PCR in real time. RESULTS: In cervical carcinoma cells observed that there was no change in cell morphology after treatment with peptide Ac2-26, however, there was a reduction in cell proliferation and migration. In the test flow cytometry there was no induction of apoptosis, late apoptosis or necrosis, but the test Magpix decreased interleukin 6 (IL-6) in SiHa cells treated with the peptide Ac2-26. The effect of treatment carried out with the exogenous protein did not affect the expression of Annexin A1 endogenous protein, but showed... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-02Bitstream added on 2014-06-13T20:37:35Z : No. of bitstreams: 1 paz_ta_me_araiq.pdf: 1193700 bytes, checksum: 6489d53c5b06afd24ac5bdf2e56d9611 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo estabelecer metodologia de cultivo e produção de células e/ou órgãos in vitro da espécie Salacia campestris com vista à obtenção de triterpenos quinonametídeos. Para isso, aplicando-se técnicas biotecnológicas, diversas tentativas de inserir a espécie in vitro foram realizadas utilizando explantes de folhas (limbo foliar e pecíolo), endosperma e sementes. Raízes obtidas in vitro foram cultivadas por 105 dias, sendo a presença e o teor de triterpenos quinonametídeos avaliados no decorrer deste período. Sistemas radiculares de plantas jovens (1 ano) cultivadas em casa de vegetação e sistemas radiculares de plantas adultas foram também analisadas quanto à presença e teor de triterpenos quinonametídeos. Foram utilizadas técnicas cromatográficas e de espetrometria de massas (EM) para a detecção e identificação de 22β-hidroximaitenina, maitenina e netzahualcoieno. Os ensaios citotóxicos in vitro foram realizados, como os dois últimos quinonametídeos, frente à linhagem de células normais 3T3 (fibroblasto) e de células tumorais HeLa (cólon de útero) e B16-F10 (melanoma murino). A partir de explantes de endosperma inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com 20 g/L de sacarose, acrescido com 4,0 mg/L de AIB (ácido indolbutírico) e 100 mg/L de PVP (polivinilpirrolidona), foram obtidas raízes in vitro. A partir dos estudos fitoquímicos foram detectados e identificados, nas raízes in vitro e em sistemas radiculares de plantas cultivadas em casa de vegetação, os triterpenos quinonametídeos maitenina e 22β-hidroximaitenina, enquanto que nos sistemas radiculares coletados em campo foram identificados os triterpenos maitenina e netzahualcoieno. O isolamento dos três triterpenos citados também foi realizado. Para as raízes cultivadas... / This work aimed to establish a methodology of cultivation and production of in vitro cells and /or organs of Salacia campestris, trying to obtain the quinone-methide triterpenes. Based on this and applying biotechnological techniques, several attempts to insert this species in an in vitro system were performed using leaf explants (leaf and petiole), endosperm and seeds. The in vitro roots obtained were cultured for 105 days, and the presence and content of quinone-methide triterpenes were evaluated during this period. The roots of young plants (1 year) grown in a greenhouse as well roots of adult plants were also analyzed for the presence and content of the quinone-methides. The analysis of the quinone-methides were performed using chromatographic techniques and mass spectrometrometry (MS) led to the identification of 22β-hydroxymaytenin, maytenin and netzahualcoyene. The in vitro cytotoxic assays were performed using the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene, comparing with the normal cell line 3T3 (fibroblast) as well the HeLa tumor cells (uterus carcinoma) and B16-F10 (murine melanoma). The in vitro roots were obtained from endosperm explants, inoculated in WPM medium supplemented with 20 g/L sucrose, 4.0 mg/L IBA (indole-butyric acid) and 100 mg/L PVP (polyvinylpyrrolidone). The phytochemical studies of the in vitro roots and roots of plants grown in a greenhouse resulted in the identification of the quinone-methide triterpenes maytenin and 22β-hydroxymaytenin, while from the natural roots were identified the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene. All of the triterpenes were also isolated. The results obtained for in vitro roots indicated that the greatest accumulation of biomass occurred on the 60th day of culture and the highest levels of maytenin (972.11 mg/g) and ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:30:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6752.pdf: 4579140 bytes, checksum: b319a63f17cf6c81e23c5fddb8d6d2f5 (MD5) Previous issue date: 2015-03-30 / Financiadora de Estudos e Projetos / The microalgae Haematococcus pluvialis has been studied as one of the main natural sources of astaxanthin carotenoid, potent antioxidant with applications in the nutraceutical and cosmetic industry. H. pluvialis is a microalgae Chlorophyceae whose life cycle includes a phase encystment with high pigment production. In recent years there has been increased activity, processes and applications involving the use of H. pluvialis and its biomass, however H. pluvialis culture do not achieve generally high biomass and species is considered delicate, a slow-growing. Thus, the production and use of the pigment depends on the microorganism and biological, physical and chemical interactions which result in high production of green cells which subsequently form red astaxanthin filled cysts. In this study we sought to optimize the vegetative growth of microalgae, increased the final biomass yield in crops. To this end we investigated the composition of the nutrient medium different pHs and culture methods (sealed vs continuous). Determination of photosynthetic efficiency and energy dissipation were used to infer the cellular health in green flagellates, evaluating the different experimental conditions on microalgae. Intracellular biochemical composition analyzes were performed by determining the concentration of proteins, lipids and carbohydrates in addition to the fatty acid composition. The study was initiated by investigating different nutrient media the growth and biomass production and the results showed that modified Oligo LC medium containing ammonium bicarbonate four times more concentrated nutrients and the remaining 2 times, resulting in improved production of biomass. A procedure then to study the influence of pH on vegetative growth, photosynthetic efficiency and biochemical composition of H. pluvialis. For this purpose we used pH buffers (MES, HEPES, and PIPES), and the results showed a higher germination cysts and higher growth rate in buffered at pH 6.3 cultures (growth rate 0.45 d-1; MES buffer). These findings that the production of H. pluvialis can proceed in the absence of a lag phase in cultures inoculated with cysts. Pigments and lipids related to cell wall dominated at pH 6.3 and palmitic acid (C16:0) and linoleic acid (C18:2n6c) were the most abundant fatty acids. PH in the 6.7 and 7.2 crops showed the highest content of polyunsaturated fatty acids, 6% higher than the control. Regarding the methods of cultivation, continuous were better. The biomass showed higher protein content and the larger culture growth rate and biomass of the sealed. The photosynthetic activity and its parameters suffered significant variations in continuous cultures. H. pluvialis responded better as the photosynthetic parameters in various light intensities when in continuous culture, despite the saturation irradiance was higher in batch cultures. / A microalga Haematococcus pluvialis tem sido estudada por ser uma das principais fontes naturais do carotenoide astaxantina, potente antioxidante com aplicações na indústria de nutracêuticos e cosméticos. H. pluvialis é uma microalga Chlorophyceae cujo ciclo de vida inclui uma fase de encistamento onde o pigmento é acumulado. Apesar de registrar-se um aumento de processos e aplicações envolvendo H. pluvialis, suas culturas dificilmente atingem elevada biomassa e a espécie é considerada sensível a variações ambientais, com crescimento lento. Assim, a produção e uso do pigmento e do microorganismo tornam-se dependentes do desenvolvimento de tecnologia relativas aos fatores biológicos, físicos e químicos, cujas interações resultem em alta produção de células verdes para que posteriormente formem cistos vermelhos repletos de astaxantina. Nesta pesquisa buscou-se otimizar o crescimento vegetativo da microalga, aumentado o rendimento de biomassa final nas culturas. Para isso investigouse a composição de meios nutritivos, diferentes pHs (controle, 6.0, 6.3, 6.7 e 7.2) e modalidades de cultivo (estanque vs contínua). Determinações de eficiência fotossintética e dissipação de energia foram usadas para inferir sobre a saúde celular nas células flageladas verdes, avaliando-se as diferentes condições experimentais. Foram feitas análises da composição bioquímica intracelular determinando-se a concentração de proteínas, lipídios e carboidratos, além da composição de ácidos graxos. O estudo foi iniciado investigando-se diferentes meios nutritivos no crescimento e produção de biomassa e, os resultados mostraram que o meio de cultura LC Oligo modificado contendo bicarbonato de amônio 4 vezes mais concentrado e o restante dos nutrientes 2 vezes, resultou no maior rendimento de biomassa. Procedeu-se então ao estudo da influência do pH no crescimento vegetativo, eficiência fotossintética e composição bioquímica da microalga. Os resultados mostraram maior germinação de cistos e maior taxa de crescimento em culturas tamponadas em pH 6.3 com tampão MES (taxa de crescimento 0,53 d-1). Lipídios relacionados a pigmentos e parede celular dominaram nesse pH e, ácido palmítico (C16:0) e linoleico (C18:2n6c) foram os ácidos graxos de maior abundância. Em relação às modalidades de cultivo, os contínuos foram melhores do que os estanques, que tiveram menor conteúdo proteico e taxa de crescimento. A atividade fotossintética e seus parâmetros sofreu menor variação nas culturas contínuas. H. pluvialis respondeu melhor quanto aos parâmetros fotossintéticos em várias intensidades luminosas quando em cultura contínua, apesar da irradiância de saturação ter sido maior em cultivos estanques.

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-28. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:17:01Z : No. of bitstreams: 1 000854431_20160830.pdf: 559332 bytes, checksum: 82acba91ad1b0ebae4fa52afb316509f (MD5) Bitstreams deleted on 2016-09-01T14:08:38Z: 000854431_20160830.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-01T14:09:16Z : No. of bitstreams: 1 000854431.pdf: 4368746 bytes, checksum: 2e9194d47ab5ffd7a2ae61d7d309c626 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A medicina regenerativa emergiu do impulso biotecnológico com uso da célula-tronco (CT), caracterizada por indiferenciação, autorrenovação e capacidade de gerar vários tipos celulares. A célula-tronco mesenquimal (CTM) pode ser isolada de várias fontes biológicas, sendo o tecido adiposo uma promissora fonte. São candidatas para aplicação em terapia celular por vários motivos e capazes de se diferenciar e produzir muitos tipos celulares para reparação do tecido danificado, no entanto são dose dependente necessitando de expansão pelo método de cultura celular. A aplicabilidade do LED como agente bioestimulador tem sido proposto. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da luz contínua e pulsátil, 630nm, comparando esta ação sob células obtidas pelos métodos de dissociação mecânica e enzimática. Foram retirados blocos de gordura de rato wistar com idade média de 3 meses. A concentração de células LMN obtidas/g de tecido 1 x 105 e 3,34 x 105 para DM e DE, respectivamente. O perfil fenotípico utilizando CD90/CD44/CD71/CD31/CD11b/CD45 evidenciou que a DE remove um percentual significativo de antígenos das superfícies das CTMs. Quanto à curva de confluência à 80% entre as passagens, mostrou que as CTMs obtidas por DM sofrem melhor a ação do LED, proliferando mais rapidamente. Foram determinadas citocinas TNF, IFN-ɣ, IL-4 e IL-10. A maioria das amostras que apresentam secreção de citocinas foram obtidas pelo método de DM. Amostras controle, não irradiadas também apresentaram secreção de citocinas, mostrando a ação dos aditivos do meio de cultura como bioestimulador dos efeitos parácrinos. Os testes de micronúcleo e cometa para análise de genotoxicidade evidenciam que a luz pulsátil de 1J/cm2 determinam o aparecimento de micronúcleos, enquanto que o dano de DNA determinado pelo cometa, diminui pela ação do LED / Regenerative medicine (RM) has emerged of different sciences boost, including biology of the stem cell. The mesenchymal stem cells (MSCs) isolated from adipose tissue have occupied more space in MR. They are characterized by differentiation, self-renewal and the ability to generate at least three different cell lines, being involved in the repair of damaged tissue, however they are dose-dependent requiring expansion by cell culture method. The applicability of LED as biostimulator agent has been proposed. The aim of this study was to evaluate the effect of continuous and pulsed light, 630nm, comparing this action in cells obtained by the methods of mechanical and enzymatic dissociation. Mouse fat blocks were removed from rats with an average age of 3 months. The concentration of cells obtained LMN / g tissue 1 x 105 and 3.34 x 105 MD and ED, respectively. The phenotypic profile using markers as CD90 / CD44 / CD71 / CD31 / CD11b / CD45 showed that ED removes a significant percentage of the surface antigens of MSCs. The curve of the confluence at 80% between passages showed that MSCs obtained by MD was beneficiated by the action LED and proliferating faster. Cytokines TNF, IFN-ɣ, IL-4 and IL-10 were determined by flow cytometry. Most of the samples showed cytokine secretion was obtained by MD method. Control samples, not-irradiated also showed secretion of cytokines, showing the action of the additive of the culture medium as biostimulator of paracrine effects. The micronucleus and comet assays to the genotoxicity analysis show that pulsed light of 1J / cm2 determine the appearance of micronuclei, while DNA damage determined by the comet assay decreases by the LED action / FAPESP: 2013/01942-0